Javascript imezimwa katika kivinjari chako kwa sasa.Baadhi ya vipengele vya tovuti hii havitafanya kazi wakati javascript imezimwa.
Sajili kwa maelezo yako mahususi na dawa mahususi inayokuvutia na tutalingana na maelezo unayotoa na makala katika hifadhidata yetu pana na kukutumia nakala ya PDF mara moja.
作者 Stella S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Ficheravia, 16 Chuo Kikuu cha Madawa ya Caperitania, 16 Chuo Kikuu cha Catalia na Chuo Kikuu cha Maperitania, 16. , Catania, 95123, Italia;2 Kituo cha Oncology ya Majaribio na Hematology, AOU Policlinico "G.Rodolico - San Marco", Catania , 95123, Italia;3 Oncology ya Matibabu, AOU Policlinico “G.Rodolico - San Marco”, Catania, 95123, Italia;4 Medical Genetics, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, Italia;5 Dawa Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Italia;6 Idara ya Sayansi ya Biomedical na Bioteknolojia, Chuo Kikuu cha Catania, Jenetiki ya Matibabu, Catania, Italia, 95123;Taasisi ya Utafiti ya 7Oasi-IRCS, Troina, 94018, Italia Mawasiliano: Stefania Stella, simu +39 095 378 1946, barua pepe [email protected];[email protected] Kusudi: Mabadiliko ya vijidudu katika BRCA1 na BRCA2 na kuanzisha saratani ya matiti (BC), ovari (OC) na nyingine zinazohusiana na hatari ya maisha yote ya saratani. Upimaji wa jeni la BRCA ni muhimu katika kutathmini hatari ya mtu binafsi, na pia kutafuta mbinu za kuzuia katika wabebaji wa afya na urekebishaji wa matibabu kwa wagonjwa wa saratani. Lahaja za pathogenic za BRCA katika familia za Sicily, tafiti zinazolenga hasa idadi ya watu katika Sicily ya mashariki hazipo.Lengo la utafiti wetu lilikuwa kuchunguza matukio na usambazaji wa mabadiliko ya viini vya pathogenic ya BRCA katika kundi la wagonjwa wa BC kutoka Sicily mashariki na kutathmini uhusiano wao na sifa maalum za BC kwa kutumia kizazi kijacho cha upanuzi wa viwango vya juu vya maisha na matokeo ya 3. Wagonjwa 5 (9%) walikuwa na lahaja ya BRCA ya pathogenic, 17 (49%) katika BRCA1 na 18 (51%) katika BRCA2.BRCA1 mabadiliko yameenea kwa wagonjwa wa BC tatu-hasi, ambapo mabadiliko ya BRCA2 yanajulikana zaidi kwa wagonjwa wa luminal BC. Ikilinganishwa na wasio wabebaji, watu walio na viwango vya juu zaidi vya matokeo ya BRCA hutoa muhtasari wa juu zaidi wa uvimbe. Hali ya mabadiliko ya BRCA kwa wagonjwa wa BC kutoka Sicily mashariki na kuthibitisha jukumu la uchanganuzi wa NGS katika kutambua wagonjwa walio na BC ya urithi. Kwa ujumla, data hizi zinalingana na ushahidi wa awali unaounga mkono uchunguzi wa BRCA kwa ajili ya kuzuia na matibabu sahihi ya saratani katika wabebaji wa mabadiliko.
Saratani ya matiti (BC) ndiyo ugonjwa mbaya zaidi duniani kote na saratani hatari zaidi kwa wanawake.1 Vipengele vya kibiolojia vinavyobainisha ubashiri wa BC na tabia ya kimatibabu vimechunguzwa kwa kina na kufafanuliwa kwa muda baada ya muda. Kwa hakika, viashirio kadhaa vya urithi vinatumika kwa sasa kuainisha BC katika aina ndogo tofauti za molekuli.Nazo ni estrojeni (ER) na/au kipokezi cha ukuaji wa projesteroni ya binadamu, epiplojeni ya projesteroni ya binadamu index ya mgawo Ki-67 na daraja la tumor (G) .2 Mchanganyiko wa vigezo hivi vilibainisha makundi ya BC yafuatayo: 1) Tumors ya Luminal, inayoonyesha ER na / au PgR kujieleza, ilihesabu 75% ya BCs. Uvimbe huu uligawanywa zaidi katika Luminal A, wakati Ki-67 ilikuwa chini ya 20% na HER2 hasi, na Luminal B, wakati 0 ya uwepo wa Ki-6 na juu ya HER 2 bila kujali kiwango cha juu cha HER 2 na kiwango cha juu cha HER 2. index;2) uvimbe wa HER2+ ambao ni ER na PgR hasi lakini huonyesha ukuzaji wa HER2. Kikundi hiki kinachukua 10% ya uvimbe wote wa matiti;3) Saratani ya matiti-hasi mara tatu (TNBC), ambayo haionyeshi usemi wa ER na PgR na ukuzaji wa HER2, huchangia takriban 15% ya saratani za matiti.2-4
Miongoni mwa aina hizi ndogo za BC, daraja la tumor na fahirisi ya kuenea huwakilisha alama za kibayolojia ambazo zinahusishwa moja kwa moja na kwa kujitegemea na ukali wa tumor na ubashiri.5,6
Mbali na vipengele vya kibiolojia vilivyotajwa hapo juu, jukumu la mabadiliko ya urithi wa urithi na kusababisha maendeleo ya BC limezidi kuwa muhimu zaidi ya miaka michache iliyopita.7 Takriban 1 kati ya uvimbe wa matiti 10 hurithi kutokana na mabadiliko ya vijidudu katika jeni maalum. K2, PALB2, RAD51C, na RAD51D) hasa inayohusika na urithi wa BC. Miongoni mwa jeni hizi, BRCA1 na BRCA2 (ambayo baadaye inajulikana kama BRCA1/2) ilionyesha uhusiano mkubwa zaidi na maendeleo ya uvimbe wa matiti. ectal, na melanoma.Kuanzia umri wa miaka 13 hadi 80, matukio ya jumla ya BC ni 72% kwa wanawake walio na lahaja ya pathogenic ya BRCA1 (PV) na 69% kwa wanawake walio na BRCA2 PV.14.
