หัวข้อการแก้ไขปัญหา LC บางหัวข้อไม่เคยล้าสมัย เนื่องจากมีปัญหาในการปฏิบัติ LC แม้ว่าเทคโนโลยีเครื่องมือจะปรับปรุงดีขึ้นตามกาลเวลาก็ตาม มีหลายวิธีที่ปัญหาอาจเกิดขึ้นในระบบ LC และส่งผลให้อยู่ในสภาพพีคที่ไม่ดี เมื่อปัญหาที่เกี่ยวข้องกับสภาพพีคเกิดขึ้น รายการสั้นๆ ของสาเหตุที่เป็นไปได้สำหรับผลลัพธ์เหล่านี้ จะช่วยลดความซับซ้อนของประสบการณ์การแก้ไขปัญหาของเรา
การเขียนคอลัมน์ "การแก้ไขปัญหา LC" นี้และคิดเกี่ยวกับหัวข้อต่างๆ ทุกเดือนนั้นสนุกมาก เพราะหัวข้อบางหัวข้อไม่เคยตกยุค ในขณะที่ในสาขาการวิจัยโครมาโตกราฟี หัวข้อหรือแนวคิดบางอย่างจะล้าสมัยเนื่องจากถูกแทนที่ด้วยแนวคิดใหม่ๆ และดีกว่า ในสาขาการแก้ไขปัญหา เนื่องจากบทความแก้ไขปัญหาฉบับแรกปรากฏในวารสารนี้ (วารสาร LC ในขณะนั้น) เนื่องจากหัวข้อบางหัวข้อยังคงมีความเกี่ยวข้องในปี 1983(1) ในช่วงไม่กี่ปีที่ผ่านมา ฉันได้มุ่งเน้นหัวข้อการแก้ไขปัญหา LC หลายหัวข้อเกี่ยวกับแนวโน้มร่วมสมัยที่มีผลต่อโครมาโตกราฟีของเหลว (LC) (ตัวอย่างเช่น การเปรียบเทียบแบบสัมพันธ์กันของความเข้าใจของเราเกี่ยวกับผลกระทบของแรงกดดันต่อการกักเก็บ [2] ความก้าวหน้าใหม่) การตีความผลลัพธ์ของ LC ของเราและวิธีแก้ไขปัญหาด้วยเครื่องมือ LC สมัยใหม่ ในงวดประจำเดือนนี้ ฉันจะดำเนินการต่อชุดบทความ (3) ซึ่งเริ่มต้นในเดือนธันวาคม 2021 ซึ่งมุ่งเน้นไปที่หัวข้อ "ชีวิตและความตาย" บางหัวข้อของการแก้ไขปัญหา LC — องค์ประกอบที่ดีสำหรับการแก้ไขปัญหาใดๆ ก็มีความจำเป็น ไม่ว่าระบบที่เรากำลังใช้จะเก่าแค่ไหนก็ตาม หัวข้อหลักของชุดบทความนี้ มีความเกี่ยวข้องอย่างยิ่งกับแผนภูมิติดผนัง “LC Troubleshooting Guide” (4) ที่มีชื่อเสียงของ LCGC ซึ่งแขวนอยู่ในห้องปฏิบัติการหลายแห่ง สำหรับส่วนที่สามของซีรีส์นี้ ฉันเลือกที่จะมุ่งเน้นไปที่ปัญหาที่เกี่ยวข้องกับรูปร่างจุดสูงสุดหรือลักษณะของจุดสูงสุด ซึ่งน่าเหลือเชื่อที่แผนภูมิติดผนังแสดงรายการสาเหตุที่เป็นไปได้ 44 ประการของรูปร่างจุดสูงสุดที่ไม่ดี! เราไม่สามารถพิจารณาปัญหาทั้งหมดเหล่านี้โดยละเอียดได้ในบทความเดียว ดังนั้น ในงวดแรกของหัวข้อนี้ ฉันจะมุ่งเน้นไปที่ปัญหาบางส่วนที่ฉันเห็นบ่อยที่สุด ฉันหวังว่าผู้ใช้ LC ทั้งรุ่นเก่าและรุ่นใหม่จะพบเคล็ดลับและคำเตือนที่เป็นประโยชน์เกี่ยวกับหัวข้อสำคัญนี้
