"Düşünceli, kendini adamış küçük bir vatandaş grubunun dünyayı değiştirebileceğinden asla şüphe etmeyin. Aslında, oradaki tek grup odur."
Cureus'un misyonu, araştırma gönderiminin pahalı, karmaşık ve zaman alıcı olabildiği uzun süredir devam eden tıbbi yayıncılık modelini değiştirmektir.
Trombositten zengin plazma/prp, doku rejenerasyonu, trombosit aktivasyonu, glikoz proliferatif tedavisi, trombositler, proliferatif tedavi
Bu makaleyi şu şekilde atıfta bulunun: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, ve diğerleri. (17 Mayıs 2022) Glikozun trombosit sayısı ve hacmi üzerindeki etkisi: rejeneratif tıp için çıkarımlar. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Trombositten zengin plazma (PRP) ve hipertonik glikoz solüsyonları rejeneratif tıpta enjeksiyon için yaygın olarak kullanılır, bazen birlikte kullanılır. Hipertonik glikozun trombosit lizisi ve aktivasyonu üzerindeki etkisi daha önce bildirilmemiştir. Yükselmiş glikoz konsantrasyonlarının trombosit ve eritrosit sayıları ile PRP ve tam kandaki (WB) hücre hacimleri üzerindeki etkisini test ettik. Tüm glikoz karışımlarının PRP veya tam kanla karıştırılmasıyla trombosit sayısında kısmi lizisle tutarlı olarak hızlı bir kısmi azalma meydana geldi. İlk dakikadan sonra trombosit sayıları stabil kaldı ve bu durum aşırı hipertonisiteye (>2000 mOsm) rezidüel trombositlerin hızla uyum sağladığını düşündürdü. İlk dakikadan sonra trombosit sayıları stabil kaldı ve bu durum aşırı hipertonisiteye (>2000 mOsm) rezidüel trombositlerin hızla uyum sağladığını düşündürdü. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. İlk dakikadan sonra trombosit sayısı stabil kaldı ve bu durum, kalan trombositlerin aşırı (>2000 mOsm) hipertonisiteye hızla uyum sağladığını gösterdi.第一分钟后，血小板计数保持稳定,表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm (mOsm)2000 mOsm. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. İlk dakikadan sonra trombosit sayısı stabil kaldı ve bu durum, kalan trombositlerin aşırı (>2000 mOsm) hiperozmolar duruma hızla adapte olduğunu gösterdi.%25 ve üzeri glikoz konsantrasyonları, ortalama trombosit hacminde (MPV) önemli bir artışa neden oldu ve bu da trombosit aktivasyonunun erken bir evresini gösterdi. Trombosit lizisi veya aktivasyonunun meydana gelip gelmediğini ve hipertonik glikoz enjeksiyonunun tek başına veya PRP ile kombinasyon halinde ek klinik fayda sağlayıp sağlamayacağını belirlemek için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır.
1950'lerde Amerikalı cerrah George Hackett, tendonlara ve bağlara proliferatif bir solüsyon enjekte ederek birçok hastada eklem ve sırt ağrısını kalıcı olarak giderebileceğini keşfetti. Tavşanlar üzerinde yaptığı deneyler, proliferatif terapi adını verdiği tedavinin tendonların büyümesine ve güçlenmesine neden olduğunu gösterdi. Histolojik çalışmalar, bu süreçte yeni kolajenin üretildiğini doğruladı [1].
İlk birkaç on yıl boyunca, birçok farklı dağıtım çözümü denendi. 1990'lara gelindiğinde, çoğu uygulayıcı yüksek konsantrasyonlarda glikozun en güvenli ve en etkili yöntem olduğunu düşünüyordu. Ancak, etki mekanizması hala belirsizliğini koruyor.
Hackett'in çalışmasının ardından 20. yüzyılda birkaç klinik çalışma yürütüldü. Ancak 2000'lerde ilgi yeniden canlandı ve bel ağrısı [2], diz osteoartriti [3] ve lateral epikondilit [4] tedavisi için proliferatif terapinin birkaç başarılı klinik çalışması tamamlandı.
Doku rejenerasyonu kök hücrelerin katılımını gerektirir. Bu nedenle, yüksek glikoz konsantrasyonları bir şekilde kök hücrelerin göçünü, replikasyonunu ve farklılaşmasını tetiklemelidir. Trombositlerin haberci olarak hareket edebileceğini ve yüksek glikoz konsantrasyonlarının trombositlerin sitokin ve büyüme faktörleri salmasına neden olabileceğini ve böylece rejeneratif süreçleri, özellikle kök hücre göçünü yüksek glikoz konsantrasyonlarına sahip alanlara teşvik edebileceğini varsayıyoruz.