Hasa, uchapishaji wa hivi majuzi unapendekeza kwamba hatari ya BC inategemea aina ya PV. Kwa kweli, ikilinganishwa na tofauti za upunguzaji wa pathogenic, lahaja za missense zinazong'aa, hasa katika jeni la BRCA1, zinahusishwa na hatari iliyopunguzwa ya BC, hasa kwa wanawake wazee.15
Uwepo wa BRCA1 au BRCA2 PV ulihusishwa na vipengele tofauti vya kibaiolojia na kiafya.16,17 BC zinazohusishwa na BRCA1 huwa na uchokozi wa kimatibabu, hazitofautianishwi sana, na huenea sana. Uvimbe huu kwa kawaida huwa na hasi mara tatu na huwa na umri mdogo wa kuanza.Vivimbe vinavyotokea kwa wagonjwa walio na viwango tofauti vya wastani na vitofauti vya kawaida vya BRCA2 hutofautiana. uvimbe wa se hujulikana zaidi katika lumen B na kwa kawaida hutokea kwa watu wazima.16-18 Hasa, mabadiliko katika BRCA1 na BRCA2 huongeza usikivu kwa matibabu maalum, ikiwa ni pamoja na chumvi za platinamu na dawa zinazolengwa kama vile vizuizi vya poly(ADP-ribose) polymerase (PARPi).19,20
Katika miaka michache iliyopita, utekelezaji wa mpangilio wa kizazi kijacho (NGS) katika mazoezi ya kimatibabu umewezesha idadi inayoongezeka ya wagonjwa wa BC kufanyiwa uchunguzi wa molekuli kwa dalili za kuathiriwa na saratani, ikiwa ni pamoja na BRCA1/2.21 Sanjari na hayo, ufafanuzi unaozingatia vigezo sahihi kuhusu historia ya familia , demografia, na sifa za kiafya ili kutambua vyema watu binafsi2322222222222222222222222222222422222222 Uchunguzi wa BRCA1/2 katika makundi mahususi, ukiangazia tofauti katika maeneo ya kijiografia.24–27 Ingawa kuna ripoti kuhusu kundi la BC magharibi mwa Sicily, data chache zinapatikana kuhusu uchunguzi wa BRCA1/2 katika wakazi wa Sicily mashariki.28,29
Tunaelezea hapa matokeo ya uchunguzi wa viini vya BRCA1/2 kwa wagonjwa wa BC kutoka mashariki mwa Sicily, ikihusisha zaidi uwepo wa mabadiliko ya BRCA1 au BRCA2 na sifa kuu za kiafya za uvimbe huu.
Utafiti wa rejea ulifanyika katika "Kituo cha Majaribio ya Oncology na Hematology" katika Hospitali ya Policlinico.Rodolico - San Marco huko Catania.Kuanzia Januari 2017 hadi Machi 2021, jumla ya wagonjwa 455 wenye saratani ya matiti na ovari, melanoma, kongosho au tezi ya kibofu walitumwa kwa uchunguzi wetu wa uchunguzi wa kijenetiki kwa uchunguzi wa kimaabara wa BRCA2. lsinki, na washiriki wote walitoa idhini iliyoandikwa kabla ya uchanganuzi wa molekuli.
Sifa za histolojia na za kibayolojia (ER, PgR, hadhi ya HER2, Ki-67, na daraja) za BC zilitathminiwa kwa sampuli za msingi za biopsy au upasuaji, kwa kuzingatia vipengele vikali vya uvimbe pekee.Kulingana na sifa hizi, BC ziliainishwa kama ifuatavyo: luminal A (ER+ na/au PgR+, HER2-, HER20, P+R, HER2-, HER20, HER2, P-R, 7, HER2-, HER2-R, HER2, HER2, P-R, 7, HER2, HER2, Pg-R, 7). -67≥20%), mwangaza wa B-HER2+ (ER na/au PgR+, HER2+), HER2+ (ER na PgR-, HER2+) au hasi mara tatu (ER na PgR-, HER2-).
