Nature.com'u ziyaret ettiğiniz için teşekkür ederiz. Kullandığınız tarayıcı sürümü sınırlı CSS desteğine sahiptir. En iyi deneyim için güncellenmiş bir tarayıcı kullanmanızı (veya Internet Explorer'da Uyumluluk Modunu devre dışı bırakmanızı) öneririz. Bu arada, sürekli desteği sağlamak için siteyi stiller ve JavaScript olmadan sunacağız.
Kontrolsüz kanama önde gelen ölüm nedenlerinden biridir. Hızlı hemostaz elde etmek, muharebe, trafik kazaları ve ölüm azaltma operasyonları sırasında ilk yardım olarak kişinin hayatta kalmasını sağlar. Basit bir hemostatik film oluşturan bileşimden (HFFC) türetilen nano gözenekli elyaf takviyeli kompozit iskele (NFRCS), sürekli bir faz olarak hemostazı tetikleyebilir ve artırabilir. NFRCS'nin geliştirilmesi, yusufçuğun kanadının tasarımına dayanmaktadır. Yusufçuk kanat yapısı, enine ve uzunlamasına kanatlardan oluşur ve kanat zarları, mikro yapının bütünlüğünü korumak için birbirine bağlanır. HFFC, elyafın yüzeyini nanometre kalınlığında bir filmle düzgün bir şekilde kaplar ve rastgele dağıtılmış pamuk kalınlığını (Ct) (dağılmış faz) birleştirerek nano gözenekli bir yapı oluşturur. Sürekli ve dağılmış fazların birleşimi, ürünün maliyetini ticari olarak satılan ürünlere kıyasla on kat azaltır. Değiştirilmiş NFRCS (tamponlar veya bileklikler) çeşitli biyomedikal uygulamalarda kullanılabilir. İn vivo çalışmalar, geliştirilen Cp NFRCS'nin uygulama bölgesinde pıhtılaşma sürecini tetiklediği ve geliştirdiği sonucuna varmıştır. NFRCS, nano gözenekli yapısı nedeniyle mikro çevreyi düzenleyebilir ve hücresel düzeyde etki ederek eksizyon yara modelinde daha iyi yara iyileşmesine neden olabilir.
Muharebe, ameliyat sırasında ve acil durumlarda kontrolsüz kanama yaralıların yaşamı için ciddi bir tehdit oluşturabilir1. Bu durumlar ayrıca periferik vasküler dirençte genel bir artışa yol açarak hemorajik şoka neden olur. Ameliyat sırasında ve sonrasında kanamayı kontrol etmek için uygun önlemler potansiyel olarak yaşamı tehdit edici olarak kabul edilir2,3. Büyük damarlardaki hasar büyük kan kaybına yol açar ve muharebede ≤ %50 ve ameliyatta %31'lik bir ölüm oranına neden olur1. Büyük kan kaybı vücut hacminde bir azalmaya yol açar ve bu da kalp debisini azaltır. Toplam periferik vasküler dirençte artış ve mikrosirkülasyonun ilerleyici bir şekilde bozulması yaşam destek organlarında hipoksiye yol açar. Durum etkili bir müdahale olmaksızın devam ederse hemorajik şok meydana gelebilir1,4,5. Diğer komplikasyonlar arasında hipotermi ve metabolik asidozun ilerlemesi ve pıhtılaşma sürecini engelleyen bir pıhtılaşma bozukluğu bulunur. Şiddetli hemorajik şok daha yüksek bir ölüm riski ile ilişkilidir6,7,8. III. derece (ilerleyen) şokta, kan transfüzyonu, intraoperatif ve postoperatif morbidite ve mortalite sırasında hastanın hayatta kalması için esastır. Yukarıdaki tüm yaşamı tehdit eden durumların üstesinden gelmek için, suda çözünen hemostatik polimerlerin bir kombinasyonunu kullanarak minimum polimer konsantrasyonu (%0,5) kullanan nano gözenekli fiber takviyeli kompozit bir iskele (NFRCS) geliştirdik.
Elyaf takviyesinin kullanımıyla, maliyet etkin ürünler geliştirilebilir. Rastgele düzenlenmiş lifler, kanatlardaki yatay ve dikey çizgilerle dengelenmiş bir yusufçuğun kanadının yapısına benzer. Kanadın enine ve boyuna damarları kanat zarıyla iletişim kurar (Şekil 1). NFRCS, daha iyi fiziksel ve mekanik mukavemete sahip bir iskele sistemi olarak takviyeli Ct'den oluşur (Şekil 1). Uygun fiyatlı olması ve işçiliği nedeniyle, cerrahlar ameliyatlar ve pansumanlar sırasında pamuklu iplik ölçerleri (Ct) kullanmayı tercih eder. Bu nedenle, %90'dan fazla kristalin selüloz içermesi (hemostatik aktivitenin artırılmasında rol oynar) gibi çok sayıda faydası göz önünde bulundurularak, Ct, NFRCS9,10'un iskelet sistemi olarak kullanıldı. Bu nedenle, %90'dan fazla kristalin selüloz içermesi (hemostatik aktivitenin artırılmasında rol oynar) gibi çok sayıda faydası göz önünde bulundurularak, Ct, NFRCS9,10'un iskelet sistemi olarak kullanıldı. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% kристаллической целлюлозы (участвует в повышении гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Bu nedenle, %90'dan fazla kristalin selüloz (hemostatik aktiviteyi artırmada rol oynar) içermesi de dahil olmak üzere pek çok faydası göz önüne alındığında, Ct, NFRCS iskelet sistemi olarak kullanılmıştır9,10.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90% 的结晶纤维素（有助于增强止血活性）,Ct NFRCS9,10'un yeni sürümü.因此,考虑到它的多重益处,包括> 90%Bu nedenle, %90'ın üzerinde kristalin selüloz içermesi (hemostatik aktiviteyi artırmaya yardımcı olur) dahil olmak üzere birçok faydası göz önüne alındığında, Ct, NFRCS9,10 için bir iskele olarak kullanıldı.Ct yüzeysel olarak kaplandı (nano-kalın film oluşumu gözlemlendi) ve hemostatik film oluşturan bir bileşimle (HFFC) birbirine bağlandı. HFFC, rastgele yerleştirilmiş Ct'yi bir arada tutan bir matrigel gibi davranır. Geliştirilen tasarım, dağılmış faz (güçlendirici lifler) içindeki stresi iletir. Minimum polimer konsantrasyonları kullanılarak iyi mekanik mukavemete sahip nano gözenekli yapılar elde etmek zordur. Ayrıca, farklı biyomedikal uygulamalar için farklı kalıpları özelleştirmek kolay değildir.
