"Tvivla aldrig på att en liten grupp av omtänksamma, hängivna medborgare kan förändra världen.Det är faktiskt den enda där.”
Cureus uppdrag är att förändra den mångåriga modellen för medicinsk publicering, där forskningsinlämning kan vara dyrt, komplext och tidskrävande.
Blodplättsrik plasma/prp, vävnadsregenerering, trombocytaktivering, glukosproliferativ terapi, blodplättar, proliferativ terapi
Citera denna artikel som: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 maj 2022) Effekten av glukos på trombocytantal och volym: konsekvenser för regenerativ medicin.Cure 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Blodplättsrik plasma (PRP) och hypertona glukoslösningar används vanligtvis för injektion inom regenerativ medicin, ibland tillsammans.Effekten av hyperton glukos på trombocytlys och aktivering har inte tidigare rapporterats.Vi testade effekten av förhöjda glukoskoncentrationer på antalet blodplättar och erytrocyter, samt cellvolymer i PRP och helblod (WB).En snabb partiell minskning av trombocytantalet inträffade med alla glukosblandningar blandade med PRP eller helblod, i överensstämmelse med partiell lysering. Efter den första minuten förblev trombocytantalet stabilt, vilket tyder på en snabb anpassning av kvarvarande trombocyter till extrem (>2000 mOsm) hypertonicitet. Efter den första minuten förblev trombocytantalet stabilt, vilket tyder på en snabb anpassning av kvarvarande trombocyter till extrem (>2000 mOsm) hypertonicitet. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Efter den första minuten förblev trombocytantalet stabilt, vilket indikerar en snabb ackommodation av de kvarvarande trombocyterna till extrem (>2000 mOsm) hypertonicitet.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（0m昁端（竂m2000 mOsm）高渗状态. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптациц экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Efter den första minuten förblev trombocytantalet stabilt, vilket indikerar en snabb anpassning av de kvarvarande trombocyterna till det extrema (>2000 mOsm) hyperosmolära tillståndet.Glukoskoncentrationer på 25 % och över resulterade i en signifikant ökning av medelblodplättsvolymen (MPV), vilket indikerar ett tidigt stadium av trombocytaktivering.Ytterligare studier behövs för att avgöra om trombocytlys eller aktivering inträffar och om hypertonisk glukosinjektion ensam eller i kombination med PRP kan ge ytterligare kliniska fördelar.
På 1950-talet upptäckte den amerikanske kirurgen George Hackett att han permanent kunde lindra led- och ryggsmärtor hos många patienter genom att injicera en proliferativ lösning i senor och ligament.Hans experiment på kaniner visade att behandlingen, som han kallade proliferativ terapi, fick senorna att förstoras och stärkas.Histologiska studier har bekräftat att nytt kollagen produceras under denna process [1].
Under de första decennierna prövades många olika distributionslösningar.På 1990-talet ansåg de flesta utövare höga koncentrationer av glukos vara den säkraste och mest effektiva metoden.Verkningsmekanismen är dock fortfarande oklar.
Få kliniska studier genomfördes under 1900-talet efter Hacketts arbete.Men under 2000-talet fanns ett förnyat intresse och flera framgångsrika kliniska prövningar av proliferativ terapi slutfördes för behandling av ländryggssmärta [2], artros i knäet [3] och lateral epikondylit [4].
Vävnadsregenerering kräver deltagande av stamceller.Därför måste höga koncentrationer av glukos på något sätt inducera migration, replikation och differentiering av stamceller.Vi antar att blodplättar kan fungera som budbärare och att höga glukoskoncentrationer kan få blodplättar att frigöra cytokiner och tillväxtfaktorer, och därigenom främja regenerativa processer, särskilt stamcellsmigration till områden med höga glukoskoncentrationer.
Blodplättsaktivering föregår alltid en ökning av intracellulärt kalcium [5].Liu et al.2008 visade att höga glukosnivåer ökar aktiviteten hos transient receptor potential canonical type 6 (TRPC6) kanaler i plasmamembranet, vilket leder till ett inflöde av kalciumjoner till blodplättar [6].En annan studie visade att exponering av mikrotubulus marginalzon för kalciumjoner orsakar avslappning, expansion och deformation av marginalzonen, vilket i sin tur orsakar en förändring i form från disk till sfärisk, vilket resulterar i genomsnittlig trombocytvolym (MPV) [7].
