Iýmitlenmek we paýlamak mör-möjekleri otlamak we ýaşaýyş taryhy aýratynlyklaryny birleşdirýär. Dürli durmuş etaplarynda belli bir iýmit maddalarynyň ýetmezçiliginiň öwezini dolmak üçin, mör-möjekler goşmaça iýmitlenmek arkaly bu iýmitleri alyp bilerler, mysal üçin, oňurgaly sekresiýalary howuz diýlip atlandyrylýan amalda iýmitlendirip bilerler. Çybyn Anopheles arabiani iýmitlenmedik ýaly görünýär. Iýmitlenmek üçin sygyryň peşewinde arabiensis agitasiýasy durmuş taryhynyň aýratynlyklaryny gowulandyrýar.
Ygtybarlydygyna göz ýetiriň. Arabiensis täze, 24 sagat, 72 sagat we 168 sagatlyk sygyr peşewiniň ysyna çekildi we öý gözleýän we gan bilen iýmitlenýän (48 sagatdan soň nahar) aýallar Y turbasy olfaktometrde ölçenildi, göwreli aýallar süýdemdiriş synagy üçin bahalandyryldy. Y-turba we meýdan synaglarynda bahalandyrylýar. Gyzzyrma wektorlary üçin goşmaça berhiz hökmünde sygyr peşewini we esasy azotly birleşýän karbamidleri barlamak üçin iýmitleniş parametrleri we ýaşaýyş taryhy aýratynlyklary ölçeldi. Aýal çybynlaryň paýy we sygyr peşewiniň we karbamidiň mukdary bahalandyryldy. Iýmitlenenden soň aýallar diri galmak, birleşdirilen uçuş we köpelmek üçin baha berildi.
Öý eýesiniň ganyny we iýmitini gözläň. Laboratoriýa we meýdan gözleglerinde araplar täze we garry sygyr peşewiniň tebigy we sintetiki ysyna çekildi. Göwreli aýallar süýdemdiriji ýerlerde sygyr peşewiniň seslenmesine biperwaý garadylar. Öý gözleýän we gan sorýan aýallar sygyr peşewini we karbamidini işjeň siňdirýärler we bu çeşmeleri ömrüň dowamlylygy, fiziologiki ýagdaýy hökmünde bölýärler.
Anopheles arabinis, ömrüň taryhynyň gowulaşmagy üçin sygyr peşewini almak we paýlamak. Sygyr peşewiniň goşmaça iýmitlenmegi gündelik ýaşamagyň we wektoryň dykyzlygyny ýokarlandyrmak arkaly we göni uçuş işjeňligini üýtgetmek arkaly wektor kuwwatyna täsir edýär we şonuň üçin geljekki modellerde göz öňünde tutulmalydyr.
Iýmitlenmek we paýlamak mör-möjekleriň ot-iýmlerini we ýaşaýyş taryhynyň aýratynlyklaryny birleşdirýär [1,2,3] .Mör-möjekler iýmit saýlamaga we edinmäge we iýmitiň barlygyna we ýokumly talaplara esaslanyp öwezini dolmagy üpjün edip bilerler. Iýmit maddalarynyň paýlanyşy ömrüň dowamlylygyna bagly bolup, mör-möjekleriň iýmitlenişiniň üsti bilen iýmitlenişiň hiline we mukdaryna dürli talaplary döredip biler [1, 2]. palçyk, oňurgaly haýwanlaryň dürli bölünip çykmagy we sekresiýalary we käşir, howuzlar diýlip atlandyrylýan bir amaldyr. 2 Dürli kebelek we güjük görnüşleri beýan edilse-de, suwaryş deşikleri beýleki mör-möjekleriň sargytlarynda hem ýüze çykýar we bu çeşmeleriň özüne çekilmegi we iýmitlenmegi saglyga we durmuşyň beýleki aýratynlyklaryna möhüm täsir edip biler [2, 4, 5, 6] la la la la la la la la (sl) “ýeterlik iýmitlenmedik” ulular hökmünde ýüze çykýar [8], şonuň üçin suwarmak onuň durmuş taryhynyň aýratynlyklarynda möhüm rol oýnap biler, emma şu wagta çenli bu hereket äsgerilmedi .Bu möhüm ulagda ýokumly maddalary köpeltmegiň serişdesi hökmünde agitasiýa ulanylmagy ünsi çekýär, sebäbi bu epidemiologiki netijelere sebäp bolup biler.
Ululykdaky aýal Anofel çybynlarynda azot kabul edilmegi, gurçuk basgançagyndan alnan az kaloriki ätiýaçlyklar we gan naharynyň netijesiz ulanylmagy sebäpli çäklidir .Ann. Oňurgaly haýwanlar, beýleki mör-möjekleriň görkezişi ýaly uýgunlaşmagy we uçuş hereketini güýçlendirýän azotly birleşmeleri almak üçin [2] .Bu nukdaýnazardan An.-de dogan görnüşleriň biriniň güýçli we tapawutly özüne çekijisi. mallar. Sygyr peşewi azotly birleşmelere baý çeşme bolup, karbamid täze peşewdäki azotyň 50-95% -ini emele getirýär [15, 16]. Sygyr peşewiniň ýaşyna görä mikroorganizmler bu çeşmeleri 24 sagadyň dowamynda azot birleşmeleriniň çylşyrymlylygyny azaltmak üçin ulanýarlar. aýal bolup biler Ann.arabiensis 24 sagat ýa-da ondan pes ýaşly peşewlere has gowy çekilýär [13, 14].
