“Düşünceli, özverili küçük bir grup vatandaşın dünyayı değiştirebileceğinden asla şüphe etmeyin.Aslında, oradaki tek kişi o.”
Cureus'un misyonu, araştırma sunumunun pahalı, karmaşık ve zaman alıcı olabildiği uzun süredir devam eden tıbbi yayıncılık modelini değiştirmektir.
Trombositten zengin plazma/prp, doku rejenerasyonu, trombosit aktivasyonu, glukoz proliferatif tedavisi, trombositler, proliferatif tedavi
Bu makaleyi şu şekilde alıntılayın: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 Mayıs 2022) Glikozun trombosit sayısı ve hacmi üzerindeki etkisi: rejeneratif tıp için çıkarımlar.Tedavi 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Trombositten zengin plazma (PRP) ve hipertonik glikoz çözeltileri, rejeneratif tıpta enjeksiyon için yaygın olarak, bazen birlikte kullanılır.Hipertonik glikozun trombosit lizisi ve aktivasyonu üzerindeki etkisi daha önce bildirilmemiştir.Yüksek glikoz konsantrasyonlarının trombosit ve eritrosit sayılarının yanı sıra PRP ve tam kandaki (WB) hücre hacimleri üzerindeki etkisini test ettik.PRP veya tam kan ile karıştırılan tüm glikoz karışımları ile trombosit sayısında hızlı bir kısmi azalma meydana geldi ve kısmi lizis ile tutarlı oldu. İlk dakikadan sonra trombosit sayıları sabit kaldı, bu da artık trombositlerin aşırı (>2000 mOsm) hipertonisiteye hızlı bir şekilde uyum sağladığını gösteriyor. İlk dakikadan sonra trombosit sayıları sabit kaldı, bu da artık trombositlerin aşırı (>2000 mOsm) hipertonisiteye hızlı bir şekilde uyum sağladığını gösteriyor. После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю аккомодацию оста точных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Birinci dakikadan sonra, trombosit sayısı sabit kaldı ve bu, kalıntı trombositlerin aşırı (>2000 mOsm) hipertonisiteye hızla uyum sağladığını gösterir.第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态。2000 mOsm) После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быструю адаптацию остато чных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Birinci dakikadan sonra, trombosit sayısı sabit kaldı ve bu, kalıntı trombositlerin aşırı (>2000 mOsm) hiperozmolar duruma hızlı bir şekilde adapte olduğunu gösterir.%25 ve üzerindeki glikoz konsantrasyonları, ortalama trombosit hacminde (MPV) önemli bir artışa neden olarak, trombosit aktivasyonunun erken bir aşamasını gösterir.Trombosit lizisi veya aktivasyonunun meydana gelip gelmediğini ve tek başına veya PRP ile kombinasyon halinde hipertonik glukoz enjeksiyonunun ek klinik fayda sağlayıp sağlayamayacağını belirlemek için daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.
1950'lerde Amerikalı cerrah George Hackett, tendonlara ve bağlara proliferatif bir solüsyon enjekte ederek birçok hastada eklem ve sırt ağrısını kalıcı olarak giderebileceğini keşfetti.Tavşanlar üzerinde yaptığı deneyler, proliferatif terapi adını verdiği tedavinin tendonların genişlemesine ve güçlenmesine neden olduğunu gösterdi.Histolojik çalışmalar, bu süreçte yeni kolajenin üretildiğini doğrulamıştır [1].
İlk birkaç on yılda birçok farklı dağıtım çözümü denendi.1990'lara gelindiğinde, uygulayıcıların çoğu yüksek konsantrasyonlarda glikozun en güvenli ve en etkili yöntem olduğunu düşündüler.Bununla birlikte, etki mekanizması belirsizliğini koruyor.
Hackett'in çalışmasının ardından 20. yüzyılda çok az klinik çalışma yapıldı.Bununla birlikte, 2000'lerde ilgi yeniden canlandı ve bel ağrısı [2], diz osteoartriti [3] ve lateral epikondilit [4] tedavisi için proliferatif tedavinin birkaç başarılı klinik denemesi tamamlandı.
Doku rejenerasyonu, kök hücrelerin katılımını gerektirir.Bu nedenle, yüksek glikoz konsantrasyonları bir şekilde kök hücrelerin göçünü, replikasyonunu ve farklılaşmasını tetiklemelidir.Trombositlerin haberci olarak hareket edebileceğini ve yüksek glikoz konsantrasyonlarının trombositlerin sitokinleri ve büyüme faktörlerini salmasına neden olabileceğini ve böylece rejeneratif süreçleri, özellikle yüksek glikoz konsantrasyonlarının olduğu alanlara kök hücre göçünü teşvik edebileceğini varsayıyoruz.
