ขอบคุณที่เยี่ยมชม Nature.comเวอร์ชันเบราว์เซอร์ที่คุณใช้มีการรองรับ CSS ที่จำกัดเพื่อประสบการณ์ที่ดีที่สุด เราขอแนะนำให้คุณใช้เบราว์เซอร์ที่อัปเดตแล้ว (หรือปิดใช้งานโหมดความเข้ากันได้ใน Internet Explorer)ในระหว่างนี้ เพื่อให้แน่ใจว่าได้รับการสนับสนุนอย่างต่อเนื่อง เราจะแสดงไซต์โดยไม่มีสไตล์และ JavaScript
เลือดออกที่ไม่สามารถควบคุมได้เป็นสาเหตุหนึ่งของการเสียชีวิตการบรรลุผลห้ามเลือดอย่างรวดเร็วช่วยให้ผู้ถูกทดสอบรอดชีวิตในฐานะการปฐมพยาบาลระหว่างการสู้รบ อุบัติเหตุจราจร และปฏิบัติการลดการเสียชีวิตนั่งร้านคอมโพสิตเสริมเส้นใยนาโน (NFRCS) ที่ได้มาจากองค์ประกอบการขึ้นรูปฟิล์มห้ามเลือดอย่างง่าย (HFFC) เป็นระยะต่อเนื่องสามารถกระตุ้นและเพิ่มการห้ามเลือดการพัฒนา NFRCS ขึ้นอยู่กับการออกแบบปีกของแมลงปอโครงสร้างปีกแมลงปอประกอบด้วยปีกตามขวางและตามยาว และเยื่อปีกเชื่อมต่อกันเพื่อรักษาความสมบูรณ์ของโครงสร้างจุลภาคHFFC เคลือบพื้นผิวของเส้นใยอย่างสม่ำเสมอด้วยฟิล์มที่มีความหนาระดับนาโนเมตร และเชื่อมต่อความหนาของฝ้ายที่กระจายแบบสุ่ม (Ct) (เฟสกระจายตัว) เพื่อสร้างโครงสร้างรูพรุนระดับนาโนการผสมผสานระหว่างเฟสต่อเนื่องและเฟสกระจายช่วยลดต้นทุนของผลิตภัณฑ์ได้สิบเท่าเมื่อเทียบกับผลิตภัณฑ์ที่มีจำหน่ายทั่วไปNFRCS ที่ดัดแปลงแล้ว (ผ้าอนามัยแบบสอดหรือสายรัดข้อมือ) สามารถนำไปใช้กับงานด้านชีวการแพทย์ที่หลากหลายการศึกษาในร่างกายได้ข้อสรุปว่า Cp NFRCS ที่พัฒนาขึ้นกระตุ้นและปรับปรุงกระบวนการจับตัวเป็นก้อนที่ไซต์ของแอปพลิเคชันNFRCS สามารถปรับสภาพแวดล้อมระดับจุลภาคและทำหน้าที่ในระดับเซลล์ได้ เนื่องจากโครงสร้างรูพรุนระดับนาโนส่งผลให้การรักษาบาดแผลดีขึ้นในแบบจำลองแผลที่ถูกตัดออก
เลือดออกที่ไม่สามารถควบคุมได้ในระหว่างการต่อสู้ ระหว่างการผ่าตัด และสถานการณ์ฉุกเฉินสามารถก่อให้เกิดภัยคุกคามร้ายแรงต่อชีวิตของผู้บาดเจ็บ1เงื่อนไขเหล่านี้นำไปสู่การเพิ่มความต้านทานของหลอดเลือดส่วนปลายโดยรวมซึ่งนำไปสู่การช็อกจากเลือดออกมาตรการที่เหมาะสมในการควบคุมเลือดออกระหว่างและหลังการผ่าตัดถือเป็นอันตรายถึงชีวิต2,3ความเสียหายต่อหลอดเลือดขนาดใหญ่นำไปสู่การสูญเสียเลือดจำนวนมาก ส่งผลให้อัตราการเสียชีวิตในการต่อสู้อยู่ที่ ≤ 50% และระหว่างการผ่าตัด 31%1การสูญเสียเลือดจำนวนมากนำไปสู่การลดลงของปริมาตรของร่างกาย ซึ่งลดการส่งออกของหัวใจการเพิ่มขึ้นของความต้านทานของหลอดเลือดส่วนปลายทั้งหมดและความบกพร่องของจุลภาคที่ก้าวหน้านำไปสู่การขาดออกซิเจนในอวัยวะช่วยชีวิตอาจเกิดภาวะช็อกจากเลือดออกได้หากอาการยังคงดำเนินต่อไปโดยไม่มีการแทรกแซงที่มีประสิทธิภาพ1,4,5ภาวะแทรกซ้อนอื่น ๆ ได้แก่ การลุกลามของภาวะอุณหภูมิต่ำและภาวะเลือดเป็นกรดจากการเผาผลาญ ตลอดจนความผิดปกติของการแข็งตัวที่ขัดขวางกระบวนการแข็งตัวภาวะช็อกจากเลือดออกอย่างรุนแรงเกี่ยวข้องกับความเสี่ยงที่สูงขึ้นของการเสียชีวิต6,7,8ในภาวะช็อกระดับ III (ก้าวหน้า) การถ่ายเลือดเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการอยู่รอดของผู้ป่วยระหว่างการเจ็บป่วยและการเสียชีวิตระหว่างการผ่าตัดและหลังการผ่าตัดเพื่อเอาชนะสถานการณ์ที่คุกคามชีวิตทั้งหมดข้างต้น เราได้พัฒนานั่งร้านคอมโพสิตเสริมเส้นใยนาโน (NFRCS) ที่ใช้ความเข้มข้นของโพลิเมอร์น้อยที่สุด (0.5%) โดยใช้ส่วนผสมของโพลิเมอร์ห้ามเลือดที่ละลายน้ำได้
ด้วยการใช้การเสริมแรงด้วยไฟเบอร์ทำให้สามารถพัฒนาผลิตภัณฑ์ที่คุ้มค่าได้เส้นใยที่จัดเรียงแบบสุ่มนั้นมีลักษณะคล้ายกับโครงสร้างของปีกแมลงปอ โดยมีแถบแนวนอนและแนวตั้งบนปีกอย่างสมดุลเส้นเลือดตามขวางและตามยาวของปีกสื่อสารกับเยื่อหุ้มปีก (รูปที่ 1)NFRCS ประกอบด้วย Ct ที่เสริมแรงเป็นระบบนั่งร้านที่มีความแข็งแรงทางกายภาพและทางกลที่ดีกว่า (รูปที่ 1)เนื่องจากราคาย่อมเยาและงานฝีมือ ศัลยแพทย์จึงนิยมใช้สายวัดด้ายฝ้าย (Ct) ในระหว่างการผ่าตัดและปิดแผล ดังนั้น เมื่อพิจารณาถึงคุณประโยชน์หลายประการ ซึ่งรวมถึงเซลลูโลสที่เป็นผลึก > 90% (มีส่วนในการเพิ่มประสิทธิภาพของการห้ามเลือด) Ct จึงถูกใช้เป็นระบบโครงกระดูกของ NFRCS9,10 ดังนั้น เมื่อพิจารณาถึงคุณประโยชน์หลายประการ ซึ่งรวมถึงเซลลูโลสที่เป็นผลึก > 90% (มีส่วนในการเพิ่มประสิทธิภาพของการห้ามเลือด) Ct จึงถูกใช้เป็นระบบโครงกระดูกของ NFRCS9,10 Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целлюлозы (участвует в повые нии гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. ดังนั้น ด้วยคุณประโยชน์มากมาย รวมถึงเซลลูโลสที่เป็นผลึก >90% (เกี่ยวข้องกับกิจกรรมห้ามเลือดที่เพิ่มขึ้น) จึงใช้ Ct เป็นระบบโครงร่าง NFRCS9,10因此，考虑到它的多重益处，包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血活性），Ct 被用作NFRCS9,10 的骨架系统。