Кайбер LC проблемаларын чишү темалары беркайчан да искерми, чөнки LC практикасында проблемалар бар, хәтта инструмент технологиясе яхшырган кебек. LC системасында проблемалар килеп чыгарга һәм начар формада бетергә мөмкин булган бик күп ысуллар бар.
Бу "LC проблемаларын чишү" баганасын язу һәм ай саен темалар турында уйлау бик күңелле булды, чөнки кайбер темалар беркайчан да стильдән чыкмый. Хроматография тикшеренүләре өлкәсендә кайбер темалар яки идеялар искерә, чөнки алар яңа һәм яхшырак идеялар белән алмаштырыла, чөнки беренче проблемаларны чишү бу журналда (ул вакытта LC журналлары) берничә тема булган (1983 ел). Сыек хроматографиягә (LC) тәэсир итүче заманча тенденцияләр буенча бүлекләрне чишү (мәсәлән, басымның саклануга тәэсирен аңлавыбызны чагыштыру) Яңа алга китешләр) LC нәтиҗәләрен аңлату һәм заманча LC кораллары белән ничек чишү. Бу айны бүлеп бирүдә, мин 2021 елның декабрендә башланган серияләремне дәвам итәм, алар "тормыш һәм үлем" проблемаларының төп проблемалары. Без кулланган система. Бу сериянең төп темасы күп лабораторияләрдә эленгән LCGC мәшһүр "LC проблемаларын чишү өчен кулланма" стена диаграммасына бик актуаль. Бу сериянең өченче өлеше өчен мин иң югары форма яки иң югары характеристика белән бәйле проблемаларга игътибар итүне сайладым. Искиткеч, стеналар диаграммасында мин бу проблемаларның барысына да игътибар итәрмен, мин бу проблемаларның барысын да җентекләп карап чыгармын, мин бу мәкаләләрнең бер өлешен җентекләп карап чыгармын, мин бу мәкаләләрнең барысына игътибар итәрмен, мин бу мәкаләләрнең бер өлешенә игътибар итәрмен, бу проблемаларның барысын да җентекләп карап чыгармын. Еш кына. Яшь һәм олы LC кулланучылары бу мөһим темага файдалы киңәшләр һәм искәртмәләр табарлар дип ышанам.
Мин "һәрнәрсә мөмкин" белән проблемаларны чишү сорауларына көннән-көн җавап бирәм .Бу җавапны аңлату кыен булган күзәтүләрне караганда җиңел кебек тоелырга мөмкин, ләкин мин еш кына урынлы дип саныйм. Начар форманың күп сәбәпләре белән, проблема нинди булырга мөмкинлеген ачыклаганда, ачык фикер йөртү мөһим, һәм иң мөһим мөмкинлекләргә игътибар итү.
Проблемаларны чишү өчен төп адым - ләкин минем уйлавымча, чишелергә тиешле проблема барлыгын тану. Проблема барлыгын тану еш кына корал белән булган хәлнең безнең өметләрдән аерылып торуын тану дигәнне аңлата, теория, эмпирик белем һәм тәҗрибә формалашкан (5) .Бу телгә алынган "иң югары форма" шома, симметрик, биек, симметик, тим, форма гына түгел. h.б. әйберләр дөрес булмаган юллар. Бу өлешнең калган өлешендә без бу форма төрләренә китерә алган ситуацияләрнең конкрет мисаллары турында сөйләшәчәкбез.
Кайвакыт чокырлар хроматограммада бөтенләй күзәтелми, алар күтәрелергә тиеш. Wallгарыдагы стена диаграммасында иң югары булмау күрсәтелә (үрнәк концентрациядә максатлы аналитикны үз эченә ала, бу детекторның тавышын ишетү өчен җитәрлек булырга тиеш) гадәттә кайбер инструмент проблемасы яки мобиль фаза шартлары белән бәйле (бөтенләй күзәтелсә). иң югары, гадәттә артык "зәгыйфь"). Бу категориядәге потенциаль проблемаларның һәм чишелешләрнең кыска исемлеген I таблицада табарга мөмкин.
Aboveгарыда әйтелгәнчә, игътибарны арттырганчы һәм аны төзәтер алдыннан күпме киңәюгә юл куярга кирәк дигән сорау - мин киләчәк мәкаләдә сөйләшәчәк катлаулы тема. Минем тәҗрибәм шунда ки, иң зур киңәю еш кына формадагы зур үзгәрешләр белән бергә бара, һәм иң югары койрыклау иң югары ноктага кадәр яки ярылуга караганда еш очрый.
