Deňiz pseudomonas aeruginosa biofilminiň 2707 Super Dupleks poslamaýan poladyň mikrob poslamasy

Nature.com-a gireniňiz üçin sag boluň. Ulanylýan brauzer wersiýaňyzda CSS-iň çäkli goldawy bar. Iň oňat tejribe üçin täzelenen brauzeri ulanmagy maslahat berýäris (ýa-da Internet Explorer-de gabat geliş tertibini öçüriň). Şol aralykda, dowamly goldawy üpjün etmek üçin sahypany stil we JavaScript-de görkezeris.
Mikrob poslama (MIC) köp pudakda çynlakaý mesele bolup durýar, sebäbi bu uly ykdysady ýitgilere sebäp bolup biler.2707 super dupleks poslamaýan polatdan (2707 HDSS) ajaýyp himiki garşylygy sebäpli deňiz gurşawynda ulanyldy. Şeýle-de bolsa, MIC-e garşylygy tejribe taýdan görkezilmedi. Bu gözlegde, 2707 HDSS-iň deňiz aerobikasy bakteriýasy Pseudin Peres Puds 2216E gurşawynda udomonas aeruginosa biofilm, poslama potensialynda oňyn üýtgeşiklik we poslama tok dykyzlygynyň ýokarlanmagy bolup geçdi. X şöhleli fotoelektron spektroskopiýa (XPS) seljermesi biofilmiň aşagyndaky nusganyň üstündäki Cr mazmunynyň azalandygyny görkezdi. 7 HDSS P. aeruginosa biofilmleriniň MIC-den doly immun däl.
Dupleks poslamaýan polatlar (DSS) ajaýyp mehaniki häsiýetleri we poslama garşylygy iň oňat utgaşdyrmak üçin dürli pudaklarda giňden ulanylýar1,2. Lokallaşdyrylan çukur henizem ýüze çykýar we bu poladyň bitewiligine täsir edýär3,4.DSS mikrob poslama garşy durmaýar. .Jeon et al7, hatda super dupleks poslamaýan polatlaryň (SDSS) hem poslama garşylyk taýdan käbir çäklendirmeleriniň bardygyny anyklady. Şonuň üçin käbir programmalarda has ýokary poslama garşylygy bolan super dupleks poslamaýan polatlar (HDSS) talap edilýär. Bu gaty erginli HDSS-iň ösmegine sebäp boldy.
DSS-iň poslama garşylygy alfa we gamma fazalarynyň we ikinji faza ýanaşyk ýerleşýän Cr, Mo we W tükenen sebitleriň gatnaşygyna baglydyr. HDSS Cr, Mo we N11-iň ýokary mukdaryny öz içine alýar, şonuň üçin ajaýyp poslama garşylygy we ýokary bahasy (45-50) Piting garşylyk ekwiwalent belgisi (PREN) wt + wt% Wt + 3% wt. ion garşylygy takmynan 50% ferrit (α) we 50% austenit (γ) fazalary öz içine alýan deňagramly kompozisiýa esaslanýar, HDSS has gowy mehaniki häsiýetlere we adaty DSS13-den has ýokary garşylyga eýe.Hlorid poslama häsiýetleri. Gowulaşan poslama garşylyk, HDSS-iň deňiz gurşawy ýaly has poslaýjy hlorid şertlerinde ulanylmagyny giňeldýär.
MIC-ler nebit-gaz we suw hyzmatlary ýaly köp pudakda esasy mesele bolup durýar. MIC ähli poslama zeper ýetmeginiň 20% -ini emele getirýär15. MIC köp gurşawda syn edilip bilinjek bioelektrohimiki poslama. Metal ýüzlerde emele gelýän biofilmler elektrokimiki şertleri üýtgedýär, şeýlelik bilen korroziýa mikroorganizmleri. merkezi MIC gözlegleri, EET-iň (öýjükden daşary elektron geçiriş) MIC-de elektrogen mikroorganizmleriň täsiri bilen çäklendiriji faktordygyny görkezdi. Zhangang we başg.18 elektron araçylaryň Desulfowibrio sessificans öýjükleri bilen 304 poslamaýan poladyň arasynda elektron geçirişini çaltlaşdyrýandygyny görkezdi, bu bolsa MIC-iň has agyr hüjümine sebäp boldy. Enning we ş.m.19 we Wenzlaff we başgalar.20 poslaýjy sulfat azaldýan bakteriýalaryň (SRB) biofilmleriniň metal substratlardan elektronlary göni siňdirip biljekdigini, netijede agyr poslama sebäp bolandygyny görkezdi.