Bu gözlegde, öý eýesi we gan bilen iýmitlenýän Ans gözlendi. Ilkinji gonadotropin siklinde arabiensis, peşew garyşmagy bilen karbamid ýaly azot birleşmelerini almak üçin baha berildi. Indiki döwürde aýal çybynlaryň bu potensial ýokumly serişdäni gowulaşdyrmagy we köpelmegi we sygyrlary kesgitlemek üçin ygtybarlydygyny kesgitlemek üçin birnäçe synag geçirildi. Gan bilen iýmitlenýän An. Bu potensial iýmit çeşmesini gözlemekde, arabiensis syn edilýän diferensial özüne çekijiligiň aňyrsynda himiki arabaglanyşyklary tapdy. 24 sagatlyk peşewde kesgitlenen üýtgäp durýan organiki birleşmeleriň sintetiki ys garyndylary meýdan şertlerinde hasam bahalandyryldy, laboratoriýa şertlerinde alnan netijeleri giňeldip, iriň peşew ysynyň dürli fiziologiki ýagdaýlara täsirini görkezdi. Çybynlary özüne çekmek. Alnan netijeler An. arabiensis, oňurgaly peşewde tapylan azot birleşmelerini ýaşaýşyň taryhy aýratynlyklaryna täsir etmek üçin alýar we paýlaýar. Bu netijeler epidemiologiki netijeleriň we wektor gözegçiligi we gözegçiligi üçin nähili ulanylyp bilinjekdigi barada maslahat edilýär.
Anofel araplary (Dongola ştammy) 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH we 12:12 sagatda ýagtylyk: garaňky aýlaw. Larwalar distillendirilen suwdan doldurylan plastmassa gaplarda (20 sm × 18 sm × 7 sm) ösdürilip ýetişdirildi we Tetramin® balyk iýmiti bilen iýmitlenýärdi (Tetra Werke, Melle, DE) .Pupertae ýygnaldy Bugdorm kapasalaryna (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science, Taýçung, Taýwan) ulularyň ýüze çykmagyna ýol açmak üçin ululara 10% sukroz ergini bilen üpjün edildi, ýüze çykandan 4 gün soň (dpe), şol pursatda öý gözleýän aýal-gyzlar eksperimentiň öňüsyrasynda 4 sagatlap aç-açan suw bilen açyldy. Mahabat iýmitleniş ulgamyny (Hemotek açyş ussahanalary, Akkrington, Beýik Britaniýa) ulanyp, 4 dpe urkaçy defibrotik goýun gany (Håtunalab, Bro, SE) bilen üpjün edildi. Düwürtikli aýallar soňra aşakda görkezilişi ýaly aýry-aýry kapasalara geçirildi we aşakda görkezilişi ýaly 10 gün dowam etdi. uçuş turbasy bioassaýlar we laboratoriýa geçirildi, soňra synagdan 4-6 sagat öň distillendirilen suw mahabaty bardy.
Iýmitlendiriş barlaglary uly ýaşly An.Arab aýal-gyzlarda peşew we karbamid sarp edilişini kesgitlemek üçin ulanyldy. Öý gözleýän we gan bilen iýmitlenýän aýallara 48 sagatda 1% suwuklandyrylan täze we garry sygyr peşewi we iki gözegçilik (10% sukroz we suw) berilýär. Mundan başga-da, iýmit reňkleri (1 mg ml-1 ksilen sianid FF, CAS 2650-17-1); 250 µl mikrosentrifuge turbalarynda 4 × 4 matrisa (Kislorod ylmy, Union City, CA, ABŞ; 1A surat) Gyrasyna dolduryň (~ 300 µl). Çybynlar we boýag reňkiniň bolup biljek täsirleriniň arasynda bäsdeşlik bolmazlygy üçin, uly Petri tagamyna 10 çybyny goýuň (diametri 12 sm we beýikligi 6 sm); çyglylyk. Bu synaglar 5-10 gezek gaýtalandy. Iýmitlenenden soň, çybynlar has giňişleýin seljerişe çenli -20 ° C derejesinde goýuldy.
Öý eýesi we gan sorýan aýal Anopheles arabianus tarapyndan siňdirilen iriň peşewini we karbamidini gözläň. Iýmitlendiriş synagynda (A) aýal çybynlara täze we garry sygyr peşewinden, dürli karbamid, sukrozadan (10%) we distillendirilen suwdan (H2O) girýän aýal-gyzlardan has köp sorulýan aýal. 72 sagatlyk sygyr peşewi 168 sagatdan az sygyr peşewi (B) .Siýdiniň ortaça azot mukdary (± standart gyşarmasy) insetde görkezilýär. Öý gözleýän (D, F) we gan sorýan (E, G) aýallar karbamid dozalara bagly görnüşde alýarlar. 0.05) .Ralňyşlyklar çyzgylary ortaça (BE) adaty ýalňyşlygy aňladýar .Dönekeý çyzyk çyzykly regressiýa çyzygyny görkezýär (F, G)
Siňdirilen iýmitleri çykarmak üçin çybynlar aýratynlykda 1,5 ml distillendirilen suwy öz içine alýan 1,5 ml mikrosentrifuga turbalaryna ýerleşdirildi we bir gezek ulanylýan pestle we simsiz hereketlendiriji (VWR International, Lund, SE) ulanylyp, 10 minutda sentrifugasiýa edildi. spektrofotometr esasly mikroplat okaýjy (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm) ulanmak arkaly kesgitlenildi .Alternatiw görnüşde, çybynlar 1 ml distillendirilen suwda ýerleşdirildi, 900 µl spektrofotometrik derňew üçin bir kwetta geçirildi (UV 620, Şimadzu; 0,2 µl-dan 2,4 µl 1 mg ml-1 ksilen sianid öndürmek üçin eritme. Soňra belli bir boýag konsentrasiýasynyň optiki dykyzlygy, her çybynyň iýmitlenýän mukdaryny kesgitlemek üçin ulanyldy.
Ses göwrümi üýtgeýşiň (ANOVA) bir taraplaýyn seljermesi arkaly seljerildi, soň bolsa Tukiniň soňky jübüt deňeşdirmeleri (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, ABŞ, 1989–2007) .Linear regressiýa derňewleri konsentrasiýa bagly karbamidiň kabul edilişini beýan etdi we öý gözleýän we gan sorýan çybynlar (GraphPad Pris, GraphPad Prisis). ABŞ).
