Javascript дар айни замон дар браузери шумо ғайрифаъол аст. Баъзе хусусиятҳои ин вебсайт ҳангоми хомӯш кардани javascript кор намекунанд.
Бо тафсилоти мушаххаси худ ва доруи мушаххаси мавриди таваҷҷӯҳи худ сабти ном кунед ва мо ба маълумоте, ки шумо бо мақолаҳо дар базаи васеи мо пешниҳод мекунед, мувофиқат мекунем ва ба таври фаврӣ ба шумо нусхаи PDF-ро бо почтаи электронӣ мефиристем.
Стелла С, Витале СР, Марторана Ф, Массимино М, Павоне Г, Ланзафаме К, Бианка С, Барон С, Горгоне С, Фичера М, Манзелла Л.
Стефания Стелла, 1,2 Силвия Рита Витале, 1,2 Федерика Марторана, 1,2 Мишел Массимино, 1,2 Ҷулиана Павоне, 3 Катя Ланзафаме, 3 Себастяно Бианка, 4 Чиара Бароне, 5 Кристина Горгоне, 6 Марко Фичера Лицера12, Тибб, Донишгоҳи Катания, Катания, 95123, Италия; 2 Маркази таҷрибавии онкология ва гематология, AOU Policlinico “G.Rodolico – San Marco”, Катания, 95123, Италия;3 Онкологияи тиббии АОУ поликлиникаи «Г.Родолико – Сан Марко”, Катания, 95123, Италия;4 Генетикаи тиббӣ, ARNAS Garibaldi, Катания, 95123, Италия;5 Medicine Genetics, ASP, Syracuse, 96100, Италия;6 Шӯъбаи илмҳои биотиббӣ ва биотехнология, Донишгоҳи Катания, Генетикаи тиббӣ, Катания, Италия, 95123;Институти тадқиқотии 7Oasi-IRCCS, Троина, 94018, Италия Муошират: Стефания Стелла, тел +39 095 378 1946, почтаи электронӣ [email protected];[email protected] Мақсад: Мутатсияҳои хати насл дар BRCA1 ва BRCA2 ва саратони муқарраршудаи сина (BC), тухмдон (OC) ва дигарҳое, ки бо хатари умри саратон алоқаманданд. Санҷиши гени BRCA калиди арзёбии хатари инфиродӣ, инчунин барои дарёфти усулҳои пешгирӣ дар интиқолдиҳандагони солим ва табобати дӯзандагӣ дар беморони саратон мебошад. дар бораи вариантҳои патогении BRCA дар оилаҳои Сицилия вуҷуд доранд, тадқиқотҳое, ки махсусан ба аҳолии шарқии Сицилия нигаронида шудаанд, вуҷуд надоранд. Ҳадафи омӯзиши мо таҳқиқи ҳодиса ва паҳншавии тағиротҳои патогении BRCA дар як гурӯҳи беморони милод аз Сицилияи шарқӣ ва арзёбии робитаи онҳо бо ҳузури мушаххаси BC бо истифода аз аломатҳои мушаххаси BC бо истифода аз аломатҳои мушаххаси коррелятсияҳо буд. НАТИҶАҲО: Дар маҷмӯъ, дар 35 беморон (9%) варианти патогении BRCA доштанд, 17 (49%) дар BRCA1 ва 18 (51%) дар BRCA2. Тағйироти BRCA1 дар беморони секаратаи манфии BC маъмуланд, дар ҳоле ки мутатсияҳои BRCA2 дар беморони гирифтори люминалӣ, варамҳои баланди BRCA бо варианти люминалӣ бо варианти назарраси BRCA бо беморони гирифтори бемории BRCA1 дар дараҷаи баландтар. ва индекси пролиферативӣ.Хулосаҳо: Бозёфтҳои мо шарҳи ҳолати мутатсиявии BRCA-ро дар беморони пеш аз милод аз шарқи Сицилия таъмин мекунанд ва нақши таҳлили NGS-ро дар муайян кардани беморони ирсии BC.Overall, ин маълумотҳо бо далелҳои қаблии дастгирии скрининги BRCA барои пешгирӣ ва табобати дурусти саратон дар интиқолдиҳандагони мутатсия мувофиқат мекунанд.
