Upatikanaji na usambazaji wa virutubishi huunganisha lishe ya wadudu na sifa za historia ya maisha. Ili kufidia upungufu wa virutubishi maalum katika hatua tofauti za maisha, wadudu wanaweza kupata virutubisho hivi kupitia ulishaji wa ziada, kwa mfano, kwa kulisha majimaji ya wanyama wenye uti wa mgongo katika mchakato unaojulikana kama madimbwi. Mbu Anopheles arabiani anaonekana kuwa na lishe, kwa hivyo, anahitaji lishe na uboreshaji wa lishe. utafiti huu ulikuwa wa kutathmini kama An. arabiensis fadhaa kwenye mkojo wa ng'ombe kwa ajili ya kupata virutubisho huboresha sifa za historia ya maisha.
Hakikisha ni salama.arabiensis ilivutiwa na harufu ya mkojo mpya wa ng'ombe, wa saa 24, 72 na 168, na wanawake wanaotafuta mwenyeji na kulishwa damu (saa 48 baada ya mlo wa damu) walipimwa kwa kipimo cha Y-tube olfactometer, na wanawake wajawazito walichunguzwa na uchunguzi wa kieletrojeni ulifanywa ili kubaini vipimo vya kisaikolojia. Michanganyiko ya kibiolojia katika mkojo wa ng'ombe katika madarasa yote manne. Michanganyiko ya syntetisk ya misombo ya bioactive ilitathminiwa katika majaribio ya Y-tube na shambani. Kuchunguza mkojo wa ng'ombe na urea iliyo na nitrojeni ya msingi kama mlo wa ziada wa vidudu vya malaria, vigezo vya ulishaji na sifa za historia ya maisha vilipimwa. Uwiano wa mbu jike ulifyonza na kunyonya mkojo. kulisha, wanawake walitathminiwa kwa ajili ya kuishi, kukimbia kwa kutumia mtandao, na uzazi.
Tafuta damu na lishe ya mwenyeji. Katika tafiti za maabara na shambani, Waarabu walivutiwa na harufu ya asili na ya asili ya mkojo wa ng'ombe aliyezeeka. Wanawake wajawazito hawakujali majibu ya mkojo wa ng'ombe mahali pa kuzaa. Wanawake wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu kwa bidii hunyonya mkojo wa ng'ombe na urea na kutenga rasilimali hizi za uokoaji kulingana na hali ya maisha. kuishi, au uzazi.
Upatikanaji na usambazaji wa mkojo wa ng'ombe wa Anopheles arabini kwa sifa bora za historia ya maisha.Ulishaji wa ziada wa mkojo wa ng'ombe huathiri uwezo wa vekta moja kwa moja kwa kuongeza maisha ya kila siku na msongamano wa vekta, na kwa njia isiyo ya moja kwa moja kwa kubadilisha shughuli za ndege na kwa hivyo inapaswa kuzingatiwa katika mifano ya baadaye.
Upatikanaji na usambazaji wa virutubisho huunganisha lishe ya wadudu na sifa za historia ya maisha [1,2,3].Wadudu wanaweza kuchagua na kupata chakula na kufanya ulishaji wa fidia kulingana na upatikanaji wa chakula na mahitaji ya virutubishi [1, 3]. Usambazaji wa virutubisho hutegemea mchakato wa historia ya maisha na inaweza kusababisha mahitaji tofauti ya ubora wa chakula na kiasi cha maisha1. upungufu wa virutubishi maalum, wadudu wanaweza kupata virutubisho hivi kupitia ulishaji wa ziada, kama vile kwenye matope, kinyesi na majimaji mbalimbali ya wanyama wenye uti wa mgongo, na nyamafu, mchakato unaojulikana kama madimbwi [2]. sifa [2, 4, 5, 6] ,7].Mbu wa malaria Anopheles gambiae sensu lato (sl) anaibuka kama mtu mzima 'aliye na utapiamlo' [8], kwa hivyo kumwagilia kunaweza kuwa na jukumu muhimu katika sifa zake za historia ya maisha, lakini tabia hii hadi sasa imepuuzwa .Matumizi ya fadhaa kama njia ya kuongeza virutubishi kwa sababu ya athari za kirutubisho hiki muhimu inaweza kuwa na athari za kiafya kwenye gari.
Ulaji wa nitrojeni kwa mbu jike Anopheles ni mdogo kwa sababu ya akiba ya chini ya kalori inayobebwa kutoka kwa kiwango cha mabuu na utumiaji duni wa mlo wa damu [9]. Ann.gambiae sl ya kike kwa kawaida hufidia hili kwa kuongeza milo ya ziada ya damu [10, 11], na hivyo kuwaweka watu wengi katika hatari kubwa ya kuambukizwa na mbu. Au, mbu wanaweza kutumia ulishaji wa ziada wa kinyesi cha wanyama wenye uti wa mgongo kupata misombo ya nitrojeni ambayo huongeza hali ya kukabiliana na hali na uwezo wa kuruka, kama inavyoonyeshwa na wadudu wengine. inavutia.Anopheles arabini ni nyemelezi katika upendeleo wake wa mwenyeji na inajulikana kuhusishwa na kulisha ng'ombe.Mkojo wa ng'ombe ni rasilimali iliyojaa misombo ya nitrojeni, na urea inachukua 50-95% ya jumla ya nitrojeni katika mkojo safi [15, 16]. [15].Kwa ongezeko la haraka la amonia, linalohusishwa na kupungua kwa nitrojeni ya kikaboni, vijidudu vya alkalofili (ambazo nyingi huzalisha misombo yenye sumu kwa mbu) hustawi [15], ambayo inaweza kuwa Ann.arabiensis wa kike huvutiwa zaidi na mkojo wenye umri wa saa 24 au chini ya [13, 14].
Katika utafiti huu, Ans waliolishwa na waliolishwa damu walitafutwa. Wakati wa mzunguko wake wa kwanza wa gonadotropini, arabiensis ilitathminiwa kwa ajili ya kupata misombo ya nitrojeni, ikiwa ni pamoja na urea, kwa kuchanganya mkojo. Kisha, mfululizo wa majaribio ulifanyika kutathmini jinsi mbu wa kike wanavyotenga rasilimali hii ya virutubisho kwa ajili ya kuboresha uzazi, uzazi na kuzaliana zaidi. Mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee ulitathminiwa ili kubaini kama hizi zilitoa dalili za kutegemewa kwa mwenyeji na kulishwa damu An. Katika utafutaji wao wa rasilimali hii ya lishe inayoweza kutokea, arabiensis iligundua uwiano wa kemikali nyuma ya mvuto ulioonekana. Michanganyiko ya harufu ya sintetiki ya misombo ya kikaboni tete (VOCs) iliyotambuliwa katika saa 24 iliyozeeka na kupanua mkojo chini ya hali ya maabara ilichunguzwa zaidi. athari ya harufu ya mkojo wa bovin kwa hali tofauti za kisaikolojia. Kivutio cha mbu.Matokeo yaliyopatikana yanathibitisha kuwa An. arabiensis hupata na kusambaza misombo ya nitrojeni inayopatikana katika mkojo wa wanyama wenye uti wa mgongo ili kuathiri sifa za historia ya maisha.Matokeo haya yanajadiliwa katika muktadha wa matokeo yanayoweza kutokea ya epidemiolojia na jinsi yanavyoweza kutumika kwa ufuatiliaji na udhibiti wa vekta.