Trombosit aktivasyonu her zaman hücre içi kalsiyum artışından önce gelir [5].Liu ve ark.2008'de yüksek glikoz seviyelerinin, plazma zarındaki geçici reseptör potansiyel kanonik tip 6 (TRPC6) kanallarının aktivitesini arttırdığını ve bunun da trombositlere kalsiyum iyonlarının akışına yol açtığını göstermiştir [6].Başka bir çalışma, mikrotübül marjinal bölgesinin kalsiyum iyonlarına maruz kalmasının, marjinal bölgenin gevşemesine, genişlemesine ve deformasyonuna neden olduğunu ve bunun da diskten sferik şekle dönüşerek ortalama trombosit hacmi (MPV) ile sonuçlandığını göstermiştir [7].
Bu çalışmadaki hipotezimiz, trombositlerin yüksek glikoz konsantrasyonlarına maruz kalmasının mikrotübül marjinal bölgesini ve hücre içi ortamı etkileyerek MPV'de bir artışa yol açtığıdır.
Tüm katılımcılar, çalışmanın detayları açıklandıktan sonra ve örnekleri almadan önce bilgilendirilmiş onam formu imzaladılar.Bu çalışmada, karşılaştırma için eritrosit (eritrosit) sayısı ve kırmızı kan hücrelerinin ortalama alyuvar hacminin (MCV) dahil edilebilmesi için hematokriti %2'den büyük olan PRP numuneleri kullanılmıştır.
Çalışma dört aşamada gerçekleştirildi, ilk aşama PRP ve geri kalan aşamalar tam kandı (Tablo 1).Daha önce açıklandığı gibi [8], tüm bağıl santrifüj kuvvetleri (RCF, g-kuvveti), santrifüj şırıngasındaki kan sütununun orta noktasından (Rmid, cm olarak) hesaplanmıştır.Her ikisi de standart hematoloji analizörlerinde kolaylıkla ölçülebilen trombosit duyarlılığının bir belirteci olarak MPV'yi ve potansiyel trombosit lizizinin bir göstergesi olarak trombosit sayısını kullanmayı seçtik.
İlk aşamada, 47 gönüllü kan örnekleri bağışladı; bir tüp etilendiamintetraasetik asit (EDTA) ve bir PRP tam kan örneği (sodyum sitrat (NaCl, %3) ile antikoagüle edilmiş) (Tablo 1).Rocker'ı hemen boruya yerleştirin.Tam kan sayımı (CBC) EDTA numuneleri üzerinde üç kopya halinde yapıldı ve CBC analizi için NaCl örnekleri üç kopya halinde analiz edildi ve ardından yukarıda açıklanan çeşitli yöntemlerle PRP hazırlandı [8].Tüm PRP örnekleri 900–1000 g'de santrifüj edilerek hazırlandı.Her bir PRP numunesini bir vorteks karıştırıcıda 5-10 saniye karıştırın, ardından beş adet 0,5 ml'lik alikotları tüplere bölün.
Trombosit maruziyetinin yüksek glukoz konsantrasyonları üzerindeki etkisini değerlendirmek için su içerisinde eşit miktarlarda (0,5 ml) %0, %5, %12,5, %25 ve %50 glukoz trombosit numuneleri ile karıştırılarak %0, %2,5 %6,25, %12,5 ve %25 konsantrasyonlarında glukoz karışımı elde edildi ve tüpler bir test tüpü çalkalayıcısında 15 dakika süreyle karıştırıldı.Her karışımın TAC'si, 15 dakika sonra üç kopya halinde analiz edildi.Her tüp için trombosit sayısı (PLT), RBC sayısı, MCV ve MPV'nin ortalaması alındı ​​ve tüm PRP numuneleri için ortalama trombosit sayısı, RBC sayısı, MCV ve MPV hesaplandı.
Veri toplamanın ilk aşaması tamamlandıktan sonra, D50W eklendikten sonra PRP trombositlerinde trombosit hacminde önemli bir artış olduğunu fark ettik.PRP trombositleri, kandaki tüm trombositleri temsil etmez ve PRP ortamı, WB ortamından farklıdır.Bu nedenle, tam kana D50W eklemenin etkisinin ikinci aşama denemesini yapmaya karar verdik.