Саратони сина (BC) бемории маъмултарин дар саросари ҷаҳон ва марговартарин саратон дар занон мебошад.1 Хусусиятҳои биологие, ки пешгӯии BC ва рафтори клиникиро муайян мекунанд, бо мурури замон ба таври васеъ омӯхта ва қисман равшан карда шудаанд. Дарвоқеъ, дар айни замон якчанд маркерҳои суррогатӣ барои тасниф кардани BC ба зергурӯҳҳои гуногуни молекулавӣ истифода мешаванд. Онҳо афзоиши ресепторҳои инсонӣ (эстрогенҳо/эстрогенҳо) (эстрогенҳо/ресепторҳо) мебошанд. ё 2 (HER2) амплификация, индекси паҳншавии Ki-67 ва дараҷаи варам (G).2 Маҷмӯи ин тағирёбанда категорияҳои зерини BC-ро муайян кард: 1) Омосҳои люминалӣ, ки ифодаи ER ва/ё PgR-ро нишон медиҳанд, 75% BCs-ро ташкил медоданд. Ин варамҳо минбаъд ба Luminal A тақсим карда шуданд, вақте ки Luminal A ва Ki-HER6 манфӣ дар поён буд, ва B2-6, баробар ё бештар аз 20% буд ва дар ҳузури амплификацияи HER2, новобаста аз шохиси паҳншавӣ;2) варамҳои HER2+, ки ER ва PgR манфӣ мебошанд, вале амплификацияи HER2-ро нишон медиҳанд. Ин гурӯҳ 10% тамоми варамҳои синаро ташкил медиҳад;3) Саратони синаи сегонаи манфии сина (TNBC), ки ифодаи ER ва PgR ва амплификацияи HER2-ро нишон намедиҳад, тақрибан 15% саратони синаро ташкил медиҳад.2-4
Дар байни ин зергурӯҳҳои BC, дараҷаи варам ва шохиси паҳншавӣ биомаркерҳои салибро ифода мекунанд, ки мустақиман ва мустақилона бо хашмгинӣ ва пешгӯии варам алоқаманданд.5,6
Илова ба хусусиятҳои биологии дар боло зикршуда, дар тӯли чанд соли охир нақши тағироти ирсии ирсӣ, ки ба рушди BC оварда мерасонад, аҳамияти бештар пайдо мекунад.7 Тақрибан 1 аз 10 варами сина аз сабаби тағирёбии хати насл дар генҳои мушаххас мерос гирифта мешавад.8 Ду тадқиқоти калони эпидемиологӣ, ки зиёда аз 180,000 занонро дар бар мегиранд, ба наздикӣ муайян карда шуданд. BRCA2, CHK2, PALB2, RAD51C ва RAD51D) пеш аз ҳама барои ирсии BC масъуланд. Дар байни ин генҳо, BRCA1 ва BRCA2 (минбаъд BRCA1/2 номида мешавад) робитаи қавитаринро бо рушди варамҳои сина нишон доданд. бемориҳо, аз ҷумла тухмдонҳо, ғадуди простата, гадуди зери меланома, колоректалӣ ва меланома. Аз синни 13 то 80 сола, паҳншавии маҷмӯӣ BC дар занони дорои варианти патогении BRCA1 (PV) 72% ва дар занони гирифтори BRCA2 PV 69% аст.14
Қобили зикр аст, ки як нашрияи нав нишон медиҳад, ки хатари милод аз навъи PV вобаста аст. Дар асл, дар муқоиса бо вариантҳои патогении буридан, вариантҳои барҷастаи гумроҳӣ, бахусус дар генҳои BRCA1, бо коҳиши хатари BC, махсусан дар занони солхӯрда алоқаманданд.15
Мавҷудияти BRCA1 ё BRCA2 PV бо хусусиятҳои гуногуни биологӣ ва клиникопатологӣ алоқаманд буд. 16,17 BC-ҳои бо BRCA1 алоқаманд одатан аз ҷиҳати клиникӣ хашмгин, суст фарқкунанда ва хеле пролиферативӣ мебошанд. Ин варамҳо одатан се маротиба манфӣ буда, синну соли барвақти сар доранд. ва шохиси пролиферативии тағйирёбанда. Ин варамҳо бештар дар люмени В маъмуланд ва одатан дар калонсолони калонсол ба вуҷуд меоянд.16-18 Қобили зикр аст, ки мутатсияҳо дар BRCA1 ва BRCA2 ҳассосиятро ба табобатҳои мушаххас, аз ҷумла намакҳои платина ва доруҳои мақсаднок ба монанди ингибиторҳои полимеразии поли(ADP-рибоза) (PARPi) зиёд мекунанд.19,22
Дар тӯли чанд соли охир, татбиқи пайдарпайии насли оянда (NGS) дар амалияи клиникӣ имкон дод, ки шумораи афзояндаи беморони пеш аз милод аз санҷиши молекулавӣ барои синдромҳои ҳассосияти саратон, аз ҷумла BRCA1 / 2.21 Ҳамзамон, таърифҳо дар асоси меъёрҳои дақиқи таърихи оила, демографӣ ва арзиши беҳтари хусусиятҳои клиникии клиникӣ / CA22, муайян кардани ташхиси клиникии инфиродӣ гузаранд. Дар ин замина, далелҳо дар бораи скрининги BRCA1/2 дар популятсияҳои мушаххас ҷамъ мешаванд, ки фарқиятҳоро дар байни минтақаҳои ҷуғрофӣ таъкид мекунанд.24–27 Ҳарчанд гузоришҳо дар бораи когорти BC дар ғарби Сицилия мавҷуданд, дар бораи скрининги BRCA1/2 дар аҳолии шарқии Сицилия маълумоти камтар мавҷуд аст.28,29
Мо дар ин ҷо натиҷаҳои скрининги гермлинии BRCA1/2-ро дар беморони пеш аз милод аз шарқи Сицилия тавсиф мекунем, ки минбаъд мавҷудияти мутатсияҳои BRCA1 ё BRCA2-ро бо хусусиятҳои асосии клиникопатологии ин варамҳо алоқаманд мекунанд.
Тадқиқоти ретроспективӣ дар "Маркази таҷрибавии онкология ва гематология" дар беморхонаи Поликлинико гузаронида шуд. Родолико - Сан-Марко дар Катания. Аз январи соли 2017 то марти соли 2021, дар маҷмӯъ 455 беморони сина ва тухмдон, меланома, гадуди зери меъда ё простата барои ташхиси геноситалии саратони простата/БРР-и мо гузаронида шуданд. Таҳқиқоти ӯ мувофиқи Эъломияи Хелсинки гузаронида шуд ва ҳамаи иштирокчиён пеш аз таҳлили молекулавӣ розигии хаттии огоҳонидашударо пешниҳод карданд.
