Nature.com сайтына кергәнегез өчен рәхмәт.Сез кулланган браузер версиясенең CSS ярдәме чикләнгән.Иң яхшы тәҗрибә өчен без яңартылган браузерны кулланырга киңәш итәбез (яки Internet Explorer'та туры килү режимын сүндерегез).Шул ук вакытта, дәвамлы ярдәмне тәэмин итү өчен, без сайтны стильләр һәм JavaScriptсыз күрсәтәчәкбез.
Контрольсез кан китү - үлемнең төп сәбәпләренең берсе.Тиз гемостазга ирешү сугыш, юл-транспорт вакыйгалары һәм үлемне киметү операцияләре вакытында предметның яшәвен тәэмин итә.Нанопорус җепселле-ныгытылган композит скафольд (NFRCS) гади гемостатик кино формалаштыру композициясеннән (HFFC) өзлексез этап буларак гемостазны кабызырга һәм көчәйтергә мөмкин.NFRCS үсеше аждаһа канаты дизайнына нигезләнгән.Аждаһа канаты структурасы аркылы һәм озын канатлардан тора, һәм микросруктураның бөтенлеген саклау өчен канат мембраналары бер-берсенә тоташалар.HFFC җепсел өслеген нанометр калынлыгы пленкасы белән бертөрле каплый һәм очраклы таратылган мамык калынлыгын (Ct) тоташтыра, нанопор структурасын формалаштыра.Даими һәм таралган этапларның берләшүе продукт бәясен коммерцияле продуктлар белән чагыштырганда ун тапкыр киметә.Модификацияләнгән NFRCS (тампоннар яки билбау) төрле биомедицина кушымталарында кулланылырга мөмкин.Vivo тикшеренүләре нәтиҗә ясады: эшләнгән Cp NFRCS куллану урынында коагуляция процессын көчәйтә һәм көчәйтә.NFRCS микроэнергетикны модульләштерә ала һәм нанопороз структурасы аркасында күзәнәк дәрәҗәсендә эш итә ала, нәтиҗәдә экизизация ярасы моделендә яраны яхшырак дәвалыйлар.
Сугыш, операцион һәм гадәттән тыш хәлләр вакытында контрольсез кан китү яралылар тормышына җитди куркыныч тудырырга мөмкин1.Бу шартлар периферик кан тамырларына каршы торуның гомуми үсешенә китерә, геморрагик шокка китерә.Операция вакытында һәм аннан соң кан китүне контрольдә тоту өчен тиешле чаралар тормыш өчен куркыныч булып санала2,3.Зур тамырларга зыян зур кан югалтуга китерә, нәтиҗәдә сугышта үлем 50%, операция вакытында 31%.Канның массив югалуы тән күләменең кимүенә китерә, бу йөрәк чыгаруны киметә.Периферик кан тамырларының каршылыгының артуы һәм микрокиркуляциянең прогрессив бозылуы тормышны тәэмин итүче органнарда гипоксиягә китерә.Әгәр дә нәтиҗә эффектив интервенциясез дәвам итсә, геморрагик шок булырга мөмкин1,4,5.Башка катлаулануларга гипотермия һәм метаболик ассидоз үсеше, шулай ук ​​коагуляция процессына комачаулый торган коагуляция бозылуы керә.Каты геморрагик шок үлем куркынычы белән бәйле 6,7,8.III класста (прогрессив) шокта, кан җибәрү пациентларның операцион һәм операциядән соң авыруы һәм үлеме өчен исән калу өчен бик кирәк.Lifeгарыда әйтелгән тормыш өчен куркыныч булган барлык очракларны җиңәр өчен, без нанопорус җепселле-ныгытылган композит скафольд (NFRCS) эшләдек, минималь полимер концентрациясен куллана (0,5%), суда эри торган гемостатик полимерлар комбинациясе ярдәмендә.
Fiberепсел ныгыту ярдәмендә чыгымлы продуктлар эшләнергә мөмкин.Очраклы урнаштырылган җепселләр аждаһа канаты структурасына охшаган, канаттагы горизонталь һәм вертикаль полосалар белән балансланган.Канатның аркылы һәм озын тамырлары канат мембранасы белән аралаша (1 нче рәсем).NFRCS яхшырак физик һәм механик көче булган скафолд системасы буларак ныгытылган Ctтан тора (Рәсем 1).Арзанлык һәм осталык аркасында, хирурглар операция һәм киенү вакытында мамык җеп үлчәүләрен (Ct) куллануны өстен күрәләр. Димәк, аның күп файдасын исәпкә алып, 90% кристалл целлюлоза (гемостатик активлыкны көчәйтә), Ct NFRCS9,10 скелет системасы буларак кулланылган. Димәк, аның күп файдасын исәпкә алып, 90% кристалл целлюлоза (гемостатик активлыкны көчәйтә), Ct NFRCS9,10 скелет системасы буларак кулланылган. Следовательно, зытывая его многочисленные преимущества, в том числе> 90% кристаллической ц чюлозы (эстаствует в повишении гемостатической активности), Ct использовали в кчечечве счеты. Шуңа күрә, аның күп өстенлекләрен исәпкә алып, 90% кристалл целлюлоза (гемостатик активлыкның артуында катнаша), Ct NFRCS скелет системасы буларак кулланылды9,10.% ， 考虑 90 90 90 90 90> 90% 的 结晶 ， ， t Ct 被 用作 NFRCS9,10 的 骨架 系统。% ， 考虑 90 90 90 90 90> 90%Шуңа күрә, аның күп өстенлекләрен исәпкә алып, 90% тан артык кристалл целлюлоза (гемостатик активлыкны көчәйтергә ярдәм итә), Ct NFRCS9,10 өчен скафель буларак кулланылды.Ct өстән капланган (нано-калын кино формалашуы күзәтелгән) һәм гемостатик кино формалаштыру композициясе (HFFC) белән бәйләнгән.HFFC очраклы рәвештә урнаштырылган Ct тотып, матригель кебек эш итә.Эшләнгән дизайн стрессны таралган этапта җибәрә (ныгытучы җепселләр).Минималь полимер концентрацияләрен кулланып, яхшы механик көче булган нанопор структураларын алу кыен.Моннан тыш, төрле биомедицина кушымталары өчен төрле формаларны көйләү җиңел түгел.