Бу проблемаларның һәрберсе LC проблемаларын чишүнең алдагы саннарында җентекләп тикшерелде, һәм бу темалар белән кызыксынган укучылар бу сәбәпләрнең төп сәбәпләре һәм потенциаль чишелешләре турында мәгълүмат алу өчен алдагы мәкаләләргә мөрәҗәгать итә алалар. Төгәлрәк мәгълүмат.
Пик койрыклау, иң югары фронт һәм ярылу барысы да химик яки физик күренешләр аркасында булырга мөмкин, һәм бу проблемаларның потенциаль чишелешләре исемлеге төрлечә үзгәрә, без химик яки физик проблема белән эш итүебезгә карап. Офтен, хроматограммадагы төрле чокырларны чагыштырып, сез гаепле булган мөһим мәгълүматларны таба аласыз. яхшы күрен, сәбәбе химик.
Пик койрыкның химик сәбәпләре монда кыскача сөйләшү өчен бик катлаулы. Кызыксынган укучы күптән түгел "LC проблемаларын чишү" чыгарылышына мөрәҗәгать итә (10). Шулай да, җиңел сынау өчен, инъекцияләнгән аналитик массасын киметү һәм иң югары форма яхшырганын күрү. Әгәр алайса, бу проблема "масса белән чикләнергә тиеш". хроматографик шартлар үзгәртелергә тиеш, шуңа күрә иң зур массалар инъекцияләнгән очракта да яхшы формалар алына.
Пик койрыгы өчен бик күп потенциаль физик сәбәпләр бар. Мөмкинлекләр турында җентекләп фикер алышу белән кызыксынган укучылар "LC проблемаларын чишү" (11) журналының тагын бер чыгарылышына мөрәҗәгать итәләр. Пик койрыкның иң еш очрый торган физик сәбәпләренең берсе - инжектор белән детектор арасында ноктада начар бәйләнеш. Датсыз корыч капиллярга формалаштырылган феррул белән инъекция әйләнәсе. Берничә проблемаларны чишү тәҗрибәләреннән соң, без инъекция клапан статорындагы порт тирәнлегенең элеккегә караганда күпкә тирәнрәк булуын аңладык, нәтиҗәдә порт төбендә зур үлгән күләм барлыкка килде.
1-нче рәсемдә күрсәтелгән кебек иң югары фронтлар физик яки химик проблемалар аркасында да булырга мөмкин. Иң алдынгы кырның гомуми физик сәбәбе - багананың кисәкчәләре яхшы тутырылмаган, яки кисәкчәләр вакыт узу белән үзгәртеп корылган. Бу физик күренеш аркасында иң яхшы койрык кебек, моны төзәтүнең иң яхшы ысулы - багананы алыштыру һәм дәвам итү. стационар этапта сакланган аналитик күләме (димәк, тоту факторы) баганада аналитик концентрациясе белән турыдан-туры бәйле. Хроматографик яктан, бу баганага салынган аналитик масса арта барган саен, биекрәк була, ләкин киңрәк түгел. чокырлар, нәтиҗәдә әйдәп баручы яки арткы кырлар. Күпчелек койрыкны китереп чыгаручы масса артык булган кебек, сызыксыз тоту аркасында килеп чыккан иң югары күрсәткеч шулай ук ​​инъекцияләнгән аналитик массаны киметеп диагноз куярга мөмкин. Әгәр дә форма яхшырса, алдынгы читкә китергән инъекция сыйфатыннан артмаска, яки хроматографик шартлар үзгәртелергә тиеш.
Кайвакыт без "бүленгән" иң югары булып күренгәнне күзәтәбез, 1-нче рәсемдә күрсәтелгәнчә. Бу проблеманы чишүнең беренче ады - иң югары форма өлешчә кушылу аркасында булуын ачыклау (ягъни, ике төрле, ләкин тыгыз кушылучы кушылмалар булу) .Әгәр чыннан да ике төрле аналитик бер-берсенә якынлаша икән, димәк, аларның резолюциясен яхшырту мөһим, мәсәлән, сайлап алу, тоту, яисә тәлинкә санын арттыру. Колоннаның үзе. Офтен, бу карарның иң мөһим ачкычы - хроматограммадагы иң югары нокталар бүленгән формаларны күрсәтәме, әллә бер-ике генә. Әгәр ул бер-ике генә булса, бу, мөгаен, уртак проблема; барлык биеклекләр бүленсә, бу, мөгаен, багананың үзе белән бәйле физик проблема.