Her ýaş toparyndan takmynan 20 µl peşew nusgasy Hromosorb® W / AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrih) bilen baglanyşdyryldy we galaýy kapsulalarynda (8 mm × 5 mm) kapsulalar CHNS / O analizatorynyň ýanýan kamerasyna girizildi (Flash 2000, Termo Fisher Scientific, Waltham, MA). protokol. Jemi azot (g N l-1) standart hökmünde ulanylýan belli karbamid konsentrasiýalaryna esaslanyp kesgitlenildi.
Iýmitlenýän we gan sorýan aýallaryň diri galmagyna edýän täsirine baha bermek üçin çybynlar aýratyn Petri tagamlaryna (diametri 12 sm we beýikligi 6 sm; Semadeni) howa çalşygy we iýmit üpjünçiligi üçin gapakdaky deşik (diametri 3 sm) ýerleşdirildi. Dietler 4 dpe-den soň üpjün edildi we 1% suwuklandyrylan täze we garry sygyr peşewi, dört sany konsentrasiýa we dört sany sygyr peşewi. diş tamponyna (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) 5 ml şpris (Termo Fisher Scientific, Göteborg, SE) içine salnan plunjer aýryldy we petri tagamynyň üstünde goýuldy (1-nji surat) .1A) Her gün iýmitlenişiňizi üýtgediň. iň soňky çybyn ölýänçä (bejergide n = 40). Dürli berhizler bilen iýmitlenýän çybynlaryň diri galmagy, berhizleriň arasynda diri galmagyň paýlanyşyny deňeşdirmek üçin Kaplan-Maýeriň diri galmak egrileri we sanaw derejesi synaglary arkaly statistik taýdan seljerildi (IBM SPSS Statistika 24.0.0.0).
Öň we yzky panellerden (3-nji surat: ýokarky) 5 mm galyňlykdaky akril panellerden (3-nji surat: ýokarky) 5 mm galyňlykdaky akril panellerden (3-nji surat: ýokarky) çybyn uçýan degirmen. (6.5 sm L) dik turbany ikä bölüp, ýeňil kesýän signal hökmünde alýumin folgasynyň kiçijik bölegini göterýän birleşdirilen gol we gol emele getirdi.
24 sagat açlyk çekýän aýal-gyzlara saklanmazdan 30 minut öň ýokardaky berhiz berildi. Doly iýmitlenýän aýal çybynlar 2-3 minutda buzda aýratyn anestizasiýa edildi we ary baly (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) bilen gornizontal turbalaryň gollaryna daňyldy. PC-Lab 2000 ™ programma üpjünçiligi (v4.01; Velleman, Gavere, BE). Uçuş fabrigi howany kadalaşdyrýan otaga ýerleşdirildi (12 sag: 12 sag, ýagtylyk: garaňky, 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% RH).
Uçuş işjeňliginiň görnüşini göz öňüne getirmek üçin uçuşyň umumy aralygy (m) we yzygiderli uçuş çäreleriniň umumy sany 24 sagadyň dowamynda hasaplandy. Mundan başga-da, aýry-aýry aýallar tarapyndan uçýan ortaça aralyklar bejergiler boýunça deňeşdirildi we bir taraplaýyn ANOVA we Tukiniň soňky derňewi (JMP Pro, v14.0.0, SAS instituty Inc.) hasaplanýar, ortaça aralyk garaşsyz hasaplanýar. 10 minutlyk artdyrma.
Iýmitiň An.arabiensisiň öndürijilik öndürijiligine edýän täsirini bahalandyrmak üçin alty sany aýal (4 dpe) gan ýygnanandan soň göni Bugdorm kapasalaryna (30 sm × 30 sm × 30 sm) geçirildi we soňra ýokarda görkezilişi ýaly 48 sagadyň dowamynda synag synagyny berdi. Dietler aýryldy we her gün 24 sagat distillendirilen suw bilen dolduryldy. Her bir synag kafesi üçin ýumurtga sanaldy we hasaba alyndy. Leum Kamera (DFC) 320 R2 bilen enjamlaşdyrylan Dialux-20 mikroskopy (DM1000; Ernst Leitz Wetzlar, Wetzlar, DE) ulanyp, ýumurtgalaryň nusgalary aýratyn ýumurtgalaryň ortaça ululygyna we uzynlygyna baha bermek üçin ulanyldy. Leica Microsystems Ltd., DE). Galan ýumurtgalar 24 sagadyň dowamynda adaty terbiýe şertlerinde howanyň gözegçiligindäki otagda saklandy we ýokarda görkezilişi ýaly ýaňy-ýakynda ýüze çykan 1-nji instar liçinkalarynyň bir nusgasy ölçeldi. Eggsumurtgalaryň sany we ýumurtga we liçinkalaryň ululygy bejergiler bilen deňeşdirildi we ANOVA we Tukey Inc.
Zebu mallaryndan, Arsi ýaryşlaryndan ýygnanan nusgalardan täze (1 sagatdan soň synag), 24 sagat, 72 sagat we 168 sagatlyk peşew ýygnaldy. Amatly bolmak üçin, sygyrlar henizem ammarda bolanda peşew nusgalary ýygnaldy we her nusganyň 100-200 ml aýratyn poliampid Cchchres GF Co., Minden, DE) gapakly 3 l poliamidde winil hlorid plastik depreklerde. Her bir peşew peşewiniň nusgasyndaky giňişlik üýtgemeleri gönüden-göni (täze) ýa-da otag temperaturasynda 24 sagatda, 72 sagatda we 168 sagatda ýygnaldy, ýagny her peşew nusgasy her ýaş toparynyň wekili boldy.
Nauşnik üýtgemelerini ýygnamak üçin, diafragma vakuum nasosyny (KNF Neuberger, Freiburg, DE) ulanyp, poliamid halta arkaly işjeňleşdirilen uglerod süzgüçli gaz akymyny (100 ml min-1) 2,5 sagatda adsorbsion sütünine aýlamak üçin ýapyk halkaly ulgam ulanyldy. id) aýna ýüň wilkalaryň arasynda 35 mg Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, ABŞ) öz içine alýar. Ulanylmazdan ozal sütün 1 ml gaýtadan redaktirlenen n-heksan (Merk, Darmştadt, DE) we 1 ml pentan (99.0% arassa erginli GC derejesi, Sigma Aldrih) 400Hl. howuzlandy we soňra derňew üçin ulanylýança -20 ° C derejesinde saklandy.