DSB, SRB, demir azaldýan bakteriýalar (IRB) we ş.m. öz içine alýan şertlerde MIC-e duçar bolýandygy mälimdir .Bu bakteriýalar biofilmleriň aşagyndaky DSS ýüzlerinde lokal çukuryň döremegine sebäp bolýar 22,23. DSS-den tapawutlylykda HDSS24 MIC-i känbir bilinmeýär.
Pseudomonas aeruginosa, tebigatda giňden ýaýran gram-negatiw hereketli çybyk şekilli bakteriýadyr. Pseudomonas aeruginosa, şeýle hem deňiz gurşawynda esasy mikrob topary bolup, MIC-iň polat bolmagyna sebäp bolýar.28 we uanuan we başgalar.29, Pseudomonas aeruginosa-nyň suwly ýerlerde ýumşak polatdan we erginlerden poslama derejesini ýokarlandyrmaga meýillidigini görkezdi.
Bu işiň esasy maksady, elektrokimiki usullary, ýerüsti seljeriş usullaryny we poslama önüm analizini ulanyp, deňiz aerob bakteriýasy Pseudomonas aeruginosa sebäpli ýüze çykan 2707 HDSS-iň MIC häsiýetlerini barlamakdy. Açyk aýlaw potensialy (OCP), çyzykly polýarizasiýa garşylygy (LPR), Elektrokimiki täsir Poslanan üstünde himiki elementleri tapmak üçin 07 HDSS.Energy dispersiw spektrometr (EDS) derňewi geçirildi. Mundan başga-da, Pseudomonas aeruginosa bolan deňiz gurşawynyň täsiri astynda oksid film passiwasiýasynyň durnuklylygyny kesgitlemek üçin rentgen fotoelektron spektroskopiýa (XPS) derňewi ulanyldy. Çukuryň çuňlugy konokok lazer skaner mikroskopynda ölçenildi.
1-nji tablisada 2707 HDSS-iň himiki düzümi görkezilýär. 2-nji tablisada 2707 HDSS-iň öndürijilik güýji 650 MPa bolan ajaýyp mehaniki häsiýetleri görkezilýär. 1-nji surat 2707 HDS bilen bejerilen ergin ýylylygynyň optiki mikrostrukturasyny görkezýär.
2a suratda abiotik 2216E orta we P. aeruginosa çorbasynda 2707 HDSS täsir ediş wagty bilen deňeşdirilende açyk zynjyr potensialy (Eocp) 37 ° C-de 14 günüň dowamynda görkezilýär. Bu Eocp-de iň uly we möhüm üýtgeşmäniň ilkinji 24 sagadyň dowamynda bolup geçýändigini görkezýär. Iki ýagdaýda-da Eocp bahalary -145 mV (SCE vs. iotiki nusga we P degişlilikde).Pseudomonas aeruginosa talonlary degişlilikde. 24 sagatdan soň, P. aeruginosa üçin 2707 HDSS-iň Eocp bahasy -228 mV (SCE garşy) birneme durnuklydy, biologiki däl nusgalaryň degişli bahasy takmynan -442 mV (SCE garşy) .P aeruginozanyň barlygynda ep-esli pesdi.
Abiotik orta we Pseudomonas aeruginosa çorbasynda 2707 HDSS nusgalarynyň 37 ° C-de elektrohimiki synag:
)
3-nji tablisada 14 günüň dowamynda abiotik orta we Pseudomonas aeruginosa sanjym gurşawyna sezewar bolan 2707 HDSS nusgasynyň elektrohimiki poslama parametrleri görkezilýär. Anodiki we katodiki egrileriň tangensleri, poslama häzirki dykyzlygy (icorr) we poslama potensialy (Ecorr).