ฉันพบว่าตัวเองตอบคำถามเกี่ยวกับการแก้ปัญหาด้วยคำว่า "อะไรก็เป็นไปได้" มากขึ้นเรื่อยๆ คำตอบนี้อาจดูง่ายเมื่อพิจารณาข้อสังเกตที่ยากต่อการตีความ แต่ฉันพบว่ามันมักจะเหมาะสม ด้วยสาเหตุที่เป็นไปได้มากมายของรูปร่างจุดสูงสุดที่ไม่ดี จึงเป็นสิ่งสำคัญที่จะต้องมีใจที่เปิดกว้างเมื่อพิจารณาว่าปัญหาอาจเกิดจากอะไร และเพื่อให้สามารถจัดลำดับความสำคัญของสาเหตุที่อาจเกิดขึ้นเพื่อเริ่มความพยายามในการแก้ไขปัญหาของเรา โดยมุ่งเน้นไปที่ความเป็นไปได้ที่พบบ่อยที่สุด จุดนี้จึงมีความสำคัญมาก
ขั้นตอนสำคัญในการแก้ไขปัญหาใดๆ — แต่ขั้นตอนหนึ่งที่ฉันคิดว่าถูกมองข้าม — คือการรับรู้ว่ามีปัญหาที่ต้องแก้ไข การรับรู้ว่ามีปัญหา มักจะหมายถึงการรับรู้ว่าสิ่งที่เกิดขึ้นกับเครื่องมือนั้นแตกต่างจากความคาดหวังของเรา ซึ่งถูกกำหนดโดยทฤษฎี ความรู้เชิงประจักษ์ และประสบการณ์ (5) “รูปร่างของจุดสูงสุด” ที่อ้างถึงที่นี่จริง ๆ แล้วไม่ได้หมายถึงรูปร่างของจุดสูงสุด (สมมาตร ไม่สมมาตร เรียบ ฟู ขอบนำ หาง ฯลฯ) เท่านั้น แต่ยังหมายถึงความกว้างด้วย ความคาดหวังของเราสำหรับรูปร่างจุดสูงสุดจริงนั้นเรียบง่าย ทฤษฎี (6) สนับสนุนความคาดหวังในตำราเรียนได้เป็นอย่างดีว่าในกรณีส่วนใหญ่ จุดสูงสุดของโครมาโตกราฟีควรสมมาตรและสอดคล้องกับรูปร่างของการแจกแจงแบบเกาส์เซียน ดังที่แสดงในรูปที่ 1a สิ่งที่เราคาดหวังจากความกว้างของจุดสูงสุดเป็นปัญหาที่ซับซ้อนกว่า และเราจะพูดถึงหัวข้อนี้ในบทความในอนาคต รูปร่างจุดสูงสุดอื่น ๆ ในรูปที่ 1 แสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้อื่น ๆ บางส่วนที่สามารถสังเกตได้ กล่าวอีกนัยหนึ่ง คือ วิธีการที่สิ่งต่าง ๆ อาจเกิดขึ้น ผิด ในส่วนที่เหลือของงวดนี้ เราจะใช้เวลาพูดคุยกันถึงตัวอย่างเฉพาะเจาะจงของสถานการณ์ที่อาจนำไปสู่รูปร่างประเภทเหล่านี้