因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%ดังนั้น ด้วยคุณประโยชน์มากมาย รวมถึงเซลลูโลสที่เป็นผลึกมากกว่า 90% (ช่วยเพิ่มกิจกรรมห้ามเลือด) Ct จึงถูกใช้เป็นโครงสร้างสำหรับ NFRCS9,10Ct ถูกเคลือบอย่างผิวเผิน (สังเกตเห็นการก่อตัวของฟิล์มหนาระดับนาโน) และเชื่อมต่อกับองค์ประกอบที่ก่อตัวเป็นฟิล์มห้ามเลือด (HFFC)HFFC ทำหน้าที่เหมือน matrigel จับ Ct ที่วางสุ่มไว้ด้วยกันการออกแบบที่พัฒนาขึ้นจะส่งความเครียดภายในเฟสที่กระจายตัว (เส้นใยเสริมแรง)เป็นการยากที่จะได้โครงสร้างรูพรุนระดับนาโนที่มีความแข็งแรงเชิงกลที่ดีโดยใช้ความเข้มข้นของโพลิเมอร์น้อยที่สุดนอกจากนี้ การปรับแต่งแม่พิมพ์ที่แตกต่างกันสำหรับการใช้งานด้านชีวการแพทย์นั้นไม่ใช่เรื่องง่าย
รูปแสดงไดอะแกรมของการออกแบบ NFRCS ตามโครงสร้างปีกแมลงปอ (A)ภาพนี้แสดงการเปรียบเทียบเชิงเปรียบเทียบของโครงสร้างปีกของแมลงปอ (เส้นที่ตัดกันและเส้นตามยาวของปีกเชื่อมต่อกัน) และโฟโตไมโครกราฟภาคตัดขวางของ Cp NFRCS (B)การแสดงแผนผังของ NFRCS
NFRCs ได้รับการพัฒนาโดยใช้ HFFC เป็นเฟสต่อเนื่องเพื่อจัดการกับข้อจำกัดข้างต้นHFFC ประกอบด้วยโพลิเมอร์ห้ามเลือดที่ก่อตัวเป็นฟิล์มหลายชนิด รวมถึงไคโตซาน (เป็นโพลิเมอร์ห้ามเลือดหลัก) กับเมทิลเซลลูโลส (MC), ไฮดรอกซีโพรพิลเมทิลเซลลูโลส (HPMC 50 cp) และโพลิไวนิลแอลกอฮอล์ (PVA)) (125 kDa) เป็นพอลิเมอร์สนับสนุนที่ส่งเสริมการก่อตัวของลิ่มเลือดรูปแบบ.การเติม polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) ปรับปรุงความสามารถในการดูดซับความชื้นของ NFRCSพอลิเอทิลีนไกลคอล 400 (PEG 400) ถูกเติมเพื่อปรับปรุงการเชื่อมขวางของพอลิเมอร์ในพอลิเมอร์ผสมที่ถูกผูกมัดองค์ประกอบห้ามเลือด HFFC สามชนิดที่แตกต่างกัน (Cm HFFC, Ch HFFC และ Cp HFFC) ได้แก่ ไคโตซานที่มี MC (Cm), ไคโตซานที่มี HPMC (Ch) และไคโตซานที่มี PVA (Cp) ถูกนำไปใช้กับ Ctการศึกษาลักษณะต่างๆ ในหลอดทดลอง และ ในร่างกาย ได้ยืนยันกิจกรรมการห้ามเลือดและการรักษาบาดแผลของ NFRCSวัสดุคอมโพสิตที่เสนอโดย NFRCS สามารถใช้ปรับแต่งรูปแบบต่างๆ ของนั่งร้านให้ตรงกับความต้องการเฉพาะได้
นอกจากนี้ยังสามารถดัดแปลง NFRCS เป็นผ้าพันแผลหรือม้วนเพื่อปิดบริเวณที่บาดเจ็บทั้งหมดของส่วนล่างและส่วนอื่น ๆ ของร่างกายโดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการบาดเจ็บที่แขนขาจากการต่อสู้ การออกแบบ NFRCS ที่ออกแบบสามารถเปลี่ยนเป็นครึ่งแขนหรือเต็มขาได้ (รูปที่ S11 เพิ่มเติม)NFRCS สามารถนำมาทำเป็นสายรัดข้อมือด้วยกาวทิชชู่ ซึ่งสามารถใช้ห้ามเลือดจากการบาดเจ็บที่ข้อมือจากการฆ่าตัวตายอย่างรุนแรงเป้าหมายหลักของเราคือการพัฒนา NFRCS โดยใช้พอลิเมอร์ให้น้อยที่สุดเท่าที่จะเป็นไปได้ ซึ่งสามารถส่งไปยังประชากรจำนวนมาก (ต่ำกว่าเส้นความยากจน) และสามารถใส่ไว้ในชุดปฐมพยาบาลได้การออกแบบที่เรียบง่าย มีประสิทธิภาพ และประหยัด NFRCS เป็นประโยชน์ต่อชุมชนท้องถิ่นและสามารถมีผลกระทบทั่วโลก
ซื้อไคโตซาน (น้ำหนักโมเลกุล 80 กิโลดาลตัน) และผักโขมจากเมอร์ค ประเทศอินเดียHydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 และ methylcellulose ถูกซื้อจาก Loba Chemie Pvt.LLC, มุมไบโพลีไวนิลแอลกอฮอล์ (น้ำหนักโมเลกุล 125 kDa) (ไฮโดรไลซ์ 87-90%) ถูกซื้อจาก National Chemicals รัฐคุชราตซื้อ Polyvinylpyrrolidine K30 จาก Molychem เมืองมุมไบ ซื้อไม้กวาดปลอดเชื้อจาก Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd. รัฐทมิฬนาฑู โดยมีน้ำ Milli Q (ระบบกรองน้ำ Direct-Q3 ของ Merck ประเทศอินเดีย) เป็นพาหะ
NFRCS ได้รับการพัฒนาโดยใช้วิธีการทำแห้งแบบแห้ง 11,12องค์ประกอบ HFFC ทั้งหมด (ตารางที่ 1) ถูกเตรียมโดยใช้เครื่องกวนผสมเชิงกลเตรียมสารละลายไคโตซาน 0.5% โดยใช้กรดอะซิติก 1% ในน้ำโดยกวนอย่างต่อเนื่องที่ 800 รอบต่อนาทีบนเครื่องกวนผสมเชิงกลน้ำหนักที่แน่นอนของพอลิเมอร์ที่บรรจุตามที่ระบุในตารางที่ 1 ถูกเติมลงในสารละลายไคโตซานและคนให้เข้ากันจนได้สารละลายโพลิเมอร์ใสPVP K30 และ PEG 400 ถูกเติมลงในของผสมที่เป็นผลลัพธ์ในปริมาณที่ระบุในตารางที่ 1 และการกวนยังคงดำเนินต่อไปจนกระทั่งได้สารละลายโพลีเมอร์ที่มีความหนืดใสสารละลายโพลิเมอร์ในอ่างที่ได้จะถูกทำให้เป็นฟองเป็นเวลา 60 นาทีเพื่อขจัดฟองอากาศที่ติดอยู่ออกจากส่วนผสมของโพลิเมอร์ดังที่แสดงในรูปเสริม S1 (b) กะรัตถูกกระจายอย่างเท่าเทียมกันในแต่ละหลุมของเพลต 6 หลุม (แม่พิมพ์) ที่เสริมด้วย HFFC 5 มล.