Şekilde yusufçuk kanat yapısına dayalı NFRCS tasarımının bir diyagramı gösterilmektedir (A). Bu görüntü, bir yusufçuğun kanat yapısının karşılaştırmalı bir analojisini (kanadın kesişen ve uzunlamasına damarları birbirine bağlıdır) ve Cp NFRCS'nin bir kesit fotomikrografisini (B) göstermektedir. NFRCS'nin şematik gösterimi.
Yukarıdaki sınırlamaları ele almak için NFRC'ler sürekli faz olarak HFFC kullanılarak geliştirildi. HFFC, ana hemostatik polimer olarak kitosan ile metilselüloz (MC), hidroksipropil metilselüloz (HPMC 50 cp) ve polivinil alkol (PVA)) (125 kDa) trombüs oluşumunu destekleyen bir destek polimeri olmak üzere çeşitli film oluşturan hemostatik polimerlerden oluşur. oluşumu. Polivinilpirolidin K30 (PVP K30) eklenmesi, NFRCS'nin nem emme kapasitesini iyileştirdi. Polietilen glikol 400 (PEG 400), bağlanmış polimer karışımlarında polimer çapraz bağlanmasını iyileştirmek için eklendi. Üç farklı HFFC hemostatik bileşimi (Cm HFFC, Ch HFFC ve Cp HFFC), yani MC'li kitosan (Cm), HPMC'li kitosan (Ch) ve PVA'lı kitosan (Cp), Ct'ye uygulandı. Çeşitli in vitro ve in vivo karakterizasyon çalışmaları, NFRCS'nin hemostatik ve yara iyileştirme aktivitesini doğrulamıştır. NFRCS tarafından sunulan kompozit malzemeler, belirli ihtiyaçları karşılamak için çeşitli iskele formlarını özelleştirmek için kullanılabilir.
Ek olarak, NFRCS alt ekstremitelerin ve vücudun diğer kısımlarının tüm yaralanma alanını kaplamak için bir bandaj veya rulo olarak değiştirilebilir. Özellikle savaş uzuv yaralanmaları için tasarlanan NFRCS tasarımı yarım kol veya tam bacak olarak değiştirilebilir (Ek Şekil S11). NFRCS, ciddi intihar bilek yaralanmalarından kaynaklanan kanamayı durdurmak için kullanılabilen doku yapıştırıcısı ile bir bileklik haline getirilebilir. Ana hedefimiz, mümkün olduğunca az polimer içeren, geniş bir nüfusa (yoksulluk sınırının altında) ulaştırılabilen ve bir ilk yardım çantasına yerleştirilebilen bir NFRCS geliştirmektir. Basit, etkili ve tasarımı ekonomik olan NFRCS, yerel topluluklara fayda sağlar ve küresel bir etkiye sahip olabilir.
Kitosan (moleküler ağırlığı 80 kDa) ve amarant Merck, Hindistan'dan satın alındı. Hidroksipropil metilselüloz 50 Cp, polietilen glikol 400 ve metilselüloz Loba Chemie Pvt. LLC, Mumbai'den satın alındı. Polivinil alkol (moleküler ağırlığı 125 kDa) (%87-90 hidrolize) National Chemicals, Gujarat'tan satın alındı. Polivinilpirolidin K30 Molychem, Mumbai'den satın alındı, steril çubuklar Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu'dan, taşıyıcı olarak Milli Q su (Direct-Q3 su arıtma sistemi, Merck, Hindistan) ile satın alındı.
NFRCS, liyofilizasyon yöntemi11,12 kullanılarak geliştirildi. Tüm HFFC bileşimleri (Tablo 1) mekanik bir karıştırıcı kullanılarak hazırlandı. Mekanik bir karıştırıcıda 800 rpm'de sürekli karıştırarak suda %1 asetik asit kullanarak %0,5'lik bir kitosan çözeltisi hazırlayın. Tablo 1'de belirtilen yüklü polimerin tam ağırlığı kitosan çözeltisine eklendi ve berrak bir polimer çözeltisi elde edilene kadar karıştırıldı. PVP K30 ve PEG 400, Tablo 1'de belirtilen miktarlarda elde edilen karışıma eklendi ve berrak, viskoz bir polimer çözeltisi elde edilene kadar karıştırmaya devam edildi. Elde edilen polimer çözeltisi banyosu, polimer karışımından sıkışmış hava kabarcıklarını çıkarmak için 60 dakika boyunca sonikasyona tabi tutuldu. Ek Şekil S1(b)'de gösterildiği gibi, Ct, 5 ml HFFC ile desteklenmiş 6 kuyulu bir plakanın (kalıp) her bir kuyusunda eşit olarak dağıtıldı.
Altı kuyulu plaka, Ct ağında HFFC'nin eşit şekilde ıslanması ve dağılımını sağlamak için 60 dakika boyunca sonikasyona tabi tutuldu. Daha sonra altı kuyulu plakayı -20°C'de 8-12 saat dondurun. Dondurulmuş plakalar, çeşitli NFRCS formülasyonları elde etmek için 48 saat boyunca liyofilize edildi. Aynı prosedür, tamponlar veya silindirik tamponlar veya farklı uygulamalar için başka herhangi bir şekil gibi farklı şekiller ve yapılar üretmek için kullanılır.
Hassas bir şekilde tartılan kitosan (80 kDa) (%3) manyetik karıştırıcı kullanılarak %1 asetik asitte çözülür. Elde edilen kitosan çözeltisine %1 PEG 400 eklenir ve 30 dakika karıştırılır. Elde edilen çözeltiyi kare veya dikdörtgen bir kaba dökün ve -80°C'de 12 saat dondurun. Dondurulmuş örnekler gözenekli Cs13 elde etmek için 48 saat liyofilize edildi.
Geliştirilen NFRCS, kitosanın diğer polimerlerle kimyasal uyumluluğunu doğrulamak için Fourier dönüşümlü kızılötesi spektroskopisi (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japonya) kullanılarak deneylere tabi tutuldu14,15. Test edilen tüm numunelerin FTIR spektrumları (spektral aralığın genişliği 400 ila 4000 cm-1) 32 tarama yapılarak elde edildi.