2b suratda görkezilişi ýaly, P. aeruginosa egrisiniň ýokary süýşmegi abiotik egrilik bilen deňeşdirilende Ecorr-yň köpelmegine sebäp boldy. Poslama derejesine proporsional bolan icorr bahasy, Pseudomonas aeruginosa nusgasynda 0,328 μA cm-2 ýokarlandy, biologiki däl nusganyň dört essesi (0.087 μA cm-2).
LPR çalt poslama derňewi üçin weýran ediji däl elektrokimiki usuldyr. MIC32-ni öwrenmek üçin hem ulanyldy. 2-nji surat polýarizasiýa garşylygyny (Rp) täsir ediş wagtynyň funksiýasy hökmünde görkezýär. Has ýokary Rp bahasy az poslamagy aňladýar. Ilkinji 24 sagadyň dowamynda 2707 HDSS Rp iň ýokary bahasy 1955 k2 sms c şeýle hem Rp bahasynyň bir günden soň çalt peselendigini we soňraky 13 günüň dowamynda üýtgemän galandygyny görkezýär. Pseudomonas aeruginosa nusgasynyň Rp bahasy takmynan 40 kΩ sm2, bu biologiki däl nusganyň 450 kΩ sm2 bahasyndan has pesdir.
Icorr bahasy birmeňzeş poslama derejesine proporsionaldyr. Onuň bahasy aşakdaky Stern-Geary deňlemesinden hasaplanyp bilner,
Zou we ş.33, bu işdäki B Tafel eňňidiniň adaty bahasy 26 mV / dek diýip çaklanyldy. 2-nji surat, biologiki däl 2707 nusganyň ikorynyň birneme durnukly bolandygyny görkezýär, P. aeruginosa nusgasy ilkinji 24 sagatdan soň ep-esli üýtgäpdir.
EIS poslanan interfeýslerde elektrokimiki reaksiýalary häsiýetlendirmek üçin ulanylýan başga bir päsgelçiliksiz usuldyr. Abiotik mediýa we Pseudomonas aeruginosa erginine sezewar bolan impedans spektri we hasaplanan sygymlylyk bahalary, nusganyň üstünde emele gelen passiw filmiň / biofilmiň Rb garşylygy, Rct zarýad geçiriş garşylygy, Cdl elektrik goşa gatlagynyň ölçegi ekwiwalent zynjyr (EEC) modelini ulanyp maglumatlary ýerleşdirmek arkaly hasam derňelýär.
3-nji suratda dürli inkubasiýa wagtlary üçin abiotik orta we P. aeruginosa çorbasynda 2707 HDSS nusgasyndaky adaty Nyquist sýuotsetleri (a we b) we Bode bölekleri (a 'we b') görkezilýär. Pseudomonas aeruginosa bar bolan Nyquist halkasynyň diametri azalýar. igure 4 monolaýer (a) we bilýer (b) esasly fiziki gurluşlary we degişli EEC.CPE EEC modeline girizilendigini görkezýär. Giriş we impedans aşakdaky ýaly görkezilýär:
2707 HDSS nusgasynyň impedans spektrine gabat gelmek üçin iki sany fiziki model we degişli ekwiwalent zynjyrlar:
bu ýerde Y0 CPE-iň ululygy, j hyýaly san ýa-da (-1) 1/2, ω burç ýygylygy, n bolsa CPE güýç görkezijisi agzybirlikden pesdir. Zarýad beriş garşylygynyň tersi (ýagny 1 / Rct) poslama tizligine gabat gelýär. Biologiki däl nusgalaryň cm2 (4-nji tablisa).
5-nji suratdaky CLSM şekilleri we SEM şekilleri 7 günden soň 2707 HDSS nusgasynyň üstündäki biofilmiň örtüginiň dykyzdygyny görkezýär. Şeýle-de bolsa, 14 günden soň biofilmiň örtügi seýrek we käbir öli öýjükler peýda boldy. günler. Biofilmiň ortaça galyňlygy hem bu tendensiýany tassyklady. 7 günden soň 22,2 ± 0,7 mkm-den 14 günden 17,8 ± 1,0 m çenli azaldy.
