Käbir LC näsazlyklaryny düzetmek temalary hiç wagt könelmeýär, sebäbi LC praktikasynda wagtyň geçmegi bilen gural tehnologiýasy kämilleşse-de meseleler bar. LC ulgamynda ýüze çykyp, pes derejä ýetip biljek köp usul bar. Iň ýokary görnüş bilen baglanyşykly meseleler ýüze çykanda, bu netijeleriň bolup biljek sebäpleriniň gysga sanawy, näsazlyklary düzetmek tejribämizi ýönekeýleşdirmäge kömek edýär.
Bu "LC näsazlyklaryny düzetmek" sütünini ýazmak we her aý mowzuklar hakda pikir etmek gyzykly boldy, sebäbi käbir mowzuklar hiç haçan stilden çykmaýar. Hromatografiýa gözleginde käbir mowzuklar ýa-da pikirler könelişýär, täze we has gowy pikirler sebäpli, näsazlyklary düzetmek ugrunda, sebäbi birnçe ýyl bäri LC-iň üstünde durup geçýärin). Suwuk hromatografiýa (LC) täsir edýän häzirki zaman tendensiýalarynda (mysal üçin, basyşyň saklanmagyna täsirine düşünişimizi deňeşdirmek [2] Täze öňegidişlik) LC netijelerini düşündirmek we häzirki zaman LC gurallary bilen nädip çözmeli bu seriýa LCGC-iň meşhur “LC näsazlyklary düzetmek boýunça gollanma” diwar diagrammasy (4) üçin gaty möhümdir. Bu tapgyryň üçünji bölümi üçin pik görnüşi ýa-da pik aýratynlyklary bilen baglanyşykly meselelere ünsi jemledim. Geň galdyryjy zat, diwar diagrammasy pes görnüşiň 44 dürli sebäbini görkezýär! Bu meseleleriň hemmesini bir makalada jikme-jik öwrenerin, köplenç bu mowzuklara üns bererin. bu möhüm mowzukda.
Näsazlyklary düzetmek soraglaryna "islendik zat mümkin" bilen has köp jogap berýärin .Düşünmek kyn bolan synlamalary göz öňünde tutanymyzda bu jogap aňsat bolup biler, ýöne köplenç ýerlikli hasaplaýaryn. Peýdanyň pes bolmagynyň köp sebäpleri bilen, meseläniň nämedigini göz öňünde tutanyňyzda aç-açan pikir ýöretmek we iň möhüm mümkinçiliklere ünsi jemlemek möhümdir.
Näsazlyklary düzetmek boýunça islendik maşkda möhüm ädim - ýöne meniň pikirimçe pes hasaplanylýan - çözülmeli bir meseläniň bardygyny ykrar etmekdir. Bir meseläniň bardygyny bilmek, köplenç gural bilen bolup geçýän zatlaryň teoriýa, empirik bilimler we tejribe bilen emele gelýän garaşýan zatlarymyzdan tapawutlydygyny bilmek diýmekdir. Hakyky pik görnüşine garaşýan zatlarymyz ýönekeýdir. Nazaryýet (6), 1a suratda görkezilişi ýaly, hromatografiki pikleriň simmetrik we Gauss paýlanyşynyň görnüşine laýyk bolmalydygyna garaşýar. Iň ýokary giňliklerden garaşýan zadymyz has çylşyrymly mesele we beýleki mowzuklarda başga bir zat bolup biler. bu bölümiň mazmuny, bu görnüş görnüşlerine sebäp bolup biljek ýagdaýlaryň käbir anyk mysallaryny ara alyp maslahatlaşmak üçin wagt sarp ederis.
Käwagt pikleriň hromatogrammasynda asla garaşylmaýan ýerlerinde asla syn edilmeýär. Aboveokardaky diwar diagrammasy pikiň ýoklugyny görkezýär (nusgada hakykatdanam nyşanyň analitigini göz öňünde tutsaň, detektoryň sesini görmek üçin ýeterlik bolmaly) adatça käbir gural meselesi ýa-da nädogry ykjam faza şertleri bilen baglanyşyklydyr.pikler, adatça gaty “gowşak”) Bu kategoriýadaky potensial meseleleriň we çözgütleriň gysga sanawyny I tablisada tapyp bilersiňiz.
Aboveokarda belläp geçişimiz ýaly, üns bermezden we ony düzetmezden ozal näçe giňelişe ýol berilmelidigi baradaky sorag, geljekki makalada ara alyp maslahatlaşjak çylşyrymly mowzugymdyr. Meniň tejribäm, pikiň giňelmegi köplenç pik görnüşiniň düýpgöter üýtgemegi bilen utgaşýar we pik guýrugy öň pik ýa-da bölünmekden has ýygy duş gelýär.
Bu meseleleriň her biri LC näsazlyklaryny düzetmegiň öňki sanynda jikme-jik ara alnyp maslahatlaşyldy we bu mowzuklar bilen gyzyklanýan okyjylar bu sebäpleriň düýp sebäpleri we mümkin bolan çözgütleri barada maglumat almak üçin öňki makalalara ýüz tutup bilerler.Has giňişleýin maglumat.
