Хвала вам што сте посетили Натуре.цом.Верзија претраживача коју користите има ограничену подршку за ЦСС.За најбоље искуство препоручујемо да користите ажурирани прегледач (или онемогућите режим компатибилности у Интернет Екплорер-у).У међувремену, да бисмо обезбедили сталну подршку, приказаћемо сајт без стилова и ЈаваСцрипт-а.
Неконтролисано крварење је један од водећих узрока смрти.Постизањем брзе хемостазе обезбеђује се опстанак субјекта као прва помоћ током борбе, саобраћајних незгода и операција смањења смрти.Композитна скела ојачана нанопорозним влакнима (НФРЦС) изведена из једноставне хемостатске композиције за формирање филма (ХФФЦ) као континуирана фаза може покренути и побољшати хемостазу.Развој НФРЦС је заснован на дизајну крила вретенца.Структура крила вретенца састоји се од попречних и уздужних крила, а мембране крила су повезане једна са другом да би се одржао интегритет микроструктуре.ХФФЦ равномерно облаже површину влакна филмом нанометарске дебљине и повезује насумично распоређену дебљину памука (Цт) (дисперзовану фазу) да би се формирала нанопорозна структура.Комбинација континуираних и дисперзованих фаза смањује цену производа десет пута у поређењу са комерцијално доступним производима.Модификовани НФРЦС (тампони или наруквице) могу се користити у разним биомедицинским апликацијама.Ин виво студије су закључиле да развијени Цп НФРЦС покреће и побољшава процес коагулације на месту примене.НФРЦС може да модулише микроокружење и делује на ћелијском нивоу због своје нанопорозне структуре што доводи до бољег зарастања ране у моделу ране са ексцизијом.
Неконтролисано крварење током борбених, интраоперативних и хитних ситуација може представљати озбиљну претњу по живот рањеника1.Ова стања даље доводе до укупног повећања периферног васкуларног отпора, што доводи до хеморагичног шока.Одговарајуће мере за контролу крварења током и после операције сматрају се потенцијално опасним по живот2,3.Оштећење великих судова доводи до великог губитка крви, што резултира стопом смртности од ≤ 50% у борби и 31% током операције1.Масивни губитак крви доводи до смањења запремине тела, што смањује минутни волумен срца.Остале компликације укључују прогресију хипотермије и метаболичке ацидозе, као и поремећај коагулације који омета процес коагулације.
Уз употребу ојачања влакнима, могу се развити исплативи производи.Насумично распоређена влакна подсећају на структуру крила вилиног коњица, уравнотежена хоризонталним и вертикалним пругама на крилима.Попречне и уздужне вене крила комуницирају са мембраном крила (сл. 1).НФРЦС се састоји од ојачаног Цт као система скеле са бољом физичко-механичком чврстоћом (слика 1).Због приступачности и вештине израде, хирурзи радије користе мерење памучних нити (Цт) током операција и завоја. Дакле, имајући у виду његове вишеструке предности, укључујући > 90% кристалне целулозе (поспешује хемостатску активност), Цт је коришћен као скелетни систем НФРЦС9,10. Дакле, имајући у виду његове вишеструке предности, укључујући > 90% кристалне целулозе (поспешује хемостатску активност), Цт је коришћен као скелетни систем НФРЦС9,10. Следовательно, уважаа его многочисленние преимусества, в том числе > 90% кристаллическој целулози (учествует в повећане хемостатическе активности), Цт использовал в качественој скелетној системи НФРЦС9,10. Стога, с обзиром на многе предности, укључујући >90% кристалне целулозе (укључене у повећану хемостатску активност), Цт је коришћен као НФРЦС скелетни систем9,10.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90% 的结晶纤维素 (有助于增强止血) ,10 的骨架系统.因此,考虑到它的多重益处, 包括> 90%Стога, с обзиром на многе предности, укључујући преко 90% кристалне целулозе (помаже у побољшању хемостатске активности), Цт је коришћен као скела за НФРЦС9,10.Цт је површински обложен (уочено је формирање нано-дебелог филма) и међусобно повезан са хемостатском композицијом за формирање филма (ХФФЦ).ХФФЦ делује као матригел, држећи насумично постављени Цт заједно.Развијени дизајн преноси напон унутар дисперговане фазе (ојачавајућа влакна).Тешко је добити нанопорозне структуре са добром механичком чврстоћом користећи минималне концентрације полимера.Поред тога, није лако прилагодити различите калупе за различите биомедицинске примене.