Хусусиятҳои гистологӣ ва биологии (ER, PgR, мақоми HER2, Ki-67 ва дараҷаи) BC дар биопсияи аслӣ ё намунаҳои ҷарроҳӣ бо назардошти танҳо ҷузъҳои варамҳои хашмгин арзёбӣ карда шуданд. Дар асоси ин хусусиятҳо, BCs ба таври зерин тасниф карда шуданд: luminal A (ER+ ва/ё PgR+, HER7-2%, PgR+, PgR+, HER7-2+, PgR+, 6+2, HER2-, Ki-67≥20%), luminal B-HER2+ (ER ва/ё PgR+, HER2+), HER2+ (ER ва PgR-, HER2+) ё секаратаи манфӣ (ER ва PgR-, HER2-).
Пеш аз арзёбии ҳолати мутатсияи BRCA1 ва BRCA2, як гурӯҳи бисёрсоҳавӣ, аз ҷумла онколог, генетик ва равоншинос барои ҳар як бемор машварат оид ба генетикаи варам гузарониданд, то мавҷудияти BRCA1 ва/ё BRCA1-ро муайян кунад.ё ашхосе, ки хавфи баланди PV дар генофонди BRCA2 доранд. Интихоби беморон тибқи дастурҳои Ҷамъияти итолиёвии саратоншиносии тиббӣ (AIOM) ва тавсияҳои маҳаллии Сицилия анҷом дода шуд.30,31 Ба ин меъёрҳо дохил мешаванд: (i) таърихи оилавии вариантҳои патогении маълум дар генҳои ҳассосият (масалан, BRCA1, BRCA3PT, EN);(ii) мардон бо пеш аз милод;(iii) онҳое, ки BC ва OC доранд;(iv) занони гирифтори BC <36 сола, TNBC <60 сола ё дутарафаи BC <50 сола;(v) таърихи тиббии шахсии то 50 сол аз милод ва на камтар аз як хеши дараҷаи якум: (а) аз милод < 50 сол;(б) ОК-и ғайримусинӣ ва ғайримарзӣ дар ҳама синну сол;$C) дутарафаи милод;$D) мард аз милод;$E) саратони гадуди зери меъда;(е) саратони простата;(vi) ду ё зиёда таърихи шахсии пеш аз милод > 50 сол ва таърихи оилавии бемории пеш аз милод, ОК ё саратони гадуди зери меъда барои хешовандоне, ки бо ҳамдигар хешовандони дараҷаи якум мебошанд (аз ҷумла хешовандоне, ки бо онҳо хешовандони дараҷаи якум мебошанд);(vii) Таърихи шахсии ОК ва ҳадди аққал як хешовандони дараҷаи якум: (а) то милод <50 сол;(б) NOC;$C) дутарафаи милод;$D) мард аз милод;(vii) зан бо дараҷаи баланди OC сероз.
Аз ҳар як бемор намунаи хуни периферикии 20 мл гирифта шуд ва дар найҳои EDTA (BD Biosciences) ҷамъоварӣ карда шуд. ДНК-и геномӣ аз намунаҳои хуни 0,7 мл бо истифода аз маҷмӯаи изолятсияи QIAsymphony DSP DNA Midi (QIAGEN, Ҳилден, Италия) мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда (Quibit S) ҷудо карда шуд. , Уолтам, MA, ИМА) Андозаи миқдорро иҷро кунед.Ғанигардонии ҳадаф ва омодасозии китобхона аз ҷониби Oncomine™ BRCA Research Assay Chef анҷом дода мешавад, ки барои бор кардан ба маҷмӯаи Ion AmpliSeq™ Chef Reagents DL8 барои омодасозии автоматии китобхона мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда омода карда мешавад. Маҷмӯа аз ду ҳавзи мултиплекси PCR иборат аст, ки онҳоро барои омӯзиши ҳама BRCA1 ва BRCA03N (NM30_020) истифода бурдан мумкин аст. генҳо. Хулоса, 15 мкл аз ҳар як ДНК-и маҳлулшуда (10 нг) ба лавҳаҳои штрих-кодшуда барои омодасозии китобхона илова карда шуд ва ҳама реактивҳо ва масолеҳи масрафшаванда ба асбоби Ion Chef™ бор карда шуданд. Сипас дар асбоби Ion Chef™ ҷамъоварӣ кардани китобхонаи штрих-кодшудаи намунаҳо анҷом дода шуд. tific, Waltham, MA, ИМА) мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда. Ниҳоят, китобхонаҳо дар таносуби эквимолярӣ дар қубурҳои намунавии Ion Chef™ (найҳои штрих-код) муттаҳид карда мешаванд ва ба асбоби Ion Chef™ бор карда мешаванд. Пайдарпайкунӣ бо истифода аз Ion Torrent S5 (Thermo Fisher Scientific (Thermo Fisher Scientific) Fishermo (Thermo Fisher) бо истифода аз асбоби Scientificmo10) анҷом дода шуд. Fisher Scientific).Таҳлили маълумот аз ҷониби Amplicon Suite (SmartSeq srl) ва Ion Reporter Software анҷом дода шуд.