Trombosit aktivasyonu her zaman hücre içi kalsiyumdaki artıştan önce gelir [5]. Liu ve arkadaşları 2008'de yüksek glikoz seviyelerinin plazma membranındaki geçici reseptör potansiyeli kanonik tip 6 (TRPC6) kanallarının aktivitesini artırdığını ve bunun da trombositlere kalsiyum iyonlarının akışına yol açtığını gösterdi [6]. Başka bir çalışma, mikrotübül marjinal bölgesinin kalsiyum iyonlarına maruz kalmasının marjinal bölgenin gevşemesine, genişlemesine ve deformasyonuna neden olduğunu ve bunun da disk şeklinden küresel şekle dönüşerek ortalama trombosit hacmi (MPV) ile sonuçlandığını gösterdi [7].
Bu çalışmadaki hipotezimiz, trombositlerin yüksek konsantrasyonlarda glukoza maruz kalmasının mikrotübül marjinal bölgesini ve hücre içi ortamı etkileyerek MPV'de artışa yol açmasıdır.
Tüm katılımcılar çalışmanın detayları açıklandıktan ve örnekleri almadan önce bilgilendirilmiş onam formunu imzaladılar. Bu çalışmada, yalnızca hematokriti %2'den büyük olan PRP örnekleri kullanıldı, böylece eritrosit (eritrosit) sayısı ve kırmızı kan hücrelerinin ortalama korpusküler hacmi (MCV) karşılaştırma için dahil edilebildi.
Çalışma dört fazda yürütüldü, ilk faz PRP ve kalan faz tam kandı (Tablo 1). Daha önce açıklandığı gibi [8], tüm bağıl santrifüj kuvvetleri (RCF, g-kuvvet) santrifüjlü şırıngadaki kan kolonunun orta noktasından (Rmid, cm cinsinden) hesaplandı. Trombosit duyarlılığının bir belirteci olarak MPV'yi ve potansiyel trombosit lizinin bir göstergesi olarak trombosit sayısını kullanmayı seçtik; her ikisi de standart hematoloji analizörlerinde kolayca ölçülebilir.
Birinci aşamada, 47 gönüllü kan örnekleri bağışladı - bir tüp etilendiamintetraasetik asit (EDTA) ve bir PRP tam kan örneği (sodyum sitratla (NaCl, %3) antikoagüle edilmiş) (Tablo 1). Salıncaklı kolu hemen tüpe yerleştirin. EDTA örneklerinde tam kan sayımı (CBC) üç kez gerçekleştirildi ve NaCl örnekleri CBC analizi için üç kez analiz edildi ve ardından PRP yukarıda açıklanan çeşitli yöntemlerle hazırlandı [8]. Tüm PRP örnekleri 900-1000 g'de santrifüjleme ile hazırlandı. Her PRP örneğini bir girdap karıştırıcıda 5-10 saniye karıştırın, ardından beş adet 0,5 ml'lik alikotu tüplere bölün.
Trombosit maruziyetinin yükselmiş glikoz konsantrasyonları üzerindeki etkisini değerlendirmek için, %0, %5, %12,5, %25 ve %50 glikozun eşit miktarları (0,5 ml) suda trombosit örnekleriyle karıştırılarak %0, %2,5, %6,25, %12,5 ve %25'lik glikoz karışımı konsantrasyonları elde edildi ve tüpler bir test tüpü çalkalayıcıda 15 dakika karıştırıldı. Her karışımın TAC'si 15 dakika sonra üçlü olarak analiz edildi. Trombosit sayısı (PLT), RBC sayısı, MCV ve MPV her tüp için ortalaması alındı ​​ve tüm PRP örnekleri için ortalama trombosit sayısı, RBC sayısı, MCV ve MPV hesaplandı.
Veri toplamanın ilk aşaması tamamlandıktan sonra, D50W eklendikten sonra PRP trombositlerinde trombosit hacminde önemli bir artış fark ettik. PRP trombositleri kandaki tüm trombositleri temsil etmeyebilir ve PRP ortamı WB ortamından farklıdır. Bu nedenle, tam kana D50W eklemenin etkisine ilişkin ikinci bir aşama denemesi yapmaya karar verdik.