จานหกหลุมถูกโซนิคเป็นเวลา 60 นาทีเพื่อให้ได้การเปียกและการกระจายของ HFFC ในเครือข่าย Ct อย่างสม่ำเสมอจากนั้นแช่แข็งจานหกหลุมที่อุณหภูมิ -20°C เป็นเวลา 8-12 ชั่วโมงแผ่นแช่แข็งถูกทำแห้งเยือกแข็งเป็นเวลา 48 ชั่วโมงเพื่อให้ได้สูตรผสมต่างๆ ของ NFRCSขั้นตอนเดียวกันนี้ใช้ในการผลิตรูปทรงและโครงสร้างต่างๆ เช่น ผ้าอนามัยแบบสอดหรือผ้าอนามัยแบบสอดทรงกระบอก หรือรูปทรงอื่นๆ สำหรับการใช้งานที่แตกต่างกัน
ไคโตซานที่ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ (80 kDa) (3%) ละลายในกรดอะซิติก 1% โดยใช้เครื่องกวนแบบแม่เหล็กเติม PEG 400 1% ลงในสารละลายที่เป็นผลลัพธ์ของไคโตซานแล้วกวนเป็นเวลา 30 นาทีเทสารละลายที่ได้ลงในภาชนะสี่เหลี่ยมหรือสี่เหลี่ยมแล้วแช่แข็งที่อุณหภูมิ -80°C เป็นเวลา 12 ชั่วโมงตัวอย่างแช่แข็งถูกทำให้แห้งเป็นเวลา 48 ชั่วโมงเพื่อให้ได้ Cs13 ที่มีรูพรุน
NFRCS ที่พัฒนาขึ้นนั้นอยู่ภายใต้การทดลองโดยใช้ฟูเรียร์ทรานส์ฟอร์มอินฟราเรดสเปกโทรสโกปี (FTIR) (ชิมะสุ 8400 s FTIR, โตเกียว, ญี่ปุ่น) เพื่อยืนยันความเข้ากันได้ทางเคมีของไคโตซานกับโพลิเมอร์อื่นๆ14,15สเปกตรัม FTIR (ความกว้างของช่วงสเปกตรัมตั้งแต่ 400 ถึง 4,000 ซม.-1) ของตัวอย่างที่ทดสอบทั้งหมดได้มาจากการสแกน 32 ครั้ง
อัตราการดูดซึมของเลือด (BAR) สำหรับสูตรทั้งหมดได้รับการประเมินโดยใช้วิธีการที่อธิบายโดย Chen และคณะ16 มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยNFRK ที่พัฒนาขึ้นขององค์ประกอบทั้งหมดถูกทำให้แห้งในเตาอบสุญญากาศที่ 105°ซ ข้ามคืนเพื่อขจัดตัวทำละลายที่ตกค้างNFRCS 30 มก. (น้ำหนักตัวอย่างเริ่มต้น – W0) และ 30 มก. กะรัต (กลุ่มควบคุมที่เป็นบวก) ถูกใส่ในจานแยกต่างหากที่มีพรีมิกซ์ของโซเดียมซิเตรต 3.8%ในช่วงเวลาที่กำหนดไว้ล่วงหน้า ได้แก่ 5, 10, 20, 30, 40 และ 60 วินาที NFRCS จะถูกนำออกและทำความสะอาดพื้นผิวของเลือดที่ไม่ถูกดูดซึมโดยวางตัวอย่างไว้บน Ct เป็นเวลา 30 วินาทีน้ำหนักสุดท้ายของเลือดที่ดูดซึมโดย NFRCS 16 ได้รับการพิจารณา (W1) ในแต่ละช่วงเวลาคำนวณเปอร์เซ็นต์ BAR โดยใช้สูตรต่อไปนี้:
กำหนดเวลาการแข็งตัวของเลือด (BCT) ตามที่รายงานโดย Wang et al17 .เวลาที่จำเป็นสำหรับเลือดครบส่วน (เลือดหนูที่ผสมล่วงหน้ากับโซเดียมซิเตรต 3.8%) ในการจับตัวเป็นก้อนเมื่อมี NFRCS ถูกคำนวณเป็น BCT ของตัวอย่างทดสอบส่วนประกอบ NFRCS ต่างๆ (30 มก.) ถูกใส่ในขวดแก้วที่มีฝาเกลียวขนาด 10 มล. และบ่มที่ 37°ซเติมเลือด (0.5 มล.) ลงในขวด และเติม 0.2 M CaCl2 0.3 มล. เพื่อกระตุ้นการแข็งตัวของเลือดสุดท้าย ให้พลิกขวดทุกๆ 15 วินาที (สูงสุด 180°) จนกว่าจะจับตัวเป็นก้อนBCT ของตัวอย่างประมาณด้วยจำนวนครั้งของการพลิก 17,18ขึ้นอยู่กับ BCT องค์ประกอบที่เหมาะสมที่สุดสององค์ประกอบจาก NFRCS Cm, Ch และ Cp ถูกเลือกสำหรับการศึกษาคุณลักษณะเพิ่มเติม
องค์ประกอบ BCT ของ Ch NFRCS และ Cp NFRCS ถูกกำหนดโดยการใช้วิธีที่อธิบายโดย Li et al19 .วาง 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS และ Cs (การควบคุมเชิงบวก) ลงในจานเลี้ยงเชื้อแยกกัน (37 °C)เลือดที่มีโซเดียมซิเตรต 3.8% ผสมกับ 0.2 M CaCl2 ในอัตราส่วนปริมาตร 10:1 เพื่อเริ่มกระบวนการแข็งตัวของเลือด20 µl ของส่วนผสมของเลือดหนู CaCl2 0.2 M ถูกนำไปใช้กับพื้นผิวตัวอย่างและวางในจานเพาะเชื้อเปล่าการควบคุมคือเลือดเทลงในจานเลี้ยงเชื้อเปล่าที่ไม่มี Ctที่ช่วงเวลาคงที่ 0, 3 และ 5 นาที ให้หยุดการจับตัวเป็นก้อนโดยเติมน้ำปราศจากไอออน (DI) 10 มล. ลงในตัวอย่างที่มีจานโดยไม่รบกวนการจับตัวเป็นก้อนเม็ดเลือดแดงที่ไม่จับตัวเป็นก้อน (erythrocytes) จะเกิดภาวะเม็ดเลือดแดงแตกในที่ที่มีน้ำปราศจากไอออนและปล่อยฮีโมโกลบินเฮโมโกลบินที่จุดเวลาต่างกัน (HA(t)) วัดที่ 540 นาโนเมตร (λสูงสุดเฮโมโกลบิน) โดยใช้เครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ UV-Visการดูดซึมสัมบูรณ์ของฮีโมโกลบิน (AH(0)) ในเลือด 20 µl ในเวลา 0 นาทีในน้ำปราศจากไอออน 10 มล. ใช้เป็นมาตรฐานอ้างอิงการดูดซึมฮีโมโกลบินสัมพัทธ์ (RHA) ของเลือดที่แข็งตัวคำนวณจากอัตราส่วน HA(t)/HA(0) โดยใช้เลือดชุดเดียวกัน
การใช้เครื่องวิเคราะห์พื้นผิว (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA) ระบุคุณสมบัติกาวของ NFRK กับเนื้อเยื่อที่เสียหายกดจานทรงกระบอกก้นเปิดกับด้านในของหนังหมู (ไม่มีชั้นไขมัน)ตัวอย่าง (Ch NFRCS และ Cp NFRCS) ถูกนำมาใช้ผ่าน cannula ในแม่พิมพ์ทรงกระบอกเพื่อสร้างการยึดเกาะกับผิวหนังของสุกรหลังจากการบ่ม 3 นาทีที่อุณหภูมิห้อง (RT) (25° C) ความแข็งแรงของกาว NFRCS ถูกบันทึกที่อัตราคงที่ 0.5 มม./วินาที
คุณสมบัติหลักของสารเคลือบหลุมร่องฟันคือการเพิ่มการแข็งตัวของเลือดในขณะที่ลดการสูญเสียเลือดการแข็งตัวแบบไม่สูญเสียใน NFRCS ได้รับการประเมินโดยใช้วิธีการที่เผยแพร่ก่อนหน้านี้พร้อมการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย 19ทำหลอดไมโครเซนติฟิวจ์ (2 มล.) (เส้นผ่านศูนย์กลางภายใน 10 มม.) โดยมีรูขนาด 8 × 5 มม.2 ที่ด้านหนึ่งของหลอดเซนติฟิวจ์ (แทนการเปิดแผล)NFRCS ใช้เพื่อปิดช่องเปิดและใช้เทปเพื่อปิดขอบด้านนอกเติม 20 µl ของ 0.2 M CaCl2 ลงในหลอดไมโครเซนติฟิวจ์ที่มีพรีมิกซ์โซเดียมซิเตรต 3.8%หลังจากผ่านไป 10 นาที หลอดไมโครเซนติฟิวจ์จะถูกนำออกจากจานและหาการเพิ่มขึ้นของมวลของจานเนื่องจากการไหลออกของเลือดจาก NFRK (n = 3)การสูญเสียเลือด Ch NFRCS และ Cp NFRCS ถูกนำมาเปรียบเทียบกับ Cs
