"Huwag mag-alinlangan na ang isang maliit na grupo ng maalalahanin, dedikadong mga mamamayan ay maaaring baguhin ang mundo.Kung tutuusin, mag-isa lang doon.”
Ang misyon ni Cureus ay baguhin ang matagal nang modelo ng medikal na pag-publish, kung saan ang pagsusumite ng pananaliksik ay maaaring magastos, masalimuot, at matagal.
Platelet-rich plasma/prp, tissue regeneration, platelet activation, glucose proliferative therapy, platelets, proliferative therapy
Sipiin ang artikulong ito bilang: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(Mayo 17, 2022) Ang epekto ng glucose sa bilang at dami ng platelet: mga implikasyon para sa regenerative na gamot.Lunas 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Ang platelet-rich plasma (PRP) at hypertonic glucose solution ay karaniwang ginagamit para sa iniksyon sa regenerative na gamot, kung minsan ay magkasama.Ang epekto ng hypertonic glucose sa platelet lysis at activation ay hindi pa naiulat dati.Sinubukan namin ang epekto ng mataas na konsentrasyon ng glucose sa mga bilang ng platelet at erythrocyte, pati na rin ang mga dami ng cell sa PRP at buong dugo (WB).Ang isang mabilis na bahagyang pagbawas sa bilang ng platelet ay naganap sa lahat ng mga halo ng glucose na may halong PRP o buong dugo, na naaayon sa bahagyang lysis. Matapos ang unang minuto, ang mga bilang ng platelet ay nanatiling matatag, na nagmumungkahi ng isang mabilis na pag-ako ng natitirang mga platelet sa matinding (>2000 mOsm) hypertonicity. Matapos ang unang minuto, ang mga bilang ng platelet ay nanatiling matatag, na nagmumungkahi ng isang mabilis na pag-ako ng natitirang mga platelet sa matinding (>2000 mOsm) hypertonicity. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю акктомбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю акктомодациромкстостостомсто ального (>2000 мОсм) гипертонуса. Pagkatapos ng unang minuto, ang bilang ng platelet ay nanatiling matatag, na nagpapahiwatig ng isang mabilis na pag-ako ng mga natitirang platelet sa matinding (> 2000 mOsm) hypertonicity.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацитов остатрокве остатром ому (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Matapos ang unang minuto, ang bilang ng platelet ay nanatiling matatag, na nagpapahiwatig ng isang mabilis na pagbagay ng mga natitirang platelet sa matinding (> 2000 mOsm) na estado ng hyperosmolar.Ang mga konsentrasyon ng glucose na 25% pataas ay nagresulta sa isang makabuluhang pagtaas sa mean platelet volume (MPV), na nagpapahiwatig ng isang maagang yugto ng pag-activate ng platelet.Ang mga karagdagang pag-aaral ay kinakailangan upang matukoy kung ang platelet lysis o pag-activate ay nangyayari at kung ang hypertonic glucose injection lamang o kasama ng PRP ay maaaring magbigay ng karagdagang klinikal na benepisyo.
Noong 1950s, natuklasan ng American surgeon na si George Hackett na maaari niyang permanenteng maibsan ang joint at back pain sa maraming pasyente sa pamamagitan ng pag-iniksyon ng proliferative solution sa tendons at ligaments.Ang kanyang mga eksperimento sa mga kuneho ay nagpakita na ang paggamot, na tinatawag niyang proliferative therapy, ay naging sanhi ng paglaki at paglakas ng mga litid.Kinumpirma ng mga pag-aaral sa kasaysayan na ang bagong collagen ay ginawa sa prosesong ito [1].
Sa unang ilang dekada, maraming iba't ibang solusyon sa pamamahagi ang sinubukan.Noong 1990s, itinuturing ng karamihan sa mga practitioner ang mataas na konsentrasyon ng glucose bilang pinakaligtas at pinakamabisang paraan.Gayunpaman, ang mekanismo ng pagkilos ay nananatiling hindi malinaw.
Ilang mga klinikal na pag-aaral ang isinagawa noong ika-20 siglo kasunod ng gawain ni Hackett.Gayunpaman, noong 2000s nagkaroon ng panibagong interes at ilang matagumpay na klinikal na pagsubok ng proliferative therapy ang nakumpleto para sa paggamot ng mababang sakit sa likod [2], osteoarthritis ng tuhod [3], at lateral epicondylitis [4].
Ang pagbabagong-buhay ng tissue ay nangangailangan ng pakikilahok ng mga stem cell.Samakatuwid, ang mataas na konsentrasyon ng glucose ay dapat na kahit papaano ay mag-udyok sa paglipat, pagtitiklop, at pagkakaiba-iba ng mga stem cell.Ipinagpalagay namin na ang mga platelet ay maaaring kumilos bilang mga mensahero at na ang mataas na konsentrasyon ng glucose ay maaaring maging sanhi ng mga platelet na maglabas ng mga cytokine at mga kadahilanan ng paglago, at sa gayon ay nagpo-promote ng mga proseso ng pagbabagong-buhay, lalo na ang paglipat ng stem cell sa mga lugar na may mataas na konsentrasyon ng glucose.