İkinci tur için, Analiz bölümünde açıklandığı gibi, ilk seriden elde edilen sonuçlara dayanarak 30'luk bir örneklem büyüklüğü seçtik. Bu seride, 20 gönüllü kan örnekleri bağışladı (Tablo 1). Tam kan (1,8 ml) 3 ml'lik bir şırıngaya çekildi ve 0,2 ml %40 NaCl ile antikoagüle edildi. Tam kan şırıngası bir vorteks karıştırıcı ile beş saniye karıştırıldı ve tam kan sayımı üç kez analiz edildi. Analizden sonra, antikoagüle kana 5 ml'lik bir şırıngadaki 2 ml %50 glukoz eklendi (son glukoz konsantrasyonu yaklaşık %25 idi (D25) ve 30 dakika boyunca bir çalkalama tüpüne yerleştirildi. 30 dakika sonra, WB şırıngalarındaki D25/tam kan sayımı üç kez analiz edildi. Şırınga başına trombosit sayısı, alyuvar sayısı, MCV ve MPV ortalaması alındı ​​ve her numune için glukoz eklenmeden önce ve sonra ortalama PLT, alyuvar sayısı, MCV ve MPV hesaplandı.
Tam kandaki trombositler minimal invaziv enjeksiyon nedeniyle proliferatif glukoz tedavisi sırasında genellikle hipertonik glukoza maruz kaldığından ve PRP'yi enjeksiyondan hemen önce hipertonik glukozla birleştirmek yaygın olmadığından, Bölüm 1. Adım Üç ve dörtte hipertonik glukozu WB ile kombinasyon halinde incelemeye karar verdik. Her aşamada, 20 gönüllü kan antikoagülanları için 7-8 ml ACD-A (trisodyum sitrat içeren asit (22,0 g/l), sitrik asit (8,0 g/l) ve glukoz (24,5 g/l), dekstroz sitrat çözeltisi) bağışladı (Tablo 1). MPV'deki artışla ilişkili eşik yüzdesini belirlemek için yalnızca %12,5'ten büyük glukoz karışımları kullanıldı. Üçüncü aşamada, bir test tüpüne 1 ml kan yerleştirilir. Daha sonra, tüpe 1 ml %30 glikoz, %40 glikoz veya %50 glikoz ekleyerek 10 saniye boyunca bir vorteks mikserde kanı karıştırın ve sırasıyla %15, %20 ve %25'lik bir son glikoz konsantrasyonu elde edin. Glikoz kan örnekleri, karıştırıldıktan hemen sonra tam kan sayımı için analiz edildi ve 30 dakika boyunca her iki dakikada bir tekrarlandı.
İlk karıştırma sırasında, 1:1 hipertonik glikoz ve WB veya PRP eklenmesi trombositleri birkaç saniye boyunca %25'in üzerindeki konsantrasyonlara maruz bırakır. Dördüncü adımda, hipertonik glikozun etkisini minimal başlangıç ​​tepe konsantrasyonlarıyla değerlendirmek ve glikozun etkisinin üst sınırını test etmek için D25W veya D50W'ye sadece az miktarda kan ekledik. Bir tüpe 1 ml D25W veya D50W koyun ve örneği 10 saniye boyunca vortekslerken 0,2 ml WB ekleyin. Bu durumlarda, kan, Faz 3'teki gibi son konsantrasyonun %50 üzerindeki bir konsantrasyon yerine, son konsantrasyonun yaklaşık %20 üzerindeki bir konsantrasyonda glikoza maruz bırakıldı ve %20,8 ve %41,6'lık son glikoz konsantrasyonları elde edildi. Karma örnekler, adım 3'tekiyle aynı zaman aralığında analiz edildi.
Her glikoz seyreltme serisinin ilk adımında, pilot çalışma için uygun örneklem büyüklüğü olduğundan 30 örnek alındı ​​[9]. Her fazın sonunda (ilk faz dahil), bir popülasyonda sürekli çıktı değişkeninin ortalamasını tahmin etmek için gereken örneklem büyüklüğünü belirlemek için kullanılan formülü kullanarak örneklem büyüklüğünün yeterliliğini değerlendirin. Formül n = Z2 x SD2 /E2. Bu denklemde, Z Z puanı, SD standart sapma ve E istenen hatadır [10]. Alfa değerimiz 0,05'tir, bu da 1,96'lık bir Z değerine karşılık gelir ve 5'lik bir hata bekliyoruz (yüzde olarak). Bu nedenle n = (1,962 x SD2) / 52 için çözüyoruz. Sonuçlar, her aşama için gereken örneklem büyüklüğünün toplanan gerçek sayıdan daha küçük olduğunu gösterdi.