Ҳама номенклатураи вариантҳо дастурҳои ҷории Консорсиуми тағирёбии геноми инсонро, ки дар интернет дастрасанд (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen) риоя карданд. Аҳамияти клиникии вариантҳои BRCA1/2 бо истифода аз таснифи Консорсиуми Байналмилалии ENIGMA (Evidence-Based Network, Network for Interpretantium Germorgs/https://www.hgvs.org/mutnomen) муайян карда шуд. ARUP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD ва UMD. Тасниф панҷ категорияи гуногуни хатарро дар бар мегирад: зарарнок (категорияи I), эҳтимолан хуб (категорияи II), варианти аҳамияти номуайян (VUS, категорияи III), эҳтимолии патогенӣ (категорияи IV) ва таъсири патогенӣ (категорияи IV) ва инчунин таъсироти патогенӣ ба сохтори мутатсияшудаи сохтори протеин, василаи таҳлили патогенӣ. бо дастрасӣ ба 30 пойгоҳи додаҳо.32
Барои таъин кардани аҳамияти потенсиалии клиникӣ ба ҳар як VUS, алгоритмҳои зерини ҳисобкунии пешгӯии сафедаҳо истифода шуданд: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/http:///genetics.bwh.harvard.edu/http://pph-Dtahv.g. u/agvgd_input.php).Вариантҳое, ки ҳамчун синфи 1 ва 2 тасниф шудаанд, навъи ваҳшӣ ҳисобида мешуданд.
Пайдарпайвандии Сангер мавҷудияти ҳар як варианти патогениро тасдиқ кард. Ба таври мухтасар, як ҷуфт праймерҳои мушаххас барои ҳар як варианти ошкоршуда бо истифода аз пайдарпаии истинодҳои генҳои BRCA1 ва BRCA2 тарҳрезӣ шудаанд (NG_005905.2, NM_007294.3 ва NG_012772.3, NM95R аз ҷониби PC риоя карда шуд. пайдарпайии гер.
Бемороне, ки барои гени BRCA1/2 манфӣ санҷидаанд, мувофиқи дастурҳои истеҳсолкунанда барои арзёбии мавҷудияти азнавсозии бузурги геномӣ (LGR) тавассути амплификацияи вобаста ба мултиплекс (MLPA) озмоиш карда шуданд. Хулоса, намунаҳои ДНК денатурат карда мешаванд ва то 60 генҳои BRCA1 ва BRCA2 тақрибан дар ҳар як генҳои мушаххаси DNA60 муайян карда мешаванд. Маҳсулоти амплификацияи length.Probe, ки аз маҷмӯи беназири ампликонҳои PCR иборат аст, баъдан тавассути электрофорези капиллярӣ ва нармафзори Cofalyser.Net дар якҷоягӣ бо ҷадвалҳои мувофиқи партияи мушаххаси Cofalyser (www.mrcholland.com) таҳлил карда шуданд.
Тағйирёбандаҳои клиникӣпатологии интихобшуда (дараҷаи гистологӣ ва шохиси паҳншавии Ki-67%) бо мавҷудияти BRCA1/2 PV алоқаманд буданд, ки бо истифода аз нармафзори Prism v. 8.4 бо истифода аз санҷиши дақиқи Фишер бо фарз кардани арзиши p <0,05 муҳим аст.
Дар байни моҳи январи соли 2017 ва марти соли 2021, 455 бемор барои мутатсияҳои ҷанини BRCA1/2 муоина карда шуданд. Санҷиши мутатсия дар Маркази таҷрибавии онкология ва гематологияи беморхонаи Policlinico гузаронида шуд. Мувофиқи дастури Сицилия (http://www.gurs.regione. Gennaio 2020), Родоликои Катания - Сан-Марко» дар маҷмӯъ, 389 бемор саратони сина, 37 саратони тухмдон, 16 саратони гадуди зери меъда, 8 саратони простата ва 5 меланома буданд.Тақсимоти беморон аз рӯи намуди саратон ва натиҷаҳои таҳлил дар расми 1 нишон дода шудааст.
Дар расми 1 диаграммаи ҷараён нишон дода шудааст, ки шарҳи тадқиқотро нишон медиҳад. Беморони гирифтори варамҳои сина, меланома, гадуди зери меъда, простата ё тухмдон барои мутатсия дар генҳои BRCA1 ва BRCA2 санҷида шуданд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ;VUS, варианти аҳамияти номуайян;WT, пайдарпаии навъи ваҳшӣ BRCA1/2.
Мо ба таври интихобӣ таҳқиқоти худро ба гурӯҳҳои саратони сина равона кардем. Синну соли миёнаи беморон 49 сола (диапазони 23-89) ва асосан занон буданд (n=376 ё 97%).
Аз ин субъектҳо, 64 (17%) мутацияҳои BRCA1/2 доштанд ва ҳама занон буданд. Сиву панҷ (9%) PV ва 29 (7,5%) VUS доштанд. Ҳабдаҳ (48,6%) аз 35 варианти патогенӣ дар BRCA1 ва 18 (51,4%) дар BRCA2 рух додаанд, дар ҳоле ки 18 (51,4%) дар BRCA2 (% 51,2) ва 1782. дар BRCA2 (Расмҳои 1 ва 2). LGR дар таҳлили MLPA мавҷуд набуд.