Vår hypotes i denna studie är att exponering av blodplättar för höga koncentrationer av glukos påverkar mikrotubulus marginalzon och intracellulär miljö, vilket leder till en ökning av MPV.
Alla deltagare undertecknade ett informerat samtycke efter att detaljerna i studien förklarats och innan de fick proverna.I denna studie användes endast PRP-prover med en hematokrit större än 2 % så att antalet erytrocyter (erytrocyter) och medelkroppsvolymen av röda blodkroppar (MCV) kunde inkluderas för jämförelse.
Studien genomfördes i fyra faser, den första fasen var PRP och de återstående faserna var helblod (tabell 1).Som beskrivits tidigare [8] beräknades alla relativa centrifugalkrafter (RCF, g-kraft) från mittpunkten (Rmid, i cm) av blodkolonnen i centrifugalsprutan.Vi valde att använda MPV som en markör för trombocytsensibilisering och trombocytantal som en indikator på potentiell trombocytlys, som båda enkelt kan mätas på vanliga hematologianalysatorer.
I den första fasen donerade 47 frivilliga blodprov – ett rör med etylendiamintetraättiksyra (EDTA) och ett PRP-helblodsprov (antikoagulerat med natriumcitrat (NaCl, 3%)) (tabell 1).Placera vippan i röret omedelbart.Fullständigt blodvärde (CBC) utfördes på EDTA-prover i tre exemplar, och NaCl-prover analyserades i tre exemplar för CBC-analys, och sedan preparerades PRP med olika metoder som beskrivs ovan [8].Alla PRP-prover preparerades genom centrifugering vid 900–1000 g.Blanda varje PRP-prov på en virvelblandare i 5–10 sekunder och dela sedan fem alikvoter om 0,5 ml i rör.
För att utvärdera effekten av blodplättsexponering på förhöjda glukoskoncentrationer blandades lika mängder (0,5 ml) av 0 %, 5 %, 12,5 %, 25 % och 50 % glukos i vatten med blodplättsprover för att erhålla 0 %, 2,5 % 6,25 %, 12,5 % glukoskoncentration av 12,5 % glukos på en tub och 25 % glukos i en tub och 25 % glukos. minuter.TAC för varje blandning analyserades i tre exemplar efter 15 min.Medelvärdet av trombocytantal (PLT), RBC-antal, MCV och MPV beräknades för varje rör, och medeltal av trombocyter, RBC-antal, MCV och MPV beräknades för alla PRP-prover.
Efter att den första fasen av datainsamlingen slutförts märkte vi en signifikant ökning av trombocytvolymen i PRP-trombocyter efter tillsatsen av D50W.PRP-blodplättar representerar inte nödvändigtvis alla blodplättar i blodet, och PRP-medium skiljer sig från WB-medium.Därför beslutade vi att genomföra en andra fasförsök av effekten av att tillsätta D50W till helblod.
För den andra omgången valde vi en urvalsstorlek på 30 baserat på resultaten från den första serien, som beskrivs i avsnittet Analys.I denna serie donerade 20 frivilliga blodprover (tabell 1).Helblod (1,8 ml) drogs in i en 3 ml spruta och antikoagulerades med 0,2 ml 40% NaCl.Helblodssprutan blandades i fem sekunder med en virvelblandare och CBC analyserades i tre exemplar.Efter analys sattes antikoagulerat blod till 2 ml 50% glukos i en 5 ml spruta (slutlig glukoskoncentration var cirka 25% (D25) och placerades i ett skakrör i 30 minuter. Efter 30 minuter analyserades D25/CBC i WB-sprutor i tre exemplar. Trombocytantal, RBC-antal, RBC-antal, PV-antal, och RBC-antal, PV-antal, PV-antal, och RBC-antal, medeltal. , MCV och MPV beräknades för varje prov före och efter tillsats av glukos.