1, 3 ve 4. periyotlarda birden fazla glikoz konsantrasyonu kullanılarak, farklı glikoz konsantrasyonlarının etkisi, zaman 0 ile sonraki her bir zaman arasındaki kesirli değişimin karşılaştırılması yoluyla analiz edildi (faz 1 15 dakikada, periyot 3 15 dakikada). ve 15 saniyede dört, sonra her iki dakikada bir.) Her bir zaman periyodu için değişim oranları, veriler Shapiro-Wilk normallik testi ile belirlendiği gibi normal bir dağılıma uymadığından Mann-Whitney U testi kullanılarak karşılaştırıldı. Birinci, üçüncü ve dördüncü adımlarda (toplamda beş) birkaç grubun (beş) 1'e 1 analizi yapıldığından, istenen alfa değerini ≤0,01'e ancak ≤0,05'e ayarlamamak için bir Bonferroni düzeltmesi yapıldı.
Hipertonik dekstrozun tüm konsantrasyonlarında trombosit sayısında azalma ve PRP trombositlerinde >%12,5 dekstroz konsantrasyonunda MPV artışı: PRP trombosit sayıları, yönteme bağlı olarak (gösterilmemiştir) başlangıç ​​tam kan konsantrasyonuna kıyasla bir ila beş kat arttı. Hipertonik dekstrozun tüm konsantrasyonlarında trombosit sayısında azalma ve PRP trombositlerinde >%12,5 dekstroz konsantrasyonunda MPV artışı: PRP trombosit sayıları, yönteme bağlı olarak (gösterilmemiştir) başlangıç ​​tam kan konsantrasyonuna kıyasla bir ila beş kat konsantrasyonda artmıştır. Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы ve увеличение MPV в тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровью, в Yöntemden tasarruf edin (hiçbir şekilde). Tüm hipertonik dekstroz konsantrasyonlarında trombosit sayısında azalma ve PRP trombositlerinde >%12,5 dekstroz konsantrasyonunda MPV artışı: PRP trombosit sayısı, yönteme bağlı olarak (gösterilmemiştir) başlangıç ​​tam kanına kıyasla 1-5 kat arttı. ).在> 12.5%增加:与基线全血相比,PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍,因方法而异(未描述）。 >%12,5 glikoz konsantrasyonunda, yüksek glikoz konsantrasyonu kan sayımını düşürür, PRP kan MPV'si artar: PRP kan sayımı, 与基线全血 ile karşılaştırıldığında, konsantrasyondan (açıklanmadı) 1 ila 5 kat artar. Konut kredileri >%12,5 ve konut kredileri için uygun krediler тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- 5 кратных концентраций по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (hiçbir описано ). Glukoz konsantrasyonları >%12,5 olduğunda, tüm hipertansif glukoz konsantrasyonları trombosit sayısını düşürdü ve PRP trombositlerinde MPV'yi artırdı: PRP trombosit sayısı, yönteme bağlı olarak (açıklandığı gibi) başlangıç ​​tam kan konsantrasyonlarına kıyasla 1 ila 5 kat arttı.Şekil 1'de, trombosit sayısının, su ile seyreltildikten sonra yaklaşık %75 oranında, farklı glikoz konsantrasyonları ile 15 dakikalık seyreltme sonrasında ise, bazal PRP ve hacme göre ayarlanmış 1:1 seyreltme (hacim düzeltmeli 1-k1) ile karşılaştırıldığında %20-30 oranında azaldığı görülmektedir.
Her seyreltmedeki hücre sayısı, seyreltme öncesi orijinal sayının bir kesri olarak ifade edilir.
MPV, PRP üretimi sırasında minimal olarak azaldı, su veya glikozda %12,5'e kadar seyreltme konsantrasyonlarında daha fazla değişiklik olmadan (%25 PRP glikoz karışımları dahil) ve %50 glikoz solüsyonunda seyreltmeden sonra %20'den fazla arttı (Şekil .2). ). Buna karşılık, eritrositler H2O dışındaki herhangi bir seyreltmede hacimde önemli bir değişiklik göstermedi.
Her seyreltmedeki hücrelerin ortalama hacmi, seyreltme öncesi orijinal hacmin yüzdesi olarak ifade edilir.
