Punguza Kelele ya Msingi ya Mfumo wa HPLC/UHPLC na Ongeza Usikivu kwa Kichanganya Kipya cha Utendaji cha Juu cha 3D Iliyochapishwa - Februari 6, 2017 - James C. Steele, Christopher J. Martineau, Kenneth L. Rubow - Makala katika sayansi ya Habari za Biolojia

Kichanganyaji kipya cha kimapinduzi cha tuli kimeundwa mahususi ili kukidhi mahitaji magumu ya kromatografia ya kioevu ya utendaji wa juu (HPLC) na mifumo ya utendakazi wa hali ya juu ya kromatografia kioevu (HPLC na UHPLC).Mchanganyiko duni wa awamu mbili au zaidi za rununu kunaweza kusababisha uwiano wa juu wa mawimbi hadi kelele, ambayo hupunguza usikivu.Mchanganyiko usio na usawa wa vimiminika viwili au zaidi vyenye ujazo wa ndani wa kima cha chini zaidi na vipimo vya kimwili vya kichanganyiko tuli huwakilisha kiwango cha juu zaidi cha kichanganyaji tuli bora.Kichanganyaji kipya tuli hufanikisha hili kwa kutumia teknolojia mpya ya uchapishaji ya 3D ili kuunda muundo wa kipekee wa 3D ambao hutoa uchanganyaji wa tuli wa hidrodynamic ulioboreshwa na upunguzaji wa juu zaidi wa mawimbi ya sine msingi kwa kila kitengo cha ndani cha mchanganyiko.Kutumia 1/3 ya ujazo wa ndani wa kichanganyaji cha kawaida hupunguza wimbi la msingi la sine kwa 98%.Kichanganyaji kina mikondo ya mtiririko ya 3D iliyounganishwa na maeneo tofauti ya sehemu na urefu wa njia huku umajimaji ukipitia jiometri changamani za 3D.Kuchanganyika kwenye njia nyingi zenye misukosuko, pamoja na misukosuko ya ndani na eddy, husababisha kuchanganyika kwenye mizani ndogo, meso na macro.Kichanganyaji hiki cha kipekee kimeundwa kwa kutumia uigaji wa mienendo ya maji ya komputa (CFD).Data ya majaribio iliyowasilishwa inaonyesha kuwa uchanganyaji bora hupatikana kwa kiwango cha chini cha sauti ya ndani.
Kwa zaidi ya miaka 30, kromatografia ya kioevu imekuwa ikitumika katika tasnia nyingi, ikijumuisha dawa, dawa za kuua wadudu, ulinzi wa mazingira, uchunguzi wa kisheria na uchambuzi wa kemikali.Uwezo wa kupima kwa sehemu kwa milioni au chini ni muhimu kwa maendeleo ya teknolojia katika sekta yoyote.Ufanisi duni wa kuchanganya husababisha uwiano duni wa mawimbi kati ya kelele, jambo ambalo ni kero kwa jumuiya ya kromatografia katika suala la vikomo vya ugunduzi na hisia.Wakati wa kuchanganya vimumunyisho viwili vya HPLC, wakati mwingine ni muhimu kulazimisha kuchanganya kwa njia za nje ili kufanya homogenize vimumunyisho viwili kwa sababu baadhi ya vimumunyisho havichanganyiki vizuri.Ikiwa vimumunyisho havijachanganywa kabisa, uharibifu wa kromatogramu ya HPLC unaweza kutokea, na kujidhihirisha kama kelele nyingi za msingi na/au umbo duni wa kilele.Kwa kuchanganya vibaya, kelele ya msingi itaonekana kama wimbi la sine (kupanda na kushuka) kwa ishara ya kigunduzi baada ya muda.Wakati huo huo, kuchanganya vibaya kunaweza kusababisha upanuzi na vilele vya asymmetric, kupunguza utendaji wa uchambuzi, umbo la kilele, na azimio la kilele.Sekta imetambua kuwa vichanganyaji vya mtandaoni na visivyobadilika ni njia ya kuboresha vikomo hivi na kuwaruhusu watumiaji kufikia viwango vya chini vya ugunduzi (hisia).Mchanganyiko bora wa tuli huchanganya faida za ufanisi wa juu wa kuchanganya, kiasi cha chini cha kufa na kushuka kwa shinikizo la chini na kiasi cha chini na upeo wa juu wa mfumo.Kwa kuongeza, uchambuzi unavyozidi kuwa mgumu zaidi, wachambuzi lazima watumie mara kwa mara vimumunyisho zaidi vya polar na vigumu kuchanganya.Hii inamaanisha kuwa uchanganyaji bora ni lazima kwa majaribio ya siku zijazo, na kuongeza zaidi hitaji la muundo na utendakazi bora wa kichanganyaji.