Расми 2. Таҳлили мутатсияҳои BRCA1 ва BRCA2 дар 389 беморони саратони сина. (A) Тақсимоти вариантҳои патогенӣ (PV) (сурх), вариантҳои аҳамияти номуайян (VUS) (норанҷӣ) ва WT (кабуд) дар 389 беморони саратони сина;(B) 389 беморони саратони сина 35 (9%) вариантҳои патогении BRCA1/2 (PVs) доштанд. Дар байни онҳо 17 (48,6%) интиқолдиҳандагони BRCA1 PV (сурхи торик) ва 18 (51,4%) интиқолдиҳандагони BRCA2 (сурхи сабук) буданд;(C) 29 (7,5%) аз 389 субъектҳо VUS, 5 (17,2%) генҳои BRCA1 (норанҷии торик) ва 24 (82,8%) генҳои BRCA2 (норанҷии сабук) доштанд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ;VUS, варианти аҳамияти номуайян;WT, пайдарпаии навъи ваҳшӣ BRCA1/2.
Мо баъдан паҳншавии зергурӯҳҳои молекулавии BC дар беморони гирифтори BRCA1/2 PV-ро таҳқиқ кардем. Тақсимоти 2 (5,7%) luminal A, 15 (42,9%) luminal B, 3 (8,6%) luminal B-HER2+, 2 (5,7%) HER2+ ва 13 mon (37,7%) беморони TCA1, 13 (37% BCNA1, 13) (37,5%) . 9,4% luminal B BC, 2 (11,8%) бемории HER2+ ва 10 (58,8%) TNBC дошт. Омосҳои бе мутатсияҳои BRCA1 luminal A ё luminal B-HER2+ (Расми 3). B-HER2+, 3 (16,7%) TNBC ва 2 (11,1%) luminal A буданд (Расми 3). Дар ин гурӯҳ ягон варами HER2+ вуҷуд надошт. Ҳамин тавр, мутатсияҳои BRCA1 дар беморони TNBC маъмуланд, дар ҳоле ки тағйироти BRCA2 дар одамони lumen B бартарӣ доранд.
Тасвири 3 Паҳншавии зергурӯҳҳои саратони сина дар беморони дорои вариантҳои патогенӣ дар BRCA1 ва BRCA2.Гистограммаҳо, ки тақсимоти BRCA1- (сурхи торик) ва BRCA2- (сурх сурх) дар байни зергурӯҳҳои молекулавии беморони саратони сина нишон медиҳанд. Рақамҳое, ки дар ҳар як қуттӣ гузориш дода шудаанд, фоизи беморони гирифтори BRCA21 ва ҳар як намуди саратони BRCAPV-ро нишон медиҳанд.
Ихтисорот: PVs, варианти патогенӣ;HER2+, ретсептори омили афзоиши эпидермалии инсон 2 мусбат;TNBC, саратони сина манфии сегона.
Баъдан, мо намуд ва маҳалли ҷойгиршавии генофонди BRCA1 ва BRCA2-ро арзёбӣ кардем. Дар BRCA1 PV, мо 7 варианти ягонаи нуклеотидҳо (SNVs), 6 ҳазфкунӣ, 3 такрорӣ ва 1 воридкуниро мушоҳида кардем. Танҳо як мутатсия (c.5522delG) як кашфиёти навро дар BRCA_1535 ошкор намуд. delCTAAT.Ин тағирот ҳазфи панҷ нуклеотид (CTAAT) дар экзони BRCA1 15-ро дар бар мегирад, ки дар натиҷа лейцини аминокислотаи аминокислотаҳо бо тирозин дар кодони 1679 иваз карда мешавад ва аз сабаби тағирёбии чаҳорчӯбаи тарҷума бо кодони алтернативии пешгӯишаванда боиси як тағироти пеш аз мӯҳлат буридани сафеда дар як ҳолати дигар ошкор карда нашудааст. Минтақаи консенсуси макони пайвастшавӣ (c.4357+1G>T) (Ҷадвали 1).
Дар робита ба BRCA2 PV, мо 6 ҳазф, 6 SNV ва 2 такрорро мушоҳида кардем. Ҳеҷ кадоме аз тағиротҳои ёфтшуда нав нестанд. Се мутатсия дар популятсияи мо такрор шуданд, c.428dup ва c.8487+1G>A дар 3 субъект мушоҳида карда шуданд, пас аз он c.5851_5854delAG4 дар ду ҳолати такрории C.5851_5854delAG4. дар экзони 5-и BRCA2, пешгӯӣ шудааст, ки сафедаи буридашуда ва ғайрифунксионалӣ рамзгузорӣ шавад. Мутация c.8487+1G>A дар минтақаи дохилии BRCA2 intron 19 (± 1,2) ба амал меояд ва ба пайдарпаии консенсуси пайвастшавӣ таъсир мерасонад, ки дар натиҷа пайванди тағирёбанда ё протеини ғайримуқаррарии c.8487 дар натиҷаи роҳи c.855-и протеини abnormal AG пайдо мешавад. сабаби несткунии 4-нуклеотид аз мавқеъҳои нуклеотидҳои 5851 то 5854 дар экзони рамзгузории 10-и гени BRCA2 аст ва боиси тағирёбии чаҳорчӯбаи тарҷума бо кодони алтернативии таваққуф (p.S1951WfsTer) мегардад. Қобили зикр, тавре ки қаблан хабар дода шуда буд, ҳарду тағирот дар c>1G02 дар c>1G02 дар беморон ошкор карда шуданд. 4 Мутацияи аввал ивазшавии аденозин (A) дар экзони BRCA2 7 бо гуанин (G)-и дорои нуклеотиди иборат аст, ки дар натиҷа валин ба изолейцин дар кодони 211 иваз мешавад, изолейцин аминокислота аминокислотаи дорои хосиятҳои хеле шабеҳ аст. Ин тағирот ба ҳолати муқаррарии mRNA дар минтақаи A таъсир мерасонад ва дар варианти дуюм дар минтақаи экспликатсияи дуҷониба ҷойгир шудааст. дар 13 гени рамзгузори BRCA2. Тағйирёбии c.7008-2A>T метавонад транскриптҳои сершумори дарозии гуногунро тавлид кунад. Ғайр аз ин, дар гурӯҳи BRCA2 PVs, 4 аз 18 тағирот (22,2%) интронӣ буданд.