%50 glikoza maruz kalan BC'de (25% glikozla formüle etmek için) trombosit sayısında benzer ancak daha az belirgin bir azalma ve CVR'de artış gözlemlendi. Tablo 2, %50 dekstrozda seyreltilmiş tam kandaki hücre sayılarını ve hücre hacimlerini %50 dekstrozda seyreltilmiş faz 1 PRP verileriyle karşılaştırır. RBC sayısındaki ve RBC MCV'deki değişiklikler belirgin değildi ve dikkatimizin odağı değildi.
SD = standart sapma, MD = gruplar arasındaki ortalama fark, SE = ortalama farkın standart sapması, RBC = eritrositler, PLT = trombositler, PRP = trombositten zengin plazma, WB = tam kan
D50W'nin WB'ye eklenmesinden sonra, seyreltme ayarlı trombosit kaybı yüzdesi %7,7 (310±73'e karşı 286±96) iken, D50W'de PRP seyreltmesinde bu oran %17,8'di (664±348'e karşı 544±277). MPV WB %16,8 arttı (10,1 ± 0,5'ten 11,8 ± 0,6'ya), MPV PRP ise %26 arttı (9,2 ± 0,8'e karşı 11,6 ± 0,7). Her ne kadar hem trombosit sayısı azalmasında hem de MPV artışında ortalama farklar PRP ile anlamlı derecede daha fazla olsa da, WB içindeki trombosit sayısı azalmasındaki değişiklikler neredeyse anlamlıydı (310 ± 73 ila 286 ± 96 (-%7,7); p = .06) ve MPV'deki artış anlamlıydı (10,1 ± 0,5 ila 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001). Her ne kadar hem trombosit sayısı azalmasında hem de MPV artışında ortalama farklar PRP ile anlamlı derecede daha fazla olsa da, WB içindeki trombosit sayısı azalmasındaki değişiklikler neredeyse anlamlıydı (310 ± 73 ila 286 ± 96 (-%7,7); p = .06) ve MPV'deki artış anlamlıydı (10,1 ± 0,5 ila 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001).Her ne kadar hem trombosit sayısındaki azalma hem de CVR artışındaki ortalama farklar PRP ile anlamlı derecede daha fazla olsa da, WB içindeki trombosit sayısındaki azalmadaki değişimler neredeyse anlamlıydı (310 ± 73 ila 286 ± 96 (-%7,7); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (10,1 ± 0,5 ila 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV'deki artış anlamlıydı (10,1 ± 0,5'ten 11,8 ± 0,6'ya (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大,但WB内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (%-7,7);p = 0,06）ve MPV的增加是显着的（10,1 ± 0,5 ve 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 ， 但 但 内血小板 计数10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001）。WB içindeki trombosit sayısındaki azalmadaki değişim neredeyse anlamlıydı (310 ± 73'ten 286 ± 96'ya (-%7,7); p = 0,06), ancak PRP'de trombosit sayısındaki düşüş ve MPV artışında anlamlı derecede daha büyük ortalama farklılıklar vardı ve MPV'deki artış anlamlıydı.(10,1 ± 0,5 ila 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5'ten 11,8 ± 0,6'ya (+16,8) p < 0,001).
MPV'de anlamlı bir değişiklik görmek için %20'lik son glikoz konsantrasyonu gerekiyordu, ancak MPV'deki değişiklik %25'lik son konsantrasyonda daha belirgindi. Trombosit kaybı ilk düşüşten sonra stabilize oldu. CVR'de başlangıçta keskin bir düşüş olduğunu fark ettik, ancak CVR, %20 ve %15'lik son glikoz konsantrasyonlarında gözlemlenen CVR seviyelerinden önemli ölçüde daha yüksek olan %25'lik son glikoz konsantrasyonunda hızla düzeldi (Şekil 3 ve Tablo 3'ün solunda; gölgeli kutular). 0,01'lik bir Bonferroni düzeltmesiyle p-değerleri ​​≤ alfa olduğunu gösterir). Ayrıca, 0-15 saniyelik başlangıç ​​fazında gözlemlenen ve daha sonra sabit kalan (15 saniyeden 30 dakikaya; tablo 4'ün solunda) PLT sayısında başlangıçta keskin bir düşüş de vardı.
Çeşitli konsantrasyonlarda glikozun tam kana eklenmesi, MPV'de başlangıçta hızlı bir düşüşe ve ardından %20'den fazla konsantrasyona bağlı bir iyileşmeye neden oldu. Efsane, seyreltmeden sonraki glikoz konsantrasyonunu göstermektedir. D15, D20 ve D25, 1:1 seyreltmede gerçekleştirildi. D21 ve D41, 1:5 seyreltmede gerçekleştirildi.