Ang pag-activate ng platelet ay palaging nauuna sa pagtaas ng intracellular calcium [5].Liu et al.noong 2008 ay nagpakita na ang mataas na antas ng glucose ay nagpapataas ng aktibidad ng mga transient receptor potential canonical type 6 (TRPC6) channels sa plasma membrane, na humahantong sa isang pag-agos ng mga calcium ions sa mga platelet [6].Ang isa pang pag-aaral ay nagpakita na ang pagkakalantad ng microtubule marginal zone sa mga calcium ions ay nagdudulot ng relaxation, expansion, at deformation ng marginal zone, na nagiging sanhi ng pagbabago ng hugis mula sa disc patungo sa spherical, na nagreresulta sa mean platelet volume (MPV) [7].
Ang aming hypothesis sa pag-aaral na ito ay ang pagkakalantad ng mga platelet sa mataas na konsentrasyon ng glucose ay nakakaapekto sa microtubule marginal zone at intracellular na kapaligiran, na humahantong sa isang pagtaas sa MPV.
Ang lahat ng mga kalahok ay pumirma sa isang form na may kaalamang pahintulot pagkatapos maipaliwanag ang mga detalye ng pag-aaral at bago matanggap ang mga sample.Sa pag-aaral na ito, tanging ang mga sample ng PRP na may hematocrit na higit sa 2% ang ginamit upang maisama ang bilang ng erythrocyte (erythrocyte) at ibig sabihin ng corpuscular volume ng mga pulang selula ng dugo (MCV) para sa paghahambing.
Ang pag-aaral ay isinagawa sa apat na yugto, ang unang yugto ay PRP at ang natitirang mga yugto ay buong dugo (Talahanayan 1).Tulad ng inilarawan dati [8], ang lahat ng mga kamag-anak na puwersa ng sentripugal (RCF, g-force) ay kinakalkula mula sa midpoint (Rmid, sa cm) ng haligi ng dugo sa centrifugal syringe.Pinili naming gamitin ang MPV bilang marker ng platelet sensitization at platelet count bilang indicator ng potensyal na platelet lysis, na parehong madaling masusukat sa standard hematology analyzers.
Sa unang yugto, 47 boluntaryo ang nag-donate ng mga sample ng dugo-isang tubo ng ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) at isang PRP buong sample ng dugo (anticoagulated na may sodium citrate (NaCl, 3%)) (Talahanayan 1).Ilagay kaagad ang rocker sa tubo.Ang kumpletong bilang ng dugo (CBC) ay isinagawa sa mga sample ng EDTA sa triplicate, at ang mga sample ng NaCl ay nasuri sa triplicate para sa pagsusuri ng CBC, at pagkatapos ay inihanda ang PRP ng iba't ibang mga pamamaraan na inilarawan sa itaas [8].Ang lahat ng mga sample ng PRP ay inihanda sa pamamagitan ng centrifugation sa 900-1000 g.Paghaluin ang bawat sample ng PRP sa isang vortex mixer sa loob ng 5–10 segundo, pagkatapos ay hatiin ang limang 0.5 ml na aliquot sa mga tubo.
Upang suriin ang epekto ng pagkakalantad ng platelet sa mataas na konsentrasyon ng glucose, ang pantay na halaga (0.5 ml) ng 0%, 5%, 12.5%, 25%, at 50% na glucose sa tubig ay hinaluan ng mga sample ng platelet upang makakuha ng 0%, 2.5 % 6.25%, 12.5% ​​​​at 25% na halo ng mga tube ng pagsubok para sa mga tube ng shaker.Ang TAC ng bawat halo ay nasuri sa triplicate pagkatapos ng 15 min.Ang bilang ng platelet (PLT), bilang ng RBC, MCV, at MPV ay na-average para sa bawat tubo, at ang ibig sabihin ng bilang ng platelet, bilang ng RBC, MCV, at MPV ay kinakalkula para sa lahat ng mga sample ng PRP.
Matapos makumpleto ang unang yugto ng pagkolekta ng data, napansin namin ang isang makabuluhang pagtaas sa dami ng platelet sa mga platelet ng PRP pagkatapos ng pagdaragdag ng D50W.Ang mga platelet ng PRP ay hindi kinakailangang kumakatawan sa lahat ng mga platelet sa dugo, at ang PRP medium ay naiiba sa WB medium.Samakatuwid, nagpasya kaming magsagawa ng pangalawang yugto ng pagsubok ng epekto ng pagdaragdag ng D50W sa buong dugo.