บางครั้งไม่พบค่าพีคเลยในโครมาโทแกรมที่คาดว่าจะถูกชะออก แผนภูมิผนังด้านบนบ่งชี้ว่าการไม่มีค่าพีค (โดยถือว่าตัวอย่างมีสารวิเคราะห์ที่เป็นเป้าหมายในความเข้มข้นที่ทำให้เครื่องตรวจจับตอบสนองเพียงพอที่จะมองเห็นค่านี้ได้เหนือสัญญาณรบกวน) มักเกี่ยวข้องกับปัญหาของเครื่องมือหรือสภาพเฟสเคลื่อนที่ที่ไม่ถูกต้อง (หากสังเกตเห็นเลย) ค่าพีคมักจะ "อ่อน" เกินไป รายการปัญหาที่อาจเกิดขึ้นและวิธีแก้ไขในหมวดหมู่นี้สั้นๆ สามารถดูได้ในตารางที่ I
ดังที่ได้กล่าวมาข้างต้น คำถามว่าควรยอมให้พีคขยายออกไปมากแค่ไหน ก่อนที่จะใส่ใจและพยายามแก้ไข เป็นหัวข้อที่ซับซ้อนซึ่งฉันจะพูดถึงในบทความในอนาคต ประสบการณ์ของฉันก็คือ พีคขยายออกไปอย่างมีนัยสำคัญ มักจะมาพร้อมกับการเปลี่ยนแปลงที่สำคัญในรูปร่างของพีค และพีคที่ขยายออกไปแบบหางยาวนั้นเกิดขึ้นได้บ่อยกว่าช่วงก่อนพีคหรือการแตกตัว อย่างไรก็ตาม พีคที่สมมาตรตามชื่อเรียกก็ขยายออกไปด้วยเช่นกัน ซึ่งอาจเกิดจากสาเหตุต่างๆ ดังต่อไปนี้:
ปัญหาแต่ละประเด็นนี้ได้รับการกล่าวถึงโดยละเอียดใน Troubleshooting LC ฉบับก่อนๆ แล้ว และผู้อ่านที่สนใจหัวข้อเหล่านี้สามารถอ่านบทความก่อนหน้านี้เหล่านี้เพื่อดูข้อมูลเกี่ยวกับสาเหตุหลักและแนวทางแก้ไขที่เป็นไปได้สำหรับปัญหาเหล่านี้ รายละเอียดเพิ่มเติม
การแตกของยอด การแยกส่วนยอด และการแตกแยกอาจเกิดจากปรากฏการณ์ทางเคมีหรือทางกายภาพ และรายชื่อแนวทางแก้ไขปัญหาที่เป็นไปได้เหล่านี้มีความหลากหลาย ขึ้นอยู่กับว่าเรากำลังจัดการกับปัญหาทางเคมีหรือทางกายภาพ บ่อยครั้งที่การเปรียบเทียบยอดต่างๆ ในโครมาโทแกรมจะช่วยให้คุณค้นหาเบาะแสสำคัญๆ เกี่ยวกับสาเหตุที่ทำให้เกิดได้ หากยอดทั้งหมดในโครมาโทแกรมมีรูปร่างคล้ายคลึงกัน สาเหตุส่วนใหญ่มักไม่ได้เกิดจากสาเหตุทางกายภาพ หากมีเพียงยอดเดียวหรือหลายยอดที่ได้รับผลกระทบ แต่ยอดที่เหลือยังดูเหมือนปกติ สาเหตุส่วนใหญ่มักเกิดจากสารเคมี
สาเหตุทางเคมีของการเกิดจุดสูงสุดซ้ำซากนั้นซับซ้อนเกินกว่าจะกล่าวถึงในระยะสั้นที่นี่ ผู้ที่สนใจสามารถดูการอภิปรายเชิงลึกเพิ่มเติมได้ในฉบับล่าสุดของ “LC Troubleshooting” (การแก้ไขปัญหา LC) อย่างไรก็ตาม สิ่งที่ทำได้ง่ายอย่างหนึ่งคือการลดมวลของสารวิเคราะห์ที่ฉีดเข้าไปและดูว่ารูปร่างของจุดสูงสุดดีขึ้นหรือไม่ หากเป็นเช่นนั้น แสดงว่านี่เป็นเบาะแสที่ดีว่าปัญหาอยู่ที่ “มวลเกิน” ในกรณีนี้ วิธีการจะต้องจำกัดอยู่ที่การฉีดมวลสารวิเคราะห์ที่มีขนาดเล็ก หรือจะต้องเปลี่ยนเงื่อนไขทางโครมาโตกราฟีเพื่อให้ได้รูปร่างของจุดสูงสุดที่ดีแม้จะฉีดมวลที่มีขนาดใหญ่ขึ้นก็ตาม