Öý eýesi gözleýän we gan iýýän An.Headspace üýtgäp durýan ekstraktlar, 24 sagatda, 72 sagatda we 168 sagatlyk peşewde ýygnanan Arabidopsis çybynlaryndan göni aýna turba olfaktometri [18] ulanylyp, synaglar geçirildi. 9.5 sm id) ýokardan 3 ± 1 lx gyzyl yşyk bilen yşyklandyryldy. Kömür süzülen we çygly howa akymy (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% çyglylyk) bioassaýy 30 sm s-1-den geçdi. Olfaktometriň şemalyň ujunda 5 sm rulon, her 5 minutda stimulýator üýtgeýär. Derňew üçin, her bir nauşnik ekstraktynyň 10 μl, stimul hökmünde ulanyldy. Deň mukdarda pentan gözegçilik hökmünde ulanyldy. Aýry-aýry öý gözlegleri ýa-da gan sorýan çybynlar, goýberilişinden 2-3 sagat öň goýlan gapaklarda goýuldy. olfaktometr, çybynlara 1 minut aklimirlemäge rugsat berildi, soň bolsa kapasanyň kebelek klapany açyldy. Bejergi ýa-da gözegçilik üçin çekiş 5 minutyň içinde çeşme bilen gatnaşyga giren çybynlaryň paýy hökmünde seljerildi. Her bir kelläňizdäki üýtgewsiz ekstrakt we gözegçilik her gün azyndan 30 gezek köpeldildi we bir günüň dowamynda geçirilen synaglardan bir gezek geçirildi. öý eýesi we gan bilen iýmitlenýän Ans.Arabic bilen nauşnik toplumlary nominal logistik regressiýa arkaly seljerildi, soň bolsa täsin gatnaşyklar üçin jübüt deňeşdirmeler (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Bugdorm kafeslerinde (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science) analiz edildi. 20 ml distillendirilen suw bilen doldurylan plastiki käseler (30 ml; Nolato Hertila), süýdemdiriji substraty üpjün etdi we her bir 10 ekstrakt bilen deňleşdirildi. eritme. Dolandyryş käsesini sazlamak üçin deň mukdarda pentan ulanyldy. positioner täsirine gözegçilik etmek üçin her synagyň arasynda bejeriş we gözegçilik käseleri çalşyldy. Gan bilen iýmitlenýän aýallar ZT 9-11-de tejribe kapasalaryna goýberildi we käselerdäki ýumurtgalar 24 sagatdan soň sanaldy. Tüweleý indeksiniň sanlary (bejerilen käsede goýlan ýumurtgalaryň sany). gezek.
Zenan An.arabiensisiň gaz hromatografiki we elektron antenna nagşyny kesgitlemek (GC-EAD) derňewi öň beýan edilişi ýaly geçirildi [20]. Gysgaça, HP-5 sütüni (30 m × 0,25 mm id, 0,25 μm film galyňlygy, Agilent Technologies) bilen enjamlaşdyrylan Agilent Technologies 6890 GC (Santa Klara, CA, ABŞ) kömegi bilen täze nauşnik üýtgäp durýan ekstraktlar aýryldy. Gidrogen ortaça çyzykly akym tizligi 45 sm s-1 bolan göçme faza hökmünde ulanyldy. Her nusga (2 μl) giriş temperaturasy 225 ° C bilen bölünmedik tertipde 30 sekuntda sanjym edildi. GC peçiniň temperaturasy 35 ° C (3 minutlyk tutum) -dan 300 ° C (10 minutlyk tutma) 10 ° C minut 1-e goşuldy. ýalyn ionlaşdyryjy detektor bilen EAD arasynda pes ölüli haç (Gerstel, Mülheim, DE). EAD üçin GC akymly kapilýar, GC peçiniň temperaturasyny we 5 ° C-ni yzarlaýan Gerstel ODP-2 geçiriji liniýadan, aýna turbasyna (10 sm × 8 mm) uglerod süzülen, çygly howa bilen garyldy. çybynlaryň bir nusgasy hasaba alyndy, öý gözleýän çybynlar üçin her ýaşdaky peşew nusgalarynda azyndan üç sany göçürme geçirildi.
GC-EAD derňewinde antenn jogaplaryny almak üçin birleşdirilen GC we köpçülik spektrometrini (GC-MS; 6890 GC we 5975 MS; Agilent Technologies) ulanyp, täze we garry süýt peşewleriniň nauşnik kolleksiýalarynda bioaktiw birleşmeleri kesgitlemek. GC eAD-da elektron täsir ionlaşdyryş re modeiminde işleýär. Geliý ortaça çyzykly akym tizligi 35 sm s-1.A 2 μl nusga, GC-EAD derňewi ýaly injektor sazlamalary we peç temperaturasy bilen sanjym edildi. Birleşmeler saklanyş wagtyna (Kovát indeksine) we adaty spektrlere görä NIST14 kitaphanasy (Agilent) bilen kesgitlenildi. (10 ng, 99,8% himiki arassalygy, Aldrih) daşarky standart hökmünde sanjym edildi.