Tablo 4 hipertonik glikozda seyreltildiğinde trombosit sayısındaki değişimi göstermektedir. 1:1 seyreltmede ve 1:5 seyreltmede PLT sayılarındaki ani düşüş arasında doz bağımlı bir ilişki gözlemledik. 1:1 seyreltmeleri tek grup olarak 1:5 seyreltmelerle karşılaştırdığımızda, 1:1 grubunda trombosit sayısında 1:5 grubundan daha az ani bir düşüş görüldü 66±48.000 (%23) ile 99±69.000 (%37). , p = 0,014) 1:5 grubunda. İlk ölçüm noktasındaki ilk düşüşten sonra, trombosit sayısı glikoz yüzdesi olarak stabilize oldu (Şekil 4).
Tam kan glikoza 1:1 oranında eklendiğinde, trombosit sayısı yaklaşık %25 oranında azalır. Ancak, tam kan 1:5 oranında eklendiğinde, azalma çok daha fazlaydı - yaklaşık %50.
%41 glikoz, MPV'yi %25 veya %21'den daha hızlı ve daha dramatik bir şekilde artırdı. MPV sonuçları Şekil 3'te gösterilmiştir. Diğer tüm seyreltmelerde, %50 glikoz eklendikten sonra MPV'de ani bir ilk düşüş gözlenmedi. %25 glikoz kullanıldığında (son seyreltmede glikoz konsantrasyonu %20,8), MPV'deki değişim 1:1 seyreltmede %20 glikozdaki değişime benzerdi (Şekil 3). MPV'deki değişimler başlangıçta %41 karışık konsantrasyonda %25'tekinden daha büyük olsa da, 16 dakika sonra %41 ile %25 arasındaki MPV farkı artık anlamlı değildi (Tablo 3, sağ). Ayrıca %25 glikozun MPV'yi %20,8'den daha etkili bir şekilde artırması da ilginçtir.
Bu in vitro çalışma hipotezimizi kısmen doğruladı. Dekstroz karışımıyla kısmi trombosit lizi potansiyeli, trombositlerin aşırı hipertonisiteye hızlı uyum sağlaması ve hipertonik dekstrozun %25'ten fazla konsantrasyonlarına yanıt olarak MPV'de önemli bir artış olduğu gösterildi. Dekstroz karışımıyla kısmi trombosit lizi potansiyeli, trombositlerin aşırı hipertonisiteye hızlı uyum sağlaması ve hipertonik dekstrozun %25'ten fazla konsantrasyonlarına yanıt olarak MPV'de önemli bir artış olduğu gösterildi. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов до экстремального гипертонуса ve значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию deкстрозы > %25. Dekstroz ile potansiyel kısmi trombosit lizi, aşırı hipertonisiteye karşı hızlı trombosit akomodasyonu ve hipertonik dekstroz düzeylerine >%25 yanıt olarak MPV'de anlamlı bir artış gösterildi.它显示出通过葡萄糖混合物潜在的部分血小板溶解，血小板快速适应极端高渗，以及响应> %25'i MPV'ye aktarılıyor.它 显示 出 通过 葡萄糖 潜在 的 部分 血小板 溶解 血小板 快速 适应 极端 高渗 , 以及响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。. Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу ve значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > %25. Glukoz karışımları ile potansiyel kısmi trombosit lizi, aşırı hipertonisiteye hızlı trombosit adaptasyonu ve hipertonik glukoza >%25 yanıt olarak MPV'de anlamlı artış gösterir.Başlangıçtaki artış %41,6 glukoz maruziyetinde maksimumdu, ancak MPV'deki artış maruziyetten yaklaşık 20 dakika sonra %25 glukoz maruziyetine yaklaştı.
Trombosit konsantrasyonu glikozdan etkilenir. PLT miktarının tüm glikoz seyreltmelerinde azaldığını fark ettik. PRP serisinin H2O (0%) seyreltmelerindeki trombosit sayısındaki keskin düşüş ozmotik lizisle ilişkili olabilir. Alternatif olarak, bu trombosit kümelenmesinin neden olduğu bir eser olabilir, ancak bu bu seyreltmede MPV değişiminin olmamasıyla çelişir. Bu bulgu, bazı trombositlerin hipoosmolariteye karşı çok hassas olduğu anlamına gelir.