İkinci tur için, Analiz bölümünde açıklandığı gibi, ilk serinin sonuçlarına dayalı olarak 30 kişilik bir örneklem büyüklüğü seçtik.Bu seride 20 gönüllü kan örneği bağışladı (Tablo 1).Tam kan (1.8 mi) 3 ml'lik bir şırıngaya çekildi ve 0.2 ml %40 NaCl ile antikoagüle edildi.Tam kan şırıngası, bir vorteks karıştırıcı ile beş saniye karıştırıldı ve CBC, üç kopya halinde analiz edildi.Analizden sonra, 5 ml'lik bir şırıngada 2 ml %50 glukoza antikoagüle edilmiş kan ilave edildi (nihai glukoz konsantrasyonu yaklaşık %25'ti (D25) ve 30 dakika boyunca bir çalkalama tüpüne yerleştirildi. 30 dakika sonra, WB şırıngalarında D25/CBC üç kopya halinde analiz edildi. Trombosit sayısı, RBC sayısı, MCV ve şırınga başına MPV'nin ortalaması alındı ​​ve eklemeden önce ve sonra her numune için ortalama PLT, RBC sayısı, MCV ve MPV hesaplandı. glikoz.
Tam kandaki trombositler, minimal invaziv enjeksiyon nedeniyle proliferatif glikoz tedavisi sırasında genellikle hipertonik glikoza maruz kaldığından ve enjeksiyondan hemen önce PRP'yi hipertonik glikozla birleştirmek yaygın olmadığından, Bölüm 1, Adım Üç ve Dördüncü'de hipertonik glikozu WB ile kombinasyon halinde incelemeye karar verdik.Her aşamada 20 gönüllü, kan pıhtılaşma önleyicileri için 7-8 ml ACD-A (trisodyum sitrat (22.0 g/l), sitrik asit (8.0 g/l) ve glukoz (24.5 g/l) içeren asit, dekstroz sitrat solüsyonu) bağışladı (Tablo 1).MPV'deki artışla ilişkili eşik yüzdesini belirlemek için yalnızca% 12,5'ten büyük glikoz karışımları kullanıldı.Üçüncü aşamada bir test tüpüne 1 ml kan konur.Daha sonra sırasıyla %15, %20 ve %25'lik bir nihai glikoz konsantrasyonu elde etmek için tüpe 1 ml %30 glikoz, %40 glikoz veya %50 glikoz ekleyerek kanı bir vorteks karıştırıcıda 10 saniye karıştırın.Glikoz kan numuneleri, karıştırıldıktan hemen sonra CBC için analiz edildi ve 30 dakika boyunca her iki dakikada bir tekrarlandı.
İlk karıştırma sırasında, 1:1 hipertonik glikoz ve WB veya PRP eklenmesi, trombositleri birkaç saniyeliğine %25'in üzerinde konsantrasyonlara maruz bırakır.Dördüncü adımda, hipertonik glikozun etkisini minimum başlangıç ​​tepe konsantrasyonları ile değerlendirmek ve glikoz etkisinin üst sınırını test etmek için D25W veya D50W'ye yalnızca az miktarda kan ekledik.Bir tüpe 1 ml D25W veya D50W koyun ve numuneyi 10 saniye vorteksleyerek 0,2 ml WB ekleyin.Bu durumlarda, kan, Faz 3'te olduğu gibi nihai konsantrasyonun %50 üzerinde değil, nihai konsantrasyonun yaklaşık %20 üzerinde bir konsantrasyonda glukoza maruz bırakıldı, bu da %20,8 ve %41,6'lık nihai glukoz konsantrasyonları ile sonuçlandı.Karışık numuneler, 3. adımda olduğu gibi aynı zaman aralığında analiz edildi.
Her glikoz seyreltme serisinin ilk adımında, pilot çalışma için uygun örneklem büyüklüğü olduğu için 30 numune alınmıştır [9].Her aşamanın sonunda (ilk aşama dahil), bir popülasyondaki sürekli sonuç değişkeninin ortalamasını tahmin etmek için gereken örnek büyüklüğünü belirlemek için kullanılan formülü kullanarak örnek boyutunun yeterliliğini değerlendirin.Formül n = Z2 x SD2 /E2.Bu denklemde Z, Z-skoru, SD standart sapma ve E istenen hatadır [10].Alfamız 0,05'tir, bu da 1,96'lık bir Z değerine karşılık gelir ve 5'lik (yüzde olarak) bir hata bekliyoruz.Dolayısıyla n = (1.962 x SD2)/52 için çözüyoruz.Sonuçlar, her aşama için gereken örneklem büyüklüğünün toplanan gerçek sayıdan daha küçük olduğunu gösterdi.
