Käbir LC näsazlyklaryny düzetmek temalary hiç wagt könelmeýär, sebäbi LC praktikasynda wagtyň geçmegi bilen gural tehnologiýasy kämilleşse-de meseleler bar. LC ulgamynda ýüze çykyp, pes derejä ýetip biljek köp usul bar. Iň ýokary görnüş bilen baglanyşykly meseleler ýüze çykanda, bu netijeleriň bolup biljek sebäpleriniň gysga sanawy, näsazlyklary düzetmek tejribämizi ýönekeýleşdirmäge kömek edýär.
Bu "LC näsazlyklaryny düzetmek" sütünini ýazmak we her aý mowzuklar hakda pikirlenmek gyzykly boldy, sebäbi käbir mowzuklar hiç haçan stilden çykmaýar. Hromatografiýa gözleginde käbir mowzuklar ýa-da pikirler köne we has gowy pikirler bilen çalşylanda könelýär, sebäbi ilkinji ýazgylar şu journalurnalda (şol bir wagtyň özünde LC Journalurnaly). Suwuk hromatografiýa (LC) täsir edýän häzirki zaman tendensiýalary boýunça bölümleri çözmek (mysal üçin, basyşyň saklanmagyna edýän täsiri baradaky düşünjämiziň deňeşdirilişi [2] Täze öňe gidişlik) LC netijelerini düşündirmek we häzirki zaman LC gurallary bilen nädip çözmeli ulanýan ulgamymyz. Bu seriýanyň esasy mowzugy, köp laboratoriýada asylan LCGC-iň meşhur “LC näsazlyklary düzetmek boýunça gollanma” diwar diagrammasy (4) bilen baglanyşyklydyr. Bu tapgyryň üçünji bölümi üçin pik görnüşi ýa-da pik aýratynlyklary bilen baglanyşykly meselelere ünsi jemledim. Geň galdyryjy zat, diwar diagrammasynda bu meseläniň üstünde durup bilmerin, bu meseleleriň hemmesine üns bererin, bu meseleleriň hemmesini jikme-jik görerin, bu meseleleriň hemmesine üns bererin, bu meseleleriň hemmesini jikme-jik görerin, bu meseleleriň hemmesini jikme-jik belläp geçerin! köplenç. youngaş we garry LC ulanyjylary bu möhüm mowzukda peýdaly maslahatlar we ýatlatmalar taparlar diýip umyt edýärin.
Näsazlyklary düzetmek soraglaryna "islendik zat mümkin" bilen has köp jogap berýärin .Düşünmek kyn bolan synlamalary göz öňünde tutanymyzda bu jogap aňsat bolup biler, ýöne köplenç ýerlikli hasaplaýaryn. Peýdanyň pes bolmagynyň köp sebäpleri bilen, meseläniň nämedigini göz öňünde tutanyňyzda aç-açan pikir ýöretmek we iň möhüm mümkinçiliklere ünsi jemlemek möhümdir.
Näsazlyklary düzetmek boýunça islendik maşkda möhüm ädim - ýöne meniň pikirimçe pes hasaplanylýan bir mesele - çözülmeli meseläniň bardygyny ykrar etmekdir. Meseläniň bardygyny bilmek, köplenç gural bilen bolup geçýän zatlaryň teoriýa, empirik bilimler we tejribe bilen emele gelen garaşýan zatlarymyzdan tapawutlydygyny bilmek diýmekdir. we başgalar. zatlaryň nädogry bolup biljekdigi. Bu bölümiň galan böleginde, bu görnüş görnüşlerine sebäp bolup biljek ýagdaýlaryň käbir anyk mysallaryny ara alyp maslahatlaşmaga wagt sarp ederis.
Käwagt pikleriň hromatogrammasynda asla garaşylmaýan ýerlerinde asla syn edilmeýär. Aboveokardaky diwar diagrammasy pikiň ýoklugyny görkezýär (nusgada hakykatdanam nyşanyň analitigini göz öňünde tutsaň, detektoryň sesini görmek üçin ýeterlik bolmaly) adatça käbir gural meselesi ýa-da nädogry ykjam faza şertleri bilen baglanyşyklydyr. pikler, adatça gaty “gowşak”) Bu kategoriýadaky potensial meseleleriň we çözgütleriň gysga sanawyny I tablisada tapyp bilersiňiz.
Aboveokarda belläp geçişimiz ýaly, üns bermezden we ony düzetmezden ozal näçe giňelişe ýol berilmelidigi baradaky sorag, geljekki makalada ara alyp maslahatlaşjak çylşyrymly mowzugymdyr. Meniň tejribäm, pikiň giňelmegi köplenç pik görnüşiniň düýpgöter üýtgemegi bilen utgaşýar we pik guýrugy öň pik ýa-da bölünmekden has ýygy duş gelýär.