Hivi majuzi Mott ameunda anuwai mpya ya vichanganyaji tuli vya ndani vya hati miliki vya PerfectPeakTM vilivyo na ujazo tatu za ndani: 30 µl, 60 µl na 90 µl.Saizi hizi hufunika anuwai ya ujazo na sifa za kuchanganya zinazohitajika kwa majaribio mengi ya HPLC ambapo uchanganyaji ulioboreshwa na mtawanyiko mdogo unahitajika.Aina zote tatu zina kipenyo cha 0.5″ na hutoa utendaji bora wa sekta katika muundo thabiti.Zimeundwa kwa chuma cha pua cha 316L, kilichopitishwa kwa ajizi, lakini titani na aloi nyingine za chuma zinazostahimili kutu na ajizi zinapatikana pia.Wachanganyaji hawa wana shinikizo la juu la kufanya kazi hadi 20,000 psi.Kwenye mtini.1a ni picha ya mchanganyiko tuli wa 60 µl Mott iliyoundwa ili kutoa ufanisi wa juu zaidi wa uchanganyaji huku ukitumia sauti ndogo ya ndani kuliko vichanganyaji vya kawaida vya aina hii.Muundo huu mpya wa kichanganyaji tuli hutumia teknolojia mpya ya utengenezaji wa viungio ili kuunda muundo wa kipekee wa 3D ambao hutumia mtiririko mdogo wa ndani kuliko kichanganyiko chochote kinachotumika sasa katika tasnia ya kromatografia kufikia uchanganyaji tuli.Vichanganyaji vile vinajumuisha mikondo ya mtiririko yenye mwelekeo-tatu iliyounganishwa na maeneo tofauti ya sehemu-mkataba na urefu tofauti wa njia huku kioevu kivuka vizuizi changamano vya kijiometri ndani.Kwenye mtini.Mchoro wa 1b unaonyesha mchoro wa kichanganyiko kipya, unaotumia viwango vya 10-32 vya HPLC yenye nyuzi za tasnia ya kuingiza na kutoa, na una mipaka ya samawati iliyotiwa kivuli ya lango la kichanganyiko cha ndani chenye hati miliki.Maeneo tofauti ya sehemu ya msalaba ya njia za mtiririko wa ndani na mabadiliko ya mwelekeo wa mtiririko ndani ya kiasi cha mtiririko wa ndani huunda maeneo ya mtiririko wa msukosuko na laminar, na kusababisha kuchanganya kwenye mizani ndogo, meso na macro.Muundo wa kichanganyaji hiki cha kipekee ulitumia uigaji wa mienendo ya kiowevu (CFD) kuchanganua ruwaza za mtiririko na kuboresha muundo kabla ya kutoa kielelezo kwa ajili ya majaribio ya uchanganuzi wa ndani na tathmini ya uga wa mteja.Utengenezaji wa ziada ni mchakato wa uchapishaji wa vipengele vya kijiometri vya 3D moja kwa moja kutoka kwa michoro za CAD bila ya haja ya machining ya jadi (mashine za kusaga, lathes, nk).Vichanganyaji hivi vipya vya tuli vimeundwa kutengenezwa kwa kutumia mchakato huu, ambapo mwili wa mchanganyiko huundwa kutoka kwa michoro za CAD na sehemu zinatengenezwa (zilizochapishwa) safu kwa safu kwa kutumia utengenezaji wa nyongeza.Hapa, safu ya poda ya chuma yenye unene wa mikroni 20 huwekwa, na leza inayodhibitiwa na kompyuta kwa kuchagua huyeyuka na kuunganisha poda kuwa fomu thabiti.Omba safu nyingine juu ya safu hii na weka