Kabla ya kutathmini hali ya mabadiliko ya BRCA1 na BRCA2, timu ya taaluma mbalimbali ikiwa ni pamoja na daktari wa saratani, mtaalamu wa maumbile, na mwanasaikolojia walifanya mashauriano ya kinasaba ya uvimbe kwa kila mgonjwa ili kubaini kuwepo kwa BRCA1 na/au BRCA1.au watu walio na hatari kubwa ya PV katika jeni la BRCA2. Uchaguzi wa mgonjwa ulifanywa kulingana na miongozo ya Jumuiya ya Kiitaliano ya Oncology ya Matibabu (AIOM) na mapendekezo ya eneo la Sicilian.30,31 Vigezo hivi ni pamoja na: (i) historia ya familia ya lahaja zinazojulikana za pathogenic katika jeni za kuathiriwa (kwa mfano, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) wanaume walio na BC;(iii) wale walio na BC na OC;(iv) wanawake walio na BC chini ya miaka 36, ​​TNBC chini ya miaka 60, au BC baina ya miaka 50;(v) historia ya matibabu ya kibinafsi ya KK chini ya miaka 50 na angalau jamaa mmoja wa shahada ya kwanza: (a) KK chini ya miaka 50;(b) OC asiye na mucinous na asiye na mipaka wa umri wowote;(c) BC baina ya nchi mbili;(d) BC kiume;(e) saratani ya kongosho;(f) saratani ya tezi dume;(vi) mbili au zaidi Historia ya kibinafsi ya BC > miaka 50 na historia ya familia ya BC, OC, au saratani ya kongosho kwa jamaa ambao ni jamaa wa daraja la kwanza (pamoja na jamaa ambao yeye ni jamaa wa daraja la kwanza);(vii) Historia ya kibinafsi ya OC na angalau jamaa mmoja wa shahada ya kwanza: (a) KK chini ya miaka 50;(b) NOC;(c) BC baina ya nchi mbili;(d) BC kiume;(vii) mwanamke aliye na OC ya hali ya juu ya serous.
Sampuli ya damu ya pembeni ya mililita 20 ilipatikana kutoka kwa kila mgonjwa na kukusanywa kwenye mirija ya EDTA (BD Biosciences). DNA ya jenasi ilitengwa kutoka kwa sampuli za damu nzima za mililita 0.7 kwa kutumia Kifurushi cha Kutenga cha QIAsymphony DSP DNA Midi (QIAGEN, Hilden, Italia) kulingana na maagizo ya mtengenezaji na kupitishwa kwa 3. , MA, USA) Fanya ukadiriaji.Uboreshaji lengwa na utayarishaji wa maktaba hufanywa na Mpishi wa Uchunguzi wa Utafiti wa Oncomine™ BRCA, tayari kupakiwa kwenye Kifaa cha Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 kwa utayarishaji wa kiotomatiki wa maktaba kulingana na maagizo ya mtengenezaji. Seti hii ina vidimbwi viwili vya utangulizi vya PCR ambavyo vinaweza kutumika kusoma BRCA7 zote (N5M0030. ) jeni. Kwa ufupi, 15 µL ya kila sampuli iliyoyeyushwa ya DNA (10 ng) iliongezwa kwenye sahani zenye barcoded kwa ajili ya utayarishaji wa maktaba na vitendanishi vyote na vifaa vya matumizi vilipakiwa kwenye chombo cha Ion Chef™. Maandalizi ya kiotomatiki ya maktaba na ujumuishaji wa sampuli za maktaba yenye msimbo ulifanyika kwenye chombo cha Ion Chef™. Idadi ya maktaba zilizotayarishwa kwa kutumia Quor 3 za Fish® kisha ziliandaliwa. cientific, Waltham, MA, USA) kulingana na maagizo ya mtengenezaji. Hatimaye, maktaba huunganishwa kwa uwiano sawa katika sampuli za sampuli za mirija ya maktaba ya Ion Chef™ (mirija yenye barcoded) na kupakiwa kwenye chombo cha Ion Chef™. Mfuatano ulifanywa kwa kutumia Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific) kwa kutumia zana ya Sayansi ya Fisher 5 (Thermo Fisher Scientific) (Thermo Fisher Scientific) Kisayansi).Uchambuzi wa data ulifanywa na Amplicon Suite (SmartSeq srl) na Ion Reporter Software.
Aina zote za majina zilifuata miongozo ya sasa ya Muungano wa Tofauti wa Jeni za Binadamu, unaopatikana mtandaoni (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). Umuhimu wa kimatibabu wa vibadala vya BRCA1/2 ulifafanuliwa kwa kutumia uainishaji wa Muungano wa Kimataifa wa ENIGMA (Mtandao Unaotegemea Ushahidi kwa Ukalimani wa Vijidudu vya Mutantenig://org/ kama vile ARUP, BRCAEXCHANGE , ClinVar, IARC_LOVD, na UMD. Uainishaji unajumuisha kategoria tano tofauti za hatari: benign (aina ya I), ambayo ina uwezekano wa kuwa mbaya (aina ya II), lahaja la umuhimu usio na uhakika (VUS, kitengo cha III), uwezekano wa kusababisha magonjwa (aina ya IV), na pathogenics kwenye muundo wa proteni na utendakazi wa aina ya V. upatikanaji wa hifadhidata 30.32
Ili kuangazia umuhimu wa kiafya unaowezekana kwa kila VUS, algoriti zifuatazo za utabiri wa hesabu za protini zilitumika: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:// /genetics.bwh.harvard.edu/pph2/G) na Align. d_input.php).Vibadala vilivyoainishwa kama darasa la 1 na 2 vilichukuliwa kuwa vya aina ya porini.