Рәсемдә аждаһа канаты структурасы (A) нигезендә NFRCS дизайнының схемасы күрсәтелгән.Бу рәсемдә аждаһа канат структурасының чагыштырма аналогы күрсәтелә (канатның кисешкән һәм озын тамырлары үзара бәйләнгән) һәм Cp NFRCS (B) кисемтә фотомикрографы.NFRCS-ның схематик чагылышы.
NFRCs югарыдагы чикләүләрне чишү өчен өзлексез этап буларак HFFC ярдәмендә эшләнде.HFFC төрле фильм формалаштыручы гемостатик полимерлардан тора, шул исәптән хитосан (төп гемостатик полимер буларак), метилселулоза (МК), гидроксипропил метилселулоза (HPMC 50 cp) һәм поливинил спирты (PVA)) (125 kDa) тромбус формалашуга ярдәм итүче полимер.формалашуы.Поливинилпирролидин K30 (PVP K30) кушылуы NFRCSның дымны үзләштерү сыйфатын яхшыртты.Полиэтилен гликол 400 (PEG 400) бәйләнгән полимер кушылмаларында полимерның үзара бәйләнешен яхшырту өчен кушылды.Ct өчен өч төрле HFFC гемостатик композиция (Cm HFFC, Ch HFFC һәм Cp HFFC), ягъни MC (Cm) белән хитосан, HPMC (Ch) белән хитосан, һәм PVA (Cp) белән хитосан кулланылды.Төрле витро һәм виво характеристика тикшеренүләре NFRCSның гемостатик һәм яраларны дәвалау активлыгын раслады.NFRCS тәкъдим иткән композицион материаллар төрле ихтыяҗларны канәгатьләндерү өчен төрле скафолдинг формаларын көйләү өчен кулланылырга мөмкин.
Моннан тыш, NFRCS аскы экстрементларның һәм тәннең бүтән өлешләренең бөтен җәрәхәт өлкәсен каплау өчен бинт яки ролл итеп үзгәртелергә мөмкин.Аерым алганда, кул-аяк җәрәхәтләре өчен, эшләнгән NFRCS дизайны ярты кулга яки тулы аякка үзгәртелергә мөмкин (өстәмә рәсем S11).NFRCS тукымалы клей белән билбауга ясалырга мөмкин, бу үз-үзенә кул салуның каты җәрәхәтләреннән канны туктату өчен кулланыла ала.Безнең төп максат - күпчелек кешегә (ярлылык чигендә) һәм беренче ярдәм күрсәтү комплектына урнаштырырга мөмкин булган аз полимерлы NFRCS булдыру.Дизайнда гади, эффектив һәм экономияле, NFRCS җирле җәмгыятьләргә файда китерә һәм глобаль йогынты ясый ала.
Читосан (молекуляр авырлык 80 кДа) һәм амарант Мерк, Indiaиндстаннан сатып алынган.Гидроксипропил метилселлюлоза 50 Cp, полиэтилен гликол 400 һәм метилцеллюлоза Loba Chemie Pvt сатып алынган.ООО, Мумбай.Поливинил спирты (молекуляр авырлык 125 кДа) (87-90% гидролизацияләнгән) Милли Химия, Гуджараттан алынган.Поливинилпирролидин К30 Молихемнан, Мумбайдан, Тамил Надудагы Рамаражу Хирургия Пахта Миллс ОООдан, Q Q суы белән (Direct-Q3 су чистарту системасы, Мерк, Indiaиндстан) сатып алынган.
NFRCS лиофилизация ысулы ярдәмендә эшләнде11,12.Барлык HFFC композицияләре (таблица 1) механик стритер ярдәмендә әзерләнгән.Механик стритерда 800 минутта өзлексез кайнап, суда 1% кислотасы кулланып, хитосанның 0,5% эремәсе әзерләгез.1-нче таблицада күрсәтелгән йөкләнгән полимерның төгәл авырлыгы хитосан эремәсенә кушылды һәм ачык полимер эремәсе алынганчы кузгатылды.PVP K30 һәм PEG 400 барлыкка килгән катнашмага 1-нче таблицада күрсәтелгән күләмдә кушылды, һәм ачык полимер эремәсе алынганчы кайнату дәвам итте.Полимер эремәсенең ванна 60 минут эчендә полимер катнашмасыннан капланган һава күбекләрен чыгару өчен ясалды.Өстәмә рәсемдә күрсәтелгәнчә S1 (b), Ct 5 мл HFFC белән тулыландырылган 6 кое тәлинкә (форма) һәр коеда тигез бүленде.
Алты кое тәлинкә 60 минутка Ct челтәрендә HFFC бердәм сугаруга һәм таратуга ирешелде.Аннары алты кое тәлинкәне -20 ° C температурада 8-12 сәгать туңдырыгыз.Туңдырма тәлинкәләр NFRCSның төрле формулаларын алу өчен 48 сәгать дәвамында лиофилизацияләнде.Шул ук процедура төрле формалар һәм структуралар чыгару өчен кулланыла, мәсәлән, тампон яки цилиндрик тампон, яки төрле кушымталар өчен башка форма.
Төгәл үлчәүле хитосан (80 kDa) (3%) магнит стритеры ярдәмендә 1% кислотасында эри.Читосан эремәсенә 1% PEG 400 кушылды һәм 30 минут кайнатылды.Нәтиҗә ясалган эремәне квадрат яки турыпочмаклы савытка салыгыз һәм -80 ° C 12 сәгатькә туңдырыгыз.Туңдырылган үрнәкләр Cs13 күзәнәкләрен алу өчен 48 сәгать дәвамында лиофилизацияләнде.
Эшләнгән NFRCS хитосанның башка полимерлар белән химик туры килүен раслау өчен Фурье трансформацион инфракызыл спектроскопия (FTIR) (Шимадзу 8400 s FTIR, Токио, Япония) кулланып экспериментларга дучар булды.Барлык тикшерелгән үрнәкләрнең FTIR спектры (спектр диапазонының киңлеге 400 - 4000 см-1) 32 сканер ясап алынган.