Anopheles arabicans (Strain Dongola) zilidumishwa kwa 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH na 12:12 h mwanga:mzunguko wa giza. Mabuu yalikuzwa kwenye trei za plastiki (cm 20 × 18 cm × 7 cm) zilizojaa maji yaliyosafishwa na kulishwa chakula cha Tetramin, DE ®, samaki wa Tetramin. katika vikombe 30 ml (Nolato Hertila, Åstorp, SE) na kisha kuhamishiwa kwenye vizimba vya Bugdorm (cm 30 × 30 cm × 30 cm; Sayansi ya MegaView, Taichung, Taiwan) ili kuruhusu kutokea kwa watu wazima. majaribio, au walikufa kwa njaa usiku kucha kwa maji yaliyochemshwa kabla ya jaribio, kama ilivyoelezwa hapa chini. Wanawake waliotumiwa kwa majaribio ya bomba la ndege walikufa kwa njaa kwa saa 4-6 tu kwa kutumia maji ya tangazo. Ili kuandaa mbu wanaonyonya damu kwa ajili ya uchunguzi wa kibayolojia uliofuata, wanawake 4 wa dpe walipewa damu ya kondoo isiyo na fibrotic (Håtunalab kwa kutumia mfumo wa kulisha wa Diskofu, Diskofu ya Workshop, SE). Accrington, UK).Wanawake waliosongamana kikamilifu walihamishwa hadi kwenye vizimba vya mtu binafsi na kutoa chakula moja kwa moja, kama ilivyoelezwa hapa chini, au 10% ya sucrose ad libitum kwa siku 3 kabla ya majaribio yaliyoelezwa hapa chini. Wanawake wa mwisho walitumiwa kwa bioassays ya tube ya ndege na kuhamishiwa kwenye maabara, na kisha walikuwa na maji yaliyotengenezwa ad libitum kabla ya majaribio kwa saa 4-6.
Vipimo vya ulishaji vilitumiwa kukadiria utumiaji wa mkojo na urea kwa wanawake wa Kiarabu. Wanawake wanaotafuta mwenyeji na kulishwa damu walipewa lishe iliyo na 1% ya mkojo safi na mzee uliochanganywa na mkojo, viwango mbalimbali vya urea, na vidhibiti viwili (10% sucrose na maji) kwa saa 48. Aidha, rangi ya chakula (xy mgne CAS; 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) iliongezwa kwenye mlo na ikatolewa kwa tumbo la 4 × 4 katika mirija midogo midogo 250 µl (Axygen Scientific, Union City, CA, US; Kielelezo 1A) Jaza hadi ukingoni µes na athari za rangi ili kuepukana na rangi (~300). weka mbu 10 kwenye sahani kubwa ya Petri (sentimita 12 kwa kipenyo na urefu wa 6 cm; Semadeni, Ostermundigen, CH; Kielelezo 1A) katika giza kamili kwa 25 ± 2 cm °C na 65 ± 5% ya unyevu wa jamaa. Majaribio haya yalirudiwa mara 5 hadi 10. Baada ya kufichuliwa kwa 0 ° C hadi 2.
Angalia mkojo wa ng'ombe na urea uliofyonzwa na mwenyeji na jike anayenyonya damu Anopheles arabianus. Katika jaribio la kulisha (A), mbu jike walipewa mlo unaojumuisha mkojo wa ng'ombe aliyezeeka, viwango mbalimbali vya urea, sucrose (10%), na maji yaliyosafishwa (H2O).Watafutaji mwenyeji (B) na wanaonyonyesha wanawake wengine waliopimwa damu. kwamba wanawake wanaotafuta mwenyeji walifyonza mkojo wa ng'ombe wa saa 72 chini ya mkojo wa ng'ombe wa saa 168 (B). Wastani wa jumla ya maudhui ya nitrojeni (± kupotoka kwa kawaida) ya mkojo inawakilishwa katika sehemu iliyoingizwa.Wanawake wanaotafuta mwenyeji (D, F) na wanaonyonya damu (E, G) huchukua urea kwa njia inayotegemea kipimo) na herufi tofauti tofauti na herufi tofauti (D) (ANOVA ya njia moja kwa kutumia uchanganuzi wa post hoc wa Tukey; p <0.05).Pau za hitilafu zinawakilisha hitilafu ya kawaida ya wastani (BE).Mstari ulionyooka unawakilisha mstari wa kurejesha kumbukumbu (F, G)
Ili kutoa chakula kilichofyonzwa, mbu waliwekwa mmoja mmoja ndani ya mirija ya mililita 1.5 yenye 230 µl ya maji yaliyoyeyushwa na tishu ilitatizwa kwa kutumia kichuna kisichoweza kutupwa na injini isiyo na waya (VWR International, Lund, SE), ikifuatwa na kuangazia saa 10 krpm kwa dakika 10 . microplate (Sigma-Aldrich) na ufyonzaji (λ620) iliamuliwa kwa kutumia kisomaji microplate chenye spectrophotometer (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm). Vinginevyo, mbu walisagwa kwa ml 1 ya maji yaliyosafishwa, 900 µl ambayo ilihamishwa kwa kipimo cha 600 µl ilihamishwa kwa spishi 2. nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE).Ili kukadiria ulaji wa chakula, curve ya kawaida ilitayarishwa kwa dilution mfululizo ili kutoa 0.2 µl hadi 2.4 µl ya 1 mg ml-1 zailini sianidi. Kisha, msongamano wa macho wa chakula ulitumiwa kuamua kiasi cha moquidi ya chakula.
Data ya sauti ilichanganuliwa kwa kutumia uchanganuzi wa njia moja wa tofauti (ANOVA) ikifuatwa na ulinganisho wa baada ya hoc wa Tukey (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007). Uchanganuzi wa urejeshaji wa mstari ulifafanua mwitikio wa urea unaotegemea ukolezi na kulinganisha ulaji wa urea wa damu na kulinganisha ulaji wa urea damu. (GraphPad Prism v8.0.0 kwa Mac, Programu ya GraphPad, San Diego, CA, Marekani).
Takriban 20 µl za sampuli za mkojo kutoka kwa kila kikundi cha umri zilifungwa kwenye Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) na kuingizwa kwenye kapsuli za bati (8 mm × 5 mm). Vidonge viliwekwa kwenye chumba cha mwako cha 20molash CHNS, CHNS 200 FNS / O. Kisayansi, Waltham, MA, US) ili kubaini maudhui ya nitrojeni katika mkojo safi na uliozeeka kulingana na itifaki ya mtengenezaji. Jumla ya nitrojeni (g N l-1) ilihesabiwa kulingana na viwango vya urea vinavyojulikana vilivyotumika kama kawaida.