Eftersom trombocyter i helblod ofta exponeras för hypertont glukos under proliferativ glukosbehandling på grund av minimalt invasiv injektion, och det inte är vanligt att kombinera PRP med hypertont glukos strax före injektion, bestämde vi oss för att studera hypertont glukos i kombination med WB i avsnitt 1. Steg tre och fyra.I varje steg donerade 20 frivilliga 7-8 ml ACD-A (syra innehållande trinatriumcitrat (22,0 g/l), citronsyra (8,0 g/l) och glukos (24,5 g/l), lösning dextroscitrat) för blodantikoagulanter (tabell 1).Endast blandningar av glukos över 12,5 % användes för att bestämma tröskelprocenten förknippad med en ökning av MPV.I det tredje steget placeras 1 ml blod i ett provrör.Blanda sedan blodet på en virvelblandare i 10 sekunder genom att tillsätta 1 ml 30 % glukos, 40 % glukos eller 50 % glukos till röret för att erhålla en slutlig glukoskoncentration på 15 %, 20 % respektive 25 %.Glukosblodprover analyserades för CBC omedelbart efter blandning och upprepades varannan minut i 30 minuter.
Under den första blandningen exponerar tillsatsen av 1:1 hyperton glukos och WB eller PRP blodplättar för koncentrationer över 25 % under flera sekunder.I det fjärde steget, för att utvärdera effekten av hypertont glukos med minimala initiala toppkoncentrationer och testa den övre gränsen för effekten av glukos, tillsatte vi endast en liten mängd blod till D25W eller D50W.Placera 1 ml D25W eller D50W i ett rör och tillsätt 0,2 ml WB medan du vortexar provet i 10 sekunder.I dessa fall exponerades blodet för glukos i en koncentration ungefär 20 % över slutkoncentrationen, snarare än 50 % över slutkoncentrationen som i fas 3, vilket resulterade i slutliga glukoskoncentrationer på 20,8 % och 41,6 %.Blandade prover analyserades vid samma tidsintervall som i steg 3.
I det första steget av varje glukosspädningsserie togs 30 prover eftersom detta var lämplig provstorlek för pilotstudien [9].Vid slutet av varje fas (inklusive den första fasen), utvärdera lämpligheten av urvalsstorleken med hjälp av formeln som används för att bestämma urvalsstorleken som behövs för att uppskatta medelvärdet av den kontinuerliga utfallsvariabeln i en population.Formel n = Z2 x SD2/E2.I denna ekvation är Z Z-poängen, SD är standardavvikelsen och E är det önskade felet [10].Vår alfa är 0,05, vilket motsvarar ett Z-värde på 1,96, och vi förväntar oss ett fel på 5 (i procent).Därför löser vi för n = (1,962 x SD2)/52.Resultaten visade att provstorleken som krävdes för varje steg var mindre än det faktiska antalet insamlade.
Under perioderna 1, 3 och 4 med användning av mer än en glukoskoncentration analyserades effekten av olika glukoskoncentrationer genom att jämföra fraktionsförändringen mellan tid 0 och varje efterföljande tidpunkt (fas 1 vid 15 minuter, period 3 vid 15 minuter).och fyra vid 15 sekunder, sedan varannan minut.) Förändringshastigheter för varje tidsperiod jämfördes med Mann-Whitneys U-test eftersom data inte följde en normalfördelning som bestämdes av Shapiro-Wilks normalitetsteste.Eftersom en 1-till-1-analys av flera grupper (fem) utfördes i det första, tredje och fjärde steget (fem totalt), utfördes en Bonferroni-korrigering för att justera det önskade alfavärdet till ≤0,01 men inte ≤0,05.