Барлык формуляцияләр өчен дә кан сеңдерү дәрәҗәсе (BAR) Чен һәм башкалар сурәтләгән ысул ярдәмендә бәяләнде.16 аз үзгәртүләр белән.Барлык композицияләрнең эшләнгән NFRKлары вакуум мичендә төнлә 105 ° C ка киптерделәр, калдыкны эретү өчен.30 мг NFRCS (башлангыч үрнәк авырлыгы - W0) һәм 30 мг Ct (уңай контроль) 3,8% натрий цитраты премикасы булган аерым савытларга урнаштырылды.Алдан билгеләнгән вакыт аралыгында, ягъни 5, 10, 20, 30, 40 һәм 60 секундта, NFRCS алынды һәм аларның өслекләре 30 секундка Ct үрнәкләрен куеп, чистартылмаган каннан чистартылды.NFRCS 16 үзләштергән канның соңгы авырлыгы һәр пунктта (W1) каралды.Түбәндәге формула ярдәмендә BAR процентын исәпләгез:
Кан җыю вакыты (BCT) Ван һәм башкалар хәбәр иткәнчә билгеләнде.17.NFRCS булганда тулы кан (тычкан каны 3,8% натрий цитраты белән кушылган) өчен кирәк булган вакыт сынау үрнәгенең BCT булып исәпләнде.Төрле NFRCS компонентлары (30 мг) 10 мл винт капка касәләренә урнаштырылды һәм 37 ° C инкубацияләнде.Касәгә кан (0,5 мл) кушылды, кан коагуляциясен активлаштыру өчен 0,3 мл 0,2 М CaCl2 кушылды.Ниһаять, касәне 15 секунд саен (180 ° га кадәр) нык тыгызлык барлыкка килгәнче кире борыгыз.Ampleрнәкнең BCT флип пәрдәләре саны белән бәяләнә17,18.BCT нигезендә, алга таба характеристика өйрәнүләре өчен NFRCS Cm, Ch һәм Cp-ның ике оптималь композициясе сайланды.
Ch NFRCS һәм Cp NFRCS композицияләренең BCT Ли һәм башкалар сурәтләгән ысулны кулланып билгеләнде.19.15 x 15 мм2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, һәм Cs (уңай контроль) аерым Петри савытларына (37 ° C) урнаштырыгыз.3,8% натрий цитраты булган кан 0,2 M CaCl2 белән 10: 1 күләмендә кушылды, кан җыю процессын башлау өчен.20 µl 0,2 M CaCl2 тычкан кан катнашмасы үрнәк өслегенә кулланылды һәм буш Петри савытына урнаштырылды.Контроль буш Петри савытларына Ctсыз кушылды.0, 3, һәм 5 минутлык интервалларда, савытны үз эченә алган үрнәккә 10 мл деонизацияләнгән (DI) су кушып, канлашуны туктатыгыз.Көтелмәгән эритроцитлар (эритроцитлар) деонизацияләнгән су булганда гемолиз кичерәләр һәм гемоглобинны чыгаралар.Төрле вакыт нокталарында гемоглобин (HA (t)) UV-Vis спектропотометры ярдәмендә 540 нм (λmax гемоглобин) белән үлчәнде.Гемоглобинның (AH (0)) 0 минутта 20 µл канда 10 мл деонизацияләнгән суда абсолют үзләштерү белешмә стандарты буларак кабул ителде.Коагуляцияләнгән канның чагыштырмача гемоглобин алуы (RHA) шул ук партия канын кулланып HA (t) / HA (0) нисбәтеннән исәпләнде.
Текстур анализаторын кулланып (Текстур Pro CT V1.3 Build 15, Брукфилд, АКШ), NFRKның зарарланган тукымаларга ябыштыргыч үзлекләре билгеләнде.Дуңгыз итенең эчке ягына ачык майлы цилиндрик савытны басыгыз (май катламы булмаса).Дуңгыз тиресенә ябышу өчен, үрнәкләр (Ch NFRCS һәм Cp NFRCS) каннула аша цилиндрик формаларга кулланылды.Бүлмә температурасында (ТР) 3 минутлык инкубациядән соң (25 ° C), NFRCS ябыштыргыч көче даими 0,5 мм / сек тизлектә теркәлде.
Хирургик плиткаларның төп үзенчәлеге - кан югалтуын киметкәндә кан җыюны арттыру.NFRCSдагы югалтмас коагуляция моңа кадәр бастырылган ысул ярдәмендә бәяләнде, аз үзгәртүләр 19.Centентрифуга трубасының бер ягында 8 × 5 мм2 тишекле микроцентрифуга трубасы (2 мл) (эчке диаметры 10 мм) ясагыз (ачык яраны күрсәтә).NFRCS ачуны ябу өчен кулланыла, тышкы кырларны мөһерләү өчен тасма кулланыла.3,8% натрий цитрат премикс булган микроцентрифуга торбасына 20 µl 0,2 M CaCl2 кушыгыз.10 минуттан соң савытлардан микроцентрифуга торбалары алынды һәм савытларның массасының артуы NFRK (n = 3) кан агымы аркасында билгеләнде.Кан югалту Ch NFRCS һәм Cp NFRCS CS белән чагыштырылды.
NFRCSның дым тулылыгы Мишра һәм Чаудхари21 белән кечкенә үзгәртүләр белән сурәтләнгән ысул нигезендә билгеләнде.NFRCS-ны 100 мл Эрленмейер савытына 50 мл су белән урнаштырыгыз һәм өстен ясамыйча 60 с.Collectionыю нигезендә физик бөтенлек өчен визуаль тикшерү һәм үрнәкләрнең өстенлеге.
HFFC-ның Ct белән бәйләүче көче кечкенә модификацияләр белән элек бастырылган ысуллар ярдәмендә өйрәнелде.Faceир өсте каплау бөтенлеге NFRK-ны акустик дулкыннарга (тышкы стимул) миллиQ су (Ct) булганда бәяләде.Эшләнгән NFRCS Ch NFRCS һәм Cp NFRCS су белән тутырылган чүкечкә урнаштырылды һәм тиешенчә 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, һәм 30 мин.Кипкәч, NFRCSның башлангыч һәм соңгы авырлыгы арасындагы процент аермасы материалның югалтуын исәпләү өчен кулланылды (HFFC).Витро BCT тагын да бәйләүче көчне яки өслек материалларын югалтуны хуплады.Ct белән бәйләүче HFFC эффективлыгы кан коагуляциясен һәм Ct22 өслегендә эластик каплауны тәэмин итә.
