Nature.com-a gireniňiz üçin sag boluň. Ulanylýan brauzer wersiýaňyzda CSS-iň çäkli goldawy bar. Iň oňat tejribe üçin täzelenen brauzeri ulanmagy maslahat berýäris (ýa-da Internet Explorer-de gabat geliş tertibini öçüriň). Şol aralykda, dowamly goldawy üpjün etmek üçin sahypany stil we JavaScript-de görkezeris.
Gözenekli kremniniň bölejikleri, makroply bölejikleri almak üçin käbir üýtgeşmeler bilen sol-gel usuly bilen taýýarlandy. Bu bölejikler N-fenilmaleimid-metilwinilisokýanat (PMI) we styren bilen polimer stansiýasy (polimer stansiýa) ) gaplamak bilen gaplandy. Bäş sany peptidden (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leucine enkephalin) hromatografiki öndürijilik ýaly 28 sany peptid garyndysynyň PMP sütüniniň bölünişi bahalandyryldy. , 000 plastinka / m². Işlenip düzülen sütüniň bölüniş öndürijiligini täjirçilik Ascentis Express RP-Amide sütüni bilen deňeşdireniňde, PMP sütüniniň aýralyk işiniň aýralyk netijeliligi we çözgüdi taýdan täjirçilik sütüninden has ýokarydygy syn edildi.
Soňky ýyllarda biofarmasewtika senagaty bazardaky paýyň ep-esli ýokarlanmagy bilen giňelýän dünýä bazaryna öwrüldi. Biofarmasewtika pudagynyň partlaýjy ösüşi bilen 1,2,3, peptidleriň we beloklaryň seljermesi gaty islenýär. Peptid sintezi wagtynda birnäçe hapalar emele gelýär, şeýlelik bilen, gerekli arassalygyň peptidlerini tapmak üçin hromatografiki arassalanmagy talap edýär. Köpçülik spektrometri peptid we belok yzygiderliligi üçin täsirli gural bolsa-da, şeýle nusgalar köpçülik spektrometrine sanjym edilse, aýralyk ideal bolmaz. Bu mesele MS analizinden öň suwuk hromatografiýa (LC) bölünişikleri amala aşyryp, belli bir wagtyň içinde massa spektrometrine girýän analitikleriň sanyny azaldyp biler. Suwuk hromatografiýa (LC) soňky on ýylda ep-esli ösdi we proteomiki derňewde meşhur tehnika öwrüldi 7,8,9,10.
Tersine fazaly suwuk hromatografiýa (RP-LC), oktadekil üýtgedilen kremnini (ODS) stasionar faza hökmünde ulanyp, peptid garyndylaryny arassalamak we bölmek üçin giňden ulanylýar11,12,13. Şeýle-de bolsa, RP stasionar fazalary çylşyrymly gurluşy we amfifil tebigaty üçin zerur bolan polietinler we amfifil häsiýetli polýarlar bilen birleşdirilen polietinler we amfifil häsiýetli polietinler üçin zerur bolan polietinler bilen birleşdirilýär. bu analitikleri saklamak we saklamak16. Multimodal täsirleri üpjün edýän garyşyk re modeimli hromatografiýa, peptidleri, beloklary we beýleki çylşyrymly garyndylary bölmek üçin RP-LC-e alternatiwa bolup biler. Käbir garyşyk re modeim stasionar fazalary taýýarlandy we bu fazalar bilen gaplanan sütünler peptid we belok bölünişikleri üçin ulanyldy17,18,19,20,22.MCL / RLCL / RASLAR polýar we polýar däl toparlaryň bolmagy sebäpli peptid we belok bölünişikleri üçin amatlydyr 22,23,24,25,26,27,28 .Şuňa meňzeş, polýar toparlary bilen polýar interkalasiýa stasionar fazalar, polýar we polýar däl analitikler üçin gowy bölüniş güýjüni we üýtgeşik seçimliligini görkezýär, sebäbi aýralyk analitik we stasionar fazanyň özara täsirine baglydyr.29, 30, 31, 32. Multimodal täsirler. Soňky döwürde Zhangang we ş.m.30 dodekil bilen gutarýan poliamin stasionar fazasyny taýýarlady we uglewodorodlary, antidepressantlary, flawonoidleri, nukleozidleri, estrogenleri we başga-da birnäçe analitikleri üstünlikli böldi. Polýar interkalatoryň hem polýar, hem polýar däl toparlary bar, şonuň üçin gidrofob we gidrofil moietleri bolan peptidleri we beloklary bölmek üçin ulanylyp bilner. RP-Amide sütünleri, ýöne bu sütünler diňe amin 33 derňewi üçin ulanylýar.