Para sa ikalawang round, pumili kami ng sample na laki na 30 batay sa mga resulta mula sa unang serye, tulad ng inilarawan sa seksyong Pagsusuri.Sa seryeng ito, 20 boluntaryo ang nag-donate ng mga sample ng dugo (Talahanayan 1).Ang buong dugo (1.8 ml) ay iginuhit sa isang 3 ml na hiringgilya at anticoagulated na may 0.2 ml 40% NaCl.Ang buong syringe ng dugo ay hinalo sa loob ng limang segundo gamit ang isang vortex mixer at ang CBC ay nasuri sa triplicate.Pagkatapos ng pagsusuri, ang anticoagulated na dugo ay idinagdag sa 2 ml ng 50% na glucose sa isang 5 ml na hiringgilya (ang pangwakas na konsentrasyon ng glucose ay humigit-kumulang 25% (D25) at inilagay sa isang shake tube sa loob ng 30 minuto. Pagkatapos ng 30 minuto, ang D25/CBC sa WB syringes ay nasuri sa triplicate. Ang bilang ng platelet, RBC count, RBC bawat average, MCVring, at RBC ay average na bilang, MCV, at RBC. at MPV ay kinakalkula para sa bawat sample bago at pagkatapos magdagdag ng glucose.
Dahil ang mga platelet sa buong dugo ay karaniwang nakalantad sa hypertonic glucose sa panahon ng proliferative glucose therapy dahil sa minimally invasive na iniksyon, at hindi karaniwan na pagsamahin ang PRP sa hypertonic glucose bago ang pag-iniksyon, nagpasya kaming mag-aral ng hypertonic glucose sa kumbinasyon ng WB sa Seksyon 1. Ikatlong Hakbang at apat.Sa bawat yugto, 20 boluntaryo ang nag-donate ng 7-8 ml ng ACD-A (acid na naglalaman ng trisodium citrate (22.0 g/l), citric acid (8.0 g/l) at glucose (24.5 g/l), solution dextrose citrate) para sa mga anticoagulants ng dugo (Talahanayan 1).Ang mga mixtures lang ng glucose na higit sa 12.5% ​​​​ang ginamit upang matukoy ang porsyento ng threshold na nauugnay sa pagtaas ng MPV.Sa ikatlong yugto, 1 ml ng dugo ang inilalagay sa isang test tube.Pagkatapos ay ihalo ang dugo sa isang vortex mixer sa loob ng 10 segundo sa pamamagitan ng pagdaragdag ng 1 ml ng 30% glucose, 40% glucose, o 50% glucose sa tubo upang makakuha ng panghuling konsentrasyon ng glucose na 15%, 20%, at 25%, ayon sa pagkakabanggit.Ang mga sample ng glucose ng dugo ay sinuri para sa CBC kaagad pagkatapos ng paghahalo at paulit-ulit tuwing dalawang minuto sa loob ng 30 minuto.
Sa paunang paghahalo, ang pagdaragdag ng 1:1 hypertonic glucose at WB o PRP ay naglalantad sa mga platelet sa mga konsentrasyon na higit sa 25% sa loob ng ilang segundo.Sa ika-apat na hakbang, upang suriin ang epekto ng hypertonic glucose na may kaunting inisyal na peak concentrations at subukan ang itaas na limitasyon ng epekto ng glucose, nagdagdag lamang kami ng maliit na halaga ng dugo sa D25W o D50W.Ilagay ang 1 ml ng D25W o D50W sa isang tubo at magdagdag ng 0.2 ml ng WB habang ini-vortex ang sample sa loob ng 10 segundo.Sa mga kasong ito, ang dugo ay nalantad sa glucose sa isang konsentrasyon na humigit-kumulang 20% ​​sa itaas ng huling konsentrasyon, sa halip na 50% sa itaas ng huling konsentrasyon tulad ng sa Phase 3, na nagreresulta sa panghuling konsentrasyon ng glucose na 20.8% at 41.6%.Ang mga pinaghalong sample ay nasuri sa parehong agwat ng oras tulad ng sa hakbang 3.
Sa unang hakbang ng bawat serye ng glucose dilution, 30 sample ang kinuha dahil ito ang naaangkop na sample size para sa pilot study [9].Sa dulo ng bawat yugto (kabilang ang unang yugto), suriin ang kasapatan ng laki ng sample gamit ang formula na ginamit upang matukoy ang laki ng sample na kailangan upang matantya ang mean ng tuluy-tuloy na variable ng resulta sa isang populasyon.Formula n = Z2 x SD2 /E2.Sa equation na ito, Z ang Z-score, SD ang standard deviation, at E ang gustong error [10].Ang aming alpha ay 0.05, na tumutugma sa isang Z value na 1.96, at inaasahan namin ang isang error na 5 (sa porsyento).Kaya't nalulutas namin ang n = (1.962 x SD2)/52.Ipinakita ng mga resulta na ang laki ng sample na kinakailangan para sa bawat yugto ay mas maliit kaysa sa aktwal na bilang na nakolekta.