Эшләнгән NFRCSның бер тигезлеге NFRCSның очраклы сайланган гомуми урыннарыннан алынган үрнәкләрнең BCT (30 мг) белән билгеләнде.NFRCS туры килүен ачыклау өчен алда искә алынган BCT процедурасын үтәгез.Барлык биш үрнәкләр арасындагы якынлык бертөрле өслекне каплауны һәм Ct мешендә HFFC чүпләнүен тәэмин итә.
Канның контакт өлкәсе (NBCA) кайбер модификацияләр белән алдан хәбәр ителгәнчә билгеләнде.Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS һәм Csның ике өслеге арасында 20 µл канны кысып канны коагуляцияләгез.1 сәгатьтән соң стентның ике өлеше аерылды һәм кул белән канның мәйданын үлчәде.Өч кабатлауның уртача бәясе NBCA NFRCS19 булып саналды.
Динамик пар сорпциясе (DVS) анализы NFRCSның тышкы тирәлектән яки коагуляция башлау өчен җаваплы җәрәхәт урыныннан су сеңдерүнең эффективлыгын бәяләү өчен кулланылды.DVS парның кабул ителүен һәм югалуын гравиметрик үрнәктә ультра сизгер баланс кулланып масса резолюциясе ± 0,1 µг бәяли яки яздыра.Парның өлешчә басымы (чагыштырмача дым) электрон масса агым контроллеры белән туенган һәм коры ташучы газларны кушып үрнәк тирәсендә барлыкка килә. Европа фармакопиясе күрсәтмәләре буенча, үрнәкләр буенча дым алу процентына нигезләнеп, үрнәкләр 4 категориягә бүленде (0–0,012% w / w− гигроскопик булмаган, 0,2-2% w / w бераз гигроскопик, 2-15% уртача гигроскопик һәм> 15% бик гигроскопик) 23. Европа фармакопиясе күрсәтмәләре буенча, үрнәкләр буенча дым алу процентына нигезләнеп, үрнәкләр 4 категориягә бүленде (0–0,012% w / w− гигроскопик булмаган, 0,2-2% w / w бераз гигроскопик, 2-15% уртача гигроскопик һәм> 15% бик гигроскопик) 23.Европа фармакопоя тәкъдимнәре нигезендә, үрнәкләр дымның үзләштерү процентына карап, үрнәкләр 4 категориягә бүленде (0–0.012% w / w - гигроскопик булмаган, 0,2-2% w / w бераз гигроскопик, 2– унбиш%).% умеренно гигроскопичен и> 15% очень гигроскопичен) 23. % уртача гигроскопик һәм> 15% бик гигроскопик) 23.根据 欧洲 药典 指南 ， 分为 分为 4 类 （0-0.012% w / w- 非 、 0.2-2% w / w 轻微 -15 -15 2-15% 适度 吸湿 15> 15% 非常 吸湿） 23。根据 欧洲 药典 指南 -0 （-0 0-0.012% W / w- 吸湿 2 .2 0.2-2% W / w 轻微 -15 2-15% 适度 吸湿 ，> 15% 非常）） 23。Европа фармакопоя тәкъдимнәре нигезендә, үрнәкләр үзләштерелгән дым процентына карап 4 класска бүленәләр (авырлыгы буенча 0-0,012% - гигроскопик булмаган, авырлыгы буенча 0,2-2%, авырлыгы буенча 2-15%).% умеренно гигроскопичен,> 15% очень гигроскопичен) 23. % уртача гигроскопик,> 15% бик гигроскопик) 23.NFCS X NFCS һәм TsN NFCSның гигроскопик эффективлыгы DVS TA TGA Q5000 SA анализаторында билгеләнде.Бу процесс вакытында эш вакыты, чагыштырма дым (RH), һәм 25 ° C24 реаль вакыттагы үрнәк авырлыгы алынды.Дым эчтәлеге түбәндәге тигезләмә ярдәмендә төгәл NFRCS масса анализы белән исәпләнә:
МК - NFRCS дым.m1 - NSAIDларның коры авырлыгы.m2 - бирелгән RHдагы реаль вакыт NFRCS массасы.
Гомуми өслек мәйданы сыек азот белән азотның adsorption эксперименты ярдәмендә бәяләнде, үрнәкләрне 25 ° C 10 сәг. Гомуми өслек мәйданы сыек азот белән азотның adsorption эксперименты ярдәмендә бәяләнде, үрнәкләрне 25 ° C 10 сәг. Общая площадь поверхности оценивалась с помощу зимимента по ад адсиции азота жидким азотом после о чиджнения обрцов при 25 ° С в течение 10 ч (<7 × 10–3 конср). Гомуми өслек мәйданы сыек азот белән азотның adsorption эксперименты ярдәмендә бәяләнде, үрнәкләр 25 ° C 10 сәгатькә бушаганнан соң (<7 × 10–3 Торр).在 25 ° C 清空 样品 10 小时 7 <7 × 10-3 Торр） 后 ， 使用 液氮。。。在 25 ° C. Общая площадь поверхности оценивалась с использованием елов по ад адбции азота жидким азотом после о чидожнения орбцов в течени 10 часов при 25 ° C (<7 × 10-3 торр). 25 ° C (<7 x 10-3 торр) үрнәкләре 10 сәгать бушаганнан соң, сыек азот белән азотны adsorption экспериментлары кулланып, өслекнең гомуми мәйданы бәяләнде.Гомуми өслек мәйданы, күзәнәк күләме һәм NFRCS күзәнәк күләме NOVA 1000e, Австрия RS 232 программа ярдәмендә квант белән билгеләнде.
Бөтен каннан 5% РБК (тозлы) тоз әзерләгез.Аннары HFFC аликотын (0,25 мл) 96 кое тәлинкәгә һәм 5% РБК массасына (0,1 мл) күчерегез.Бу катнашманы 37 минутта 40 минутка инкубацияләгез.Кызыл кан күзәнәкләре һәм зарум катнашмасы уңай контроль, тозлы һәм кызыл кан күзәнәкләре катнашмасы тискәре контроль булып саналды.Гемагглютинация Стажицкий масштабы буенча билгеләнде.Тәкъдим ителгән таразалар түбәндәгечә: + + + + тыгыз гранул агрегатлар;+ + + кәкре кырлары белән шома аскы такталар;+ + ертылган кырлары белән шома аскы такталар;+ шома такта кырлары тирәсендә тар кызыл боҗралар;- (тискәре) аскы кое уртасында 12 кызыл төймә.