Bu meseleleriň her biri LC näsazlyklaryny düzetmegiň öňki sanynda jikme-jik ara alnyp maslahatlaşyldy we bu mowzuklar bilen gyzyklanýan okyjylar bu sebäpleriň düýp sebäpleri we mümkin bolan çözgütleri barada maglumat almak üçin öňki makalalara ýüz tutup bilerler. Has giňişleýin maglumat.
Iň ýokary guýruk, iň ýokary derejeli we bölünişikleriň hemmesi himiki ýa-da fiziki hadysalar sebäpli döräp biler we himiki ýa-da fiziki mesele bilen iş salyşýandygymyza baglylykda bu meseleleriň çözgüdiniň sanawy dürli-dürli bolýar. Hromatogrammadaky dürli pikleri deňeşdirip, günäkärdigi barada möhüm maglumatlary tapyp bilersiňiz. gowy görün, sebäbi himiki bolmagy ähtimal.
Iň ýokary guýrugyň himiki sebäpleri bu ýerde gysgaça ara alyp maslahatlaşmak üçin gaty çylşyrymly. Gyzyklanýan okyjy has çuňňur ara alyp maslahatlaşmak üçin “LC näsazlyklaryny düzeltmek” atly soňky sanyna ýüzlenýär (10). Şeýle-de bolsa, synanyşmak aňsat bir zat, sanjym edilen analitigiň massasyny azaltmak we iň ýokary görnüşiniň gowulaşýandygyny görmekdir. Hromatografiki şertler üýtgedilmelidir, şonuň üçin has uly massa sanjym edilende-de gowy pik şekilleri alyp bolar.
Iň ýokary guýruk üçin köp fiziki sebäpler hem bar. Mümkinçilikleri jikme-jik ara alyp maslahatlaşmak isleýän okyjylar “LC näsazlyklaryny düzetmek” (11) atly başga bir meselä ýüz tutýarlar. Iň ýokary guýulmagyň iň köp ýaýran fiziki sebäpleriniň biri injektor bilen detektoryň (12) arasyndaky nokadyň pes baglanyşygydyr. Birnäçe mysal öň laboratoriýamyzda gurulmadyk kiçijik bir sanjym bardy. poslamaýan polat kapilýaryna gazylan ferruly sanjym aýlawy. Birnäçe başlangyç näsazlyklary düzetmek synaglaryndan soň, sanjym klapan statoryndaky port çuňlugynyň öňküsinden has çuňdugyna göz ýetirdik, netijede portuň düýbünde uly ölü emele geldi. Bu mesele sanjym aýlawyny başga bir turba bilen çalşyp, ferrulyň göwrümini dogry pozup bileris.
1e-nji suratda görkezilişi ýaly ýokary derejelere fiziki ýa-da himiki kynçylyklar hem sebäp bolup biler. Öňdäki gyranyň umumy fiziki sebäbi sütüniň bölejik ýatagynyň gowy gaplanmazlygy ýa-da bölejikleriň wagtyň geçmegi bilen täzeden gurulmagydyr. Bu fiziki hadysanyň iň ýokary guýrugy ýaly, muny düzetmegiň iň gowy usuly sütüni çalyşmak we dowam etdirmekdir. Stasionar fazada saklanylýan analitigiň mukdary (şonuň üçin, saklaýyş faktory) sütündäki analitigiň konsentrasiýasy bilen gönüden-göni baglanyşyklydyr. Hromatografiki taýdan bu sütüne sanjylýan analitigiň köpelmegi bilen pikiň has uzyn bolýandygyny, ýöne has giň däldigini aňladýar. pikler, öňdebaryjy ýa-da yzky gyralara sebäp bolýar. Iň ýokary guýruga sebäp bolýan köpçülikleýin artykmaçlyk bilen (10), çyzykly saklanmazlyk sebäpli ýüze çykýan iň ýokary derejä sanjym edilen analitik massasyny azaltmak arkaly hem diagnoz goýup bolýar. Eger pik görnüşi gowulaşsa, öňdebaryjy gyjyndyrmany döredýän sanjym hilinden ýokary bolmazlygy ýa-da hromatografiki şertleri üýtgetmeli.
Käwagt 1f suratda görkezilişi ýaly “bölünen” pik ýaly bolup görünýän zady synlaýarys. Bu meseläni çözmegiň ilkinji ädimi, iň ýokary görnüşiň bölekleýin birleşmegi (ýagny, iki sany tapawutly, ýöne biri-birine ýakyn birleşýän birleşmeleriň bolmagy) sebäpli ýüze çykýandygyny kesgitlemekdir. Eger hakykatdanam iki dürli analitik biri-birine ýakynlaşýan bolsa, onda olaryň çözgüdini gowulaşdyrmak meselesi bar (meselem, seçimliligi ýokarlandyrmak, saklamak ýa-da plastinka hasaplamak). sütüniň özi. Often, bu kararyň iň möhüm açary, hromatogrammadaky ähli pikleriň bölünen şekilleri görkezýändigi ýa-da diňe bir ýa-da iki bolmagydyr. Eger diňe bir ýa-da iki bolsa, bu bilelikde çözülmeli mesele; ähli pikler bölünen bolsa, sütüniň özi bilen baglanyşykly bolmagy ähtimal fiziki mesele.