Birden fazla glukoz konsantrasyonu kullanılan 1, 3 ve 4. periyotlar sırasında, farklı glukoz konsantrasyonlarının etkisi, 0 zamanı ile sonraki her bir zaman arasındaki fraksiyonel değişim karşılaştırılarak analiz edildi (faz 1, 15 dakikada, periyot 3, 15 dakikada).ve 15 saniyede dört, ardından her iki dakikada bir.) Her zaman periyodu için değişim oranları Mann-Whitney U-testi kullanılarak karşılaştırıldı, çünkü veriler Shapiro-Wilk normallik testi tarafından belirlenen bir normal dağılıma uymadı.Birinci, üçüncü ve dördüncü adımlarda (toplamda beş) birkaç grubun (beş) 1'e 1 analizi yapıldığından, istenen alfa değerini ≤0,01'e ayarlamak ancak ≤0,05'e ayarlamak için bir Bonferroni düzeltmesi yapıldı.
Hipertonik dekstrozun tüm konsantrasyonlarında trombosit sayısında azalma ve >%12,5 dekstroz konsantrasyonunda PRP trombositlerinde MPV'de artış: PRP trombosit sayıları, yönteme göre değişen (gösterilmemiştir) başlangıç ​​tam kanına kıyasla bir ila beş kat arttı. Tüm hipertonik dekstroz konsantrasyonlarında trombosit sayısında azalma ve>% 12,5 dekstroz konsantrasyonunda PRP trombositlerinde MPV'de artış: PRP trombosit sayıları, yönteme göre değişen (gösterilmemiştir) taban çizgisi tam kanına kıyasla bir ila beş kat arttı. Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы ve увеличение MPV в тромбоци тах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной це льной кровью, в зависимости от метода (не показано). Tüm hipertonik dekstroz konsantrasyonlarında azalmış trombosit sayısı ve >%12,5 dekstroz konsantrasyonunda PRP trombositlerinde MPV artışı: PRP trombosit sayısı, yönteme bağlı olarak (gösterilmemiştir) başlangıç ​​tam kanına kıyasla 1-5 kat artmıştır. ).%12.5 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小板中MPV 增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述) >%12,5 ​​glikoz konsantrasyonunda, yüksek glikoz konsantrasyonu kan sayımını azaltır, PRP kan MPV'si artar: 与基线全血 ile karşılaştırıldığında, PRP kan sayımı konsantrasyonun (açıklanmamış) 1 ila 5 katı artar. При концентрациях глюкозы >12,5%, а MP V повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1- ila 5-кратных концентраций по сравненю с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). >%12,5 glukoz konsantrasyonlarında, tüm hipertansif glukoz konsantrasyonları trombosit sayısını azalttı ve PRP trombositlerinde MPV'yi yükseltti: PRP trombosit sayısı, yönteme bağlı olarak (açıklandığı gibi) başlangıç ​​tam kan konsantrasyonlarına kıyasla 1 ila 5 kat arttı.Şekil 1, trombosit sayısının suda seyreltmeden sonra neredeyse %75 ve farklı glikoz konsantrasyonlarıyla 15 dakikalık seyreltmeden sonra bazal PRP'ye ve hacme göre ayarlanmış 1:1 seyreltmeye kıyasla %20-30 azaldığını göstermektedir (hacim düzeltmeli 1-k1).k -1 üreme).1 üreme).
Her dilüsyondaki hücre sayısı, dilüsyondan önceki orijinal sayının kesri olarak ifade edilir.
MPV, su veya glikozda (% 25 PRP glikoz karışımları dahil)% 12,5'e kadar seyreltme konsantrasyonlarında daha fazla değişiklik olmaksızın PRP üretimi sırasında minimum düzeyde azaldı ve% 50 glikoz çözeltisinde seyreltildikten sonra% 20'den fazla arttı (Şekil .2).).Buna karşılık eritrositler, H2O dışındaki herhangi bir seyreltmede hacimde önemli bir değişiklik göstermedi.
Her seyreltmedeki ortalama hücre hacmi, seyreltmeden önceki orijinal hacmin yüzdesi olarak ifade edilir.