Mfuatano wa Sanger ulithibitisha kuwepo kwa kila kigezo cha pathogenic. Kwa ufupi, jozi ya vianzio mahususi iliundwa kwa kila kibadala kilichotambuliwa kwa kutumia BRCA1 na BRCA2 mfuatano wa marejeleo ya jeni (NG_005905.2, NM_007294.3 na NG_012772.3, NM9.00, NM9.00, mfululizo wa PC, NM_000, ilitekelezwa kwa heshima). kung'aa.
Wagonjwa waliobainika kuwa hawana jeni la BRCA1/2 walijaribiwa kwa ukuzaji wa uchunguzi unaotegemea ligation (MLPA) kulingana na maagizo ya mtengenezaji ili kutathmini uwepo wa upangaji upya wa jeni kubwa (LGR). Kwa ufupi, sampuli za DNA hazibadilishwi na hadi 60 BRCA1 na BRCA2 zinatumika kuchunguza DNA mahususi, kila jeni mahususi nyukleotidi kwa urefu.Bidhaa za ukuzaji wa probe, zinazojumuisha seti ya kipekee ya amplikoni za PCR, kisha zilichanganuliwa kwa electrophoresis ya kapilari na programu ya Cofalyser.Net kwa kushirikiana na jedwali zinazofaa za kundi mahususi za Cofalyser (www.mrcholland.com).
Vigezo vilivyochaguliwa vya kiafya (daraja la histolojia na faharasa ya uenezi wa Ki-67%) vilihusishwa na kuwepo kwa BRCA1/2 PV, iliyokokotwa kwa kutumia programu ya Prism v. 8.4 kwa kutumia jaribio kamili la Fisher ikichukua kuwa thamani ya p <0.05 ni muhimu.
Kati ya Januari 2017 na Machi 2021, wagonjwa 455 walichunguzwa ili kubaini mabadiliko ya viini vya BRCA1/2. Upimaji wa mabadiliko ulifanywa katika Kituo cha Majaribio cha Oncology na Hematology cha Hospitali ya Policlinico. Kulingana na mwongozo wa Sicilian (http://www.gurs.regione.sicilia.it.0m. 2020), Rodolico ya Catania - San Marco” kwa ujumla, wagonjwa 389 Kulikuwa na saratani ya matiti, saratani ya ovari 37, saratani ya kongosho 16, saratani ya kibofu 8 na melanoma 5.Usambazaji wa wagonjwa kulingana na aina ya saratani na matokeo ya uchambuzi umeonyeshwa kwenye Mchoro 1.
Kielelezo cha 1 kinaonyesha chati ya mtiririko inayoonyesha muhtasari wa utafiti. Wagonjwa wenye uvimbe wa matiti, melanoma, kongosho, kibofu, au ovari walijaribiwa kubaini mabadiliko katika jeni za BRCA1 na BRCA2.
Vifupisho: PVs, tofauti ya pathogenic;VUS, lahaja ya umuhimu usio na uhakika;WT, mlolongo wa aina ya mwitu BRCA1/2.
Tuliangazia masomo yetu kuhusu vikundi vya saratani ya matiti. Wagonjwa walikuwa na umri wa wastani wa miaka 49 (miaka 23-89) na wengi wao walikuwa wanawake (n=376, au 97%).
Kati ya masomo haya, 64 (17%) walikuwa na mabadiliko ya BRCA1/2 na wote walikuwa wanawake. Thelathini na tano (9%) walikuwa na PV na 29 (7.5%) walikuwa na VUS.Kumi na saba (48.6%) ya lahaja 35 za pathogenic zilitokea katika BRCA1 na 18 (51.4%) katika BRCA2, huku 51.4% katika BRCA2, ilhali 5 VCA 2% 28 (BRCA2%) na 5 BRCA2% 2 ilitokea katika . (Kielelezo 1 na 2).LGR haikuwepo katika uchanganuzi wa MLPA.
Kielelezo 2. Uchambuzi wa mabadiliko ya BRCA1 na BRCA2 katika wagonjwa wa saratani ya matiti 389. (A) Usambazaji wa anuwai za pathogenic (PV) (nyekundu), anuwai za umuhimu usio na uhakika (VUS) (machungwa), na WT (bluu) katika wagonjwa 389 wa saratani ya matiti;(B) Wagonjwa 389 wa saratani ya matiti Thelathini na tano (9%) walikuwa na BRCA1/2 variants pathogenic (PVs).Kati yao, 17 (48.6%) walikuwa BRCA1 PV flygbolag (nyekundu nyeusi) na 18 (51.4%) walikuwa BRCA2 flygbolag (nyekundu nyekundu);(C) 29 (7.5%) ya masomo 389 yalibeba VUS, 5 (17.2%) jeni za BRCA1 (rangi ya chungwa) na 24 (82.8%) jeni za BRCA2 (chungwa nyepesi).