Ili kutathmini athari za lishe kwa wanawake wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu, mbu waliwekwa mmoja mmoja kwenye vyombo vikubwa vya Petri (sentimita 12 kwa kipenyo na urefu wa sentimeta 6; Semadeni) na tundu lililofunikwa na matundu kwenye kifuniko (sentimita 3 kwa kipenyo) na Kwa uingizaji hewa na usambazaji wa chakula. Mlo ulitolewa moja kwa moja baada ya 4% ya mkojo safi na mkusanyiko wa 4% ya myeyuko mpya na myeyuko wa 4%. urea, na vidhibiti viwili, 10% ya sucrose na maji.Kila mlo uliwekwa kwa bomba kwenye kisodo cha meno (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) iliyoingizwa kwenye sindano ya mililita 5 (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), plunger kuondolewa, na kuwekwa juu ya petri dish yako ya kila siku kama ilivyoelezwa. hapo juu.Mbu waliosalia walihesabiwa mara mbili kwa siku, huku mbu waliokufa walitupwa hadi mbu wa mwisho alipokufa (n = 40 kwa matibabu).Uhai wa mbu wanaolishwa kwa vyakula mbalimbali ulichambuliwa kitakwimu kwa kutumia mikunjo ya kuishi ya Kaplan-Meyer na vipimo vya kiwango cha kumbukumbu ili kulinganisha ugawaji wa mlo wa SPSS. 24.0.0.0).
Kinu maalum cha kurukia mbu kulingana na Attisano et al.[17], kilichoundwa kwa paneli za akriliki zisizo na unene wa milimita 5 ( upana wa 10 x 10 cm kwa urefu x 10 cm kwenda juu) bila paneli za mbele na za nyuma (Mchoro 3: juu). Mkusanyiko wa egemeo na mrija wa wima ulioundwa na safu wima ya kromatografia ya gesi (cm; 0.25 mm kwa gundi ya 5 mm; sindano iliyoning'inizwa kati ya jozi ya sumaku za neodymium zenye umbali wa sentimita 9. Mrija wa mlalo uliotengenezwa kwa nyenzo sawa (sentimita 6.5 L) uligawanya bomba la wima kufanyiza mkono uliofungwa na mkono uliobeba kipande kidogo cha karatasi ya alumini kama ishara ya kukatiza mwanga.
Wanawake wenye njaa ya saa 24 walipewa mlo ulio hapo juu kwa dakika 30 kabla ya kuzuiliwa. Mbu jike waliolishwa kikamilifu walilazimishwa mmoja mmoja kwenye barafu kwa muda wa dakika 2-3 na kuunganishwa kwenye pini za wadudu kwa nta (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) na kisha kuunganishwa kwenye mikono ya bomba. Mapinduzi ya Mill. kwa kila safari ya ndege yalirekodiwa na kiweka kumbukumbu cha data kilichoundwa maalum, kisha kuhifadhiwa na kuonyeshwa kwa kutumia programu ya PC-Lab 2000™ (v4.01; Velleman, Gavere, BE).Kinu cha ndege kiliwekwa kwenye chumba kinachodhibitiwa na hali ya hewa (saa 12:saa 12, mwanga: giza, 25 ± 2 °C, 5 % RH).
Ili kuibua muundo wa shughuli za ndege, jumla ya umbali wa (m) na jumla ya idadi ya shughuli za ndege zinazofuatana zilihesabiwa kwa saa katika kipindi cha saa 24. Aidha, umbali wa wastani unaosafirishwa na mwanamke mmoja mmoja ulilinganishwa katika matibabu na kuchanganuliwa kwa kutumia ANOVA na uchanganuzi wa baada ya muda wa Tukey (JMP Pro, v14.0.0), umbali wa wastani wa matibabu ulizingatiwa, SAS, Inc. factor.Aidha, idadi ya wastani ya raundi huhesabiwa katika nyongeza za dakika 10.
Ili kutathmini athari za lishe kwenye utendaji wa uzazi wa An.arabiensis, wanawake sita (4 dpe) walihamishiwa moja kwa moja kwenye vizimba vya Bugdorm (cm 30 × 30 cm × 30 cm) baada ya kukusanya damu na kisha kutoa mlo wa majaribio kwa saa 48 kama ilivyoelezwa hapo juu. Mlo uliondolewa na vikombe vya kuzaa (30 ml) vilijazwa siku ya tatu ya maji ya Hertila; Nolato 2 ya maji yalitolewa kwa siku ya tatu. Saa 48, kubadilisha kila baada ya saa 24. Rudia kila mlo mara 20-50.Mayai yalihesabiwa na kurekodiwa kwa kila ngome ya majaribio.Sampuli ndogo za mayai zilitumika kutathmini wastani wa ukubwa na tofauti ya urefu wa mayai ya mtu binafsi (n ≥ 200 kwa kila mlo) kwa kutumia darubini ya Dialux-20 (DM1000) yenye darubini ya Wetzlar, Etzlarst, Wetzlar Etzlar; Kamera ya Leica (DFC) 320 R2; Leica Microsystems Ltd., DE).Mayai yaliyosalia yaliwekwa katika chumba kinachodhibitiwa na hali ya hewa chini ya hali ya kawaida ya ufugaji kwa saa 24, na sampuli ndogo ya mabuu ya kwanza iliyoibuka hivi karibuni (n ≥ 200 kwa kila mlo) yalipimwa, kama ilivyoelezwa hapo juu. Idadi ya mayai na ukubwa wa mayai na mabuu yalilinganishwa kati ya matibabu na kutumia njia ya posta ya njia ya posta (MP) na Tukio la Tukio. v14.0.0, Taasisi ya SAS Inc.).
Tetesi kutoka kwa sehemu ya kichwa kutoka safi (saa 1 baada ya sampuli), saa 24, saa 72 na mkojo uliozeeka saa 168 zilikusanywa kutoka kwa sampuli zilizokusanywa kutoka kwa ng'ombe wa Zebu, mbio za Arsi. mifuko ya kuoka ya polyamide (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) katika l 3 polyamide yenye mfuniko Katika ngoma za plastiki za kloridi ya vinyl. Tetemeko la nafasi ya kichwa kutoka kwa kila sampuli ya mkojo wa ng'ombe zilikusanywa moja kwa moja (safi) au baada ya kukomaa kwa joto la kawaida la h 262h, kila sampuli ya 72 h ya mkojo. alikuwa mwakilishi wa kila kikundi cha umri.
Kwa mkusanyiko wa tetemeko la nafasi ya kichwa, mfumo wa kitanzi funge ulitumiwa kusambaza mkondo wa gesi iliyochujwa kaboni (100 ml min-1) kupitia mfuko wa polyamide hadi safu ya adsorption kwa saa 2.5 kwa kutumia pampu ya utupu ya diaphragm (KNF Neuberger, Freiburg, DE).Kama safu ya utupu ya bag. ilitengenezwa kwa neli ya Teflon (5.5 cm x 3 mm id) iliyo na 35 mg ya Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, US) kati ya plagi za pamba za glasi. Sigma Aldrich).Kinyume cha utangazaji kilitolewa kwa 400 μl ya pentane.Makusanyo ya anga ya kichwa yaliunganishwa na kisha kuhifadhiwa kwa -20°C hadi kutumika kwa uchanganuzi zaidi.
