காலப்போக்கில் கருவி தொழில்நுட்பம் மேம்பட்டாலும், LC நடைமுறையில் சிக்கல்கள் இருப்பதால், சில LC சரிசெய்தல் தலைப்புகள் காலாவதியானவை அல்ல. LC அமைப்பில் சிக்கல்கள் எழுவதற்கும் மோசமான உச்ச வடிவில் முடிவடைவதற்கும் பல வழிகள் உள்ளன. உச்ச வடிவம் தொடர்பான சிக்கல்கள் எழும்போது, ​​இந்த முடிவுகளுக்கான சாத்தியமான காரணங்களின் சுருக்கமான பட்டியல் எங்கள் பிழைகாணல் அனுபவத்தை எளிதாக்க உதவுகிறது.
இந்த “LC ட்ரபிள்ஷூட்டிங்” பத்தியை எழுதுவதும், ஒவ்வொரு மாதமும் தலைப்புகளைப் பற்றி சிந்திப்பதும் வேடிக்கையாக உள்ளது, ஏனென்றால் சில தலைப்புகள் ஒருபோதும் பாணியை மீறுவதில்லை. குரோமடோகிராஃபி துறையில் சில தலைப்புகள் அல்லது யோசனைகள் வழக்கற்றுப் போகின்றன, ஏனெனில் அவை புதிய மற்றும் சிறந்த யோசனைகளால், பிழைகாணல் துறையில், முதல் சிக்கல் தீர்க்கும் கட்டுரைகள் 8 இல் வெளிவந்தன. (1).கடந்த சில ஆண்டுகளாக, திரவ நிறமூர்த்தத்தை (LC) பாதிக்கும் சமகால போக்குகளில் பல LC ட்ரபிள்ஷூட்டிங் பிரிவுகளில் கவனம் செலுத்தியுள்ளேன் (உதாரணமாக, தக்கவைப்பில் அழுத்தத்தின் விளைவைப் பற்றிய நமது புரிதலின் ஒப்பீட்டு ஒப்பீடு [2] புதிய முன்னேற்றங்கள்) LC முடிவுகளின் எங்கள் விளக்கம் மற்றும் நவீன LC கருவிகளை எவ்வாறு சரிசெய்வது என்பது டிசம்பர் 1 இல் தொடங்கும் எனது 2'0 தொடர் நிறுவல். LC சரிசெய்தலின் சில "வாழ்க்கை மற்றும் இறப்பு" தலைப்புகளில் கவனம் செலுத்தப்படுகிறது - எந்த பிரச்சனையறிதலுக்கும் சிறந்த கூறுகள் அவசியம், நாம் பயன்படுத்தும் அமைப்பின் வயதைப் பொருட்படுத்தாது. இந்தத் தொடரின் முக்கிய தலைப்பு, LCGC இன் புகழ்பெற்ற "LC ட்ரபிள்ஷூட்டிங் கையேடு" சுவர் விளக்கப்படத்திற்கு மிகவும் பொருத்தமானது (4) பல ஆய்வகங்களில் தொங்கும். ly, சுவர் விளக்கப்படம் மோசமான உச்ச வடிவத்திற்கான 44 வெவ்வேறு சாத்தியமான காரணங்களை பட்டியலிடுகிறது! இந்த சிக்கல்கள் அனைத்தையும் ஒரே கட்டுரையில் விரிவாகக் கருத முடியாது, எனவே தலைப்பில் இந்த முதல் தவணையில், நான் அடிக்கடி பார்க்கும் சிலவற்றில் கவனம் செலுத்துவேன். இந்த முக்கியமான தலைப்பில் இளம் மற்றும் வயதான LC பயனர்கள் சில பயனுள்ள உதவிக்குறிப்புகள் மற்றும் நினைவூட்டல்களைக் கண்டுபிடிப்பார்கள் என்று நம்புகிறேன்.