На слици је приказан дијаграм НФРЦС дизајна заснованог на структури крила вретенца (А).Ова слика приказује упоредну аналогију структуре крила вилиног коњица (укрштајуће и уздужне вене крила су међусобно повезане) и фотомикрографију попречног пресека Цп НФРЦС (Б).Шематски приказ НФРЦС.
НФРЦ су развијени коришћењем ХФФЦ-а као континуиране фазе да би се одговорило на горња ограничења.ХФФЦ се састоји од различитих хемостатских полимера који формирају филм укључујући хитозан (као главни хемостатски полимер) са метилцелулозом (МЦ), хидроксипропил метилцелулозом (ХПМЦ 50 цп) и поливинил алкохолом (ПВА)) (125 кДа) као потпорним полимером који подстиче формирање тромба.формација.Додатак поливинилпиролидина К30 (ПВП К30) побољшао је способност НФРЦС-а да упија влагу.Полиетилен гликол 400 (ПЕГ 400) је додат да би се побољшало умрежавање полимера у мешавинама везаних полимера.Три различите ХФФЦ хемостатске композиције (Цм ХФФЦ, Цх ХФФЦ и Цп ХФФЦ), односно хитозан са МЦ (Цм), хитозан са ХПМЦ (Цх) и хитозан са ПВА (Цп), примењене су на Цт.Различите ин витро и ин виво студије карактеризације су потврдиле хемостатску активност и активност зарастања рана НФРЦС.Композитни материјали које нуди НФРЦС могу се користити за прилагођавање различитих облика скела у складу са специфичним потребама.
Поред тога, НФРЦС се може модификовати као завој или ролна да покрије читаву област повреде доњих екстремитета и других делова тела.Посебно за борбене повреде екстремитета, дизајнирани НФРЦС дизајн се може променити на пола руке или пуну ногу (додатна слика С11).
Хитозан (молекулске тежине 80 кДа) и амарант су набављени од Мерцк-а, Индија.Хидроксипропил метилцелулоза 50 Цп, полиетилен гликол 400 и метилцелулоза су купљени од Лоба Цхемие Пвт.ЛЛЦ, Мумбај.Поливинил алкохол (молекулска тежина 125 кДа) (87-90% хидролизован) је набављен од Натионал Цхемицалс, Гујарат.Поливинилпиролидин К30 је купљен од Молицхема, Мумбаи, стерилни брисеви су купљени од Рамарају Сургери Цоттон Миллс Лтд., Тамил Наду, са Милли К водом (Дирецт-К3 систем за пречишћавање воде, Мерцк, Индија) као носачем.
НФРЦС је развијен методом лиофилизације11,12.Све ХФФЦ композиције (Табела 1) су припремљене коришћењем механичке мешалице.Припремити 0,5% раствор хитозана користећи 1% сирћетне киселине у води континуираним мешањем на 800 рпм на механичкој мешалици.Тачна тежина напуњеног полимера наведена у табели 1 је додата у раствор хитозана и мешана док се не добије бистар раствор полимера.У добијену смешу су додати ПВП К30 и ПЕГ 400 у количинама наведеним у табели 1 и мешање је настављено док се не добије бистар вискозни раствор полимера.Добијена купка раствора полимера је соникирана 60 минута да би се уклонили заробљени ваздушни мехурићи из мешавине полимера.Као што је приказано на додатној слици С1 (б), Цт је равномерно распоређен у сваки бунар плоче са 6 бунара (калуп) допуњен са 5 мл ХФФЦ.
Плоча са шест бунара је ултразвучна током 60 минута да би се постигло уједначено влажење и дистрибуција ХФФЦ-а у Цт мрежи.Затим замрзните плочу са шест јажица на -20°Ц 8-12 сати.Плоче за замрзавање су лиофилизоване 48 сати да би се добиле различите формулације НФРЦС.Исти поступак се користи за производњу различитих облика и структура, као што су тампони или цилиндрични тампони, или било који други облик за различите примене.
Прецизно измерен хитозан (80 кДа) (3%) је растворен у 1% сирћетној киселини коришћењем магнетне мешалице.У добијени раствор хитозана је додат 1% ПЕГ 400 и мешан 30 минута.Добијени раствор сипајте у квадратну или правоугаону посуду и замрзните на -80°Ц 12 сати.Замрзнути узорци су лиофилизовани током 48 сати да би се добио порозни Цс13.