ความสมบูรณ์แบบเปียกของ NFRCS ถูกกำหนดตามวิธีการที่อธิบายโดย Mishra และ Chaudhary21 โดยมีการดัดแปลงเล็กน้อยวาง NFRCS ลงในขวดแก้ว Erlenmeyer ขนาด 100 มล. กับน้ำ 50 มล. แล้วหมุนวนเป็นเวลา 60 วินาทีโดยไม่ต้องตั้งยอดการตรวจสอบด้วยสายตาและจัดลำดับความสำคัญของตัวอย่างเพื่อความสมบูรณ์ทางกายภาพตามการรวบรวม
ศึกษาความแข็งแรงในการจับยึดของ HFFC ถึง Ct โดยใช้วิธีการที่เผยแพร่ก่อนหน้านี้พร้อมการดัดแปลงเล็กน้อยประเมินความสมบูรณ์ของชั้นเคลือบผิวโดยการให้ NFRK สัมผัสกับคลื่นอะคูสติก (สิ่งกระตุ้นภายนอก) ต่อหน้าน้ำเป็นมิลลิคิว (Ct)NFRCS Ch NFRCS และ Cp NFRCS ที่พัฒนาขึ้นถูกใส่ในบีกเกอร์ที่เติมน้ำและโซนิคเป็นเวลา 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 และ 30 นาทีตามลำดับหลังจากการอบแห้ง เปอร์เซ็นต์ความแตกต่างระหว่างน้ำหนักเริ่มต้นและน้ำหนักสุดท้ายของ NFRCS ถูกนำมาใช้ในการคำนวณเปอร์เซ็นต์การสูญเสียของวัสดุ (HFFC)ในหลอดทดลอง BCT ยังสนับสนุนความแข็งแรงในการยึดเกาะหรือการสูญเสียวัสดุพื้นผิวประสิทธิภาพของ HFFC จับกับ Ct ทำให้เลือดแข็งตัวและเคลือบยืดหยุ่นบนพื้นผิวของ Ct22
ความเป็นเนื้อเดียวกันของ NFRCS ที่พัฒนาขึ้นถูกกำหนดโดย BCT ของตัวอย่าง (30 มก.) ที่นำมาจากตำแหน่งทั่วไปที่สุ่มเลือกของ NFRCSปฏิบัติตามขั้นตอน BCT ที่กล่าวถึงก่อนหน้านี้เพื่อพิจารณาการปฏิบัติตาม NFRCSความใกล้เคียงกันระหว่างตัวอย่างทั้งห้าช่วยให้มั่นใจได้ถึงการครอบคลุมพื้นผิวที่สม่ำเสมอและการสะสมของ HFFC ในตาข่าย Ct
พื้นที่สัมผัสเลือดที่ระบุ (NBCA) ถูกกำหนดตามที่รายงานก่อนหน้านี้พร้อมการแก้ไขบางอย่างทำให้เลือดจับตัวเป็นก้อนโดยการหนีบเลือด 20 µl ระหว่างสองพื้นผิวของ Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS และ Csหลังจากผ่านไป 1 ชั่วโมง ขดลวดทั้งสองส่วนจะถูกแยกออกจากกันและวัดพื้นที่ของก้อนด้วยตนเองค่าเฉลี่ยของการทำซ้ำสามครั้งถือเป็น NBCA NFRCS19
การวิเคราะห์ Dynamic Vapor Sorption (DVS) ใช้เพื่อประเมินประสิทธิผลของ NFRCS ในการดูดซับน้ำจากสภาพแวดล้อมภายนอกหรือจากบริเวณที่เกิดการบาดเจ็บที่รับผิดชอบในการเริ่มจับตัวเป็นก้อนDVS ประเมินหรือบันทึกการดูดกลืนและการสูญเสียไอระเหยในตัวอย่างโดยใช้เครื่องชั่งที่มีความไวสูงเป็นพิเศษซึ่งมีความละเอียดมวล ±0.1 µgความดันไอบางส่วน (ความชื้นสัมพัทธ์) ถูกสร้างขึ้นโดยตัวควบคุมการไหลของมวลแบบอิเล็กทรอนิกส์รอบๆ ตัวอย่างโดยการผสมก๊าซอิ่มตัวและก๊าซพาหะแห้ง ตามหลักเกณฑ์ของ European Pharmacopeia ตามเปอร์เซ็นต์การดูดซึมความชื้นของตัวอย่าง ตัวอย่างถูกจัดประเภทเป็น 4 ประเภท (0–0.012% w/w− ไม่ดูดความชื้น, 0.2–2% w/w ดูดความชื้นเล็กน้อย, 2–15% ดูดความชื้นปานกลาง, และ > 15% ดูดความชื้นมาก)23 ตามหลักเกณฑ์ของ European Pharmacopeia ตามเปอร์เซ็นต์การดูดซึมความชื้นของตัวอย่าง ตัวอย่างถูกจัดประเภทเป็น 4 ประเภท (0–0.012% w/w− ไม่ดูดความชื้น, 0.2–2% w/w ดูดความชื้นเล็กน้อย, 2–15 % ดูดความชื้นปานกลาง และ > 15% ดูดความชื้นมาก)23ตามคำแนะนำของ European Pharmacopoeia ขึ้นอยู่กับเปอร์เซ็นต์การดูดซึมความชื้นของตัวอย่าง ตัวอย่างถูกแบ่งออกเป็น 4 ประเภท (0–0.012% w/w – ไม่ดูดความชื้น, 0.2–2% w/w ดูดความชื้นเล็กน้อย, 2–15 %)% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % ดูดความชื้นปานกลาง และ > 15% ดูดความชื้นมาก)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w- 非吸湿性、0.2-2% w/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 类 （（0-0.012% W/w- 吸湿性、 、 、 、 0.2-2% W/w 轻微 、 2-15% 适度吸湿，> 15 %非常吸湿）23。ตามคำแนะนำของ European Pharmacopoeia ตัวอย่างจะถูกแบ่งออกเป็น 4 ชั้น โดยขึ้นอยู่กับเปอร์เซ็นต์ความชื้นที่ตัวอย่างดูดซับ (0-0.012% โดยน้ำหนัก – ไม่ดูดความชื้น, 0.2-2% โดยน้ำหนัก ดูดความชื้นเล็กน้อย, 2-15% โดยน้ำหนัก)% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % ดูดความชื้นปานกลาง > 15% ดูดความชื้นมาก) 23.ประสิทธิภาพการดูดความชื้นของ NFCS X NFCS และ TsN NFCS ถูกกำหนดโดยเครื่องวิเคราะห์ DVS TA TGA Q5000 SAในระหว่างกระบวนการนี้ เวลาทำงาน ความชื้นสัมพัทธ์ (RH) และน้ำหนักตัวอย่างตามเวลาจริงที่ 25°C24 ได้รับมาปริมาณความชื้นคำนวณโดยการวิเคราะห์มวล NFRCS ที่แม่นยำโดยใช้สมการต่อไปนี้:
MC คือความชื้น NFRCSm1 – น้ำหนักแห้งของ NSAIDsm2 คือมวล NFRCS แบบเรียลไทม์ที่ RH ที่กำหนด
พื้นที่ผิวทั้งหมดประเมินโดยใช้การทดลองการดูดซับไนโตรเจนด้วยไนโตรเจนเหลวหลังจากล้างตัวอย่างที่อุณหภูมิ 25 °C เป็นเวลา 10 ชั่วโมง (< 7 × 10–3 Torr) พื้นที่ผิวทั้งหมดประเมินโดยใช้การทดลองการดูดซับไนโตรเจนด้วยไนโตรเจนเหลวหลังจากล้างตัวอย่างที่อุณหภูมิ 25 °C เป็นเวลา 10 ชั่วโมง (< 7 × 10–3 Torr) Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом после опорожнения обр азцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). พื้นที่ผิวทั้งหมดประเมินโดยใช้การทดลองการดูดซับไนโตรเจนด้วยไนโตรเจนเหลวหลังจากตัวอย่างถูกทำให้ว่างเปล่าที่อุณหภูมิ 25°C เป็นเวลา 10 ชั่วโมง (< 7 × 10–3 Torr)在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积。在 25°ซ Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом после опорожнен ия образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). พื้นที่ผิวทั้งหมดประเมินโดยใช้การทดลองการดูดซับไนโตรเจนด้วยไนโตรเจนเหลวหลังจากตัวอย่างถูกทำให้ว่างเปล่าเป็นเวลา 10 ชั่วโมงที่ 25°C (< 7 x 10-3 torr)พื้นที่ผิวทั้งหมด ปริมาตรรูพรุน และขนาดรูพรุน NFRCS ถูกกำหนดด้วย Quantachrome จาก NOVA 1000e ประเทศออสเตรีย โดยใช้ซอฟต์แวร์ RS 232