NFRCS-ның гемокомплективлыгы Халыкара Стандартлаштыру Оешмасы (ISO) (ISO10993-4, 1999) 26,27 ысулы буенча өйрәнелде.Сингх һәм башкалар сурәтләгән гравиметрик ысул.Тромбус формалашуын NFRCS булганда яки өслегендә бәяләү өчен кечкенә модификацияләр ясалды.500 мг Cs, Ch NFRCS һәм Cp NFRCS фосфат буферланган тозда (ПБС) 37 сәгать эчендә 24 сәгать инкубацияләнде.24 сәгатьтән соң ПБС алынды һәм NFRCS 2 мл кан белән эшкәртелде, 3,8% натрий цитраты.NFRCS өслегендә инкубацияләнгән үрнәкләргә 0,04 мл 0,1 М CaCl2 кушыгыз.45 минуттан соң коагуляцияне туктатыр өчен 5 мл дистилляцияләнгән су кушылды.NFRK өслегендә коагуляцияләнгән кан 36-38% формальдегид эремәсе белән эшкәртелде.Формальдегид белән тоташтырылган плиталар киптерделәр һәм үлчәделәр.Тромбоз проценты стаканның авырлыгын кансыз һәм үрнәксез (тискәре контроль) һәм пыяла кан белән (позитив контроль) исәпләп бәяләнде.
Башлангыч раслау буларак, үрнәкләр оптик микроскоп астында визуальләштерелде, HFFC өслеге каплау, Ct үзара бәйләнгән һәм Ct челтәренең күзәнәкләр булдыру мөмкинлеген аңлау.NFRCS-ның Ch һәм Cp нечкә кисәкләре скальпель плитасы белән киселгән.Нәтиҗә ясалган бүлек пыяла слайдка урнаштырылды, каплагыч белән капланды, кырлары клей белән тоташтырылды.Әзерләнгән слайдлар оптик микроскоп астында каралды һәм төрле зурлыкта фотога төшерелде.
Ct челтәрләрендә полимер чүпләү Райс һәм башкалар тасвирлаган ысул нигезендә флуоресцент микроскопия ярдәмендә визуальләштерелгән. Формуляция өчен кулланылган HFFC композициясе флуоресцент буяу (амарант) белән кушылды, һәм NFRCS (Ch & Cp) алда әйтелгән ысул буенча әзерләнде. Формуляция өчен кулланылган HFFC композициясе флуоресцент буяу (амарант) белән кушылды, һәм NFRCS (Ch & Cp) алда әйтелгән ысул буенча әзерләнде.Формуляция өчен кулланылган HFFC композициясе флуоресцент буяу (амарант) белән кушылды һәм алда әйтелгән ысул буенча NFRCS (Ch һәм Cp) алынды.NFRCS （Ch & Cp）。 F HFFC 组合 F F F F FNFRCS （Ch & Cp）。 F HFFC 组合 F F F F FФормуляциядә кулланылган HFFC композициясе флуоресцент буяу (Amaranth) белән кушылган һәм алда әйтелгәнчә NFRCS (Ch һәм Cp) алган.НФРКның нечкә бүлекләре алынган үрнәкләрдән киселгән, пыяла слайдларга куелган һәм каплагычлар белән капланган.Яшел фильтр (310-380 нм) ярдәмендә флюоресцент микроскоп астында әзерләнгән слайдларны күзәтегез.Ct мөнәсәбәтләрен һәм Ct челтәрендәге полимерның артык чүпләнүен аңлау өчен рәсемнәр 4х зурлыкта алынган.
NFRCS Ch һәм Cp өслек топографиясе ату көче микроскопы (AFM) ярдәмендә ультра үткен TESP кантильверы белән кагылу режимында билгеләнде: 42 N / m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Брукер, Тайвань.Faceир өслегенең тупаслыгы программа ярдәмендә (Сканерлау Рәсем Процессоры) кулланып, төп квадрат (RMS) белән билгеләнде.3D рәсемнәрдә төрле NFRCS урыннары күрсәтелде, өслекнең бердәмлеген тикшерү.Бирелгән өлкә өчен баллның стандарт тайпылышы өслекнең тупаслыгы дип билгеләнә.RMS тигезләмәсе NFRCS31 өслегенең тупаслыгын бәяләү өчен кулланылды.
FESEM нигезендә тикшеренүләр FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Хитачи, Токио ярдәмендә үткәрелде, C NFRCS һәм Cp NFRCS өслек морфологиясен аңлау өчен, Cm NFRCSга караганда BCT яхшырак күрсәткән.FESEM өйрәнүе Чжао һәм башкалар сурәтләгән ысул буенча башкарылды.32 кечкенә үзгәртүләр белән.NFRCS 20-30 мг Ch NFRCS һәм Cp NFRCS 20 µл 3,8% натрий цитраты белән тычкан каны белән кушылган.Коагуляция башлау өчен кан белән эшләнгән үрнәкләргә 20 μl 0,2 M CaCl2 кушылды һәм үрнәкләр бүлмә температурасында 10 минут инкубацияләнде.Моннан тыш, артык эритроцитлар NFRCS өслегеннән тозлы чайкап чыгарылды.
Соңгы үрнәкләр 0,1% глютаральдегид белән эшкәртелде, аннары дымны бетерү өчен 37 ° C кайнар һава мичендә киптерделәр.Кипкән үрнәкләр капланган һәм анализланган 32.Анализ вакытында алынган бүтән рәсемнәр аерым мамык җепселләре өстендә кан тамырлары формалашуы, Ct арасында полимер чүпләнеше, эритроцит морфологиясе (форма), канның бөтенлеге, NFRCS булганда эритроцит морфологиясе.Тазартылмаган NFRCS өлкәләре һәм Ch һәм Cp белән эшкәртелгән NFRCS өлкәләре кан белән инкубацияләнгән элементлар ионнар өчен сканерланган (натрий, калий, азот, кальций, магний, цинк, бакыр һәм селен) 33.Элемент ион процентларын эшкәртелгән һәм эшкәртелмәгән үрнәкләр арасында чагыштырыгыз.