சிக்கல் தீர்க்கும் கேள்விகளுக்கு "எதுவும் சாத்தியம்" என்று அதிகளவில் பதிலளிப்பதை நான் காண்கிறேன். புரிந்துகொள்ள கடினமாக இருக்கும் அவதானிப்புகளைக் கருத்தில் கொள்ளும்போது இந்த பதில் எளிதாகத் தோன்றலாம், ஆனால் அது பெரும்பாலும் பொருத்தமானது என்று நான் கருதுகிறேன். மோசமான உச்ச வடிவத்தின் சாத்தியமான பல காரணங்களால், பிரச்சனை என்னவாக இருக்கும் என்பதைக் கருத்தில் கொள்ளும்போது திறந்த மனதுடன் இருப்பது முக்கியம்.
எந்தவொரு சரிசெய்தல் பயிற்சியிலும் ஒரு முக்கிய படி - ஆனால் நான் குறைத்து மதிப்பிடப்பட்ட ஒன்று - தீர்க்கப்பட வேண்டிய ஒரு சிக்கல் உள்ளது என்பதை அங்கீகரிப்பது. ஒரு சிக்கல் இருப்பதை அங்கீகரிப்பது என்பது கோட்பாடு, அனுபவ அறிவு மற்றும் அனுபவத்தால் வடிவமைக்கப்பட்ட நமது எதிர்பார்ப்புகளிலிருந்து வேறுபட்டது என்பதை அங்கீகரிப்பதாகும் (5). பஞ்சுபோன்ற, முன்னணி விளிம்பு, வால், முதலியன), ஆனால் அகலமும் கூட. உண்மையான உச்ச வடிவத்திற்கான எங்கள் எதிர்பார்ப்புகள் எளிமையானவை. பெரும்பாலான சந்தர்ப்பங்களில், குரோமடோகிராஃபிக் சிகரங்கள் சமச்சீராக இருக்க வேண்டும் மற்றும் காசியன் பரவலின் வடிவத்துடன் ஒத்துப்போக வேண்டும் என்ற பாடப்புத்தக எதிர்பார்ப்பை கோட்பாடு (6) நன்கு ஆதரிக்கிறது. படம் 1 இல் உள்ள சில சாத்தியக்கூறுகளைக் காட்டுகிறது-வேறுவிதமாகக் கூறினால், சில வழிகள் தவறாகப் போகலாம். இந்த தவணையின் எஞ்சிய பகுதியில், இந்த வடிவ வகைகளுக்கு வழிவகுக்கும் சூழ்நிலைகளின் சில குறிப்பிட்ட உதாரணங்களைப் பற்றி விவாதிப்பதில் நேரத்தை செலவிடுவோம்.
சில நேரங்களில் சிகரங்கள் நீக்கப்படும் என்று எதிர்பார்க்கப்படும் குரோமடோகிராமில் கவனிக்கப்படுவதில்லை. மேலே உள்ள சுவர் விளக்கப்படம், உச்சநிலை இல்லாதது (மாதிரி உண்மையில் இலக்கு பகுப்பாய்வு செறிவில் இருப்பதாகக் கருதினால், அது சத்தத்திற்கு மேலே கண்டறிவதற்கான பதிலைப் போதுமானதாக மாற்ற வேண்டும்) பொதுவாக சில கருவி சிக்கல்கள் அல்லது தவறான மொபைல் கட்ட நிலைகளுடன் தொடர்புடையது (எல்லாவற்றையும் கவனித்தால்).சிகரங்கள், பொதுவாக மிகவும் "பலவீனமானவை").இந்த வகையில் சாத்தியமான சிக்கல்கள் மற்றும் தீர்வுகளின் குறுகிய பட்டியலை அட்டவணை I இல் காணலாம்.
மேலே குறிப்பிட்டுள்ளபடி, கவனம் செலுத்தி அதை சரிசெய்ய முயற்சிக்கும் முன் எவ்வளவு உச்ச விரிவடைவதை பொறுத்துக்கொள்ள வேண்டும் என்ற கேள்வி எதிர்கால கட்டுரையில் விவாதிக்கப்படும் ஒரு சிக்கலான தலைப்பாகும். எனது அனுபவம் என்னவென்றால், குறிப்பிடத்தக்க உச்ச விரிவாக்கம் பெரும்பாலும் உச்ச வடிவில் குறிப்பிடத்தக்க மாற்றத்துடன் இருக்கும், மேலும் உச்சக்கட்டத்தை பிரிப்பதற்கு முன் அல்லது பிளவுபடுவதை விட பொதுவானது.