sintering ya laser.Rudia utaratibu huu hadi sehemu ikamilike kabisa.Kisha poda huondolewa kwenye sehemu isiyounganishwa na laser, na kuacha sehemu iliyochapishwa ya 3D inayofanana na mchoro wa awali wa CAD.Bidhaa ya mwisho inafanana kwa kiasi fulani na mchakato wa microfluidic, tofauti kuu ni kwamba vipengele vya microfluidic kawaida ni mbili-dimensional (gorofa), wakati kwa kutumia utengenezaji wa ziada, mifumo ya mtiririko tata inaweza kuundwa katika jiometri tatu-dimensional.Mabomba haya kwa sasa yanapatikana kama sehemu zilizochapishwa za 3D katika chuma cha pua cha 316L na titani.Aloi nyingi za chuma, polima na baadhi ya keramik zinaweza kutumika kutengeneza vipengele kwa kutumia njia hii na zitazingatiwa katika miundo/bidhaa za siku zijazo.
Mchele.1. Picha (a) na mchoro (b) wa kichanganyaji tuli cha 90 μl cha Mott kinachoonyesha sehemu ya msalaba ya njia ya mtiririko wa kiowevu iliyotiwa kivuli kwa samawati.
Tekeleza uigaji wa mienendo ya maji ya kukokotoa (CFD) ya utendaji wa kichanganyaji tuli wakati wa awamu ya kubuni ili kusaidia kubuni miundo bora na kupunguza majaribio yanayotumia muda na ya gharama kubwa ya kujaribu na kufanya makosa.Uigaji wa CFD wa vichanganyaji tuli na upigaji bomba wa kawaida (simulizi lisilo na mchanganyiko) kwa kutumia kifurushi cha programu cha COMSOL Multifizikia.Kuiga kwa kutumia mechanics ya maji ya lamina inayoendeshwa na shinikizo ili kuelewa kasi ya maji na shinikizo ndani ya sehemu.Mienendo hii ya maji, pamoja na usafirishaji wa kemikali wa misombo ya awamu ya simu, husaidia kuelewa mchanganyiko wa vimiminiko viwili tofauti vilivyojilimbikizia.Mfano huo husomwa kama kipengele cha muda, sawa na sekunde 10, kwa urahisi wa kuhesabu wakati wa kutafuta suluhu zinazolingana.Data ya kinadharia ilipatikana katika utafiti unaohusiana na wakati kwa kutumia zana ya makadirio ya uchunguzi wa uhakika, ambapo sehemu ya katikati ya njia ya kutoka ilichaguliwa kwa ajili ya kukusanya data.Muundo wa CFD na majaribio ya majaribio yalitumia vimumunyisho viwili tofauti kupitia vali ya sampuli sawia na mfumo wa kusukuma maji, na kusababisha plagi ya kubadilisha kwa kila kiyeyushi kwenye mstari wa sampuli.Vimumunyisho hivi huchanganywa katika mchanganyiko tuli.Kielelezo cha 2 na 3 kinaonyesha uigaji wa mtiririko kupitia bomba la kawaida (hakuna kichanganyaji) na kupitia kichanganyaji tuli cha Mott, mtawalia.Uigaji huo uliendeshwa kwa bomba moja kwa moja lenye urefu wa sm 5 na kitambulisho cha mm 0.25 ili kuonyesha dhana ya plagi za maji na asetonitrile safi ndani ya bomba bila mchanganyiko wa tuli, kama inavyoonyeshwa kwenye Mchoro 2. Uigaji huo ulitumia vipimo halisi vya bomba na kichanganyaji na kasi ya mtiririko wa 0 .3 ml/min.