นอกจากนี้ยังมีสาเหตุทางกายภาพที่อาจเกิดขึ้นได้มากมายสำหรับการเกิดค่าพีคท้ายๆ ผู้อ่านที่สนใจการอภิปรายโดยละเอียดเกี่ยวกับความเป็นไปได้ต่างๆ สามารถอ่านได้ในฉบับล่าสุดของ “LC Troubleshooting” (การแก้ไขปัญหา LC) (11) สาเหตุทางกายภาพที่พบบ่อยที่สุดประการหนึ่งของการเกิดค่าพีคท้ายๆ คือการเชื่อมต่อที่ไม่ดีในจุดระหว่างหัวฉีดและตัวตรวจจับ (12) ตัวอย่างที่รุนแรงแสดงอยู่ในรูปที่ 1d ซึ่งได้มาในห้องแล็บของฉันเมื่อไม่กี่สัปดาห์ที่ผ่านมา ในกรณีนี้ เราได้สร้างระบบที่มีวาล์วฉีดใหม่ซึ่งเราไม่เคยใช้มาก่อน และติดตั้งลูปฉีดปริมาตรน้อยพร้อมปลอกหุ้มที่หล่อขึ้นบนแคปิลลารีสแตนเลส หลังจากทำการทดลองแก้ไขปัญหาเบื้องต้นแล้ว เราพบว่าความลึกของพอร์ตในสเตเตอร์วาล์วฉีดลึกกว่าปกติมาก ส่งผลให้มีปริมาตรตายจำนวนมากที่ด้านล่างของพอร์ต ปัญหานี้แก้ไขได้ง่ายๆ โดยเปลี่ยนลูปฉีดด้วยท่ออื่น เราสามารถปรับปลอกหุ้มให้อยู่ในตำแหน่งที่เหมาะสมเพื่อขจัดปริมาตรตายที่ด้านล่างของพอร์ตได้
หน้าพีคแบบที่แสดงในรูปที่ 1e อาจเกิดจากปัญหาทางกายภาพหรือเคมีได้เช่นกัน สาเหตุทางกายภาพทั่วไปของขอบนำคือชั้นอนุภาคของคอลัมน์ไม่ได้รับการอัดแน่นอย่างดี หรืออนุภาคมีการจัดระเบียบใหม่เมื่อเวลาผ่านไป เช่นเดียวกับการที่ส่วนท้ายของพีคเกิดจากปรากฏการณ์ทางกายภาพนี้ วิธีที่ดีที่สุดในการแก้ไขปัญหานี้คือการเปลี่ยนคอลัมน์และทำต่อไป โดยพื้นฐานแล้ว รูปร่างของพีคขอบนำที่มีต้นกำเนิดจากสารเคมีมักเกิดจากสิ่งที่เราเรียกว่าเงื่อนไขการกักเก็บ "แบบไม่เชิงเส้น" ภายใต้เงื่อนไขที่เหมาะสม (เชิงเส้น) ปริมาณของสารวิเคราะห์ที่กักเก็บโดยเฟสคงที่ (ดังนั้นจึงเป็นปัจจัยการกักเก็บ) จะสัมพันธ์เชิงเส้นกับความเข้มข้นของสารวิเคราะห์ในคอลัมน์ ในทางโครมาโตกราฟี หมายความว่า เมื่อมวลของสารวิเคราะห์ที่ฉีดเข้าไปในคอลัมน์เพิ่มขึ้น พีคจะสูงขึ้นแต่ไม่กว้างขึ้น ความสัมพันธ์นี้จะขาดหายไปเมื่อพฤติกรรมการกักเก็บไม่เป็นเชิงเส้น และพีคไม่เพียงสูงขึ้นแต่ยังกว้างขึ้นเมื่อมีการฉีดมวลมากขึ้น