Развијени НФРЦС је подвргнут експериментима коришћењем инфрацрвене спектроскопије Фуријеове трансформације (ФТИР) (Схимадзу 8400 с ФТИР, Токио, Јапан) да би се потврдила хемијска компатибилност хитозана са другим полимерима14,15.ФТИР спектри (ширина спектралног опсега од 400 до 4000 цм-1) свих испитиваних узорака добијени су извођењем 32 скенирања.
Стопа апсорпције крви (БАР) за све формулације је процењена коришћењем методе коју су описали Цхен ет ал.16 са малим изменама.Развијени НФРК свих композиција су сушени у вакуумској пећи на 105°Ц преко ноћи да би се уклонио преостали растварач.30 мг НФРЦС (почетна тежина узорка – В0) и 30 мг Цт (позитивна контрола) стављено је у одвојене посуде које садрже премикс од 3,8% натријум цитрата.У унапред одређеним временским интервалима, односно 5, 10, 20, 30, 40 и 60 секунди, НФРЦС су уклоњени и њихове површине очишћене од неапсорбоване крви стављањем узорака на Цт у трајању од 30 секунди.Коначна тежина крви коју је апсорбовао НФРЦС 16 разматрана је (В1) у свакој временској тачки.Израчунајте БАР проценат користећи следећу формулу:
17 .Различите компоненте НФРЦС (30 мг) су стављене у бочице са затварачем од 10 мл и инкубиране на 37°Ц.Крв (0,5 мл) је додата у бочицу и 0,3 мл 0,2 М ЦаЦл2 да би се активирала коагулација крви.На крају, окрените бочицу сваких 15 секунди (до 180°) док се не формира чврст угрушак.БЦТ узорка је процењен бројем преокрета17,18.На основу БЦТ, две оптималне композиције из НФРЦС Цм, Цх и Цп су одабране за даља испитивања карактеризације.
БЦТ композиција Цх НФРЦС и Цп НФРЦС одређен је применом методе коју су описали Ли ет ал.19 .Ставите 15 к 15 мм2 Цх НФРЦС, Цп НФРЦС и Цс (позитивна контрола) у засебне Петријеве посуде (37 °Ц).Крв која садржи 3,8% натријум цитрата је помешана са 0,2 М ЦаЦл2 у запреминском односу 10:1 да би се започео процес згрушавања крви.20 µл 0,2 М мешавине крви пацова ЦаЦл2 нането је на површину узорка и стављено у празну Петријеву посуду.Контрола је била крв сипана у празне Петријеве посуде без Цт.Некоагулирани еритроцити (еритроцити) подлежу хемолизи у присуству дејонизоване воде и ослобађају хемоглобин.Хемоглобин у различитим временским тачкама (ХА(т)) је мерен на 540 нм (λмак хемоглобин) коришћењем УВ-Вис спектрофотометра.Апсолутна апсорпција хемоглобина (АХ(0)) у 0 мин од 20 µл крви у 10 мл дејонизоване воде узета је као референтни стандард.Релативни унос хемоглобина (РХА) коагулиране крви је израчунат из односа ХА(т)/ХА(0) коришћењем исте серије крви.
Користећи анализатор текстуре (Тектуре Про ЦТ В1.3 Буилд 15, Брукфилд, САД), одређена су својства лепљења НФРК-а на оштећено ткиво.Притисните цилиндрични суд са отвореним дном уз унутрашњост свињске коже (без слоја масти).Узорци (Цх НФРЦС и Цп НФРЦС) су нанети преко каниле у цилиндричне калупе да би се створила адхезија на кожи свиње.После 3 минута инкубације на собној температури (РТ) (25°Ц), НФРЦС адхезивна снага је забележена константном брзином од 0,5 мм/сец.
Главна карактеристика хируршких заптивача је повећање згрушавања крви уз смањење губитка крви.Коагулација без губитака у НФРЦС је процењена коришћењем раније објављене методе са малим модификацијама 19 .НФРЦС се користи за затварање отвора, а трака се користи за заптивање спољних ивица.Додати 20 µл 0,2 М ЦаЦл2 у епрувету за микроцентрифугу која садржи 3,8% премикс натријум цитрата.Губитак крви Цх НФРЦС и Цп НФРЦС су упоређени са Цс.

Развијени НФРЦС Цх НФРЦС и Цп НФРЦС стављени су у чашу напуњену водом и обрађени соникацијом 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 и 30 минута, респективно.Ефикасност везивања ХФФЦ за Цт обезбеђује коагулацију крви и еластичну превлаку на површини Цт22.
