„Никада немојте сумњати да мала група промишљених, посвећених грађана може променити свет.У ствари, то је једино тамо.”
Цуреусова мисија је да промени дугогодишњи модел медицинског објављивања, у којем подношење истраживања може бити скупо, сложено и дуготрајно.
Плазма/прп богата тромбоцитима, регенерација ткива, активација тромбоцита, пролиферативна терапија глукозе, тромбоцити, пролиферативна терапија
Цитирајте овај чланак као: Харрисон ТЕ, Бовлер Ј, Реевес К, ет ал.(17. мај 2022.) Утицај глукозе на број и запремину тромбоцита: импликације за регенеративну медицину.Лек 14(5): е25081.дои:10.7759/цуреус.25081
Плазма богата тромбоцитима (ПРП) и раствор хипертоничне глукозе се обично користе за ињекције у регенеративној медицини, понекад заједно.Ефекат хипертоничне глукозе на лизу и активацију тромбоцита није раније пријављен.Испитивали смо ефекат повишених концентрација глукозе на број тромбоцита и еритроцита, као и на запремину ћелија у ПРП и пуној крви (ВБ).До брзог делимичног смањења броја тромбоцита дошло је са свим мешавинама глукозе помешаним са ПРП или целом крвљу, у складу са делимичном лизом. После првог минута, број тромбоцита је остао стабилан, што указује на брз смештај резидуалних тромбоцита до екстремне (>2000 мОсм) хипертоничности. После првог минута, број тромбоцита је остао стабилан, што указује на брз смештај резидуалних тромбоцита до екстремне (>2000 мОсм) хипертоничности. После прве минуте количество тромбоцитов оставалось стабилно, что указује на биструу аккомодациу остальних тромбоцитов до екстремног (>2000 мОсм) хипертонуса. После првог минута, број тромбоцита је остао стабилан, што указује на брзу акомодацију резидуалних тромбоцита до екстремне (>2000 мОсм) хипертоничности.第一分钟后,血小板计数保持稳定,表明残余血小板迅速适应极競（> 200 мс2000 мОсм）高渗状态. После прве минуте количество тромбоцитов оставалось стабилно, что указује на биструу адаптациу остальних тромбоцитов к екстремальному (>2000 мОсм) гиперосмоларном состоаниу. После првог минута, број тромбоцита је остао стабилан, што указује на брзу адаптацију резидуалних тромбоцита у екстремно (>2000 мОсм) хиперосмоларно стање.Концентрације глукозе од 25% и више резултирале су значајним повећањем средње запремине тромбоцита (МПВ), што указује на рану фазу активације тромбоцита.Потребне су даље студије да би се утврдило да ли долази до лизе или активације тромбоцита и да ли само хипертонична ињекција глукозе или у комбинацији са ПРП-ом може пружити додатну клиничку корист.
Педесетих година прошлог века амерички хирург Џорџ Хакет открио је да може трајно да ублажи болове у зглобовима и леђима код многих пацијената убризгавањем пролиферативног раствора у тетиве и лигаменте.Његови експерименти на зечевима показали су да је третман, који је назвао пролиферативна терапија, проузроковао повећање и јачање тетива.Хистолошке студије су потврдиле да се током овог процеса производи нови колаген [1].
Током првих неколико деценија испробано је много различитих решења за дистрибуцију.До 1990-их, већина практичара је сматрала да су високе концентрације глукозе најсигурнији и најефикаснији метод.Међутим, механизам деловања остаје нејасан.
Неколико клиничких студија је спроведено у 20. веку након Хацкеттовог рада.Међутим, током 2000-их дошло је до поновног интересовања и завршено је неколико успешних клиничких испитивања пролиферативне терапије за лечење болова у доњем делу леђа [2], остеоартритиса колена [3] и латералног епикондилитиса [4].