Mchele.2. Uigaji wa mtiririko wa CFD katika bomba la sentimita 5 na kipenyo cha ndani cha 0.25 mm ili kuwakilisha kile kinachotokea kwenye bomba la HPLC, yaani, kwa kukosekana kwa mchanganyiko.Nyekundu kamili inawakilisha sehemu kubwa ya maji.Bluu inawakilisha ukosefu wa maji, yaani asetonitrile safi.Maeneo ya mtawanyiko yanaweza kuonekana kati ya plugs mbadala za vimiminika viwili tofauti.
Mchele.3. Mchanganyiko tuli na kiasi cha 30 ml, kilichoundwa katika mfuko wa programu ya COMSOL CFD.Hadithi inawakilisha sehemu kubwa ya maji katika mchanganyiko.Maji safi yanaonyeshwa kwa acetonitrile nyekundu na safi katika bluu.Mabadiliko katika sehemu ya molekuli ya maji ya simulated inawakilishwa na mabadiliko katika rangi ya mchanganyiko wa maji mawili.
Kwenye mtini.4 inaonyesha uchunguzi wa uthibitishaji wa mfano wa uwiano kati ya ufanisi wa kuchanganya na kiasi cha kuchanganya.Wakati kiasi cha kuchanganya kinaongezeka, ufanisi wa kuchanganya utaongezeka.Kwa ufahamu wa waandishi, nguvu zingine ngumu za mwili zinazofanya kazi ndani ya kichanganyaji haziwezi kuhesabiwa katika muundo huu wa CFD, na kusababisha ufanisi wa juu wa kuchanganya katika majaribio ya majaribio.Ufanisi wa uchanganyaji wa majaribio ulipimwa kama punguzo la asilimia katika sinusoid ya msingi.Kwa kuongeza, kuongezeka kwa shinikizo la nyuma kwa kawaida husababisha viwango vya juu vya kuchanganya, ambavyo hazizingatiwi katika simulation.
Masharti yafuatayo ya HPLC na usanidi wa majaribio ulitumika kupima mawimbi ghafi ya sine ili kulinganisha utendaji wa jamaa wa vichanganyaji tuli tofauti.Mchoro katika Mchoro wa 5 unaonyesha mpangilio wa kawaida wa mfumo wa HPLC/UHPLC.Mchanganyiko wa tuli ulijaribiwa kwa kuweka mchanganyiko moja kwa moja baada ya pampu na kabla ya injector na safu ya kutenganisha.Vipimo vingi vya usuli wa sinusoidal hufanywa kwa kupitisha injector na safu wima ya kapilari kati ya kichanganyaji tuli na kigunduzi cha UV.Wakati wa kutathmini uwiano wa mawimbi kwa kelele na/au kuchanganua umbo la kilele, usanidi wa mfumo unaonyeshwa kwenye Mchoro 5.
Mchoro 4. Mpango wa ufanisi wa kuchanganya dhidi ya kiasi cha kuchanganya kwa aina mbalimbali za mchanganyiko wa tuli.Uchafu wa kinadharia hufuata mtindo sawa na data ya majaribio ya uchafu inayothibitisha uhalali wa uigaji wa CFD.