เตรียม RBCs 5% (น้ำเกลือเป็นตัวเจือจาง) จากเลือดครบส่วนจากนั้นโอนส่วนที่เป็น HFFC (0.25 มล.) ไปยังจาน 96 หลุมและมวล RBC 5% (0.1 มล.)บ่มส่วนผสมที่อุณหภูมิ 37°C เป็นเวลา 40 นาทีส่วนผสมของเม็ดเลือดแดงและซีรั่มถือเป็นตัวควบคุมเชิงบวก และส่วนผสมของน้ำเกลือและเซลล์เม็ดเลือดแดงเป็นตัวควบคุมเชิงลบHemagglutination ถูกกำหนดตามมาตราส่วน Stajitzkyสเกลที่เสนอมีดังนี้ + + + + มวลรวมแบบละเอียดหนาแน่น;+ + + แผ่นรองด้านล่างเรียบพร้อมขอบโค้ง+ + แผ่นรองด้านล่างเรียบพร้อมขอบฉีกขาด+ วงแหวนสีแดงแคบ ๆ รอบ ๆ ขอบของแผ่นเรียบ– (ลบ) ปุ่มสีแดงแยก 12 ตรงกลางของหลุมล่าง
ความเข้ากันได้ของเลือดของ NFRCS ได้รับการศึกษาตามวิธีการขององค์การระหว่างประเทศว่าด้วยการมาตรฐาน (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27วิธีกราวิเมตริกที่อธิบายโดย Singh และคณะมีการดัดแปลงเล็กน้อยเพื่อประเมินการก่อตัวของลิ่มเลือดในที่ที่มีหรือบนพื้นผิวของ NFRCS500 มก. ของ Cs, Ch NFRCS และ Cp NFRCS ถูกบ่มในน้ำเกลือบัฟเฟอร์ฟอสเฟต (PBS) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่ 37°ซหลังจาก 24 ชั่วโมง PBS ถูกนำออกและ NFRCS ได้รับการบำบัดด้วยเลือด 2 มล. ที่มีโซเดียมซิเตรต 3.8%บนพื้นผิวของ NFRCS ให้เติม 0.1 M CaCl2 0.1 M 0.04 มล. ลงในตัวอย่างที่บ่มหลังจากผ่านไป 45 นาที เติมน้ำกลั่น 5 มล. เพื่อหยุดการแข็งตัวเลือดที่จับตัวเป็นก้อนบนพื้นผิวของ NFRK ได้รับการบำบัดด้วยสารละลายฟอร์มาลดีไฮด์ 36-38%ก้อนที่จับตัวด้วยฟอร์มาลดีไฮด์ถูกทำให้แห้งและชั่งน้ำหนักเปอร์เซ็นต์ของการเกิดลิ่มเลือดประเมินโดยการคำนวณน้ำหนักของแก้วที่ไม่มีเลือดและตัวอย่าง (กลุ่มควบคุมเชิงลบ) และแก้วที่มีเลือด (กลุ่มควบคุมเชิงบวก)
เพื่อเป็นการยืนยันเบื้องต้น ตัวอย่างถูกมองเห็นภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงเพื่อทำความเข้าใจความสามารถของการเคลือบผิว HFFC, การเชื่อมต่อระหว่าง Ct และเครือข่าย Ct เพื่อสร้างรูพรุนบางส่วนของ Ch และ Cp จาก NFRCS ถูกตัดด้วยมีดผ่าตัดส่วนที่เป็นผลลัพธ์วางอยู่บนสไลด์แก้วปิดด้วยใบปิดและยึดขอบด้วยกาวสไลด์ที่เตรียมไว้ถูกดูภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบใช้แสงและถ่ายภาพด้วยกำลังขยายที่แตกต่างกัน
การสะสมโพลิเมอร์ในเครือข่าย Ct ถูกมองเห็นโดยใช้กล้องจุลทรรศน์ฟลูออเรสเซนซ์ตามวิธีการที่อธิบายโดย Rice et al.29 องค์ประกอบ HFFC ที่ใช้สำหรับสูตรผสมกับสีย้อมเรืองแสง (ผักโขม) และ NFRCS (Ch & Cp) ถูกเตรียมตามวิธีการที่กล่าวถึงก่อนหน้านี้ องค์ประกอบ HFFC ที่ใช้สำหรับสูตรผสมกับสีย้อมเรืองแสง (ผักโขม) และ NFRCS (Ch & Cp) ถูกเตรียมตามวิธีการที่กล่าวถึงก่อนหน้านี้องค์ประกอบ HFFC ที่ใช้สำหรับสูตรผสมกับสีย้อมเรืองแสง (ผักโขม) และได้รับ NFRCS (Ch และ Cp) ตามวิธีการที่กล่าวถึงก่อนหน้านี้将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Cp）。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Cp）。องค์ประกอบ HFFC ที่ใช้ในสูตรผสมกับสีย้อมเรืองแสง (อะมาแรนธ์) และได้รับ NFRCS (Ch และ Cp) ตามที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้บางส่วนของ NFRK ถูกตัดออกจากตัวอย่างที่ได้มา วางบนสไลด์แก้ว และปิดด้วยใบปิดสังเกตสไลด์ที่เตรียมไว้ภายใต้กล้องจุลทรรศน์เรืองแสงโดยใช้ฟิลเตอร์สีเขียว (310-380 นาโนเมตร)ภาพถูกถ่ายที่กำลังขยาย 4 เท่าเพื่อทำความเข้าใจความสัมพันธ์ของ Ct และการสะสมโพลิเมอร์ส่วนเกินในเครือข่าย Ct
ภูมิประเทศพื้นผิวของ NFRCS Ch และ Cp ถูกกำหนดโดยใช้กล้องจุลทรรศน์กำลังอะตอม (AFM) ที่มีคานยื่น TESP ที่คมชัดเป็นพิเศษในโหมดการกรีด: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, ไต้หวันความหยาบของพื้นผิวถูกกำหนดโดยรูตค่าเฉลี่ยกำลังสอง (RMS) โดยใช้ซอฟต์แวร์ (ตัวประมวลผลภาพโพรบการสแกน)มีการแสดงตำแหน่ง NFRCS ต่างๆ บนภาพ 3 มิติเพื่อตรวจสอบความสม่ำเสมอของพื้นผิวค่าเบี่ยงเบนมาตรฐานของคะแนนสำหรับพื้นที่หนึ่ง ๆ ถูกกำหนดให้เป็นความขรุขระของพื้นผิวสมการ RMS ถูกใช้เพื่อหาปริมาณความหยาบผิวของ NFRCS31
การศึกษาโดยใช้ FESEM ดำเนินการโดยใช้ FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo เพื่อทำความเข้าใจลักษณะทางสัณฐานวิทยาของพื้นผิวของ Ch NFRCS และ Cp NFRCS ซึ่งแสดง BCT ที่ดีกว่า Cm NFRCSการศึกษา FESEM ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายโดย Zhao et al32 มีการแก้ไขเล็กน้อยNFRCS 20 ถึง 30 มก. Ch NFRCS และ Cp NFRCS ถูกผสมล่วงหน้าด้วย 20 ไมโครลิตรของโซเดียมซิเตรต 3.8% ผสมล่วงหน้ากับเลือดหนู20 ไมโครลิตรของ 0.2 M CaCl2 ถูกเติมลงในตัวอย่างที่บำบัดด้วยเลือดเพื่อเริ่มต้นการแข็งตัวและตัวอย่างถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 10 นาทีนอกจากนี้ เม็ดเลือดแดงส่วนเกินถูกกำจัดออกจากพื้นผิว NFRCS โดยการล้างด้วยน้ำเกลือ