Sa mga panahon 1, 3 at 4 gamit ang higit sa isang konsentrasyon ng glucose, ang epekto ng iba't ibang mga konsentrasyon ng glucose ay nasuri sa pamamagitan ng paghahambing ng fractional na pagbabago sa pagitan ng oras 0 at bawat kasunod na oras (phase 1 sa 15 minuto, yugto 3 sa 15 minuto).at apat sa 15 segundo, pagkatapos ay bawat dalawang minuto.) Ang mga rate ng pagbabago para sa bawat yugto ng panahon ay inihambing gamit ang Mann-Whitney U-test dahil ang data ay hindi sumunod sa isang normal na distribusyon gaya ng tinutukoy ng Shapiro-Wilk normality test.Dahil ang isang 1-to-1 na pagsusuri ng ilang grupo (lima) ay isinagawa sa una, ikatlo at ikaapat na hakbang (lima sa kabuuan), isang Bonferroni correction ang isinagawa upang ayusin ang nais na halaga ng alpha sa ≤0.01 ngunit hindi ≤0.05.
Pagbawas ng bilang ng platelet sa lahat ng konsentrasyon ng hypertonic dextrose at pagtaas ng MPV sa PRP platelet sa>12.5% ​​na konsentrasyon ng dextrose: Ang mga bilang ng platelet ng PRP ay tumaas mula isa hanggang limang beses na konsentrasyon kumpara sa baseline na buong dugo, na nag-iiba ayon sa pamamaraan (hindi ipinakita). Pagbawas ng bilang ng platelet sa lahat ng konsentrasyon ng hypertonic dextrose at pagtaas ng MPV sa PRP platelet sa >12.5% ​​​​dextrose na konsentrasyon: Ang mga bilang ng platelet ng PRP ay tumaas mula isa hanggang limang beses na konsentrasyon kumpara sa baseline na buong dugo, na nag-iiba ayon sa pamamaraan (hindi ipinakita). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увеличение MPV sa тромбRPо строцкрицнх > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровьюто, в зависидока (в зависидам). Nabawasan ang bilang ng platelet sa lahat ng hypertonic dextrose na konsentrasyon at tumaas ang MPV sa PRP platelet sa >12.5% ​​​​dextrose na konsentrasyon: Ang bilang ng platelet ng PRP ay tumaas ng 1-5 beses kumpara sa baseline na buong dugo, depende sa pamamaraan (hindi ipinakita). ).在> 12.5% ​​的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小板血小板血小板䢭行相比，PRP 血小板计数从浓度的1 上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 Sa >12.5% ​​​​konsentrasyon ng glucose, binabawasan ng mataas na konsentrasyon ng glucose ang bilang ng dugo, ang PRP blood MPV ay tumataas: kumpara sa 与基线全血, ang PRP blood count ay tumataas mula 1 hanggang 5 beses kaysa sa konsentrasyon (hindi inilarawan). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количество концентрации гипертонической глюкозы снижали количество тромбоцамитровто : количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравнению с исходными концлентра концентра мости от метода (walang описано ). Sa glucose concentrations>12.5%, lahat ng hypertensive glucose concentrations ay bumaba sa bilang ng platelet at tumaas ang MPV sa PRP platelets: Ang PRP platelet counts ay tumaas ng 1- hanggang 5-fold kumpara sa baseline whole blood concentrations, depende sa pamamaraan (tulad ng inilarawan ).Ipinapakita ng Figure 1 na ang bilang ng mga platelet ay bumaba ng halos 75% pagkatapos ng pagbabanto sa tubig at sa pamamagitan ng 20-30% pagkatapos ng 15 minuto ng pagbabanto na may iba't ibang konsentrasyon ng glucose kumpara sa baseline PRP at isang 1:1 na pagbabanto na na-adjust para sa volume (1- k1 na may volume correction).k -1 breeding).1 breeding).
Ang bilang ng mga cell sa bawat dilution ay ipinahayag bilang isang fraction ng orihinal na numero bago ang dilution.
Ang MPV ay nabawasan nang kaunti sa panahon ng produksyon ng PRP, nang walang karagdagang pagbabago sa mga konsentrasyon ng dilution sa 12.5% ​​​​sa tubig o glucose (kabilang ang 25% PRP glucose mixtures) at tumaas ng higit sa 20% pagkatapos ng dilution sa 50% glucose solution (Fig. 2).).Sa kaibahan, ang mga erythrocytes ay nagpakita ng walang makabuluhang pagbabago sa dami sa anumang pagbabanto maliban sa H2O.
Ang average na volume ng mga cell sa bawat dilution ay ipinahayag bilang isang porsyento ng orihinal na volume bago ang dilution.
Ang isang katulad ngunit hindi gaanong binibigkas na pagbawas sa bilang ng platelet at pagtaas sa CVR ay naobserbahan sa BC na nakalantad sa 50% na glucose (upang bumalangkas sa 25% na glucose).Inihahambing ng Talahanayan 2 ang mga numero ng cell at dami ng cell sa buong dugo na natunaw sa 50% dextrose na may phase 1 na data ng PRP na natunaw sa 50% na dextrose.Ang mga pagbabago sa bilang ng RBC at RBC MCV ay hindi halata at hindi ang focus ng aming pansin.