%50 glikoza (%25 glikoz ile formüle etmek için) maruz bırakılan BC'de trombosit sayısında benzer ancak daha az belirgin bir azalma ve CVR'de artış gözlendi.Tablo 2, %50 dekstrozda seyreltilmiş tam kandaki hücre sayılarını ve hücre hacimlerini %50 dekstrozda seyreltilmiş faz 1 PRP verileriyle karşılaştırır.RBC sayısındaki ve RBC MCV'deki değişiklikler belirgin değildi ve dikkatimizin odak noktası değildi.
SD = standart sapma, MD = gruplar arasındaki ortalama fark, SE = ortalama farkın standart sapması, RBC = eritrositler, PLT = trombositler, PRP = trombositten zengin plazma, WB = tam kan
WB'ye D50W eklendikten sonra, dilüsyona göre ayarlanmış trombosit kaybı yüzdesi %7,7 (310±73'e karşı 286±96), D50W'de PRP dilüsyonu için %17,8'dir (664±348'e karşı 544±277).MPV WB %16,8 arttı (10,1 ± 0,5'ten 11,8 ± 0,6'ya), MPV PRP ise %26 arttı (9,2 ± 0,8 - 11,6 ± 0,7). Hem trombosit sayısındaki azalma hem de MPV artışındaki ortalama farklar PRP ile önemli ölçüde daha fazla olsa da, WB içindeki trombosit sayısındaki azalmadaki değişiklikler neredeyse anlamlıydı (310 ± 73 ila 286 ± 96 (-7.7); p = .06) ve MPV'deki artış anlamlıydı (10.1 ± 0.5 ila 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001). Hem trombosit sayısındaki azalma hem de MPV artışındaki ortalama farklar PRP ile önemli ölçüde daha fazla olsa da, WB içindeki trombosit sayısındaki azalmadaki değişiklikler neredeyse anlamlıydı (310 ± 73 ila 286 ± 96 (-7.7); p = .06) ve MPV'deki artış anlamlıydı (10.1 ± 0.5 ila 11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001).Hem trombosit sayısındaki azalma hem de CVR artışındaki ortalama farklar PRP ile önemli ölçüde daha büyük olmasına rağmen, WB içinde trombosit sayısındaki düşüşteki değişiklikler neredeyse anlamlıydı (310 ± 73 ila 286 ± 96 (%-7,7); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (arasında 10,1 ± 0,5 ila 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV'deki artış önemliydi (10,1 ± 0,5'ten 11,8 ± 0,6'ya (+16,8) p < 0,001).Daha Fazla几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7.7%)；p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001 )PRP Uygulamaları的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7.7) ； p = .06）和MPV 的增加是显着的（10.1 ± 0.5 ve 11.8 ± 0. 6 (+16.8) p < .001)。WB içindeki trombosit sayısındaki azalmadaki değişiklik neredeyse anlamlıydı (310 ± 73'ten 286 ± 96'ya (%-7.7); p = 0.06), ancak PRP'nin trombosit sayısı düşüşünde ve MPV artışında önemli ölçüde daha büyük ortalama farkları vardı.ve MPV'deki artış anlamlıydı.(10,1 ± 0,5 ila 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (10,1 ± 0,5 - 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
MPV'de önemli bir değişiklik görmek için %20 glukoz nihai konsantrasyonu gerekliydi, ancak MPV'deki değişiklik %25'lik nihai konsantrasyonda daha belirgindi.Trombosit kaybı, ilk düşüşün ardından dengelendi.CVR'de başlangıçta keskin bir düşüş kaydettik, ancak CVR, %20 ve %15'lik nihai glukoz konsantrasyonlarında gözlenen CVR seviyelerinden önemli ölçüde daha yüksek olan %25 nihai glukoz konsantrasyonunda hızla geri yüklendi (Şekil 3 ve Tablo 3'ün solunda; gölgeli kutular).0,01 Bonferroni düzeltmesi ile p-değerlerini ≤ alfa olarak belirtin).Ayrıca, PLT sayısında ilk aşamada 0-15 s gözlenen keskin bir düşüş oldu ve ardından sabit kaldı (15 s'den 30 dakikaya; tablo 4'ün solunda).
Tam kana çeşitli konsantrasyonlarda glikoz eklenmesi, MPV'de başlangıçta hızlı bir düşüşle ve ardından %20'den fazla konsantrasyona bağlı bir geri kazanımla sonuçlandı.Açıklama, seyreltmeden sonraki glikoz konsantrasyonunu gösterir.D15, D20 ve D25, 1:1 dilüsyonda gerçekleştirildi.D21 ve D41, 1:5 dilüsyonda gerçekleştirildi.