Sütüniň fiziki aýratynlyklary bilen baglanyşykly bölünen pikler, adatça bölekleýin petiklenen giriş ýa-da rozetkalar ýa-da sütündäki bölejikleriň üýtgedilip gurulmagy bilen, sütün kanalynyň emele gelmeginiň käbir ýerlerinde ykjam fazadan has çalt akmagyna mümkinçilik berýär. Beýleki sebitlerde (11). Bölekleýin dykylan frit käwagt sütüniň akymyny tersine arassalap bolýar; Şeýle-de bolsa, meniň pikirimçe, bu uzak möhletli çözgüt däl-de, gysga möhletli. Bu bölejikler sütüniň içinde birleşse, köplenç häzirki sütünler bilen ölüme sebäp bolýar. Şu pursatda sütüni çalyşmak we dowam etdirmek iň gowusydyr.
1g suratdaky iň ýokary dereje, şeýle hem soňky döwürde öz laboratoriýamda signalyň şeýle ýokarydygyny we jogap diapazonynyň iň ýokary derejesine ýetendigini görkezýär. Optiki siňdiriş detektorlary üçin (bu ýagdaýda UV-vis), analitik konsentrasiýasy gaty ýokary bolanda, analitik detektor akymynyň öýjüginden geçýän ýagtylygyň köp bölegini öz içine alýar. we “garaňky tok”, daşky görnüşi we analitik konsentrasiýasyna garaşsyz signaly gaty “bulaşyk” edýär. Bu ýagdaý ýüze çykanda, analitigiň sanjym göwrümini azaltmak - sanjymyň göwrümini azaltmak, nusgany eritmek ýa-da ikisini hem aňsatlyk bilen çözüp bolýar.
Hromatografiýa mekdebinde analitik konsentrasiýasynyň görkezijisi hökmünde detektor signalyny (ýagny, hromatogrammadaky y oky) ulanýarys. Şonuň üçin hromatogrammany noldan pes signal bilen görmek geň görünýär, sebäbi ýönekeý düşündiriş munuň negatiw analitik konsentrasiýasyny görkezýär - elbetde fiziki taýdan mümkin däl.
Bu ýagdaýda otrisatel pik, sütünden çykýan molekulalaryň iň ýokary derejeden öň we soň göçme fazanyň özünden has az ýagtylygy siňdirýändigini aňladýar. Bu, meselem, tolkun uzynlyklarynyň az mukdaryny (<230 nm) we ykjam faza goşundylaryny ulananyňyzda ýüze çykyp biler. kalibrleme egrisi we takyk mukdar maglumatlary alyň, şonuň üçin olardan gaça durmagyň düýp sebäbi ýok (bu usul käwagt “gytaklaýyn UV kesgitlemesi” diýilýär) (13) .Hogsa-da, negatiw piklerden düýbünden gaça durmak islesek, siňdiriş ýüze çykarylanda, iň oňat çözgüt başga bir kesgitleýiş tolkun uzynlygyny ulanmakdyr, analitik ykjam fazadan has az siňer ýa-da ykjam fazany az siňdirer.
Ativearamaz pikler, refraktiw indeks (RI) kesgitlemesi ulanylanda, çözgüdiň matrisasy ýaly nusgadaky analitikden başga komponentleriň refraktiw görkezijisi ykjam fazanyň refraktiw görkezijisinden tapawutlananda ýüze çykyp biler. Bu hem UV-vis kesgitlemesi bilen bolup geçýär, ýöne bu täsir RI kesgitlemesi bilen deňeşdirilende has amatly bolup biler.
LC näsazlyklaryny düzetmegiň esasy mowzugynyň üçünji bölüminde syn edilen pik görnüşiniň garaşylýan ýa-da adaty pik görnüşinden tapawutlanýan ýagdaýlaryny ara alyp maslahatlaşdym. Şeýle meseleleriň netijeli çözülmegi garaşylýan pik şekillerini bilmekden başlaýar (teoriýa ýa-da bar bolan usullar bilen öňki tejribä esaslanýar), şonuň üçin bu garaşmalardan gyşarmalar düşnüklidir. bu jikme-jiklikler näsazlyklary düzetmek üçin gowy ýer berýär, ýöne ähli mümkinçilikleri ele almaýar. Sebäpleriň we çözgütleriň has çuňňur sanawy bilen gyzyklanýan okyjylar LCGC “LC näsazlyklary düzetmek boýunça gollanma” diwar diagrammasyna ýüz tutup bilerler.
(4) LCGC “LC näsazlyklary düzetmek boýunça gollanma” diwar diagrammasy.https: //www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) A. Felinger, Hromatografiýada maglumatlary derňemek we signallary gaýtadan işlemek (Elsevier, Nýu-Yorkork, NY, 1998), 43-96 sahypa.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF we Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rew. 907, 31–44 (2016) .https: //doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.