Регенерација ткива захтева учешће матичних ћелија.Због тога, високе концентрације глукозе морају некако да изазову миграцију, репликацију и диференцијацију матичних ћелија.Претпостављамо да тромбоцити могу деловати као гласници и да високе концентрације глукозе могу изазвати тромбоците да ослобађају цитокине и факторе раста, чиме се промовишу регенеративни процеси, посебно миграција матичних ћелија у подручја са високим концентрацијама глукозе.
Активација тромбоцита увек претходи повећању интрацелуларног калцијума [5].Лиу ет ал.2008. године су показали да високи нивои глукозе повећавају активност канала канонског типа 6 (ТРПЦ6) пролазног рецепторског потенцијала у плазма мембрани, што доводи до прилива јона калцијума у ​​тромбоците [6].Друга студија је показала да излагање маргиналне зоне микротубула јонима калцијума изазива релаксацију, проширење и деформацију маргиналне зоне, што заузврат изазива промену облика од диска до сферног, што доводи до средње запремине тромбоцита (МПВ) [7].
Наша хипотеза у овој студији је да излагање тромбоцита високим концентрацијама глукозе утиче на маргиналну зону микротубула и интрацелуларно окружење, што доводи до повећања МПВ.
Сви учесници су потписали формулар за информисани пристанак након што су објашњени детаљи студије и пре него што су добили узорке.У овој студији коришћени су само узорци ПРП са хематокритом већим од 2% како би се за поређење могли укључити број еритроцита (еритроцита) и средњи корпускуларни волумен црвених крвних зрнаца (МЦВ).
Студија је спроведена у четири фазе, прва фаза је била ПРП, а преостале фазе пуна крв (Табела 1).Као што је претходно описано [8], све релативне центрифугалне силе (РЦФ, г-сила) су израчунате из средње тачке (Рмид, у цм) колоне крви у центрифугалном шприцу.Одлучили смо да користимо МПВ као маркер сензибилизације тромбоцита и број тромбоцита као индикатор потенцијалне лизе тромбоцита, а оба се могу лако мерити на стандардним хематолошким анализаторима.
У првој фази, 47 волонтера је дало узорке крви — једну епрувету са етилендиаминтетрасирћетном киселином (ЕДТА) и један узорак пуне крви ПРП (антикоагуланса са натријум цитратом (НаЦл, 3%)) (Табела 1).Одмах ставите клацкалицу у цев.Комплетна крвна слика (ЦБЦ) је урађена на узорцима ЕДТА у три примерка, а узорци НаЦл су анализирани у три примерка за ЦБЦ анализу, а затим је припремљен ПРП различитим методама описаним горе [8].Сви ПРП узорци су припремљени центрифугирањем на 900–1000 г.Мешајте сваки ПРП узорак на вортекс миксеру 5–10 секунди, а затим поделите пет аликвота од 0,5 мл у епрувете.
Да би се проценио ефекат изложености тромбоцитима на повишене концентрације глукозе, једнаке количине (0,5 мл) од 0%, 5%, 12,5%, 25% и 50% глукозе у води су помешане са узорцима тромбоцита да би се добило 0%, 2,5% 6,25%, 12,5% и 25% мешавине туцосе мешавине за мешавину тубес сха.ТАЦ сваке смеше је анализиран у три примерка после 15 мин.Број тромбоцита (ПЛТ), број еритроцита, МЦВ и МПВ су усредсређени за сваку епрувету, а средњи број тромбоцита, број еритроцита, МЦВ и МПВ су израчунати за све узорке ПРП.
Након што је завршена прва фаза прикупљања података, приметили смо значајно повећање запремине тромбоцита у ПРП тромбоцитима након додавања Д50В.ПРП тромбоцити не представљају нужно све тромбоците у крви, а ПРП медијум се разликује од ВБ медијума.Због тога смо одлучили да спроведемо другу фазу испитивања ефекта додавања Д50В пуној крви.
