Кайбер LC проблемаларын чишү темалары беркайчан да искерми, чөнки LC практикасында проблемалар бар, хәтта инструмент технологиясе яхшырган кебек. LC системасында проблемалар килеп чыгарга һәм начар формада бетергә мөмкин булган бик күп ысуллар бар.
Бу "LC проблемаларын чишү" баганасын язу һәм ай саен темалар турында уйлау күңелле булды, чөнки кайбер темалар беркайчан да стильдән чыкмый. Хроматография тикшеренүләре өлкәсендә кайбер темалар яки идеялар искерә, чөнки алар яңа һәм яхшырак идеялар белән алмаштырыла, чөнки беренче проблемаларны чишү бу журналда (шул ук вакытта LC журналлары). сыек хроматографиягә тәэсир итүче заманча тенденцияләр турында (мәсәлән, басымның саклануга тәэсирен аңлавыбызны чагыштыру [2] Яңа казанышлар) LC нәтиҗәләрен аңлату һәм заманча LC кораллары белән ничек чишү. Бу айны бүлеп бирүдә, мин 2021 елның декабрендә башланган серияләремне дәвам итәм, алар LC проблемаларын чишү өчен бик мөһим. бу сериянең LCGC мәшһүр "LC проблемаларын чишү буенча кулланма" дивар схемасы (4) бик лабораторияләрдә эленеп тора. Бу сериянең өченче өлеше өчен мин иң югары форма яки иң югары характеристика белән бәйле проблемаларга игътибар иттем. Искиткеч, стена диаграммасы начар формадагы 44 төрле потенциаль сәбәпне күрсәтә! бу мөһим тема.
Мин "һәрнәрсә мөмкин" белән проблемаларны чишү сорауларына көннән-көн җавап бирәм .Бу җавапны аңлату кыен булган күзәтүләрне караганда җиңел кебек тоелырга мөмкин, ләкин мин еш кына урынлы дип саныйм. Начар форманың күп сәбәпләре белән, проблема нинди булырга мөмкинлеген ачыклаганда, ачык фикер йөртү мөһим, һәм иң мөһим мөмкинлекләргә игътибар итү.
Проблемаларны чишү өчен төп адым - ләкин минем уйлавымча, чишелмәгән проблема барлыгын тану. Проблема барлыгын тану еш кына корал белән булган хәлнең безнең өметләрдән аерылып торуын тану дигәнне аңлата, теория, эмпирик белем һәм тәҗрибә белән формалашкан (5) .Бу телгә алынган "иң югары форма", симметр, тим, форма гына түгел, тим, форма, симметр, тим, формаль, симметик, тим, форма гына түгел. Безнең иң югары формага өметләребез гади. Теория (6), күпчелек очракта, хроматографик чокырлар симметрияле булырга һәм Гаусия тарату формасына туры килергә тиеш дигән өметне хуплый. Без иң киңлектән нәрсә көтәбез, бу катлаулы тема. бу бүлекчәне күрсәтеп, без бу форма төрләренә китерә алган ситуацияләрнең кайбер конкрет мисаллары турында сөйләшәчәкбез.
Кайвакыт чокырлар хроматограммада бөтенләй күзәтелми, алар күтәрелергә тиеш. Wallгарыдагы стена диаграммасында иң югары булмау күрсәтелә (үрнәк концентрациядә максатлы аналитикны үз эченә ала, бу детекторның тавышын ишетү өчен җитәрлек булырга тиеш) гадәттә кайбер инструмент проблемасы яки мобиль фаза шартлары белән бәйле (бөтенләй күзәтелсә).иң югары, гадәттә артык "зәгыйфь"). Бу категориядәге потенциаль проблемаларның һәм чишелешләрнең кыска исемлеген I таблицада табарга мөмкин.
Aboveгарыда әйтелгәнчә, игътибарны арттырганчы һәм аны төзәтер алдыннан күпме киңәюгә юл куярга кирәк дигән сорау - мин киләчәк мәкаләдә сөйләшәчәк катлаулы тема. Минем тәҗрибәм шунда ки, иң зур киңәю еш кына формадагы зур үзгәрешләр белән бергә бара, һәм иң югары койрыклау иң югары ноктага кадәр яки ярылуга караганда еш очрый.