Tablo 4, hipertonik glikozda seyreltildiğinde trombosit sayısındaki değişikliği göstermektedir.1:1 dilüsyonda ve 1:5 dilüsyonda PLT sayılarındaki ani düşüş arasında doza bağlı bir ilişki gözlemledik.1:1 dilüsyonları tek bir grup olarak 1:5 dilüsyonlarla karşılaştırıldığında, 1:1 grubunun trombosit sayısında 1:5 grubundan daha az ani bir düşüş oldu: 66±48.000 (%23) ve 99±69.000 (%37)., p = 0,014) 1:5 grubunda.İlk ölçüm noktasındaki ilk düşüşün ardından trombosit, stabilize edilmiş glukoz yüzdesi olarak sayılır (Şekil 4).
Tam kan glikoza 1:1 oranında eklendiğinde, trombosit sayısı yaklaşık %25 oranında azalır.Bununla birlikte, 1:5 oranında tam kan eklendiğinde, azalma çok daha fazlaydı – yaklaşık %50.
%41 glikoz, MPV'yi %25 veya %21'den daha hızlı ve daha dramatik bir şekilde artırdı.MPV sonuçları Şekil 3'te gösterilmektedir. Diğer tüm dilüsyonlarda, %50 glikoz ilave edildikten sonra MPV'de ani bir başlangıç ​​düşüşü gözlenmedi.%25 glukoz kullanıldığında (nihai seyreltmede glukoz konsantrasyonu %20,8), MPV'deki değişiklik, 1:1 dilüsyonda %20 glukozdaki değişimle karşılaştırılabilirdi (Şekil 3).MPV'deki değişiklikler başlangıçta %41'lik karışık konsantrasyonda %25'tekinden daha fazla olmasına rağmen, 16 dakika sonra MPV'deki %41 ile %25 arasındaki fark artık anlamlı değildi (Tablo 3, sağ).%25 glikozun MPV'yi %20.8'den daha etkili bir şekilde artırması da ilginçtir.
Bu in vitro çalışma hipotezimizi kısmen doğruladı. Dekstroz karışımı ile potansiyel kısmi trombosit lizisi, trombositlerin aşırı hipertonisiteye hızlı bir şekilde uyum sağlaması ve >%25 hipertonik dekstroz konsantrasyonlarına yanıt olarak MPV'de önemli bir artış gösterdi. Dekstroz karışımı ile potansiyel kısmi trombosit lizisi, trombositlerin aşırı hipertonisiteye hızlı bir şekilde uyum sağlaması ve >%25 hipertonik dekstroz konsantrasyonlarına yanıt olarak MPV'de önemli bir artış gösterdi. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю аккомодацию тромбоцитов ов до экстремального гипертонуса ve значительное повышение MPV в ответ на гипертоническую концентрацию декстрозы > 25% . Dekstroz ile potansiyel kısmi trombosit lizisi, aşırı hipertonisiteye hızlı trombosit yerleşimi ve >%25 hipertonik dekstroz seviyelerine yanıt olarak MPV'de önemli bir artış gösterdi.25 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升.Daha Fazla Bilgi应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV в ответ на концентрацию гипертонической глюкозы > 25%. Glikoz karışımları tarafından potansiyel kısmi trombosit lizisi, aşırı hipertonisiteye hızlı trombosit adaptasyonu ve >%25 hipertonik glikoza yanıt olarak MPV'de önemli bir artış gösterir.İlk artış %41.6 glukoz maruziyetinde maksimum olmuştur, ancak MPV'deki artış maruziyetten yaklaşık 20 dakika sonra %25 glukoz maruziyetine yaklaşmıştır.
Trombosit konsantrasyonu glikozdan etkilenir.Tüm glikoz dilüsyonlarında PLT miktarının azaldığını fark ettik.PRP serisinin H2O (%0) dilüsyonlarındaki trombosit sayısındaki keskin düşüş, ozmotik lizis ile ilişkilendirilebilir.Alternatif olarak, bu, trombosit kümelenmesinin neden olduğu bir artefakt olabilir, ancak bu, bu dilüsyonda MPV değişikliği olmamasının tersidir.Bu bulgu, bazı trombositlerin hipoozmolariteye karşı çok duyarlı olduğu anlamına gelir.