นอกจากนี้ รูปร่างที่ไม่เป็นเชิงเส้นยังกำหนดรูปร่างของพีคโครมาโตกราฟี ส่งผลให้เกิดพีคชั้นนำ หรือขอบท้าย เช่นเดียวกับการโอเวอร์โหลดมวลที่ทำให้เกิดการหางของพีค (10) การนำของพีคที่เกิดจากการกักเก็บแบบไม่เชิงเส้นยังสามารถวินิจฉัยได้โดยการลดมวลของสารวิเคราะห์ที่ฉีด หากรูปร่างของพีคดีขึ้น จะต้องปรับเปลี่ยนวิธีการไม่ให้เกินคุณภาพการฉีดที่ทำให้เกิดขอบท้าย หรือจะต้องเปลี่ยนเงื่อนไขโครมาโตกราฟีเพื่อลดพฤติกรรมนี้ให้น้อยที่สุด
บางครั้งเราสังเกตเห็นสิ่งที่ดูเหมือนเป็นจุดสูงสุดที่ "แยกออกจากกัน" ดังที่แสดงในรูปที่ 1f ขั้นตอนแรกในการแก้ปัญหานี้คือการพิจารณาว่ารูปร่างของจุดสูงสุดนั้นเกิดจากการแยกตัวของสารร่วมกันบางส่วนหรือไม่ (กล่าวคือ การมีสารประกอบที่แตกต่างกันสองชนิดแต่แยกตัวออกจากกันอย่างใกล้ชิด) หากมีสารวิเคราะห์สองชนิดที่แตกต่างกันแยกตัวออกจากกันอย่างใกล้ชิด แสดงว่าเป็นเรื่องของการปรับปรุงความละเอียดของสารวิเคราะห์เหล่านั้น (ตัวอย่างเช่น โดยเพิ่มความเลือกสรร การกักเก็บ หรือจำนวนแผ่น) และจุดสูงสุดที่ "แยกออกจากกัน" ที่ชัดเจนนั้นเกี่ยวข้องกับประสิทธิภาพทางกายภาพ ไม่มีส่วนเกี่ยวข้องกับคอลัมน์นั้นเอง บ่อยครั้ง เบาะแสที่สำคัญที่สุดในการตัดสินใจนี้คือจุดสูงสุดทั้งหมดในโครมาโทแกรมแสดงรูปร่างที่แยกออกจากกันหรือมีเพียงหนึ่งหรือสองจุดเท่านั้น หากมีเพียงหนึ่งหรือสองจุด ก็อาจเกิดปัญหากับการแยกตัวของสารร่วมกัน หากจุดสูงสุดทั้งหมดแยกออกจากกัน ก็อาจเกิดปัญหาทางกายภาพ ซึ่งส่วนใหญ่มักจะเกี่ยวข้องกับคอลัมน์นั้นเอง
จุดยอดแตกที่เกี่ยวข้องกับคุณสมบัติทางกายภาพของคอลัมน์นั้นมักเกิดจากการอุดตันของฟริตทางเข้าหรือทางออกบางส่วนหรือการจัดระเบียบใหม่ของอนุภาคในคอลัมน์ ทำให้เฟสเคลื่อนที่ไหลได้เร็วกว่าเฟสเคลื่อนที่ในพื้นที่บางส่วนของการก่อตัวของช่องคอลัมน์ในภูมิภาคอื่น (11) ฟริตที่อุดตันบางส่วนบางครั้งสามารถเคลียร์ได้โดยการย้อนทิศทางการไหลผ่านคอลัมน์ อย่างไรก็ตาม จากประสบการณ์ของฉัน นี่เป็นวิธีแก้ปัญหาในระยะสั้นมากกว่าระยะยาว ซึ่งมักเป็นอันตรายถึงชีวิตสำหรับคอลัมน์สมัยใหม่หากอนุภาครวมตัวกันอีกครั้งภายในคอลัมน์ ณ จุดนี้ ทางที่ดีควรเปลี่ยนคอลัมน์และดำเนินการต่อไป