За други круг, изабрали смо узорак величине 30 на основу резултата из прве серије, као што је описано у одељку Анализа.У овој серији узорке крви дало је 20 волонтера (Табела 1).Пуна крв (1,8 мл) је извучена у шприц од 3 мл и антикоагулирана са 0,2 мл 40% НаЦл.Читав шприц за целу крв је мешан пет секунди са вортекс миксером и ЦБЦ је анализиран у три примерка.После анализе, антикоагулисана крв је додата у 2 мл 50% глукозе у шприцу од 5 мл (коначна концентрација глукозе је била приближно 25% (Д25) и стављена у епрувету за мућкање на 30 минута. После 30 минута, Д25/ЦБЦ у ВБ шприцевима су анализирани у три примерка, РБЦ, број тромбоцита и просечан број ПВ су анализирани по броју тромбоцита, просечан број ПВ ЛТ, број еритроцита, МЦВ и МПВ су израчунати за сваки узорак пре и после додавања глукозе.
Пошто су тромбоцити у пуној крви обично изложени хипертоничној глукози током терапије пролиферативном глукозом због минимално инвазивне ињекције, а није уобичајено комбиновати ПРП са хипертоничном глукозом непосредно пре ињекције, одлучили смо да проучавамо хипертоничну глукозу у комбинацији са ВБ у одељку 1. Трећи и четврти корак.У свакој фази, 20 добровољаца је донирало 7-8 мл АЦД-А (киселина која садржи тринатријум цитрат (22,0 г/л), лимунску киселину (8,0 г/л) и глукозу (24,5 г/л), раствор декстрозе цитрата) за антикоагулансе у крви (Табела 1).Само смеше глукозе веће од 12,5% су коришћене да би се одредио проценат прага повезан са повећањем МПВ.У трећој фази, 1 мл крви се ставља у епрувету.Затим мешајте крв на вортекс миксеру 10 секунди додавањем 1 мл 30% глукозе, 40% глукозе или 50% глукозе у епрувету да бисте добили коначну концентрацију глукозе од 15%, 20% и 25%, респективно.Узорци крви глукозе су анализирани на ЦБЦ одмах након мешања и понављани свака два минута током 30 минута.
Током почетног мешања, додавање 1:1 хипертоничне глукозе и ВБ или ПРП излаже тромбоците концентрацијама изнад 25% током неколико секунди.У четвртом кораку, да бисмо проценили ефекат хипертоничне глукозе са минималним почетним вршним концентрацијама и тестирали горњу границу ефекта глукозе, додали смо само малу количину крви у Д25В или Д50В.Ставите 1 мл Д25В или Д50В у епрувету и додајте 0,2 мл ВБ уз мешање узорка вортексом 10 секунди.У овим случајевима, крв је била изложена глукози у концентрацији приближно 20% изнад коначне концентрације, уместо 50% изнад коначне концентрације као у фази 3, што је резултирало коначним концентрацијама глукозе од 20,8% и 41,6%.Мешани узорци су анализирани у истом временском интервалу као у кораку 3.
У првом кораку сваке серије разблаживања глукозе, узето је 30 узорака јер је то била одговарајућа величина узорка за пилот студију [9].На крају сваке фазе (укључујући прву фазу), процените адекватност величине узорка користећи формулу која се користи за одређивање величине узорка која је потребна за процену средње вредности варијабле континуираног исхода у једној популацији.Формула н = З2 к СД2 /Е2.У овој једначини, З је З-сцоре, СД је стандардна девијација, а Е је жељена грешка [10].Наша алфа је 0,05, што одговара З вредности од 1,96, а очекујемо грешку од 5 (у процентима).Отуда решавамо за н = (1,962 к СД2)/52.Резултати су показали да је величина узорка потребна за сваку фазу била мања од стварно прикупљеног броја.