Öý eýesi gözleýän we gan sorýan Ans.arabiensis-i özüne çekmek üçin täze we garry peşewde ýüze çykarylan bioaktiw birleşmelerden ybarat sintetiki ys garyndysynyň netijeliligine baha bermek, ýokardaky ýaly bir olfaktometr we protokol ulanyp. Sintetiki garyndylar garyşyk nauşnikdäki birleşmeleriň düzümini we deňeşdirmelerini takyklaýar, 24 sagatlyk, 48 sagatlyk, 48 sagatlyk, 48 sagatlyk, 48 sagatlyk, 72 sagatlyk, 48 sagatlyk, 48 sagatlyk, 72 sagatlyk, 48 sagatlyk, 48 sagatlyk, 72 sagatlyk, 48 sagatlyk, 72 sagatlyk Faýl; 1: Tablisa S2). Derňew üçin, sintetiki garyndynyň 1: 100 eritmesinden 10 μl ulanyň, umumy goýberiliş tizligi takmynan 140-2400 ng h-1 aralygynda, öý we gan sorýan çybynlaryň özüne çekijiligini bahalandyrmak üçin. Soňra synag doly garyndylarda geçirilýär, şol bir wagtyň özünde birleşdirilen garyndylar. garyndylar nominal logistik regressiýa arkaly seljerildi, soň bolsa täsin gatnaşyklar üçin jübüt deňeşdirmeler (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Sygyr peşewiniň gyzzyrma çybynlary, täze we garry sygyr peşewleri üçin ýokarda görkezilişi ýaly ýygnalan ýer bolup hyzmat edip biljekdigini ýa-da ýokdugyny kesgitlemek üçin suw 3 l çelekde (100 ml) goýlup, çeňňek duzaklaryna salnypdyr. . gijeler. Dürli ýaşdaky peşew bilen duzakda tutulan çybyn sanlary logiki regressiýany beta binomial paýlamak bilen deňeşdirildi (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Efiopiýanyň Oromiýa sebitiniň Maki şäherçesiniň golaýyndaky gyzzyrma-endemiki obada (8 ° 11 ′ 08 ″ N, 38 ° 81 ′ 70 ″ E; 6A surat). Gözleg awgust aýynyň ortalaryndan sentýabryň ortalaryna çenli her ýyl ýapyk galyndy sepilmezden ozal geçirildi. Uzyn ýagyş möwsümi bilen bir hatarda saýlanyldy. jaýlar: öýde haýwanlara rugsat berilmedi, içerde nahar bişirmäge (odun ýa-da kömür çekmäge) rugsat berilmedi (iň bolmanda synag döwründe) we iň köp iki ilaty bolan öýler, kesel ýokaşan ýerlerde uklady. bejerilen çybyn torunda. Addis Ababa uniwersitetiniň Tebigy ylymlar fakultetiniň (CNS-IRB) institusional gözleg etikasyna gözegçilik geňeşi (IRB / 022/2016) tarapyndan tassyklanyldy, Helsinki Bütindünýä lukmançylyk birleşiginiň jarnamasy tarapyndan kesgitlenen görkezmelere laýyklykda. ('kebele') derejesi. Tejribe dizaýny 2 × 2 latyn inedördül dizaýnyna eýerdi, onda sintetik garyndylar we dolandyryşlar ilkinji gije jübütlenen jaýlara bellendi we indiki synag gijesinde öýleriň arasynda çalşyldy. Bu amal on gezek gaýtalandy. Mundan başga-da, saýlanan öýlerde çybyn işjeňligini bahalandyrmak üçin CDC duzaklary, synagyň başynda, orta günlerinde we bäş gijesinde dowam etdiriler.
Alty bioaktiw birleşmäni öz içine alýan sintetiki garyndy heptanda (97,0% çözüji GC derejesi, Sigma Aldrih) eritildi we pagta süýümi dispenseri arkaly 140 ng h-1-de goýberildi. Çeňňek dispenseri 12 sagatlyk synagyň dowamynda ähli birleşmeleri yzygiderli paýlamaga mümkinçilik berdi. W. Hok kompaniýasy, Gaýneswil, FL, ABŞ 6A surat) .Gaplar ýerden 0,8 - 1 m ýokarda, düşegiň aýagynda asyldy we meýletinçi bejerilmedik çybyn torunyň aşagynda ýatdy we 18: 00-dan 06: 30 aralygynda işledi. Toplumyň agzalary [23]. Meýdanda geçirilen gözlegde jübüt logiki laýyk modeliň kömegi bilen seljerildi, bu ýerde özüne çekiji garaşly üýtgeýän we bejergi (sintetiki garyndy vs kontrol) kesgitlenen täsir boldy (JMP® 14.0. SAS Institute Inc.).
Howpsuzdygyna baha beriň. Arabiensis, esasy azot çeşmesi bolan karbamid, 4 günüň dowamynda (dpe) öý gözleýän we gan bilen iýmitlenýän aýal iýmitlendiriş synaglary üçin 48 sagadyň dowamynda peşew almagy başardy (1-nji surat) .Her öý gözleýän we gan sorýan aýallar beýleki iýmitlerden ýa-da suwlardan ep-esli sukrozany siňdirdi (F (5,426) = 20.1 <0.0001 degişlilikde 1B, C surat.) Mundan başga-da, öý gözleýän aýallar 168 sagatda peşew bilen deňeşdirilende 72 sagatda az iýdiler (1B-nji surat) .Herbany öz içine alýan berhiz hödürläninde, beýleki konsentrasiýalar we suwlar bilen deňeşdirilende 2,69 mM-de karbamid ep-esli mukdarda siňdirildi (10% 813) (F); 1D) .Bu, adatça 10% sukrozdan (F (10,557) = 78.35, p <0.0001; 1-nji surat) .1E) az mukdarda karbamidli berhizleri suwdan has köp siňdirýän gan bilen iýmitlenýän aýallaryň beren jogabyndan tapawutlydy. has ýokary konsentrasiýalar (F (1,953) = 78.82, p <0.0001; 1F, G). Karbamidli iýmitden kabul edilmegiň iň amatly bahalary bar ýaly görünse-de (1D, E), iki fiziologiki ýagdaýdaky aýallar karbamid konsentrasiýalarynyň ähli diapazonyna logiki çyzykly görnüşde modulirlemegi başardylar (1F, G). ) .Şuňa meňzeşlikde, çybynlar azotyň siňdirilişini gözegçilikde saklaýana meňzeýär, sebäbi peşewdäki azotyň mukdary sorulýan mukdarda görkezilýär (1B, C we B suratlar).