Iň ýokary guýruk, iň ýokary derejeli we bölünişik bularyň hemmesi himiki ýa-da fiziki hadysalar sebäpli döräp biler we himiki ýa-da fiziki mesele bilen iş salyşýandygymyza baglylykda bu meseleleriň çözgüdiniň sanawy dürli-dürli bolýar. Hromatogrammadaky dürli pikleri deňeşdirip, günäkärdigi barada möhüm maglumatlary tapyp bilersiňiz. himiki bolmagy ähtimal.
Peýkam guýrugynyň himiki sebäpleri bu ýerde gysgaça ara alyp maslahatlaşmak üçin gaty çylşyrymly. Gyzyklanýan okyjy has çuňňur ara alyp maslahatlaşmak üçin “LC näsazlyklaryny düzeltmek” atly soňky sanyna ýüzlenýär (10). Şeýle-de bolsa, sanjym edilen analitigiň massasyny azaltmak we pik şekiliniň gowulaşýandygyny ýa-da ýokdugyny anyklamak üçin bu meseläniň “massa massasy köp bolmaly” diýilse gowy bolar. has uly massa sanjymlary bilen hem iň ýokary pik şekillerini alyp bolar ýaly.
Iň ýokary guýruk üçin köp fiziki sebäpler hem bar. Mümkinçilikleri jikme-jik ara alyp maslahatlaşmak isleýän okyjylar “LC näsazlyklaryny düzetmek” (11) atly başga bir meselä ýüzlenýärler. Iň ýokary guýulmagyň iň köp ýaýran fiziki sebäpleriniň biri injektor bilen detektoryň (12) arasyndaky nokadyň pes baglanyşygydyr. Bu sanjym bilen birnäçe hepde öň gurulmadyk, kiçijik bir sanjym bilen gurlupdy. poslamaýan polat kapilýaranyň üstünde düzülen düzgün. Birnäçe başlangyç näsazlyklary düzetmek synaglaryndan soň, sanjym klapan statoryndaky port çuňlugynyň öňküsinden has çuňdugyna göz ýetirdik, netijede portuň düýbünde uly göwrüm bar. Bu mesele sanjym aýlawyny başga bir turba bilen çalşyp, ölen göwrümi ýok etmek üçin ferruly dogry ýerleşdirip bileris.
1-nji suratda görkezilişi ýaly iň ýokary derejelere fiziki ýa-da himiki kynçylyklar hem sebäp bolup biler. Öňdäki gyranyň umumy fiziki sebäbi sütüniň bölejik ýatagynyň gowy gaplanmazlygy ýa-da bölejikleriň wagtyň geçmegi bilen täzeden gurulmagydyr. Bu fiziki hadysanyň netijesinde iň ýokary guýruk bolşy ýaly, muny düzetmegiň iň oňat usuly sütüniň ýerini çalyşmak we dowam etdirmekdir. Stasionar faza (şonuň üçin, saklaýyş faktory) sütüniň içindäki analitigiň konsentrasiýasy bilen gönüden-göni baglanyşyklydyr. Hromatografiki taýdan bu sütüne sanjylýan analitigiň köpelmegi bilen pikiň has beýik bolýandygyny, ýöne giňelmeýändigini aňladýar. Bu gatnaşyk saklanyş häsiýeti çyzykly däl bolsa, pikler diňe uzyn däl, has köp çekilýär. Iň ýokary guýruga sebäp bolýan köpçülikleýin artykmaçlyk (10), çyzykly saklanmazlyk sebäpli ýüze çykýan iň ýokary derejeli sanjym analitik massasyny azaltmak arkaly hem diagnoz goýup bolýar. Eger pik görnüşi gowulaşsa, öňdebaryjy gyra sebäp bolýan sanjym hilinden ýokary bolmazlygy üçin ýa-da bu hereketi azaltmak üçin hromatografiki şertler üýtgedilmelidir.
Käwagt 1f suratda görkezilişi ýaly “bölünen” pik ýaly bolup görünýän zady synlaýarys. Bu meseläni çözmegiň ilkinji ädimi, iň ýokary görnüşiň bölekleýin birleşmegi (ýagny, iki sany tapawutly, ýöne biri-birine ýakyn birleşýän birleşmeleriň bolmagy) sebäpli ýüze çykýandygyny kesgitlemekdir .Eger hakykatdanam iki dürli analitik biri-birine ýakynlaşýan bolsa, onda çözgüdi gowulaşdyrmak meselesi bar (meselem, seçimliligi ýokarlandyrmak, saklamak we plastinka hasaplamak). en, bu kararyň iň möhüm açary, hromatogrammadaky ähli pikleriň bölünen şekilleri görkezýändigi ýa-da diňe bir ýa-da iki bolmagydyr. Eger diňe bir ýa-da iki bolsa, bu bilelikde çözülmeli mesele;ähli pikler bölünen bolsa, sütüniň özi bilen baglanyşykly bolmagy ähtimal fiziki mesele.