Током периода 1, 3 и 4 коришћењем више од једне концентрације глукозе, ефекат различитих концентрација глукозе је анализиран упоређивањем фракционих промена између времена 0 и сваког следећег времена (фаза 1 на 15 минута, период 3 на 15 минута).и четири на 15 секунди, а затим на свака два минута.) Стопе промена за сваки временски период су упоређене коришћењем Манн-Вхитнеи У-теста јер подаци нису пратили нормалну дистрибуцију како је утврђено Схапиро-Вилковим тестом нормалности.Пошто је 1-на-1 анализа неколико група (пет) извршена у првом, трећем и четвртом кораку (укупно пет), извршена је Бонферонијева корекција да би се жељена алфа вредност подесила на ≤0,01, али не и ≤0,05.
Смањење броја тромбоцита са свим концентрацијама хипертоничне декстрозе и повећање МПВ у ПРП тромбоцитима при >12,5% концентрације декстрозе: ПРП број тромбоцита је порастао од једног до пет пута концентрације у поређењу са почетном линијом пуне крви, варирајући у зависности од методе (није приказано). Смањење броја тромбоцита са свим концентрацијама хипертоничне декстрозе и повећање МПВ-а у ПРП тромбоцитима при >12,5% концентрације декстрозе: ПРП број тромбоцита је порастао од једног до пет пута концентрације у поређењу са почетном линијом пуне крви, варирајући у зависности од методе (није приказано). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрацијах гипертоничне декстрози и увеличение МПВ в тромбоцитах ПРП при концентрацијах декстрози > 12,5%: количество тромбоцитов ПРП увеличило в 1-5 раз по сравнениу с исходној целичној кровьу, в зависности од метода (не показано). Смањен број тромбоцита при свим хипертонским концентрацијама декстрозе и повећан МПВ у ПРП тромбоцитима при >12,5% концентрације декстрозе: ПРП број тромбоцита се повећао 1-5 пута у поређењу са почетном линијом пуне крви, у зависности од методе (није приказано). ).在> 12,5% 的 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 降低 葡萄糖 降低 葡萄糖 葡萄糖 葡萄糖 降低 降低 血小板 血小板 血小板 中 мпв 增加: 与 基线 全 血 相比, прп 血小板 计数 从 浓度 的 1 倍 上升 到 5 倍, 因 方法 而异 (因 描述 而异 (因 描述 而异 (因 При >12,5% концентрације глукозе, висока концентрација глукозе смањује крвну слику, ПРП крви МПВ се повећава: у поређењу са 与基线全血, ПРП крвна слика се повећава од 1 до 5 пута од концентрације (није описано). При концентрацијах глукози >12,5% све концентрације хипертоничне гликозе снижали су број тромбоцитов, а МПВ повишали у тромбоцитама ПРП: број тромбоцитов ПРП увеличало се од 1- до 5-кратних концентрација по сравњењу с исходним концентрацијама целичне крви, у зависности од методе (не описано). При концентрацијама глукозе >12,5%, све концентрације глукозе код хипертензивних пацијената смањиле су број тромбоцита и повећале МПВ у ПРП тромбоцитима: број ПРП тромбоцита се повећао 1 до 5 пута у поређењу са почетном концентрацијом у целој крви, у зависности од методе (као што је описано).Слика 1 показује да се број тромбоцита смањио за скоро 75% након разблаживања у води и за 20-30% након 15 минута разблаживања са различитим концентрацијама глукозе у поређењу са основним ПРП и разблажењем 1:1 прилагођеном запремини (1- к1 са корекцијом запремине).к -1 узгој).1 узгој).
Број ћелија у сваком разблажењу је изражен као део првобитног броја пре разблажења.
МПВ се минимално смањио током производње ПРП, без даље промене у концентрацији разблажења на 12,5% у води или глукози (укључујући 25% смеше ПРП глукозе) и повећао се за више од 20% након разблаживања у 50% раствору глукозе (Сл. 2).).Насупрот томе, еритроцити нису показали значајну промену у запремини при било ком разблажењу осим Х2О.