Siýdiniň we karbamidiň öý gözleýän we gan siňdirýän çybynlaryň ýaşamagyna edýän täsirine baha bermek üçin aýallara dört ýaşdaky peşew (täze, 24 sag, 72 sag, we 168 sagatdan soň) iýmitlenýär we karbamid konsentrasiýasynyň bir bölegi, distillendirilen suw we 10% sukroz gözegçilik hökmünde hyzmat edýär (2A surat). 5, sah. sakroza dietasy bilen iýmitlenýär (2B-E surat). Täze we köne peşew bilen iýmitlenýän aýallar, 72 sagatlyk peşew (p = 0.016) bilen ýaşamak ähtimallygy iň pes bolan (2B-nji surat) iýmitlenýän aýallar, suw gözegçiliginden has uzak ýaşadylar (p <0.04) p = 0.012 degişlilikde 2D-nji surat), 72 sagatlyk peşew bilen iýmitlenýän aýallar gysga täze peşew we 24 sagatlyk peşew bilen iýmitlenýänlerden has uzak ýaşadylar (p <0.0001 we p = 0.013; 2D surat) .Men karbamid iýmitlenende, gan bilen iýmitlenýän aýallar karbamidiň we suwuň beýleki konsentrasiýalaryndan has uzak ýaşadylar (p <0.013);
Sygyr peşewi we karbamid bilen iýmitlenýän we gan sorýan aýal Anofel arabinisiň diri galmagy. Bioassaýda (A) aýal çybynlara täze we garry sygyr peşewinden, karbamid, sukrozadan (10%) we distillendirilen suwdan (H2O) iýmitlenýär. peşew (B, D) we karbamid (C, E) we gözegçilik, Sukroza we suw öldi
Uçuş fabriginiň synagynda 24 sagadyň dowamynda kesgitlenen aralyk we sany, umumy uçuş işjeňligini az görkezýän öý gözleýän we gan sorýan çybynlaryň arasynda tapawutlanýar (3-nji surat). Täze we garry peşew ýa-da sukroz we suw üpjün edýän öý çybynlary dürli uçuş usullaryny görkezýärdi (3-nji surat), täze siýdikde iýmitlenýän aýallar, 24 ýaşda bolsa peşew bilen iýmitlenýär. nagyşlar we esasan gündelikdi. Sakaroza ýa-da 72 sagatlyk peşew bilen üpjün edýän aýal çybynlar 24 sagadyň dowamynda işjeňlik görkezýärdi, suw bilen üpjün edýän aýallar bolsa orta döwürde has işjeň bolýardy. Sakaroza bilen iýmitlenýän çybynlar gijäniň bir wagty we irden iň ýokary işjeňlik görkezýärdi, 72 sagatlyk peşew iýenler bolsa 24 sagadyň dowamynda yzygiderli peselýär.
Aw gözleýän gan sorýan aýal Anopheles arabinisiň sygyr peşewi we karbamid bilen iýmitlenmegi. Uçuş fabriginiň synagynda täze we garry sygyr peşewi bilen iýmitlenýän aýal çybynlar, karbamid, sukroz (10%) we distillendirilen suw (H2O) gorizontal, erkin aýlanýan gollara (ýokarda) sag gözleýän aýal-gyzlar (sag). her bir berhiz üçin 24 sagadyň dowamynda hasaba alyndy (garaňky: çal; açyk: ak) .Sirkadanyň işjeňlik grafiginiň sag tarapynda ortaça aralyk we ortaça sany görkezilýär. Roralňyşlyklar çyzgylary ortaça adaty ýalňyşlygy görkezýär. Statistik derňew tekste serediň
Umuman alanyňda, gözleýän aýal-gyzlaryň umumy uçuş işjeňligi 24 sagadyň dowamynda uçuş aralygyna meňzeş bir nusga eýerdi. Uçuş aralygy iýmitlenýän iýmitlere ep-esli derejede täsir etdi (F (5, 138) = 28.27, p <0.0001), 72 sagatlyk peşew iýen öý gözleýän aýallar beýleki berhizler bilen deňeşdirilende ep-esli uzak aralyklara uçdy (p <0.0001), we sukrozalar. 24 ýaşly peşew (p = 0.022) iýmitlenýän çybynlar. Siýdik iýmitlenişi bilen beýan edilen uçuş işjeňliginiň görnüşinden tapawutlylykda, karbamid bilen iýmitlenýän aýal-gyzlar 24 sagadyň dowamynda dowamly uçuş işjeňligini görkezdiler, garaňky fazanyň ikinji ýarymynda iň ýokary derejä ýetdi (3-nji surat). Işjeňlik görnüşleri birmeňzeş bolsa-da, 13-e deňdir. 0.0001) .Gördegiň islendik konsentrasiýasy bilen iýmitlenýän aýallar suw ýa-da sukroz bilen iýmitlenýän aýallardan has uzak uçdy (p <0.03).
Gan sorýan çybynlaryň umumy uçuş işjeňligi durnukly we ähli berhizlerde 24 sagadyň dowamynda dowam etdi, suw bilen iýmitlenýän aýallar we täze we 24 sagat iýmitlenýän aýallar üçin garaňky döwrüň ikinji ýarymynda peşew işjeňliginiň ýokarlanmagy bilen (3-nji surat) .Siýdik iýmitlenmegi gan bilen iýmitlenýän aýallaryň uçuş aralygyna ep-esli täsir etdi (F (5, 138) = 4.83, p = 0.0004) beýleki peşew we gözegçilik dietasy bilen (täze, p = 0.0091; 72 sagat, p = 0.0022; 168 sagat, p = 0,001; sukroz, p = 0.0017; dH2O, p = 0.036).