SD = standard deviation, MD = mean difference between groups, SE = standard deviation of mean difference, RBC = erythrocytes, PLT = platelets, PRP = platelet rich plasma, WB = whole blood
Pagkatapos idagdag ang D50W sa WB, ang porsyento ng pagbabanto-na-adjust na pagkawala ng platelet ay 7.7% (310±73 vs. 286±96) kumpara sa 17.8% para sa PRP dilution sa D50W (664±348 vs. 544±277).Ang MPV WB ay tumaas ng 16.8% (mula 10.1 ± 0.5 hanggang 11.8 ± 0.6), habang ang MPV PRP ay tumaas ng 26% (9.2 ± 0.8 vs. 11.6 ± 0. 7). Kahit na ang ibig sabihin ng mga pagkakaiba sa parehong pagbabawas ng bilang ng platelet at pagtaas ng MPV ay higit na malaki sa PRP, ang mga pagbabago sa pagbabawas ng bilang ng platelet sa loob ng WB ay halos makabuluhan (310 ± 73 hanggang 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) at ang pagtaas ng MPV ay makabuluhan (10.1 ± 0.5 hanggang 11.8) (10.1 ± 0.5 hanggang 11.8) Kahit na ang ibig sabihin ng mga pagkakaiba sa parehong pagbabawas ng bilang ng platelet at pagtaas ng MPV ay higit na malaki sa PRP, ang mga pagbabago sa pagbabawas ng bilang ng platelet sa loob ng WB ay halos makabuluhan (310 ± 73 hanggang 286 ± 96 (-7.7%); p = .06) at ang pagtaas ng MPV ay makabuluhan (10.1 ± 0.5 hanggang 11.8) (10.1 ± 0.5 hanggang 11.8)Kahit na ang ibig sabihin ng mga pagkakaiba sa parehong pagbabawas ng bilang ng platelet at pagtaas ng CVR ay higit na malaki sa PRP, ang mga pagbabago sa pagbaba ng bilang ng platelet sa loob ng WB ay halos makabuluhan (310 ± 73 hanggang 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06).увеличение MPV было значительным (mula sa 10,1 ± 0,5 hanggang 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). ang pagtaas ng MPV ay makabuluhan (mula 10.1 ± 0.5 hanggang 11.8 ± 0.6 (+16.8) p <0.001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内血小村的内血小板计是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到 0.5 到 11.8 。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内杀 的 家乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7%) ； p = .06）和MPV 的增加是显着的增加是显着的增加是显着的（10.1 ± 8（10.1 ± 10.1 ± 10.1 ± 10.1. p <.001）.Ang pagbabago sa pagbabawas ng bilang ng platelet sa loob ng WB ay halos makabuluhan (mula 310 ± 73 hanggang 286 ± 96 (-7.7%); p = 0.06), kahit na ang PRP ay may makabuluhang mas malaking pagkakaiba-iba sa pagbaba ng bilang ng platelet at pagtaas ng MPV.at malaki ang pagtaas ng MPV.(mula sa 10,1 ± 0,5 hanggang 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (mula 10.1 ± 0.5 hanggang 11.8 ± 0.6 (+16.8) p <0.001).
Ang pangwakas na konsentrasyon ng 20% ​​glucose ay kinakailangan upang makita ang isang makabuluhang pagbabago sa MPV, ngunit ang pagbabago sa MPV ay mas malinaw sa huling konsentrasyon na 25%.Ang pagkawala ng platelet ay nagpapatatag pagkatapos ng unang pagbaba.Napansin namin ang isang paunang matalim na pagbaba sa CVR, gayunpaman, ang CVR ay mabilis na naibalik sa 25% na panghuling konsentrasyon ng glucose, na makabuluhang mas mataas kaysa sa mga antas ng CVR na naobserbahan sa panghuling konsentrasyon ng glucose na 20% at 15% (Larawan 3 at sa kaliwa ng Talahanayan 3; shaded na mga kahon).ipahiwatig ang mga p-values ​​​​≤ alpha na may pagwawasto ng Bonferroni na 0.01).Nagkaroon din ng paunang matalim na pagbaba sa bilang ng PLT, na naobserbahan sa paunang yugto ng 0-15 s, at pagkatapos ay nanatiling matatag (mula 15 s hanggang 30 min; kaliwa ng talahanayan 4).
Ang pagdaragdag ng iba't ibang mga konsentrasyon ng glucose sa buong dugo ay nagresulta sa isang paunang mabilis na pagbaba sa MPV na sinundan ng isang pagbawi na umaasa sa konsentrasyon na higit sa 20%.Ang alamat ay nagpapakita ng konsentrasyon ng glucose pagkatapos ng pagbabanto.Ang D15, D20 at D25 ay isinagawa sa isang 1: 1 na pagbabanto.Ang D21 at D41 ay isinagawa sa isang 1:5 na pagbabanto.
