Kea leboha ha u etetse Nature.com.Mofuta oa sebatli oo u o sebelisang o na le tšehetso e fokolang ea CSS.Bakeng sa boiphihlelo bo botle ka ho fetesisa, re khothaletsa hore o sebelise sebatli se ntlafalitsoeng (kapa o tima Compatibility Mode ho Internet Explorer).Khabareng, ho netefatsa ts'ehetso e tsoelang pele, re tla fana ka sebaka sa marang-rang ntle le mekhoa le JavaScript.
Ho tsoala ha linonyana ho itšetlehile ka bokhoni ba tsona ba ho boloka peō ea botona e lekaneng bakeng sa nako e telele ka har'a li-tubules tsa "sperm storage" (SST).Mokhoa o nepahetseng oo spermatozoa e kenang ka oona, o lula, 'me o tloha ho SST o ntse o e-na le likhang.Peō ea likhoho tsa sharkasi e bonts'a tšekamelo e phahameng ea ho bokellana, ho etsa mekotla ea likhoele tse tsamaeang tse nang le lisele tse ngata.Ka lebaka la bothata ba ho shebella motility le boitšoaro ba spermatozoa ka opaque fallopian tube, re ile ra sebelisa sesebelisoa sa microfluidic se nang le karolo ea microchannel cross-section e tšoanang le ea spermatozoa ho ithuta spermatozoa agglutination le motility.Boithuto bona bo tšohla hore na dingata tsa peō ea botona li theha joang, li tsamaea joang, le karolo ea tsona e ka bang teng ho atoloseng ho lula ha peō ho SST.Re ile ra batlisisa lebelo la peō ea botona le boitšoaro ba rheological ha phallo ea mokelikeli e hlahisoa ka har'a mocha oa microfluidic ka khatello ea hydrostatic (sekhahla sa phallo = 33 µm/s).Peo ea spermatozoa e atisa ho sesa khahlanong le hona joale (positive rheology) 'me lebelo la spermatozoon bundle le fokotsehile haholo ha le bapisoa le spermatozoa e le' ngoe.Ho 'nile ha hlokomeloa hore lihlopha tsa peō ea botona li tsamaea ka mokhoa o pota-potileng' me li eketseha ka bolelele le botenya ha peō e le 'ngoe e ntse e ngolisoa. Liphutheloana tsa peō ea botona li ile tsa bonoa li atamela le ho khomarela maboteng a likanale tsa microfluidic ho qoba ho hoholoa ka lebelo la phallo ea mokelikeli> 33 µm/s. Liphutheloana tsa peō ea botona li ile tsa bonoa li atamela le ho khomarela maboteng a likanale tsa microfluidic ho qoba ho hoholoa ka lebelo la phallo ea mokelikeli> 33 µm/s. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрофлюидных каналов, чтобы избежают смета мкм / p. Likokoana-hloko tsa peō li 'nile tsa hlokomeloa ho atamela le ho khomarela mabota a mahlakoreng a likanale tsa microfluidic ho qoba ho hoholoa ka sekhahla sa phallo ea mokelikeli>33 µm/s.观察到精子束接近并粘附在微流体通道的侧壁上，以避免被流体流速> 33 µm/s 扫过.33 µm/s 扫过. Было замечено, что пучки сперматозоидов приближаются и прилипают к боковым стенкам микрожидкостного канала, чтобы избежать сместо 3 км/с. Mangata a peo a 'nile a hlokomeloa ho atamela le ho khomarela mabota a mahlakoreng a mocha oa microfluidic ho qoba ho hoholoa ke ho phalla ha mokelikeli ho>33 µm/s.Ho hlahloba le ho fetisa microscope ea elektronike e ile ea senola hore dingata tsa peō ea botona li ne li tšehetsoa ke lintho tse ngata tse teteaneng.Lintlha tse fumanoeng li bonts'a motsamao o ikhethang oa spermatozoa ea khoho ea Sharkazi, hammoho le bokhoni ba spermatozoa ho agglutinate le ho etsa mekotla ea mehala, e thusang ho utloisisa hamolemo polokelo ea nako e telele ea spermatozoa ho SMT.
E le hore peo ea botona le mahe a emolloe bathong le liphoofolong tse ngata li fihle sebakeng seo li tsoaloang ho sona ka nako e nepahetseng.Ka hona, ho nyalana ho tlameha ho etsahala pele kapa ka nako ea ovulation.Ka lehlakoreng le leng, liphoofolo tse ling tse anyesang, tse kang lintja, hammoho le mefuta eo e seng ea liphoofolo tse anyesang, tse kang likokoanyana, litlhapi, lihahabi le linonyana, li boloka peō ea botona lithong tsa tsona tsa ho ikatisa ka nako e telele ho fihlela mahe a tsona a se a loketse ho emolisoa ( asynchronous fertilization 1 ).Linonyana li khona ho boloka matla a spermatozoa a khonang ho nontša mahe bakeng sa libeke tse 2-102.
Ena ke tšobotsi e ikhethang e khethollang linonyana ho liphoofolo tse ling, kaha e fana ka monyetla o moholo oa ho emola ka mor'a hore ho be le peo e le 'ngoe ka libeke tse' maloa ntle le ho kopana ka nako e le 'ngoe le ho hlahisa mahe.Karolo e ka sehloohong ea ho boloka peō ea botona, e bitsoang "tubule" ea "sperm storage" (SST), e fumaneha ka har'a mameno a ka hare a mameno a uterovaginal.Ho fihlela joale, mekhoa eo peō ea botona e kenang ka eona, e lulang, le ho tsoa ka eona bankeng ea peō ha e utloisisoe ka botlalo.Ho itšetlehile ka lithuto tse fetileng, likhopolo tse ngata li behiloe pele, empa ha ho le e 'ngoe ea tsona e tiisitsoeng.
Forman4 e na le maikutlo a hore spermatozoa e boloka bolulo ba eona sebakeng sa SST ka motsamao o tsoelang pele oa oscillatory khahlano le tataiso ea phallo ea mokelikeli ka likanale tsa protheine tse fumanehang ho SST epithelial cell (rheology).ATP e fokotsehile ka lebaka la ts'ebetso e sa khaotseng ea li-flagellar e hlokahalang ho boloka peō e le SST lumen 'me motility e qetella e fokotseha ho fihlela peō e ntšoa ka har'a banka ea peō ka ho phalla ha mokelikeli' me e qala leeto le lecha ho theosa le mothapo oa fallopian o nyolohang ho ea nontša peō.Lehe (Forman4).Mokhoa ona oa polokelo ea peō o tšehetsoa ke ho fumanoa ke immunocytochemistry ea aquaporins 2, 3 le 9 e teng liseleng tsa SST epithelial.Ho fihlela joale, lithuto tse mabapi le rheology ea peo ea likhoho le karolo ea eona polokelong ea SST, khetho ea peō ea botšehali, le tlholisano ea peō ha e eo.Likhohong, peō ea botona e kena ka botšehaling ka mor'a ho kopana ha tlhaho, empa ho feta 80% ea spermatozoa e ntšoa ka botšehaling nakoana ka mor'a ho kopana.Sena se fana ka maikutlo a hore botšehali ke sebaka sa mantlha sa khetho ea peō ho linonyana.Ho phaella moo, ho tlalehiloe hore karolo e ka tlaase ho 1% ea spermatozoa e emolisitsoeng ka botšehaling e qetella e le SSTs2.Ha litsuonyana li kenngoa ka botšehaling, palo ea spermatozoa e fihlang ho SST e atisa ho eketseha lihora tse 24 ka mor'a ho kenngoa.Ho fihlela joale, mokhoa oa ho khetha peō nakong ea ts'ebetso ena ha o hlake, 'me motility ea peō e ka bapala karolo ea bohlokoa ho nkeng peō ea SST.Ka lebaka la marako a teteaneng le a sa bonahaleng a li- fallopian tubes, ho thata ho beha leihlo ka ho toba motility ea peō ka har'a methapo ea linonyana.Ka hona, ha re na tsebo ea motheo ea hore na spermatozoa e fetela joang ho SST ka mor'a ho emola.