ตัวอย่างต่อมาได้รับการบำบัดด้วยกลูตารัลดีไฮด์ 0.1% แล้วทำให้แห้งในตู้อบลมร้อนที่อุณหภูมิ 37°C เพื่อขจัดความชื้นตัวอย่างแห้งถูกเคลือบและวิเคราะห์ 32 .ภาพอื่นๆ ที่ได้รับระหว่างการวิเคราะห์ ได้แก่ การก่อตัวของก้อนบนพื้นผิวของเส้นใยฝ้ายแต่ละเส้น การสะสมโพลิเมอร์ระหว่าง Ct สัณฐานวิทยาของเม็ดเลือดแดง (รูปร่าง) ความสมบูรณ์ของก้อน และสัณฐานวิทยาของเม็ดเลือดแดงเมื่อมี NFRCSพื้นที่ NFRCS ที่ไม่ผ่านการบำบัดและพื้นที่ NFRCS ที่ได้รับการรักษาด้วย Ch และ Cp ที่บ่มด้วยเลือดถูกสแกนเพื่อหาไอออนของธาตุ (โซเดียม โพแทสเซียม ไนโตรเจน แคลเซียม แมกนีเซียม สังกะสี ทองแดง และซีลีเนียม)33เปรียบเทียบเปอร์เซ็นต์ไอออนของธาตุระหว่างตัวอย่างที่ผ่านการบำบัดและไม่ผ่านการบำบัด เพื่อทำความเข้าใจการสะสมของธาตุไอออนระหว่างการก่อตัวเป็นก้อนและความเป็นเนื้อเดียวกันของก้อน
ความหนาของผิวเคลือบ Cp HFFC บนพื้นผิว Ct ถูกกำหนดโดยใช้ FESEMภาพตัดขวางของ Cp NFRCS ถูกตัดออกจากเฟรมเวิร์กและเคลือบสปัตเตอร์ตัวอย่างการเคลือบสปัตเตอร์ที่เป็นผลลัพธ์ถูกสังเกตโดย FESEM และวัดความหนาของผิวเคลือบได้ 34 , 35 , 36
X-ray micro-CT ให้ภาพ 3 มิติแบบไม่ทำลายที่มีความละเอียดสูง และช่วยให้คุณศึกษาการจัดโครงสร้างภายในของ NFRKMicro-CT ใช้ลำแสงเอ็กซ์เรย์ที่ผ่านตัวอย่างเพื่อบันทึกค่าสัมประสิทธิ์การลดทอนเชิงเส้นเฉพาะที่ของรังสีเอกซ์ในตัวอย่าง ซึ่งช่วยให้ได้ข้อมูลทางสัณฐานวิทยาตำแหน่งภายในของ Ct ใน Cp NFRCS และ Cp NFRCS ที่บำบัดด้วยเลือดถูกตรวจสอบโดย micro-CT เพื่อทำความเข้าใจประสิทธิภาพการดูดซึมและการแข็งตัวของเลือดในที่ที่มี NFRCS37,38,39โครงสร้าง 3 มิติของตัวอย่าง Cp NFRCS ที่รักษาด้วยเลือดและไม่ได้รับการรักษาถูกสร้างขึ้นใหม่โดยใช้ micro-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Germany)การใช้ซอฟต์แวร์ VG STUDIO-MAX เวอร์ชัน 2.2 ภาพเอ็กซ์เรย์หลายภาพถูกถ่ายจากมุมต่างๆ (ครอบคลุม 360° ตามหลักการแล้ว) เพื่อพัฒนาภาพ 3 มิติสำหรับ NFRCSข้อมูลการฉายภาพที่รวบรวมได้ถูกสร้างขึ้นใหม่เป็นภาพสามมิติโดยใช้ซอฟต์แวร์ 3D ScanIP Academic ที่สอดคล้องกัน
นอกจากนี้ เพื่อให้เข้าใจถึงการกระจายตัวของก้อนเลือด เลือดที่มีซิเตรตผสมล่วงหน้า 20 ไมโครลิตร และ 0.2 M CaCl2 20 ไมโครลิตร ถูกเติมลงใน NFRCS เพื่อเริ่มการแข็งตัวของเลือดตัวอย่างที่เตรียมไว้จะถูกปล่อยให้แข็งตัวพื้นผิว NFRK ได้รับการบำบัดด้วยกลูตาราลดีไฮด์ 0.5% และทำให้แห้งในเตาอบลมร้อนที่อุณหภูมิ 30–40°C เป็นเวลา 30 นาทีลิ่มเลือดที่ก่อตัวขึ้นบน NFRCS ได้รับการสแกน สร้างใหม่ และแสดงภาพ 3 มิติของลิ่มเลือด
การทดสอบการต้านแบคทีเรียดำเนินการบน Cp NFRCS (ดีที่สุดเมื่อเปรียบเทียบกับ Ch NFRCS) โดยใช้วิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้พร้อมการดัดแปลงเล็กน้อยฤทธิ์ต้านแบคทีเรียของ Cp NFRCS และ Cp HFFC ถูกกำหนดโดยใช้จุลินทรีย์ทดสอบที่แตกต่างกันสามชนิด (S.aureus (แบคทีเรียแกรมบวก), E.coli (แบคทีเรียแกรมลบ) และ Candida สีขาว (C.albicans)] ที่เติบโตบนอาหารเลี้ยงเชื้อในจานเพาะเชื้อในตู้ฟักไข่ฉีดสารแขวนลอยเพาะเชื้อแบคทีเรียเจือจาง 50 มล. ที่ความเข้มข้น 105-106 CFU มล.-1 ลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อเทอาหารเลี้ยงเชื้อลงในจานเลี้ยงเชื้อและปล่อยให้แข็งตัวทำหลุมบนพื้นผิวของแผ่นวุ้นเพื่อเติม HFFC (3 หลุมสำหรับ HFFC และ 1 หลุมสำหรับกลุ่มควบคุมเชิงลบ)เติม HFFC 200 µl ลงในหลุม 3 หลุม และ 200 µl pH 7.4 PBS ลงในหลุมที่ 4ที่อีกด้านหนึ่งของจานเพาะเชื้อ วางจาน Cp NFRCS ขนาด 12 มม. บนวุ้นที่แข็งตัวแล้วชุบด้วย PBS (pH 7.4)ยาเม็ด Ciprofloxacin, ampicillin และ fluconazole ถือเป็นมาตรฐานอ้างอิงสำหรับ Staphylococcus aureus, Escherichia coli และ Candida albicansวัดโซนของการยับยั้งด้วยตนเองและถ่ายภาพดิจิทัลของโซนของการยับยั้ง
หลังจากการอนุมัติทางจริยธรรมของสถาบัน การศึกษาได้ดำเนินการที่ Kasturba Medical College of Education and Research ในเมือง Manipal รัฐ Karnataka ทางตอนใต้ของอินเดียโปรโตคอลการทดลอง TEG ในหลอดทดลองได้รับการตรวจสอบและอนุมัติโดย Institutional Ethics Committee of Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020)อาสาสมัครได้รับคัดเลือกจากอาสาสมัครผู้บริจาคโลหิต (อายุ 18 ถึง 55 ปี) จากธนาคารเลือดของโรงพยาบาลนอกจากนี้ยังได้รับใบยินยอมจากอาสาสมัครในการเก็บตัวอย่างเลือดNative TEG (N-TEG) ​​ใช้เพื่อศึกษาผลของการกำหนด Cp HFFC ต่อเลือดครบส่วนที่ผสมกับโซเดียมซิเตรตN-TEG ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางว่ามีบทบาทในการช่วยฟื้นคืนชีพ ณ จุดดูแล ซึ่งสร้างปัญหาให้กับแพทย์เนื่องจากอาจเกิดความล่าช้าอย่างมีนัยสำคัญทางคลินิกในผลลัพธ์ (การทดสอบการแข็งตัวของเลือดตามปกติ)การวิเคราะห์ N-TEG ดำเนินการโดยใช้เลือดครบส่วนได้รับความยินยอมและประวัติทางการแพทย์โดยละเอียดจากผู้เข้าร่วมทั้งหมดการศึกษาไม่รวมผู้เข้าร่วมที่มีภาวะแทรกซ้อนห้ามเลือดหรือลิ่มเลือดอุดตัน เช่น การตั้งครรภ์/หลังคลอด หรือโรคตับอาสาสมัครที่ใช้ยาที่มีผลต่อการแข็งตัวของเลือดก็ไม่รวมอยู่ในการศึกษาเช่นกันการทดสอบในห้องปฏิบัติการขั้นพื้นฐาน (ฮีโมโกลบิน, เวลาของโปรทรอมบิน, การเปิดใช้งาน thromboplastin และจำนวนเกล็ดเลือด) ดำเนินการกับผู้เข้าร่วมทุกคนตามขั้นตอนมาตรฐานN-TEG ระบุความหนืดของลิ่มเลือด โครงสร้างของก้อนเลือดเริ่มต้น ปฏิสัมพันธ์ของอนุภาค การทำให้ก้อนแข็งตัวแข็งแรงขึ้น และการสลายตัวของก้อนเลือดการวิเคราะห์ N-TEG ให้ข้อมูลเชิงกราฟิกและเชิงตัวเลขเกี่ยวกับผลกระทบโดยรวมขององค์ประกอบต่างๆ ของเซลล์และพลาสมาการวิเคราะห์ N-TEG ถูกดำเนินการในสองปริมาตรที่แตกต่างกันของ Cp HFFC (10 µl และ 50 µl)เป็นผลให้เลือดครบ 1 มิลลิลิตรพร้อมกรดซิตริกถูกเติมลงใน 10 ไมโครลิตรของ Cp HFFCเติม 1 มล. (Cp HFFC + ซิเตรตเลือด), เลือดผสม 340 µl ถึง 20 µl 0.2 M CaCl2 ที่มีจาน TEGหลังจากนั้น จาน TEG ถูกบรรจุลงใน TEG® 5000, US เพื่อวัด R, K, มุมอัลฟา, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% ของตัวอย่างเลือดที่มี Cp HFFC41