Пас аз он мо BRCA1 / 2 мутатсияҳои зарароварро дар доменҳои функсионалӣ ва минтақаҳои протеин-ҳатмӣ харита кардем (расми 4). Дар гени BRCA1, 50% PVs дар минтақаи кластери саратони сина (BCCR) ҷойгир буданд, дар ҳоле ки 22% мутатсияҳо дар минтақаи кластери саратони тухмдон (OCCR) ҷойгир буданд (Расми 42 дар Варианти PVBR BC3, Варианти PVBR BC7). Минтақаи CR ва 42,8% мутатсияҳо дар OCCR ҷойгир буданд (Расми 4B). Баъдан, мо ҷойгиршавии PV-ро дар дохили доменҳои сафедаи BRCA1 ва BRCA2 арзёбӣ кардем. Барои протеини BRCA1, мо се PVs дар ҳалқа ва доменҳои coiled, ва ду мутатсия дар домени BRCT ба протеини BRCA дар ҳоле, ки такрори домени BRCA2 (расми BRC, барои такрори протеини BRC2) пайдо шуд. Дар доменҳои олиго/олигосахарид-пайваст (ОБ) ва бурҷ (T) 3 тағироти интронӣ ва 3 экзоникӣ ошкор карда шуданд (Расми 4B).
Тасвири 4 Намоиши схематикии сафедаҳои BRCA1 ва BRCA2 ва маҳаллисозии вариантҳои патогенӣ. Ин рақам тақсимоти вариантҳои патогении BRCA1 (A) ва BRCA2 (B) дар беморони саратони сина нишон медиҳад. Мутацияҳои экзоникӣ бо ранги кабуд нишон дода шудаанд, дар ҳоле ки вариантҳои интронӣ бо ранги норанҷӣ нишон дода шудаанд. Баландии сатр шумораи ҳолатҳо ва протеинҳои гузоришшудаи BRCABR-ро нишон медиҳад (Домени BRCA21). протеин дорои домени ҳалқа (RING) ва пайдарпаии локализатсияи ядроӣ (NLS), домени печонидашуда, домени кластери SQ/TQ (SCD) ва домени BRCA1 C-терминал (BRCT) мебошад. (B) Протеин BRCA2 дорои ҳашт такрори BRC, як домени ҳатмии ДНК бо домени спиралӣ, се домени спиралӣ (хеликолӣ) ва қабати oligonide (heliccles) домени бурҷи (T) ва NLS дар тарафи C. Майдонҳо бо номи Минтақаи кластери саратони сина (BCCR) ва минтақаи кластери саратони тухмдон (OCCR) дар поён нишон дода шудаанд.*Мутацияҳоеро ифода мекунанд, ки кодонҳои қатъиро муайян мекунанд.
Пас аз он мо хусусиятҳои клиникии клиникии милодро таҳқиқ кардем, ки метавонанд бо ҳузури BRCA1 / 2 PV алоқаманд бошанд. Сабтҳои пурраи клиникӣ барои 181 беморони BRCA1 / 2-манфӣ (на интиқолдиҳандагон) ва ҳама интиқолдиҳандагон (n = 35) дастрас буданд. Дар байни суръати паҳншавии варамҳо ва дараҷа алоқамандӣ вуҷуд дошт.
Мо тақсимоти Ki-67-ро дар асоси медиани когорти худ ҳисоб кардем (25%, диапазони <10-90%). Субъектҳои дорои Ki-67 < 25% ҳамчун "Ки-67 паст" муайян карда шуданд, дар ҳоле ки ашхоси дорои арзишҳои ≥ 25% "баланд Ki-67" ҳисобида шуданд. Фарқияти назаррас байни Ki-67 ва ғайрикари PV1 (CA-170) ёфт шуд. интиқолдиҳандагон (расми 5А).
Тасвири 5 Муносибати Ki-67 бо тақсимоти дараҷа дар занони саратони сина бо BRCA1 ва BRCA2 PVs. (A) Қуттии ҷадвал нишон медиҳад, ки арзишҳои медиании Ki-67 дар 181 беморони интиқолдиҳандаи пеш аз милод нисбат ба BRCA1 (18) ё BRCA2 (17) беморони PV. Арзишҳои P аз беморони саратони аз 0,5 грами назарраси ӯро ифода мекунанд. гурӯҳҳои дараҷаи гистологӣ (G2 ва G3) мувофиқи ҳолати мутатсияи BRCA1 ва BRCA2 (субъектҳои WT, интиқолдиҳандагони BRCA1 ва BRCA2 PVs).
Ба ҳамин монанд, мо тафтиш кардем, ки дараҷаи варам бо мавҷудияти BRCA1/2 PV алоқаманд аст. Азбаски G1 пеш аз милод дар популятсияи мо мавҷуд набуд, мо беморонро ба ду гурӯҳ тақсим кардем (G2 ё G3). Мувофиқи натиҷаҳои Ki-67, таҳлил таносуби аз ҷиҳати оморӣ муҳимро байни дараҷаи варам ва мутацияи баландтари BRCA1 бо пропорционалии автомобили BRCA3 дар муқоиса бо пропорционалии автомобилии BRCA3 ошкор намуд. riers (p<0,005) (Расми 5B).