Häzirki gözlegde, HSA-nyň peptidleri we tripsin siňdirişlerini bölmek üçin polýar oturdylan stasionar faza (N-fenilmaleimid bilen ýerleşdirilen polistirol) taýýarlanyldy we baha berildi. Stasionar tapgyr aşakdaky strategiýany ulanyp taýýarlandy. Öň neşirimizde berlen tertibe laýyklykda kremniniň bölejikleri, polietilen kislotasy, polietilen kislotasy. magdanyň ululygy. Ikinjisi, fenilmaleimid-metil winil izosýanat sintez edildi we polýar oturdylan stasionar fazany taýýarlamak üçin kremniniň bölejiklerini emele getirmek üçin ulanyldy. Netijede stasionar faza poslamaýan polat sütünine (100 × 1.8 mm id) optimizirlenen gaplama shemasy bilen emele gelýär. bäş peptidden ybarat;. Ascentis Express RP-Amide sütüninden has täsirli bolan PMP sütüninde gowy çözülmeli we täsirli bolmaly.
PEG. eroksid (BPO), HPLC Grade Acetonitril (ACN), Metanol, 2-Propanol we Sigma-Aldrihden (Sent-Luis, MO, ABŞ) satyn alnan aseton.
Karbamid (8 g), polietilen glikol (8 g) we 8 ml 0.01 N sirke kislotasynyň garyndysy 10 minut garyldy, soňra buz sowuk şertlerinde oňa 24 ml TMOS goşuldy. Reaksiýa garyndysy 6 sagatlap 40 ° C gyzdyryldy, soň bolsa 120 ° C-de poslamaýan polat awtoklawda 12 sagat guradyldy. we 12 sagadyň dowamynda 550 ° C-de hasaplandy. Üç partiýa bölejikleriň ululygy, gözenegiň ululygy we ýerüsti köpelişini barlamak üçin taýýarlandy we häsiýetlendirildi.
Silis bölejikleriniň öňünden sintez edilen ligand fenilmaleimid-metilwinilisosýanat (PCMP) bilen ýerüsti üýtgemegi bilen, soň bolsa stiren bilen radial polimerizasiýa bilen polýar topary öz içine alýan birleşme taýýarlandy.Agregatlar we polistirol zynjyrlary üçin stasionar faza. Taýýarlyk prosesi aşakda beýan edilýär.
N-fenilmaleimid (200 mg) we metil winil izosýanat (100 mg) gury toluende eritildi we fenilmaleimid-metil winil izosýanat kopolimerinde 40 ° C guradyldy. 3 sagat.
Guradylan kremniniň bölejikleri (2 g) gury toluene (100 ml) dargadyldy, 500 ml tegelek aşaky flakada 10 minutda garyndy we sonikasiýa edildi. PMCP (10 mg) toluende eritildi we damjanyň üsti bilen reaksiýa çüýşesine damja goşuldy. ) toluene (200 ml) eritildi we katalizator hökmünde 100 µL dibutiltin dilauratynyň gatnaşmagynda 4-gidroksi-TEMPO (2 ml) goşuldy. Garyndy 50 ° C-de 8 sagat garyndy, süzüldi we 50 ° C-de 3 sagat guradyldy.