Tüm 1:1 glikoz dilüsyonlarında, hem PLT hem de MPV konsantrasyonda üç kat artışta değişmeden kaldığı için, PLT miktarı, D5W ile bile (252 mOsm'de hipotonik) %20-30 azaldı; bu, glikozun spesifik bir ozmotik olmayan etkisini gösterebilir.glikoz.D5W'den D25W'ye.Aslında, PLT konsantrasyonları, artan ozmolarite ile hafifçe artma eğilimindeydi.
1:1 ve 1:5 dilüsyonlar arasında PLT'deki azalma, çözünme etkisinin ilk ve son glikoz konsantrasyonuna bağlı olduğu anlamına gelir.Yalnızca ilk konsantrasyona bağlı olsaydı, o zaman 1:1 konsantrasyonlar arasında PLT düşüşünde bir fark görülmesi beklenirdi.Ama yapmıyoruz.Parçalama etkisi yalnızca nihai glikoz konsantrasyonuna bağlıysa, %20 1:1 seyreltme ile %20,8 1:5 seyreltme arasında çok fazla bir fark beklemiyoruz.Ve yine de başardık.
Trombosit lizisi nedeniyle trombosit kaybı meydana gelirse, kısmi bir lizat oluşur ve ardından sitokinler ve büyüme faktörleri hücre dışı ortama salınır.Birkaç çalışma, trombosit lizatının bir proliferasyon solüsyonu olarak neredeyse PRP kadar etkili olduğunu göstermiştir [11].PRP'nin kendisinin proliferasyon tedavisi için etkili bir çözüm olduğu gösterilmiştir [12-14].
Aktif olmayan trombositler, çeşitli iç yapılarla güçlendirilmiş bir disk şeklinde dolaşır.Aktivasyon sırasında, daha küresel veya amip şekli alırlar ve bu da hacimde bir artışa neden olur.Hacimdeki artış, açık tübül sisteminin (OCS) ekstrüzyonunun ve zara ekzositik granüllerin eklenmesinin bir sonucu olan yüzey alanında bir artış gerektirir.Hipertonik glikoz tarafından indüklenen MPV'deki artışın bu mekanizmalardan birini mi yoksa her ikisini mi içerdiği henüz belirlenmedi, ancak ikincisi ise, MPV'deki bir artış degranülasyonu gösterir.
Bu çalışma, PRP veya tam kan trombositlerinde yüksek glikoz konsantrasyonlarına maruz kalmanın, sırasıyla %25 ve %41.6'lık bir glikoz konsantrasyonu ile 15 dakika içinde MPV'de bir artışa neden olduğunu göstermiştir.
Trombosit MPV'sindeki artış, kalsiyum akışına yanıt olarak çevreleyen mikrotübül yumaklarının genişlemesine bağlı olabilir.Liu ve ark.Glikozun trombosit TRPC6 kanalı yoluyla kalsiyum akışına aracılık ettiği gösterilmiştir [6].Hipotezimiz, glikozun mikrotübül düğümlerinin gevşemesini indükleyerek MPV'de ve trombosit duyarlılığında ve/veya aktivasyonunda bir artışa yol açtığıdır.Ancak, sonuçlarımıza bakılırsa, bu hikayenin sadece bir parçası.Testlerimizde, D25W'nin altındaki hiçbir konsantrasyon MPV'de bir artışa neden olmadı.%12,5 ile %25 arasındaki glikoz konsantrasyonlarına maruz kalmayı test etmediğimiz göz önüne alındığında, faz 1 sonuçlarımız, bu glikoz konsantrasyonları aralığında MPV'de artışa yol açan bir eşik olabileceğini düşündürmektedir.Aşama 3 ve 4'teki diğer testler, %20-25 glikozun bunun için eşik olduğunu gösterdi, ancak bunun nedeni belirsizliğini koruyor.
Ayrıca santrifüjlemeden sonra MPV'de ~%9'luk bir düşüş gözlemledik.MPV'deki bu düşüşün, santrifüjün RBC tabakasında hapsolan daha büyük ve daha yoğun trombositlerden kaynaklanıp kaynaklanmadığı açık değildir.Bu gözlem, PRP trombositlerinin WB trombositlerinin daha küçük ve daha az yoğun bir alt kümesi olduğunu ima edebileceğinden klinisyenler için önemli olabilir.
Önceki bir çalışmada, manuel yöntemlerle PRP hazırlamanın ucuz olduğunu gösterdik [8].Glikoz, doku trombositlerini veya PRP'yi duyarlılaştırarak onları aktivasyona karşı daha duyarlı hale getirirse veya PRP kısmi lizat özellikleriyle üretilirse, bu, rejenerasyonu artırabilir ve tedavi ihtiyacını azaltabilir.Bu nedenle, PRP ve yüksek konsantrasyonlu glikozun kombinasyonu, tek başına PRP veya glikozdan daha uygun maliyetli olabilir.