(a) 7 günden soň 3-D CLSM suraty, (b) 14 günden soň 3-D CLSM suraty, (c) 7 günden soň SEM suraty we (d) 14 günden soň SEM şekili.
EDS biofilmlerde himiki elementleri we poslama önümlerinde P. aeruginoza 14 günüň dowamynda täsir eden nusgalarda ýüze çykaryldy. 6-njy surat, biofilmlerde we poslama önümlerdäki C, N, O we P düzümleriniň ýalaňaç metallara garanyňda has ýokarydygyny görkezýär, sebäbi bu elementler biofilmler we olaryň metabolitleri bilen baglanyşyklydyr. metal matrisa poslama sebäpli elementleri ýitirdi.
14 günden soň, 2216E ortaça P. aeruginosa bilen çukuryň ýokaşmagy hasaba alyndy. Inkubasiýa edilmezden ozal, nusganyň üstü tekiz we kemçiliksizdi (7a surat) .Biofilm we poslama önümleri inkubasiýa edilenden we ýok edilenden soň, nusgalaryň üstündäki iň çuň çukurlar CLSM-iň aşagyndaky iň çuň çukurlar, iň ýokary çuňlukda ýok. Pseudomonas aeruginosa sebäpli 7 günden soň 0,52 mkm, 14 günden soň bolsa 0,69 mkm boldy, 3 nusganyň ortaça iň ýokary çuňlugyna esaslanyp (her nusga üçin iň ýokary çukur çuňlugynyň 10 bahasy saýlandy) degişlilikde 0,42 ± 0.12 μm we 0,52 ± 0,15 μm boldy (5-nji tablisa).
(a) Täsir etmezden ozal, (b) abiotik gurşawda 14 gün we (c) Pseudomonas aeruginosa çorbasynda 14 gün.
8-nji suratda dürli nusgalyk ýüzleriň XPS spektri görkezilýär we her bir ýer üçin seljerilen himiki kompozisiýalar 6-njy tablisada jemlenendir. 6-njy tablisada P. aeruginozanyň (A we B nusgalary) barlygynda Fe we Cr atom göterimleri biologiki däl gözegçilik nusgalaryndan (C we D nusgalary) ep-esli pesdi. 6.8 eV, degişlilikde Cr, Cr2O3, CrO3 we Cr (OH) 3 bilen baglanyşdyrylyp bilner (9a we b surat) .Biologiki däl nusgalar üçin Cr 2p ýadro derejeli spektr Cr üçin iki esasy pikiri öz içine alýar (BE üçin 573.80 eV) we Cr2O3 (BE üçin 575.90 eV) Biofilmiň aşagyndaky Cr (OH) 3 (BE 586,8 eV).
Iki metbugatda 2707 HDSS nusgasynyň üstündäki giň XPS spektri degişlilikde 7 gün 14 gün.
(a) P. aeruginoza 7 gün täsir etmek, (b) P. aeruginoza 14 gün täsir etmek, (c) 7 gün abiotik gurşawda we (d) 14 gün abiotik gurşawda.
HDSS köp gurşawda poslama garşylygy görkezýär .Kim we ş.m.2 UNS S32707 HDSS-iň 45-den gowrak PREN bilen gaty garyndy DSS hökmünde kesgitlenendigini habar berdi. Bu eserdäki 2707 HDSS nusgasynyň PREN bahasy 49-dyr. Bu ýokary hrom düzümi we ýokary molibden we Ni derejesi sebäpli bolýar, kislotaly we ýokary hlorid gurşawy üçin peýdaly. Bu işdäki tejribe maglumatlary 2707 HDSS-iň P. aeruginosa biofilmleriniň MIC-den doly immunitetiniň ýokdugyny görkezýär.