Mfumo wa HPLC uliotumika kwa jaribio hili ulikuwa Agilent 1100 Series HPLC yenye kitambua UV kinachodhibitiwa na Kompyuta inayoendesha programu ya Chemstation.Jedwali la 1 linaonyesha hali za kawaida za kurekebisha kwa kupima ufanisi wa mchanganyiko kwa kufuatilia sinusoidi za msingi katika kesi mbili.Majaribio ya majaribio yalifanywa kwa mifano miwili tofauti ya vimumunyisho.Vimumunyisho viwili vilivyochanganywa katika kesi ya 1 vilikuwa ni kutengenezea A (acetate ya ammoniamu 20 mm katika maji yaliyotolewa) na kutengenezea B (80% asetonitrile (ACN)/20% maji yaliyotenganishwa).Katika kesi ya 2, kutengenezea A ilikuwa suluhisho la asetoni (lebo) ya 0.05% katika maji yaliyotolewa.Kimumunyisho B ni mchanganyiko wa 80/20% ya methanoli na maji.Katika kesi ya 1, pampu iliwekwa kwa kiwango cha mtiririko wa 0.25 ml / min hadi 1.0 ml / min, na katika kesi ya 2, pampu iliwekwa kwa kiwango cha mtiririko wa 1 ml / min.Katika matukio yote mawili, uwiano wa mchanganyiko wa vimumunyisho A na B ulikuwa 20% A / 80% B. Kichunguzi kiliwekwa 220 nm katika kesi 1, na ngozi ya juu ya acetone katika kesi 2 iliwekwa kwa urefu wa 265 nm.
Jedwali 1. Mipangilio ya HPLC kwa Kesi 1 na 2 Kesi 1 Kesi 2 Kasi ya Pampu 0.25 ml/min hadi 1.0 ml/dakika 1.0 ml/min Tengeneza A 20 mM acetate ya ammoniamu katika maji yaliyotolewa 0.05% asetoni katika maji yaliyotenganishwa Kimumunyisho B 80% 2% ya maji ya Aceto 8 ACN 80% Acetoni 20% Uwiano wa kuyeyusha maji 20% A / 80% B 20% A / 80% B Kigunduzi 220 nm 265 nm
Mchele.6. Viwanja vya mawimbi ya sine mchanganyiko hupimwa kabla na baada ya kutumia kichujio cha pasi-chini ili kuondoa vipengee vya msingi vya kupeperushwa kwa mawimbi.
Mchoro wa 6 ni mfano wa kawaida wa kelele mchanganyiko wa msingi katika Uchunguzi wa 1, unaoonyeshwa kama mchoro unaojirudia wa sinusoidal uliowekwa juu kwenye mkondo wa msingi.Baseline drift ni ongezeko la polepole au kupungua kwa mawimbi ya usuli.Ikiwa mfumo hauruhusiwi kusawazisha kwa muda wa kutosha, kwa kawaida utaanguka, lakini utaelea bila mpangilio hata wakati mfumo ukiwa thabiti kabisa.Uelekeo huu wa msingi huelekea kuongezeka wakati mfumo unafanya kazi katika hali ya mwinuko au shinikizo la juu la nyuma.Wakati mteremko huu wa msingi upo, inaweza kuwa vigumu kulinganisha matokeo kutoka kwa sampuli hadi sampuli, ambayo inaweza kushinda kwa kutumia kichujio cha pasi-chini kwenye data ghafi ili kuchuja tofauti hizi za masafa ya chini, na hivyo kutoa njama ya oscillation yenye msingi bapa.Kwenye mtini.Mchoro wa 6 pia unaonyesha mpango wa kelele ya msingi ya kichanganyaji baada ya kutumia kichujio cha pasi-chini.