Majibu ya kitabia ya kutafuta mwenyeji na kula damu Dondoo tete za An.Headspace zilizokusanywa kutoka kwa mkojo safi, saa 24, 72 na 168 zilichanganuliwa ili kupata dondoo tete kutoka kwa mbu wa Arabidopsis kwa kutumia olfactometer ya kioo iliyonyooka [18]. shughuli ya kutafuta nyumbani.Arab [19].Olfactometer ya bomba la glasi (80 cm × 9.5 cm kitambulisho) iliangaziwa na 3 ± 1 lx ya mwanga mwekundu kutoka juu.Mtiririko wa hewa uliochujwa na unyevunyevu wa mkaa (25 ± 2 °C, 65 ± 2% unyevu wa jamaa) ulipitisha msururu wa 30 ya chuma cha pua. skrini za matundu, kuunda mtiririko wa lamina na muundo wa bomba sare. Kisambazaji cha visodo vya meno (4 cm × 1 cm; L:D; DAB Dental AB), kilichosimamishwa kutoka kwa koili ya sentimita 5 kwenye ncha inayoelekea upepo ya olfaktomita, na mabadiliko ya kichochezi kila baada ya dakika 5. Kwa uchanganuzi, 10 μl ya kila dondoo ya kichocheo cha 1 ilitumika kama dondoo ya nafasi ya kichwa iliyosawa ya pentane ilitumika kama kidhibiti.Mbu wa kutafuta mwenyeji au wa kunyonya damu waliwekwa kwenye vizimba vya kutolewa kwa mtu binafsi saa 2-3 kabla ya kuanza kwa majaribio. Ngome ya kutolewa iliwekwa kwenye upande wa chini wa olfactometer, na mbu waliruhusiwa kuzoea kwa muda wa dakika 1, na kisha valve ya kipepeo ili kufungua au kutolewa kwa udhibiti wa kipepeo ilifunguliwa. ya mbu ambao waligusana na chanzo ndani ya dakika 5 baada ya kutolewa. Kila dondoo na udhibiti tete wa nafasi ya kichwa uliigwa angalau mara 30, na ili kuepuka madhara ya siku yoyote, idadi sawa ya matibabu na vidhibiti vilijaribiwa kwa kila siku ya majaribio. Tafuta majibu kutoka kwa Ans mwenyeji na kulishwa damu. (JMP Pro, v14.0.0, Taasisi ya SAS Inc.).
Mwitikio wa kuzaa wa An. Vichupo vya sehemu ya juu kutoka kwa mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee vilichanganuliwa katika vizimba vya Bugdorm (cm 30 × 30 cm × 30 cm; Sayansi ya MegaView). Vikombe vya plastiki (30 mL; Nolato Hertila) vilivyojaa mililita 20 za maji yaliyoyeyushwa vilitoa sehemu ndogo ya kuzaa, sehemu ya 2 ya sehemu ya T iliyo kinyume na kuwekwa kwenye sehemu ya 4 ya tundu. vikombe vilirekebishwa na 10 μl ya kila dondoo la nafasi ya kichwa katika dilution ya 1:10. Kiasi sawa cha pentane kilitumiwa kurekebisha kikombe cha kudhibiti.Vikombe vya matibabu na udhibiti vilibadilishwa kati ya kila jaribio ili kudhibiti athari za nafasi.Wanawake kumi waliolishwa damu walitolewa kwenye mabwawa ya majaribio katika ZT 9-11 na mayai katika vikombe yalihesabiwa baadaye. mayai yaliyowekwa kwenye kikombe cha matibabu – idadi ya mayai yaliyowekwa kwenye kikombe cha kudhibiti)/(jumla ya mayai yaliyotagwa).Kila matibabu yalirudiwa mara 8.
Uchambuzi wa kromatografia ya gesi na mchoro wa antena ya elektroni (GC-EAD) wa An.arabiensis ya kike ulifanyika kama ilivyoelezwa hapo awali [20]. Kwa ufupi, madondoo tete ya anga ya juu yalitenganishwa kwa kutumia Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) iliyo na safu wima ya HP-5 × 5 μd 5 mm × 30 m2 μd filamu. unene, Teknolojia ya Agilent). na mkojo kuzeeka.Hidrojeni ilitumika kama awamu ya kuhama na wastani wa mtiririko wa mstari wa sm 45 s-1.Kila sampuli (2 μl) ilidungwa kwa sekunde 30 katika hali isiyogawanyika na joto la kuingiza la 225 °C. Joto la tanuri la GC lilipangwa kutoka 35 °C (kushikilia kwa dakika 3) hadi 300 °C kwa dakika 100 °C kwa dakika 100 °C. kigawanyaji cha maji taka, psi 4 za nitrojeni ziliongezwa na kupasuliwa 1:1 katika msalaba wa kiasi cha chini cha Gerstel 3D/2 (Gerstel, Mülheim, DE) kati ya kigunduzi cha ioni ya moto na EAD. Kapilari ya maji taka ya GC ya EAD ilipitishwa kupitia laini ya uhamishaji ya Gerstel ODP-2, ambayo hufuata ndani ya glasi ya 5 × 8 ° C, pamoja na glasi ya 5 × 8 oveni. ambapo ilichanganywa na hewa iliyochujwa na unyevunyevu wa kaboni (1.5 l min-1). Antena iliwekwa sm 0.5 kutoka kwa bomba.Kila mbu mmoja mmoja alichangia nakala moja, na kwa mbu wanaotafuta mwenyeji, angalau nakala tatu zilifanywa kwenye sampuli za mkojo za kila umri.
Utambulisho wa misombo ya viumbe hai katika mikusanyo ya anga ya juu ya mkojo wa ng'ombe safi na kongwe kwa kutumia GC iliyounganishwa na spectrometer ya wingi (GC-MS; 6890 GC na 5975 MS; Agilent Technologies) ili kuibua majibu ya antena katika uchanganuzi wa GC-EAD, unaofanya kazi katika modi ya ioni ya athari ya elektroni kwa 70 GCMS-equipped. safu wima ya kapilari ya silika iliyounganishwa (kipenyo cha ndani cha 60 m × 0.25 mm, unene wa filamu 0.25 μm) kwa kutumia heliamu kama sehemu ya simu ya mkononi yenye kiwango cha wastani cha mtiririko wa sm 35 s-1.A 2 μl ilidungwa kwa kutumia mipangilio sawa ya kidunga na halijoto ya oveni kama ilivyo kwa uchanganuzi wa GC-EAD kulingana na wakati wa utiririshaji wa utiririshaji. kwa maktaba maalum na maktaba ya NIST14 (Agilent). Michanganyiko iliyotambuliwa ilithibitishwa kwa kudunga viwango halisi (Faili ya Ziada ya 1: Jedwali S2). Kwa kutathminiwa, heptyl acetate (10 ng, 99.8% ya usafi wa kemikali, Aldrich) ilidungwa kama kiwango cha nje.