Просечна запремина ћелија у сваком разблажењу је изражена као проценат првобитне запремине пре разблажења.
Слично, али мање изражено смањење броја тромбоцита и повећање ЦВР примећено је код БЦ изложених 50% глукозе (да се формулише са 25% глукозе).Табела 2 упоређује бројеве ћелија и запремине ћелија у целој крви разблаженој у 50% декстрозе са ПРП подацима фазе 1 разблаженим у 50% декстрозе.Промене у броју РБЦ и РБЦ МЦВ нису биле очигледне и нису биле у фокусу наше пажње.
СД = стандардна девијација, МД = средња разлика између група, СЕ = стандардна девијација средње разлике, РБЦ = еритроцити, ПЛТ = тромбоцити, ПРП = плазма богата тромбоцитима, ВБ = пуна крв
Након додавања Д50В у ВБ, процентуални губитак тромбоцита прилагођен разблажењу био је 7,7% (310±73 наспрам 286±96) у поређењу са 17,8% за ПРП разблаживање у Д50В (664±348 наспрам 544±277).МПВ ВБ је повећан за 16,8% (са 10,1 ± 0,5 на 11,8 ± 0,6), док је МПВ ПРП повећан за 26% (9,2 ± 0,8 наспрам 11,6 ± 0,7). Иако су средње разлике у смањењу броја тромбоцита и повећању МПВ биле значајно веће код ПРП, промене у смањењу броја тромбоцита унутар ВБ биле су скоро значајне (310 ± 73 до 286 ± 96 (-7,7%); п = 0,06) и повећање МПВ је било значајно (10,1 ± 0,5 до 11,6 ± 0,8 п). Иако су средње разлике у смањењу броја тромбоцита и повећању МПВ биле значајно веће код ПРП, промене у смањењу броја тромбоцита унутар ВБ биле су скоро значајне (310 ± 73 до 286 ± 96 (-7,7%); п = 0,06) и повећање МПВ је било значајно (10,1 ± 0,5 до 11,6 ± 0,8 п).Иако су средње разлике у смањењу броја тромбоцита и повећању ЦВР биле значајно веће код ПРП, промене у паду броја тромбоцита унутар ВБ су биле скоро значајне (310 ± 73 до 286 ± 96 (-7,7%); п = 0,06).повећање МПВ било значительно (от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) п < 0,001). повећање МПВ је било значајно (са 10,1 ± 0,5 на 11,8 ± 0,6 (+16,8) п < 0,001).尽管ПРП 在血小板计数减少和МПВ 增加方面的平均差异显着蛴大, 但ВБ 台叕村血台几乎是显着的 (310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%)；п = .06) 001).尽管 ПРП 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 叅 葡 大的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； п = 0,06）和МПВ 的增加是.±1,0,1 的 1,0, 1,0 ± 0,6 (+16,8) п < .001).Промена у смањењу броја тромбоцита унутар ВБ била је скоро значајна (са 310 ± 73 на 286 ± 96 (-7,7%); п = 0,06), иако је ПРП имао значајно веће средње разлике у паду броја тромбоцита и повећању МПВ.а повећање МПВ је било значајно.(од 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (од 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) п < 0,001).
Потребна је коначна концентрација од 20% глукозе да би се видела значајна промена МПВ-а, али је промена МПВ-а била израженија при коначној концентрацији од 25%.Губитак тромбоцита се стабилизовао након почетног пада.Приметили смо почетно оштро смањење ЦВР-а, међутим, ЦВР је брзо обновљен при коначној концентрацији глукозе од 25%, што је било значајно више од ЦВР нивоа примећених при коначним концентрацијама глукозе од 20% и 15% (Слика 3 и лево од Табеле 3; засенчене кутије).означавају п-вредности ≤ алфа са Бонферонијевом корекцијом од 0,01).Такође је дошло до почетног наглог пада броја ПЛТ, примећеног у почетној фази од 0-15 с, а затим је остао стабилан (од 15 с до 30 мин; лево од табеле 4).