Rheology e sa tsoa hlokomeloa e le ntho ea bohlokoa e laolang ho tsamaisoa ha peō ka har'a setho sa mammalian.Ho ipapisitsoe le bokhoni ba spermatozoa ea motile ho falla ka tsela e fapaneng, Zaferani et al8 ba sebelisitse sistimi ea corra microfluidic ho arola spermatozoa ea motile ho tsoa lisampoleng tsa peō e ngotsoeng.Mofuta ona oa ho hlopha peō ea botona o bohlokoa bakeng sa kalafo ea ho hloka thari ea bongaka le lipatlisiso tsa bongaka, 'me o khethoa ho feta mekhoa ea setso e nkang nako le mosebetsi o boima mme e ka senya sebopeho sa peō le sebopeho sa 'mele.Leha ho le joalo, ho fihlela joale, ha ho liphuputso tse entsoeng mabapi le phello ea li-secretions tse tsoang lithong tsa botona kapa botšehali tsa likhoho ka motility ea peō.
Ho sa tsotellehe mochine o bolokang peō e bolokiloeng ho SST, bafuputsi ba bangata ba hlokometse hore moahi oa spermatozoa agglutinate hlooho-to-hlooho ho SST ea likhoho tse 9, 10, likoekoe tse 2, le li-turkeys tse 11 ho theha mekotla ea peō ea agglutinated.Bangoli ba fana ka maikutlo a hore ho na le kamano pakeng tsa agglutination ena le polokelo ea nako e telele ea spermatozoa ho SST.
Tingari le Lake12 li tlalehile kamano e matla pakeng tsa spermatozoa ka har'a tšoelesa e amohelang peō ea khoho 'me ea botsa hore na avian spermatozoa agglutinate ka tsela e tšoanang le ea mammalian spermatozoa.Ba lumela hore likamano tse tebileng pakeng tsa peō ea botona ka har’a vas deferens e ka ’na eaba li bakoa ke khatello ea kelello e bakoang ke ho ba teng ha peō e ngata sebakeng se senyenyane.
Ha ho hlahlojoa boitšoaro ba spermatozoa holim'a li-slide tse ncha tse leketlileng, matšoao a nakoana a agglutination a ka bonoa, haholo-holo metseng ea marotholi a peō.Leha ho le joalo, agglutination e ne e atisa ho khathatsoa ke ketso ea ho potoloha e amanang le ho sisinyeha ho tsoelang pele, e hlalosang mokhoa oa nakoana oa ketsahalo ena.Bafuputsi ba boetse ba hlokometse hore ha sehlaseli se eketsoa peōng ea botona, ho ile ha hlaha likarolo tse telele tsa lisele tse "joaloka khoele".
Boiteko ba pele ba ho etsisa spermatozoon bo entsoe ka ho tlosa terata e tšesaane lerotholing le leketlileng, e leng se ileng sa fella ka hore ho be le leqhubu le lelelele le kang peō le hlahelletseng lerotholing la peō.Hang-hang spermatozoa e ile ea kenngoa ka mokhoa o ts'oanang ka har'a vesicle, empa sehlopha sohle se ile sa nyamela ka potlako ka lebaka la moeli oa 3D.Ka hona, ho ithuta spermatozoa agglutination, hoa hlokahala ho shebella motility le boitšoaro ba spermatozoa ka ho toba ka har'a li-tubules tse ka thōko tsa polokelo ea peō, eo ho leng thata ho e finyella.Ka hona, hoa hlokahala ho hlahisa sesebelisoa se etsisang spermatozoa ho tšehetsa lithuto tsa peō ea motility le boitšoaro ba agglutination.Brillard et al13 ba tlalehile hore bolelele bo bolelele ba li-tubules tsa polokelo ea peō ho litsuonyana tse kholo ke 400-600 µm, empa li-SST tse ling li ka ba bolelele ba 2000 µm.Mero le Ogasawara14 li ile tsa arola litšoelesa tsa seminiferous ka li-tubules tse atolositsoeng le tse sa atolositsoeng tsa polokelo ea peō, tseo ka bobeli li neng li lekana ka bolelele (~ 500 µm) le bophara ba molala (~ 38 µm), empa bophara ba lumen ea li-tubules e ne e le 56.6 le 56.6 µm.., ka ho latellana 11.2 μm, ka ho latellana.Thutong ea morao-rao, re sebelisitse sesebelisoa sa microfluidic se nang le boholo ba mocha oa 200 µm × 20 µm (W × H), eo karolo ea eona ea sefapano e batlang e le haufi le ea SST e matlafalitsoeng.Ho feta moo, re ile ra hlahloba motility ea peō ea botona le boitšoaro ba agglutination mokelikeli o phallang, o lumellanang le khopolo ea Foreman ea hore mokelikeli o hlahisoang ke lisele tsa SST epithelial li boloka peō ka har'a lumen ka lehlakoreng le leng (rheological).
Sepheo sa thuto ena e ne e le ho hlōla mathata a ho shebella motility ea spermatozoa ka har'a fallopian tube le ho qoba mathata a ho ithuta rheology le boitšoaro ba spermatozoa tikolohong e matla.Ho ile ha sebelisoa sesebelisoa sa microfluidic se hlahisang khatello ea hydrostatic ho etsisa ho tsamaea ha peō ka har'a litho tsa botona kapa botšehali tsa khoho.
Ha lerotholi la peo ea botona e hlapolotsoeng (1:40) le ne le kentsoe mochineng oa microchannel, ho ne ho ka tsejoa mefuta e ’meli ea peō ea botona (peō e ka thōko le peō e tlanngoeng).Ho phaella moo, spermatozoa e ne e atisa ho sesa khahlanong le hona joale (positive rheology; video 1, 2). Le hoja liphutheloana tsa peō ea botona li ne li e-na le lebelo le tlaase ho feta la peō e le 'ngoe (p <0.001), li ile tsa eketsa peresente ea peō e bontšang rheotaxis e ntle (p <0.001; Letlapa la 2). Le hoja liphutheloana tsa peō ea botona li ne li e-na le lebelo le tlaase ho feta la peō e le 'ngoe (p <0.001), li ile tsa eketsa peresente ea peō e bontšang rheotaxis e ntle (p <0.001; Letlapa la 2). Хотя пучки сперматозоидов имели более низкую скорость, чем у одиночных сперматозоидов (p <0,001), они увеличивали процемали процемали процент, они увеличивали процемали проценто, ложительный реотаксис (p <0,001; таблица 2). Le hoja liphutheloana tsa spermatozoa li ne li e-na le lebelo le tlaase ho feta la spermatozoa e le 'ngoe (p <0.001), li ile tsa eketsa peresente ea spermatozoa e bontšang rheotaxis e ntle (p <0.001; Letlapa la 2).尽管精子束的速度低于孤独精子的速度（p <0.001），但它們增加了显示阳性流变性的爾0。表2).尽管 精子束 的 速度 低于 孤独 的 速度（p <0.001） , 但 增加 显示 阳性 流 爾.001 ; 2 .......(())) Хотя скорость пучков сперматозоидов была ниже, чем у одиночных сперматозоидов (p <0,001), они увеличивали процент одиночных сперматозоидов (p <0,001), они увеличивали процент одиночных сперматозоидов p <0,001; таблица 2). Le hoja lebelo la liphutheloana tsa peō le ne le le tlaase ho feta la spermatozoa e le 'ngoe (p <0.001), li ile tsa eketsa peresente ea spermatozoa e nang le rheology e ntle (p <0.001; Letlapa la 2).Positive rheology bakeng sa spermatozoa e le 'ngoe le li-tufts e hakanngoa hoo e ka bang 53% le 85%, ka ho latellana.