Sütüniň fiziki aýratynlyklary bilen baglanyşykly bölünen pikler, adatça bölekleýin petiklenen giriş ýa-da rozetkalar ýa-da sütündäki bölejikleriň üýtgedilip gurulmagy bilen, sütün kanalynyň emele gelmeginiň käbir ýerlerinde ykjam fazadan has çalt akmagyna mümkinçilik berýär. Beýleki sebitlerde (11). Bölekleýin dykylan frit käwagt sütüniň akymyny tersine arassalap bolýar;Şeýle-de bolsa, meniň pikirimçe, bu uzak möhletli çözgüt däl-de, gysga möhletli. Bu bölejikler sütüniň içinde birleşse, köplenç häzirki sütünler bilen ölüme sebäp bolýar. Şu pursatda sütüni çalyşmak we dowam etdirmek iň gowusydyr.
1g suratdaky iň ýokary dereje, ýaňy-ýakynda öz laboratoriýamda ýüze çykan ýagdaýdan, adatça signalyň şeýle ýokarydygyny we jogap diapazonynyň iň ýokary nokadyna ýetendigini görkezýär. Optiki siňdiriş detektorlary üçin (bu ýagdaýda UV-vis), analitik konsentrasiýasy gaty ýokary bolanda, analitik detektoryň akym öýjüginden geçýän ýagtylygyň köp bölegini alýar, şeýle hem dürli ýagtylyk, fotod signaly daşky görnüşde gaty “bulaşyk” etmek we analitik konsentrasiýasyna garaşsyz.Bu ýagdaý ýüze çykanda, analitigiň sanjym göwrümini azaltmak - sanjymyň göwrümini azaltmak, nusgany eritmek ýa-da ikisini hem aňsatlyk bilen çözüp bolýar.
Hromatografiýa mekdebinde analitik konsentrasiýasynyň görkezijisi hökmünde detektor signalyny (ýagny, hromatogrammadaky y oky) ulanýarys. Şonuň üçin hromatogrammany noldan pes signal bilen görmek geň görünýär, sebäbi ýönekeý düşündiriş munuň negatiw analitik konsentrasiýasyny görkezýär - elbetde fiziki taýdan mümkin däl.
Bu ýagdaýda otrisatel pik, sütünden çykýan molekulalaryň iň ýokary derejeden öň we soň göçme fazanyň özünden has az ýagtylygy siňdirýändigini aňladýar. Bu, meselem, tolkun uzynlyklarynyň az mukdaryny (<230 nm) we ykjam faza goşundylaryny ulananyňyzda ýüze çykyp biler. takyk mukdar maglumatlary, şonuň üçin olardan gaça durmagyň düýp sebäbi ýok (bu usul käwagt “gytaklaýyn UV kesgitlemesi” diýilýär) (13) .Hogsa-da, hakykatdanam negatiw piklerden düýbünden gaça durmak islesek, siňdiriş ýüze çykarylan ýagdaýynda, analitik ykjam fazadan has köp siňdirip biler ýa-da ykjam fazanyň düzümini üýtgedip biler.
Ativearamaz pikler, refraktiw indeks (RI) kesgitlemesi ulanylanda, çözgüdiň matrisasy ýaly nusgadaky analitikden başga komponentleriň refraktiw görkezijisi ykjam fazanyň refraktiw görkezijisinden tapawutlananda ýüze çykyp biler. Bu hem UV-vis kesgitlemesi bilen bolup geçýär, ýöne bu täsir RI kesgitlemesi bilen deňeşdirilende has amatly bolup biler.
LC näsazlyklaryny düzetmegiň esasy mowzugynyň üçünji bölüminde syn edilen pik görnüşiniň garaşylýan ýa-da adaty pik görnüşinden tapawutlanýan ýagdaýlaryny ara alyp maslahatlaşdym. Şeýle meseleleriň netijeli çözülmegi garaşylýan pik şekillerini bilmekden başlanýar (teoriýa ýa-da bar bolan usullar bilen öňki tejribä esaslanýar), şonuň üçin bu garaşmalardan gyşarmalar aç-açan bolýar. näsazlyklary düzetmäge başlamaly, ýöne ähli mümkinçilikleri ele almaýar. Sebäpleriň we çözgütleriň has çuňňur sanawy bilen gyzyklanýan okyjylar LCGC “LC näsazlyklary düzetmek boýunça gollanma” diwar diagrammasyna ýüz tutup bilerler.
(4) LCGC “LC näsazlyklary düzetmek boýunça gollanma” diwar diagrammasy.https: //www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Hromatografiýada maglumatlary derňemek we signallary gaýtadan işlemek (Elsevier, Nýu-Yorkork, NY, 1998), 43-96 sahypa.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF we Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rew.907, 31–44 (2016) .https: //doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.