Tüm formülasyonlar için kan emilim oranı (BAR), Chen ve ark. tarafından açıklanan yöntem kullanılarak küçük değişikliklerle değerlendirildi. 16 Tüm bileşimlerin geliştirilen NFRK'leri, kalan çözücüyü uzaklaştırmak için 105 °C'de bir vakumlu fırında bir gece kurutuldu. 30 mg NFRCS (başlangıç ​​numune ağırlığı – W0) ve 30 mg Ct (pozitif kontrol), %3,8 sodyum sitrat ön karışımı içeren ayrı kaplara yerleştirildi. Önceden belirlenmiş zaman aralıklarında, yani 5, 10, 20, 30, 40 ve 60 saniyede, NFRCS'ler çıkarıldı ve numuneler 30 saniye boyunca Ct'ye yerleştirilerek yüzeyleri emilmeyen kandan temizlendi. Her zaman noktasında NFRCS tarafından emilen kanın son ağırlığı 16 dikkate alındı ​​(W1). BAR yüzdesini aşağıdaki formülü kullanarak hesaplayın:
Kan pıhtılaşma süresi (BCT), Wang ve ark. tarafından bildirildiği gibi belirlendi. 17 Tam kanın (3,8% sodyum sitratla önceden karıştırılmış sıçan kanı) NFRCS varlığında pıhtılaşması için gereken süre, test örneğinin BCT'si olarak hesaplandı. Çeşitli NFRCS bileşenleri (30 mg), 10 ml vidalı kapaklı şişelere yerleştirildi ve 37 °C'de inkübe edildi. Şişeye kan (0,5 ml) eklendi ve kan pıhtılaşmasını etkinleştirmek için 0,3 ml 0,2 M CaCl2 eklendi. Son olarak, sıkı bir pıhtı oluşana kadar şişeyi her 15 saniyede bir (180°'ye kadar) ters çevirin. Örneğin BCT'si, çevirme sayısıyla tahmin edilir17,18. BCT'ye dayanarak, daha ileri karakterizasyon çalışmaları için NFRCS Cm, Ch ve Cp'den iki optimum bileşim seçildi.
Ch NFRCS ve Cp NFRCS bileşimlerinin BCT'si, Li ve arkadaşları tarafından açıklanan yöntemi uygulayarak belirlendi. 19 . 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS ve Cs'yi (pozitif kontrol) ayrı Petri kaplarına (37 °C) yerleştirin. %3,8 sodyum sitrat içeren kan, kan pıhtılaşma sürecini başlatmak için 10:1 hacim oranında 0,2 M CaCl2 ile karıştırıldı. 20 µl 0,2 M CaCl2 sıçan kan karışımı örnek yüzeyine uygulandı ve boş bir Petri kabına yerleştirildi. Kontrol, Ct olmadan boş Petri kaplarına dökülen kandır. 0, 3 ve 5 dakikalık sabit aralıklarla, pıhtıyı bozmadan kabı içeren örneğe 10 ml deiyonize (DI) su ekleyerek pıhtılaşmayı durdurun. Pıhtılaşmamış eritrositler (eritrositler), deiyonize suyun varlığında hemolize uğrar ve hemoglobini serbest bırakır. Farklı zaman noktalarındaki hemoglobin (HA(t)), bir UV-Vis spektrofotometresi kullanılarak 540 nm'de (λmax hemoglobin) ölçüldü. 10 ml deiyonize suda 20 µl kanın 0 dakikasında hemoglobinin (AH(0)) mutlak emilimi referans standart olarak alındı. Pıhtılaşmış kanın bağıl hemoglobin alımı (RHA), aynı kan partisi kullanılarak HA(t)/HA(0) oranından hesaplandı.
Bir doku analizörü (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, ABD) kullanılarak, NFRK'nin hasarlı dokuya yapışma özellikleri belirlendi. Açık tabanlı silindirik bir tabağı domuz derisinin içine (yağ tabakası olmadan) bastırın. Örnekler (Ch NFRCS ve Cp NFRCS) kanül aracılığıyla silindirik kalıplara uygulanarak domuz derisine yapışma sağlandı. Oda sıcaklığında (RT) (25° C) 3 dakikalık bir inkübasyondan sonra, NFRCS yapışma gücü sabit 0,5 mm/sn hızında kaydedildi.
Cerrahi dolgu maddelerinin temel özelliği kan kaybını azaltırken kan pıhtılaşmasını artırmaktır. NFRCS'deki kayıpsız pıhtılaşma, daha önce yayınlanmış bir yöntem kullanılarak küçük değişikliklerle değerlendirildi 19. Santrifüj tüpünün bir tarafında 8 × 5 mm2 delik bulunan bir mikrosantrifüj tüpü (2 ml) (iç çapı 10 mm) yapın (açık bir yarayı temsil eder). Açıklığı kapatmak için NFRCS kullanılır ve dış kenarları kapatmak için bant kullanılır. %3,8 sodyum sitrat ön karışımını içeren mikrosantrifüj tüpüne 20 µl 0,2 M CaCl2 ekleyin. 10 dakika sonra mikrosantrifüj tüpleri kaplardan çıkarıldı ve kapların kütlesindeki artış, NFRK'dan (n = 3) kanın dışarı akışı nedeniyle belirlendi. Kan kaybı Ch NFRCS ve Cp NFRCS, Cs ile karşılaştırıldı.
NFRCS'nin ıslak bütünlüğü, Mishra ve Chaudhary21 tarafından açıklanan yönteme göre küçük değişikliklerle belirlendi. NFRCS'yi 50 ml su içeren 100 ml'lik bir Erlenmeyer şişesine yerleştirin ve bir tepe oluşturmadan 60 saniye boyunca döndürün. Toplamaya dayalı olarak görsel inceleme ve fiziksel bütünlük açısından örneklerin önceliklendirilmesi.
HFFC'nin Ct'ye bağlanma gücü, daha önce yayınlanmış yöntemler kullanılarak küçük değişikliklerle incelendi. Yüzey kaplama bütünlüğü, NFRK'yi milliQ su (Ct) varlığında akustik dalgalara (harici uyaran) maruz bırakarak değerlendirildi. Geliştirilen NFRCS Ch NFRCS ve Cp NFRCS, suyla dolu bir behere yerleştirildi ve sırasıyla 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ve 30 dakika boyunca sonikasyona tabi tutuldu. Kurutulduktan sonra, NFRCS'nin başlangıç ​​ve son ağırlığı arasındaki yüzdelik fark, malzeme kaybı yüzdesini (HFFC) hesaplamak için kullanıldı. İn vitro BCT, bağlanma gücünü veya yüzey malzemelerinin kaybını daha da destekledi. HFFC'nin Ct'ye bağlanmasının verimliliği, kan pıhtılaşması ve Ct22 yüzeyinde elastik bir kaplama sağlar.