Ho 'nile ha hlokomeloa hore spermatozoa ea likhoho tsa sharkasi hang ka mor'a ho tsoa ha ejaculation e theha dingata tse nang le batho ba bangata.Li-tufts tsena li eketseha ka bolelele le botenya ha nako e ntse e ea 'me li ka lula li le ka har'a vitro lihora tse' maloa pele li senyeha (video 3).Lingata tsena tse nang le likhoele li bōpehile joaloka echidna spermatozoa tse hlahang qetellong ea epididymis.Semen ea khoho ea Sharkashi e fumanoe e e-na le tšekamelo e phahameng ea ho bokella le ho theha sephutheloana sa reticulate ka nako e ka tlaase ho motsotso o le mong ka mor'a ho bokella.Mabala ana a matla 'me a khona ho khomarela mabota leha e le afe a haufi kapa lintho tse tsitsitseng.Le hoja liphutheloana tsa peō li fokotsa lebelo la lisele tsa peō, ho hlakile hore ka macroscopically li eketsa linearity ea tsona.Bolelele ba dingata bo fapana ho latela palo ea peo e bokeletsoeng ka dingata.Likarolo tse peli tsa sephutheloana li ne li arotsoe: karolo ea pele, ho kopanyelletsa le hlooho e sa lefelloeng ea peō e kopantsoeng, le karolo ea ho qetela, ho akarelletsa le mohatla le karolo eohle ea distal ea peō.Ho sebelisa k'hamera ea lebelo le phahameng (950 fps), lihlooho tse sa lefelloeng tsa spermatozoa tse nang le agglutinated li ile tsa hlokomeloa karolong ea pele ea sephutheloana, se ikarabellang bakeng sa ho tsamaea ha sekoti ka lebaka la ho sisinyeha ha bona, ho hula tse setseng ka har'a bongata ka ho sisinyeha ha helical (Video 4).Leha ho le joalo, lihlopheng tse telele, ho 'nile ha hlokomeloa hore lihlooho tse ling tse sa lefelloeng tsa peō li khomaretse 'mele 'me karolo e qetellang ea tuft e sebetsa joaloka li-vane ho thusa ho tsamaisa leqhubu.
Ha li ntse li phalla butle-butle, liphutheloana tsa peō ea botona li tsamaisana ka tsela e tšoanang, leha ho le joalo, li qala ho kopana le ho khomarela ntho e 'ngoe le e' ngoe e ntseng e le teng, e le hore li se ke tsa hlatsuoa ke phallo ea hona joale ha lebelo la phallo le ntse le eketseha.Lingata li theha ha lisele tse seng kae tsa peō li atamelana, li qala ho tsamaea ka synchrony le ho pota-pota tse ling, ebe li khomarela ntho e khomarelang.Lipalo 1 le 2 li bontša kamoo peō ea botona e atamelanang kateng, e etsa mateano ha mehatla e pota-pota.
Bafuputsi ba ile ba sebelisa khatello ea hydrostatic ho theha phallo ea mokelikeli ka har'a microchannel ho ithuta rheology ea peō.Ho ile ha sebelisoa microchannel e nang le boholo ba 200 µm × 20 µm (W × H) le bolelele ba 3.6 µm.Sebelisa li-microchannel pakeng tsa lijana tse nang le lisyringe tse kentsoeng lipheletsong.Ho ne ho sebelisoa mebala ea lijo ho etsa hore likanale li bonahale haholoanyane.
Tlama lithapo tsa likhokahano le lisebelisoa leboteng.Video ena e nkiloe ka microscope e fapaneng le mohato.Ka setšoantšo se seng le se seng, ho hlahisoa litšoantšo tsa microscopy le 'mapa oa mohato.(A) Kamano pakeng tsa melapo e 'meli e hanyetsa ho phalla ka lebaka la ho tsamaea ha helical (motsu o mofubelu).(B) Khokahano pakeng tsa sephutheloana sa tube le lerako la kanale (metsu e khubelu), ka nako e ts'oanang li hokahane le li-bundle tse ling tse peli (metsu e mosehla).(C) Mangata a peō mocheng oa microfluidic a qala ho hokahana (metsu e khubelu), a etsa letlooeng la dingata tsa peō.(D) Ho thehoa ha marang-rang a mangata a peō ea botona.
Ha lerotholi la peō e hlapolotsoeng le kenngoa ka har'a sesebelisoa sa microfluidic 'me ho etsoa phallo, ho ile ha hlokomeloa hore peō ea peō e tsamaea khahlanong le tsela ea ho phalla.Li-bundle li lumellana hantle le marako a li-microchannels, 'me lihlooho tse sa lefelloeng karolong ea pele ea li-bundle li lumellana hantle le tsona (video 5).Li boetse li khomarela likaroloana leha e le life tse emeng tseleng ea tsona, joalo ka maloanlahla, ho hanela ho hoholoa ke metsi.Ha nako e ntse e ea, likhoele tsena li fetoha likhoele tse telele tse tšoasang peō ea botona e le 'ngoe le li-tufts tse khutšoane (Video 6).Ha phallo e qala ho fokotseha, mela e melelele ea peō ea botona e qala ho theha marang-rang a mela ea peō (Video 7; Setšoantšo sa 2).
Ka lebelo la phallo e phahameng (V > 33 µm/s), metsamao ea spiral ea likhoele e ea eketseha e le boiteko ba ho ts'oara peō e 'ngoe e etsang dingata hamolemo ho hanela matla a hoholeha a phallo. Ka lebelo la phallo e phahameng (V > 33 µm/s), metsamao ea spiral ea likhoele e ea eketseha e le boiteko ba ho ts'oara peō e 'ngoe e etsang dingata hamolemo ho hanela matla a hoholeha a phallo. При высокой скорости потока (V > 33 мкм/с) спиралевидные движения нитей усиливаются, оскольку они пытаются поймать множествоы оздостиный х пучки, которые лучше противостоят дрейфующей силе потока. Ka litekanyetso tse phahameng tsa phallo (V> 33 µm/s), metsamao ea helical ea likhoele ea eketseha ha e ntse e leka ho ts'oara li-spermatozoa tse ngata tse etsang dingata tse khonang ho hanela matla a ho hoholeha a phallo.在高流速(V > 33 µm/s) 时，螺纹的螺旋运动增加，以试图捕捉许多形成束的单个旋精子，漂移力.在 高 流速 (v> 33 µm/s) 时， 的 螺旋 运动 增加, 以漂移力。。。。。. При высоких скоростях потока (V > 33 мкм/с) При высоких скоростях потока чтобы лучше сопротивляться силам дрейфа потока. Ka litekanyetso tse phahameng tsa phallo (V> 33 µm/s), motsamao oa helical oa likhoele oa eketseha molemong oa ho hapa spermatozoa tse ngata tse etsang dingata ho hanyetsa hamolemo matla a ho hoholeha a phallo.Ba ile ba boela ba leka ho hokela li-microchannel maboteng.