Додавање различитих концентрација глукозе у пуној крви резултирало је почетним брзим смањењем МПВ-а праћеним опоравком зависним од концентрације од више од 20%.Легенда показује концентрацију глукозе након разблаживања.Д15, Д20 и Д25 су изведени у разблажењу 1:1.Д21 и Д41 су изведени у разблажењу 1:5.
Табела 4 показује промену броја тромбоцита када се разблажи у хипертоничној глукози.Приметили смо однос зависан од дозе између тренутног пада ПЛТ бројева при разблажењу 1:1 и при разблажењу 1:5.Упоређујући разблажења 1:1 као једну групу са разблажењима 1:5, група 1:1 је имала тренутно смањење броја тромбоцита мање од групе 1:5 66±48,000 (23%) наспрам 99±69,000 (37%)., п = 0,014) у групи 1:5.Након почетног пада на првој тачки мерења, број тромбоцита као проценат глукозе се стабилизовао (слика 4).
Када се пуна крв дода глукози у односу 1:1, број тромбоцита се смањује за око 25%.Међутим, када је додата пуна крв у односу 1:5, смањење је било много веће – око 50%.
41% глукозе је повећало МПВ брже и драматичније од 25% или 21%.Резултати МПВ-а су приказани на слици 3. Код свих осталих разблажења, није примећено тренутно почетно смањење МПВ-а након додавања 50% глукозе.Када се користи 25% глукозе (концентрација глукозе 20,8% при коначном разблажењу), промена МПВ је упоредива са променом у 20% глукозе при разблажењу 1:1 (слика 3).Иако су промене у МПВ у почетку биле веће при мешаној концентрацији од 41% него при 25%, разлика у МПВ између 41% и 25% након 16 минута више није била значајна (Табела 3, десно).Такође је занимљиво да је 25% глукозе повећало МПВ ефикасније од 20,8%.
Ова ин витро студија је делимично потврдила нашу хипотезу. Показао је потенцијалну делимичну лизу тромбоцита применом декстрозе, брзу акомодацију тромбоцита до екстремне хипертоничности и значајан пораст МПВ-а као одговор на > 25% концентрације хипертоничне декстрозе. Показао је потенцијалну делимичну лизу тромбоцита применом декстрозе, брзу акомодацију тромбоцита до екстремне хипертоничности и значајан пораст МПВ-а као одговор на > 25% концентрације хипертоничне декстрозе. Он показао потенциальниј частичниј лизис тромбоцитов примесьу декстрози, биструу аккомодациу тромбоцитов до екстремального гипертонуса и знатное повишење МПВ в ответ на хипертоническу концентрацију декстрози > 25%. Показао је потенцијалну делимичну лизу тромбоцита са декстрозом, брзу акомодацију тромбоцита до екстремне хипертоничности и значајно повећање МПВ-а као одговор на хипертоничне нивое декстрозе >25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应昊，血小板快速适应极% 浓度的高渗葡萄糖时МПВ 显着上升。它 显示 出 通过 葡 萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 櫁 奼应 极应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 мпв 显着。。。。. Он показује потенцијални частичниј лизис тромбоцитов смесами с глукозом, биструу адаптациу тромбоцитов к екстремальному хипертонусу и знатное повећање МПВ-а при концентрацији хипертоничне гликозе > 25%. Показује потенцијалну делимичну лизу тромбоцита мешавинама глукозе, брзу адаптацију тромбоцита на екстремну хипертоничност и значајно повећање МПВ-а као одговор на хипертоничну глукозу >25%.Почетно повећање је било максимално при 41,6% изложености глукози, али се повећање МПВ приближило 25% изложености глукози отприлике 20 минута након излагања.