Vifupisho: PVs, tofauti ya pathogenic;VUS, lahaja ya umuhimu usio na uhakika;WT, mlolongo wa aina ya mwitu BRCA1/2.
Kisha tukachunguza kuenea kwa aina ndogo za molekuli za BC kwa wagonjwa walio na BRCA1/2 PV. Usambazaji ulijumuisha mwangaza wa A 2 (5.7%), 15 (42.9%) luminal B, 3 (8.6%) luminal B-HER2+, 2 (5.7%) HER2+ na 13 (37.1%) kati ya wagonjwa wa TNBC 2 (37.1%) wa wagonjwa wa TNBC, 5-5. , 2 (11.8%) walikuwa na ugonjwa wa HER2+, na 10 (58.8%) walikuwa na TNBC.Vivimbe bila mabadiliko ya BRCA1 vilikuwa aidha luminal A au luminal B-HER2+ (Kielelezo 3).Katika kikundi cha BRCA2-chanya, 10 (55.6%) uvimbe ulikuwa luminal B, 3 (16) 16 BBC (16%) na BTN 16%. .1%) walikuwa mwanga wa A (Kielelezo 3).Hakuna uvimbe wa HER2+ uliokuwepo katika kundi hili. Kwa hivyo, mabadiliko ya BRCA1 yameenea kwa wagonjwa wa TNBC, ilhali mabadiliko ya BRCA2 yanaonekana zaidi katika watu binafsi wa lumen B.
Kielelezo 3 Kuenea kwa aina ndogo za saratani ya matiti kwa wagonjwa walio na tofauti za pathogenic katika BRCA1 na BRCA2.Histograms zinazoonyesha usambazaji wa BRCA1- (nyekundu nyeusi) na BRCA2- (nyekundu nyepesi) PVs kati ya aina ndogo za molekuli za wagonjwa wa saratani ya matiti.Nambari zilizoripotiwa ndani ya kila sanduku zinawakilisha asilimia ya wagonjwa wenye BRCA1 ya saratani ya matiti PV1 na BRCA2 ya kila aina ya saratani ya matiti.
Vifupisho: PVs, tofauti ya pathogenic;HER2+, kipokezi cha ukuaji wa epidermal ya binadamu 2 chanya;TNBC, saratani ya matiti-hasi mara tatu.
Baadaye, tulitathmini aina na ujanibishaji wa jeni wa BRCA1 na BRCA2 PVs.Katika BRCA1 PV, tuliona lahaja 7 za nyukleotidi (SNVs), ufutaji 6, urudufishaji 3 na uingizaji 1. Ni mabadiliko moja tu (c.5522delG) yanawakilisha ugunduzi mpya wa kawaida 530 wote P530 P530. 9delCTAAT. Mabadiliko haya yanahusisha ufutaji wa nyukleotidi tano (CTAAT) katika BRCA1 exon 15, na kusababisha uingizwaji wa leucine ya amino asidi na tyrosine kwenye kodoni 1679, na kutokana na mabadiliko ya fremu yenye njia mbadala ya kusimamisha kodoni iliyotabiriwa hadi kupunguzwa kwa protini ya mapema, hakuna kisa kimoja kilichoripotiwa katika kupunguzwa kwa protini ya mapema. eneo la makubaliano ya tovuti ya splice (c.4357+1G>T) (Jedwali 1).
Kuhusu BRCA2 PV, tuliona ufutaji 6, SNV 6 na marudio 2. Hakuna mabadiliko yoyote kati ya hayo yaliyopatikana ni riwaya. Mabadiliko matatu yalijirudia katika idadi ya watu wetu, c.428dup na c.8487+1G>A iliyozingatiwa katika masomo 3, ikifuatiwa na c.5851_5854 ubadilishanaji wa mara mbili na kurudiwa kwa C.TT na kurudiwa kwa c. 5 kati ya BRCA2, iliyotabiriwa kusimba protini iliyopunguzwa, isiyofanya kazi. The c.8487+1G>Mbadiliko hutokea katika eneo la ndani la BRCA2 intron 19 (± 1,2) na huathiri mfuatano wa makubaliano ya kuunganisha, na kusababisha kubadilika kwa mgawanyiko na kusababisha absent58protein_185 ya protini isiyo ya kawaida. hadi ufutaji wa nyukleotidi 4 kutoka nafasi za nyukleotidi 5851 hadi 5854 katika exoni ya 10 ya jeni la BRCA2 na kusababisha mabadiliko ya kitafsiri yenye kodoni ya kusimamisha mbadala iliyotabiriwa (p.S1951WfsTer). Hasa, kama ilivyoripotiwa hapo awali, mabadiliko yote mawili c.834G na mgonjwa C.831G yaligunduliwa. Mabadiliko ya kwanza yanahusisha uingizwaji wa adenosine (A) katika BRCA2 exon 7 na guanini (G) iliyo na nyukleotidi na kusababisha mabadiliko ya valine hadi isoleusini kwenye kodoni 211, isoleucine Amino asidi ni amino asidi yenye sifa zinazofanana sana. Mabadiliko haya huathiri mRNA ya kawaida kuungana. Matokeo ya pili katika eneo la amino la thyme ni lahaja ya pili katika sehemu ya atrojeni ya A. 13 ya usimbaji wa jeni BRCA2.Badiliko la c.7008-2A>T linaweza kutoa nakala nyingi za urefu tofauti. Zaidi ya hayo, katika kundi la BRCA2 PVs, mabadiliko 4 kati ya 18 (22.2%) yalikuwa ya ndani.