Хомогеност развијеног НФРЦС је одређена БЦТ узорцима (30 мг) узетих са насумично одабраних општих локација НФРЦС.Пратите претходно поменуту БЦТ процедуру да бисте утврдили усаглашеност са НФРЦС.Близина између свих пет узорака обезбеђује уједначену покривеност површине и таложење ХФФЦ у Цт мрежици.
Номинална површина контакта са крвљу (НБЦА) одређена је као што је претходно објављено са неким модификацијама.Коагулирајте крв тако што ћете стегнути 20 µл крви између две површине Цт, Цх НФРЦС, Цп НФРЦС и Цс.Након 1 сата, два дела стента су раздвојена и ручно је измерена површина угрушка.Просечна вредност од три понављања сматрана је НБЦА НФРЦС19.
Анализа динамичке сорпције паре (ДВС) је коришћена за процену ефикасности НФРЦС да апсорбује воду из спољашње средине или са места повреде одговорног за иницирање коагулације.ДВС процењује или бележи унос и губитак паре у узорку гравиметријски користећи ултра осетљиву вагу са резолуцијом масе од ±0,1 µг.Парцијални притисак паре (релативна влажност) генерише електронски регулатор протока масе око узорка мешањем засићених и сувих гасова носача. 根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 刻0-0 В.湿 性 、 、 、 、 0,2-2% В/в 轻微 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15% 非常吸湿）23。% умерено гигроскопичан, > 15 % веома гигроскопичан) 23. % умерено хигроскопно, > 15% веома хигроскопно) 23.Хигроскопска ефикасност НФЦС Кс НФЦС и ТсН НФЦС одређена је на анализатору ДВС ТА ТГА К5000 СА.Током овог процеса добијено је време рада, релативна влажност (РХ) и тежина узорка у реалном времену на 25°Ц24.Садржај влаге се израчунава прецизном анализом масе НФРЦС користећи следећу једначину:
МЦ је НФРЦС влажност.м1 – сува тежина НСАИЛ.м2 је НФРЦС маса у реалном времену при датој РХ.
25°Ц 10 сати (< 7 × 10-3 тора)25°Ц Укупна површина, запремина пора и величина пора НФРЦС одређени су Куантацхроме из НОВА 1000е, Аустрија коришћењем РС 232 софтвера.
Припремите 5% еритроцита (физиолошки раствор као разблаживач) из пуне крви.Затим пренесите аликвот ХФФЦ (0,25 мл) на плочу са 96 бунарчића и 5% РБЦ масе (0,1 мл).Инкубирајте смешу на 37°Ц 40 минута.Мешавина црвених крвних зрнаца и серума се сматра позитивном контролом, а мешавина физиолошког раствора и црвених крвних зрнаца као негативна контрола.Хемаглутинација је одређена према Стајитзки скали.Предложене скале су следеће: + + + + густи зрнати агрегати;+ + + глатки доњи јастучићи са закривљеним ивицама;+ + глатки доњи јастучићи са поцепаним ивицама;+ уски црвени прстенови око ивица глатких јастучића;– (негативно) дискретно црвено дугме 12 у центру доњег бунара.
Гравиметријска метода коју су описали Сингх ет ал.Мање модификације су направљене да би се проценило формирање тромба у присуству или на површини НФРЦС.500 мг Цс, Цх НФРЦС и Цп НФРЦС је инкубирано у физиолошком раствору са фосфатним пуфером (ПБС) током 24 сата на 37°Ц.После 24 сата, ПБС је уклоњен и НФРЦС је третиран са 2 мл крви која садржи 3,8% натријум цитрата.На површину НФРЦС-а додајте 0,04 мл 0,1 М ЦаЦл2 у инкубиране узорке.После 45 минута додато је 5 мл дестиловане воде да се заустави коагулација.Коагулирана крв на површини НФРК третирана је 36-38% раствором формалдехида.Угрушци фиксирани формалдехидом су осушени и измерени.
Танки делови Цх и Цп из НФРЦС-а су обрезани сечивом скалпела.Добијени део је постављен на стакло, прекривен покровним стакалцем, а ивице су фиксиране лепком.Припремљени дијапозитиви су прегледани под оптичким микроскопом и фотографисане су у различитим увећањима.