Geliştirilen NFRCS'nin homojenliği, NFRCS'nin rastgele seçilen genel konumlarından alınan örneklerin (30 mg) BCT'si ile belirlendi. NFRCS uyumluluğunu belirlemek için daha önce belirtilen BCT prosedürünü izleyin. Beş örneğin tümü arasındaki yakınlık, Ct ağında düzgün yüzey kaplaması ve HFFC birikimi sağlar.
Nominal kan temas alanı (NBCA), daha önce bildirildiği gibi bazı değişikliklerle belirlendi. Kanı, Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ve Cs'nin iki yüzeyi arasına 20 µl kan sıkıştırarak pıhtılaştırın. 1 saat sonra, stentin iki parçası ayrıldı ve pıhtının alanı elle ölçüldü. Üç tekrarın ortalama değeri NBCA NFRCS19 olarak kabul edildi.
Dinamik Buhar Sorpsiyonu (DVS) analizi, NFRCS'nin dış ortamdan veya pıhtılaşmayı başlatan yaralanma bölgesinden suyu emme etkinliğini değerlendirmek için kullanıldı. DVS, ±0,1 µg kütle çözünürlüğüne sahip ultra hassas bir terazi kullanarak bir numunedeki buhar alımını ve kaybını gravimetrik olarak değerlendirir veya kaydeder. Doymuş ve kuru taşıyıcı gazları karıştırarak numunenin etrafında elektronik bir kütle akış kontrolörü tarafından kısmi bir buhar basıncı (bağıl nem) üretilir. Avrupa Farmakopesi kılavuzlarına göre, numunelerin nem alma yüzdesine göre numuneler 4 kategoriye ayrıldı (%0-0,012 w/w- higroskopik olmayan, %0,2-2 w/w hafif higroskopik, %2-15 orta derecede higroskopik ve > %15 çok higroskopik)23. Avrupa Farmakopesi kılavuzuna göre, numunelerin nem alma yüzdesine göre numuneler 4 kategoriye ayrıldı (%0-0,012 w/w- higroskopik olmayan, %0,2-2 w/w hafif higroskopik, %2-15 orta derecede higroskopik ve > %15 çok higroskopik)23.Avrupa Farmakopesi’nin önerileri doğrultusunda, numunelerin nem absorpsiyon yüzdesine göre numuneler 4 kategoriye ayrıldı (%0-0,012 w/w – higroskopik olmayan, %0,2-2 w/w hafif higroskopik, %2-15).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % orta derecede higroskopik ve > %15 çok higroskopik)23.根据欧洲药典指南,根据样品吸收水分的百分比,样品分为4 类（0-0,012% w/w-非吸湿性、0.2-2% a/w 轻微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23。根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 类 （（0-0,012% W/w- 吸湿 性 、 、 、 、 0,2-2% W/w 、 2-15% 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿）23。Avrupa Farmakopesi’nin önerileri doğrultusunda numuneler, numunenin absorbe ettiği nem yüzdesine göre 4 sınıfa ayrılır (ağırlıkça %0-0,012 – higroskopik olmayan, ağırlıkça %0,2-2 hafif higroskopik, ağırlıkça %2-15).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % orta derecede higroskopik, > %15 çok higroskopik) 23.NFCS X NFCS ve TsN NFCS'nin higroskopik verimliliği bir DVS TA TGA Q5000 SA analizöründe belirlendi. Bu işlem sırasında, çalışma süresi, bağıl nem (RH) ve 25°C24'te gerçek zamanlı numune ağırlığı elde edildi. Nem içeriği, aşağıdaki denklem kullanılarak doğru NFRCS kütle analiziyle hesaplanır:
MC, NFRCS nemidir. m1 – NSAID'lerin kuru ağırlığıdır. m2, belirli bir bağıl nemdeki gerçek zamanlı NFRCS kütlesidir.
Toplam yüzey alanı, numuneler 25 °C'de 10 saat boşaltıldıktan sonra sıvı nitrojenle yapılan bir nitrojen adsorpsiyon deneyi kullanılarak tahmin edildi (< 7 × 10–3 Torr). Toplam yüzey alanı, numuneler 25 °C'de 10 saat boşaltıldıktan sonra sıvı nitrojenle yapılan bir nitrojen adsorpsiyon deneyi kullanılarak tahmin edildi (< 7 × 10–3 Torr). Bu, bir sonraki adım için en uygun olanıdır. опорожнения образцов при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Toplam yüzey alanı, numuneler 25°C'de 10 saat boşaltıldıktan sonra sıvı nitrojenle yapılan bir nitrojen adsorpsiyon deneyi kullanılarak tahmin edildi (< 7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积。25°C Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом после опорожнения образцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Toplam yüzey alanı, numuneler 25°C'de (< 7 x 10-3 torr) 10 saat boşaltıldıktan sonra sıvı azotla yapılan azot adsorpsiyon deneyleri kullanılarak tahmin edildi.Toplam yüzey alanı, gözenek hacmi ve NFRCS gözenek boyutu, Avusturya'daki NOVA 1000e firmasından alınan Quantachrome ile RS 232 yazılımı kullanılarak belirlendi.
Tam kandan %5 eritrosit (seyreltici olarak tuzlu su) hazırlayın. Daha sonra HFFC'nin (0,25 ml) bir alikotunu 96 kuyulu bir plakaya ve %5 eritrosit kütlesine (0,1 ml) aktarın. Karışımı 37 °C'de 40 dakika inkübe edin. Kırmızı kan hücreleri ve serum karışımı pozitif kontrol, tuzlu su ve kırmızı kan hücreleri karışımı ise negatif kontrol olarak kabul edildi. Hemaglütinasyon Stajitzky ölçeğine göre belirlendi. Önerilen ölçekler şu şekildedir: + + + + yoğun granüler agregalar; + + + eğimli kenarlı düz tabanlı pedler; + + yırtık kenarlı düz tabanlı pedler; + düz pedlerin kenarları etrafında dar kırmızı halkalar; – (negatif) alt kuyunun ortasında ayrı kırmızı düğme 12.