Kutathmini ufanisi wa mchanganyiko wa harufu ya sintetiki unaojumuisha viambata amilifu vilivyotambulika katika mkojo safi na kongwe ili kuvutia Ans.arabiensis ya watu wanaotafuta mwenyeji na kunyonya damu, kwa kutumia olfaktomita na itifaki sawa na hapo juu. Michanganyiko ya syntetisk iliiga muundo na uwiano wa misombo katika dondoo tete za anga za juu, 24, 24ho na 24-ho. Mkojo ulio na umri wa saa 168 (Mchoro 5D-G; Faili ya Ziada ya 1: Jedwali S2). Kwa uchanganuzi, tumia 10 μl ya myeyusho wa 1:100 wa mchanganyiko wa sintetiki, wenye kiwango cha jumla cha kutolewa kuanzia takriban 140-2400 ng h-1, kwa kutathmini mvuto wa kukaribisha moshi, mchanganyiko ambao unafanywa baada ya uchunguzi wa damu. michanganyiko ya kupunguza ya misombo moja ya mchanganyiko kamili huondolewa.Majibu ya Tafuta kutoka kwa mwenyeji na michanganyiko ya Ans.Arab iliyolishwa kwa damu dhidi ya sintetiki na ya kupunguza ilichanganuliwa kwa kutumia urejeshaji wa kawaida wa vifaa na kufuatiwa na ulinganisho wa jozi kwa uwiano usio wa kawaida (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Kutathmini kama mkojo wa ng'ombe unaweza kutumika kama kielelezo cha makazi ya mbu wa malaria, mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee, uliokusanywa kama ilivyoelezwa hapo juu, na maji yaliwekwa kwenye ndoo za lita 3 (100 ml) na kuwekwa kwenye mitego ya chambo. (Toleo la BG-HDT; BioGents, Regensburg, DE).Mitego kumi iliwekwa kando ya mita 50 kwenye malisho, mita 400 kutoka jamii ya kijiji (Silay, Ethiopia, 5°53'24′′N, 37°29′24′′E) na hakuna ng'ombe, kwenye maeneo ya kuzaliana na vijiji vya kudumu. huzungushwa usiku kucha kwa jumla ya usiku tano.Nambari za mbu walionaswa katika mitego iliyonaswa na mkojo wa umri tofauti zililinganishwa kwa kutumia urejeshaji wa vifaa na usambazaji wa beta binomial (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Katika kijiji kilicho na malaria karibu na mji wa Maki, eneo la Oromia, Ethiopia (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Kielelezo 6A). Utafiti ulifanyika kati ya katikati ya Agosti na katikati ya Septemba kabla ya unyunyiziaji wa mabaki ya ndani ya kila mwaka, pamoja na msimu wa mvua kwa muda mrefu. Jozi tano kati ya 20 ya nyumba ziko katika umbali wa mita 200 kati ya mta. walichaguliwa kwa ajili ya utafiti (Mchoro 6A). Vigezo vilivyotumika kuchagua nyumba vilikuwa: hakuna wanyama walioruhusiwa ndani ya nyumba, hakuna kupikia ndani (kuchora kuni au mkaa) kuruhusiwa (angalau wakati wa kipindi cha majaribio), na nyumba zilizo na idadi ya juu ya wakazi wawili, kulala katika dawa za kuua wadudu. chini ya chandarua kilichotibiwa. Idhini ya kimaadili imetolewa na Bodi ya Mapitio ya Maadili ya Utafiti ya Kitaasisi (IRB/022/2016) ya Kitivo cha Sayansi Asilia (CNS-IRB), Chuo Kikuu cha Addis Ababa, kwa mujibu wa miongozo iliyoanzishwa na Tamko la Chama cha Madaktari Ulimwenguni cha Helsinki. Ridhaa ilipatikana kutoka kwa kila mhudumu wa afya wa eneo hilo. tawala katika ngazi ya wilaya na kata ('kebele'). Muundo wa majaribio ulifuata muundo wa mraba wa Kilatini 2 × 2, ambapo mchanganyiko na udhibiti wa synthetic uliwekwa kwa nyumba zilizounganishwa usiku wa kwanza na kubadilishana kati ya nyumba katika usiku uliofuata wa majaribio. Utaratibu huu ulirudiwa mara kumi. Zaidi ya hayo, ili kukadiria shughuli za mbu katika nyumba zilizochaguliwa, CDC iliendesha mfululizo wa mwisho wa usiku wakati wa mwanzo wa majaribio ya CDC iliweka mitego mitano ya mwisho. wakati huo huo wa siku.
Mchanganyiko wa sintetiki ulio na misombo sita ya kibiolojia uliyeyushwa katika heptane (kiyeyuzi 97.0% daraja la GC, Sigma Aldrich) na kutolewa kwa 140 ng h-1 kwa kutumia kisambaza utambi wa pamba [20]. Kisambaza utambi kiliruhusu misombo yote kutolewa kwa uwiano wa mara kwa mara katika muda wote wa saa 12. Sehemu iliyofuata ya uunganisho ilitumika kama sehemu ya kudhibiti. Vituo vya Kudhibiti na Kuzuia Magonjwa (CDC) mtego mwepesi (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Kielelezo 6A). Mitego hiyo ilitundikwa 0.8 - 1 m juu ya ardhi, karibu na mguu wa kitanda, na mtu aliyejitolea alilala chini ya chandarua ambacho hakijatibiwa na kuendeshwa kati ya 106:00 na saa 10:00 hadi 10:00. hali ya kisaikolojia (bila kulishwa, kulishwa, nusu-mimba, na mjamzito [21] baadaye walichunguzwa kwa kutumia uchanganuzi wa mnyororo wa polymerase (PCR) ili kutambua spishi iliyotambuliwa kimofolojia kama A. gambiae sl. Washiriki wa tata [23]. Katika utafiti wa shambani, utegaji wa mtego wa nyumba zilizooanishwa ulichanganuliwa kwa kutumia mchanganyiko, muundo tegemezi na tegemezi. kudhibiti) ilikuwa athari isiyobadilika (JMP® 14.0. 0. Taasisi ya SAS Inc.).
Tathmini kama ni salama.arabiensis iliweza kupata mkojo, chanzo chake kikuu cha nitrojeni, urea, kwa kulisha moja kwa moja, ndani ya h 48 ya utawala kwa siku 4 baada ya (dpe) majaribio ya ulishaji wa wanawake wanaotafuta mwenyeji na kulishwa damu (Mchoro 1A). Wanawake wote wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu walifyonza kwa kiasi kikubwa sucrose zaidi kuliko nyingine yoyote, F15 = 5, p5 = 2 au maji. 0.0001 na F (5,299) = 56.00, p <0.0001, mtawalia. Mtini. 1B, C). Zaidi ya hayo, wanawake wanaotafuta mwenyeji walikula kidogo kwenye mkojo kwa saa 72 ikilinganishwa na mkojo wa saa 168 (Kielelezo 1B).Wakati walipewa chakula kilicho na urea 2 M9 kwa kiasi kikubwa. ikilinganishwa na viwango vingine vyote na maji, ilhali haiwezi kutofautishwa na 10% ya sucrose (F(10,813) = 15.72, p <0.0001; Kielelezo 1D).Hii ilikuwa tofauti na mwitikio wa wanawake wanaolishwa damu, ambao kwa kawaida walifyonza vyakula vilivyo na urea zaidi kuliko maji, ingawa 10(7) chini ya 5% = 5% 78.35, p <0.0001; Kielelezo 1).1E).Zaidi ya hayo, wakati wa kulinganisha kati ya hali mbili za kisaikolojia, wanawake walio na phlebotomized walifyonza urea zaidi kuliko wanawake wanaotafuta mwenyeji kwa viwango vya chini zaidi, na wanawake hawa walichukua kiasi sawa cha urea katika viwango vya juu (F(1,980; 1F, G).Ijapokuwa ulaji kutoka kwa lishe iliyo na urea ulionekana kuwa na maadili bora (Kielelezo 1D, E), wanawake katika hali zote mbili za kisaikolojia waliweza kurekebisha kiwango cha urea kilichofyonzwa juu ya safu nzima ya viwango vya urea kwa mtindo wa logi (Mchoro 1F, G). ).Vile vile, mbu wanaonekana kudhibiti uchukuaji wao wa nitrojeni kwa kudhibiti kiasi cha mkojo unaofyonzwa, kwani kiasi cha nitrojeni kwenye mkojo huonyeshwa kwa kiasi kinachofyonzwa (Mchoro 1B, C na B).