Minskning av trombocytantalet med alla koncentrationer av hypertont dextros och en ökning av MPV i PRP-blodplättar vid >12,5 % dextroskoncentration: PRP-trombocytantalet steg från en till fem gånger koncentrationen jämfört med helblod vid baslinjen, varierande beroende på metoden (ej avbildad). Minskning av trombocytantalet med alla koncentrationer av hypertont dextros och en ökning av MPV i PRP-blodplättar vid >12,5 % dextroskoncentration: PRP-trombocytantalet steg från en till fem gånger koncentrationen jämfört med helblod vid baslinjen, varierande beroende på metoden (ej avbildad). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV процие MPV в RP рации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельвиз исходной цельвиз етода (не показано). Minskat trombocytantal vid alla hypertona dextroskoncentrationer och ökad MPV i PRP-trombocyter vid >12,5 % dextroskoncentration: PRP-trombocytantalet ökade 1-5 gånger jämfört med helblod vid baslinjen, beroende på metod (visas ej). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数,MPV线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未／艏 Vid >12,5 % glukoskoncentration minskar den höga koncentrationen av glukos blodantalet, PRP-blod-MPV ökar: jämfört med 与基线全血, ökar PRP-blodvärdet från 1 till 5 gånger koncentrationen (ej beskrivet). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество MP,ов тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- till 5-кратных концентраций по сравнициц и цельной крови, в зависимости от метода (nе описано ). Vid glukoskoncentrationer >12,5 % minskade alla hypertensiva glukoskoncentrationer trombocytantalet och ökade MPV i PRP-trombocyter: PRP-trombocytantalet ökade 1- till 5-faldigt jämfört med utgångskoncentrationerna i helblod, beroende på metoden (enligt beskrivning).Figur 1 visar att antalet blodplättar minskade med nästan 75 % efter utspädning i vatten och med 20-30 % efter 15 minuters utspädning med olika koncentrationer av glukos jämfört med baslinje PRP och en 1:1 spädning justerad för volym (1- k1 med volymkorrigering).k -1 avel).1 avel).
Antalet celler i varje spädning uttrycks som en bråkdel av det ursprungliga antalet före spädning.
MPV minskade minimalt under PRP-produktion, utan ytterligare förändring av utspädningskoncentrationerna till 12,5 % i vatten eller glukos (inklusive 25 % PRP-glukosblandningar) och ökade med mer än 20 % efter utspädning i 50 % glukoslösning (Fig. .2).).Däremot visade erytrocyter ingen signifikant förändring i volym vid någon annan utspädning än H2O.
Den genomsnittliga volymen av celler i varje spädning uttrycks som en procentandel av den ursprungliga volymen före spädning.
En liknande men mindre uttalad minskning av antalet trombocyter och ökning av CVR observerades i BC exponerade för 50 % glukos (för att formulera med 25 % glukos).Tabell 2 jämför cellantal och cellvolymer i helblod utspätt i 50 % dextros med fas 1 PRP-data utspädd i 50 % dextros.Förändringar i RBC-antal och RBC MCV var inte uppenbara och var inte i fokus för vår uppmärksamhet.
SD = standardavvikelse, MD = medelskillnad mellan grupper, SE = standardavvikelse för medelskillnad, RBC = erytrocyter, PLT = blodplättar, PRP = blodplättsrik plasma, WB = helblod
Efter tillsats av D50W till WB var den procentuella utspädningsjusterade blodplättsförlusten 7,7 % (310±73 vs. 286±96) jämfört med 17,8% för PRP-spädning i D50W (664±348 vs. 544±277).MPV WB ökade med 16,8 % (från 10,1 ± 0,5 till 11,8 ± 0,6), medan MPV PRP ökade med 26 % (9,2 ± 0,8 vs. 11,6 ± 0,7). Även om medelskillnaderna i både blodplättsreduktion och MPV-ökning var signifikant mer med PRP, var förändringarna i trombocytreduktion inom WB nästan signifikanta (310 ± 73 till 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) och ökningen av MPV var signifikant (10,1 ± 0,5 till 11,08 p) < ± 0,08 (± 0,1) Även om medelskillnaderna i både