இந்த சிக்கல்கள் ஒவ்வொன்றும் LC இன் முந்தைய இதழ்களில் விரிவாக விவாதிக்கப்பட்டுள்ளன, மேலும் இந்த தலைப்புகளில் ஆர்வமுள்ள வாசகர்கள் இந்த சிக்கல்களுக்கான மூல காரணங்கள் மற்றும் சாத்தியமான தீர்வுகள் பற்றிய தகவலுக்கு இந்த முந்தைய கட்டுரைகளைப் பார்க்கலாம்.கூடுதல் தகவல்கள்.
பீக் டெயில்லிங், பீக் ஃப்ரண்ட்டிங் மற்றும் பிளவுகள் அனைத்தும் இரசாயன அல்லது உடல் நிகழ்வுகளால் ஏற்படக்கூடும், மேலும் இந்த பிரச்சனைகளுக்கான சாத்தியமான தீர்வுகளின் பட்டியல் பரவலாக மாறுபடும், நாம் இரசாயன அல்லது உடல் சார்ந்த பிரச்சனையை கையாளுகிறோமா என்பதைப் பொறுத்து. பெரும்பாலும், ஒரு குரோமடோகிராமில் உள்ள வெவ்வேறு சிகரங்களை ஒப்பிடுவதன் மூலம், குற்றவாளி எது என்பது பற்றிய முக்கியமான தடயங்களை நீங்கள் காணலாம். ஒரு சில சிகரங்கள் பாதிக்கப்படுகின்றன, ஆனால் மீதமுள்ளவை நன்றாக இருக்கின்றன, காரணம் பெரும்பாலும் இரசாயனமாகும்.
பீக் டெயிலிங்கிற்கான இரசாயன காரணங்கள் இங்கே சுருக்கமாக விவாதிக்க மிகவும் சிக்கலானவை. ஆர்வமுள்ள வாசகர் "LC ட்ரபிள்ஷூட்டிங்" இன் சமீபத்திய இதழில் இன்னும் ஆழமான விவாதத்திற்கு (10) பரிந்துரைக்கப்படுகிறார். இருப்பினும், உட்செலுத்தப்பட்ட பகுப்பாய்வின் அளவைக் குறைத்து, உச்ச வடிவம் மேம்படுகிறதா என்பதைப் பார்ப்பது எளிதான முயற்சியாகும். சிறிய பகுப்பாய்வி நிறைகள் அல்லது குரோமடோகிராஃபிக் நிலைமைகள் மாற்றப்பட வேண்டும், இதனால் பெரிய வெகுஜனங்களை உட்செலுத்தினாலும் நல்ல உச்ச வடிவங்களைப் பெற முடியும்.
பீக் டெயிலிங்கிற்கு பல சாத்தியமான இயற்பியல் காரணங்களும் உள்ளன. சாத்தியக்கூறுகள் பற்றிய விரிவான விவாதத்தில் ஆர்வமுள்ள வாசகர்கள் மற்றொரு சமீபத்திய இதழான “LC ட்ரபிள்ஷூட்டிங்” (11) ஐப் பார்க்கிறார்கள். பீக் டெயிலிங்கிற்கான பொதுவான காரணங்களில் ஒன்று, இன்ஜெக்டருக்கும் டிடெக்டருக்கும் இடையே உள்ள மோசமான இணைப்பு (12) ஒரு தீவிர உதாரணம், சில வாரங்களுக்கு முன்பு உருவாக்கப்பட்ட ஒரு ஆய்வகத்தில், படம். நாங்கள் இதற்கு முன் பயன்படுத்தாத ஊசி வால்வு, மற்றும் ஒரு சிறிய அளவு ஊசி வளையத்தை ஒரு துருப்பிடிக்காத எஃகு தந்துகி மீது வடிவமைக்கப்பட்ட ஒரு ஃபெரூலுடன் நிறுவினோம். சில ஆரம்ப பிழைத்திருத்த சோதனைகளுக்குப் பிறகு, ஊசி வால்வு ஸ்டேட்டரில் உள்ள போர்ட் ஆழம் நாம் பயன்படுத்தியதை விட மிகவும் ஆழமாக இருப்பதை உணர்ந்தோம். துறைமுகத்தின் அடிப்பகுதியில் உள்ள டெட் வால்யூமை அகற்ற, ஃபெரூலை சரியான நிலையில் சரிசெய்ய முடியும்.