Таложење полимера у Цт мрежама је визуелизовано коришћењем флуоресцентне микроскопије на основу методе коју су описали Рице ет ал.29. 将用于配方的ХФФЦﻄ㐈物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方（苋菜）混合，并按照前面提到的方（ЦЦС（ФР将用于配方的ХФФЦﻄ㐈物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方（苋菜）混合，并按照前面提到的方（ЦЦС（ФРКомпозиција ХФФЦ коришћена у формулацији је помешана са флуоресцентном бојом (Амарант) и добијена је НФРЦС (Цх и Цп), као што је раније поменуто.Из добијених узорака исечени су танки делови НФРК-а, постављени на стаклена стакла и прекривени покровним стакалцима.Посматрајте припремљене плочице под флуоресцентним микроскопом користећи зелени филтер (310-380 нм).Слике су снимљене при увећању од 4к да би се разумели Цт односи и вишак полимера таложења у Цт мрежи.
Храпавост површине одређена је средњим квадратом (РМС) коришћењем софтвера (Сцаннинг Пробе Имаге Процессор).Различите НФРЦС локације су приказане на 3Д сликама да би се проверила уједначеност површине.Стандардна девијација резултата за дату област се дефинише као храпавост површине.РМС једначина је коришћена за квантификацију храпавости површине НФРЦС31.
Студије засноване на ФЕСЕМ-у су спроведене коришћењем ФЕСЕМ, СУ8000, ХИ-0876-0003, Хитацхи, Токио, да би се разумела морфологија површине Цх НФРЦС и Цп НФРЦС, који су показали бољи БЦТ од Цм НФРЦС.ФЕСЕМ студија је изведена према методи коју су описали Зхао ет ал.32 са мањим изменама.НФРЦС 20 до 30 мг Цх НФРЦС и Цп НФРЦС су претходно помешани са 20 µл 3,8% натријум цитрата помешаног са крвљу пацова.20 μл 0,2 М ЦаЦл2 је додато узорцима третираним крвљу да се започне коагулација и узорци су инкубирани на собној температури 10 минута.Поред тога, вишак еритроцита је уклоњен са површине НФРЦС испирањем физиолошким раствором.
Следећи узорци су третирани са 0,1% глутаралдехида, а затим сушени у пећници са врућим ваздухом на 37°Ц да би се уклонила влага.Осушени узорци су премазани и анализирани 32 .
Дебљина Цп ХФФЦ површинског премаза на површини Цт је одређена коришћењем ФЕСЕМ.Попречни пресеци Цп НФРЦС-а су исечени из оквира и обложени распршивањем.Добијени узорци распршеног премаза су посматрани помоћу ФЕСЕМ-а и мерена је дебљина површинског премаза 34, 35, 36.
Рентгенски микро-ЦТ пружа 3Д недеструктивно снимање високе резолуције и омогућава вам да проучавате унутрашњи структурни распоред НФРК-а.Унутрашња локација Цт у Цп НФРЦС и Цп НФРЦС третирана крвљу је испитана микро-ЦТ да би се разумела ефикасност апсорпције и згрушавање крви у присуству НФРЦС37,38,39.3Д структуре крви третираних и нетретираних Цп НФРЦС узорака су реконструисане коришћењем микро-ЦТ (В|томе|к С240, Пхоеник, Немачка).Коришћењем софтвера ВГ СТУДИО-МАКС верзије 2.2, снимљено је неколико рендгенских снимака из различитих углова (идеално покривање од 360°) да би се развиле 3Д слике за НФРЦС.Прикупљени пројекцијски подаци су реконструисани у 3Д волуметријске слике коришћењем одговарајућег једноставног 3Д СцанИП Ацадемиц софтвера.
Припремљени узорци се остављају да се стврдну.Површина НФРК-а је третирана са 0, 5% глутаралдехида и сушена у пећници са врућим ваздухом на 30-40 ° Ц током 30 минута.Крвни угрушак формиран на НФРЦС је скениран, реконструисан и визуелизована је 3Д слика крвног угрушка.