Liphutheloana tsa peō li ile tsa khetholloa e le lihlopha tsa lihlooho tsa peō ea botona le mehatla e kobehileng e sebelisang maekrosekopo e khanyang (LM).Liphutheloana tsa peō tse nang le lihlopha tse fapa-fapaneng li boetse li khetholloa e le lihlooho tse sothehileng le li-flaggellar aggregates, mehatla e mengata e kopantsoeng ea peō, lihlooho tsa peō tse khomaretsoeng mohatleng, le lihlooho tsa peo tse nang le nuclei e kobehileng e le li-nuclei tse ngata tse kopantsoeng.phetiso ea electron microscopy (TEM).Scanning electron microscopy (SEM) e bontšitse hore dingata tsa peō ea botona e ne e le lihlopha tse koaletsoeng tsa lihlooho tsa peō 'me li-aggregate tsa peō li bontša marang-rang a khomaretsoeng a mehatla e phuthetsoeng.
The morphology le ultrastructure ea spermatozoa, ho thehoa ha dingata tsa spermatozoa li ile tsa ithutoa ho sebelisoa microscopy e khanyang (halofo ea karolo), scanning electron microscopy (SEM) le transmission electron microscopy (TEM), smear ea peō e ne e silafalitsoe ka lamunu ea acridine 'me ea hlahlojoa ho sebelisoa epifluorescence microscopy.
Sperm smear staining le acridine lamunu (sa feiga. 3B) o ile a bontša hore peō ea lihlooho li ne li khomaretsoe hammoho le koahetsoeng ka lintho tse bonahalang secretory, e leng se ile sa etsa hore ho thehoe tufts khōlō (sa feiga. 3D).Lingata tsa peō ea botona li ne li e-na le li-aggregate tsa peō tse nang le marang-rang a mehatla e khomaretsoeng (Setšoantšo sa 4A-C).Li-bundle tsa peō li entsoe ka mehatla ea li-spermatozoa tse ngata tse khomaretsoeng (setšoantšo sa 4D).Liphiri (setšoantšo sa 4E, F) se koahetse lihlooho tsa likotla tsa spermatozoa.
Ho thehoa ha spermatozoa bundle Ho sebelisa phapano ea microscopy le smear ea peō e nang le acridine orange, e bontšitse hore lihlooho tsa spermatozoa li khomarelana.(A) Ho bōptjoa ha peō ea pele ea peō ho qala ka peō ea botona (selika-likoe se tšoeu) le peō e meraro (selika-likoe se mosehla), ’me selika-likoe se qala mohatleng ho ea fihla hloohong.(B) Photomicrograph ea sperm smear e nang le acridine orange e bontšang lihlooho tse khomarelang tsa peō (metsu).Ho tsoa ho koahela hlooho (li)hlooho.Ho hōlisa × 1000. (C) Ntšetso-pele ea sefate se seholo se tsamaisoang ka ho phalla ka mocha oa microfluidic (ho sebelisa k'hamera e phahameng ka lebelo la 950 fps).(D) Micrograph ea smear ea peō e silafalitsoeng ka lamunu ea acridine e bonts'ang metsu e meholo (metsu).Katoloso: ×200.
Ho hlahloba micrograph ea electron ea beam ea peō le smear ea peō e nang le acridine orange.(A, B, D, E) ke li-electron micrographs tsa elektronike tse hlahlobang mebala ea spermatozoa, 'me C le F ke li-micrograph tsa li-smears tsa acridine orange tse nang le matheba tse bontšang ho khomarela ha spermatozoa e mengata e koahelang tepo ea caudal.(AC) Li-sperm aggregates li bontšoa e le marang-rang a mehatla e khomaretsoeng (metsu).(D) Ho khomarela ha spermatozoa tse 'maloa (ka ntho e khomarelang, kemiso e pinki, motsu) e pota-potileng mohatla.(E le F) Li-aggregate tsa hlooho ea peō (litsupa) tse koahetsoeng ka lintho tse khomarelang (litsupa).Peō ea spermatozoa e ile ea theha mekotla e nang le mekhoa e mengata e kang ea vortex (F).(C) × 400 le (F) × 200 magnifications.
Ho sebelisa phetiso elektrone microscopy, re ile ra fumana hore dingata peō e ne e khomaretse mehatla (sa feiga. 6A, C), lihlooho khomaretse mehatla (sa feiga. 6B), kapa lihlooho khomaretse mehatla (sa feiga. 6D).Lihlooho tsa spermatozoa ka har'a ngata li kobehile, li hlahisa karolong ea libaka tse peli tsa nyutlelie (Setšoantšo sa 6D).Ka har'a bongata ba sekoahelo, spermatozoa e ne e e-na le hlooho e sothehileng e nang le libaka tse peli tsa nyutlelie le libaka tse ngata tsa flagella (Fig. 5A).
Digital color electron micrograph e bonts'ang mehatla e hokelang ka har'a sephutheloana sa peō ea botona le thepa e kopanyang e kopanyang lihlooho tsa peō.(A) Mohatla o khomaretsoeng oa palo e kholo ea spermatozoa.Ela hloko kamoo mohatla o shebahalang kateng setšoantšong (motsu) le sebopeho sa naha (motsu).(B) Hlooho (motsu) oa peō e hokahane le mohatla (motsu).(C) Ho hoketsoe mehatla e mengata ea peō ea botona (metsu).(D) Thepa ea agglutination (AS, blue) e kopanya lihlooho tse 'nè tsa peō ea botona (pherese).
Ho hlahlobisisa microscope ea elektronike e ne e sebelisetsoa ho lemoha lihlooho tsa peō ka har'a mekotla ea peō e koahetsoeng ka li-secretions kapa lera (Figure 6B), e leng se bontšang hore liphutheloana tsa peō li ne li khomaretsoe ke lisebelisoa tsa extracellular.Thepa ea agglutinated e ne e tsepamisitsoe hloohong ea peō ea botona (sehlooho se kang hlooho ea jellyfish; Setšoantšo sa 5B) 'me sa atolosoa ka thōko, se fana ka ponahalo e khanyang e mosehla tlas'a microscopy ea fluorescence ha e silafalitsoe ka acridine orange (Fig. 6C).Ntho ena e bonahala ka ho hlaka ka tlas'a microscope ea ho hlahloba 'me e nkoa e le tlamahano.Semi-thin likarolo (sa feiga. 5C) le peō ea botona smears silafalitsoeng ka acridine orange ile a bontša dingata peō e nang le densely pakiloeng lihlooho le curled mehatla (sa feiga. 5D).
Lifotomicrograph tse fapaneng tse bonts'ang ho bokellana ha lihlooho tsa peō ea botona le mehatla e menahaneng ka mekhoa e fapaneng.A(B) Digital color scanning electron micrograph e bontšang sehlopha sa lihlooho tsa peō tse kang jellyfish (metsu) tse bonahalang li koahetsoe.(C) Karolo e tšesaane e bonts'ang lihlooho tsa peo e kopaneng (metsu) le mehatla e kobehileng (metsu).(D) Micrograph ea smear ea peō e silafalitsoeng ka lamunu ea acridine e bontšang lihlopha tsa lihlooho tsa peō (metsu) le mehatla e khomarelang e kobehileng (metsu).Hlokomela hore ntho e khomarelang (S) e koahela hlooho ea spermatozoon.(D) × 1000 kgolo.
Ho sebelisa phetiso elektrone microscopy (sa feiga. 7A), ho ile ha boela ha hlokomeloa hore lihlooho tsa peō ea botona li ne li sothehile 'me nuclei e na le sebopeho sa spiral, joalokaha ho netefalitsoe ke li-sperm smears tse silafalitsoeng ka acridine orange' me li hlahlojoa ka ho sebelisa microscopy ea fluorescence (setšoantšo sa 7B).