படம் 1e இல் காட்டப்பட்டுள்ளதைப் போன்ற உச்ச முனைகள் இயற்பியல் அல்லது இரசாயன பிரச்சனைகளாலும் ஏற்படலாம். முன்னணி விளிம்பிற்கு ஒரு பொதுவான உடல் காரணம் என்னவென்றால், நெடுவரிசையின் துகள் படுக்கை நன்றாக நிரம்பவில்லை அல்லது காலப்போக்கில் துகள்கள் மறுசீரமைக்கப்படுகின்றன. இலட்சிய (நேரியல்) நிலைமைகளின் கீழ், நிலையான கட்டத்தால் தக்கவைக்கப்படும் பகுப்பாய்வின் அளவு (எனவே, தக்கவைப்பு காரணி) நெடுவரிசையில் உள்ள பகுப்பாய்வின் செறிவுடன் நேர்கோட்டில் தொடர்புடையது. குரோமடோகிராபிபடி, இதன் பொருள், நெடுவரிசையில் உட்செலுத்தப்பட்ட பகுப்பாய்வின் நிறை அதிகரிக்கும் போது, ​​உச்சம் உயரமாக மாறும், ஆனால் இந்த உறவு விரிவடையாது. அதிக நிறை உட்செலுத்தப்படுவதால் அகலமானது.மேலும், நேரியல் அல்லாத வடிவங்கள் நிறமூர்த்த சிகரங்களின் வடிவத்தை தீர்மானிக்கின்றன, இதன் விளைவாக முன்னணி அல்லது பின்தங்கிய விளிம்புகள் ஏற்படும் இந்த நடத்தையை குறைக்க வரைபட நிலைமைகள் மாற்றப்பட வேண்டும்.
சில சமயங்களில் படம் 1f இல் காட்டப்பட்டுள்ளபடி "பிளவு" உச்சமாகத் தோன்றுவதை நாம் கவனிக்கிறோம். இந்தச் சிக்கலைத் தீர்ப்பதற்கான முதல் படி, உச்ச வடிவம் பகுதி இணை நீக்கம் (அதாவது, இரண்டு வேறுபட்ட ஆனால் நெருக்கமாக நீக்கும் சேர்மங்களின் இருப்பு) காரணமா என்பதை தீர்மானிக்க வேண்டும். மற்றும் வெளிப்படையான "பிளவு" சிகரங்கள் இயற்பியல் செயல்திறனுடன் தொடர்புடையவை. நெடுவரிசையுடன் எந்தத் தொடர்பும் இல்லை. பெரும்பாலும், இந்த முடிவிற்கான மிக முக்கியமான துப்பு, குரோமடோகிராமில் உள்ள அனைத்து சிகரங்களும் பிளவு வடிவங்களைக் காட்டுகின்றனவா அல்லது ஒன்றா அல்லது இரண்டா என்பதுதான். இது ஒன்று அல்லது இரண்டாக இருந்தால், அது அநேகமாக ஒரு இணை நீக்குதல் பிரச்சினையாக இருக்கலாம்;அனைத்து சிகரங்களும் பிளவுபட்டால், அது ஒரு உடல் பிரச்சினை, பெரும்பாலும் நெடுவரிசையுடன் தொடர்புடையது.