blodplättsreduktion och MPV-ökning var signifikant mer med PRP, var förändringarna i trombocytreduktion inom WB nästan signifikanta (310 ± 73 till 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) och ökningen av MPV var signifikant (10,1 ± 0,5 till 11,08 p) < ± 0,08 (± 0,1)Även om medelskillnaderna i både blodplättsreduktion och CVR-ökning var signifikant större med PRP, var förändringar i blodplättsminskning inom WB nästan signifikant (310 ± 73 till 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (от 10,1 ± 0,5 till 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). ökningen av MPV var signifikant (från 10,1 ± 0,5 till 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内谄凰茏几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.51 ± 10.51 ± 10.51 ± 10.51 ± 10.51 ± 001).尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 殌 但 佡 内的 几乎 是 显着 的 （（（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加缈睯昚1.（1,01. ± 0,6 (+16,8) p < 0,001）.Förändringen i blodplättsreduktion inom WB var nästan signifikant (från 310 ± 73 till 286 ± 96 (-7,7 %); p = 0,06), även om PRP hade signifikant större genomsnittliga skillnader i minskning av trombocytantal och ökning av MPV.och ökningen av MPV var signifikant.(от 10,1 ± 0,5 till 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (från 10,1 ± 0,5 till 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
En slutlig koncentration på 20 % glukos krävdes för att se en signifikant förändring i MPV, men förändringen i MPV var mer uttalad vid den slutliga koncentrationen på 25 %.Trombocytförlusten stabiliserades efter den initiala nedgången.Vi noterade en initial kraftig minskning av CVR, men CVR återställdes snabbt vid den slutliga glukoskoncentrationen på 25 %, vilket var signifikant högre än de CVR-nivåer som observerades vid de slutliga glukoskoncentrationerna på 20 % och 15 % (Fig. 3 och till vänster om Tabell 3; skuggade rutor).indikera p-värden ≤ alfa med en Bonferroni-korrigering på 0,01).Det fanns också en initial kraftig minskning av antalet PLT, observerad i den initiala fasen på 0-15 s, och förblev sedan stabil (från 15 s till 30 min; till vänster om tabell 4).
Tillsatsen av olika koncentrationer av glukos till helblod resulterade i en initial snabb minskning av MPV följt av en koncentrationsberoende återhämtning på mer än 20 %.Förklaringen visar koncentrationen av glukos efter utspädning.D15, D20 och D25 utfördes i en 1:1 utspädning.D21 och D41 utfördes i en 1:5 utspädning.
Tabell 4 visar förändringen i trombocytantal vid utspädning i hyperton glukos.Vi observerade ett dosberoende samband mellan den omedelbara minskningen av PLT-tal vid 1:1-spädningen och vid 1:5-spädningen.Genom att jämföra 1:1-spädningarna som en enda grupp med 1:5-spädningarna, hade 1:1-gruppen en omedelbar minskning av trombocytantalet mindre än 1:5-gruppen 66±48 000 (23%) jämfört med 99±69 000 (37%).p = 0,014) i 1:5-gruppen.Efter ett initialt fall vid den första mätpunkten, trombocytantalet som en procentandel av stabiliserat glukos (Fig. 4).
När helblod tillsätts till glukos i förhållandet 1:1 minskas trombocytantalet med cirka 25 %.Men när helblod tillsattes i förhållandet 1:5 var minskningen mycket större – cirka 50 %.
41 % glukos ökade MPV snabbare och mer dramatiskt än 25 % eller 21 %.MPV-resultat visas i figur 3. Vid alla andra spädningar observerades ingen omedelbar initial minskning av MPV efter tillsats av 50 % glukos.Vid användning av 25 % glukos (glukoskoncentration 20,8 % vid den slutliga utspädningen), var förändringen i MPV jämförbar med förändringen i 20 % glukos vid en 1:1 utspädning (fig. 3).Även om förändringar i MPV initialt var större vid 41 % blandad koncentration än vid 25 %, var skillnaden i MPV mellan 41 % och 25 % efter 16 minuter inte längre signifikant (tabell 3, höger).Det är också intressant att 25 % glukos ökade MPV mer effektivt än 20,8 %.