Kisha tulipanga mabadiliko mabaya ya BRCA1/2 katika vikoa vya kazi na maeneo ya kumfunga protini (Mchoro 4). Katika jeni la BRCA1, 50% ya PVs zilipatikana katika eneo la kansa ya matiti (BCCR), wakati 22% ya mabadiliko yalipatikana katika eneo la kansa ya ovari (OCCR) (Mchoro 30 BRCA57 katika eneo la BRCA 42A). na 42.8% ya mabadiliko yalipatikana katika OCCR (Mchoro 4B). Kisha, tulitathmini eneo la PV ndani ya BRCA1 na BRCA2 vikoa vya protini. Kwa protini ya BRCA1, tulipata PV tatu katika kitanzi na vikoa vya coil, na mabadiliko mawili katika kikoa cha BRCT (Kwa kikoa cha BRCA, kikoa cha 42 cha BRC kilichorudiwa kwa BRCA 4A). intronic na 3 mabadiliko ya kigeni walikuwa wanaona katika oligo/oligosaccharide-binding (OB) na mnara (T) domains (Kielelezo 4B).
Mchoro wa 4 Uwakilishi wa kimkakati wa protini za BRCA1 na BRCA2 na ujanibishaji wa anuwai za pathogenic. Takwimu hii inaonyesha usambazaji wa vibadala vya BRCA1 (A) na BRCA2 (B) vya pathogenic kwa wagonjwa wa saratani ya matiti. Mabadiliko ya kigeni yanaonyeshwa kwa rangi ya samawati, huku vibadala vya intronic vinaonyeshwa kwa rangi ya chungwa. Urefu wa pau unawakilisha idadi ya kesi. Protini ya BRCA21 iliyoripotiwa.1 BRCA21 ya protini iliyoripotiwa. kikoa cha kitanzi (RING) na mfuatano wa ujanibishaji wa nyuklia (NLS), kikoa-coil iliyoviringishwa, kikoa cha nguzo cha SQ/TQ (SCD), na kikoa cha BRCA1 C-terminal (BRCT).(B) Protini ya BRCA2 ina marudio nane ya BRC, kikoa kinachofunga DNA chenye kikoa cha helical (Helical), kikoa cha oligo/olingingi (TQ) na ahaharidi ya oligonucleotidi, oligonucleotidi ya BRCA2 na T. NLS kwa upande wa C. Maeneo yanayoitwa Eneo la Nguzo la Saratani ya Matiti (BCCR) na Eneo la Nguzo la Saratani ya Ovari (OCCR) yanaonyeshwa chini.*Inawakilisha mabadiliko yanayoamua kodoni za kuacha.
Kisha tukachunguza vipengele vya kiafya vya BC ambavyo vinaweza kuhusiana na kuwepo kwa BRCA1/2 PV. Rekodi za kliniki kamili zilipatikana kwa wagonjwa 181 BRCA1/2-hasi (wasio wabebaji) na wabebaji wote (n = 35). Kulikuwa na uwiano kati ya kiwango cha kuenea kwa tumor na daraja.
Tulikokotoa usambazaji wa Ki-67 kulingana na wastani wa kundi letu (25%, masafa ya <10-90%). Mada zilizo na Ki-67 <25% zilifafanuliwa kuwa "chini Ki-67″, ilhali watu walio na thamani ≥ 25% walizingatiwa "Ki-67" ya juu ilizingatiwa "Ki-67″.Tofauti muhimu0 (CAp-60) kati ya zisizo muhimu (CAp-607) zilipatikana. flygbolag (Mchoro 5A).
Kielelezo cha 5 Uwiano wa Ki-67 na usambazaji wa daraja kwa wanawake wa saratani ya matiti walio na na wasio na BRCA1 na BRCA2 PVs. (A) Kisanduku kinachoonyesha maadili ya wastani ya Ki-67 katika wagonjwa 181 ambao sio wabebaji wa BC dhidi ya BRCA1 (18) au BRCA2 (17) PV. wagonjwa wa saratani katika vikundi vya daraja la histological (G2 na G3) kulingana na BRCA1 na BRCA2 mutation status (masomo ya WT, BRCA1 na BRCA2 PVs flygbolag).
Vile vile, tulikagua ikiwa daraja la uvimbe linahusiana na uwepo wa BRCA1/2 PV. Kwa kuwa G1 BC haikuwepo katika idadi ya watu wetu, tuligawanya wagonjwa katika makundi mawili (G2 au G3). Kulingana na matokeo ya Ki-67, uchambuzi ulifunua uwiano mkubwa wa kitakwimu kati ya daraja la uvimbe na mabadiliko ya BRCA1, yenye sehemu ya juu zaidi ya 01 ya kisababishi cha uvimbe cha 0BRCA ikilinganishwa na 01. ) (Kielelezo 5B).