நெடுவரிசையின் இயற்பியல் பண்புகளுடன் தொடர்புடைய பிளவு சிகரங்கள் பொதுவாக பகுதியளவு தடுக்கப்பட்ட நுழைவாயில் அல்லது அவுட்லெட் ஃபிரிட்கள் அல்லது நெடுவரிசையில் உள்ள துகள்களை மறுசீரமைத்தல், நெடுவரிசை சேனல் உருவாக்கத்தின் சில பகுதிகளில் மொபைல் கட்டத்தை விட மொபைல் கட்டத்தை வேகமாக ஓட்ட அனுமதிக்கிறது.இருப்பினும், எனது அனுபவத்தில், இது பொதுவாக நீண்ட கால தீர்வைக் காட்டிலும் குறுகிய கால தீர்வாகும். துகள்கள் நெடுவரிசைக்குள் மீண்டும் இணைந்தால், இது பெரும்பாலும் நவீன நெடுவரிசைகளுடன் ஆபத்தானது. இந்த கட்டத்தில், நெடுவரிசையை மாற்றி, தொடர்வது சிறந்தது.
படம் 1g இல் உள்ள உச்சம், எனது சொந்த ஆய்வகத்தில் ஒரு சமீபத்திய நிகழ்விலிருந்து, சிக்னல் மிகவும் அதிகமாக இருப்பதைக் குறிக்கிறது, அது மறுமொழி வரம்பின் உயர்நிலையை அடைந்துள்ளது. ஆப்டிகல் உறிஞ்சுதல் கண்டுபிடிப்பாளர்களுக்கு (UV-vis), பகுப்பாய்வு செறிவு மிக அதிகமாக இருக்கும்போது, ​​​​பகுப்பாய்வானது பெரும்பாலான ஒளியை உறிஞ்சுகிறது. தவறான ஒளி மற்றும் "இருண்ட மின்னோட்டம்" போன்ற சத்தத்தின் பல்வேறு ஆதாரங்களால் தாக்கம் ஏற்படுகிறது, இது தோற்றத்தில் மிகவும் "தெளிவில்லாதது" மற்றும் பகுப்பாய்வு செறிவு இல்லாமல் செய்கிறது.இது நிகழும்போது, ​​பகுப்பாய்வின் ஊசி அளவைக் குறைப்பதன் மூலம், ஊசி அளவைக் குறைப்பதன் மூலம், மாதிரியை நீர்த்துப்போகச் செய்தல் அல்லது இரண்டையும் செய்வதன் மூலம் சிக்கலை எளிதாக தீர்க்க முடியும்.
குரோமடோகிராபி பள்ளியில், மாதிரியில் பகுப்பாய்வு செறிவின் ஒரு குறிகாட்டியாக டிடெக்டர் சிக்னலை (அதாவது, குரோமடோகிராமில் உள்ள ஒய்-அச்சு) பயன்படுத்துகிறோம். எனவே பூஜ்ஜியத்திற்குக் கீழே ஒரு சமிக்ஞை கொண்ட ஒரு குரோமடோகிராம் பார்ப்பது ஒற்றைப்படை என்று தோன்றுகிறது, ஏனெனில் இது ஒரு எதிர்மறை பகுப்பாய்வு செறிவைக் குறிக்கிறது, இது உடல் ரீதியாக சாத்தியமில்லை, பெரும்பாலும் என் அனுபவத்தைப் பயன்படுத்துவது, எதிர்மறையான உறிஞ்சுதல், இது பெரும்பாலும் கவனிக்கப்படுகிறது, இது எதிர்மறையானது, எதிர்மறையானது, எதிர்மறையான உறிஞ்சுதல், எதிர்மறையான உறிஞ்சுதல், இது மிகவும் கவனிக்கப்படுகிறது, இது எதிர்மறையானது, ஏனெனில் அவை அதிகப்படியான உறிஞ்சுதல், இது கவனிக்கும்போது.