Stiren (1 ml), benzoýl peroksid BPO (0,5 ml) we TEMPO-PMCP birikdirilen kremniniň bölejikleri (1,5 g) toluende dargadyldy we azot bilen arassalandy. Stiriniň polimerizasiýasy 100 ° C-de 12 sagatlap geçirildi. Netijede önüm metanol bilen ýuwuldy we bir gije 60 ° C-de guradyldy.
Nusgalar 10-3 Torr-dan az galyndy basyşyny almak üçin 1 sagat 393 K derejesinde peseldi. P / P0 = 0.99 degişlilikde basyşda adsorbsirlenen N2 mukdary gözenegiň umumy mukdaryny kesgitlemek üçin ulanyldy. Arealaňaç we baglanan kremniniň bölejikleriniň morfologiýasy skaner elektron mikroskopiýasy (Hitachi High Technologies, Tokio, Japanaponiýa). uglerod lentasy. Q150T tüýdükli örtük ulanyp, nusgalarda altyn örtüldi we nusgalarda 5 nm Au gatlagy goýuldy. Bu pes woltly kömegi ulanyp prosesiň netijeliligini ýokarlandyrýar we däne, sowuk tüýdük bilen üpjün edýär. Termo elektron (Waltham, MA, ABŞ) Flash EA1112 elementar seljeriji ulanyldy. we baglanan kremniniň bölejikleri (hersi 5 mg) 5 ml izopropanolda dargadyldy, 10 minutda sonikasiýa edildi, 5 minut worteksde goýuldy we Mastersizer-iň optiki skameýkasynda ýerleşdirildi. Termogravimetriki derňew minutda 30-dan 800 ° C çenli aralykda 5 ° C derejesinde geçirildi.
Aýna bilen örtülen poslamaýan polatdan ýasalan ölçegli sütünler (100 × 1.8 mm id), Ref-de ulanylýan prosedurany ulanyp, süýümli gaplama usuly bilen gaplandy.31. Poslamaýan polat sütüni (aýna bilen örtülen, 100 × 1.8 mm id), 1 µm fritden ybarat rozetkaly gaplaýjy (Alltech Deerfield, IL, ABŞ) birikdirildi. 1,2 ml metanolda 150 mg stasionar fazany togtadyp, stasionar fazany taýynlaň we 100-e ýetýän sütün bilen üpjün ediň. Metanol. Sütüniň birmeňzeş gaplanmagyny üpjün etmek üçin 10 minut, 80 MP 15 minut we 60 MP 30 minut üçin gaplamak wagtynda iki sany GC sütün sarsdyryjylary bilen (Alltech, Deerfield, IL, ABŞ) mehaniki yrgyldy ulanyldy. Sütüniň içindäki zeper ýetmeginiň öňüni almak üçin sütüni gaplaň we basyşy ýuwaş-ýuwaşdan boşadyň.
LC nasosy (10AD Şimadzu, Japanaponiýa), injektor (Walco (ABŞ) C14 W.05) 50nL sanjym aýlawy, membrananyň degasseri (Şimadzu DGU-14A), UV-VIS kapilýar penjiresi guruldy Specialörite µLC enjam detektory (UV-2075) we aýna bilen örtülen mikrokolonlary ulanyň. keseller (50 μm) azalýan birleşigiň 1/16 rozetkasynda oturdyldy. Maglumat ýygnamak we hromatografiki gaýtadan işlemek Multichro 2000 programma üpjünçiligi arkaly amala aşyryldy. 254 nm-de gözegçilik UV siňdirilmegi üçin synag edildi. Hromatografiki maglumatlar OriginPro8 (Northampton, MA) tarapyndan seljerildi.
Adam serumu, lýofilizlenen poroşok, ≥ 96% (agarose gel elektroforezi) 3 mg tripsin (1,5 mg), 4.0 M karbamid (1 ml) we 0,2 M ammiak bikarbonat (1 ml) bilen garylan 3 mg. Ergin 10 minut garyndy we 37 ° C-den aşakda 6 ° C suwda saklandy.