Ipinapakita sa talahanayan 4 ang pagbabago sa bilang ng platelet kapag natunaw sa hypertonic glucose.Napansin namin ang isang relasyon na umaasa sa dosis sa pagitan ng agarang pagbaba sa mga numero ng PLT sa 1: 1 na pagbabanto at sa 1: 5 na pagbabanto.Kung ikukumpara ang 1:1 dilutions bilang isang grupo na may 1:5 dilution, ang 1:1 group ay nagkaroon ng agarang pagbaba sa bilang ng platelet na mas mababa sa 1:5 group na 66±48,000 (23%) kumpara sa 99±69,000 (37%)., p = 0.014) sa pangkat na 1:5.Pagkatapos ng isang paunang pagbaba sa unang punto ng pagsukat, ang bilang ng platelet bilang isang porsyento ng glucose ay nagpapatatag (Larawan 4).
Kapag ang buong dugo ay idinagdag sa glucose sa isang 1:1 ratio, ang platelet count ay nababawasan ng humigit-kumulang 25%.Gayunpaman, kapag ang buong dugo ay idinagdag sa isang ratio na 1: 5, ang pagbawas ay mas malaki - mga 50%.
Ang 41% glucose ay tumaas ng MPV nang mas mabilis at mas kapansin-pansing kaysa sa 25% o 21%.Ang mga resulta ng MPV ay ipinapakita sa Figure 3. Sa lahat ng iba pang dilution, walang agarang paunang pagbaba sa MPV ang naobserbahan pagkatapos ng pagdaragdag ng 50% glucose.Kapag gumagamit ng 25% glucose (konsentrasyon ng glucose 20.8% sa huling pagbabanto), ang pagbabago sa MPV ay maihahambing sa pagbabago sa 20% glucose sa isang 1:1 na pagbabanto (Fig. 3).Bagaman ang mga pagbabago sa MPV sa una ay mas malaki sa 41% halo-halong konsentrasyon kaysa sa 25%, ang pagkakaiba sa MPV sa pagitan ng 41% at 25% pagkatapos ng 16 minuto ay hindi na makabuluhan (Talahanayan 3, kanan).Kapansin-pansin din na ang 25% glucose ay tumaas ng MPV nang mas epektibo kaysa sa 20.8%.
Ang pag-aaral sa vitro na ito ay bahagyang nakumpirma ang aming hypothesis. Nagpakita ito ng potensyal na partial platelet lysis sa pamamagitan ng dextrose admixture, isang mabilis na pagtanggap ng mga platelet sa matinding hypertonicity, at isang makabuluhang pagtaas sa MPV bilang tugon sa> 25% na konsentrasyon ng hypertonic dextrose. Nagpakita ito ng potensyal na partial platelet lysis sa pamamagitan ng dextrose admixture, isang mabilis na pagtanggap ng mga platelet sa matinding hypertonicity, at isang makabuluhang pagtaas sa MPV bilang tugon sa> 25% na konsentrasyon ng hypertonic dextrose. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцэтогитов д и значительное повышение MPV sa ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25%. Nagpakita ito ng potensyal na partial platelet lysis na may dextrose, mabilis na platelet accommodation sa matinding hypertonicity, at isang makabuluhang pagtaas sa MPV bilang tugon sa hypertonic dextrose level>25%.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端速适应极端高家度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 适应 极端 ， 5% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбогиктов у и значительное увеличение MPV sa ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Nagpapakita ito ng potensyal na partial platelet lysis ng glucose mixtures, mabilis na pagbagay ng platelet sa matinding hypertonicity, at isang makabuluhang pagtaas sa MPV bilang tugon sa hypertonic glucose>25%.Ang unang pagtaas ay pinakamalaki sa 41.6% na pagkakalantad sa glucose, ngunit ang pagtaas sa MPV ay lumalapit sa 25% na pagkakalantad sa glucose humigit-kumulang 20 minuto pagkatapos ng pagkakalantad.
Ang konsentrasyon ng mga platelet ay apektado ng glucose.Napansin namin na ang halaga ng PLT ay nabawasan sa lahat ng mga pagbabanto ng glucose.Ang isang matalim na pagbaba sa bilang ng mga platelet sa H2O (0%) na pagbabanto ng serye ng PRP ay maaaring nauugnay sa osmotic lysis.Bilang kahalili, ito ay maaaring isang artifact na sanhi ng platelet clumping, ngunit ito ay kabaligtaran sa kakulangan ng pagbabago ng MPV sa pagbabanto na ito.Ang paghahanap na ito ay nangangahulugan na ang ilang mga platelet ay napaka-sensitibo sa hypoosmolarity.