Пешрафтҳо дар технологияи пайдарпайии ДНК ба пешрафтҳои бесобиқа дар озмоиши генетикии BRCA1/2 имкон доданд, ки барои беморони дорои таърихи оилавии саратон оқибатҳои муҳим доранд. То имрӯз, тақрибан 20.000 вариантҳои BRCA1/2 мувофиқи Ҷамъияти Амрико оид ба генетикаи тиббии 35 ва системаи EN5CA3/16 маълум ва тасниф карда шудаанд. Дар байни минтақаҳои ҷуғрофӣ ба таври васеъ фарқ мекунад.37 Дар Италия сатҳи BRCA1/2 PV-ҳо аз 8% то 37% буд, ки тағирёбии васеи дохили кишварро нишон дод.38,39 Бо аҳолии қариб 5 миллион нафар, Сицилия аз ҷиҳати шумораи сокинон панҷумин минтақаи калонтарин дар Италия мебошад. Ҳарчанд маълумот дар бораи тақсимоти BRCA дар шарқ вуҷуд надорад12. як қисми ҷазира.
Тадқиқоти мо яке аз гузоришҳои аввалин оид ба паҳншавии BRCA1/2 PV дар беморони пеш аз милод дар Сицилияи шарқӣ мебошад.28 Мо таҳлили худро ба BC равона кардем, зеро ин бемории маъмултарин дар гурӯҳи мост.
Ҳангоми санҷиши 389 беморони пеш аз милод, 9% BRCA1/2 PV-ҳоро дар байни BRCA1 ва BRCA2 баробар тақсим карданд. Ин натиҷаҳо бо натиҷаҳои қаблан гузоришшуда дар аҳолии Италия мувофиқат мекунанд.28 Ҷолиб он аст, ки 3% (13/389) гурӯҳи мо мардон буданд. хатари мутатсия. Бо вуҷуди ин, ҳеҷ яке аз ин мардон BRCA1/2 PV-ро таҳия накарданд, аз ин рӯ онҳо барои таҳлили минбаъдаи молекулавӣ барои истисно кардани мавҷудияти мутатсияҳои камтар маъмул ба монанди PALB2, RAD51C ва D, дар байни дигарон буданд. Вариантҳои аҳамияти номуайян дар 7% субъектҳое дарёфт карда шуданд, ки дар онҳо BRCAE VUS ин натиҷаи пешгӯӣ буд1424.
Вақте ки мо тақсимоти зеризамина moodecult-ро дар BRCA1 / 2 занони мутаносиб таҳлил кардем, мо ба интиқолдиҳандагони PV ва BRCAS2 PV ва BRCAS2 PV ва BRCA2
Сипас мо ба намуд ва ҷойгиршавии BRCA1/2 PV тамаркуз мекунем. Дар гурӯҳи мо маъмултарин BRCA1 PV c.5035_5039delCTAAT буд. Ҳарчанд Incorvaia et al.ин вариантро дар когорти сицилии худ тавсиф накардаанд, муаллифони дигар онро ҳамчун хати насли BRCA1 PV гузориш додаанд.34 Дар гурӯҳи мо якчанд BRCA1 PV-ҳо пайдо шуданд - масалан c.181T>G, c.514del, c.3253dupA ва c.5266dupC - ки ду мутатсия дар SCA11c. >G ва c.5266dupC) маъмулан дар яҳудиёни ашкеназии Аврупои Шарқӣ ва Марказӣ (Полша, Чехия), Словенӣ, Австрия, Маҷористон, Беларус ва Олмон) пайдо мешаванд, 44,45 ва дар Иёлоти Муттаҳида ва Аргентина ба наздикӣ ҳамчун "варианти ҷанини такроршаванда" дар беморони итолиёвии саратони пештараи BC1438c муайян карда шуд. Сицилия дар Палермо ва Мессина. Ҷолиб он аст, ки ҳатто Incorvaia et al.Варианти c.3253dupA-ро дар баъзе оилаҳо дар Катания ёфтанд.28 Намояндагии бештари PV-ҳои BRCA2 c.428dup, c.5851_5854delAGTT ва варианти интроникии c.8487+1G>A мебошанд, ки ба таври муфассал дар як бемор дар Палермо бо c.458585s дар хонаи c.425858 мушоҳидашуда гузориш дода шудаанд. дар шимолу ғарби Сицилия, асосан дар минтақаҳои Трапани ва Палермо, дар ҳоле ки c.5851_5854delAGTT PV дар хонаводаҳои шимолу ғарби Сицилия мушоҳида шудааст. Варианти 8487+1G>A бештар дар субъектҳои Мессина, Палермо ва Калтаниссетта маъмул буд.28 Реббек ва дигарон.қаблан тағирёбии c.5851_5854delAGTT дар Колумбия тавсиф карда шуда буд.37 Дигар BRCA2 PV, c.631+1G>A дар беморони BC ва OC аз Сицилия (Агригенто, Сиракуса ва Рагуса) пайдо шудааст.28 Қобили зикр аст, ки мо ҳамзистии ду варианти BRCA2T ва c.1G>206) мушоҳида кардем. дар ҳамон бемор, ки мо тахмин карда будем, ки дар режими cis ҷудо карда шуда буд, тавре ки қаблан гузориш дода шуда буд.34,46 Ин мутатсияҳои BRCA2 воқеан дар минтақаи Италия зуд-зуд мушоҳида карда мешаванд ва муайян карда шудаанд, ки кодонҳои пеш аз мӯҳлатро ҷорӣ мекунанд, ки ба пайванди РНК таъсир мерасонанд ва боиси нокомии протеини BRCA2 мегардад.47,48
Мо инчунин PV-ҳои BRCA1 ва BRCA2-ро дар минтақаҳои тахминии OCCR ва BCCR доменҳо ва генҳои сафедаҳо харита кардем. Ин минтақаҳоро Реббек ва дигарон тавсиф кардаанд.мутаносибан минтақаҳои хавфи рушди саратони тухмдон ва сина мебошанд.49 Бо вуҷуди ин, далелҳо дар бораи робитаи байни ҷойгиршавии вариантҳои хати насл ва хатари саратони сина ё тухмдон баҳсбарангез боқӣ мемонанд.28,50-52 Дар аҳолии мо, BRCA1 PVs асосан дар минтақаи BCCR ҷойгир буданд, дар ҳоле ки мо дар ҳама гуна минтақаҳои BRCA2 дар PVCR номувофиқ буданд. ассотсиатсияи байни минтақаҳои тахминии OCCR ва BCCR ва хусусиятҳои BC. Ин метавонад ба шумораи маҳдуди беморони мутацияи BRCA1/2 вобаста бошад. Аз нуқтаи назари домени сафеда, PVs BRCA1 дар тамоми сафеда тақсим карда мешаванд ва тағиротҳои BRCA2 афзалиятнок дар домени такрории BRC пайдо мешаванд.