Ct өслегендә Cp HFFC өслегенең калынлыгы FESEM ярдәмендә билгеләнде.Cp NFRCSның кисемтәләре рамкадан киселгән һәм чәчелгән.Нәтиҗә ясалган шакмак каплау үрнәкләре FESEM тарафыннан күзәтелде һәм өслек катламының калынлыгы 34, 35, 36 белән үлчәнде.
Рентген микро-КТ югары резолюцияле 3D җимергеч булмаган сурәтләү тәэмин итә һәм NFRK эчке структурасын өйрәнергә мөмкинлек бирә.Микро-КТ үрнәк аша узучы рентген нурларын куллана, морфологик мәгълүмат алырга ярдәм итүче рентген нурларының җирле сызыклы коэффициентын язу өчен.Cp NFRCSдагы Ctның эчке урыны һәм кан белән эшкәртелгән Cp NFRCS микро-КТ тарафыннан NFRCS37,38,39 булганда үзләштерү эффективлыгын һәм кан җыюны аңлау өчен тикшерелде.Кан белән эшкәртелгән һәм эшкәртелмәгән Cp NFRCS үрнәкләренең 3D структуралары микро-КТ ярдәмендә реконструкцияләнде (V | том | x S240, Феникс, Германия).VG STUDIO-MAX программа тәэминаты 2.2 версиясен кулланып, NFRCS өчен 3D рәсемнәр ясау өчен берничә рентген рәсемнәр төрле почмаклардан алынган (идеаль 360 ° яктырту)..Ыелган проекция мәгълүматлары тиешле 3D ScanIP академик программа ярдәмендә 3D күләмле рәсемнәргә реконструкцияләнде.
Моннан тыш, кан җыюны башлау өчен, NFRCS-ка 20 µл премиксланган цитратланган кан һәм 20 µl 0,2 M CaCl2 кушылды.Әзерләнгән үрнәкләр катырырга калдырыла.NFRK өслеге 0,5% глютаральдегид белән эшкәртелде һәм 30-40 ° C кайнар һава мичендә 30 минутка киптерелде.NFRCSда барлыкка килгән кан тамыры сканерланды, реконструкцияләнде, һәм кан тамырының 3D рәсеме визуальләштерелде.
Антибактериаль анализлар Cp NFRCS (Ch NFRCS белән чагыштырганда иң яхшы) алда тасвирланган ысулны кечкенә үзгәртүләр ярдәмендә башкарылды.Cp NFRCS һәм Cp HFFC антибактериаль активлыгы инкубатордагы Петри савытларында агарда үскән өч төрле сынау микроорганизмнары [С.Аурей (грамм-позитив бактерияләр), Э.Коли (грамм-тискәре бактерияләр) һәм ак Кандида (C.albicans) ярдәмендә билгеләнде.Агар уртага 105-106 CFU мл-1 концентрациясендә 50 мл эретелгән бактерия культурасы асылынуны бертөрле прививка.Петри савытына уртача салыгыз һәм аны ныгытырга рөхсәт итегез.Скважиналар агар тәлинкәсе өстендә HFFC белән тутыру өчен ясалган (HFFC өчен 3 скважина һәм тискәре контроль өчен 1).4 скважинага 200 µl HFFC һәм 200 µl pH 7.4 PBS кушыгыз.Петри савытның икенче ягына каты мм агарга 12 мм Cp NFRCS диск куегыз һәм ПБС белән дымлагыз (pH 7.4).Сипрофлоксаин, ампициллин һәм флуконазол планшетлары Стафилококк ауреасы, Эшеричия коли һәм Кандида альбиканнары өчен белешмә стандартлар булып санала.Ингибия зонасын кул белән үлчәгез һәм тыю зонасының санлы сурәтен алыгыз.
Институциональ этик хуплаудан соң, өйрәнү Кастурба медицина белем һәм тикшеренүләр колледжында, Манипалда, Карнатакада, southernиндстанның көньягында үткәрелде.Витро TEG эксперименталь протоколы Карнатаканың Манипал, Кастурба медицина көллиятенең институциональ этика комитеты тарафыннан каралды һәм расланды (IEC: 674/2020).Темалар волонтер кан донорларыннан (18 яшьтән 55 яшькә кадәр) больницаның кан банкыннан алынган.Моннан тыш, кан үрнәкләрен җыю өчен волонтерлардан рөхсәт формасы алынган.Туган TEG (N-TEG) ​​Cp HFFC формулировкасының натрий цитраты белән кушылган бөтен канга тәэсирен өйрәнү өчен кулланылды.N-TEG реанимациядәге роле белән киң таныла, нәтиҗә клиникларның әһәмиятле тоткарлану потенциалы аркасында клиниклар өчен проблемалар тудыра (гадәти коагуляция тестлары).N-TEG анализы бөтен кан ярдәмендә башкарылды.Барлык катнашучылардан мәгълүматлы ризалык һәм җентекле медицина тарихы алынган.Тикшеренүдә гемостатик яки тромботик авырлыклар булган катнашучылар кермәде, мәсәлән, йөклелек / бала тудыру яки бавыр авыруы.Коагуляция каскадына тәэсир итүче наркотиклар кулланган предметлар да тикшерүдән чыгарылды.Стандарт процедуралар нигезендә барлык лаборатория тестлары (гемоглобин, протромбин вакыты, активлашкан тромбопластин һәм тромбоцитлар саны) үткәрелде.N-TEG кан тамырларының вискоэластиклыгын, башлангыч кан структурасын, кисәкчәләрнең үзара бәйләнешен, кан тамырларын ныгыту һәм кан лизисын билгели.N-TEG анализы берничә кәрәзле элементның һәм плазманың коллектив эффектлары турында график һәм санлы мәгълүмат бирә.N-TEG анализы Cp HFFCның ике төрле томында (10 µл һәм 50 µл) башкарылды.Нәтиҗәдә, литр кислотасы белән 1 мл тулы кан 10 μл Cp HFFC кушылды.TEG савыты булган 20 мл 0,2 М CaCl2 га 1 мл (Cp HFFC + цитратланган кан), 340 µл катнаш кан кушыгыз.Аннан соң, R, K, альфа почмагы, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% Cp HFFC41 булганда, TEG савытлары TEG® 5000, АКШка салынды.