(A) Digital colour transmission electron micrograph and (B) Acridine orange stained smear smear e bontšang lihlooho tse koahetseng le ho khomarela lihlooho tsa peō ea botona le mehatla (metsu).(B) × 1000 ho hōlisa.
Taba e khahlang ke hore peo ea Sharkazi ea peō ea botona e kopana ho etsa mekoloko ea likhoele.Thepa ea mekotla ena e re lumella ho utloisisa karolo ea bona e ka bang teng ho monyeng le ho boloka spermatozoa ho SST.
Ka mor'a ho nyalana, peō ea botona e kena ka botšehaling 'me e etsa khetho e matla, e leng se etsang hore ho be le palo e lekanyelitsoeng ea peō e kenang SST15,16.Ho fihlela joale, mekhoa eo peō ea botona e kenang le ho tsoa ka eona ho SST ha e tsejoe hantle.Ka likhoho, spermatozoa e bolokiloe ho SST nako e telele ea libeke tse 2 ho isa ho tse 10, ho itšetlehile ka mefuta ea6.Khang e ntse e le mabapi le boemo ba peō nakong ea polokelo ho SST.Na li ntse li tsamaea kapa li phomotse?Ka mantsoe a mang, lisele tsa peō li boloka boemo ba tsona joang ho SST nako e telele hakaale?
Forman4 e khothalelitse hore bolulo ba SST le ejection li ka hlalosoa ho latela mokhoa oa ho tsamaea ha peō.Bangoli ba nahana hore peō ea botona e boloka boemo ba bona ka ho sesa khahlanong le phallo ea mokelikeli e entsoeng ke SST epithelium le hore peō e ntšoa ho SST ha lebelo la bona le oela ka tlase ho ntlha eo ba qalang ho khutlela morao ka lebaka la ho hloka matla.Zaniboni5 e netefalitse boteng ba li-aquaporins 2, 3, le 9 karolong ea apical ea lisele tsa epithelial tsa SST, tse ka tšehetsang ka mokhoa o sa tobang mohlala oa polokelo ea peō ea Foreman.Phuputsong ea morao-rao, re fumane hore hoo e ka bang halofo ea spermatozoa ea Sharkashi e bontša rheology e ntle ka mokelikeli o phallang, le hore mekotla ea peō ea agglutinated e eketsa palo ea spermatozoa e bontšang rheology e ntle, le hoja agglutination e liehisa.Hore na lisele tsa peō li tsamaea joang ka mothapo oa fallopian oa nonyana ho ea moo e emollang teng ha ho utloisisoe ka botlalo.Liphoofolo tse anyesang, follicular fluid chemo e hohela spermatozoa.Leha ho le joalo, li-chemoattractants li lumeloa hore li tsamaisa spermatozoa ho atamela libaka tse telele7.Ka hona, mekhoa e meng e ikarabella bakeng sa ho tsamaisa peō ea botona.Bokhoni ba peō ea botona ho ikamahanya le ho phalla khahlanong le mokelikeli oa fallopian tube o lokolloa ka mor'a ho kopana ho tlalehoa e le lebaka le leholo la ho lebisa peō ho litoeba.Parker 17 o ile a etsa tlhahiso ea hore spermatozoa e tšele matsoele a mahe ka ho sesa khahlano le maqhubu a nonyana le lihahabi.Le hoja e so ka e bontšoa linonyana ka liteko, Adolphi18 e bile eena oa pele oa ho fumana hore peō ea linonyana e fana ka liphello tse ntle ha mokelikeli o mosesaane o pakeng tsa sekoahelo le slide o etsoa ka pampiri ea sefa.Rheology.Hino le Yanagimachi [19] ba kentse motsoako oa toeba oa ovary-tubal-uterine ka har'a selikalikoe sa perfusion 'me ba enta 1 µl ea enke ka har'a isthmus ho bona ho phalla ha mokelikeli ka har'a methapo ea fallopian.Ba ile ba hlokomela motsamao o matla haholo oa ho honyela le ho khatholoha mothapong oa fallopian, moo libolo tsohle tsa enke li neng li ntse li tsamaea butle-butle ho ea ho ampulla ea fallopian tube.Bangoli ba hatisa bohlokoa ba ho phalla ha tubal fluid ho tloha ka tlaase ho ea ka holimo ho li- fallopian tubes bakeng sa ho phahamisa peō le ho emola.Brillard20 e tlalehile hore likhoho le li-turkeys, spermatozoa e falla ka ho sisinyeha ka mafolofolo ho tloha monyako oa botšehali, moo li bolokiloeng teng, ho ea mateanong a utero-vaginal, moo li bolokiloeng teng.Leha ho le joalo, mokhatlo ona ha o hlokehe pakeng tsa motsoako oa uterovaginal le infundibulum hobane spermatozoa e tsamaisoa ke ho falla ho sa tloaelehang.Ho tseba litlhahiso tsena tse fetileng le liphello tse fumanoeng thutong ea morao-rao, ho ka nkoa hore bokhoni ba spermatozoa ho nyolohela holimo (rheology) ke e 'ngoe ea thepa eo mokhoa oa ho khetha o thehiloeng ho eona.Sena se etsa qeto ea ho feta ha spermatozoa ka botšehali le ho kena ha bona ho CCT bakeng sa polokelo.Joalokaha Forman4 e khothalelitse, sena se ka boela sa bebofatsa tšebetso ea peō ea botona ho kena ho SST le sebaka sa eona sa bolulo ka nako e itseng ebe e tsoa ha lebelo la tsona le qala ho theoha.
Ka lehlakoreng le leng, Matsuzaki le Sasanami 21 ba ile ba etsa tlhahiso ea hore spermatozoa ea avian e be le liphetoho tsa motility ho tloha dormancy ho ea ho motility lipampitšaneng tsa banna le basali.Thibelo ea "sperm motility" ea baahi ho SST e 'nile ea etsoa tlhahiso ea ho hlalosa nako e telele ea polokelo ea peō ebe e tsosolosoa ka mor'a hore e tlohe SST.Tlas'a maemo a hypoxic, Matuzaki et al.1 e tlalehile tlhahiso e phahameng le ho lokolloa ha lactate ho SST, e leng se ka lebisang ho thibela ho tsamaea ha peō ea botona.Tabeng ena, bohlokoa ba rheology ea peō bo bonahala ka khetho le ho kenngoa ha spermatozoa, eseng ka polokelo ea bona.
Mokhoa oa ho kopanya peō o nkoa e le tlhaloso e utloahalang bakeng sa nako e telele ea polokelo ea peō ho SST, kaha ona ke mokhoa o tloaelehileng oa ho boloka peō ho likhoho2,22,23.Bakst et al.2 e hlokometse hore boholo ba spermatozoa bo khomarelana, bo etsa li-aggregates tsa fascicular, 'me spermatozoa e le' ngoe e ne e fumanoa seoelo ho likoekoe tsa CCM.Ka lehlakoreng le leng, Wen et al.24 e hlokometse spermatozoa e hasaneng haholoanyane le li-tufts tse fokolang tsa spermatozoa ho SST lumen ho likhoho.Ho latela maikutlo ana, ho ka nahanoa hore tšekamelo ea ho kopanya peō ea botona e fapane pakeng tsa linonyana le pakeng tsa spermatozoa ka ejaculate e tšoanang.Ho phaella moo, Van Krey et al.9 e khothalelitse hore karohano e sa reroang ea spermatozoa e kopaneng ke eona e ikarabellang bakeng sa ho kenella butle-butle ha spermatozoa ho lumen ea fallopian tube.Ho ea ka khopolo-taba ena, spermatozoa e nang le matla a tlaase a agglutination e lokela ho lelekoa ho SST pele.Tabeng ena, bokhoni ba spermatozoa ho agglutinate e ka 'na ea e-ba lebaka le susumetsang sephetho sa tlhōlisano ea peō ho linonyana tse litšila.Ho phaella moo, ha peō e kopantsoeng ka nako e telele e ikarola, ho ba le nako e telele ea ho ba le bana.