На концентрацију тромбоцита утиче глукоза.Приметили смо да се количина ПЛТ смањује при свим разблажењима глукозе.Оштар пад броја тромбоцита у Х2О (0%) разблажењима ПРП серије може бити повезан са осмотском лизом.Алтернативно, ово може бити артефакт узрокован згрушавањем тромбоцита, али то је у супротности са недостатком промене МПВ-а при овом разблажењу.Овај налаз значи да су неки тромбоцити веома осетљиви на хипоосмоларност.
У свим разблажењима глукозе 1:1, количина ПЛТ се смањила за 20-30%, чак и за Д5В (хипотоничан на 252 мОсм), што може указивати на специфичан неосмотски ефекат глукозе, пошто су и ПЛТ и МПВ остали непромењени при троструком повећању концентрације.глукоза.од Д5В до Д25В.У ствари, концентрације ПЛТ-а су имале тенденцију благог повећања са повећањем осмоларности.
Смањење ПЛТ између разблажења 1:1 и 1:5 значи да ефекат растварања зависи од почетне и крајње концентрације глукозе.Ако би то зависило само од почетне концентрације, онда би се очекивало да се види разлика у смањењу ПЛТ између концентрација 1:1.Али ми не радимо.Ако ефекат лизе зависи само од коначне концентрације глукозе, онда не очекујемо велику разлику између разблажења од 20% 1:1 и разблажења од 20,8% 1:5.А ипак смо то урадили.
Ако дође до губитка тромбоцита услед лизе тромбоцита, формира се делимични лизат, након чега се цитокини и фактори раста ослобађају у екстрацелуларно окружење.Неколико студија је показало да је лизат тромбоцита скоро једнако ефикасан као ПРП као раствор за пролиферацију [11].Сам ПРП се показао као ефикасно решење за лечење пролиферације [12-14].
Неактивни тромбоцити циркулишу у облику диска ојачаног са неколико унутрашњих структура.Током активације, они попримају сферичнији облик или облик амебе, што резултира повећањем запремине.Повећање запремине захтева повећање површине, што је резултат екструзије система отворених тубула (ОЦС) и додавања егзоцитних гранула на мембрану.Остаје да се утврди да ли повећање МПВ изазвано хипертоничном глукозом укључује један или оба ова механизма, али ако је други, онда би повећање МПВ-а указивало на дегранулацију.
Ова студија је показала да је излагање високим концентрацијама глукозе на ПРП или тромбоцитима целе крви довело до повећања МПВ-а у року од 15 минута са концентрацијом глукозе од 25% и 41,6%, респективно.
Повећање МПВ-а тромбоцита може бити последица дилатације заплета околних микротубула као одговора на прилив калцијума.Лиу ет ал.Показало се да глукоза посредује у приливу калцијума кроз канал ТРПЦ6 тромбоцита [6].Наша хипотеза је да глукоза изазива релаксацију заплета микротубула, што доводи до повећања МПВ и сензибилизације и/или активације тромбоцита.Међутим, судећи по нашим резултатима, ово је само део приче.У нашим тестовима, ниједна концентрација испод Д25В није резултирала повећањем МПВ-а.С обзиром на то да нисмо тестирали излагање концентрацијама глукозе између 12,5% и 25%, наши резултати прве фазе сугеришу да може постојати праг у овом опсегу концентрација глукозе који доводи до повећања МПВ-а.Даље тестирање у фазама 3 и 4 показало је да се чини да је 20-25% глукозе праг за ово, али остаје нејасно зашто.
Такође смо приметили смањење МПВ од ~9% након центрифугирања.Није јасно да ли је ово смањење МПВ-а последица већих и гушћих тромбоцита заробљених у слоју еритроцита центрифуге.Ово запажање може бити важно за клиничаре јер може имплицирати да су ПРП тромбоцити мањи и мање густи подскуп ВБ тромбоцита.