Maendeleo katika teknolojia ya mpangilio wa DNA yamewezesha maendeleo ambayo hayajawahi kushuhudiwa katika upimaji wa kijeni wa BRCA1/2, kukiwa na athari muhimu kwa wagonjwa walio na historia ya familia ya saratani. Hadi sasa, takriban lahaja 20.000 za BRCA1/2 zimetambuliwa na kuainishwa kulingana na Jumuiya ya Kiamerika ya Jenetiki ya Kimatibabu 35 na mfumo wa ENIGMA unajulikana kote kote. maeneo ya picha.37 Ndani ya Italia, kiwango cha BRCA1/2 PVs kilianzia 8% hadi 37%, ikionyesha tofauti kubwa ya ndani ya nchi.38,39 Ikiwa na wakazi karibu milioni 5, Sicily ni eneo la tano kwa ukubwa nchini Italia kwa idadi ya wakazi.
Utafiti wetu ni mojawapo ya ripoti za kwanza kuhusu matukio ya BRCA1/2 PV kwa wagonjwa wa BC mashariki mwa Sicily.28 Tuliangazia uchanganuzi wetu kwenye BC, kwa kuwa huu ndio ugonjwa unaojulikana zaidi katika kundi letu.
Wakati wa kupima wagonjwa wa 389 BC, 9% walibeba BRCA1/2 PVs, zilizosambazwa sawasawa kati ya BRCA1 na BRCA2. Matokeo haya yanawiana na yale yaliyoripotiwa hapo awali katika idadi ya watu wa Italia.28 Jambo la kushangaza ni kwamba, 3% (13/389) ya kundi letu walikuwa wanaume. Kiwango hiki ni cha juu zaidi kuliko inavyotarajiwa kwa saratani ya matiti ya wanaume (1% 4 BR) kulingana na uteuzi wetu wa saratani ya matiti ya wanaume BC (1% 4 ya BR). Hata hivyo, hakuna hata mmoja wa wanaume hawa aliyeanzisha BRCA1/2 PV, kwa hivyo walikuwa watahiniwa wa uchanganuzi zaidi wa molekuli ili kuondoa uwepo wa mabadiliko yasiyo ya kawaida kama vile PALB2, RAD51C na D, miongoni mwa mengine. Vibadala vya umuhimu usio na uhakika vilipatikana katika 7% ya masomo ambayo BRCA2 VUS ilikuwa dhahiri.Hata matokeo haya yanalingana28,41.
Tulipochanganua usambazaji wa aina ndogo za molekuli za BC katika wanawake waliobadilikabadilika BRCA1/2, tulithibitisha uhusiano unaojulikana kati ya TNBC na BRCA1 PV (58.8%) na kati ya B BC na BRCA2 PV (55.6%).
Kisha tunazingatia aina na eneo la BRCA1/2 PV.Katika kundi letu, BRCA1 PV ya kawaida ilikuwa c.5035_5039delCTAAT.Ingawa Incorvaia et al.haikuelezea lahaja hii katika kundi lao la Sicilian, waandishi wengine wameiripoti kama kijidudu BRCA1 PV.34 PV kadhaa za BRCA1 zilipatikana katika kundi letu - k.m c.181T>G, c.514del, c.3253dupA na c.5266dupC - ambazo zimezingatiwa 1BRCA1 mbili katika Siksi>18. G na c.5266dupC) hupatikana kwa kawaida katika Wayahudi wa Ashkenazi wa Ulaya ya Mashariki na Kati (Poland, Czech), Kislovenia, Austrian, Hungarian, Belarusi na Ujerumani ), 44,45 na, nchini Marekani na Argentina, hivi karibuni ilifafanuliwa kama "lahaja ya vijidudu vya kawaida" katika wagonjwa wa Kiitaliano wenye BC na OC51 wagonjwa wa saratani ya matiti ya kaskazini 34cant. katika Palermo na Messina. Inashangaza, hata Incorvaia et al.ilipata lahaja ya c.3253dupA katika baadhi ya familia huko Catania.28 PVs za BRCA2 zinazowakilisha zaidi ni c.428dup, c.5851_5854delAGTT na lahaja ya intronic c.8487+1G>A, ambazo zimeripotiwa kwa undani zaidi 28 kwa mgonjwa katika Palermo aliye na c.52V8 kaya c.52V8 c. kaskazini-magharibi mwa Sicily, hasa katika mikoa ya Trapani na Palermo, ambapo c.5851_5854delAGTT PV ilizingatiwa katika kaya kaskazini-magharibi mwa Sicily.Lahaja ya 8487+1G>A ilikuwa ya kawaida zaidi katika masomo kutoka Messina, Palermo, na Caltanissetta.28 Rebbeck et al.hapo awali ilieleza mabadiliko ya c.5851_5854delAGTT nchini Kolombia.37 Nyingine BRCA2 PV, c.631+1G>A, imepatikana katika BC na wagonjwa wa OC kutoka Sicily (Agrigento, Siracusa na Ragusa).28 Hasa, tuliona kuwepo kwa pamoja kwa lahaja mbili za BRCA2 na lahaja mbili za BRCA2 na 8 c.820 mgonjwa c. , ambayo tulidhani kuwa imetengwa katika hali ya cis, kama ilivyoripotiwa hapo awali.34,46 Mabadiliko haya ya uble ya BRCA2 yanazingatiwa mara kwa mara katika eneo la Italia na yamepatikana kuanzisha kodoni za kusimama kabla ya wakati, kuathiri mgawanyiko wa RNA ya messenger na kusababisha protini ya BRCA2 kushindwa.47,48