Siýdik we karbamidiň iýmitlenişiň köpeliş parametrlerine edýän täsiri ýumurtga goýýan bioassaýlarda (4A surat) bahalandyryldy we her bir aýal tarapyndan goýlan ýumurtgalaryň sanyna, ýumurtganyň ululygyna we täze çykan ilkinji liçinkalaryna görä derňeldi. Eggsumurtgalaryň sany iýmitlenýär. beýleki peşew berhizleri we iýmitlenýän sukrozlara meňzeýärdi (4B-nji surat). Şonuň ýaly-da, peşew bilen iýmitlenýän urkaçylaryň goýýan ýumurtgalarynyň ululygy (F (5, 209) = 12.85, p <0.0001) üýtgeýär, 24 sagatlyk peşew we sukroz bilen iýmitlenýän aýallar suw bilen iýmitlenýän aýallara garanyňda ep-esli uly ýumurtga goýýar. (F (5, 187) = 7.86, p <0.0001), 24 we 72 sagatlyk peşew bilen iýmitlenýän urkaçylaryň ýumurtgalaryndan çykýan ýumurtgalardan ep-esli uly liçinkalar ýüze çykýar.
Sygyr peşewi we karbamid bilen iýmitlenýän aýal Anopheles arabinisiň öndürijilik öndürijiligi. Gan bilen iýmitlenýän aýal çybynlara täze we garry sygyr peşewinden, karbamidiň, sukrozanyň (10%) we distillendirilen suwdan (H2O) 48 sagatlap bioassaýa goýmazdan we ýumurtga goýýan substratlar 48 sagat (A), ýumurtga goýýan substratlar (A), ýumurtga goýýan substratlar 48 sagat (A) bolýar. (D, G) berlen berhiz ep-esli derejede täsir etdi (sygyr peşewi: BD; karbamid: EG) .Dürli harp atlary bilen ölçenen her bir parametr üçin manylar biri-birinden düýpgöter tapawutlanýardy (Tukiniň post analizini ulanyp bir taraplaýyn ANOVA; p <0.05) .Ralňyşlyklar barlary ortaça adaty ýalňyşlygy görkezýär;
Siýdiniň esasy azot düzümi hökmünde karbamid, gan bilen iýmitlenýän urkaçylara berhiz hökmünde berlende, ähli gözleglerde köpeliş parametrlerine ep-esli täsir etdi. Karbamidiň iýmitlenmeginden soň, karbamid konsentrasiýasyna baglylykda F (11, 360) = 4.69; p <0.0001), aýallar karbamidiň konsentrasiýasy 134 µM we 1334 mM has köp ýumurtga goýýar. suwda iýmitlenýän aýallardan ýumurtga (F (10, 4245) = 36.7; p <0.0001; 4F surat) we gurçuklaryň ululygy, enelerde karbamidiň şuňa meňzeş konsentrasiýasyna täsir eden hem bolsa (F (10, 3305) = 37.9; p <0.0001) has üýtgeýärdi (4G surat).
Öýjükli peşew peşewiniň gulak giňişliginde üýtgäp durýan ekstraktlar üçin umumy özüne çekiji. Aýna turba olfaktometrinde (5A surat) bahalandyrylan arabiensis, peşew ýaşyna ep-esli derejede täsir etdi (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; 5B surat) .Post hok seljermesi 24 sagadyň dowamynda köne peşew ysynyň (0.00 sagadyň) ep-esli ýokarydygyny görkezdi. .012 0.0066-njy surat)
Öý eýesi we gan bilen iýmitlenýän Anopheles arabianus gözlemekde tebigy we sintetiki sygyr peşewiniň yslaryna özüňi alyp barşyň jogaplary. Aýna turba olfaktometriniň shemasy. . ýyldyzjyk (*) yzygiderli pes amplitudaly jogaby görkezýär. Iki ýyldyzly ýyldyz (**) öndürijiliksiz jogaplary görkezýär. Öý eýesini (H) we gan sorýan (I) An.arabiensisiň täze we garry sygyr peşewiniň yslarynyň sintetiki garyndylaryna dürli ýüzlenmeleri bar. 0.05) .Ralňyşlyklar paneli şkalanyň standart ýalňyşlygyny görkezýär
Zenan Ann.arabiensis, gan naharyndan soň 72 sagatda we 120 sagatda, süýdemdirilende, pentan gözegçilikleri bilen deňeşdirilende täze we garry sygyr peşewinden gulagyň üýtgäp durýan ekstraktlaryna artykmaçlyk görkezilmedi (χ2 = 3.07, p> 0.05; Goşmaça faýl 1: S1 surat).
Zenan Ann.arabiensis üçin GC-EAD we GC-MS analizleri sekiz, alty, üç we üç bioaktiw birleşmäni kesgitledi (5D-G surat) .El elektrofiziologiki täsirleri döredýän birleşmeleriň sanynyň tapawudyna garamazdan, bu birleşmeleriň köpüsi täze we garry peşewden ýygnanan üýtgäp durýan ekstraktda bar.
Nauşnik kolleksiýasyndaky bioaktiw birleşmeleriň umumy üýtgäp durýan tizligi, täze peşewdäki 29 µg h-1-den 168 sagatlyk peşewde 242 µg h-1-e çenli ýokarlandy, esasanam p-kresol we m-formaldegid Fenol hem fenol sebäpli ýokarlanýar. Munuň tersine, 2-sikloheksen-1-iň peselmegi we peselmegi bilen peselýär. (bolçulyk) hromatogrammada (5D-nji surat) -G çep paneli) we bu birleşmelere fiziologiki jogaplar (5D-G surat sag paneli).
Umuman aýdanyňda, sintetiki garyndynyň täze we garry peşew gulaklarynyň üýtgäp durýan ekstraktlarynda (5D - G) kesgitlenen bioaktiw birleşmeleriň meňzeş tebigy gatnaşygy bardy we öý eýesini gözlemekde ep-esli täsir etmedi (χ2 = 8.15, df = 4, p = 0.083; 5H surat) ýa-da gan sorýan çybynlar (χ2 = 4.91; Bejergi arasynda iki gezek deňeşdirme, öý eýesi gözleýän çybynlaryň pentan dolandyryşlary bilen deňeşdirilende 24 ýaşly peşewiň sintetiki garyndysyna ep-esli özüne çekijidigini görkezdi (p = 0.0086; 5H surat).