โปรโตคอลการศึกษาในร่างกายได้รับการตรวจสอบและรับรองโดยคณะกรรมการจริยธรรมสัตว์ประจำสถาบัน (IAEC), โรงเรียนแพทย์ Kasturba, สถาบันอุดมศึกษา Manipal, Manipal (IAEC/KMC/69/2020)การทดลองในสัตว์ทั้งหมดดำเนินการตามคำแนะนำของคณะกรรมการควบคุมและกำกับดูแลการทดลองในสัตว์ (CPCSEA)การศึกษา NFRCS ในร่างกายทั้งหมด (2 × 2 ซม. 2) ดำเนินการกับหนู Wistar เพศเมีย (น้ำหนัก 200 ถึง 250 กรัม)สัตว์ทุกตัวได้รับการปรับสภาพที่อุณหภูมิ 24-26°C สัตว์เหล่านี้สามารถเข้าถึงอาหารและน้ำมาตรฐานได้ฟรีสัตว์ทั้งหมดถูกสุ่มแบ่งออกเป็นกลุ่มต่างๆ แต่ละกลุ่มประกอบด้วยสัตว์สามตัวการศึกษาทั้งหมดดำเนินการตาม Animal Studies: Report of In Vivo Experiments 43ก่อนการศึกษา สัตว์ถูกทำให้สลบโดยการบริหารให้ทางช่องท้อง (ip) ของส่วนผสมของคีตามีน 20-50 มก. (ต่อน้ำหนักตัว 1 กก.) และไซลาซีน 2-10 มก. (ต่อน้ำหนักตัว 1 กก.)หลังจากการศึกษา ปริมาตรเลือดออกคำนวณโดยการประเมินความแตกต่างระหว่างน้ำหนักเริ่มต้นและน้ำหนักสุดท้ายของตัวอย่าง ค่าเฉลี่ยที่ได้จากการทดสอบทั้งสามครั้งนำมาเป็นปริมาตรเลือดออกของตัวอย่าง
แบบจำลองการตัดหางหนูถูกนำมาใช้เพื่อทำความเข้าใจศักยภาพของ NFRCS ในการปรับเลือดออกในการบาดเจ็บ การสู้รบ หรืออุบัติเหตุจราจร (แบบจำลองการบาดเจ็บ)ตัดหางออก 50% ด้วยมีดผ่าตัดและวางไว้ในอากาศเป็นเวลา 15 วินาทีเพื่อให้แน่ใจว่าเลือดออกปกตินอกจากนี้ ตัวอย่างทดสอบถูกวางบนหางของหนูโดยใช้แรงกด (Ct, Cs, Ch NFRCS และ Cp NFRCS)มีรายงานเลือดออกและ PCT สำหรับตัวอย่างทดสอบ (n = 3)17,45
ประสิทธิภาพของการควบคุมแรงกด NFRCS ในการสู้รบถูกตรวจสอบบนแบบจำลองของหลอดเลือดแดงต้นขาชั้นตื้นหลอดเลือดแดงโคนขาเปิดออก เจาะด้วย 24G trocar และเลือดออกภายใน 15 วินาทีหลังจากสังเกตเห็นเลือดออกที่ไม่สามารถควบคุมได้ ให้วางชิ้นงานทดสอบที่ตำแหน่งเจาะโดยใช้แรงกดทันทีหลังจากใช้ตัวอย่างทดสอบ เวลาในการจับตัวเป็นก้อนจะถูกบันทึกและสังเกตประสิทธิภาพการห้ามเลือดในอีก 5 นาทีถัดไปขั้นตอนเดียวกันซ้ำกับ Cs และ Ct46
ดาวลิ่งและคณะ47 เสนอแบบจำลองการบาดเจ็บของตับเพื่อประเมินศักยภาพการห้ามเลือดของวัสดุห้ามเลือดในบริบทของการมีเลือดออกระหว่างการผ่าตัดBCT ถูกบันทึกสำหรับตัวอย่าง Ct (กลุ่มควบคุมเชิงลบ), กรอบ Cs (กลุ่มควบคุมเชิงบวก), ตัวอย่าง Ch NFRCS และตัวอย่าง Cp NFRCSSuprahepatic vena cava ของหนูถูกเปิดเผยโดยการผ่าตัดผ่านกล้องมัธยฐานหลังจากนั้นส่วนปลายของกลีบซ้ายก็ถูกตัดออกด้วยกรรไกรทำแผลในตับด้วยมีดผ่าตัดและปล่อยให้เลือดออกสักสองสามวินาทีตัวอย่างการทดสอบ Ch NFRCS และ Cp NFRCS ที่ชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำถูกวางลงบนพื้นผิวที่เสียหายโดยไม่มีแรงดันบวกใดๆ และบันทึก BCTจากนั้นกลุ่มควบคุม (Ct) ออกแรงกดตามด้วย Cs 30 s47 โดยไม่ทำลายการบาดเจ็บ
การทดสอบการหายของบาดแผลในร่างกายได้ดำเนินการโดยใช้แบบจำลองบาดแผลแบบตัดออกเพื่อประเมินคุณสมบัติการรักษาบาดแผลของ NFRCSs ที่ใช้โพลิเมอร์ที่พัฒนาขึ้นแบบจำลองของแผลที่ถูกตัดออกถูกเลือกและดำเนินการตามวิธีการที่เผยแพร่ก่อนหน้านี้โดยมีการดัดแปลงเล็กน้อย19,32,48สัตว์ทุกตัวได้รับการดมยาสลบตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ใช้เครื่องเจาะชิ้นเนื้อ (12 มม.) ทำแผลลึกเป็นวงกลมที่ผิวหนังด้านหลังบริเวณแผลที่เตรียมไว้ถูกแต่งด้วย Cs (กลุ่มควบคุมเชิงบวก), Ct (การตระหนักว่าแผ่นสำลีรบกวนการรักษา), Ch NFRCS และ Cp NFRCS (กลุ่มทดลอง) และกลุ่มควบคุมเชิงลบโดยไม่มีการรักษาใดๆในแต่ละวันของการศึกษาได้ทำการวัดพื้นที่ของบาดแผลในหนูทุกตัวใช้กล้องดิจิตอลถ่ายภาพบริเวณแผลและทำการตกแต่งใหม่เปอร์เซ็นต์ของการปิดแผลวัดได้จากสูตรต่อไปนี้:
ตามเปอร์เซ็นต์ของการปิดแผลในวันที่ 12 ของการศึกษา ผิวหนังของหนูกลุ่มที่ดีที่สุดถูกตัดออก ((Cp NFRCS) และกลุ่มควบคุม) และศึกษาโดยการย้อม H&E และการย้อม Trichrome ของ Masson ตามเปอร์เซ็นต์ของการปิดแผลในวันที่ 12 ของการศึกษา ผิวหนังของหนูกลุ่มที่ดีที่สุดถูกตัดออก ((Cp NFRCS) และกลุ่มควบคุม) และศึกษาโดยการย้อม H&E และการย้อม Trichrome ของ Massonตามเปอร์เซ็นต์ของการปิดแผลในวันที่ 12 ของการศึกษา ผิวหนังของหนูกลุ่มที่ดีที่สุด ((Cp NFRCS) และกลุ่มควบคุม) ถูกตัดออกและตรวจสอบโดยการย้อมด้วย hematoxylin-eosin และ Masson's trichrome根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和Masson三色染色研究。根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤，进行H&E染色和眳组）หนูในกลุ่มที่ดีที่สุด ((Cp NFRCS) และกลุ่มควบคุม) ถูกตัดออกสำหรับการย้อมสี hematoxylin-eosin และการย้อมสีไตรโครมของ Masson ตามเปอร์เซ็นต์การปิดแผลในวันที่ 12 ของการศึกษาขั้นตอนการย้อมสีที่ดำเนินการได้ดำเนินการตามวิธีการที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้49,50โดยสังเขป หลังจากการตรึงในฟอร์มาลิน 10% ตัวอย่างถูกทำให้แห้งโดยใช้ชุดของแอลกอฮอล์ที่ให้คะแนนใช้ไมโครโทมเพื่อให้ได้เนื้อเยื่อที่ตัดออกบางส่วน (หนา 5 µm)ส่วนควบคุมแบบอนุกรมบางและ Cp NFRCS ได้รับการรักษาด้วย hematoxylin และ eosin เพื่อศึกษาการเปลี่ยนแปลงทางจุลพยาธิวิทยาใช้สีย้อมไตรโครมของ Masson เพื่อตรวจหาการก่อตัวของคอลลาเจนไฟบริลผลลัพธ์ที่ได้รับได้รับการศึกษาโดยนักพยาธิวิทยาแบบสุ่มสี่สุ่มห้า