NFRCS'nin hemokompatibilitesi Uluslararası Standardizasyon Örgütü (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 yöntemine göre incelendi. Singh ve arkadaşları tarafından açıklanan gravimetrik yöntem. NFRCS'nin varlığında veya yüzeyinde trombüs oluşumunu değerlendirmek için küçük değişiklikler yapıldı. 500 mg Cs, Ch NFRCS ve Cp NFRCS, 37 °C'de 24 saat boyunca fosfat tamponlu salin (PBS) içinde inkübe edildi. 24 saat sonra PBS çıkarıldı ve NFRCS, %3,8 sodyum sitrat içeren 2 ml kanla muamele edildi. NFRCS'nin yüzeyine, inkübe edilen örneklere 0,04 ml 0,1 M CaCl2 ekleyin. 45 dakika sonra, pıhtılaşmayı durdurmak için 5 ml damıtılmış su eklendi. NFRK yüzeyindeki pıhtılaşmış kan %36-38 formaldehit solüsyonuyla muamele edildi. Formaldehitle sabitlenen pıhtılar kurutuldu ve tartıldı. Tromboz yüzdesi, kan ve numune içermeyen camın (negatif kontrol) ve kan içeren camın (pozitif kontrol) ağırlığı hesaplanarak tahmin edildi.
İlk doğrulama olarak, HFFC yüzey kaplamasının, Ct'nin birbirine bağlı olmasının ve Ct ağının gözenekler oluşturma yeteneğini anlamak için örnekler optik mikroskop altında görüntülendi. NFRCS'den alınan Ch ve Cp'nin ince kesitleri bir neşter bıçağıyla kesildi. Elde edilen kesit bir cam slayt üzerine yerleştirildi, bir lamel ile kapatıldı ve kenarları yapıştırıcı ile sabitlendi. Hazırlanan slaytlar optik mikroskop altında görüntülendi ve farklı büyütmelerde fotoğraflar çekildi.
Ct ağlarındaki polimer birikimi, Rice ve ark. tarafından açıklanan yönteme dayalı floresan mikroskobu kullanılarak görüntülendi. Formülasyonda kullanılan HFFC kompozisyonu floresan boya (amaranth) ile karıştırılarak NFRCS (Ch & Cp) daha önce anlatılan yönteme göre hazırlandı. Formülasyonda kullanılan HFFC kompozisyonu floresan boya (amaranth) ile karıştırılarak NFRCS (Ch & Cp) daha önce anlatılan yönteme göre hazırlandı.Formülasyonda kullanılan HFFC kompozisyonu floresan boya (amaranth) ile karıştırılarak yukarıda belirtilen yönteme göre NFRCS (Ch ve Cp) elde edildi.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Kp）。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制备NFRCS（Ch & Kp）。Formülasyonda kullanılan HFFC kompozisyonu, daha önce de belirtildiği gibi floresan boya (Amaranth) ile karıştırılarak NFRCS (Ch ve Cp) elde edildi.Elde edilen örneklerden NFRK'nin ince kesitleri kesildi, cam slaytlara yerleştirildi ve üzerleri kapak camlarıyla kapatıldı. Hazırlanan slaytları yeşil filtre (310-380 nm) kullanılarak floresan mikroskop altında inceleyin. Ct ilişkilerini ve Ct ağındaki aşırı polimer birikimini anlamak için görüntüler 4x büyütmede alındı.
NFRCS Ch ve Cp'nin yüzey topografisi, dokunma modunda ultra keskin bir TESP konsoluna sahip atomik kuvvet mikroskobu (AFM) kullanılarak belirlendi: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Tayvan. Yüzey pürüzlülüğü, yazılım (Scanning Probe Image Processor) kullanılarak ortalama karekök (RMS) ile belirlendi. Yüzey düzgünlüğünü kontrol etmek için çeşitli NFRCS konumları 3B görüntülerde işlendi. Belirli bir alan için puanın standart sapması, yüzey pürüzlülüğü olarak tanımlanır. RMS denklemi, NFRCS31'in yüzey pürüzlülüğünü ölçmek için kullanıldı.
Ch NFRCS ve Cp NFRCS'nin yüzey morfolojisini anlamak için FESEM tabanlı çalışmalar gerçekleştirildi. Ch NFRCS ve Cm NFRCS'den daha iyi BCT gösteren Cp NFRCS'nin yüzey morfolojisini anlamak için FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo kullanıldı. FESEM çalışması, Zhao ve ark. tarafından açıklanan yönteme göre küçük değişikliklerle gerçekleştirildi. 20 ila 30 mg Ch NFRCS ve Cp NFRCS'den oluşan NFRCS, sıçan kanı ile önceden karıştırılmış 20 µl %3,8'lik sodyum sitrat ile önceden karıştırıldı. Pıhtılaşmayı başlatmak için kanla işlenmiş numunelere 20 µl 0,2 M CaCl2 eklendi ve numuneler oda sıcaklığında 10 dakika inkübe edildi. Ayrıca, fazla eritrositler NFRCS yüzeyinden tuzlu su ile durulanarak uzaklaştırıldı.
Sonraki örnekler %0,1 glutaraldehit ile muamele edildi ve daha sonra nemi gidermek için 37 °C'de sıcak hava fırınında kurutuldu. Kurutulmuş örnekler kaplandı ve analiz edildi 32 . Analiz sırasında elde edilen diğer görüntüler, tek tek pamuk liflerinin yüzeyinde pıhtı oluşumu, Ct arasında polimer birikimi, eritrosit morfolojisi (şekli), pıhtı bütünlüğü ve NFRCS varlığında eritrosit morfolojisiydi. Tedavi edilmemiş NFRCS alanları ve kanla inkübe edilen Ch ve Cp ile muamele edilmiş NFRCS alanları elementer iyonlar (sodyum, potasyum, azot, kalsiyum, magnezyum, çinko, bakır ve selenyum) açısından tarandı 33. Pıhtı oluşumu ve pıhtı homojenliği sırasında elementer iyon birikimini anlamak için tedavi edilmiş ve edilmemiş örnekler arasındaki elementer iyon yüzdelerini karşılaştırın.