Sa lahat ng 1:1 dilution ng glucose, ang halaga ng PLT ay bumaba ng 20-30%, kahit na sa pamamagitan ng D5W (hypotonic sa 252 mOsm), na maaaring magpahiwatig ng isang tiyak na non-osmotic na epekto ng glucose, dahil ang parehong PLT at MPV ay nanatiling hindi nagbabago sa tatlong beses na pagtaas ng konsentrasyon.glucose.mula D5W hanggang D25W.Sa katunayan, ang mga konsentrasyon ng PLT ay may posibilidad na tumaas nang bahagya sa pagtaas ng osmolarity.
Ang pagbaba sa PLT sa pagitan ng 1:1 at 1:5 dilutions ay nangangahulugan na ang dissolution effect ay depende sa inisyal at panghuling konsentrasyon ng glucose.Kung ito ay nakasalalay lamang sa paunang konsentrasyon, pagkatapos ay inaasahan ng isa na makakita ng pagkakaiba sa pagbawas ng PLT sa pagitan ng 1:1 na mga konsentrasyon.Pero hindi tayo.Kung ang epekto ng lysis ay nakasalalay lamang sa panghuling konsentrasyon ng glucose, kung gayon hindi namin inaasahan ang malaking pagkakaiba sa pagitan ng isang 20% ​​1: 1 na pagbabanto at isang 20.8% na 1: 5 na pagbabanto.At gayon pa man ginawa namin ito.
Kung ang pagkawala ng platelet ay nangyayari dahil sa platelet lysis, ang isang bahagyang lysate ay nabuo, pagkatapos kung saan ang mga cytokine at growth factor ay inilabas sa extracellular na kapaligiran.Maraming mga pag-aaral ang nagpakita na ang platelet lysate ay halos kasing epektibo ng PRP bilang isang proliferation solution [11].Ang PRP mismo ay ipinakita na isang mabisang solusyon para sa paggamot ng paglaganap [12-14].
Ang mga hindi aktibong platelet ay nagpapalipat-lipat sa anyo ng isang disk na pinalakas ng ilang mga panloob na istruktura.Sa panahon ng pag-activate, nagkakaroon sila ng mas spherical o amoeba na hugis, na nagreresulta sa pagtaas ng volume.Ang pagtaas sa dami ay nangangailangan ng pagtaas sa lugar ng ibabaw, na resulta ng pag-extrusion ng open tubule system (OCS) at ang pagdaragdag ng mga exocytic granules sa lamad.Ito ay nananatiling upang matukoy kung ang pagtaas sa MPV sapilitan ng hypertonic glucose ay nagsasangkot ng isa o pareho ng mga mekanismong ito, ngunit kung ang huli, kung gayon ang isang pagtaas sa MPV ay nagpapahiwatig ng degranulation.
Ipinakita ng pag-aaral na ito na ang pagkakalantad sa mataas na konsentrasyon ng glucose sa PRP o buong mga platelet ng dugo ay nagresulta sa pagtaas ng MPV sa loob ng 15 minuto na may konsentrasyon ng glucose na 25% at 41.6%, ayon sa pagkakabanggit.
Ang pagtaas ng platelet MPV ay maaaring dahil sa pagluwang ng nakapalibot na microtubule tangles bilang tugon sa pag-agos ng calcium.Liu et al.Ang glucose ay ipinakita sa pamamagitan ng pag-agos ng calcium sa pamamagitan ng platelet TRPC6 channel [6].Ang aming hypothesis ay ang glucose ay nag-uudyok sa pagpapahinga ng microtubule tangles, na humahantong sa pagtaas ng MPV at platelet sensitization at/o activation.Gayunpaman, ayon sa aming mga resulta, ito ay bahagi lamang ng kuwento.Sa aming mga pagsusuri, walang konsentrasyon sa ibaba ng D25W na nagresulta sa pagtaas ng MPV.Dahil hindi pa namin nasubok ang pagkakalantad sa mga konsentrasyon ng glucose sa pagitan ng 12.5% ​​​​at 25%, iminumungkahi ng aming mga resulta sa phase 1 na maaaring mayroong threshold sa hanay na ito ng mga konsentrasyon ng glucose na humahantong sa pagtaas ng MPV.Ang karagdagang pagsusuri sa mga yugto 3 at 4 ay nagpakita na ang 20-25% na glucose ay lumilitaw na ang threshold para dito, ngunit nananatiling hindi malinaw kung bakit.
Napansin din namin ang isang ~ 9% na pagbaba sa MPV pagkatapos ng centrifugation.Hindi malinaw kung ang pagbaba na ito sa MPV ay dahil sa mas malaki at mas siksik na mga platelet na nakulong sa RBC layer ng centrifuge.Ang obserbasyon na ito ay maaaring mahalaga sa mga clinician dahil maaari itong magpahiwatig na ang mga PRP platelet ay isang mas maliit at hindi gaanong siksik na subset ng mga WB platelet.