ความเสถียรของตัวอย่าง Cp NFRCS ได้รับการศึกษาที่อุณหภูมิห้อง (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) เป็นเวลา 12 เดือน51Cp NFRCS (การเปลี่ยนสีพื้นผิวและการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์) ได้รับการตรวจสอบด้วยสายตาและทดสอบความต้านทานการสึกหรอแบบพับและ BCT ตามวิธีการข้างต้นที่สรุปไว้ในส่วนวัสดุและวิธีการ
ความสามารถในการปรับขนาดและความสามารถในการทำซ้ำของ Cp NFRCS ได้รับการตรวจสอบโดยการเตรียม Cp NFRCS ที่มีขนาด 15×15 ตร.ซม.นอกจากนี้ ตัวอย่าง 30 มก. (n = 5) ถูกตัดออกจากเศษส่วน Cp NFRCS ต่างๆ และ BCT ของตัวอย่างที่ศึกษาได้รับการประเมินตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้าในส่วนวิธีการ
เราได้พยายามพัฒนารูปร่างและโครงสร้างต่างๆ โดยใช้องค์ประกอบ Cp NFRCS สำหรับการใช้งานด้านชีวการแพทย์ต่างๆรูปร่างหรือโครงร่างดังกล่าวรวมถึงไม้กวาดรูปกรวยสำหรับเลือดกำเดาไหล การทำหัตถการทางทันตกรรม และไม้กวาดทรงกระบอกสำหรับเลือดออกทางช่องคลอด
ชุดข้อมูลทั้งหมดแสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน และวิเคราะห์โดย ANOVA โดยใช้ Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) ตามด้วยการทดสอบการเปรียบเทียบพหุคูณของ Bonferroni (*p<0.05)
ขั้นตอนทั้งหมดที่ดำเนินการในการศึกษาในมนุษย์เป็นไปตามมาตรฐานของสถาบันและสภาวิจัยแห่งชาติ ตลอดจนประกาศของเฮลซิงกิ พ.ศ. 2507 และการแก้ไขเพิ่มเติมในภายหลัง หรือมาตรฐานทางจริยธรรมที่คล้ายคลึงกันผู้เข้าร่วมทั้งหมดได้รับแจ้งเกี่ยวกับคุณลักษณะของการศึกษาและความสมัครใจข้อมูลของผู้เข้าร่วมยังคงเป็นความลับเมื่อรวบรวมแล้วโปรโตคอลการทดลอง TEG ในหลอดทดลองได้รับการตรวจสอบและอนุมัติโดย Institutional Ethics Committee of Kasturba Medical College, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020)อาสาสมัครลงนามยินยอมให้เก็บตัวอย่างเลือด
ขั้นตอนทั้งหมดที่ดำเนินการในการศึกษาในสัตว์ได้ดำเนินการตามคณะแพทยศาสตร์ Kastuba, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020)การทดลองในสัตว์ทั้งหมดได้รับการออกแบบตามแนวทางของคณะกรรมการควบคุมและกำกับดูแลการทดลองในสัตว์ (CPCSEA)ผู้เขียนทุกคนปฏิบัติตามแนวทาง ARRIVE
สเปกตรัม FTIR ของ NFRCS ทั้งหมดได้รับการวิเคราะห์และเปรียบเทียบกับสเปกตรัมของไคโตซานที่แสดงในรูปที่ 2Aลักษณะสเปกตรัมพีคของไคโตซาน (บันทึก) ที่ 3437 cm-1 (การยืด OH และ NH2, การทับซ้อน), 2945 และ 2897 cm-1 (การยืด CH) 1660 cm-1 (การยืด NH2), 1589 cm-1 (การดัด N–H ), 1157 cm-1 (การยืดสะพาน O-), 1067 cm-1 (การยืด C–O, ไฮดรอกซิลทุติยภูมิ), 993 ซม. -1 (ยืด CO, Bo-OH) 52.53.54.ตารางเสริม S1 แสดงค่าสเปกตรัมการดูดซับ FTIR NFRCS สำหรับไคโตซาน (นักข่าว) ไคโตซานบริสุทธิ์ Cm, Ch และ Cpสเปกตรัม FTIR ของ NFRCS ทั้งหมด (Cm, Ch และ Cp) แสดงแถบการดูดซับที่มีลักษณะเฉพาะเหมือนกับไคโตซานบริสุทธิ์โดยไม่มีการเปลี่ยนแปลงที่มีนัยสำคัญ (รูปที่ 2A)ผล FTIR ยืนยันว่าไม่มีปฏิสัมพันธ์ทางเคมีหรือทางกายภาพระหว่างโพลีเมอร์ที่ใช้ในการพัฒนา NFRCS ซึ่งบ่งชี้ว่าโพลีเมอร์ที่ใช้นั้นเฉื่อย
ลักษณะภายนอกร่างกายของ Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS และ Cs(A) แสดงถึงสเปกตรัม FTIR ที่รวมกันขององค์ประกอบของไคโตซานและ Cm NFRCS, Ch NFRCS และ Cp NFRCS ภายใต้การบีบอัด(B) a) อัตราการดูดซึมเลือดครบส่วนของ NFRCS Cm, Ch, Cp และ Cg (n = 3);ตัวอย่าง Ct แสดง BAR ที่สูงขึ้นเนื่องจากสำลีมีประสิทธิภาพในการดูดซับที่สูงกว่าb) เลือดหลังการดูดซึมเลือด ภาพประกอบของตัวอย่างที่ดูดซึมการแสดงแบบกราฟิกของ BCT ของตัวอย่างทดสอบ C (Cp NFRCS มี BCT ที่ดีที่สุด (15 วินาที, n = 3)) ข้อมูลใน C, D, E และ G แสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD และแถบข้อผิดพลาดแสดงถึง SD, ***p < 0.0001 ข้อมูลใน C, D, E และ G แสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± SD และแถบข้อผิดพลาดแสดงถึง SD, ***p < 0.0001 Данные в C, D, E และ G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют стандартное откл โดย, ***p <0,0001. ข้อมูลใน C, D, E และ G แสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน และแถบค่าความผิดพลาดแสดงถึงค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน *** p<0.0001 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0.0001。 Данные в C, D, E และ G показаны как среднее значение ± стандартное отклонение, планки погрешностей представляют стандартное о тклонение, ***p <0,0001. ข้อมูลใน C, D, E และ G แสดงเป็นค่าเฉลี่ย ± ส่วนเบี่ยงเบนมาตรฐาน แถบข้อผิดพลาดแสดงค่าเบี่ยงเบนมาตรฐาน *** p<0.0001