Elektrokimiki netijeler, P. aeruginosa çorbasyndaky 2707 HDSS-iň poslama derejesiniň biologiki däl serişde bilen deňeşdirilende 14 günden soň ep-esli ýokarlanandygyny görkezdi. 2a suratda abiotik orta we P. aeruginosa çorbasynyň ilkinji 24 sagadyň dowamynda peselendigi görkezildi. Soňra biofilm ep-esli derejede ýokarlandy, Eocp derejesinden has ýokary boldy. Eokp. Bu tapawudyň P. aeruginosa biofilminiň emele gelmegine baglydygyna ynanmaga esas bar. 2-nji suratda, P. aeruginozanyň gatnaşmagynda 2707 HDSS-iň ikor bahasy 0,627 μA cm-2 ýetdi, bu abiotik gözegçiligiň (0.063 μA cm-2) ululygy bilen deňeşdirildi. P. aeruginosa öýjükleriniň birikdirilmegi we biofilmleriň emele gelmegi sebäpli. Biofilm nusganyň ýüzüni doly ýapanda, impedans peselýär. Gorag gatlagy ilki biofilmleriň we biofilm metabolitleriniň emele gelmegi sebäpli hüjüm edilýär. Şonuň üçin poslama garşylygy peseldi. gözegçilik P. aeruginosa çorbasyna duçar bolan nusgalaryň degişli bahasyndan has ýokarydy. Mundan başga-da, abiotik nusgalar üçin 14-nji günde 2707 HDSS-iň Rct bahasy 489 kΩ sm2 ýetdi, bu P. aeruginozanyň barlygynda Rct bahasyndan (32 kΩ sm2) 15 esse ýokarydy. Şonuň üçin 2707 HDSS P.
Bu netijeleri 2b-nji suratda polýarizasiýa egrilerinden hem synlamak bolýar. Anod şahasy Pseudomonas aeruginosa biofilminiň emele gelmegi we metal okislenme reaksiýalary bilen baglanyşyklydyr. Şol bir wagtyň özünde katodiki reaksiýa kislorodyň azalmagydyr. SS.Yuan et al29, P. aeruginosa biofilminiň kynçylygynda 70/30 Cu-Ni garyndysynyň poslama tok dykyzlygynyň ýokarlanandygyny anyklady. Bu Pseudomonas aeruginosa biofilmleriniň kislorod azaldylmagynyň biokatalizi sebäpli bolup biler. bu işde MIC-e goşant goşup biler.
Dikinson we başgalar.38 himiki we elektrokimiki reaksiýalaryň derejesiniň nusganyň üstündäki sessil bakteriýalaryň alyş-çalyş işjeňligine we poslama önümleriň tebigatyna gönüden-göni täsir edip biljekdigini öňe sürdi. 5-nji we 5-nji tablisada görkezilişi ýaly, öýjükleriň sany we biofilmiň galyňlygy 14 günden soň azaldy. Bu 14 günüň içinde, 27S HDS-iň ýokumly öýjükleriniň 27-sinde ýokaşan öýjükleriň 27-siniň ýokaşmagyna sebäp bolýar. 2707 HDSS matrisa. Bu partiýa synaglarynyň çäklendirmesi.
Bu işde P. aeruginosa biofilmi 2707 HDSS üstündäki biofilmiň aşagyndaky Cr we Fe-iň ýerli tükenmegine kömek etdi (6-njy surat). 6-njy tablisada D nusgasyndaky Fe we Cr-iň C nusgasy bilen deňeşdirilende azalmagy, P. aeruginosa biofilminiň emele gelen Fe we Cr-iň ilkinji 7 günüň içinde dowam edýändigini görkezýär. 2216E deňiz gurşawy. awater. 17700 ppm Cl-iň bolmagy, XPS tarapyndan seljerilen 7 we 14 günlük abiotik nusgalarda Cr-iň azalmagynyň esasy sebäbi boldy. P. aeruginosa nusgalary bilen deňeşdirilende, abiotik nusgalarda Cr-iň ermegi, abiotik şertlerde 276 HDSS-iň pozulmagy bolup biler. ms, Çen we Kleýtonyň teklip edişi ýaly.
Bakteriýalaryň ösmegi sebäpli, ösdürip ýetişdirmezden ozal we soň ortaça pH bahalary degişlilikde 7,4 we 8.2 boldy. Şonuň üçin P. aeruginosa biofilminiň aşagynda, köp mukdarda pH deňeşdirilende ýokary mukdarda organiki kislotanyň poslamagy bu işe goşant goşup bilmez. Biologiki däl gözegçilik gurşawynyň pH-si, soňky 7 günüň dowamynda pH-den soňky 7 günüň dowamynda soňky 7 günüň dowamynda üýtgemedi. P. aeruginozanyň olik işjeňligi we synag zolaklary bolmadyk ýagdaýynda pH-e şol bir täsir edýändigi anyklandy.