Антибактеријски тестови су изведени на Цп НФРЦС (најбоље у поређењу са Цх НФРЦС) коришћењем претходно описане методе уз мање модификације.Антибактеријска активност Цп НФРЦС и Цп ХФФЦ одређена је коришћењем три различита тест микроорганизма [С.ауреус (грам-позитивне бактерије), Е.цоли (грам-негативне бактерије) и беле Цандида (Ц.албицанс)] које расту на агару у Петријевим посудама у инкубатору.Равномерно инокулирајте 50 мл разблажене суспензије бактеријске културе у концентрацији од 105-106 ЦФУ мл-1 на агар медијум.Сипајте медијум у Петријеву посуду и оставите да се стврдне.На површини агар плоче су направљени бунари за пуњење ХФФЦ (3 бунарчића за ХФФЦ и 1 за негативну контролу).Додајте 200 µл ХФФЦ у 3 бунарчића и 200 µл пХ 7,4 ПБС у 4. бунарчића.На другу страну петријеве посуде ставите 12 мм Цп НФРЦС диск на очврснути агар и навлажите га ПБС (пХ 7,4).Таблете ципрофлоксацина, ампицилина и флуконазола сматрају се референтним стандардима за Стапхилоцоццус ауреус, Есцхерицхиа цоли и Цандида албицанс.Измерите зону инхибиције ручно и направите дигиталну слику зоне инхибиције.
Након институционалног етичког одобрења, студија је спроведена на Кастурба Медицал Цоллеге оф Едуцатион анд Ресеарцх у Манипалу, Карнатака, у јужној Индији.Експериментални протокол ин витро ТЕГ прегледао је и одобрио Институционални етички комитет Медицинског колеџа Кастурба, Манипал, Карнатака (ИЕЦ: 674/2020).Субјекти су регрутовани од добровољних давалаца крви (старости од 18 до 55 година) из болничке банке крви.Поред тога, добијен је образац информисаног пристанка од волонтера за узимање узорака крви.Нативни ТЕГ (Н-ТЕГ) је коришћен за проучавање ефекта формулације Цп ХФФЦ на пуну крв помешану са натријум цитратом.Н-ТЕГ је широко познат по својој улози у реанимацији на месту неге, што ствара проблеме клиничарима због потенцијала за клинички значајно кашњење резултата (рутински тестови коагулације).Н-ТЕГ анализа је урађена коришћењем пуне крви.Информисани пристанак и детаљна медицинска историја добијени су од свих учесника.Студија није укључила учеснике са хемостатским или тромботичким компликацијама као што су трудноћа/постпартум или болест јетре.Испитаници који су узимали лекове који утичу на каскаду коагулације такође су искључени из студије.Свим учесницима су обављени основни лабораторијски тестови (хемоглобин, протромбинско време, активирани тромбопластин и број тромбоцита) по стандардним процедурама.Н-ТЕГ одређује вискоеластичност крвног угрушка, почетну структуру угрушка, интеракцију честица, јачање угрушка и лизу угрушка.Н-ТЕГ анализа даје графичке и нумеричке податке о колективним ефектима неколико ћелијских елемената и плазме.Н-ТЕГ анализа је изведена на две различите запремине Цп ХФФЦ (10 µл и 50 µл).Као резултат, 1 мл пуне крви са лимунском киселином је додат у 10 μл Цп ХФФЦ.Додати 1 мл (Цп ХФФЦ + цитрована крв), 340 µл мешане крви у 20 µл 0,2 М ЦаЦл2 који садржи ТЕГ посуду.Након тога, ТЕГ посуде су стављене у ТЕГ® 5000, САД да би се измерило Р, К, алфа угао, МА, Г, ЦИ, ТПИ, ЕПЛ, ЛИ 30% узорака крви у присуству Цп ХФФЦ41.
Протокол студије ин виво прегледао је и одобрио Институционални комитет за етику животиња (ИАЕЦ), Медицински факултет Кастурба, Институт за високо образовање Манипал, Манипал (ИАЕЦ/КМЦ/69/2020).Сви огледи на животињама изведени су у складу са препорукама Комитета за контролу и надзор експериментисања на животињама (ЦПЦСЕА).Све ин виво НФРЦС студије (2 × 2 цм2) су спроведене на женкама Вистар пацова (тежине 200 до 250 г).Све животиње су аклиматизоване на температури од 24-26°Ц, животиње су имале слободан приступ стандардној храни и води ад либитум.Све животиње су насумично подељене у различите групе, свака група се састојала од три животиње.Све студије су изведене у складу са Студијама на животињама: Извештај ин виво експеримената 43 .Пре студије, животиње су анестезиране интраперитонеалном (ип) применом мешавине од 20-50 мг кетамина (по 1 кг телесне тежине) и 2-10 мг ксилазина (по 1 кг телесне тежине).Након студије, запремина крварења је израчуната проценом разлике између почетне и коначне тежине узорака, просечна вредност добијена из три теста је узета као запремина крварења узорка.