இந்த வழக்கில், எதிர்மறை உச்சம் என்பது, நெடுவரிசையிலிருந்து வெளியேறும் மூலக்கூறுகள், உச்சத்திற்கு முன்னும் பின்னும், மொபைல் கட்டத்தை விட குறைவான ஒளியை உறிஞ்சுகின்றன. எடுத்துக்காட்டாக, ஒப்பீட்டளவில் குறைந்த கண்டறிதல் அலைநீளங்கள் (<230 nm) மற்றும் மொபைல் கட்ட சேர்க்கைகளைப் பயன்படுத்தும் போது இந்த அலைநீளங்களில் உள்ள பெரும்பாலான ஒளியை உறிஞ்சும் போது இது நிகழலாம். ஒரு அளவுத்திருத்த வளைவைத் தயாரிப்பதற்கும் துல்லியமான அளவுத் தகவலைப் பெறுவதற்கும் எதிர்மறை சிகரங்களைப் பயன்படுத்தலாம், எனவே அவற்றைத் தவிர்ப்பதற்கு எந்த அடிப்படைக் காரணமும் இல்லை (இந்த முறை சில நேரங்களில் "மறைமுக UV கண்டறிதல்" என்று குறிப்பிடப்படுகிறது) (13) இருப்பினும், எதிர்மறை உச்சங்களை நாம் உண்மையில் தவிர்க்க விரும்பினால், உறிஞ்சுதல் கண்டறிதலை விட, மொபைல் நிலை மாற்றத்தைக் கண்டறிவதே சிறந்த தீர்வாகும். மொபைல் கட்டத்தின் கலவை, அவை பகுப்பாய்வுகளை விட குறைவான ஒளியை உறிஞ்சும்.
கரைப்பான் அணி போன்ற மாதிரியில் உள்ள பகுப்பாய்வைத் தவிர மற்ற கூறுகளின் ஒளிவிலகல் குறியீடானது மொபைல் கட்டத்தின் ஒளிவிலகல் குறியீட்டிலிருந்து வேறுபட்டதாக இருக்கும்போது ஒளிவிலகல் குறியீடு (RI) கண்டறிதலைப் பயன்படுத்தும் போது எதிர்மறை உச்சநிலைகள் தோன்றும். மொபைல் கட்டத்தின் அணி.
LC சரிசெய்தலின் அடிப்படை தலைப்பில் பாகம் மூன்றில், கவனிக்கப்பட்ட உச்ச வடிவம் எதிர்பார்க்கப்படும் அல்லது சாதாரண உச்ச வடிவத்திலிருந்து வேறுபடும் சூழ்நிலைகளைப் பற்றி நான் விவாதித்தேன். அத்தகைய சிக்கல்களின் பயனுள்ள சரிசெய்தல், எதிர்பார்க்கப்படும் உச்ச வடிவங்களின் அறிவுடன் தொடங்குகிறது (கோட்பாடு அல்லது ஏற்கனவே உள்ள முறைகளுடன் முந்தைய அனுபவத்தின் அடிப்படையில்), எனவே இந்த எதிர்பார்ப்புகளிலிருந்து விலகல்கள் வெளிப்படையானவை. நான் அடிக்கடி பார்க்கும் காரணங்கள்.இந்த விவரங்களைத் தெரிந்துகொள்வது பிழைகாணுதலைத் தொடங்குவதற்கு ஒரு நல்ல இடத்தை வழங்குகிறது, ஆனால் எல்லா சாத்தியக்கூறுகளையும் பிடிக்காது. காரணங்கள் மற்றும் தீர்வுகளின் ஆழமான பட்டியலில் ஆர்வமுள்ள வாசகர்கள் LCGC “LC பிழைத்திருத்த வழிகாட்டி” சுவர் விளக்கப்படத்தைப் பார்க்கவும்.
(4) LCGC “LC பிழைத்திருத்த வழிகாட்டி” சுவர் விளக்கப்படம்.https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) ஏ. ஃபெலிங்கர், குரோமடோகிராஃபியில் தரவு பகுப்பாய்வு மற்றும் சிக்னல் செயலாக்கம் (எல்சேவியர், நியூயார்க், NY, 1998), பக். 43-96.
(8) வஹாப் MF, தாஸ்குப்தா PK, Kadjo AF மற்றும் ஆம்ஸ்ட்ராங் DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.