ค่าสูงสุดในรูปที่ 1g ซึ่งมาจากกรณีล่าสุดในห้องทดลองของฉันเอง มักจะบ่งชี้ว่าสัญญาณนั้นสูงมากจนไปถึงช่วงการตอบสนองสูงสุด สำหรับเครื่องตรวจจับการดูดกลืนแสง (UV-vis ในกรณีนี้) เมื่อความเข้มข้นของสารวิเคราะห์สูงมาก สารวิเคราะห์จะดูดซับแสงส่วนใหญ่ที่ผ่านเซลล์การไหลของตัวตรวจจับ ทำให้มีแสงน้อยมากที่จะตรวจจับได้ ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ สัญญาณไฟฟ้าจากเครื่องตรวจจับแสงจะได้รับอิทธิพลอย่างมากจากแหล่งสัญญาณรบกวนต่างๆ เช่น แสงรบกวนและ "กระแสมืด" ทำให้สัญญาณมีลักษณะ "ไม่ชัดเจน" และไม่ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของสารวิเคราะห์ เมื่อเกิดเหตุการณ์นี้ขึ้น ปัญหาสามารถแก้ไขได้โดยการลดปริมาณการฉีดสารวิเคราะห์ เช่น ลดปริมาณการฉีด เจือจางตัวอย่าง หรือทั้งสองอย่าง
ในโรงเรียนโครมาโทกราฟี เราใช้สัญญาณของตัวตรวจจับ (เช่น แกน y ในโครมาโทแกรม) เป็นตัวบ่งชี้ความเข้มข้นของสารวิเคราะห์ในตัวอย่าง ดังนั้นจึงดูแปลกที่จะเห็นโครมาโทแกรมที่มีสัญญาณต่ำกว่าศูนย์ เพราะการตีความง่ายๆ คือ สัญญาณนี้บ่งชี้ถึงความเข้มข้นของสารวิเคราะห์ที่เป็นลบ ซึ่งแน่นอนว่าเป็นไปไม่ได้ในทางกายภาพ จากประสบการณ์ของฉัน มักพบค่าพีคที่เป็นลบมากที่สุดเมื่อใช้ตัวตรวจจับการดูดกลืนแสง (เช่น UV-vis)
ในกรณีนี้ พีคเชิงลบหมายความเพียงว่าโมเลกุลที่ไหลออกมาจากคอลัมน์จะดูดซับแสงน้อยกว่าเฟสเคลื่อนที่เองทันทีก่อนและหลังพีค ซึ่งอาจเกิดขึ้นได้ เช่น เมื่อใช้ความยาวคลื่นตรวจจับที่ค่อนข้างต่ำ (<230 นาโนเมตร) และสารเติมแต่งเฟสเคลื่อนที่ที่ดูดซับแสงส่วนใหญ่ที่ความยาวคลื่นเหล่านี้ สารเติมแต่งดังกล่าวอาจเป็นส่วนประกอบตัวทำละลายในเฟสเคลื่อนที่ เช่น เมทานอล หรือส่วนประกอบบัฟเฟอร์ เช่น อะซิเตทหรือฟอร์เมต โดยทั่วไปแล้ว เราสามารถใช้พีคเชิงลบเพื่อเตรียมเส้นโค้งการสอบเทียบและรับข้อมูลเชิงปริมาณที่แม่นยำได้ ดังนั้นจึงไม่มีเหตุผลพื้นฐานที่จะต้องหลีกเลี่ยงพีคเชิงลบโดยตรง (บางครั้งวิธีนี้เรียกว่า "การตรวจจับ UV ทางอ้อม") (13) อย่างไรก็ตาม หากเราต้องการหลีกเลี่ยงพีคเชิงลบโดยสิ้นเชิง ในกรณีของการตรวจจับการดูดกลืนแสง วิธีแก้ปัญหาที่ดีที่สุดคือการใช้ความยาวคลื่นตรวจจับที่แตกต่างกันเพื่อให้สารวิเคราะห์ดูดซับมากกว่าเฟสเคลื่อนที่ หรือเปลี่ยนองค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่เพื่อให้ดูดซับแสงน้อยกว่าสารวิเคราะห์