Baada ya kukamilisha uigaji wa CFD na majaribio ya awali ya majaribio, viunganishi vitatu tofauti tuli viliundwa kwa kutumia viambajengo vya ndani vilivyoelezwa hapo juu na juzuu tatu za ndani: 30 µl, 60 µl na 90 µl.Masafa haya yanajumuisha anuwai ya ujazo na utendakazi wa kuchanganya unaohitajika kwa programu za HPLC za uchanganuzi wa chini ambapo uchanganyaji ulioboreshwa na mtawanyiko mdogo unahitajika ili kutoa misingi ya chini ya amplitude.Kwenye mtini.7 inaonyesha vipimo vya kimsingi vya mawimbi ya sine vilivyopatikana kwenye mfumo wa majaribio wa Mfano wa 1 (asetonitrile na acetate ya ammoniamu kama vifuatiliaji) ikiwa na juzuu tatu za vichanganyaji tuli na bila vichanganyaji vilivyosakinishwa.Masharti ya majaribio ya matokeo yaliyoonyeshwa kwenye Mchoro 7 yalifanyika mara kwa mara katika vipimo vyote 4 kulingana na utaratibu ulioainishwa katika Jedwali 1 kwa kiwango cha mtiririko wa 0.5 ml / min.Tumia thamani ya kurekebisha kwenye hifadhidata ili ziweze kuonyeshwa kando bila mwingiliano wa mawimbi.Kukabiliana haiathiri amplitude ya ishara inayotumiwa kuhukumu kiwango cha utendaji cha mchanganyiko.Kiwango cha wastani cha amplitude ya sinusoidal bila kichanganyaji kilikuwa 0.221 mAi, wakati amplitudi za vichanganyaji tuli vya Mott kwa 30 µl, 60 µl, na 90 µl zilishuka hadi 0.077, 0.017, na 0.004 mAi, mtawalia.
Mchoro wa 7. Kidhibiti cha Kigunduzi cha UV cha HPLC dhidi ya Muda wa Uchunguzi wa 1 (asetonitrile yenye kiashirio cha acetate ya ammoniamu) inayoonyesha mchanganyiko wa kutengenezea bila kichanganyiko, 30 µl, 60 µl na 90 µl vichanganyiko vya Mott vinavyoonyesha uchanganyaji ulioboreshwa (amplitude ya chini ya mawimbi ) kadri ujazo wa kichanganyiko tulichoongezeka.(mapunguzo halisi ya data: 0.13 (hakuna kichanganyaji), 0.32, 0.4, 0.45mA kwa onyesho bora zaidi).
Data iliyoonyeshwa kwenye Mtini.8 ni sawa na katika Mchoro 7, lakini wakati huu zinajumuisha matokeo ya vichanganyaji tuli vya HPLC vinavyotumika kawaida na ujazo wa ndani wa 50 µl, 150 µl na 250 µl.Mchele.Mchoro 8. Kidhibiti cha Kichunguzi cha UV cha HPLC dhidi ya Plot ya Muda kwa Kesi ya 1 (Acetonitrile na Acetate ya Ammonium kama viashiria) inayoonyesha mchanganyiko wa kutengenezea bila mchanganyiko wa tuli, mfululizo mpya wa mchanganyiko wa Mott static, na vichanganya vitatu vya kawaida (kukabiliana na data halisi ni 0.1 (bila mixer), 0.0.0.8, 0.0.8, 0.8, 8 9 mA mtawalia kwa athari bora ya kuonyesha).Asilimia ya kupunguzwa kwa wimbi la sine ya msingi huhesabiwa kwa uwiano wa amplitude ya wimbi la sine hadi amplitude bila kichanganyaji kusakinishwa.Asilimia zilizopimwa za mawimbi ya sine kwa Kesi 1 na 2 zimeorodheshwa katika Jedwali la 2, pamoja na ujazo wa ndani wa kichanganyiko kipya cha tuli na vichanganyiko saba vya kawaida vinavyotumiwa sana katika tasnia.Data katika Kielelezo 8 na 9, pamoja na hesabu zilizowasilishwa katika Jedwali la 2, zinaonyesha kuwa Kichanganyaji cha Mott Static kinaweza kutoa hadi 98.1% ya kupunguza mawimbi ya sine, inayozidi kwa mbali utendakazi wa kichanganyaji cha kawaida cha HPLC chini ya hali hizi za majaribio.Mchoro 9. Kidhibiti cha kigunduzi cha UV cha HPLC dhidi ya mpangilio wa wakati wa kesi ya 2 (methanoli na asetoni kama vifuatilizi) isiyoonyesha mchanganyiko tuli (pamoja), mfululizo mpya wa vichanganyaji tuli vya Mott na vichanganyiko viwili vya kawaida (vipimo halisi vya data ni 0, 11 (bila mchanganyiko. ), 0.22, 0 na 0.3 mA kwa onyesho bora zaidi.Vichanganyaji saba vinavyotumika sana kwenye tasnia pia vilitathminiwa.Hizi ni pamoja na vichanganyaji vilivyo na viwango vitatu tofauti vya ndani kutoka kwa kampuni A (Mchanganyiko mteule A1, A2 na A3) na kampuni B (Mchanganyaji aliyeteuliwa B1, B2 na B3).Kampuni C ilikadiria ukubwa mmoja pekee.