Le hoja spermatozoa aggregation le aggregation ka dingata li 'nile tsa hlokomeloa lithutong tse' maloa2,22,24, ha li e-s'o hlalosoe ka ho qaqileng ka lebaka la ho rarahana ha pono ea bona ea kinematic ka har'a SST.Ho entsoe liteko tse 'maloa tsa ho ithuta sperm agglutination in vitro.Ho bokellana ho hoholo empa ha nakoana ho ile ha hlokomeloa ha terata e tšesaane e ntšoa lerotholing le leketlang la peo.Sena se lebisa tabeng ea hore bubble e telele e hlaha ho tloha lerotholi, e etsisa seminal gland.Ka lebaka la mefokolo ea 3D le linako tse khutšoane tsa ho omisa ka marotholi, boloko bohle bo ile ba oela kapele9.Thutong ea morao-rao, re sebelisa likhoho tsa Sharkashi le li-chips tsa microfluidic, re khonne ho hlalosa hore na li-tufts tsena li theha joang le hore na li tsamaea joang.Li-bundle tsa peō li ile tsa thehoa hang ka mor'a ho bokella peō 'me li fumanoe li tsamaea ka har'a spiral, li bontša rheology e ntle ha e le teng ho phalla.Ho feta moo, ha ho shejoa ka macroscopically, li-bundle tsa peō li 'nile tsa hlokomeloa ho eketsa moeli oa motility ha o bapisoa le spermatozoa e ka thōko.Sena se fana ka maikutlo a hore ho kopana ha peō ea botona ho ka 'na ha etsahala pele ho kenella ha SST le hore tlhahiso ea peō ha e felle sebakeng se senyenyane ka lebaka la khatello ea kelello joalokaha ho boletsoe pele (Tingari le Lake12).Nakong ea ho etsa li-tuft, spermatozoa e sesa ka synchrony ho fihlela e theha mateano, ebe mehatla ea eona e pota-potile 'me hlooho ea spermatozoon e lula e lokolohile, empa mohatla le karolo e ka thōko ea spermatozoon e khomarelana le ntho e khomarelang.Ka hona, hlooho e sa lefelloeng ea ligament e ikarabella bakeng sa ho sisinyeha, ho hula karolo e setseng ea ligament.Ho hlahlobisisa electron microscopy ea dingata tsa peō ea botona ho bontšitse lihlooho tse khomaretsoeng tsa peō tse koahetsoeng ka lintho tse ngata tse khomarelang, ho fana ka maikutlo a hore lihlooho tsa peō li ne li khomaretsoe ka mekotla ea ho phomola, e ka 'nang eaba e etsahetse ka mor'a ho fihla sebakeng sa polokelo (SST).
Ha smear ea peō e silafatsoa ka lamunu ea acridine, lisebelisoa tsa sekhomaretsi tsa extracellular tse potolohileng lisele tsa peō li ka bonoa ka tlas'a microscope ea fluorescent.Ntho ena e lumella liphutheloana tsa peō ea botona ho khomarela le ho khomarela bokaholimo bofe kapa bofe bo potolohileng kapa likaroloana e le hore li se ke tsa hoholeha le phallo e potolohileng.Ka hona, litebello tsa rona li bonts'a karolo ea ho khomarela spermatozoa ka mokhoa oa li-bundle tsa mobile.Bokhoni ba bona ba ho sesa khahlanong le hona joale le ho khomarela libaka tse haufi le bona ho lumella peō ea botona ho lula nako e telele ho SST.
Rothschild25 e sebelisitse kh'amera ea hemocytometry ho ithuta kabo e phaphametseng ea peō ea likhomo ka lerotholing la ho emisoa, ho nka li-photomicrographs ka khamera e nang le li-axis tse optical tse otlolohileng le tse rapameng tsa microscope.Liphello li bontšitse hore spermatozoa e ne e khahloa ke bokaholimo ba kamore.Bangoli ba fana ka maikutlo a hore ho ka 'na ha e-ba le likamano tsa hydrodynamic pakeng tsa peō le bokaholimo.Ha re nahana ka sena, hammoho le bokhoni ba peo ea litsuonyana tsa Sharkashi ho etsa lithupa tse khomarelang, ho ka eketsa monyetla oa hore peō ea botona e khomarele lebota la SST le ho bolokoa nako e telele.
Bccetti le Afzeliu26 li tlalehile hore peō ea glycocalyx ea hlokahala bakeng sa ho lemoha le ho kopanya ha gamete.Forman10 e hlokometse hore hydrolysis ea li-bond tsa α-glycosidic liphatleng tsa glycoprotein-glycolipid ka ho phekola peō ea linonyana ka neuraminidase e ile ea fella ka ho fokotseha ha tsoalo ntle le ho ama peō ea botona.Bangoli ba fana ka maikutlo a hore phello ea neuraminidase holim'a glycocalyx e sitisa peō ea peō ea peō mateanong a utero-vaginal, kahoo e fokotsa kemolo.Maikutlo a bona a ke ke a hlokomoloha monyetla oa hore phekolo ea neuraminidase e ka fokotsa peō ea botona le temoho ea oocyte.Forman le Engel10 ba fumane hore thari e fokotsehile ha dikgoho di kenngwa ka hara matshehadi ka peo e phekolwang ka neuraminidase.Leha ho le joalo, IVF e nang le peō e phekoloang ea neuraminidase ha ea ka ea ama tsoalo ha e bapisoa le likhoho tsa taolo.Bangoli ba ile ba etsa qeto ea hore liphetoho tse entsoeng ka glycoprotein-glycolipid coating ho pota-pota lera la peō li fokolitse bokhoni ba peō ea botona ho nontša ka ho senya ho kheloha ha peō ea peō ea utero-vaginal junction, e leng se ileng sa eketsa tahlehelo ea peo ka lebaka la lebelo la popelo ea botšehali, empa ha e ame peō le ho lemoha lehe.
Ka har'a turkeys Bakst le Bauchan 11 ba fumane li-vesicles tse nyane le likhechana tsa lera ka har'a lumen ea SST mme ba hlokomela hore tse ling tsa li-granules tsena li kopantsoe le lera la peō.Bangoli ba fana ka maikutlo a hore likamano tsena li ka kenya letsoho ho boloka nako e telele ea spermatozoa ho SST.Leha ho le joalo, bafuputsi ha baa ka ba hlakisa mohloli oa likaroloana tsena, ebang li patoa ke lisele tsa CCT tsa epithelial, tse hlahisoang le ho patoa ke mokhoa oa ho ikatisa oa banna, kapa o hlahisoa ke peō ka boeona.Hape, likaroloana tsena li ikarabella bakeng sa agglutination.Grützner et al27 ba tlalehile hore lisele tsa epididymal epithelial li hlahisa le ho hlahisa protheine e itseng e hlokahalang bakeng sa ho thehoa ha lipampitšana tsa pore e le 'ngoe.Bangoli ba boetse ba tlaleha hore ho hasana ha mekotla ena ho itšetlehile ka ho sebelisana ha liprotheine tsa epididymal.Nixon et al28 ba fumane hore adnexa e hlahisa protheine, e leng acidic cysteine-rich osteonectin;SPARC e kenya letsoho ho thehoeng ha sperm tufts ka echidnas e melomo e mekgutshwane le platypus.Ho hasana ha maballo ana ho amahanngoa le tahlehelo ea protheine ena.