Одрежите 50% репа оштрицом скалпела и ставите у ваздух на 15 с да бисте обезбедили нормално крварење.Поред тога, тест узорци су стављени на реп пацова применом притиска (Цт, Цс, Цх НФРЦС и Цп НФРЦС).Крварење и ПЦТ су пријављени за узорке (н=3)17,45.
Ефикасност НФРЦС контроле притиска у борби је испитивана на моделу површне феморалне артерије.Феморална артерија је откривена, пробушена трокаром 24Г и крвари у року од 15 секунди.Након што се примети неконтролисано крварење, узорак се ставља на место убода уз притисак.Непосредно након примене тестног узорка, забележено је време згрушавања и примећена је хемостатска ефикасност у наредних 5 минута.Исти поступак је поновљен са Цс и Цт46.
Довлинг и др.47 је предложио модел повреде јетре за процену хемостатског потенцијала хемостатских материјала у контексту интраоперативног крварења.БЦТ је снимљен за узорке Цт (негативна контрола), Цс оквир (позитивна контрола), Цх НФРЦС узорке и Цп НФРЦС узорке.Супрахепатична вена пацова је откривена извођењем средње лапаротомије.Након тога, дистални део левог режња је исечен маказама.Сечивом скалпела направите рез на јетри и оставите да крвари неколико секунди.Прецизно измерени тестни узорци Цх НФРЦС и Цп НФРЦС стављени су на оштећену површину без позитивног притиска и БЦТ је снимљен.Контролна група (Цт) је затим применила притисак, а затим Цс 30 с47 без наношења повреде.
Ин виво тестови зарастања рана су изведени коришћењем ексцизионог модела ране да би се проценила својства зарастања рана развијених НФРЦС на бази полимера.Модели ексцизионих рана одабрани су и изведени према раније објављеним методама уз мање модификације19,32,48.Све животиње су анестезиране као што је претходно описано.Користите бушилицу за биопсију (12 мм) да направите кружни дубоки рез на кожи леђа.Припремљена места ране су обложена Цс (позитивна контрола), Цт (признајући да памучни јастучићи ометају зарастање), Цх НФРЦС и Цп НФРЦС (експериментална група) и негативном контролом без икаквог третмана.Сваког дана студије, површина ране је мерена код свих пацова.Користите дигиталну камеру да снимите подручје ране и ставите нови завој.Проценат затварања ране мерен је следећом формулом:
На основу процента затварања ране 12. дана испитивања, кожа пацова најбоље групе ((Цп НФРЦС) и контролне групе) је ексцидирана и прегледана бојењем хематоксилин-еозином и Массоновим трихромом.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Цп НФРЦС)和对照组)的大组)的大鼠的大鼠的大鼠的大鼠的син三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Цп НФРЦС)和对照组)根据研究第)的大组)的大鼠的大鼠的大鼠的大鼠的大组)眳组)Пацови у најбољој групи ((Цп НФРЦС) и контролне групе) су изрезани за бојење хематоксилин-еозином и Массоново трихромско бојење на основу процента затварања ране 12. дана студије.Спроведена процедура бојења је спроведена према претходно описаним методама49,50.Укратко, након фиксације у 10% формалина, узорци су дехидрирани коришћењем серије класификованих алкохола.Користите микротом да добијете танке делове (дебљине 5 µм) изрезаног ткива.Танки серијски пресеци контрола и Цп НФРЦС су третирани хематоксилином и еозином ради проучавања хистопатолошких промена.Массонова трихромна боја је коришћена за откривање формирања колагених фибрила.Добијене резултате патолози су слепо проучавали.
Стабилност Цп НФРЦС узорака је проучавана на собној температури (25°Ц ± 2°Ц/60% РХ ± 5%) током 12 месеци51.Цп НФРЦС (промена боје површине и раст микроба) је визуелно прегледан и тестиран на отпорност на хабање и БЦТ према горе наведеним методама наведеним у одељку Материјали и методе.
Скалабилност и репродуктивност Цп НФРЦС испитана је припремањем Цп НФРЦС величине 15×15 цм2.Поред тога, узорци од 30 мг (н = 5) су изрезани из различитих фракција Цп НФРЦС и БЦТ проучаваних узорака је процењен као што је описано раније у одељку Методе.