Pia tulichora ramani za BRCA1 na BRCA2 PVs katika maeneo ya kuweka OCCR na BCCR ya vikoa vya protini na jeni. Maeneo haya yalielezewa na Rebbeck et al.kama maeneo ya hatari ya kupata saratani ya ovari na matiti, mtawalia.49 Hata hivyo, ushahidi kuhusu uhusiano kati ya eneo la lahaja za viini na hatari ya saratani ya matiti au ovari bado ni ya utata.28,50-52 Katika idadi yetu ya watu, PVs za BRCA1 zilipatikana zaidi katika eneo la BCCR, ilhali PV za BRCA2 zilipatikana kati ya eneo lolote na OCCR ambazo hazikuweza kupatikana. Mikoa ya BCCR na vipengele vya BC. Hii inaweza kuwa kutokana na idadi ndogo ya wagonjwa walio na mabadiliko ya BRCA1/2. Kwa mtazamo wa kikoa cha protini, BRCA1 PVs husambazwa pamoja na protini nzima, na mabadiliko ya BRCA2 yanapatikana kwa upendeleo katika kikoa cha kurudia cha BRC.
Hatimaye, tuliunganisha vipengele vya kiafya vya BC na BRCA1/2 PV. Kwa sababu ya idadi ndogo ya wagonjwa iliyojumuishwa, tulipata tu uwiano mkubwa kati ya Ki-67 na daraja la uvimbe. Ingawa tathmini na tafsiri ya Ki-67 inabakia kuwa na utata, ni hakika kwamba viwango vya juu vya kuenea vinahusishwa na ongezeko la hatari ya kurudi kwa ugonjwa na kupungua kwa "kupungua" kwa "kupungua" na kupungua kwa ugonjwa. Ki-67 ni 20%.Hata hivyo, kiwango hiki hakitumiki kwa idadi yetu ya wagonjwa wa mabadiliko ya BRCA1/2, ambayo ina thamani ya wastani ya Ki-67 ya 25%.Mtindo huu wa viwango vya juu vya Ki-67 unaweza kuelezewa na kuenea kwa kundi letu la luminal B na TNBC, ambapo uvimbe mdogo wa luminal A ulikuwepo. kwa ubashiri wao.53,54 Kutokana na matokeo ya uchanganuzi wetu, uwiano mkubwa haushangazi.Hutokea kati ya Ki-67 ya juu na alama na uwepo wa BRCA1 PV.Kwa kweli, uvimbe unaohusiana na BRCA1 ni mfano wa TNBC na huonyesha vipengele vikali zaidi.16,17
Kwa kumalizia, utafiti huu unatoa ripoti kuhusu hali ya mabadiliko ya BRCA1/2 katika kundi la BC kutoka mashariki mwa Sicily. Kwa ujumla, matokeo yetu yanawiana na ushahidi uliokuwepo hapo awali, katika suala la kuenea kwa mabadiliko na vipengele vya kiafya katika BC. Tafiti zaidi katika idadi kubwa ya BRCA1/2-mutant BC, uchanganuzi uliopanuliwa wa wagonjwa wa BC mbalimbali, kama vile uchanganuzi uliopanuliwa wa PV. ni tofauti na mara chache zaidi kuliko BRCA1/2. Hii itaruhusu utambuzi na usimamizi sahihi wa idadi inayoongezeka ya masomo katika hatari kubwa ya saratani kutokana na mabadiliko ya maumbile.
Tulithibitisha kuwa wagonjwa walitia sahihi kibali cha ufahamu cha kutoa sampuli zao za uvimbe bila kujulikana kwa madhumuni ya utafiti. Wagonjwa wote walitia saini kibali kilichoandikwa kulingana na Azimio la Helsinki. Kulingana na sera ya AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco", utafiti huu haukuhusishwa na ukaguzi wa kimaadili kwa sababu uchambuzi wa BRCA1/2 ulifanywa kulingana na data iliyoandikwa ya matumizi ya BRCA1/2 kwa wagonjwa pia ilitoa idhini ya matumizi ya kimatibabu. .
Tunamshukuru Prof. Paolo Vigneri kwa msaada wake katika kuhudumia wagonjwa wa saratani ya matiti kama ilivyoombwa na Kamati ya Maadili.
Federica Martorana anaripoti heshima kutoka kwa Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. Waandishi wengine wanatangaza hakuna migongano ya maslahi katika kazi hii.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al.Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN inakadiria matukio na vifo vya saratani 36 katika nchi 185 duniani kote.CA Cancer J Clin.2021;71(3):209-249.3ca32:16