Ct yüzeyindeki Cp HFFC yüzey kaplamasının kalınlığı FESEM kullanılarak belirlendi. Cp NFRCS'nin kesitleri çerçeveden kesildi ve püskürtmeyle kaplandı. Elde edilen püskürtme kaplama örnekleri FESEM tarafından gözlendi ve yüzey kaplamasının kalınlığı ölçüldü 34 , 35 , 36 .
X-ışını mikro-BT yüksek çözünürlüklü 3B tahribatsız görüntüleme sağlar ve NFRK'nin iç yapısal düzenlemesini incelemenize olanak tanır. Mikro-BT, örnekteki X-ışınlarının yerel doğrusal zayıflama katsayısını kaydetmek için örnekten geçen bir X-ışını demeti kullanır ve bu da morfolojik bilgi elde etmeye yardımcı olur. Cp NFRCS ve kanla işlenmiş Cp NFRCS'deki Ct'nin iç konumu, NFRCS37,38,39 varlığında emilim verimliliğini ve kan pıhtılaşmasını anlamak için mikro-BT ile incelendi. Kanla işlenmiş ve işlenmemiş Cp NFRCS örneklerinin 3B yapıları mikro-BT (V|tome|x S240, Phoenix, Almanya) kullanılarak yeniden yapılandırıldı. VG STUDIO-MAX yazılım sürüm 2.2 kullanılarak, NFRCS için 3B görüntüler geliştirmek üzere farklı açılardan (ideal olarak 360° kapsama) birkaç X-ışını görüntüsü alındı. Toplanan projeksiyon verileri, ilgili basit 3D ScanIP Academic yazılımı kullanılarak 3 boyutlu hacimsel görüntülere dönüştürüldü.
Ek olarak, pıhtının dağılımını anlamak için, kan pıhtılaşmasını başlatmak için NFRCS'ye 20 µl önceden karıştırılmış sitratlı kan ve 20 µl 0,2 M CaCl2 eklendi. Hazırlanan örnekler sertleşmeye bırakıldı. NFRK yüzeyi %0,5 glutaraldehit ile muamele edildi ve 30-40°C'de 30 dakika boyunca sıcak hava fırınında kurutuldu. NFRCS üzerinde oluşan kan pıhtısı tarandı, yeniden yapılandırıldı ve kan pıhtısının 3B görüntüsü görüntülendi.
Antibakteriyel analizler, daha önce açıklanan yöntem kullanılarak ve küçük değişikliklerle Cp NFRCS'de (Ch NFRCS ile karşılaştırıldığında en iyisi) gerçekleştirildi. Cp NFRCS ve Cp HFFC'nin antibakteriyel aktivitesi, bir inkübatörde Petri kaplarında agar üzerinde büyüyen üç farklı test mikroorganizması [S.aureus (gram pozitif bakteri), E.coli (gram negatif bakteri) ve beyaz Candida (C.albicans)) kullanılarak belirlendi. 105-106 CFU ml-1 konsantrasyonunda seyreltilmiş bakteri kültürü süspansiyonunun 50 ml'sini agar besiyerine eşit şekilde aşılayın. Besiyerini bir Petri kabına dökün ve katılaşmasını bekleyin. Agar plakasının yüzeyine HFFC ile doldurulacak kuyular yapıldı (HFFC için 3 kuyu ve negatif kontrol için 1 kuyu). 3 kuyuya 200 µl HFFC ve 4. kuyuya 200 µl pH 7,4 PBS ekleyin. Petri kabının diğer tarafında, katılaşmış agar üzerine 12 mm'lik bir Cp NFRCS diski yerleştirin ve PBS (pH 7,4) ile nemlendirin. Siprofloksasin, ampisilin ve flukonazol tabletleri Staphylococcus aureus, Escherichia coli ve Candida albicans için referans standartları olarak kabul edilir. İnhibisyon bölgesini elle ölçün ve inhibisyon bölgesinin dijital görüntüsünü alın.
Kurumsal etik onayı alındıktan sonra, çalışma Güney Hindistan'daki Karnataka, Manipal'deki Kasturba Tıp Eğitim ve Araştırma Koleji'nde yürütülmüştür. İn vitro TEG deney protokolü, Karnataka, Manipal'deki Kasturba Tıp Koleji Kurumsal Etik Komitesi tarafından incelenmiş ve onaylanmıştır (IEC: 674/2020). Denekler, hastane kan bankasından gönüllü kan bağışçılarından (18 ila 55 yaş arası) seçilmiştir. Ayrıca, gönüllülerden kan örneklerinin toplanması için bilgilendirilmiş onam formu alınmıştır. Doğal TEG (N-TEG), sodyum sitrat ile önceden karıştırılmış tam kan üzerindeki Cp HFFC formülasyonunun etkisini incelemek için kullanılmıştır. N-TEG, klinik olarak önemli sonuçlarda gecikme potansiyeli (rutin pıhtılaşma testleri) nedeniyle klinisyenler için sorunlar yaratan bakım noktası resüsitasyonundaki rolüyle yaygın olarak bilinmektedir. N-TEG analizi tam kan kullanılarak yapılmıştır. Tüm katılımcılardan bilgilendirilmiş onam ve ayrıntılı tıbbi geçmiş alınmıştır. Çalışmaya gebelik/doğum sonrası veya karaciğer hastalığı gibi hemostatik veya trombotik komplikasyonları olan katılımcılar dahil edilmedi. Pıhtılaşma kaskadını etkileyen ilaç kullanan denekler de çalışmadan hariç tutuldu. Tüm katılımcılara standart prosedürlere göre temel laboratuvar testleri (hemoglobin, protrombin zamanı, aktive tromboplastin ve trombosit sayısı) yapıldı. N-TEG, kan pıhtısı viskoelastisitesini, ilk pıhtı yapısını, partikül etkileşimini, pıhtı güçlenmesini ve pıhtı lizisini belirler. N-TEG analizi, çeşitli hücresel elemanların ve plazmanın toplu etkileri hakkında grafiksel ve sayısal veriler sağlar. N-TEG analizi, iki farklı hacimde Cp HFFC (10 µl ve 50 µl) üzerinde gerçekleştirildi. Sonuç olarak, 10 µl Cp HFFC'ye sitrik asitli 1 ml tam kan eklendi. 20 µl 0,2 M CaCl2 içeren TEG kabına 1 ml (Cp HFFC + sitratlı kan), 340 µl karışık kan ekleyin. Daha sonra TEG kapları, Cp HFFC41 varlığında kan örneklerinin %30'unda R, K, alfa açısı, MA, G, CI, TPI, EPL, LY ölçümleri yapmak için TEG® 5000, US'ye yüklendi.