Sa isang nakaraang pag-aaral, ipinakita namin na ang paghahanda ng PRP sa pamamagitan ng mga manu-manong pamamaraan ay mura [8].Kung pinasensitibo ng glucose ang mga platelet ng tissue o PRP, na ginagawang mas madaling ma-activate ang mga ito, o kung ang PRP ay ginawa na may bahagyang mga katangian ng lysate, maaari itong mapahusay ang pagbabagong-buhay at mabawasan ang pangangailangan para sa therapy.Samakatuwid, ang kumbinasyon ng PRP at mataas na puro glucose ay maaaring mas cost-effective kaysa sa PRP o glucose lamang.
Ang aming pag-aaral ay may ilang mga pagkukulang.Una, ginagamit namin ang PRP na nakuha mula sa iba't ibang pamamaraan.Ito ay maaaring humantong sa magkasalungat na mga resulta.Pangalawa, hindi namin nagawang magsagawa ng biochemical analysis ng alinman sa aming mga sample upang mas tumpak na matukoy kung naganap ang pag-activate ng platelet.Nais naming sukatin ang P-selectin, platelet factor 4, monocytic platelet aggregates, o iba pang mga marker ng platelet activation upang mas maunawaan ang antas o pagkakaroon ng alpha granule degranulation, ngunit ito ay lampas sa saklaw ng pag-aaral na ito.Pangatlo, hindi namin nakumpirma sa pamamagitan ng electron microscopy o iba pang mga pamamaraan na ang pagtaas ng MPV sa glucose-exposed na mga platelet ay dahil sa epekto sa microtubule tangles.
Ang mga halo ng WB o PRP na may 25% glucose ay nadagdagan ang MPV, na nagpapahiwatig ng pagsisimula ng pag-activate ng platelet, bagaman ang pag-aaral na ito ay hindi nagpakita ng pag-unlad ng pagsasama-sama o degranulation.Ang hypertonic glucose mixture ay nagresulta sa pagkawala ng platelet, posibleng kumakatawan sa isang lytic effect.Ang bahagyang activation o lysis ng mga platelet ay maaaring magdulot ng tissue regeneration pagkatapos ng platelet injection.Hindi malinaw kung ano ang mga klinikal na kahihinatnan na maaaring humantong sa mga pagbabagong ito.Ang mga karagdagang pag-aaral ay nagpakita ng mas tumpak na mga sukat ng activation o lysis at nasuri ang iba't ibang mga klinikal na epekto ng hypertonic glucose mixtures na may WB o PRP.
Ang Glucose proliferative therapy ay isang simple at murang regenerative therapy na mabilis na lumalawak at sumusuporta sa klinikal na pananaliksik.Ang pag-aaral na ito ay nagmumungkahi ng isang physiological na mekanismo na, kung makumpirma, ay makakatulong sa amin na maunawaan ang bahagi ng regenerative na mekanismo ng proliferative therapy.
Biomedical at Health Informatics sa University of Missouri, Kansas City School of Medicine, Kansas City, USA
Mga Paksa ng Tao: Lahat ng kalahok sa pag-aaral na ito ay nagbigay o hindi nagbigay ng pahintulot.Ang International Society for Cellular Medicine ay naglabas ng ICMS-2017-003 na pag-apruba.Ang sumusunod na protocol ay naaprubahan para sa karagdagang paggamit ng Institutional Review Board ng International Society para sa Cellular Medicine: Pamagat: Pagkalkula ng platelet-rich plasma drug yield batay sa baseline CBC platelet count.Mga Paksa ng Hayop: Kinumpirma ng lahat ng mga may-akda na walang mga hayop o tisyu ang kasangkot sa pag-aaral na ito.Mga Conflicts of Interest: Alinsunod sa ICMJE Uniform Disclosure Form, ang lahat ng mga may-akda ay nagpahayag ng mga sumusunod: Impormasyon sa pagbabayad/serbisyo: Ipinapahayag ng lahat ng mga may-akda na hindi sila nakatanggap ng suportang pinansyal mula sa anumang organisasyon para sa isinumiteng gawain.Mga Relasyon sa Pinansyal: Ipinapahayag ng lahat ng mga may-akda na hindi sila sa kasalukuyan o sa loob ng nakaraang tatlong taon ay may mga relasyon sa pananalapi sa anumang organisasyon na maaaring interesado sa isinumiteng gawain.Iba Pang Mga Kaugnayan: Ipinapahayag ng lahat ng may-akda na walang ibang mga relasyon o aktibidad na maaaring makaapekto sa isinumiteng gawa.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al.(Mayo 17, 2022) Ang epekto ng glucose sa bilang at dami ng platelet: mga implikasyon para sa regenerative na gamot.Lunas 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Copyright 2022 Harrison et al.Ito ay isang open access na artikulo na ipinamahagi sa ilalim ng mga tuntunin ng Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0.Ang walang limitasyong paggamit, pamamahagi, at pagpaparami sa anumang medium ay pinahihintulutan, sa kondisyon na ang orihinal na may-akda at pinagmulan ay kredito.