Jedwali la 2. Sifa za Kusisimua za Kichanganyiko Kilichotulia na Kesi ya Kichanganyaji cha Kiasi cha Ndani cha Kiasi cha 1 Urejeshaji wa Sinusoidal: Mtihani wa Acetonitrile (Ufanisi) Kesi ya 2 Urejeshaji wa Sinusoidal: Mtihani wa Maji ya Methanoli (Ufanisi) Kiasi cha Ndani (µl) Hakuna Kichanganyaji - - 0 Mott% 6 % 69 29. 1.3% 60 Mott 90 98.1% 97.5% 90 Mixer A1 66.4% 73.7% 50 Mixer A2 89.8% 91.6% 150 Mixer A3 92.2% 94.5% 250 Mixer B1 45.8%. 370 Mchanganyiko C 97.2% 97.4% 250
Uchanganuzi wa matokeo katika Kielelezo 8 na Jedwali 2 unaonyesha kuwa kichanganyaji tuli cha 30 µl Mott kina ufanisi sawa wa kuchanganya kama kichanganyiko cha A1, yaani 50 µl, hata hivyo, 30 µl Mott ina ujazo wa ndani kwa 30%.Wakati wa kulinganisha kichanganyaji cha 60 µl Mott na kichanganyiko cha 150 µl cha ndani cha A2, kulikuwa na uboreshaji kidogo katika ufanisi wa kuchanganya wa 92% dhidi ya 89%, lakini muhimu zaidi, kiwango hiki cha juu cha kuchanganya kilipatikana kwa 1/3 ya kiasi cha mchanganyiko.mchanganyiko sawa A2.Utendaji wa kichanganyaji cha 90 µl Mott ulifuata mtindo uleule wa kichanganyaji cha A3 chenye ujazo wa ndani wa 250 µl.Uboreshaji katika utendaji wa kuchanganya wa 98% na 92% pia ulizingatiwa na kupunguzwa kwa mara 3 kwa kiasi cha ndani.Matokeo sawa na kulinganisha yalipatikana kwa wachanganyaji B na C. Matokeo yake, mfululizo mpya wa mchanganyiko wa tuli Mott PerfectPeak TM hutoa ufanisi wa juu wa kuchanganya kuliko wachanganyaji wa washindani wa kulinganisha, lakini kwa kiasi kidogo cha ndani, kutoa kelele bora ya nyuma na uwiano bora wa signal-to-kelele, Analyte bora ya unyeti, sura ya kilele na azimio la kilele.Mitindo sawa ya ufanisi wa kuchanganya ilizingatiwa katika masomo ya Uchunguzi wa 1 na Uchunguzi wa 2.Katika Uchunguzi wa 2, majaribio yalifanywa kwa kutumia (methanoli na asetoni kama viashirio) ili kulinganisha ufanisi wa kuchanganya wa 60 ml Mott, kichanganyaji linganishi cha A1 (kiasi cha ndani 50 µl) na kichanganyiko linganishi B1 (kiasi cha ndani 35 µl)., utendakazi ulikuwa duni bila kichanganyaji kusakinishwa, lakini ilitumika kwa uchanganuzi wa kimsingi.Mchanganyiko wa Mott wa 60 ml umeonekana kuwa mchanganyiko bora katika kikundi cha mtihani, na kutoa ongezeko la 90% katika ufanisi wa kuchanganya.Kichanganyaji A1 kinacholinganishwa kiliona uboreshaji wa 75% katika ufanisi wa uchanganyaji na kufuatiwa na uboreshaji wa 45% katika kichanganyaji cha B1 kinacholingana.Jaribio la kimsingi la kupunguza mawimbi ya sine na kiwango cha mtiririko ulifanyika kwa mfululizo wa vichanganyaji chini ya masharti sawa na mtihani wa curve ya sine katika Kesi ya 1, na kiwango cha mtiririko pekee