Denna in vitro-studie bekräftade delvis vår hypotes. Den visade potentiell partiell trombocytlys genom dextrosblandning, en snabb ackommodation av trombocyter till extrem hypertonicitet och en signifikant ökning av MPV som svar på > 25 % koncentrationer av hyperton dextros. Den visade potentiell partiell trombocytlys genom dextrosblandning, en snabb ackommodation av trombocyter till extrem hypertonicitet och en signifikant ökning av MPV som svar på > 25 % koncentrationer av hyperton dextros. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомогодацицом тром пертонуса и значительное повышение MPV в ответ på гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Den visade potentiell partiell trombocytlys med dextros, snabb trombocytackommodation till extrem hypertonicitet och en signifikant ökning av MPV som svar på hypertona dextrosnivåer >25 %.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速逓适应极竌2> % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适庯 极珌应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацитовом тромбоцитов гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Den visar potentiell partiell trombocytlys av glukosblandningar, snabb trombocytanpassning till extrem hypertonicitet och en signifikant ökning av MPV som svar på hyperton glukos >25 %.Den initiala ökningen var maximal vid 41,6 % glukosexponering, men ökningen av MPV närmade sig 25 % glukosexponering ungefär 20 minuter efter exponering.
Koncentrationen av blodplättar påverkas av glukos.Vi märkte att mängden PLT minskade vid alla utspädningar av glukos.En kraftig minskning av antalet blodplättar i H2O (0 %) utspädningar av PRP-serien kan vara associerad med osmotisk lys.Alternativt kan detta vara en artefakt orsakad av trombocytklumpning, men detta står i motsats till avsaknaden av MPV-förändring vid denna utspädning.Detta fynd innebär att vissa blodplättar är mycket känsliga för hypoosmolaritet.
I alla 1:1-spädningar av glukos minskade mängden PLT med 20-30%, även med D5W (hypotonisk vid 252 mOsm), vilket kan indikera en specifik icke-osmotisk effekt av glukos, eftersom både PLT och MPV förblev oförändrade vid en trefaldig ökning av koncentrationen.glukos.från D5W till D25W.Faktum är att PLT-koncentrationerna tenderade att öka något med ökande osmolaritet.
Minskningen av PLT mellan 1:1 och 1:5 spädningar innebär att upplösningseffekten beror på den initiala och slutliga glukoskoncentrationen.Om det bara berodde på den initiala koncentrationen, skulle man förvänta sig att se en skillnad i PLT-reduktion mellan 1:1-koncentrationer.Men det gör vi inte.Om lyseffekten endast beror på den slutliga glukoskoncentrationen, så förväntar vi oss ingen stor skillnad mellan en 20% 1:1 spädning och en 20,8% 1:5 spädning.Och ändå gjorde vi det.
Om blodplättsförlust uppstår på grund av trombocytlys bildas ett partiellt lysat, varefter cytokiner och tillväxtfaktorer frisätts i den extracellulära miljön.Flera studier har visat att trombocytlysat är nästan lika effektivt som PRP som en proliferationslösning [11].PRP i sig har visat sig vara en effektiv lösning för behandling av proliferation [12-14].
Inaktiva blodplättar cirkulerar i form av en skiva förstärkt med flera inre strukturer.Under aktiveringen antar de en mer sfärisk eller amöba form, vilket resulterar i en ökning av volymen.Ökningen i volym kräver en ökning av ytarean, vilket är resultatet av extruderingen av det öppna tubulisystemet (OCS) och tillsatsen av exocytiska granuler till membranet.Det återstår att fastställa om ökningen av MPV inducerad av hyperton glukos involverar en eller båda av dessa mekanismer, men om den senare skulle en ökning av MPV indikera degranulering.
Denna studie visade att exponering för höga koncentrationer av glukos på PRP eller helblodplättar resulterade i en ökning av MPV inom 15 minuter med en glukoskoncentration på 25 % respektive 41,6 %.
Ökningen av trombocyt-MPV kan bero på dilatation av de omgivande mikrotubulierna som svar på kalciuminflöde.Liu et al.Glukos har visat sig mediera kalciuminflöde genom trombocytkanalen TRPC6 [6].Vår hypotes är att glukos inducerar avslappning av tovor i mikrotubuli, vilket leder till en ökning av MPV och trombocytsensibilisering och/eller aktivering.Men att döma av våra resultat är detta bara en del av historien.I våra tester resulterade ingen koncentration under D25W i en ökning av MPV.Med tanke på att vi inte har testat exponering för glukoskoncentrationer mellan 12,5 % och 25 %, tyder våra fas 1-resultat på att det kan finnas en tröskel i detta intervall av glukoskoncentrationer som leder till en ökning av MPV.Ytterligare tester i steg 3 och 4 visade att 20-25 % glukos verkar vara tröskeln för detta, men det är fortfarande oklart varför.