У претходној студији смо показали да је припрема ПРП ручним методама јефтина [8].Ако глукоза сензибилизира тромбоците ткива или ПРП, чинећи их подложнијим активацији, или ако се ПРП производи са делимичним својствима лизата, то може побољшати регенерацију и смањити потребу за терапијом.Стога, комбинација ПРП-а и висококонцентроване глукозе може бити исплативија од ПРП-а или саме глукозе.
Наша студија има неколико недостатака.Прво, користимо ПРП добијен на неколико различитих метода.Ово може довести до конфликтних резултата.Друго, нисмо били у могућности да извршимо биохемијску анализу било ког од наших узорака да бисмо прецизније утврдили да ли је дошло до активације тромбоцита.Желели бисмо да измеримо П-селектин, тромбоцитни фактор 4, моноцитне агрегате тромбоцита или друге маркере активације тромбоцита да бисмо боље разумели степен или присуство дегранулације алфа гранула, али то је ван оквира ове студије.Треће, нисмо били у могућности да потврдимо електронском микроскопијом или другим методама да је повећање МПВ-а у тромбоцитима изложеним глукози последица ефекта на замршене микротубуле.
Мешавине ВБ или ПРП са 25% глукозе повећале су МПВ, сигнализирајући почетак активације тромбоцита, иако ова студија није показала прогресију агрегације или дегранулације.Хипертонична мешавина глукозе је довела до губитка тромбоцита, што је вероватно представљало литички ефекат.Делимична активација или лиза тромбоцита може изазвати регенерацију ткива након ињекције тромбоцита.Није јасно до каквих клиничких последица ове промене могу довести.Даља истраживања су показала прецизнија мерења активације или лизе и проценила различите клиничке ефекте мешавина хипертоничне глукозе са ВБ или ПРП.
Пролиферативна терапија глукозе је једноставна и јефтина регенеративна терапија која се брзо шири и подржава клиничка истраживања.Ова студија сугерише физиолошки механизам који би нам, ако се потврди, могао помоћи да разумемо део регенеративног механизма пролиферативне терапије.
Биомедицинска и здравствена информатика на Универзитету у Мисурију, Медицински факултет у Канзас Ситију, Канзас Сити, САД
Људи: Сви учесници у овој студији су дали или нису дали сагласност.Међународно друштво за ћелијску медицину издало је ИЦМС-2017-003 одобрење.Следећи протокол је одобрен за даљу употребу од стране Институционалног одбора за ревизију Међународног друштва за ћелијску медицину: Наслов: Израчунавање приноса лекова у плазми богатих тромбоцитима на основу основног броја тромбоцита ЦБЦ.Субјекти животиња: Сви аутори су потврдили да ниједна животиња или ткива нису били укључени у ову студију.Сукоби интереса: У складу са ИЦМЈЕ Униформ Дисцлосуре Форм, сви аутори изјављују следеће: Информације о плаћању/услузи: Сви аутори изјављују да нису добили финансијску подршку од било које организације за послато дело.Финансијски односи: Сви аутори изјављују да тренутно или у протекле три године немају финансијске односе ни са једном организацијом која би могла бити заинтересована за пријављен рад.Други односи: Сви аутори изјављују да не постоје други односи или активности које могу утицати на послани рад.
Харрисон ТЕ, Бовлер Ј, Реевес К ет ал.(17. мај 2022.) Утицај глукозе на број и запремину тромбоцита: импликације за регенеративну медицину.Лек 14(5): е25081.дои:10.7759/цуреус.25081
© Цопиригхт 2022 Харрисон ет ал.Ово је чланак отвореног приступа који се дистрибуира под условима лиценце Цреативе Цоммонс Аттрибутион ЦЦ-БИ 4.0.Дозвољена је неограничена употреба, дистрибуција и репродукција у било ком медију, под условом да се наведе оригинални аутор и извор.