Phuputsong ea morao-rao, tlhahlobo ea ultrastructural e sebelisang microscopy ea elektronike e bontšitse hore spermatozoa e khomarela bongata bo bongata ba lintho tse teteaneng.Lintho tsena ho nahanoa hore ke tsona tse ikarabellang bakeng sa agglutination e kopanyang pakeng tsa lihlooho tse khomarelang le ho pota-pota, empa libakeng tse tlaase sebakeng sa mohatla.Re nka hore ntho ena e kopanyang e tsoa tsamaisong ea botona ea botona (epididymis kapa vas deferens) hammoho le peo ea botona, kaha hangata re bona peō e arohana le lymph le seminal plasma nakong ea ho tsoa.Ho tlalehiloe hore ha li-avian spermatozoa li feta har'a epididymis le vas deferens, li ba le liphetoho tse amanang le ho hōla tse tšehetsang bokhoni ba tsona ba ho tlama liprotheine le ho fumana plasma lemma-associated glycoprotein.Ho phehella ha liprotheine tsena ho li-membrane tsa peō e lulang ho SST ho fana ka maikutlo a hore liprotheine tsena li ka 'na tsa susumetsa ho fumanoa ha sperm membrane botsitso 30 le ho tseba hore na ba tsoala joang 31.Ahammad et al32 ba tlalehile hore spermatozoa e fumanoeng likarolong tse sa tšoaneng tsa tsamaiso ea ho ikatisa e motona (ho tloha ho testes ho ea distal vas deferens) e bontšitse keketseho e tsoelang pele ea ho phela tlas'a maemo a polokelo ea mokelikeli, ho sa tsotellehe mocheso oa polokelo, le ts'ebetso ea likhoho e boetse e eketseha ka har'a methapo ea fallopian ka mor'a ho kenngoa ha maiketsetso.
Li-tufts tsa peo ea khoho ea Sharkashi li na le litšobotsi le mesebetsi e fapaneng ho feta mefuta e meng e kang echidnas, platypus, litoeba tsa lehong, likhoto tsa likhama le likolobe.Likhoho tsa sharkasi, ho thehoa ha mekotla ea spermatozoa ho ile ha fokotsa lebelo la ho sesa ha ho bapisoa le spermatozoa e le 'ngoe.Leha ho le joalo, liphutheloana tsena li ekelitse peresente ea rheologically positive spermatozoa le ho eketsa bokhoni ba spermatozoa ho tsitsisa tikolohong e matla.Ka hona, liphetho tsa rona li tiisa tlhahiso e fetileng ea hore peō ea agglutination ho SST e amahanngoa le polokelo ea nako e telele ea peō.Re boetse re hakanya hore tšekamelo ea peō ea ho etsa li-tuft e ka laola sekhahla sa tahlehelo ea peō ho SST, e ka fetolang sephetho sa tlhōlisano ea peō.Ho ea ka khopolo ena, spermatozoa e nang le matla a tlaase a agglutination e lokolla SST pele, ha spermatozoa e nang le matla a phahameng a agglutination e hlahisa boholo ba bana.Ho thehoa ha likoti tsa peō ea pore e le 'ngoe ho molemo ebile ho ama karo-karolelano ea motsoali le ngoana, empa ho sebelisa mokhoa o fapaneng.Li-echidnas le li-platypus, li-spermatozoa li hlophisitsoe ka tsela e tšoanang ho eketsa lebelo la pele la sefate.Lingata tsa li-echidna li tsamaea ka potlako ka makhetlo a mararo ho feta spermatozoa e le 'ngoe.Ho lumeloa hore ho bōptjoa ha mahlaku a joalo a peō ka har'a echidnas ke phetoho ea ho iphetola ha lintho e le hore motho a lule a e-na le matla a ho laola, kaha basali ha ba na boitšoaro 'me hangata ba kopanela liphate le banna ba 'maloa.Ka hona, li-spermatozoa tse tsoang li-ejaculate tse fapaneng li hlōlisana ka matla bakeng sa ho nonosoa ha lehe.
Agglutinated spermatozoa ea likhoho tsa sharkasi ho bonolo ho e bona ka mahlo a kelello ho sebelisa phapano ea microscopy, e nkoang e le molemo hobane e lumella ho ithuta habonolo ka boitšoaro ba spermatozoa in vitro.Mokhoa oo ka oona ho thehoa ha peō ea peō ho khothalletsang ho ikatisa ho likhoho tsa sharkasi le oona o fapane le o bonoang liphoofolong tse ling tse anyesang tsa placenta tse emelang boitšoaro ba peō ea tšebelisano-'moho joalo ka litoeba tsa lehong, moo peō e 'ngoe e fihlang maheng, e thusang batho ba bang ba amanang le bona ho fihla le ho senya mahe a bona.ho ipaka.boitsoaro ba ho hloka boithati.Ho iketsetsa manyolo 34. Mohlala o mong oa boitšoaro ba tšebelisano-'moho ho spermatozoa o ile oa fumanoa ho litoeba tsa likhama, moo spermatozoa e neng e khona ho khetholla le ho kopana le liphatsa tsa lefutso tse amanang le liphatsa tsa lefutso le ho theha lihlopha tsa tšebelisano-'moho ho eketsa lebelo la tsona ha li bapisoa le spermatozoa35 e sa amaneng.
Liphello tse fumanoeng thutong ena ha li hanyetsane le khopolo ea Foman ea ho boloka nako e telele ea spermatozoa ho SWS.Bafuputsi ba tlaleha hore lisele tsa peō li tsoela pele ho tsamaea ka phallo ea lisele tsa epithelial tse koahelang SST ka nako e telele, 'me ka mor'a nako e itseng, polokelo ea matla ea lisele tsa peō ea botona e fokotseha, e leng se fellang ka ho fokotseha ha lebelo, e leng se lumellang ho lelekoa ha lintho tse nyenyane tsa boima ba limolek'hule.matla a spermatozoa ka phallo ea mokelikeli ho tloha lumen ea SST Mokokotlo oa fallopian tube.Phuputsong ea morao-rao, re hlokometse hore halofo ea peō e le 'ngoe e bontšitse bokhoni ba ho sesa khahlanong le maro a phallang,' me ho khomarela ha bona ka har'a bongata ho eketsa bokhoni ba bona ba ho bontša rheology e ntle.Ho feta moo, lintlha tsa rona li lumellana le tsa Matsuzaki et al.1 ea tlalehileng hore secretion e eketsehileng ea lactate ho SST e ka thibela ho tsamaea ha peō ea monna.Leha ho le joalo, liphetho tsa rona li hlalosa ho thehoa ha li-sperm motile ligaments le boitšoaro ba bona ba rheological ka pel'a tikoloho e matla ka har'a microchannel ho leka ho hlakisa boitšoaro ba bona ho SST.Lipatlisiso tsa nakong e tlang li ka 'na tsa shebana le ho fumana hore na motsoako oa lik'hemik'hale ke ofe le tšimoloho ea agglutinating agent, eo ntle ho pelaelo e tla thusa bafuputsi ho hlahisa mekhoa e mecha ea ho boloka peō ea metsi le ho eketsa nako ea ho ba le bana.
Sharkasi e motona ea lilemo li leshome le metso e mehlano ea libeke tse 30 e se nang molala (homozygous dominant; Na Na) e khethiloe e le bafani ba peō thutong.Linonyana tsena li ne li hōlisetsoa Polasing ea Likhoho ea Lipatlisiso ea Lefapha la Temo, Univesithi ea Ashit, ’Musong oa Ashit, Egepeta.Linonyana li ne li kenngoa ka har'a masaka ka bomong (30 x 40 x 40 cm), li tlas'a lenaneo la leseli (lihora tse 16 tsa leseli le lihora tse 8 tsa lefifi) 'me li fepa lijo tse nang le 160 g ea protheine e tala, 2800 kcal ea matla a metabolizable, 35 g ea khalsiamo ka' ngoe.5 dikgerama tsa phosphorus e fumanehang ka kilogram ea lijo.