Tüm 1:1 glikoz seyreltmelerinde, PLT miktarı D5W'de bile (252 mOsm'de hipotonik) %20-30 oranında azaldı; bu, hem PLT hem de MPV'nin konsantrasyonda üç kat artışta değişmeden kalması nedeniyle glikozun spesifik bir ozmotik olmayan etkisine işaret ediyor olabilir. glikoz. D5W'den D25W'ye. Aslında, PLT konsantrasyonları artan ozmolariteyle birlikte hafifçe artma eğilimindeydi.
PLT'deki 1:1 ve 1:5 seyreltmeler arasındaki azalma, çözünme etkisinin başlangıç ​​ve son glikoz konsantrasyonuna bağlı olduğu anlamına gelir. Eğer sadece başlangıç ​​konsantrasyonuna bağlı olsaydı, o zaman 1:1 konsantrasyonları arasında PLT azalmasında bir fark görmeyi beklerdik. Ama biz görmedik. Lizis etkisi sadece son glikoz konsantrasyonuna bağlıysa, o zaman %20 1:1 seyreltme ile %20,8 1:5 seyreltme arasında çok fazla fark beklemiyoruz. Ve yine de başardık.
Trombosit lizisi nedeniyle trombosit kaybı meydana gelirse, kısmi bir lizat oluşur ve ardından sitokinler ve büyüme faktörleri hücre dışı ortama salınır. Birkaç çalışma, trombosit lizatının bir proliferasyon solüsyonu olarak PRP kadar etkili olduğunu göstermiştir [11]. PRP'nin kendisinin proliferasyonun tedavisi için etkili bir solüsyon olduğu gösterilmiştir [12-14].
Etkin olmayan trombositler, birkaç iç yapı ile güçlendirilmiş bir disk şeklinde dolaşır. Aktivasyon sırasında daha küresel veya amip şekli alırlar ve bu da hacimde bir artışa neden olur. Hacimdeki artış, açık tübül sisteminin (OCS) ekstrüzyonu ve membrana ekzositik granüllerin eklenmesinin sonucu olan yüzey alanında bir artış gerektirir. Hipertonik glikoz tarafından indüklenen MPV'deki artışın bu mekanizmalardan birini veya her ikisini de içerip içermediği henüz belirlenmemiştir, ancak ikincisiyse, MPV'deki artış degranülasyonu gösterir.
Bu çalışmada PRP veya tam kan trombositlerinde yüksek konsantrasyonda glikoza maruz kalmanın, 15 dakika içerisinde sırasıyla %25 ve %41,6 glikoz konsantrasyonunda MPV'de artışa yol açtığı gösterilmiştir.
Trombosit MPV'sindeki artış, kalsiyum akışına yanıt olarak çevredeki mikrotübül düğümlerinin genişlemesinden kaynaklanıyor olabilir. Liu ve ark. Glikozun, trombosit TRPC6 kanalı aracılığıyla kalsiyum akışını düzenlediği gösterilmiştir [6]. Hipotezimiz, glikozun mikrotübül düğümlerinin gevşemesini sağlayarak MPV'de artışa ve trombosit duyarlılığına ve/veya aktivasyonuna yol açmasıdır. Ancak sonuçlarımıza bakılırsa, bu hikayenin yalnızca bir parçasıdır. Testlerimizde, D25W'nin altındaki hiçbir konsantrasyon MPV'de artışa neden olmadı. %12,5 ile %25 arasındaki glikoz konsantrasyonlarına maruziyeti test etmediğimizi göz önünde bulundurarak, faz 1 sonuçlarımız, bu glikoz konsantrasyonları aralığında MPV'de artışa yol açan bir eşik olabileceğini düşündürmektedir. Aşama 3 ve 4'teki daha ileri testler, %20-25 glikozun bunun için eşik gibi göründüğünü gösterdi, ancak bunun nedeni hala belirsizliğini koruyor.
Ayrıca santrifüjlemeden sonra MPV'de yaklaşık %9'luk bir azalma gözlemledik. MPV'deki bu azalmanın santrifüjün RBC tabakasında sıkışan daha büyük ve daha yoğun trombositlerden kaynaklanıp kaynaklanmadığı açık değildir. Bu gözlem klinisyenler için önemli olabilir çünkü PRP trombositlerinin WB trombositlerinin daha küçük ve daha az yoğun bir alt kümesi olduğunu ima edebilir.