7-nji suratda görkezilişi ýaly, P. aeruginosa biofilminiň döremeginiň iň ýokary çuňlugy 0,69 mkm boldy, bu abiotik serişdäniň (0.02 μm) has ulydy .Bu ýokarda beýan edilen elektrokimiki maglumatlara laýyk gelýär. 0.69 μm çukuryň çuňlugy, şol bir şertde 2205 DSS görkezijisi bilen deňeşdirilende 9,5 μm bahadan has azdyr. geň galdyrmaly däl, sebäbi 2707 HDSS has ýokary hrom düzümine eýe bolup, zyýanly ikinji derejeli çökündiler bolmazdan deňagramly faza gurluşy sebäpli, uzak möhletli passiwligi üpjün edýär, P. aeruginozanyň nokatlaryň tutulmagyny we başlamagyny kynlaşdyrýar.
Sözümiň ahyrynda, abiotik metbugatda ähmiýetsiz çukur bilen deňeşdirilende, P. aeruginosa çorbasynda 2707 HDSS üstünde MIC çukury tapyldy. Bu iş 2707 HDSS-iň MIC garşylygy 2205 DSS-den has gowudygyny görkezýär, ýöne P. aeruginosa biofilminiň MIC-den doly immunitetiniň ýokdugyny görkezýär.
2707 HDSS talony Hytaýyň Şenýan şäherindäki Demirgazyk-gündogar uniwersitetiniň (NEU) Metallurgiýa mekdebi tarapyndan üpjün edilýär. 2707 HDSS-iň elementar düzümi 1-nji tablisada görkezilýär, bu NEU materiallarynyň derňewi we synag bölümi tarapyndan seljerildi. Hli nusgalar 1180 ° C derejesinde 1 sagatda poslanan synag, teňňeli 27S. nyşan karbid kagyzy we 0,05 μm Al2O3 poroşok asma bilen ýalpyldadylýar. Taraplary we aşagy inert boýag bilen goralýar. Guradylandan soň, nusgalar steril deionizirlenen suw bilen ýuwuldy we 75% (v / v) etanol bilen 0,5 sagada sterilizasiýa edildi.
Deňiz Pseudomonas aeruginosa MCCC 1A00099 ştammy, Hytaýyň Sýamen Deňiz Medeniýet Toplaýyş Merkezinden (MCCC) satyn alyndy. Pseudomonas aeruginosa, 250 ml çüýşede 37 ° C-de aerobiki taýdan ösdürilip ýetişdirildi we Deňiz 2216E suwuk gurşawy (Qingdao Umyt Biotehnologiýa Co., Ltd.) . 400X ulalanda ýeňil mikroskop astynda gemositometri ulanýan toniki öýjükler. Sanjymdan soň derrew planktonik Pseudomonas aeruginozanyň öýjük konsentrasiýasy takmynan 106 öýjük / ml boldy.
Elektrokimiki synaglar ortaça 500 ml göwrümli üç elektrodly aýna öýjüginde geçirildi. Bir platina list we doýgun kalomel elektrod (SCE), duz köprüleri bilen doldurylan Luggin kapilýallary arkaly reaktora birikdirildi. Işleýän elektrodlary düzmek üçin, her bir elektrod üçin rezin bilen örtülen mis sim, 1 s. elektrokimiki ölçeglere çagyrýan nusgalar 2216E ortaça ýerleşdirildi we suw wannasynda hemişelik inkubasiýa temperaturasynda (37 ° C) saklandy. OCP, LPR, EIS we potensial dinamiki polýarizasiýa maglumatlary Autolab potensiostat (ölçeldi 600TM, Gamry Instruments, Inc., ABŞ) bilen ölçeldi. Durnukly Eocp-de 5 mV ulanylýan naprýa usingeniýäni ulanyp, 0.01 - 10,000 Hz aralygyndaky sinus tolkuny. Potensial arassalanmazdan ozal, durnuksyz erkin poslama potensial bahasyna ýetýänçä, elektrodlar açyk zynjyrda bolýar. Polýarizasiýa egrileri soň -0.2-den 1.5 V-a çenli we Eocp 0.166 mV / s skaner tizliginde 3 gezek gaýtalanýardy.