kilibadilishwa.Takwimu zilionyesha kuwa katika anuwai ya viwango vya mtiririko kutoka 0.25 hadi 1 ml / min, kupungua kwa awali kwa wimbi la sine ilibaki thabiti kwa viwango vyote vitatu vya mchanganyiko.Kwa vichanganyaji vidogo viwili vya ujazo, kuna ongezeko kidogo la mnyweo wa sinusoidal kadri kiwango cha mtiririko kinapungua, ambacho kinatarajiwa kutokana na kuongezeka kwa muda wa makazi wa kutengenezea kwenye kichanganyaji, na hivyo kuruhusu kuongezeka kwa uchanganyaji wa usambaaji.Utoaji wa wimbi la sine unatarajiwa kuongezeka kadri mtiririko unavyopungua zaidi.Walakini, kwa ujazo mkubwa zaidi wa mchanganyiko na upunguzaji wa msingi wa mawimbi ya sine, upunguzaji wa msingi wa mawimbi ya sine ulibakia bila kubadilika (ndani ya kutokuwa na uhakika wa majaribio), na maadili kutoka 95% hadi 98%.Mchele.10. Upunguzaji wa msingi wa wimbi la sine dhidi ya kiwango cha mtiririko katika kesi ya 1. Jaribio lilifanyika chini ya hali sawa na mtihani wa sine na kiwango cha mtiririko wa kutofautiana, kuingiza 80% ya mchanganyiko wa 80/20 wa asetonitrile na maji na 20% ya 20 mM acetate ya ammoniamu.
Aina mpya za vichanganyaji tuli vya PerfectPeakTM vilivyo na hati miliki vyenye ujazo tatu za ndani: 30 µl, 60 µl na 90 µl hufunika kiwango cha sauti na utendakazi mseto unaohitajika kwa uchanganuzi mwingi wa HPLC unaohitaji uchanganyaji ulioboreshwa na sakafu ya chini ya mtawanyiko.Kichanganyaji kipya tuli hufanikisha hili kwa kutumia teknolojia mpya ya uchapishaji ya 3D ili kuunda muundo wa kipekee wa 3D ambao hutoa uchanganyaji wa tuli wa hidrodynamic ulioboreshwa na upunguzaji wa juu zaidi wa kelele ya msingi kwa kila kitengo cha mchanganyiko wa ndani.Kutumia 1/3 ya kiasi cha ndani cha mchanganyiko wa kawaida hupunguza kelele ya msingi kwa 98%.Vichanganyaji vile vinajumuisha mikondo ya mtiririko yenye mwelekeo-tatu iliyounganishwa na maeneo tofauti ya sehemu-mkataba na urefu tofauti wa njia huku kioevu kivuka vizuizi changamano vya kijiometri ndani.Familia mpya ya wachanganyaji tuli hutoa utendakazi ulioboreshwa juu ya vichanganyaji vya ushindani, lakini kwa sauti ndogo ya ndani, na kusababisha uwiano bora wa ishara hadi kelele na mipaka ya chini ya kiasi, pamoja na uboreshaji wa sura ya kilele, ufanisi na azimio kwa unyeti wa juu.
Katika toleo hili Chromatography - RP-HPLC rafiki kwa mazingira - Matumizi ya kromatografia ya ganda la msingi kuchukua nafasi ya asetonitrile na isopropanoli katika uchanganuzi na utakaso - Kromatografia mpya ya gesi kwa...
Business Center International Labmate Limited Oak Court Sandridge Park, Porters Wood St Albans Hertfordshire AL3 6PH Uingereza


Muda wa kutuma: Nov-15-2022