Бу проблемаларның һәрберсе LC проблемаларын чишүнең алдагы саннарында җентекләп тикшерелде, һәм бу темалар белән кызыксынган укучылар бу сәбәпләрнең төп сәбәпләре һәм потенциаль чишелешләре турында мәгълүмат алу өчен алдагы мәкаләләргә мөрәҗәгать итә алалар.Төгәлрәк мәгълүмат.
Пик койрыклау, иң югары фронт һәм ярылу барысы да химик яки физик күренешләр аркасында булырга мөмкин, һәм бу проблемаларның потенциаль чишелешләре исемлеге төрлечә үзгәрә, без химик яки физик проблема белән эш итүебезгә карап. Офтен, хроматограммадагы төрле чокырларны чагыштырып, сез гаепле булган мөһим күренешләрне таба аласыз. химик.
Пик койрыкның химик сәбәпләре монда кыскача сөйләшү өчен бик катлаулы. Кызыксынган укучы тирәнтен фикер алышу өчен күптән түгел чыгарылган "LC проблемаларын чишү" (10) .Бу шулай да, җиңел сынау инъекцияләнгән аналитик массасын киметү һәм иң яхшы форма яхшырганын күрү. Әгәр дә алайса, бу проблема "масса артык булырга тиеш". зур массалар укол белән булса да, иң югары формаларны алу өчен.
Пик койрыгы өчен бик күп потенциаль физик сәбәпләр бар. Мөмкинлекләр турында җентекләп фикер алышу белән кызыксынган укучылар "LC проблемаларын чишү" (11) журналының тагын бер чыгарылышына мөрәҗәгать итәләр. Пик койрыкның иң еш очрый торган физик сәбәпләренең берсе - инжектор белән детектор арасындагы ноктада начар бәйләнеш. Дат басмас корыч капиллярда формалашкан кагыйдә. Берничә проблемаларны чишү тәҗрибәләреннән соң, без инъекция клапан статорындагы порт тирәнлегенең элеккегә караганда күпкә тирәнрәк булуын аңладык, нәтиҗәдә порт төбендә зур үлгән күләм. Бу проблема инжекцион циклны башка труба белән алыштырып, үлгән күләмне бетерү өчен феррулны тиешле урынга көйли алабыз.
1-нче рәсемдә күрсәтелгән шикелле иң югары фронтлар шулай ук ​​физик яки химик проблемалар аркасында булырга мөмкин. Иң алдынгы кырның гомуми физик сәбәбе - багананың кисәкчәләре яхшы тутырылмаган, яки кисәкчәләр вакыт узу белән үзгәртелгән. Бу физик күренеш аркасында иң яхшы койрык кебек, моны төзәтүнең иң яхшы ысулы - колоннаны алыштыру һәм дәвам итү. стационар этап белән бәйләнгән (димәк, тоту факторы) баганада аналитик концентрациясе белән турыдан-туры бәйле. Хроматографик яктан, бу баганага салынган аналитик масса арта барган саен, биек озынрак була, ләкин киңрәк түгел. Бу бәйләнеш бозылу тәртибе сызыксыз булмаганда, шулай ук ​​иң зур массалар. максималь артык йөкләнешкә китерә торган иң зур койрык (10), сызыксыз тоту аркасында килеп чыккан иң югары күрсәткеч шулай ук ​​инъекцияләнгән аналитик массаны киметеп диагноз куярга мөмкин. Әгәр дә форма яхшырса, алдынгы читкә китергән инъекция сыйфатыннан артмас өчен метод үзгәртелергә тиеш, яисә бу тәртипне киметү өчен хроматографик шартлар үзгәртелергә тиеш.
Кайвакыт без "бүленгән" иң югары булып күренгәнне күзәтәбез, 1ф рәсемдә күрсәтелгәнчә. Бу проблеманы чишүнең беренче адымы - иң югары форма өлешчә кушылу аркасында булуын ачыклау (ягъни, ике төрле, ләкин бер-берсенә якынлашып килүче кушылмалар булу) .Әгәр чыннан да ике төрле аналитик бер-берсенә якынлаша икән, димәк, аларның резолюциясен яхшырту мөһим. en, бу карарның иң мөһим ачкычы - хроматограммадагы иң югары нокталар бүленгән формаларны күрсәтәме, яисә бер-ике генә. Әгәр ул бер-ике генә булса, бу, мөгаен, уртак проблема;барлык биеклекләр бүленсә, бу, мөгаен, багананың үзе белән бәйле физик проблема.