Metallografiki derňew üçin nusgalar 2000 grit çygly SiC kagyzy bilen mehaniki taýdan ýalpyldadyldy we soňra optiki gözegçilik üçin 0,05 μm Al2O3 poroşok asma bilen ýalpyldy. Metallografiki derňew optiki mikroskop arkaly geçirildi. Nusgalar 10 wt.% Kaliý gidroksid ergini 43 bilen alyndy.
Inkubasiýa edilenden soň, nusgalar fosfat-buferli duzly (PBS) ergini (pH 7.4 ± 0,2) bilen 3 gezek ýuwuldy we biofilmleri düzeltmek üçin 10 sagatlap 2,5% (v / v) glutaraldegid bilen düzedildi. Soňra derejeli seriýallar bilen suwsyzlandyryldy (50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95% we 100% v / v) SEM synlamagy üçin geçirijilik üpjün etmek üçin film. SEM şekilleri her nusganyň üstündäki iň sessiz P. aeruginosa öýjükleri bolan nokatlara gönükdirildi. Himiki elementleri tapmak üçin EDS derňewini ýerine ýetiriň. Zeiss Confocal Laser Scanning Microscope (CLSM) (LSM 710, Zeiss, Germaniýa) çukuryň çuňlugyny ölçemek üçin ulanyldy. Synag böleginiň üstündäki poslama önümleri we biofilmi aýyrmak üçin T4334.4-2000.
Rentgen fotoelektron spektroskopiýa (XPS, ESCALAB250 ýerüsti derňew ulgamy, Termo VG, ABŞ) derňewi, adaty şertlerde –1350 eV ýokary ölçegli spektr, monokromatiki rentgen çeşmesi (1500 eV energiýa we 150 Wt güýji) arkaly amala aşyryldy.
Inkubasiýa edilen nusgalar aýryldy we 15 s45 üçin PBS (pH 7.4 ± 0.2) bilen ýuwaşlyk bilen ýuwuldy. Nusgalarda biofilmleriň bakteriýa ukyplylygyny synlamak üçin biofilmler LIVE / DEAD BacLight bakteriýa ukyplylygy toplumy (Invitrogen, Eugene, OR, ABŞ) iki sany floresan boýag bar. “CLSM” -iň aşagyndaky floresan ýaşyl we gyzyl nokatlar degişlilikde janly we öli öýjükleri aňladýar. Boýamak üçin 3 μl SYTO-9 we 3 μl PI erginini öz içine alýan 1 ml garyndy garaňkylykda otag temperaturasynda (23 oC) 20 minut inkubasiýa edildi. Soňra iki tolkun uzynlygynda (diri öýjükler üçin 488 nm, Nikon CLM, Nikon CLM). 3-D skaner re modeiminde ölçelýär.
Bu makalany nädip getirmeli: Li, H. we başgalar. Deňiz Pseudomonas aeruginosa biofilm.science.Rep deňiz tarapyndan 2707 super dupleks poslamaýan polatdan mikrob poslama.6, 20190;doi: 10.1038 / srep20190 (2016).
Zanotto, F.
Kim, ST, Jang, SH, Li, IS & Park, YS Erkin ýylylygy bejermegiň we azotyň gazy goramakdaky täsiri, super dupleks poslamaýan polatdan ýasalan kebşirleýiş poslama garşylygy.53, 1939–1947 (2011).
Şi, X ..
Luo, H., Dong, CF, Li, XG & Xiao, K. Hloridiň barlygynda dürli pH-nyň gidroksidi erginlerinde 2205 dupleks poslamaýan poladyň elektrokimiki hereketi.
Kiçijik, BJ, Li, JS & Reý, RI Deňiz biofilmleriniň poslama täsiri: gysgaça syn. Elektrokim.Journal.54, 2-7 (2008).


Iş wagty: Iýul-30-2022