Колоннаның физик үзлекләре белән бәйле бүленгән чокырлар, гадәттә, өлешчә блокланган керү яки чыгу фритлары, яки баганадагы кисәкчәләрне үзгәртеп кору аркасында, мобиль фаза багана каналының кайбер өлкәләрендә мобиль фазага караганда тизрәк агып китәргә мөмкинлек бирә .Бу төбәкләрдә (11) .Бер өлешчә тыгылган фрит кайвакыт багана аша кире борылып чистартылырга мөмкин; шулай да, минем тәҗрибәмдә, бу озак вакытлы чишелеш түгел, ә кыска вакытлы. Бу еш кына заманча баганалар белән үлемгә китерә.
1-нче рәсемнең иң югары ноктасы, шулай ук ​​күптән түгел үз лабораториямдә, сигналның шулкадәр югары булуын, ул җавап диапазонының югары очына җиткәнен күрсәтә. Оптик үзләштерү детекторлары өчен (бу очракта UV-vis), аналитик концентрация бик югары булганда, аналитик детектор агымы күзәнәкләре аша үткән яктылыкның күп өлешен үзләштерә. һәм "кара ток", сигналны тышкы кыяфәттә бик "томан" итә һәм аналитик концентрациядән бәйсез. Бу булганда, аналитикның инъекция күләмен киметү - инъекция күләмен киметү, үрнәкне эретү яки икесен дә җиңел генә чишеп була.
Хроматография мәктәбендә без детектор сигналын (ягъни хроматограммадагы у күчәре) аналитик концентрация индикаторы итеп кулланабыз. Шуңа күрә хроматограмманы нульдән түбән сигнал белән күрү сәер тоела, чөнки гади аңлатма - бу тискәре аналитик концентрацияне күрсәтә - әлбәттә, физик мөмкин түгел.
Бу очракта тискәре биеклек баганадан чыккан молекулаларның мобиль фазага караганда азрак яктылыкны үзләштерүен аңлата. Бу, мәсәлән, чагыштырмача аз дулкын озынлыкларын (<230 нм) һәм мобиль фаза өстәмәләрен кулланганда, бу дулкын озынлыкларында мобиль фаз эретүче компонентлар булырга мөмкин. калибрлау сызыгы һәм төгәл санлы мәгълүмат алу, шуңа күрә алардан качу өчен төп сәбәп юк (бу ысул кайвакыт "турыдан-туры УВны ачыклау" дип атала) (13). Ләкин, без чыннан да тискәре биеклектән бөтенләй сакланырга теләсәк, үзләштерүне ачыклау очракларында иң яхшы чишелеш - төрле ачыклау дулкын озынлыгын куллану, аналитик мобиль фазадан азрак үзләштерә, яки мобиль фазаны үзләштерә.
Тискәре күренешләр шулай ук ​​реактив индексны (RI) ачыклауны кулланганда барлыкка килергә мөмкин, мәсәлән, аналитиктан башка компонентларның реактив индексы, мәсәлән, эретүче матрица, мобиль фазаның реактив индексыннан аерылып торганда. Бу шулай ук ​​UV-визны ачыклау белән була, ләкин бу эффект RI ачыклау белән чагыштырганда көчәя.
LC проблемаларын чишүнең төп темасы буенча өченче өлештә мин күзәтелгән иң югары форма көтелгән яки нормаль формадан аерылып торган ситуацияләр турында сөйләштем. Мондый проблемаларны эффектив чишү көтелгән иң югары формаларны белүдән башлана (теория яки булган методлар белән булган тәҗрибә нигезендә), шуңа күрә бу өметләрдән тайпылышлар ачык күренә. бу детальләр проблемаларны чишү өчен яхшы урын бирә, ләкин барлык мөмкинлекләрне кулга алмый. Сәбәпләр һәм чишелешләрнең тирән исемлеге белән кызыксынган укучылар LCGC "LC проблемаларын чишү буенча кулланма" стеналар схемасына мөрәҗәгать итә алалар.
(4) LCGC "LC проблемаларын чишү буенча кулланма" стена диаграммасы.https: //www.chromatographyonline.com/view/troubleshooting-wallchart (2021).
(6) А.Фелингер, Хроматографиядә мәгълүмат анализы һәм сигнал эшкәртү (Elsevier, New York, NY, 1998), 43-96 б.
(8) Wahab MF, Dasgupta PK, Kadjo AF һәм Armstrong DW, Anal.Chim.Journal.Rev. 907, 31–44 (2016) .https: //doi.org/10.1016/j.aca.2015.11.043.