Vivo өйрәнү протоколы Институциональ хайваннар этикасы комитеты (IAEC), Кастурба медицина мәктәбе, Манипал югары белем институты, Манипал (IAEC / KMC / 69/2020) тарафыннан каралды һәм расланды.Барлык хайван тәҗрибәләре дә хайваннарны экспериментлау белән идарә итү комитеты (CPCSEA) тәкъдимнәре нигезендә үткәрелде.Барлык vivo NFRCS тикшеренүләре (2 × 2 см2) хатын-кыз Вистар тычканнарында (авырлыгы 200 - 250 г) башкарылды.Барлык хайваннар да 24-26 ° C температурада климатлаштырылган, хайваннар стандарт ризык һәм су рекламасы белән бушлай файдалана алган.Барлык хайваннар да очраклы рәвештә төрле төркемнәргә бүленделәр, һәр төркем өч хайваннан тордылар.Барлык тикшеренүләр дә хайваннарны өйрәнү нигезендә башкарылды: Vivo экспериментлары отчеты 43.Тикшеренү башланганчы, хайваннар 20-50 мг кетамин (1 кг тән авырлыгына) һәм 2-10 мг ксилазин (1 кг тән авырлыгына) катнашуны интерперитональ (ip) куллану белән наркозландырдылар.Тикшеренүләрдән соң, канның күләме үрнәкләрнең башлангыч һәм соңгы авырлыгы арасындагы аерманы бәяләп исәпләнде, өч тесттан алынган уртача кыйммәт үрнәкнең кан күләме итеп алынды.
Кычыткан койрыгын кисү моделе NFRCSның травма, сугыш яки юл-транспорт һәлакәтендә канны модульләштерү потенциалын аңлау өчен тормышка ашырылды.Койрыкның 50% скальпель плитасы белән кисеп алыгыз һәм гадәти кан китүне тәэмин итү өчен һавага 15 с.Моннан тыш, сынау үрнәкләре басым кулланып тычкан койрыгына куелды (Ct, Cs, Ch NFRCS һәм Cp NFRCS).Тест үрнәкләре өчен кан китү һәм ПКТ хәбәр ителде (n = 3) 17,45.
Сугышта NFRCS басым контроле эффективлыгы өстән фемораль артерия моделендә тикшерелде.Фемораль артерия фаш ителә, 24G трокар белән тишелә һәм 15 секунд эчендә кан китә.Контрольсез кан китү күзәтелгәннән соң, сынау үрнәге тешләнгән урынга басым ясалган.Тест үрнәген кулланганнан соң, кан җыю вакыты язылды һәм киләсе 5 минут эчендә гемостатик эффективлык күзәтелде.Шул ук процедура Cs һәм Ct46 белән кабатланды.
Доулинг һ.б.47 гемостатик материалларның гемостатик потенциалын операцион кан контекстында бәяләү өчен бавыр җәрәхәтләре моделен тәкъдим иттеләр.BCT Ct үрнәкләре (тискәре контроль), Cs базасы (уңай контроль), Ch NFRCS үрнәкләре, һәм Cp NFRCS үрнәкләре өчен язылган.Кычытканның супрахепатик вена кавасы уртача лапаротомия ясап фаш ителде.Аннан соң сул лобның дисталь өлеше кайчы белән киселде.Скальпель плитасы белән бавырда кисемтә ясагыз һәм берничә секундка кан җибәрегез.Төгәл үлчәү Ch NFRCS һәм Cp NFRCS сынау үрнәкләре зарарланган өслеккә бернинди уңай басымсыз урнаштырылды һәм BCT язылды.Контроль төркем (Ct) аннары басым кулланды, аннары Cs 30 s47 җәрәхәтне бозмыйча.
Vivo ярасын дәвалау анализлары полимер нигезендә эшләнгән NFRCSларның яраны дәвалау үзлекләрен бәяләү өчен эксизизаль яра моделе ярдәмендә башкарылды.Экзизицион яраларның модельләре сайланган һәм кечкенә модификацияләр белән элек бастырылган ысуллар буенча башкарылган19,32,48.Барлык хайваннар да алдан әйтелгәнчә наркозланганнар.Арткы тиредә түгәрәк тирән кисү өчен биопси тибү (12 мм) кулланыгыз.Әзерләнгән яралар Cs (позитив контроль), Ct (мамык такталарның дәвалануга комачаулаганын танып), Ch NFRCS һәм Cp NFRCS (эксперимент төркеме) һәм бернинди дәвалаусыз тискәре контроль белән киенгәннәр.Тикшеренүнең һәр көнендә яраның мәйданы барлык тычканнарда үлчәнде.Яралы урынны фотога төшерү һәм яңа кием киү өчен санлы камера кулланыгыз.Яраны ябу проценты түбәндәге формула белән үлчәнде:
Тикшеренүнең 12-нче көнендә яраларны ябу процентына нигезләнеп, иң яхшы төркемнең тычкан тире аксизланган ((Cp NFRCS) һәм контроль төркем) һәм H & E буяу һәм Массон трихромы белән өйрәнелгән. Тикшеренүнең 12-нче көнендә яраларны ябу процентына нигезләнеп, иң яхшы төркемнең тычкан тире аксизланган ((Cp NFRCS) һәм контроль төркем) һәм H & E буяу һәм Массон трихромы белән өйрәнелгән.Тикшеренүләрнең 12-нче көнендә яраларны ябу процентына нигезләнеп, иң яхшы төркемнең (Cp NFRCS) һәм контроль төркемнең тычканнары тире акцизланган һәм гематоксилин-эозин һәм Массон трихромы белән буялган.(P 第 第 ((((Cp NFRCS) 和 对照 组) 的 大鼠 皮肤 进行 H&E 染色 和 Массон 三 色 染色 研究(P 第 第 ((((Cp NFRCS) 和 对照 组) 的 大鼠 皮肤 & & H&E 染色 和 眳 组）Иң яхшы төркемдәге тычканнар ((Cp NFRCS) һәм контроль төркемнәр) гематоксилин-эозин буяу өчен һәм Массон трихромы буяу өчен тикшерүнең 12 нче көнендә процент ярасы ябылган.Эшләнгән буяу процедурасы алда тасвирланган ысуллар буенча башкарылды 49,50.Кыскасы, 10% формалинда урнаштырылганнан соң, үрнәкләр спиртлы спиртлар ярдәмендә дегидратланган.Акциз тукыманың нечкә бүлекләрен (5 мм калынлык) алу өчен микротом кулланыгыз.Гистопатологик үзгәрешләрне өйрәнү өчен, контрольнең нечкә серияләре һәм Cp NFRCS гематоксилин һәм эозин белән эшкәртелде.Массонның трихром таплары коллаген фибрилларының барлыкка килүен ачыклау өчен кулланылган.Алынган нәтиҗәләр патологлар тарафыннан сукыр өйрәнелде.