24 ýaşly peşewiň sintetiki garyndylarynda aýry-aýry komponentleriň roluna baha bermek üçin, Y-turba analizindäki doly garyndylara garşy alty sany aýryjy garyndy bahalandyryldy, onda aýry-aýry birleşmeler aýryldy. Öý eýesi gözleýän çybynlar üçin, doly garyndydan aýry-aýry birleşmeleri aýyrmak özüňi alyp barşyň täsirine ep-esli täsir etdi (χ2 = 19.63, df = 6, p = 0.0032); Doly garylanlardan has kiçi. Munuň tersine, doly sintetiki garyndydan aýry birleşmeleriň aýrylmagy, gan siňdirýän çybynlaryň (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077) özüni alyp barşyna täsir etmedi, dekanaldan başga, doly garyndy bilen deňeşdirilende pes derejelere sebäp boldy (p = 0.022; Goşmaça faýl 1: S2B surat).
Efiopiýanyň gyzzyrma-endemiki obasynda 24 gije sygyr peşewiniň sintetik garyndysynyň meýdan şertlerinde çybynlary çekmegiň netijeliligine on gije baha berildi (6A-njy surat). Jemi 4861 çybyn tutuldy we kesgitlenildi, olaryň 45,7% -i Antropus.gambiae sl, 18,9% -i Anofeller. S1) .Anopheles arabinis, PCR derňewi bilen kesgitlenen An.Gambiýa görnüşler toplumynyň ýeke-täk agzasydyr. Ortaça bir gije 320 sany çybyn tutuldy, bu döwürde sintetiki garyndy çeňňekleri duzaklar garyşyksyz jübüt duzaklardan has köp çybyn tutdy (χ2 (0, 3196) = 170.0, ýarym gijäniň başynda). synag. Öýleriň arasynda (χ2 (0, 1665) = 9 × 10-13, p> 0.05) hiç hili gapma-garşylygyň ýokdugyny we okuw döwründe ilatyň azalmaýandygyny görkezýän çybynlaryň sany tutuldy. Sintetiki garyndyny öz içine alýan duzaklarda tutulan çybynlaryň sany ep-esli artdy: öý gözleýän (χ2 (0, 210) .
24 sagatlyk sintetiki sygyr peşew ysynyň garyndysynyň netijeliligine meýdan bahalandyrmasy. Meýdan şäheriniň golaýynda, Efiopiýanyň günorta-merkezinde (karta), kesellere gözegçilik merkezleriniň (CDC) ýeňil duzagy (sagda) jübüt jaýlarda, latyn inedördül dizaýny (howa şekili) (A). Anofel farroes (C), başgaça görnüşde, fiziologiki döwlete bagly täsir. Mundan başga-da, bu duzaklar öý eýesi Culex çybynlarynyň sanyny ep-esli artdyrdy. (D) Dolandyryş bilen deňeşdirilende. Çep tarapdaky barlar ysly çeňňek jübütlerinde tutulan çybynlaryň ortaça saýlama indeksini görkezýär (N = 10), duzaklaryň ortaça nokatlary (N = 10); 5). ) .Asterisks statistiki ähmiýet derejesini görkezýär (* p = 0.01 we *** p <0.0001)
Üç görnüş sintetiki garyndylary öz içine alýan duzaklarda başgaça tutuldy. Hoster eýesine (χ2 (1, 1345) = 71,7, p <0.0001), gan iýmitlendirmek (χ2 (1, 517) = 16.7, p <0.0001) we göwrelilik (χ2 (1, 180) = 6.11, p = 0.0134) sarantiki garyndynyň duzagyna düşdi. tapawutlandyrmady. Dürli fiziologiki ýagdaýlarda faroz tapyldy (6C-nji surat) .Kulex üçin gözegçilik duzaklary bilen deňeşdirilende sintetiki garyndy (χ2 (1,1319) = 12.6, p = 0.0004; 6D surat) öý eýelerini gözleýän çybynlaryň sanynyň ep-esli artmagy tapyldy.
Efiopiýadaky köpelýän ýerler bilen oba jemgyýetleriniň arasynda potensial ýer eýeleriniň daşynda ýerleşýän ýyrtyjy duzaklar, ysytma çybynlarynyň sygyr peşewiniň ysyny kabul ediş mekany hökmünde ulanýandygyna ýa-da ýokdugyna baha bermek üçin ulanyldy. Öý eýesi, ýylylyk ýok bolsa ýa-da sygyr peşewiniň ysy ýok bolsa, çybynlar tutulmady (Goşmaça faýl 1: S3 suraty). çybynlar az mukdarda bolsa-da, peşew ýaşyna garamazdan (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; goşmaça faýl 1: S3 surat) çekildi we tutuldy. Munuň tersine, suw gözegçiligi ýokary gyzgynlykda gyzzyrma çybynlaryny tutmady (Goşmaça faýl 1: S3 surat).
Gyzzyrma çybynlary, beýleki mör-möjeklere meňzeş sygyr peşewine (ýagny, howuzlara) öwezini dolmak arkaly azot saklaýan birleşmeleri alýarlar we paýlaýarlar. 2, 4, 24, 25, 26 Siýdikdäki azotly birleşmeleriň, şol sanda peşewdäki azotly düzümiň düzümindäki karbamidiň emele gelmegini kadalaşdyryp bilýärler. 15 15, 16. Iýmitlenmedik ulular ýaly ýapyk gyzzyrma wektorlary üçin [8], sebäbi aýal çybynlara az töwekgelçilikli iýmitlenmek bilen möhüm azot birleşmelerini almak mümkinçiligini berýär. Bu tapyş ep-esli epidemiologiki netijelere eýe, sebäbi aýallaryň ömri, işjeňligi we köpeliş netijesi ýokarlanýar, bularyň hemmesi wektor dolandyryşynyň maksatlary bolup biler.