Ili kutathmini athari za mkojo na urea kwa mbu anayetafuta mwenyeji na anayenyonya damu, wanawake walilishwa mkojo wa miaka yote minne (safi, 24 h, 72 h na 168 h post-deposition) na aina mbalimbali za viwango vya urea, pamoja na maji yaliyosafishwa na 10 % uchambuzi ulionyesha kuwa chakula kilikuwa na udhibiti wa sucrose 2). athari kubwa kwa maisha ya jumla katika wanawake wanaotafuta mwenyeji (mkojo: χ2 = 108.5, df = 5, p <0.0001; urea: χ2 = 122.8, df = 5, p <0.0001; Mtini. 2B, C) na mkojo 0 = χd wanawake = 3. 5, p <0.0001; urea: χ2 = 137.9, df = 5, p <0.0001 Kielelezo 2D, E) .Katika majaribio yote, wanawake walilisha chakula cha mkojo, urea, na maji walikuwa na viwango vya chini vya kuishi ikilinganishwa na wanawake waliolisha sucrose Host ya mkojo wa kike. walionyesha viwango tofauti vya kuishi, na wale waliolishwa mkojo uliochakaa kwa saa 72 (p = 0.016) wakiwa na uwezekano wa chini kabisa wa kuishi (Mchoro 2B). Zaidi ya hayo, wanawake wanaotafuta mwenyeji waliolishwa urea 135 mM walinusurika kwa muda mrefu kuliko vidhibiti vya maji (p <0.04) (Ikilinganishwa na 2C ya mkojo na maji safi ya 2C). Mkojo ulidumu kwa muda mrefu zaidi (p = 0.001 na p = 0.012, mtawalia; Mchoro 2D), wakati wanawake waliolishwa kwa mkojo wa saa 72 walidumu kwa muda mrefu zaidi kuliko wale waliolishwa Mkojo fupi wa kike na mkojo wenye umri wa saa 24 (p <0.0001 na p = 0.013, Wakati fed 2, 3 mtawalia; wanawake waliolishwa kwa damu waliishi kwa muda mrefu zaidi kuliko viwango vingine vyote vya urea na maji (p <0.013; Mchoro 2E).
Kuishi kwa Anopheles arabini wa kike anayenyonya damu akila mkojo wa ng'ombe na urea.Katika uchunguzi wa kibayolojia (A), mbu jike walipewa mlo unaojumuisha mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee, viwango mbalimbali vya urea, sucrose (10%) na maji yaliyochujwa (H2O).Uhai wa kutafuta mwenyeji (C) na kutafuta damu (B) ulikuwa (B) kurekodiwa kila baada ya masaa 12 hadi wanawake wote waliolishwa kwenye mkojo (B, D) na urea (C, E), na udhibiti, Sucrose na maji, wamekufa.
Jumla ya umbali na idadi ya mizunguko iliyoamuliwa katika jaribio la kinu cha ndege katika kipindi cha saa 24 ilitofautiana kati ya mbu wanaotafuta mwenyeji na wanaonyonya damu, ambayo ilionyesha shughuli ndogo ya kukimbia kwa ujumla (Mchoro 3).Mbu wanaotafuta mwenyeji ambao walitoa mkojo safi na wa zamani au sucrose na maji walionyesha mifumo tofauti ya kukimbia (Mchoro 3), na majike ya alfajiri 4 ya kulisha kwa maji safi, 4 ya majike zaidi ya kulisha. na Mbu wenye umri wa saa 168 ambao walikula mkojo walionyesha mifumo tofauti ya kukimbia na walikuwa hasa wa mchana. Mbu wa kike ambao walitoa sucrose au mkojo wa saa 72 walionyesha shughuli katika muda wote wa saa 24, wakati majike waliotoa maji walikuwa wakifanya kazi zaidi wakati wa katikati ya kipindi. Mbu walijilisha usiku na mapema asubuhi na mapema asubuhi na asubuhi na mapema ya sucrose. Mkojo wenye umri wa saa 72 ulipata kupungua kwa shughuli kwa muda wa saa 24 (Mchoro 3).
Utendaji wa ndege wa wawindaji wanaonyonya damu Anopheles arabini wa kike wanaokula mkojo wa ng'ombe na urea.Katika jaribio la kinu cha ndege, mbu jike waliolishwa kwa mkojo safi na mzee, viwango mbalimbali vya urea, sucrose (10%), na maji yaliyochujwa (H2O) yalifungwa kwa usawa, kuzunguka damu kwa mwenyeji (kwa kuzunguka kwa mikono). (kulia) wanawake, jumla ya umbali na idadi ya safari za ndege kwa saa kwa kila mlo katika kipindi cha saa 24 zilinakiliwa (giza: kijivu; mwanga: nyeupe).Umbali wa wastani na idadi ya wastani ya milipuko huonyeshwa upande wa kulia wa grafu ya shughuli za mzunguko.Pau za hitilafu zinawakilisha makosa ya kawaida ya wastani.Uchanganuzi wa takwimu tazama maandishi
Kwa ujumla, shughuli za jumla za ndege za wanawake wanaotafuta mwenyeji zilifuata muundo sawa na ule wa umbali wa kukimbia kwa muda wa saa 24. Umbali wa wastani wa kukimbia uliathiriwa kwa kiasi kikubwa na chakula kilichoingizwa (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001), na wanawake wanaotafuta mwenyeji walichukua masaa 72 ya mkojo waliruka kwa kiasi kikubwa umbali mrefu zaidi wa 0 na 1
Madhara ya ulaji wa mkojo na urea kwenye vigezo vya uzazi yalitathminiwa katika uchunguzi wa kibayolojia wa kuwekea yai (Mchoro 4A) na kuchunguzwa kulingana na idadi ya mayai yaliyotagwa na kila jike, ukubwa wa yai, na vibuu wapya walioanguliwa. Kielelezo 4B).Wanawake walilishwa mkojo wa saa 24, mlo wa damu hutaga mayai mengi zaidi kuliko wanawake waliolishwa vyakula vingine vya mkojo na walikuwa sawa na wale waliolishwa sucrose (Mchoro 4B). Vilevile, ukubwa wa mayai yaliyowekwa na wanawake wanaolishwa mkojo ulitofautiana kulingana na chakula (F(5, 209) = 10 . wanawake walio na sucrose hutaga mayai makubwa zaidi kuliko wanawake wanaolishwa kwa maji , wakati mayai ya wanawake waliolishwa na 168 h ya mkojo yalikuwa madogo sana (Mchoro 4C). Kwa kuongeza, chakula cha mkojo kiliathiri kwa kiasi kikubwa ukubwa wa mabuu (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), na mayai ya lar-4 kutoka kwa lar 2 kwa kiasi kikubwa. Wanawake wanaolishwa mkojo kwa saa 72 kuliko kutoka kwa mayai yaliyotagwa kutoka kwa viluwiluwi vya mayai. Majike wanaolishwa kwa maji na waliolishwa mkojo kwa saa 168 (Mchoro 4D).