Vi observerade också en ~9% minskning av MPV efter centrifugering.Det är inte klart om denna minskning av MPV beror på större och tätare blodplättar fångade i centrifugens RBC-skikt.Denna observation kan vara viktig för läkare eftersom det kan antyda att PRP-blodplättar är en mindre och mindre tät undergrupp av WB-blodplättar.
I en tidigare studie visade vi att PRP-beredning med manuella metoder är billigt [8].Om glukos sensibiliserar vävnadsblodplättar eller PRP, vilket gör dem mer mottagliga för aktivering, eller om PRP produceras med partiella lysategenskaper, kan detta förbättra regenereringen och minska behovet av terapi.Därför kan kombinationen av PRP och högkoncentrerad glukos vara mer kostnadseffektiv än PRP eller enbart glukos.
Vår studie har flera brister.Först använder vi PRP som erhållits från flera olika metoder.Detta kan leda till motstridiga resultat.För det andra kunde vi inte utföra en biokemisk analys av något av våra prover för att mer exakt avgöra om blodplättsaktivering hade inträffat.Vi skulle vilja mäta P-selektin, trombocytfaktor 4, monocytiska trombocytaggregat eller andra markörer för trombocytaktivering för att bättre förstå graden eller närvaron av alfa-granuldegranulering, men detta ligger utanför ramen för denna studie.För det tredje kunde vi inte bekräfta med elektronmikroskopi eller andra metoder att ökningen av MPV i glukosexponerade blodplättar berodde på effekten på trassel i mikrotubuli.
Blandningar av WB eller PRP med 25 % glukos ökade MPV, vilket signalerade början av trombocytaktivering, även om denna studie inte visade progression av aggregation eller degranulering.Den hypertona glukosblandningen resulterade i blodplättsförlust, vilket möjligen representerar en lytisk effekt.Partiell aktivering eller lysering av blodplättar kan orsaka vävnadsregenerering efter blodplättsinjektion.Det är inte klart vilka kliniska konsekvenser dessa förändringar kan leda till.Ytterligare studier har visat mer exakta mätningar av aktivering eller lys och har utvärderat de olika kliniska effekterna av hypertona glukosblandningar med WB eller PRP.
Glukosproliferativ terapi är en enkel och billig regenerativ terapi som snabbt expanderar och stödjer klinisk forskning.Denna studie föreslår en fysiologisk mekanism som, om den bekräftas, kan hjälpa oss att förstå en del av den regenerativa mekanismen för proliferativ terapi.
Biomedicinsk och hälsoinformatik vid University of Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Mänskliga försökspersoner: Alla deltagare i denna studie gav eller gav inte samtycke.International Society for Cellular Medicine har utfärdat ICMS-2017-003-godkännande.Följande protokoll har godkänts för vidare användning av Institutional Review Board of International Society for Cellular Medicine: Titel: Beräkning av blodplättsrik plasmaläkemedelsutbyte baserat på CBC-trombocytantal vid baslinjen.Djurämnen: Alla författare bekräftade att inga djur eller vävnader var inblandade i denna studie.Intressekonflikter: I enlighet med ICMJE Uniform Disclosure Form deklarerar alla författare följande: Betalnings-/tjänstinformation: Alla författare förklarar att de inte fått ekonomiskt stöd från någon organisation för det inlämnade arbetet.Ekonomiska relationer: Alla författare förklarar att de för närvarande eller under de senaste tre åren inte har ekonomiska relationer med någon organisation som kan vara intresserad av det inlämnade arbetet.Andra relationer: Alla författare förklarar att det inte finns några andra relationer eller aktiviteter som kan påverka det inlämnade verket.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(17 maj 2022) Effekten av glukos på trombocytantal och volym: konsekvenser för regenerativ medicin.Cure 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Detta är en artikel med öppen tillgång som distribueras under villkoren i Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0.Obegränsad användning, distribution och reproduktion i alla medier är tillåten, förutsatt att den ursprungliga författaren och källan krediteras.