Покушали смо да развијемо различите облике и структуре користећи Цп НФРЦС композиције за различите биомедицинске примене.Такви облици или конфигурације укључују конусне брисеве за крварење из носа, стоматолошке захвате и цилиндричне брисеве за вагинално крварење.
Сви скупови података су изражени као средња вредност ± стандардна девијација и анализирани су АНОВА коришћењем Присм 5.03 (ГрапхПад, Сан Дијего, Калифорнија, САД), праћено Бонферонијевим тестом вишеструких поређења (*п<0.05).
Сви поступци спроведени у студијама на људима били су у складу са стандардима Института и Националног истраживачког савета, као и са Хелсиншком декларацијом из 1964. и њеним накнадним изменама или сличним етичким стандардима.Сви учесници су информисани о карактеристикама студије и њеној добровољности.Подаци о учесницима остају поверљиви када се прикупе.Експериментални протокол ин витро ТЕГ прегледао је и одобрио Институционални етички комитет Медицинског колеџа Кастурба, Манипал, Карнатака (ИЕЦ: 674/2020).Волонтери су потписали информисани пристанак за прикупљање узорака крви.
Све процедуре спроведене у студијама на животињама спроведене су у складу са Медицинским факултетом Кастуба, Манипал Институте оф Хигхер Едуцатион, Манипал (ИАЕЦ/КМЦ/69/2020).Сви осмишљени експерименти на животињама спроведени су у складу са смерницама Комитета за контролу и надзор експеримената на животињама (ЦПЦСЕА).Сви аутори се придржавају смерница АРРИВЕ.
ФТИР спектри свих НФРЦС су анализирани и упоређени са спектром хитозана приказаним на слици 2А.Карактеристични спектрални пикови хитозана (забележени) на 3437 цм-1 (ОХ и НХ растезање, преклапање), 2945 и 2897 цм-1 (ЦХ истезање), 1660 цм-1 (НХ2 деформација), 1589 цм-1 (Н-Х растезање 1 цм-110 цм), (Ц-Х растезање 1 цм-110) –О, секундарни хидроксил), 993 цм-1 (стретцх ЦО, Бо-ОХ) 52.53.54.Додатна табела С1 приказује вредности спектра апсорпције ФТИР НФРЦС за хитозан (репортер), чисти хитозан, Цм, Цх и Цп.ФТИР спектри свих НФРЦС (Цм, Цх и Цп) показали су исте карактеристичне апсорпционе траке као и чисти хитозан без икаквих значајних промена (слика 2А).Резултати ФТИР потврдили су одсуство хемијских или физичких интеракција између полимера коришћених за развој НФРЦС, што указује да су коришћени полимери инертни.
Ин витро карактеризација Цм НФРЦС, Цх НФРЦС, Цп НФРЦС и Цс.(А) представља комбиноване ФТИР спектре композиција хитозана и Цм НФРЦС, Цх НФРЦС и Цп НФРЦС под компресијом.(Б) а) Стопа узимања НФРЦС Цм, Цх, Цп и Цг у целој крви (н = 3);Цт узорци су показали већи БАР јер памучни штапић има већу ефикасност апсорпције;б) Крв након апсорпције крви Илустрација апсорбованог узорка.Графички приказ БЦТ тест узорка Ц (Цп НФРЦС је имао најбољи БЦТ (15 с, н = 3)). Подаци у Ц, Д, Е и Г су приказани као средња вредност ± СД, а траке грешке представљају СД, ***п < 0,0001. Подаци у Ц, Д, Е и Г су приказани као средња вредност ± СД, а траке грешке представљају СД, ***п < 0,0001. Данние в Ц, Д, Е и Г представљени као средње ± стандардно отклонение, а планки погрешности представљају стандардное отклонение, ***п <0,0001. Подаци у Ц, Д, Е и Г су представљени као средња вредност ± стандардна девијација, а траке грешке представљају стандардну девијацију, ***п<0,0001. Ц、Д、Е 和Г 中的数据显示为平均值± СД,误差线代表СД，***п < 0,0001。 Ц、Д、Е 和Г 中的数据显示为平均值± СД,误差线代表СД，***п < 0,0001。 Данние в Ц, Д, Е и Г показују како средњу вредност ± стандардное отклонение, планки погрешности представљају стандардное отклонение, ***п <0,0001. Подаци у Ц, Д, Е и Г су приказани као средња вредност ± стандардна девијација, траке грешке представљају стандардну девијацију, ***п<0,0001.