Ниҳоят, мо хусусиятҳои клиникии клиникии пеш аз милодро бо BRCA1/2 PV алоқаманд кардем. Аз сабаби шумораи маҳдуди беморон, мо танҳо таносуби назаррасро байни Ki-67 ва дараҷаи варам пайдо кардем. Ҳарчанд арзёбӣ ва тафсири Ki-67 то андозае баҳсбарангез боқӣ мемонад, мутмаин аст, ки сатҳи баланди пролиферативӣ бо афзоиши хатари коҳиши беморӣ ва коҳиши беморӣ алоқаманд аст. баланд" ва "паст" Ki-67 20% -ро ташкил медиҳад. Аммо, ин ҳадди ақалл ба аҳолии беморони мутацияи BRCA1/2, ки арзиши миёнаи Ki-67 25% дорад, дахл надорад. Ин тамоюли сатҳи баланди Ki-67-ро метавон бо паҳншавӣ дар когортҳои люминалии B ва TNBC шарҳ дод, ки баъзе аз онҳо нишон медиҳанд, ки баъзеҳо аз онҳо баландтар буданд. 7 буриш (25-30%) метавонад беморонро мувофиқи пешгӯии онҳо беҳтар тобеъ гардонад.53,54 Аз рӯи натиҷаҳои таҳлили мо, таносуби назаррас тааҷҷубовар нест.Дар байни Ki-67 ва дараҷаҳои баланд ва мавҷудияти BRCA1 PV.Дар асл, варамҳои марбут ба BRCA1 хоси TNBC мебошанд ва хусусиятҳои бештар нишон медиҳанд617.
Хулоса, ин таҳқиқот гузоришро дар бораи вазъи мутатсиявии BRCA1/2 дар когорти милод аз шарқи Сицилия пешниҳод мекунад. Дар маҷмӯъ, бозёфтҳои мо бо далелҳои қаблан мавҷудбуда, ҳам дар робита ба паҳншавии мутатсия ва ҳам хусусиятҳои клиникопатологӣ дар BC мувофиқанд. Тадқиқотҳои бештар дар популятсияҳои калонтари BRCA1/2-мутанти мавҷудияти BC, аз қабили васеъ кардани таҳлили беморони мутантии BCPV, баҳодиҳии васеъшавии беморони мутанти BC. ҳо, ки аз BRCA1/2 фарқ мекунанд ва камтаранд. Ин имкон медиҳад, ки шумораи афзояндаи субъектҳои гирифтори хатари афзоиши саратон аз сабаби мутатсияҳои генетикӣ муайян карда шаванд.
Мо тасдиқ кардем, ки беморон розигии огоҳона барои озод кардани намунаҳои варамҳои худ барои мақсадҳои тадқиқот беном имзо кардаанд. Ҳама беморон мувофиқи Эъломияи Ҳелсинки розигии хаттии огоҳшударо имзо карданд. Мувофиқи сиёсати AOU Policlinico "G.Rodolico - S.Marco", ин таҳқиқот аз баррасии ахлоқӣ озод карда шуд, зеро ба ҳама беморон мувофиқи таҳлили ахлоқӣ BRCA1/ дода шудааст. инчунин ба истифодаи маълумоти онҳо барои мақсадҳои тадқиқотӣ розигӣ медиҳанд.
Мо ба профессор Паоло Вигнери барои кӯмакаш дар нигоҳубини беморони саратони сина, ки аз ҷониби Кумитаи этика дархост шудааст, ташаккур мегӯем.
Федерика Марторана дар бораи гонорар аз Иституто Ҷентили, Эли Лилли, Новартис, Пфайзер гузориш медиҳад. Муаллифони дигар дар ин кор бархӯрди манфиатҳоро эълон намекунанд.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, et al. Global Cancer Statistics 2020: GLOBOCAN мизони 36 саратонро дар 185 кишвари ҷаҳон тахмин мезанад.