Utendaji wa uzazi wa Anopheles arabini wa kike kulisha mkojo wa ng'ombe na urea.Mbu jike waliolishwa kwa damu walilishwa mlo unaojumuisha mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee, viwango mbalimbali vya urea, sucrose (10%), na maji yaliyochujwa (H2O) kwa saa 48 kabla ya kuweka kwenye bioassays na kupata namba ya yai (A), yai 8 (A, 4) saizi ya yai (C, F) na saizi ya mabuu (D, G) iliathiriwa kwa kiasi kikubwa na mlo uliotolewa (mkojo wa ng’ombe: BD; urea: EG).Njia kwa kila kigezo kilichopimwa kwa kutumia majina tofauti ya herufi zilikuwa tofauti sana kutoka kwa kila nyingine (ANOVA ya njia moja kwa kutumia uchanganuzi wa post hoc wa Tukey; p <0.05).Pau za hitilafu zinawakilisha makosa ya kawaida ya wastani wa wastani.
Kama sehemu kuu ya nitrojeni ya mkojo, urea, inapotolewa kama lishe kwa wanawake wanaolishwa damu, iliathiri kwa kiasi kikubwa vigezo vya uzazi katika tafiti zote. Idadi ya mayai yaliyotagwa na wanawake waliolishwa urea, baada ya mlo wa damu, kulingana na ukolezi wa urea (F(11, 360) = 4.69; p <0.0001), ukolezi wa wanawake 3M 4M na 4 M 3 waliolishwa urea. hutaga mayai zaidi (Mchoro 4E). Wanawake wanaolishwa kwa viwango vya urea vya 134 µM au zaidi hutaga mayai makubwa kuliko majike wanaolishwa kwa maji (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001; Mchoro 4F), na saizi ya mabuu, ingawa huathiriwa na viwango sawa vya urea 3F (3F = 19; 3F = 19; p <0.0001) ilikuwa tofauti zaidi (Mchoro 4G).
Kuvutia kwa ujumla kwa dondoo tete za nafasi ya kichwa cha mkojo wa ng'ombe wanaotafuta mwenyeji.Arabiensis iliyotathminiwa katika olfactometer ya bomba la glasi (Kielelezo 5A) iliathiriwa kwa kiasi kikubwa na umri wa mkojo (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Mtini. 5B). Uchanganuzi wa kiwango cha juu cha mkojo wa 24 ulionyesha kuwa kiwango cha juu cha mkojo wa 24 wa kuvutia kililinganishwa kwa kiasi kikubwa na umri wa mkojo (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; Mtini. 5B). kwa matibabu mengine yote (saa 72: p = 0.0060, saa 168: p = 0.012, pentane: p = 0.00070), Isipokuwa harufu ya mkojo safi (p = 0.13; Kielelezo 5B). Ingawa mvuto wa jumla wa mbu wa kunyonya damu kwa 8 (7 = 8) haikuwa tofauti, 8 = harufu ya mkojo 8. p = 0.067; Mtini. 5C), wanawake hawa walionekana kuvutia zaidi kwa dondoo tete za nafasi ya kichwa ikilinganishwa na mkojo wa saa 72 ikilinganishwa na udhibiti (p = 0.0066; Kielelezo 5C).
Majibu ya kitabia kwa harufu ya asili na ya asili ya mkojo wa ng'ombe katika kutafuta mwenyeji na kulishwa damu Anopheles arabianus.Mchoro wa bomba la kioo olfactometer (A).Kivutio cha dondoo tete za nafasi ya kichwa kutoka kwenye mkojo wa ng'ombe mbichi na mzee kuwa mwenyeji (B) na mbu wa kunyonya damu (C).Tafuta majibu ya hema ya Lord. Saa 24 (E), saa 72 (F), na mkojo wa ng’ombe mwenye umri wa saa 168 (G) huonyeshwa. Ufuatiliaji wa antena ya elektroni (EAD) huonyesha mabadiliko ya volteji katika kukabiliana na misombo ya kibiolojia katika nafasi ya kichwa iliyotolewa kutoka kwa kromatografu ya gesi na kugunduliwa na kigunduzi cha ionization ya moto (FIDs replition ya saa jibu la FID). (s).Sifa na viwango vya kutolewa (µg h-1) vya misombo amilifu ya kibiolojia huonyeshwa. Nyota moja (*) huonyesha mwitikio thabiti wa amplitude ya chini. Nyota mbili (**) zinaonyesha majibu ambayo hayawezi kuzaliana. Tafuta mwenyeji (H) na wa kunyonya damu (I) Mchanganyiko mpya wa arabiensisi na mchanganyiko wa mkojo umevutia. idadi ya wastani ya mbu waliovutiwa na majina tofauti ya herufi ilikuwa tofauti sana kutoka kwa kila mmoja (ANOVA ya njia moja kwa kutumia uchanganuzi wa post hoc wa Tukey; p <0.05). Mipau ya hitilafu inawakilisha makosa ya kawaida ya kipimo
Ann.arabiensis wa kike, saa 72 na 120 baada ya mlo wa damu, wakati wa kuzaa, hakuna upendeleo ulioonyeshwa kwa dondoo tete za nafasi ya kichwa kutoka kwa mkojo wa ng'ombe safi na mzee ikilinganishwa na udhibiti wa pentane (χ2 = 3.07, p > 0.05; Faili ya ziada 1: Mchoro S1).
Kwa Ann.arabiensis wa kike, uchambuzi wa GC-EAD na GC-MS ulibainisha misombo minane, sita, tatu na tatu ya bioactive (Kielelezo 5D-G) .Ingawa tofauti katika idadi ya misombo ambayo ilisababisha majibu ya electrophysiological ilizingatiwa, zaidi ya misombo hii ilikuwepo katika kila dondoo tete ya nafasi ya kichwa iliyokusanywa kutoka kwa mkojo safi na wa zamani ambao ulitoa majibu ya physiological tu, kwa hiyo, tu. antena juu ya kizingiti zilijumuishwa katika uchambuzi zaidi.
Jumla ya kiwango tete cha kutolewa kwa misombo ya bioactive katika mkusanyiko wa nafasi ya kichwa kiliongezeka kutoka 29 µg h-1 kwenye mkojo safi hadi 242 µg h-1 katika mkojo wenye umri wa saa 168, hasa kutokana na ongezeko la p-cresol na m-formaldehyde Phenol pamoja na phenol. decanal, ilipungua kwa kuongeza umri wa mkojo, ambayo uhusiano na kupungua aliona katika kiwango signal (wingi) katika kromatogramu (Mtini. 5D) -G kushoto jopo) na majibu ya kisaikolojia kwa misombo haya (Mtini. 5D-G jopo kulia).
Kwa ujumla, mchanganyiko wa syntetisk ulikuwa na uwiano sawa wa asili wa misombo ya bioactive iliyotambuliwa katika dondoo tete ya vichwa vya kichwa vya mkojo safi na wazee (Mchoro 5D-G) na haukuonekana kutoa rufaa kubwa katika utafutaji wa mwenyeji (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; Kielelezo 4-to-sucking = 5H = 5H / 5H = 5H / 5H / ssucking). df = 4, p = 0.30; Mtini. 5I) .Hata hivyo, ulinganisho wa baada ya jozi kati ya matibabu ulionyesha kuwa mbu wanaotafuta mwenyeji walikuwa wakivutia kwa kiasi kikubwa mchanganyiko wa mkojo wa 24-h ikilinganishwa na udhibiti wa pentane (p = 0.0086; Kielelezo 5H).