In vivo çalışma protokolü, Kasturba Tıp Fakültesi, Manipal Yüksek Öğrenim Enstitüsü, Manipal Kurumsal Hayvan Etik Komitesi (IAEC) tarafından incelendi ve onaylandı (IAEC/KMC/69/2020). Tüm hayvan deneyleri Hayvan Deneyleri Kontrol ve Denetleme Komitesi'nin (CPCSEA) önerilerine uygun olarak gerçekleştirildi. Tüm in vivo NFRCS çalışmaları (2 × 2 cm2) dişi Wistar sıçanları (200 ila 250 g ağırlığında) üzerinde gerçekleştirildi. Tüm hayvanlar 24-26 °C'lik bir sıcaklığa alıştırıldı, hayvanların standart yem ve suya ad libitum olarak serbest erişimi sağlandı. Tüm hayvanlar rastgele farklı gruplara ayrıldı, her grup üç hayvandan oluşuyordu. Tüm çalışmalar Hayvan Çalışmaları: In Vivo Deneyler Raporu 43'e uygun olarak gerçekleştirildi. Çalışma öncesinde hayvanlara 20-50 mg ketamin (1 kg vücut ağırlığı başına) ve 2-10 mg ksilazin (1 kg vücut ağırlığı başına) karışımının intraperitoneal (ip) uygulanmasıyla anestezi uygulandı. Çalışma sonrasında örneklerin başlangıç ​​ve son ağırlıkları arasındaki fark değerlendirilerek kanama hacmi hesaplandı, üç testten elde edilen ortalama değer örneğin kanama hacmi olarak alındı.
Travma, savaş veya trafik kazasında kanamayı düzenlemede NFRCS'nin potansiyelini anlamak için sıçan kuyruğu kesme modeli uygulandı (yaralanma modeli). Kuyruğun %50'sini bir neşter bıçağıyla kesin ve normal kanamayı sağlamak için 15 saniye boyunca havaya koyun. Ek olarak, test örnekleri bir sıçanın kuyruğuna basınç uygulanarak yerleştirildi (Ct, Cs, Ch NFRCS ve Cp NFRCS). Test örnekleri için kanama ve PCT bildirildi (n ​​= 3)17,45.
Savaşta NFRCS basınç kontrolünün etkinliği, yüzeysel femoral arter modeli üzerinde araştırıldı. Femoral arter açığa çıkarılır, 24G trokarla delinir ve 15 saniye içinde kanatılır. Kontrolsüz kanama gözlendikten sonra, test örneği basınç uygulanarak delinme noktasına yerleştirilir. Test örneğinin uygulanmasından hemen sonra, pıhtılaşma süresi kaydedilir ve sonraki 5 dakika boyunca hemostatik verimlilik gözlenir. Aynı prosedür Cs ve Ct46 ile tekrarlandı.
Dowling ve ark. 47 intraoperatif kanama bağlamında hemostatik materyallerin hemostatik potansiyelini değerlendirmek için bir karaciğer yaralanması modeli önermiştir. BCT, Ct örnekleri (negatif kontrol), Cs iskeleti (pozitif kontrol), Ch NFRCS örnekleri ve Cp NFRCS örnekleri için kaydedildi. Sıçanın suprahepatik vena kavası median laparotomi yapılarak ortaya çıkarıldı. Bundan sonra, sol lobun distal kısmı makasla kesildi. Bir neşter bıçağı ile karaciğerde bir kesi yapın ve birkaç saniye kanamaya bırakın. Doğru bir şekilde tartılan Ch NFRCS ve Cp NFRCS test örnekleri, herhangi bir pozitif basınç uygulanmadan hasarlı yüzeye yerleştirildi ve BCT kaydedildi. Kontrol grubu (Ct) daha sonra yaralanmayı kırmadan basınç uyguladı ve ardından Cs 30 s47 uyguladı.
Geliştirilen polimer bazlı NFRCS'lerin yara iyileştirme özelliklerini değerlendirmek için eksizyonel yara modeli kullanılarak in vivo yara iyileştirme testleri gerçekleştirildi. Eksizyonel yara modelleri, daha önce yayınlanmış yöntemlere göre küçük değişikliklerle seçildi ve gerçekleştirildi19,32,48. Tüm hayvanlar daha önce açıklandığı gibi anestezi altına alındı. Sırt derisinde dairesel derin bir kesi yapmak için bir biyopsi delgisi (12 mm) kullanın. Hazırlanan yara bölgeleri Cs (pozitif kontrol), Ct (pamuklu pedlerin iyileşmeyi engellediğini fark ederek), Ch NFRCS ve Cp NFRCS (deney grubu) ve herhangi bir tedavi uygulanmayan bir negatif kontrol ile pansuman edildi. Çalışmanın her gününde, tüm sıçanlarda yara alanı ölçüldü. Yara alanının fotoğrafını çekmek için dijital bir kamera kullanın ve yeni bir pansuman uygulayın. Yara kapanma yüzdesi aşağıdaki formülle ölçüldü:
Çalışmanın 12. gününde yara kapanma yüzdesine göre en iyi gruptaki sıçan derileri çıkarılıp ((Cp NFRCS) ve kontrol grubu) H&E boyama ve Masson trikrom boyama ile incelendi. Çalışmanın 12. gününde yara kapanma yüzdesine göre en iyi gruptaki sıçan derileri çıkarılıp ((Cp NFRCS) ve kontrol grubu) H&E boyama ve Masson trikrom boyama ile incelendi.Çalışmanın 12. gününde yara kapanma yüzdesine göre en iyi gruptaki ((Cp NFRCS) ve kontrol grubu) sıçanların derileri çıkarılıp hematoksilen-eozin ve Masson trikrom ile boyanarak incelendi.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS) ile H&E'nin ortak çalışması ve Masson'un ortak çalışması.根据研究第12天的伤口闭合百分比,切除最佳组((Cp NFRCS) ve H&E'nin diğer bilgileri)Çalışmanın 12. gününde en iyi gruptaki (Cp NFRCS ve kontrol grupları) sıçanlar, yara kapanma yüzdesine göre hematoksilen-eozin boyama ve Masson trikrom boyama için çıkarıldı.Uygulanan boyama prosedürü daha önce açıklanan yöntemlere göre gerçekleştirildi49,50. Kısaca, %10 formalinde fiksasyondan sonra, örnekler bir dizi dereceli alkol kullanılarak dehidrate edildi. Çıkarılan dokunun ince kesitlerini (5 µm kalınlığında) elde etmek için bir mikrotom kullanın. Kontrollerin ve Cp NFRCS'nin ince seri kesitleri, histopatolojik değişiklikleri incelemek için hematoksilin ve eozin ile işlendi. Kolajen fibrillerinin oluşumunu tespit etmek için Masson'un trikrom boyası kullanıldı. Elde edilen sonuçlar patologlar tarafından kör bir şekilde incelendi.