Peptid garyndylarynyň we HSA tripsin siňdirişleriniň PMP sütünlerinde aýratyn bahalandyryldy. Peptid garyndysynyň we HSA-nyň tripsin siňdirişiniň PMP sütüni bilen bölünişini barlaň we netijeleri Ascentis Express RP-Amide sütüni bilen deňeşdiriň. Nazary plastinka belgisi aşakdaky ýaly hasaplanýar:
Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň we baglanan kremniniň bölejikleriniň SEM şekilleri FIG-de görkezilýär.2 .Salaňaç kremniniň bölejikleriniň (A, B) şekilleri, öňki gözleglerimizden tapawutlylykda, bölejikleriň uzalýan ýa-da tertipsiz simmetriýasyna eýe bolan sferikdigini görkezýär. Baglanan kremniniň bölejikleriniň (C, D) polistirol zynjyrlarynyň örtügi sebäpli bolup bilýän ýalaňaç kremniniň bölejiklerinden has ýumşakdygyny görkezýär.
Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň (A, B) we baglanan kremniniň bölejikleriniň (C, D) elektron mikroskop şekillerini barlamak.
Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň we baglanan kremniniň bölejikleriniň bölejikleriniň paýlanyşy 3-nji suratda görkezilýär. (Ses) bölejikleriň ululygynyň paýlanyş egrileri, himiki üýtgemelerden soň kremniniň bölejikleriniň ululygynyň artandygyny görkezdi (3A-njy surat) .Kilika bölejikleriniň bölejikleriň paýlanyş maglumatlary häzirki okuwdan we öňki barlagdan (0,5) deňeşdirilýär. ) bahasy 3.05 μm (polistirol bilen baglanyşykly kremniniň bölejikleri) 34.Bu partiýa, reaksiýa garyndysyndaky PEG, karbamid, TMOS we sirke kislotasynyň üýtgeýän gatnaşygy sebäpli öňki gözlegimiz bilen deňeşdirilende has dar bölejikleriň paýlanyşyna eýe boldy. PMP fazasynyň bölejikleriniň ululygy, öň öwrenilen polistirol bilen baglanyşykly kremniniň bölejikleri. Silisiýanyň üstünde 7 µm), PMP fazasynda gatlagyň galyňlygy 1,38 mkm.
Bölejikleriň ululygynyň paýlanyşy (A) we ýalaňaç kremniniň bölejikleriniň we gözenegiň ululygynyň paýlanyşy (B).
Häzirki gözlegiň kremniniň bölejikleriniň gözenek ululygy, gözenegiň göwrümi we üstki meýdany 1-nji tablisada (B) berilýär. Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň we baglanan kremniniň bölejikleriniň PSD profilleri 3-nji suratda görkezilýär. Netijeler öňki gözlegimiz bilen deňeşdirilýär. Arealaňaç we baglanan kremniniň bölejikleriniň gözenegiň ululygy 310 we 241-e deňdir. egrilik 3-nji suratda görkezilýär (B) .Şuňa meňzeş görnüşde, himiki üýtgemelerden soň kremniniň bölejikleriniň gözenek mukdary 0,67-den 0,58 sm3 / g-a çenli azaldy. Häzirki wagtda öwrenilen kremniniň bölejikleriniň aýratyn meýdany 116 m2 / g, bu bolsa öňki gözlegimiz bilen deňeşdirilýär (124 m2 / g).
Stasionar fazanyň elementar seljermesiniň netijeleri 2-nji tablisada görkezilýär. Häzirki stasionar fazanyň uglerod ýüklenmegi 6,35% bolup, bu öňki gözlegimiziň (degişlilikde polistirol bilen baglanyşykly kremniniň bölejikleri, degişlilikde 7.93% 35 we 10.21%) 42. Häzirki stasionar fazanyň uglerod ýüklenmesi pes, sebäbi häzirki SP-ni taýýarlamakda, polimenidli polimilimin, poli-polimil. 4) 35%, 2-nji tablisada görkezilişi ýaly, agramyň peselmegi PMP stasionar fazasy bilen barlandy we TGA egrisi 4-nji suratda görkezilýär. TGA egrisi 8,6% agramyny görkezýär, bu uglerodyň ýüklenmegi bilen oňat ylalaşýar (6.35%), sebäbi baglarda diňe C däl, N, O we H hem bar.
Fenilmaleimid-metilwinilisosýanat bagy, kremniniň bölejikleriniň ýerüsti üýtgemegi üçin saýlandy, sebäbi polýar fenilmaleimid toparlary we winilisosýanat toparlary bar. Winil izosýanat toparlary, radikal polimerizasiýa bilen stire bilen täsir edip biler. Ikinji sebäp, analitik stansiýa bilen güýçli täsir etmeýän bir topar goýmakdyr. Adaty pH-de wirtual zarýad ýok. Stasionar fazanyň polýarlygy iň oňat mukdarda stiren we erkin radikal polimerizasiýa reaksiýa wagty bilen dolandyrylyp bilner. Reaksiýanyň soňky ädimi (erkin radikal polimerizasiýa) möhüm we stasionar fazanyň polýarlygyny üýtgedip biler. Stasionar fazalaryň uglerod ýüklenişini we stasionar fazalaryň uglerod ýüklenişini ýokarlandyrmak üçin stasionar fazanyň uglerodynyň köpelmegi we stasionar fazanyň uglerodynyň ýokarlanmagy bilen syn edildi. Stironyň dürli uglerod ýükleri bar. Gaýtadan, bu stasionar fazalary poslamaýan polat sütünlerine ýükläň we hromatografiki öndürijiligini barlaň (seçimliligi, çözgüdi, N bahasy we ş.m.). Bu synaglaryň esasynda gözegçilik edilýän polýarlygy we gowy analitik saklanmagyny üpjün etmek üçin PMP stasionar fazasyny taýýarlamak üçin optimal formula saýlandy.
Bäş sany peptid garyndysy (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leýsin enkephalin) ykjam faza ulanyp PMP sütüni bilen baha berildi;60/40 (v / v) asetonitril / suw (0,1% TFA) 80 μL / min akym tizliginde. Iň amatly elitasiýa şertlerinde, sütüniň teoretiki plastinka belgisi (100 × 1.8 mm id) 20,000 ± 100 (200,000 plastinka / m²). 3-nji tablisa üç PMP sütüninde N bahalaryny görkezýär, 5 PMP sütüninde hromatogrammalar görkezilýär. bir minut, N bahalary gaty gowy boldy, sütün üçin 13,500 ± 330 (100 × 1.8 mm id), 135,000 plastinka / m (5B surat) gabat gelýär. Üç sany birmeňzeş sütün (100 × 1.8 mm id) köpelişini barlamak üçin üç dürli PMP stasionar fazasy bilen gaplandy. Her sütün üçin analitik konsentrasiýasy, iň ýokary elitasiýa şertleri we teoretiki plitalaryň sany. 4-nji tablisada. PMP sütüniniň köpelmegi 3-nji tablisada görkezilişi ýaly gaty pes% RSD bahalary bilen gowy baglanyşýar.
PMP sütüninde (B) we Ascentis Express RP-Amide sütüninde (A) peptid garyndysynyň bölünişi;ykjam faza 60/40 ACN / H2O (TFA 0,1%), PMP sütün ölçegleri (100 × 1.8 mm id);analitiki Birleşmeleriň elitasiýa tertibi: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) we 5 (leýsin) kislotaly enkefalin).
PMP sütüni (100 × 1.8 mm id) ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýada adam serum albumininiň triptiki siňdirişleriniň bölünmegi üçin baha berildi. 6-njy suratda görkezilen hromatogramma, nusganyň gowy bölünendigini we çözgüdiniň gaty gowydygyny görkezýär. HSA siňdirişindäki her pikiň bölüniş netijeliligi hasaplandy we bahalar 5-nji tablisada getirildi.
PMP sütüninde HSA-nyň triptiki siňdirişi (100 × 1.8 mm id) aýryldy;akym tizligi (100 µL / min), ykjam faza 60/40 asetonitril / 0,1% TFA bilen suw.
bu ýerde L sütüniň uzynlygy, η ykjam fazanyň ýapyşyklygy, ΔP sütüniň arka basyşy, u bolsa ykjam fazanyň çyzykly tizligi. PMP sütüniniň geçirijiligi 2,5 × 10-14 m2, akym tizligi 25 μL / min, 60/40 v / v ACN / suw ulanyldy. PMP sütüniniň geçirijiligi 100 × 1.8 mm. gözenekli bölejik bölejikler: 1,3 μm bölejikler üçin 1,7 × 10-15, 1,7 mk bölejikler üçin 3,1 × 10-15, 2,6 μm bölejikler üçin 2,5 × 10-14 m2 5 μm bölejikler üçin 43. Şonuň üçin PMP fazasynyň geçirijiligi 5 μm ýadro gabyk bölejiklerine meňzeýär.
bu ýerde Wx hloroform bilen gaplanan sütüniň agramy, Wy metanol bilen gaplanan sütüniň agramy, ρ bolsa çözüjiniň dykyzlygy. Metanolyň dykyzlygy (ρ = 0.7866) we hloroform (ρ = 1.484) .SILICA PARTICLES-C18 sütünleriniň umumy gözenegi (100 × 1.8 mm id) karbamid ligandalarynyň bolmagy stasionar fazanyň geçirijiligini peseldýändigini aňladýar. Beýleki tarapdan, PMP sütüniniň umumy gözenekliligi (100 × 1.8 mm id) 0.60. PMP sütünleriniň geçirijiligi C18 baglanan kremniniň bölejikleri bilen gaplanan sütünlerden has pes, sebäbi C18 görnüşli stasionar fazalarda C18 ligandalar, kremniý polýar polýus polimerleri, stasionar fazalarda bolsa, kremniniň polýar polimerleri bolýar. Adaty synagda sütüniň gözenegi aşakdaky ýaly hasaplanýar:
7A, B suratda PMP sütüni (100 × 1.8 mm id) we şol bir elitasiýa şertlerini (ýagny, 60/40 ACN / H2O we 0,1% TFA) ulanyp, Ascentis Express RP-Amide sütüni (100 × 1.8 mm id) görkezilýär.van Deemter dildüwşügi.Saýlanan peptid garyndylary (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) 20 µL / iki sütün üçin iň pes akym tizligi 800 µL / min. Degişlilikde 3,9 mkm. HETP bahalary, PMP sütüniniň (100 × 1.8 mm id) bölüniş netijeliliginiň täjirçilik taýdan elýeterli Ascentis Express RP-Amide sütüninden (100 × 1.8 mm id) has gowudygyny görkezýär. 7-nji suratda (A) Wan Deemter çyzgysy, artýan akymlar bilen deňeşdirilende N bahasynyň peselmegi, PMP-iň ýokary bölüniş effekti. häzirki işde ulanylýan şekil, ululyk we sütün gaplamak proseduralary34.
(A) 60/40 ACN / H2O-da 0,1% TFA bilen PMP sütünini (100 × 1.8 mm id) ulanyp, van Deemter sýu ploteti (100 × 1.8 mm ID)
Polýar görnüşli polistirol stasionar fazasy ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýada sintetiki peptid garyndylaryny we adam serum albumininiň (HAS) tripsin siňdirişlerini bölmek üçin taýýarlanyldy we bahalandyryldy. Peptid garyndylary üçin PMP sütünleriniň hromatografiki öndürijiligi aýralyk netijeliliginde we çözgüdinde ajaýypdyr. Sepokary aýralyk netijeliliginden başga-da, ýokary akym tizliginde pes sütün arka basyşy bu stasionar fazanyň ýene bir artykmaçlygydyr. PP sütünleri oňat köpeliş görkezýär we peptid garyndylaryny we dürli beloklaryň tripsin siňdirilişini seljermek üçin ulanylyp bilner. Bu sütüni tebigy önümleri bölmek üçin ulanmagy maksat edinýäris, suwuk hromatografiýa üçin PMP sütünleri bölüner.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. Tersine faza hromatografiýasy boýunça peptid bölüniş ulgamlary boýunça gözleg I bölüm: Sütüniň häsiýetnamasy protokolynyň ösüşi.J.Hromatografiýa.1603, 113–129.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
Gomez, B. we başgalar. Ectokanç keselleri bejermek üçin döredilen kämilleşdirilen işjeň peptidler. Biotehnologiýa. Ösüş.36 (2), 415-429.https: //doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Wlieghe, P., Lisowski, W.
Sie, F., Smith, RD & Shen, Y. Ösen proteomiki suwuk hromatografiýa.J.Hromatografiýa.A 1261, 78–90 (2012).
Liu, W. we başgalar. Ösdürilen suwuk hromatografiýa-köpçülik spektrometri giň maksatly metabolomika we proteomics.anus.Chim.Acta 1069, 89–97 (2019) birleşmäge mümkinçilik berýär.
Çesnut, SM & Salisbury, JJ UHPLC-iň neşe serişdeleriniň ösüşindäki roly.30-njy sentýabr (8), 1183-1190 (2007).
Wu, N. & Klauzen, AM Çalt bölünmek üçin ultra ýokary basyşly suwuk hromatografiýanyň esasy we amaly taraplary.J.30-njy sentýabr (8), 1167-1182.https: //doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. Ultra ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýany neşe serişdeleriniň ösüşinde ulanmak.J.Hromatografiýa.1119 (1-2), 140-146.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. we başgalar. Enterowiruslary netijeli arassalamak üçin nebitdäki suwda ýokary içerki faza emulsiýalaryndan taýýarlanan monolit makroporoz gidrogeller. Himiýa.Britain.J.401, 126051 (2020).
Şi, Y .., Sýan, R., Horwat, C. & Wilkins, JA Proteomikada suwuk hromatografiýanyň roly.Hromatografiýa.A 1053 (1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.L.Dermanhana.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012).
Gilar, M., Oliwowa, P., Dali, AE & Gebler, JC Birinji we ikinji aýralyk ölçeglerinde dürli pH bahalaryny ulanyp, RP-RP-HPLC ulgamyny ulanyp, peptidleriň iki ölçegli bölünişi.J.28-nji sentýabr (14), 1694-1703 (2005).
Feletti, S. we başgalar. C18 sub-2 μm doly we ýüzleý gözenekli bölejikler bilen gaplanan ýokary netijelilikli hromatografiki sütünleriň köpçülikleýin geçiriş aýratynlyklary we kinetiki öndürijiligi derňeldi.J.Ylym.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. we başgalar Ösümlik bioaktiw peptidleri izolirlemekde, kesgitlemekde we tassyklamakda soňky tendensiýalar we analitiki kynçylyklar. Himiki.410 (15), 3425–3444.https: //doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
Mueller, JB we başgalar. Durmuş şalygynyň proteomiki peýza .y. 582 (7813), 592-596.https: //doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. we başgalar. Terapewtiki peptidleri taýýarlaýjy suwuk hromatografiýa arkaly gaýtadan işlemek. Molekula (Bazel, Şweýsariýa) 26 (15), 4688 (2021).
Yangaň, Y .. & Geng, X. Garyşyk tertipli hromatografiýa we biopolimerlere ulanylyşy.J.Hromatografiýa.A 1218 (49), 8813–8825 (2011).
Zhao, G., Dong, X.-Y. & Sun, Y. Garyşyk re proteinimli belok hromatografiýasy üçin Ligands: ýörelge, häsiýetnama we dizaýn.J.Biotehnologiýa.144 (1), 3-11 (2009).