Önceki bir çalışmada, manuel yöntemlerle PRP hazırlamanın ucuz olduğunu gösterdik [8]. Glikoz doku trombositlerini veya PRP'yi duyarlı hale getirerek aktivasyona karşı daha duyarlı hale getirirse veya PRP kısmi lizat özellikleriyle üretilirse, bu rejenerasyonu artırabilir ve terapiye olan ihtiyacı azaltabilir. Bu nedenle, PRP ve yüksek oranda konsantre glikoz kombinasyonu, yalnızca PRP veya glikozdan daha uygun maliyetli olabilir.
Çalışmamızın birkaç eksikliği var. Birincisi, birkaç farklı yöntemle elde edilen PRP kullanıyoruz. Bu çelişkili sonuçlara yol açabilir. İkincisi, trombosit aktivasyonunun gerçekleşip gerçekleşmediğini daha doğru bir şekilde belirlemek için örneklerimizin hiçbirinin biyokimyasal analizini yapamadık. Alfa granül degranülasyonunun derecesini veya varlığını daha iyi anlamak için P-selektin, trombosit faktörü 4, monosit trombosit agregatları veya diğer trombosit aktivasyonu belirteçlerini ölçmek istiyoruz, ancak bu bu çalışmanın kapsamı dışındadır. Üçüncüsü, glikoza maruz kalan trombositlerdeki MPV'deki artışın mikrotübül düğümleri üzerindeki etkiden kaynaklandığını elektron mikroskobu veya diğer yöntemlerle doğrulayamadık.
WB veya PRP'nin %25 glikoz içeren karışımları, trombosit aktivasyonunun başlangıcını işaret ederek MPV'yi artırdı, ancak bu çalışma agregasyon veya degranülasyonun ilerlemesini göstermedi. Hipertonik glikoz karışımı, muhtemelen litik bir etkiyi temsil eden trombosit kaybına neden oldu. Trombositlerin kısmi aktivasyonu veya lizi, trombosit enjeksiyonundan sonra doku rejenerasyonuna neden olabilir. Bu değişikliklerin hangi klinik sonuçlara yol açabileceği net değildir. Daha ileri çalışmalar, aktivasyon veya lizisin daha doğru ölçümlerini gösterdi ve hipertonik glikoz karışımlarının WB veya PRP ile farklı klinik etkilerini değerlendirdi.
Glikoz proliferatif tedavisi, klinik araştırmaları hızla genişleten ve destekleyen basit ve ucuz bir rejeneratif tedavidir. Bu çalışma, doğrulanırsa proliferatif tedavinin rejeneratif mekanizmasının bir kısmını anlamamıza yardımcı olabilecek fizyolojik bir mekanizma önermektedir.
Missouri Üniversitesi, Kansas City Tıp Fakültesi, Kansas City, ABD'de Biyomedikal ve Sağlık Bilişimi
İnsan Denekler: Bu çalışmadaki tüm katılımcılar onam verdi veya vermedi. Uluslararası Hücresel Tıp Derneği, ICMS-2017-003 onayını yayınladı. Aşağıdaki protokol, Uluslararası Hücresel Tıp Derneği Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından daha ileri kullanım için onaylandı: Başlık: Başlangıç ​​tam kan sayımı trombosit sayısına dayalı trombositten zengin plazma ilaç veriminin hesaplanması. Hayvan Denekler: Tüm yazarlar bu çalışmada hiçbir hayvan veya dokunun yer almadığını doğruladılar. Çıkar Çatışmaları: ICMJE Tekdüzen Açıklama Formuna uygun olarak, tüm yazarlar aşağıdakileri beyan eder: Ödeme/hizmet bilgileri: Tüm yazarlar, gönderilen çalışma için hiçbir kuruluştan finansal destek almadıklarını beyan eder. Finansal İlişkiler: Tüm yazarlar, şu anda veya son üç yıl içinde gönderilen çalışmayla ilgilenebilecek herhangi bir kuruluşla finansal ilişkileri olmadığını beyan eder. Diğer İlişkiler: Tüm yazarlar, gönderilen çalışmayı etkileyebilecek başka hiçbir ilişki veya faaliyet olmadığını beyan eder.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K ve diğerleri (17 Mayıs 2022) Glikozun trombosit sayısı ve hacmi üzerindeki etkisi: rejeneratif tıp için çıkarımlar. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Telif Hakkı 2022 Harrison ve diğerleri. Bu, Creative Commons Atıf Lisansı CC-BY 4.0 şartları altında dağıtılan açık erişimli bir makaledir. Orijinal yazar ve kaynak belirtildiği takdirde, herhangi bir ortamda sınırsız kullanım, dağıtım ve çoğaltmaya izin verilir.