Cp NFRCS numunelerinin kararlılığı 12 ay boyunca oda sıcaklığında (25°C ± 2°C/60% RH ± %5) incelendi51. Cp NFRCS (yüzey renk bozulması ve mikrobiyal büyüme) görsel olarak incelendi ve Malzemeler ve Yöntemler bölümünde belirtilen yukarıdaki yöntemlere göre katlama aşınma direnci ve BCT açısından test edildi.
Cp NFRCS'nin ölçeklenebilirliği ve tekrarlanabilirliği, 15x15 cm2 boyutunda bir Cp NFRCS hazırlanarak incelendi. Ek olarak, çeşitli Cp NFRCS fraksiyonlarından 30 mg numune (n = 5) çıkarıldı ve incelenen numunelerin BCT'si, Yöntemler bölümünde daha önce açıklandığı gibi değerlendirildi.
Çeşitli biyomedikal uygulamalar için Cp NFRCS bileşimlerini kullanarak çeşitli şekiller ve yapılar geliştirmeye çalıştık. Bu tür şekiller veya yapılandırmalar arasında burun kanamaları, diş prosedürleri için konik çubuklar ve vajinal kanama için silindirik çubuklar yer alır.
Tüm veri setleri ortalama ± standart sapma olarak ifade edildi ve Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, ABD) kullanılarak ANOVA ile analiz edildi ve ardından Bonferroni'nin çoklu karşılaştırma testi uygulandı (*p<0,05).
İnsan çalışmalarında gerçekleştirilen tüm prosedürler Enstitü ve Ulusal Araştırma Konseyi standartlarına ve Helsinki Bildirgesi 1964 ve sonraki değişikliklerine veya benzer etik standartlara uygundu. Tüm katılımcılar çalışmanın özellikleri ve gönüllülük esasına dayalı doğası hakkında bilgilendirildi. Katılımcı verileri toplandıktan sonra gizli kalır. İn vitro TEG deney protokolü, Kasturba Tıp Fakültesi, Manipal, Karnataka Kurumsal Etik Komitesi tarafından incelendi ve onaylandı (IEC: 674/2020). Gönüllüler kan örnekleri toplamak için bilgilendirilmiş onam imzaladılar.
Hayvan çalışmalarında gerçekleştirilen tüm prosedürler, Kastuba Tıp Fakültesi, Manipal Yüksek Öğrenim Enstitüsü, Manipal (IAEC/KMC/69/2020) yönergelerine uygun olarak gerçekleştirildi. Tasarlanan tüm hayvan deneyleri, Hayvan Deneyleri Kontrol ve Denetleme Komitesi (CPCSEA) yönergelerine uygun olarak gerçekleştirildi. Tüm yazarlar ARRIVE yönergelerini takip etmektedir.
Tüm NFRCS'lerin FTIR spektrumları analiz edildi ve Şekil 2A'da gösterilen kitosan spektrumuyla karşılaştırıldı. Kitosanın karakteristik spektral tepeleri (kaydedilen) 3437 cm-1'de (OH ve NH gerilmesi, örtüşme), 2945 ve 2897 cm-1'de (CH gerilmesi), 1660 cm-1'de (NH2 suşu), 1589 cm-1'de (N–H bükülmesi), 1157 cm-1'de (köprü gerilmesi O-), 1067 cm-1'de (gerilme C–O, sekonder hidroksil), 993 cm-1'de (gerilme CO, Bo-OH) 52.53.54. Ek Tablo S1, kitosan (muhabir), saf kitosan, Cm, Ch ve Cp için FTIR NFRCS emilim spektrum değerlerini gösterir. Tüm NFRCS'lerin (Cm, Ch ve Cp) FTIR spektrumları, herhangi bir önemli değişiklik olmaksızın saf kitosanla aynı karakteristik emilim bantlarını gösterdi (Şekil 2A). FTIR sonuçları, NFRCS'yi geliştirmek için kullanılan polimerler arasında kimyasal veya fiziksel etkileşimlerin olmadığını doğruladı ve kullanılan polimerlerin inert olduğunu gösterdi.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ve Cs'nin in vitro karakterizasyonu. (A) sıkıştırma altında kitosan ve Cm NFRCS, Ch NFRCS ve Cp NFRCS kompozisyonlarının birleşik FTIR spektrumlarını temsil eder. (B) a) NFRCS Cm, Ch, Cp ve Cg'nin tam kan alım oranı (n = 3); Ct örnekleri daha yüksek bir BAR gösterdi çünkü pamuklu çubuk daha yüksek bir emilim verimliliğine sahiptir; b) Kan emiliminden sonra kan Emilen örneğin gösterimi. Test örneği C'nin BCT'sinin grafiksel gösterimi (Cp NFRCS en iyi BCT'ye sahipti (15 s, n = 3)). C, D, E ve G'deki veriler ortalama ± SD olarak gösterildi ve hata çubukları SD'yi temsil ediyor, ***p < 0,0001. C, D, E ve G'deki veriler ortalama ± SD olarak gösterildi ve hata çubukları SD'yi temsil ediyor, ***p < 0,0001. C, D, E ve G'deki değişiklikler, aynı zamanda ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E ve G'deki veriler ortalama ± standart sapma olarak sunulmuştur ve hata çubukları standart sapmayı temsil etmektedir, ***p<0,0001. C、D、E veG 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0,0001。 C、D、E veG 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p < 0,0001。 C, D, E ve G'de değişiklik yapmak, aynı zamanda daha iyi bir seçim yapmak için, daha sonra önceden planlanmış bir şekilde yapılmasına izin verir. стандартное отклонение, ***p <0,0001. C, D, E ve G'deki veriler ortalama ± standart sapma olarak gösterilmiştir, hata çubukları standart sapmayı temsil eder, ***p<0,0001.