จุดสูงสุดเชิงลบยังสามารถเกิดขึ้นได้เมื่อใช้การตรวจจับดัชนีหักเหแสง (RI) เมื่อดัชนีหักเหแสงของส่วนประกอบอื่นนอกเหนือจากสารวิเคราะห์ในตัวอย่าง เช่น เมทริกซ์ตัวทำละลาย แตกต่างจากดัชนีหักเหแสงของเฟสเคลื่อนที่ สิ่งนี้เกิดขึ้นกับการตรวจจับ UV-vis เช่นกัน แต่ผลกระทบนี้มีแนวโน้มที่จะลดน้อยลงเมื่อเทียบกับการตรวจจับ RI ในทั้งสองกรณี จุดสูงสุดเชิงลบสามารถลดให้เหลือน้อยที่สุดได้โดยการจับคู่องค์ประกอบของเมทริกซ์ตัวอย่างกับองค์ประกอบของเฟสเคลื่อนที่ให้ใกล้เคียงมากขึ้น
ในส่วนที่สามเกี่ยวกับหัวข้อพื้นฐานในการแก้ไขปัญหา LC ฉันได้พูดถึงสถานการณ์ที่รูปร่างจุดสูงสุดที่สังเกตได้แตกต่างไปจากรูปร่างจุดสูงสุดที่คาดหวังหรือปกติ การแก้ไขปัญหาอย่างมีประสิทธิผลของปัญหาเหล่านี้เริ่มต้นด้วยความรู้เกี่ยวกับรูปร่างจุดสูงสุดที่คาดหวัง (โดยอิงจากทฤษฎีหรือประสบการณ์ก่อนหน้านี้กับวิธีการที่มีอยู่) ดังนั้นการเบี่ยงเบนจากความคาดหวังเหล่านี้จึงชัดเจน ปัญหารูปร่างจุดสูงสุดมีสาเหตุที่อาจเกิดขึ้นได้หลายประการ (กว้างเกินไป หางยาว ขอบนำ ฯลฯ) ในงวดนี้ ฉันจะพูดถึงรายละเอียดสาเหตุบางประการที่ฉันพบเห็นบ่อยที่สุด การทราบรายละเอียดเหล่านี้เป็นจุดเริ่มต้นที่ดีในการแก้ไขปัญหา แต่ไม่ได้ครอบคลุมถึงความเป็นไปได้ทั้งหมด ผู้อ่านที่สนใจรายการสาเหตุและวิธีแก้ไขแบบเจาะลึกยิ่งขึ้นสามารถดูแผนภูมิติดผนัง "คู่มือการแก้ไขปัญหา LC" ของ LCGC
(4) แผนภูมิผนัง "คู่มือการแก้ไขปัญหา LCGC" LCGC https://www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021)
(6) A. Felinger, การวิเคราะห์ข้อมูลและการประมวลผลสัญญาณในโครมาโตกราฟี (Elsevier, New York, NY, 1998), หน้า 43-96
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF และ Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016).https://doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043