Ili kutathmini jukumu la vipengele vya mtu binafsi katika mchanganyiko wa synthetic wa mkojo wenye umri wa 24-h, michanganyiko sita ya kupunguza ilitathminiwa dhidi ya mchanganyiko kamili katika kipimo cha Y-tube, ambapo misombo ya mtu binafsi iliondolewa. 0.0032; Faili ya ziada ya 1: Kielelezo S2A), mchanganyiko wote wa subtractive ulikuwa wa kuvutia zaidi kuliko Ndogo kuliko mchanganyiko kikamilifu. Kwa kulinganisha, kuondolewa kwa misombo ya mtu binafsi kutoka kwa mchanganyiko kamili wa synthetic hakuathiri majibu ya tabia ya mbu wa kunyonya damu (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0,07 iliyopunguzwa na kiwango cha chini cha 0.07) Kivutio (p = 0.022; Faili ya Ziada ya 1: Kielelezo S2B).
Katika kijiji kilicho na malaria nchini Ethiopia, ufanisi wa mchanganyiko wa sintetiki wa mkojo wa ng'ombe wa saa 24 katika kuvutia mbu chini ya hali ya shamba ulitathminiwa kwa muda wa usiku kumi (Mchoro 6A). Jumla ya mbu 4,861 walikamatwa na kutambuliwa, ambapo 45.7% walikuwa Anthropus.gambias pheles18. Asilimia 35.4 walikuwa Culex spp.(Faili la ziada 1: Jedwali S1).Anopheles arabinis ndiye mwanachama pekee wa aina ya An.Gambian aliyetambuliwa na uchambuzi wa PCR. Kwa wastani, mbu 320 walikamatwa kwa usiku mmoja, wakati ambapo mitego yenye mchanganyiko wa chambo ya syntetisk ilinasa mbu zaidi kuliko mchanganyiko wa mitego 6 = χ9. 170.0, p <0.0001) .Mitego isiyo na chambo iliwekwa kwenye kila moja ya usiku tano za udhibiti mwanzoni, katikati, na mwisho wa jaribio.Nambari sawa za mbu zilinaswa katika kila jozi ya mitego, ikionyesha kutokuwa na upendeleo kati ya nyumba (χ2 (0, 1665) > 0 0 - 1 × 1 × 1 na 0 9 × 1 × 1 × 1 na 0 9 × 1 p. kipindi cha utafiti.Ikilinganishwa na mitego ya kudhibiti, idadi ya mbu walionaswa kwenye mitego iliyo na mchanganyiko wa syntetisk iliongezeka kwa kiasi kikubwa: kutafuta mwenyeji (χ2 (0, 2107) = 138.7, p <0.0001), kulisha damu hivi karibuni (χ2 (0, 650) = 32.2, p <20) = χ20,0 = 32.2, p <20 8, 0 = 0, 0 = 0. 6.27, p = 0.0123; Faili la ziada 1: Jedwali S1).Hii pia inaonekana katika jumla ya idadi ya mbu walionaswa: mwenyeji wanaotafuta > kunyonya damu > wajawazito > nusu wajawazito > dume.
Tathmini ya ufanisi wa mchanganyiko wa harufu ya mkojo wa ng'ombe wa saa 24. Majaribio ya shamba yalifanyika kusini-kati mwa Ethiopia (ramani), karibu na mji wa Maki (weka), kwa kutumia Kituo cha Kudhibiti Magonjwa (CDC) mtego mwepesi (kulia) katika nyumba zilizooanishwa, na muundo wa mraba wa Kilatini (picha ya angani ya CDC na picha ya kike inayovutia ya CDC) (A-traspheles). arabesques (B), lakini sio Anopheles farroes (C), kwa namna tofauti, athari inayotegemea hali ya kisaikolojia. Kwa kuongezea, mitego hii ilinasa idadi iliyoongezeka ya mbu mwenyeji wa Culex.(D) Ikilinganishwa na udhibiti.Nyumba zilizo upande wa kushoto zinawakilisha faharisi ya wastani ya uteuzi wa mbu walionaswa kwa jozi ya chambo cha kunukia (Nyumba ya kijani) na kudhibiti chambo cha kunukia (Nyumba ya kijani) na bait ya kudhibiti 0 (kalamu ya kijani). kulia wakilisha fahirisi ya wastani ya uteuzi katika jozi za mitego ya kudhibiti (wazi; N = 5). ).Nyota huonyesha viwango vya umuhimu wa takwimu (*p = 0.01 na ***p <0.0001)
Aina hizi tatu zilinaswa kwa njia tofauti katika mitego iliyo na mchanganyiko wa sanisi.Kutafuta mwenyeji (χ2(1, 1345) = 71.7, p <0.0001), ulishaji wa damu (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) na mimba (χ2(1, 1, 1, 1, 4 = 18) .arabiensis ilinaswa kwenye mtego ikitoa mchanganyiko wa sintetiki (Kielelezo 6B), wakati kiasi cha An hakikutofautiana.Pharoensis katika hali tofauti za kisaikolojia zilipatikana (Mchoro 6C). Kwa Culex, ni ongezeko kubwa tu la idadi ya mbu wanaotafuta majeshi ilipatikana katika mitego iliyopigwa na χ29 (mchanganyiko wa synthetic) = 19 = 1 = χ29 = 1, p. 0.0004; Mtini. 6D), ikilinganishwa na mitego ya kudhibiti.
Mitego ya chambo mwenyeji iliyoko nje ya maeneo yanayoweza kuzalishwa kati ya maeneo ya kuzaliana na jamii za mashambani nchini Ethiopia ilitumika kutathmini kama mbu wa malaria hutumia harufu ya mkojo wa ng'ombe kama kiashiria cha makazi ya mwenyeji. Kwa kukosekana kwa dalili za mwenyeji, joto, pamoja na au bila uwepo wa harufu ya mkojo wa ng'ombe, hakuna mbu aliyekamatwa (Faili la Ziada 1: Kielelezo, na uwepo wa joto la juu la mkojo wa ng'ombe). mbu walivutiwa na kukamatwa, ingawa kwa idadi ndogo, bila kujali umri wa mkojo (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; Faili la ziada 1: Kielelezo S3). Kinyume chake, udhibiti wa maji haukukamata mbu wa malaria kwa joto la juu (Faili ya Ziada 1: Kielelezo S3).
Mbu wa malaria hupata na kusambaza misombo iliyo na nitrojeni kupitia ulishaji wa fidia kwenye mkojo wa ng'ombe (yaani, madimbwi) ili kuboresha sifa za historia ya maisha, sawa na wadudu wengine [2, 4, 24, 25, 26]. kwa nyumba za mashambani na maeneo ya kuzaa. Mbu wa kike hupata rasilimali hii kwa kunusa na wanaweza kudhibiti unywaji wa misombo ya nitrojeni kwenye mkojo, ikiwa ni pamoja na urea, sehemu kuu ya nitrojeni katika mkojo [15, 16]. mbu, pamoja na maisha na sifa za uzazi za watu wanaolishwa damu wakati wa mzunguko wa kwanza wa gonadotropiki. Kwa hiyo, kuchanganya mkojo kunachukua jukumu muhimu la lishe kwa waenezaji wa malaria ambao wamefungwa kama watu wazima wenye utapiamlo [8], kwani huwapa mbu wa kike uwezo wa kupata misombo muhimu ya nitropiki kwa kushiriki katika hatari ndogo ya kulisha maisha ya jike. matarajio, shughuli na pato la uzazi, yote ambayo huathiri uwezo wa vekta.Zaidi ya hayo, tabia hii inaweza kuwa lengo la programu za usimamizi wa vekta za baadaye.
Muda wa kutuma: Jul-07-2022