Cp NFRCS үрнәкләренең тотрыклылыгы 12 ай эчендә бүлмә температурасында (25 ° C ± 2 ° C / 60% RH ± 5%) өйрәнелде.Cp NFRCS (өслекнең төссезләнүе һәм микробиаль үсеш) визуаль рәвештә тикшерелде һәм катлаулы киемгә каршы тору һәм BCT материаллар һәм методлар бүлегендә күрсәтелгән югарыдагы ысуллар буенча тикшерелде.
Cp NFRCSның масштаблылыгы һәм репродуктивлыгы 15 × 15 см2 зурлыктагы Cp NFRCS әзерләп тикшерелде.Моннан тыш, 30 мг үрнәк (n = 5) төрле Cp NFRCS фракцияләреннән чыгарылды һәм өйрәнелгән үрнәкләрнең BCT методлар бүлегендә алдан әйтелгәнчә бәяләнде.
Төрле биомедицина кушымталары өчен Cp NFRCS композицияләрен кулланып төрле формаларны һәм структураларны үстерергә тырыштык.Мондый формаларга яки конфигурацияләргә борын каннары өчен конус сваблар, стоматологик процедуралар, вагиналь кан китү өчен цилиндрик сваблар керә.
Барлык мәгълүматлар җыелмасы уртача ± стандарт тайпылыш рәвешендә күрсәтелә һәм ANOVA тарафыннан Prism 5.03 (GraphPad, Сан-Диего, Калифорния, АКШ) ярдәмендә анализланды, аннары Бонферрониның берничә чагыштыру тесты (* p <0.05).
Кеше тикшеренүләрендә башкарылган барлык процедуралар институт һәм Милли тикшеренүләр советы стандартларына, шулай ук ​​Хельсинки 1964 Декларациясенә һәм аннан соңгы төзәтмәләргә, яки охшаш этик стандартларга туры килде.Барлык катнашучыларга да өйрәнүнең үзенчәлекләре һәм аның ирекле характеры турында мәгълүмат бирелде.Катнашкан мәгълүматлар тупланганнан соң яшерен булып кала.Витро TEG эксперименталь протоколы Карнатаканың Манипал, Кастурба медицина көллиятенең институциональ этика комитеты тарафыннан каралды һәм расланды (IEC: 674/2020).Волонтерлар кан үрнәкләрен җыярга рөхсәт бирделәр.
Хайваннарны өйрәнүдә башкарылган барлык процедуралар Кастуба медицина факультеты, Манипал югары белем институты, Манипал (IAEC / KMC / 69/2020) нигезендә башкарылды.Барлык хайваннар экспериментлары да хайваннарны экспериментлау белән идарә итү һәм күзәтү комитеты (CPCSEA) күрсәтмәләре нигезендә үткәрелде.Барлык авторлар да ARRIVE күрсәтмәләрен тоталар.
Барлык NFRCSның FTIR спектры анализланды һәм 2A рәсемдә күрсәтелгән хитосан спектры белән чагыштырылды.3437 см-1дә характеристик спектраль вактлар, 2945 һәм 2897 см-1 (n-h-1), 1157 см-1 (c-o, икенчел гидроксил) , 993 см-1 (Co, Bo-EH) 52.53.54.Өстәмә таблица S1 хитосан (хәбәрче), саф хитосан, Cm, Ch, Cp өчен FTIR NFRCS үзләштерү спектры кыйммәтләрен күрсәтә.Барлык NFRCS (Cm, Ch һәм Cp) FTIR спектры бернинди мөһим үзгәрешләрсез саф хитосан белән бер үк характеристик үзләштерү полосаларын күрсәтте (2A рәсем).FTIR нәтиҗәләре NFRCSны үстерү өчен кулланылган полимерлар арасында химик яки физик үзара бәйләнешнең юклыгын раслады, кулланылган полимерларның инерт булуын күрсәтә.
Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS һәм Cs витро характеристикасы.(А) хитосан һәм Cm NFRCS, Ch NFRCS һәм Cp NFRCS композицияләренең берләштерелгән FTIR спектрын күрсәтә.(Б) а) NFRCS Cm, Ch, Cp, Cg (n = 3) тулы кан алу тизлеге;Ct үрнәкләре югарырак BAR күрсәттеләр, чөнки мамык чүпрәк үзләштерү эффективлыгына ия;б) Кан сеңгәннән соң кан сеңдерелгән үрнәк иллюстрациясе.Сынау үрнәгенең BCT график тасвирламасы (Cp NFRCS иң яхшы BCT булган (15 s, n = 3)). C, D, E, Gдагы мәгълүматлар уртача ± SD рәвешендә күрсәтелде, һәм хаталар сызыклары SD, *** p <0.0001. C, D, E, Gдагы мәгълүматлар уртача ± SD рәвешендә күрсәтелде, һәм хаталар сызыклары SD, *** p <0.0001. Данные в C, D, E һәм G предверлены как среднее ± сардное отклонение, акики погрешностей предвайляют сдерное отклонение, *** p <0,0001. C, D, E, Gдагы мәгълүматлар уртача ± стандарт тайпылыш рәвешендә күрсәтелә, һәм хата юллары стандарт тайпылышны күрсәтә, *** p <0.0001. C 、 D 、 E 和 G 中 SD SD SD SD SD ， 代表 代表 SD ， *** p <0.0001。 C 、 D 、 E 和 G 中 SD SD SD SD SD ， 代表 代表 SD ， *** p <0.0001。 Данные в C, D, E и G показаня как среднее значение ± сдерное отклонение, чекки погрешностей предвайляют сдерное отклонение, *** p <0,0001. C, D, E, Gдагы мәгълүматлар уртача ± стандарт тайпылыш рәвешендә күрсәтелә, хата юллары стандарт тайпылышны күрсәтә, *** p <0.0001.