Ho latela data 36, ​​37, peo ea botona e bokelloa ho banna ka ho silila ka mpeng.Kakaretso ea lisampole tsa peo ea 45 li ile tsa bokelloa ho banna ba 15 ka matsatsi a 3.Semen (n = 15 / letsatsi) hang-hang e ile ea hlapolloa 1: 1 (v: v) le Belsville Poultry Semen Diluent, e nang le potassium diphosphate (1.27 g), monosodium glutamate monohydrate (0.867 g), fructose (0.5 d) anhydrous sodium.acetate (0.43 g), tris(hydroxymethyl)aminomethane (0.195 g), potassium citrate monohydrate (0.064 g), potassium monophosphate (0.065 g), magnesium chloride (0.034 g) le H2O (100 ml), pH = 7, 5, osmolarity 3/33 m33 m33 m.Mehlala ea peō e hlapolotsoeng e ile ea hlahlobjoa pele ka microscope e bobebe ho netefatsa boleng bo botle ba peō (mongobo) ebe e bolokoa ka bateng ea metsi ka 37°C ho fihlela e sebelisoa nakong ea halofo ea hora ka mor'a ho bokelloa.
Li-kinematics le rheology ea spermatozoa li hlalosoa ho sebelisoa tsamaiso ea lisebelisoa tsa microfluidic.Mehlala ea peō e ile ea boela ea hlapolloa ho ea ho 1:40 Beltsville Avian Semen Diluent, e kentsoeng ka har'a sesebelisoa sa microfluidic (sheba ka tlase), 'me li-parameter tsa kinetic li ile tsa khethoa ho sebelisoa mokhoa oa Computerized Semen Analysis (CASA) o neng o ntlafalitsoe pele bakeng sa sebopeho sa microfluidics.mabapi le ho tsamaea ha spermatozoa mecheng ea litaba tsa metsi (Lefapha la Mechanical Engineering, Faculty of Engineering, Univesithi ea Assiut, Egepeta).Plugin e ka khoasolloa ho: http://www.assiutmicrofluidics.com/research/casa39.Curve velocity (VCL, μm/s), linear velocity (VSL, μm/s) le karolelano ea lebelo la trajectory (VAP, μm/s) li ne li lekantsoe.Lifitio tsa spermatozoa li nkuoe ho sebelisoa maekorosekoupo ea phapano ea karolo ea Optika XDS-3 (e nang le sepheo sa 40x) e hoketsoeng khamera ea Tucson ISH1000 ka lebelo la 30 fps bakeng sa metsotsoana e 3.Sebelisa software ea CASA ho ithuta bonyane libaka tse tharo le li-trajectories tsa sperm tse 500 ka mohlala.Video e rekotiloeng e ile ea sebetsoa ho sebelisoa CASA e entsoeng hae.Tlhaloso ea motility ho plug-in ea CASA e itšetlehile ka lebelo la ho sesa la peō ha e bapisoa le lebelo la ho phalla, 'me ha e kenyelle likarolo tse ling tse kang ho tsamaea ka lehlakoreng le leng, kaha sena se fumanoe se tšepahala haholoanyane ho phalla ha mokelikeli.Ho sisinyeha ha ramatiki ho hlalosoa e le motsamao oa lisele tsa peō khahlano le tsela ea phallo ea mokelikeli.Spermatozoa e nang le thepa ea rheological e arotsoe ka palo ea spermatozoa ea motile;spermatozoa tse neng li phomotse 'me li tsamaisana le spermatozoa li ne li qheletsoe ka thoko ho palo.
Lik'hemik'hale tsohle tse sebelisitsoeng li fumanoe Elgomhoria Pharmaceuticals (Cairo, Egypt) ntle le ha ho boletsoe ka tsela e 'ngoe.Sesebelisoa se entsoe joalo ka ha se hlalositsoe ke El-sherry et al.40 ka liphetoho tse ling.Lisebelisoa tse sebelisetsoang ho etsa li-microchannels li ne li kenyelletsa lipoleiti tsa khalase (Howard Glass, Worcester, MA), SU-8-25 negative resist (MicroChem, Newton, CA), diacetone alcohol (Sigma Aldrich, Steinheim, Jeremane), le polyacetone.-184, Dow Corning, Midland, Michigan).Li-microchannel li entsoe ka mokhoa o bonolo oa lithography.Ntlha ea pele, mask a sefahleho se sireletsang sefahleho se nang le moralo o lakatsehang oa microchannel se ile sa hatisoa mochine oa khatiso o phahameng (Prismatic, Cairo, Egypt le Pacific Arts le Design, Markham, ON).Li-masters li entsoe ka lipoleiti tsa khalase e le li-substrates.Lipoleiti li ne li hloekisoa ka acetone, isopropanol le metsi a deionized ebe li koahetsoe ka 20 µm layer ea SU8-25 ka spin coating (3000 rpm, 1 min).Likarolo tsa SU-8 li ile tsa omisoa ka bonolo (65 ° C, 2 min le 95 ° C, 10 min) 'me tsa pepesetsoa mahlaseli a UV bakeng sa 50 s.Ka mor'a ho pepeseha ho chesa ka 65 ° C le 95 ° C bakeng sa 1 min le 4 min ho crosslink pepenene SU-8 layers, e lateloa ke nts'etsopele ea tai ea diacetone bakeng sa 6.5 min.Bake li-waffles ka thata (200 ° C bakeng sa 15 min) ho tsoela pele ho tiisa lera la SU-8.
PDMS e ile ea lokisoa ka ho kopanya monoma le hardener ka karo-karolelano ea boima ba 10: 1, ebe e tlosoa ka har'a vacuum desiccator ebe e tšeloa holim'a foreimi e kholo ea SU-8.PDMS e ne e phekoloa ka ontong (120 ° C, 30 min), joale liteishene li khaoloa, li arotsoe ho monghali, 'me li phunyeletsoa ho lumella li-tubes hore li kenngoe sebakeng sa ho kena le ho tsoa ha microchannel.Qetellong, li-microchannel tsa PDMS li ile tsa hokelloa ka ho sa feleng ho li-slide tsa microscope ho sebelisoa processor ea corona e nkehang (Lihlahisoa tsa Electro-Technic, Chicago, IL) joalo ka ha ho hlalositsoe libakeng tse ling.Microchannel e sebelisitsoeng thutong ena e lekanya 200 µm × 20 µm (W × H) mme e bolelele ba 3.6 cm.
Phallo ea mokelikeli e bakoang ke khatello ea hydrostatic ka hare ho microchannel e finyelloa ka ho boloka boemo ba mokelikeli ka har'a letamo la ho kena ka holim'a phapang ea bophahamo Δh39 ka har'a letamo la ho tsoa (setšoan. 1).
moo f e leng coefficient of friction, e hlalosoang e le f = C / Re bakeng sa phallo ea laminar ka mocha o nang le mahlakore a mabeli, moo C e tsitsitseng ho itšetlehile ka karolo ea karolo ea mocha, L ke bolelele ba microchannel, Vav ke lebelo le tloaelehileng ka hare ho microchannel, Dh ke bophara ba hydraulic ea mocha, g - ho potlakisa matla a khoheli.Ka ho sebelisa equation ena, lebelo le tloaelehileng la mocha le ka baloa ho sebelisoa equation e latelang: