Nature.com-a gireniňiz üçin sag boluň. Ulanylýan brauzer wersiýaňyzda CSS-iň çäkli goldawy bar. Iň oňat tejribe üçin täzelenen brauzeri ulanmagy maslahat berýäris (ýa-da Internet Explorer-de gabat geliş tertibini öçüriň). Şol aralykda, dowamly goldawy üpjün etmek üçin sahypany stil we JavaScript-de görkezeris.
Gözenekli kremniniň bölejikleri, makroply bölejikleri almak üçin käbir üýtgeşmeler bilen sol-gel usuly bilen taýýarlandy. Bu bölejikler N-fenilmaleimid-metilwinilisokýanat (PMI) we styren bilen pol-stasionar polosirlenme stasionar polosirlenme polinir stenirli polýar . peptid garyndysynyň 280,000 plastinka / m² ýokarydyr. Ösen sütüniň bölüniş öndürijiligini täjirçilik Ascentis Express RP-Amide sütüni bilen deňeşdireniňde, PMP sütüniniň aýralyk işiniň aýralyk netijeliligi we çözgüdi taýdan täjirçilik sütüninden has ýokarydygy syn edildi.
Soňky ýyllarda biofarmasewtika pudagy bazaryň paýynyň ep-esli ýokarlanmagy bilen giňelýän dünýä bazaryna öwrüldi. Biofarmasewtika pudagynyň partlaýjy ösüşi bilen 1,2,3, peptidleriň we beloklaryň seljermesi gaty islenýär. Peptid sintezi wagtynda birnäçe hapalar emele gelýär, şeýlelik bilen gerekli arassalygyň peptidlerini almak üçin öýjükleriň hromatografiki arassalanmagyny talap edýär. Bir nusgada ýüze çykarylýan görnüşler. Köpçülik spektrometri peptid we belok yzygiderliligi üçin täsirli gural bolsa-da, şular ýaly nusgalar köpçülik spektrometrine sanjym edilse, bölünişik ideal bolmaz. Bu mesele MS analizinden öň suwuk hromatografiýa (LC) bölünişikleri azaltmak arkaly azaldylyp bilner. bu analitikleri jemlemek we MS kesgitleme duýgurlygyny ýokarlandyrmak. Suwuk hromatografiýa (LC) soňky on ýylda ep-esli ösdi we proteomiki derňewde meşhur tehnika boldy 7,8,9,10.
Tersine fazaly suwuk hromatografiýa (RP-LC), oktadekil üýtgedilen kremnini (ODS) stasionar faza hökmünde ulanyp, peptid garyndylaryny arassalamak we bölmek üçin giňden ulanylýar11,12,13. Şeýle-de bolsa, RP stasionar fazalary peptidleriň we beloklaryň kanagatlanarly bölünmegini üpjün etmeýär we amfifil häsiýetli polýarlar, polýar däl analizler, polýar däl analizler. Bu analitikler bilen täsirleşmek we saklamak üçin moietler16. Multimodal täsirleri üpjün edýän garyşyk rejeli hromatografiýa, peptidleri, beloklary we beýleki çylşyrymly garyndylary bölmek üçin RP-LC alternatiwasy bolup biler. Käbir garyşyk re modeim stasionar fazalary taýýarlandy we bu fazalar bilen gaplanan sütünler peptid we belok bölünişleri üçin ulanyldy17,18,19,20,20,2 HILIC / RPLC, polýar interkalasiýa / RPLC) polýar we polýar däl toparlaryň bolmagy sebäpli peptid we belok bölünişikleri üçin amatlydyr 22,23,24,25,26,27,28 .Şuňa meňzeş, polýar toparlar bilen polýar biri-birine bagly stasionar fazalar polýar we polýar däl analitikleriň arasyndaky üýtgeşiklige baglydyr. 29, 30, 31, 32. Multimodal täsirler. Soňky döwürde Zhangang we ş.m. 30 dodekil bilen gutarýan poliamin stasionar fazasyny taýýarlady we uglewodorodlary, antidepressantlary, flawonoidleri, nukleozidleri, estrogenleri we başga-da birnäçe analitikleri üstünlikli bölüp aldy. Polýar interkalatoryň polýar we polýar däl toparlary bar, şonuň üçin gidrofobiki we gidrofil moietleri bolan peptidleri we beloklary bölmek üçin ulanylyp bilner. ady Ascentis Express RP-Amide sütünleri, ýöne bu sütünler diňe amin 33 derňewi üçin ulanylýar.
Häzirki gözlegde, HSA-nyň peptidleri we tripsin siňdirişlerini bölmek üçin polýar oturdylan stasionar faza (N-fenilmaleimid bilen ýerleşdirilen polistirol) taýýarlanyldy we baha berildi. Stasionar tapgyr aşakdaky strategiýany ulanyp taýýarlandy. Önümçilik protokolyna käbir üýtgeşmeler bilen kremniý bölejikleri taýýarlanyldy. Uly gözenek ululygyndaky kremniniň bölejikleri. Ikinjisi, fenilmaleimid-metil winil izosýanat sintez edildi we polýar oturdylan stasionar fazany taýýarlamak üçin kremniniň bölejiklerini emele getirmek üçin ulanyldy. Netijede stasionar faza poslamaýan polat sütünine (100 × 1.8 mm id) optimallaşdyrylan gaplama shemasy bilen emele gelýär. sütün. Bäş peptidden ybarat peptid garyndylarynyň gaplanan sütün bölünişine baha beriň; . peptidleriň we beloklaryň, Ascentis Express RP-Amide sütüninden has täsirli PMP sütüninde oňat çözülendigi we täsirli bolandygy syn edildi.
PEG. 4-Gidroksi-TEMPO, Benzoýl Peroksid (BPO), HPLC Grade Acetonitril (ACN), Metanol, 2-Propanol we Sigma-Aldrihden (Sent-Luis, MO, ABŞ) satyn alnan aseton.
Karbamid (8 g), polietilen glikol (8 g) we 8 ml 0.01 N sirke kislotasynyň garyndysy 10 minut garyndy we buz-sowuk şertlerde oňa 24 ml TMOS goşuldy. Reaksiýa garyndysy 6 sagatlap 40 ° C gyzdyryldy, soň bolsa 120 ° C-de poslamaýan polat awtoklawda 8 sagat guradyldy. Peçde tekiz ýer we 12 sagat 550 ° C derejesinde hasaplanylýar. Üç partiýa bölejikleriň ululygy, gözenegiň ululygy we üstki meýdanynda köpelişini barlamak üçin taýýarlandy we häsiýetlendirildi.
Silis bölejikleriniň öňünden sintez edilen ligand fenilmaleimid-metilwinilisosýanat (PCMP) bilen ýerüsti üýtgemegi bilen, soň bolsa stiren bilen radial polimerizasiýa bilen polýar topary öz içine alýan birleşme taýýarlandy. Agregatlar we polistirol zynjyrlary üçin stasionar faza. Taýýarlyk prosesi aşakda beýan edilýär.
N-fenilmaleimid (200 mg) we metil winil izosýanat (100 mg) gury toluende eritildi we fenilmaleimid-metil winil izosýanat kopolimerinde 60 sagatda guradyldy. 40 ° C-de 3 sagatlap.
Guradylan kremniniň bölejikleri (2 g) gury toluene (100 ml) dargadyldy, 500 ml tegelek aşaky flakada 10 minutda garyndy we sonikasiýa edildi. PMCP (10 mg) toluende eritildi we damjanyň üsti bilen reaksiýa çüýşesine damja goşuldy. Garyndy 100 ° C-de 8 sagatlap ýuwuldy we süzüldi. kremniniň bölejikleri (100 g) toluanda (200 ml) eritildi we katalizator hökmünde 100 µL dibutiltin dilauratynyň gatnaşmagynda 4-gidroksi-TEMPO (2 ml) goşuldy. Garyndy 50 ° C-de 8 sagat garyndy, süzüldi we 50 ° C-de 3 sagat guradyldy.
Stiren (1 ml), benzoýl peroksid BPO (0,5 ml) we TEMPO-PMCP birikdirilen kremniniň bölejikleri (1,5 g) toluende dargadyldy we azot bilen arassalandy. Stiriniň polimerizasiýasy 100 ° C-de 12 sagatlap geçirildi. Netijede önüm metanol bilen ýuwuldy we bir gije 60 ° C-de guradyldy.
Nusgalar 10-3 Torr-dan az galyndy basyşyny almak üçin 1 sagat 393 K derejesinde peseldi. P / P0 = 0.99 degişlilikde basyşda adsorbsirlenen N2 mukdary gözenegiň umumy mukdaryny kesgitlemek üçin ulanyldy. Arealaňaç we baglanan kremniniň bölejikleriniň morfologiýasy skanirlenen elektron mikroskopiýa (Hitachi High Technologies, Tokio, Japanaponiýa). ýelimlenýän uglerod lentasy bilen sütün. Nusgalarda Q150T tüýdükli örtük ulanylyp, 5 nm Au gatlagy goýuldy. Bu pes naprýa .eniýe arkaly prosesiň netijeliligini ýokarlandyrýar we däne, sowuk tüýdük berýär. Termo Elektron (Waltham, MA, ABŞ) Flash EA1112 elementar analizator ulanyldy bölejikleriň ululygynyň paýlanyşy. Akasalan kremniniň bölejikleri we baglanan kremniniň bölejikleri (hersi 5 mg) 5 ml izopropanolda dargadyldy, 10 minut sonikasiýa edildi, 5 minut worteks edildi we Mastersizeriň optiki skameýkasynda ýerleşdirildi. Termogravimetriki derňew minutda 30 ° 800 ° C aralygynda 5 ° C derejesinde geçirildi.
Aýna bilen örtülen poslamaýan polatdan ýasalan ölçegli sütünler (100 × 1.8 mm id), Ref-de ulanylýan prosedurany ulanyp, süýümli gaplama usuly bilen gaplandy. 31. Poslamaýan polat sütüni (aýna bilen örtülen, 100 × 1.8 mm id), 1 µm friti öz içine alýan rozetka gaplaýjy (Alltech Deerfield, IL, ABŞ) birikdirildi. 1,2 ml metanolda 150 mg stasionar fazany togtadyp, stasionar fazany taýýarlaň. Sütüniň birmeňzeş gaplanmagyny üpjün etmek üçin 100 sany MP 10 minut, 80 MP 15 minut we 60 MP 30 minutlyk basyş. Gaplamak wagtynda, iki sany GC sütün sarsdyryjylary bilen mehaniki yrgyldy ulanyldy (Alltech, Deerfield, IL, ABŞ).
LC nasosy (10AD Şimadzu, Japanaponiýa), injektor (Walco (ABŞ) C14 W.05) 50nL sanjym aýlawy, membrananyň degasseri (Şimadzu DGU-14A), UV-VIS kapilýar penjiresi guruldy Specialörite µLC enjam detektory (UV-2075) we aýna bilen örtülen mikrokolonlary ulanyň. 365 we peseldýän kärdeşler arkalaşyklary (50 μm) azalýan birleşigiň 1/16 ″ rozetkasynda oturdyldy Maglumat ýygnamak we hromatografiki gaýtadan işlemek Multichro 2000 programma üpjünçiligi arkaly geçirildi, UV sorulmagy üçin Hromatografiki maglumatlar seljerildi.
Adam serumu, lýofilizlenen poroşok, ≥ 96% (agarose gel elektroforezi) 3 mg tripsin (1,5 mg), 4.0 M karbamid (1 ml) we 0,2 M ammiak bikarbonat (1 ml) bilen garylan 3 mg. Ergin 10 minut garyndy we 37 ° C-den aşakda 6 ° C suwda saklandy.
Peptid garyndylarynyň we HSA tripsin siňdirişleriniň PMP sütünlerinde aýratyn bahalandyryldy. Peptid garyndysynyň we HSA-nyň tripsin siňdirişiniň PMP sütüni bilen bölünişini barlaň we netijeleri Ascentis Express RP-Amide sütüni bilen deňeşdiriň. Nazary plastinka belgisi aşakdaky ýaly hasaplanýar:
Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň we baglanan kremniniň bölejikleriniň SEM şekilleri FIG-de görkezilýär. 2 .Salaňaç kremniniň bölejikleriniň (A, B) şekilleri, öňki gözleglerimizden tapawutlylykda, bölejikleriň uzalýan ýa-da tertipsiz simmetriýa bolan sferikdigini görkezýär. Baglanan kremniniň bölejikleriniň (C, D) polisirol zynjyrlarynyň örtügi sebäpli bolup bilýän ýalaňaç kremniniň bölejiklerinden has ýumşakdygyny görkezýär.
Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň (A, B) we baglanan kremniniň bölejikleriniň (C, D) elektron mikroskop şekillerini barlamak.
Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň we baglanan kremniniň bölejikleriniň bölejikleriniň paýlanyşy 3-nji suratda görkezilýär. (Ses) bölejikleriň ululygynyň paýlanyş egrileri himiki üýtgemeden soň kremniniň bölejikleriniň ululygynyň artandygyny görkezdi (3A-njy surat) .Klimat bölejikleriniň bölejikleriniň paýlanyş maglumatlary häzirki okuwdan we öňki barlagdan 1-nji tablisa (A) bilen deňeşdirilýär. mahabat (0,5) bahasy 3.05 μm (polistirol bilen baglanyşykly kremniniň bölejikleri) 34. Bu partiýa, reaksiýa garyndysyndaky PEG, karbamid, TMOS we sirkelik kislotanyň üýtgeýän gatnaşygy sebäpli öňki gözlegimiz bilen deňeşdirilende has dar bölejik paýlanyşyna eýe boldy. PMP fazasynyň bölejikleriniň ululygy diňe polistirol bilen baglanyşykly kremniniň bölejikleri bilen öwrenilýär. kremniniň üstünde polistirol gatlagyny (0.97 µm) goýdy, PMP fazasynda gatlagyň galyňlygy 1,38 mkm boldy.
Bölejikleriň ululygynyň paýlanyşy (A) we ýalaňaç kremniniň bölejikleriniň we gözenegiň ululygynyň paýlanyşy (B).
Häzirki gözlegiň kremniniň bölejikleriniň gözenegiň ululygy, gözenegiň göwrümi we üstki meýdany 1-nji tablisa (B) berilýär. Arealaňaç kremniniň bölejikleriniň we baglanan kremniniň bölejikleriniň PSD profilleri 3-nji suratda görkezilýär. Netijeler öňki gözlegimiz bilen deňeşdirilýär. Arealaňaç we baglanan kremniniň bölejikleriniň gözenegiň ululygy 310 we 241-e deňdir. egriniň üýtgemegi 3-nji suratda görkezilýär (B) .Şuňa meňzeşlikde, himiki üýtgemelerden soň kremniniň bölejikleriniň gözenek mukdary 0,67-den 0,58 sm3 / g çenli azaldy. Häzirki wagtda öwrenilen kremniniň bölejikleriniň aýratyn meýdany 116 m2 / g, bu öňki gözlegimiz bilen deňeşdirilende (124 m2 / g). 1-nji tablisa (g) m2 / g himiki üýtgemeden soň.
Stasionar fazanyň elementar seljermesiniň netijeleri 2-nji tablisada görkezilýär. Häzirki stasionar fazanyň uglerodyň ýüklenmegi 6,35% bolup, bu öňki gözlegimiziň (degişlilikde polistirol bilen baglanyşykly kremniniň bölejikleri, degişlilikde 7.93% 35 we 10.21%) 42 bolýar. fenilmaleimid-metilwinilisosýanat (PCMP) we 4-gidroksi-TEMPO ulanyldy. Häzirki stasionar fazanyň azot agramy degişlilikde 2,17%, öňki barlaglarda azotyň agramy bilen deňeşdirilende 0,21% we 0,85% deňeşdirilende. 2.
Fenilmaleimid-metilwinilisosýanat bagy, kremniniň bölejikleriniň ýerüsti üýtgemegi üçin saýlandy, sebäbi polýar fenilmaleimid toparlary we winilisosýanat toparlary bar. Winil izosýanat toparlary, radikal polimerizasiýa arkaly stirene täsir edip biler. Ikinji sebäp, analitik we orta stansiýa bilen ortaça täsirleşýän topara girmekdir. fenilmaleimidiň adaty pH-de wirtual zarýady ýok. Stasionar fazanyň polýarlygy iň oňat mukdarda stiren we erkin radikal polimerizasiýa reaksiýa wagty bilen dolandyrylyp bilner. Reaksiýanyň soňky ädimi (erkin radikal polimerizasiýa) möhüm we stasionar fazanyň kömür ýüklenişini barlamak üçin elementar seljerme geçirildi. Stasionar faza we tersine. Dürli konsentrasiýa bilen taýýarlanan SPP-lerde dürli uglerod ýükleri bar. Galyberse-de, bu stasionar fazalary poslamaýan polat sütünlerine ýükläň we hromatografiki öndürijiligini barlaň (saýlama, çözgüt, N bahasy we ş.m.).
Bäş sany peptid garyndysy (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, leýsin enkephalin) ykjam faza ulanyp PMP sütüni bilen baha berildi; 60/40 (v / v) asetonitril / suw (0,1% TFA) 80 μL / min akym tizliginde. Iň amatly elitasiýa şertlerinde, sütüniň başyna teoretiki plastinka belgisi (100 × 1.8 mm id) 20,000 ± 100 (200,000 plastinka / m²). 3-nji tablisa üç PMP sütüninde N bahalary berýär we 5 PMF sütüninde hromatogrammalar görkezilýär. peptidler bir minutyň içinde çykaryldy, N bahalary gaty gowy, sütün üçin 13,500 ± 330 (100 × 1.8 mm id), 135,000 plastinka / m (5B surat) gabat gelýär. Üç sany birmeňzeş sütün (100 × 1.8 mm id) köpelişini barlamak üçin üç dürli PMP stasionar fazasy bilen dolduryldy. PMP sütünleri üçin köpeliş maglumatlary 4-nji tablisada görkezilýär. PMP sütüniniň köpelmegi 3-nji tablisada görkezilişi ýaly gaty pes% RSD bahalary bilen gowy baglanyşýar.
PMP sütüninde (B) we Ascentis Express RP-Amide sütüninde (A) peptid garyndysynyň bölünişi; ykjam faza 60/40 ACN / H2O (TFA 0,1%), PMP sütün ölçegleri (100 × 1.8 mm id); analitiki Birleşmeleriň elitasiýa tertibi: 1 (Gly-Tyr), 2 (Gly-Leu-Tyr), 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg), 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) we 5 (leýsin) kislotaly enkefalin).
PMP sütüni (100 × 1.8 mm id) ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýada adam serum albumininiň triptiki siňdirişleriniň bölünmegi üçin baha berildi. 6-njy suratda görkezilen hromatogramma, nusganyň gowy bölünendigini we çözgüdiniň gaty gowydygyny görkezýär. HSA siňdirişleri 100 µL / min akym tizligi bilen seljerildi, ykjam faza 70/30 asetonitril / suwda bölünýär we 6% TFA.As görkezilýär. 17 peptide. HSA siňdirişindäki her pikiň bölüniş netijeliligi hasaplandy we bahalar 5-nji tablisada getirildi.
PMP sütüninde HSA-nyň triptiki siňdirişi (100 × 1.8 mm id) aýryldy; akym tizligi (100 µL / min), ykjam faza 60/40 asetonitril / 0,1% TFA bilen suw.
bu ýerde L sütüniň uzynlygy, η ykjam fazanyň ýapyşygy, ΔP sütüniň arka basyşy, u bolsa ykjam fazanyň çyzykly tizligi. PMP sütüniniň geçirijiligi 2,5 × 10-14 m2, akym tizligi 25 μL / min, 60/40 v / v ACN / suw ulanyldy. PMP sütüniniň geçirijiligi 100 × 1.8 mm. ýüzleý gözenekli bölejikler bilen gaplanan sütün: 1,3 μm bölejikler üçin 1,7 × 10-15, 1,7 μm bölejikler üçin 3,1 × 10-15, 2,6 μm bölejikler üçin 2,5 × 10-14 m2 5 μm bölejikler üçin 43. Şonuň üçin PMP fazasynyň geçirijiligi 5 μm ýadro gabyk bölejiklerine meňzeýär.
bu ýerde Wx hloroform bilen gaplanan sütüniň agramy, Wy metanol bilen gaplanan sütüniň agramy, ρ bolsa çözüjiniň dykyzlygy. Metanolyň dykyzlygy (ρ = 0.7866) we hloroform (ρ = 1.484) .SILICA PARTICLES-C18 sütünleriniň umumy gözenekleri (100 × 1.8 mm ID) degişlilikde karbamid ligandalarynyň bolmagy stasionar fazanyň geçirijiligini peseldýändigini aňladýar. Beýleki tarapdan, PMP sütüniniň umumy gözenekliligi (100 × 1.8 mm id) 0.60. töwereginde has galyň polimer gatlagy emele gelýär. Adaty synagda sütüniň gözenekliligi şeýle hasaplanýar:
7A, B suratda PMP sütüni (100 × 1.8 mm id) we şol bir elitasiýa şertlerini (ýagny, 60/40 ACN / H2O we 0,1% TFA) ulanyp, Ascentis Express RP-Amide sütüni (100 × 1.8 mm id) görkezilýär. van Deemter dildüwşügi. Saýlanan peptid garyndylary (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) 20 µL / iki sütün üçin iň pes akym tizligi 800 µL / min. HETP bahalary, PMP sütüniniň (100 × 1.8 mm id) bölüniş netijeliliginiň täjirçilik taýdan elýeterli Ascentis Express RP-Amide sütüninden (100 × 1.8 mm id) has gowudygyny görkezýär. 7-nji suratdaky (A) Wan Deemter çyzgysy, ýokarlanýan akym bilen deňeşdirilende N bahasynyň peselmegi, 100 mm ýokarlanmak bilen deňeşdirilende. RP-Amide sütüni, häzirki işde ulanylýan bölejikleriň şekiliniň, ululygynyň we çylşyrymly sütün gaplaýyş amallarynyň gowulaşmagyna esaslanýar34.
(A) 60/40 ACN / H2O-da 0,1% TFA bilen PMP sütünini (100 × 1.8 mm id) ulanyp, van Deemter sýu ploteti (100 × 1.8 mm ID)
Polýar görnüşli polistirol stasionar fazasy ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýada sintetiki peptid garyndylaryny we adam serum albumininiň (HAS) tripsin siňdirişlerini bölmek üçin taýýarlandy we baha berildi. Peptid garyndylary üçin PMP sütünleriniň hromatografiki öndürijiligi aýralyk netijeliligi we çözgüdi boýunça ajaýyp. çylşyrymly sütün gaplamasy. Aýrylyşmagyň netijeliligine goşmaça, ýokary akym tizliginde pes sütün arka basyşy bu stasionar fazanyň ýene bir artykmaçlygydyr. PP sütünleri oňat köpelmegi görkezýär we dürli beloklaryň peptid garyndylaryny we tripsin siňdirilişini seljermek üçin ulanylyp bilner. Bu sütüni tebigy önümleriň bölünmegi üçin ulanarys, dermanlyk ösümliklerden bioaktiw birleşmeler, şeýle hem suwuk hromatografiýa. antikorlary.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, P. Tersine faza hromatografiýasy boýunça peptid bölüniş ulgamlary boýunça gözleg I bölüm: Sütüniň häsiýetnamasy protokolynyň ösüşi.J. Hromatografiýa.1603, 113–129.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
Gomez, B. we başgalar. Ectokanç keselleri bejermek üçin döredilen kämilleşdirilen işjeň peptidler. Biotehnologiýa. Ösüş.36 (2), 415-429.https: //doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Wlieghe, P., Lisowski, W.
Sie, F., Smith, RD & Shen, Y. Ösen proteomiki suwuk hromatografiýa.J. Hromatografiýa.A 1261, 78–90 (2012).
Liu, W. we başgalar. Ösdürilen suwuk hromatografiýa-köpçülik spektrometri giň maksatly metabolomika we proteomics.anus.Chim.Acta 1069, 89–97 (2019) birleşmäge mümkinçilik berýär.
Çesnut, SM & Salisbury, JJ UHPLC-iň neşe serişdeleriniň ösüşindäki roly. 30-njy sentýabr (8), 1183-1190 (2007).
Wu, N. & Klauzen, AM Çalt bölünmek üçin ultra ýokary basyşly suwuk hromatografiýanyň esasy we amaly taraplary.J. 30-njy sentýabr (8), 1167-1182.https: //doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. Ultra ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýany neşe serişdeleriniň ösüşinde ulanmak.J. Hromatografiýa.1119 (1-2), 140-146.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
Gu, H. we başgalar. Enterowiruslary netijeli arassalamak üçin nebitdäki suwda ýokary içerki faza emulsiýalaryndan taýýarlanan monolit makroporoz gidrogeller. Himiýa.Britain.J. 401, 126051 (2020).
Şi, Y .., Sýan, R., Horwat, C. & Wilkins, JA Proteomikada suwuk hromatografiýanyň roly. Hromatografiýa.A 1053 (1-2), 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.L. Dermanhana.Biomedical Science.anus.69, 9-27 (2012).
Gilar, M., Oliwowa, P., Dali, AE & Gebler, JC Birinji we ikinji aýralyk ölçeglerinde dürli pH bahalaryny ulanyp, RP-RP-HPLC ulgamyny ulanyp, peptidleriň iki ölçegli bölünişi.J. 28-nji sentýabr (14), 1694-1703 (2005).
Feletti, S. we başgalar. C18 sub-2 μm doly we ýüzleý gözenekli bölejikler bilen gaplanan ýokary netijelilikli hromatografiki sütünleriň köpçülikleýin geçiriş aýratynlyklary we kinetiki öndürijiligi derňeldi.J. Ylym.43 (9-10), 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. we başgalar Ösümlik bioaktiw peptidleri izolirlemekde, kesgitlemekde we tassyklamakda soňky tendensiýalar we analitiki kynçylyklar. Himiki.410 (15), 3425–3444.https: //doi.org/10.1007/s00216-018-0852-x (2018).
Mueller, JB we başgalar. Durmuş şalygynyň proteomiki peýza .y. 582 (7813), 592-596.https: //doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. we başgalar. Terapewtiki peptidleri taýýarlaýjy suwuk hromatografiýa arkaly gaýtadan işlemek. Molekula (Bazel, Şweýsariýa) 26 (15), 4688 (2021).
Yangaň, Y .. & Geng, X. Garyşyk tertipli hromatografiýa we biopolimerlere ulanylyşy.J. Hromatografiýa.A 1218 (49), 8813–8825 (2011).
Zhao, G., Dong, X.-Y. & Sun, Y. Garyşyk re proteinimli belok hromatografiýasy üçin Ligands: ýörelge, häsiýetnama we dizaýn.J. Biotehnologiýa.144 (1), 3-11 (2009).