Çalışmamızın çeşitli eksiklikleri bulunmaktadır.Öncelikle birkaç farklı yöntemden elde edilen PRP kullanıyoruz.Bu çelişkili sonuçlara yol açabilir.İkincisi, trombosit aktivasyonunun gerçekleşip gerçekleşmediğini daha doğru bir şekilde belirlemek için numunelerimizin hiçbirinin biyokimyasal analizini gerçekleştiremedik.Alfa granül degranülasyonunun derecesini veya varlığını daha iyi anlamak için P-selektin, trombosit faktörü 4, monositik trombosit agregatları veya diğer trombosit aktivasyonu belirteçlerini ölçmek istiyoruz, ancak bu, bu çalışmanın kapsamı dışındadır.Üçüncüsü, glikoza maruz kalan trombositlerdeki MPV'deki artışın mikrotübül yumakları üzerindeki etkiden kaynaklandığını elektron mikroskobu veya diğer yöntemlerle doğrulayamadık.
%25 glukoz içeren WB veya PRP karışımları, MPV'yi arttırarak trombosit aktivasyonunun başlangıcına işaret eder, ancak bu çalışma agregasyon veya degranülasyonun ilerlemesini göstermemiştir.Hipertonik glikoz karışımı, muhtemelen bir litik etkiyi temsil eden trombosit kaybına neden oldu.Trombositlerin kısmi aktivasyonu veya parçalanması, trombosit enjeksiyonundan sonra doku rejenerasyonuna neden olabilir.Bu değişikliklerin hangi klinik sonuçlara yol açabileceği açık değildir.Daha ileri çalışmalar, daha doğru aktivasyon veya lizis ölçümleri göstermiştir ve hipertonik glikoz karışımlarının WB veya PRP ile farklı klinik etkilerini değerlendirmiştir.
Glikoz proliferatif tedavisi, hızla yaygınlaşan ve klinik araştırmaları destekleyen basit ve ucuz bir rejeneratif tedavidir.Bu çalışma, doğrulanırsa proliferatif tedavinin rejeneratif mekanizmasının bir kısmını anlamamıza yardımcı olabilecek fizyolojik bir mekanizma önermektedir.
Biyomedikal ve Sağlık Bilişimi, Missouri Üniversitesi, Kansas City Tıp Fakültesi, Kansas City, ABD
İnsan Denekler: Bu çalışmadaki tüm katılımcılar onay verdi veya vermedi.Uluslararası Hücresel Tıp Derneği, ICMS-2017-003 onayını yayınladı.Aşağıdaki protokol, Uluslararası Hücresel Tıp Derneği Kurumsal İnceleme Kurulu tarafından daha fazla kullanılmak üzere onaylanmıştır: Başlık: Başlangıç ​​CBC trombosit sayısına dayalı olarak trombosit açısından zengin plazma ilaç veriminin hesaplanması.Hayvan Denekler: Tüm yazarlar, bu çalışmaya hiçbir hayvanın veya dokunun dahil edilmediğini doğruladı.Çıkar Çatışmaları: ICMJE Tekdüzen Açıklama Formu uyarınca tüm yazarlar aşağıdakileri beyan eder: Ödeme/hizmet bilgileri: Tüm yazarlar, gönderilen çalışma için herhangi bir kuruluştan mali destek almadıklarını beyan eder.Mali İlişkiler: Tüm yazarlar, gönderilen eserle ilgilenebilecek herhangi bir kuruluşla şu anda veya son üç yıl içinde mali ilişkilerinin olmadığını beyan eder.Diğer İlişkiler: Tüm yazarlar, gönderilen çalışmayı etkileyebilecek başka bir ilişki veya faaliyet olmadığını beyan eder.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K ve ark.(17 Mayıs 2022) Glikozun trombosit sayısı ve hacmi üzerindeki etkisi: rejeneratif tıp için çıkarımlar.Tedavi 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Telif Hakkı 2022 Harrison ve ark.Bu, Creative Commons Atıf Lisansı CC-BY 4.0 koşulları altında dağıtılan açık erişimli bir makaledir.Orijinal yazara ve kaynağa atıfta bulunulması koşuluyla, herhangi bir ortamda sınırsız kullanım, dağıtım ve çoğaltmaya izin verilir.