Колоннаның физик үзлекләре белән бәйле бүленгән чокырлар, гадәттә, өлешчә блокланган керү яки чыгу фритлары, яки баганадагы кисәкчәләрне үзгәртеп кору аркасында, мобиль фаза багана каналының кайбер өлкәләрендә мобиль фазага караганда тизрәк агып китәргә мөмкинлек бирә .Бу өлкәләрдә (11) .Бер өлешчә тыгылган фрит кайвакыт багана аша кире борылып чистартылырга мөмкин;шулай да, минем тәҗрибәмдә, бу озак вакытлы чишелеш түгел, ә кыска вакытлы. Бу еш кына заманча баганалар белән үлемгә китерә.
1г рәсемнең иң югары ноктасы, шулай ук ​​күптән түгел үз лабораториямдә, сигналның шулкадәр югары булуын күрсәтә, ул җавап диапазонының югары очына җитте. Оптик үзләштерү детекторлары өчен (бу очракта UV-vis), аналитик концентрация бик югары булганда, аналитик детектор агымы аша үткән яктылыкның күп өлешен үзләштерә. , сигналны тышкы кыяфәттә бик "томан" итү һәм аналитик концентрациядән бәйсез.Бу булганда, аналитикның инъекция күләмен киметү - инъекция күләмен киметү, үрнәкне эретү яки икесен дә җиңел генә чишеп була.
Хроматография мәктәбендә без детектор сигналын (ягъни хроматограммадагы у күчәре) аналитик концентрация индикаторы итеп кулланабыз. Шуңа күрә хроматограмманы нульдән түбән сигнал белән күрү сәер тоела, чөнки гади аңлатма - бу тискәре аналитик концентрацияне күрсәтә - әлбәттә, физик мөмкин түгел.
Бу очракта, тискәре биеклек баганадан чыккан молекулаларның мобиль фазага караганда азрак яктылыкны үзләштерүен аңлата. Бу, мәсәлән, чагыштырмача аз дулкын озынлыкларын (<230 нм) һәм мобиль фаза өстәмәләрен кулланганда, бу дулкын озынлыкларында мобиль фаз эретүче компонентлар булырга мөмкин. төгәл санлы мәгълүмат, шуңа күрә алардан качу өчен төп сәбәп юк (бу ысул кайвакыт "турыдан-туры UV ачыклау" дип атала). Ләкин шулай да, без чыннан да тискәре биеклектән бөтенләй сакланырга теләсәк, үзләштерүне ачыклау очракларында иң яхшы чишелеш - төрле ачыклау дулкын озынлыгын куллану, аналитик мобиль фазага караганда күбрәк үзләштерә, яки мобиль фазаның составын үзгәртә.
Тискәре күренешләр шулай ук ​​реактив индексны (RI) ачыклауны кулланганда барлыкка килергә мөмкин, мәсәлән, аналитиктан башка компонентларның реактив индексы, мәсәлән, эретүче матрица, мобиль фазаның реактив индексыннан аерылып торганда. Бу шулай ук ​​UV-визны ачыклау белән була, ләкин бу эффект RI ачыклау белән чагыштырганда көчәя.
LC проблемаларын чишүнең төп темасы буенча өченче өлештә мин күзәтелгән иң югары форма көтелгән яки нормаль формадан аерылып торган ситуацияләр турында сөйләштем. Мондый проблемаларны эффектив чишү көтелгән иң югары формаларны белүдән башлана (теория яки булган тәҗрибәләр нигезендә), шуңа күрә бу өметләрдән тайпылышлар ачык күренә. проблемаларны чишә башлау урыны, ләкин барлык мөмкинлекләрне кулга алмый. Сәбәпләр һәм чишелешләрнең тирән исемлеге белән кызыксынган укучылар LCGC "LC проблемаларын чишү буенча кулланма" стеналар схемасына мөрәҗәгать итә алалар.
(4) LCGC "LC проблемаларын чишү буенча кулланма" стена диаграммасы.https: //www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) А.Фелингер, Хроматографиядә мәгълүмат анализы һәм сигнал эшкәртү (Elsevier, New York, NY, 1998), 43-96 б.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF һәм Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev.907, 31–44 (2016) .https: //doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.