Nature.com نى زىيارەت قىلغىنىڭىزغا رەھمەت. سىز ئىشلىتىۋاتقان توركۆرگۈچ نۇسخىسىنىڭ CSS نى چەكلىك قوللىشى بار. ئەڭ ياخشى تەجرىبە ئۈچۈن ، يېڭىلانغان توركۆرگۈچنى ئىشلىتىشىڭىزنى تەۋسىيە قىلىمىز (ياكى Internet Explorer دىكى ماسلىشىش ھالىتىنى ئېتىۋېتىڭ). بۇ جەرياندا ، داۋاملىق قوللاشقا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن ، ئۇسلۇب ۋە JavaScript بولمىغان تور بېكەتنى كۆرسىتىمىز.
دانىخورەك سىلىتسىي زەررىچىلىرى بىر خىل ئۆزگەرتىش ئارقىلىق ماكرو زەررىچىلەرگە ئېرىشىش ئۈچۈن تەييارلانغان. بۇ زەررىچىلەر تەتۈر يۆنىلىشلىك پارچىلىنىش زەنجىرىنى يۆتكەش (RAFT) پولىمېرلاش ئارقىلىق N-fenylmaleimide-methylvinylisocyanate (PMI) ۋە ستېرېن بىلەن N-fenylmaleimide ئۆز-ئارا ماسلاشتۇرۇلغان. . .
يېقىنقى يىللاردىن بۇيان ، بىيو دورىگەرلىك سانائىتى بازار ئۈلۈشىنىڭ زور دەرىجىدە ئېشىشى بىلەن كېڭىيىۋاتقان دۇنيا بازىرىغا ئايلاندى. بىئو دورىگەرلىك سانائىتىنىڭ پارتلاش خاراكتېرلىك ئېشىشىغا ئەگىشىپ ، پېپتىد ۋە ئاقسىلنى ئانالىز قىلىش ئىنتايىن ئارزۇ قىلىندى. نىشان پېپتىدتىن باشقا ، پېپتىد بىرىكتۈرۈش جەريانىدا بىر نەچچە خىل پاسكىنا ماددىلار پەيدا بولىدۇ ، شۇڭا خىروموگرافىك ساپلاشتۇرۇشنى تەلەپ قىلىدۇ. ئەۋرىشكە. گەرچە ئاممىۋى سپېكترومېتىرى پېپتىد ۋە ئاقسىلنى تەرتىپكە سېلىشنىڭ ئۈنۈملۈك قورالى بولسىمۇ ، ئەمما بۇ خىل ئەۋرىشكەلەر ماسسى سپېكترىغا بىر ئۆتكەلدە ئوكۇل قىلىنسا ، ئايرىش كۆڭۈلدىكىدەك بولمايدۇ. بۇ مەسىلىنى MS ئانالىز قىلىشتىن ئىلگىرى سۇيۇق خروموگرافىيە (LC) ئايرىشنى يولغا قويۇش ئارقىلىق پەسەيتكىلى بولىدۇ ، بۇ ۋاقىتتا سەزگۈرلۈكنى مەركەزلەشتۈرگەندە ئانالىز قىلىنىدىغان رايونلارنىڭ سانىنى ئازايتىدۇ. سۇيۇق خروموگرافىيە (LC) ئۆتكەن ئون يىلدا كۆرۈنەرلىك تەرەققىي قىلىپ ، ئاقسىل ئانالىزىدىكى مودا تېخنىكىغا ئايلاندى .7،8،9،10.
تەتۈر باسقۇچلۇق سۇيۇقلۇق خروموگرافىيىسى (RP-LC) ئوكتادېكسىل ئۆزگەرتىلگەن سىلىتسىي (ODS) ئارقىلىق پېپتىد ئارىلاشمىسىنى ساپلاشتۇرۇش ۋە ئايرىشتا كەڭ كۆلەمدە ئىشلىتىلىدۇ ، 12،12،13. قانداقلا بولمىسۇن ، RP تۇراقلىق باسقۇچلار پېپتىد ۋە ئاقسىلنىڭ قانائەتلىنەرلىك ئايرىلىشىنى تەمىنلىمەيدۇ ، چۈنكى ئۇلار مۇرەككەپ قۇرۇلما ۋە ئامفىفىللىق تەبىئەت بىلەن مۇناسىۋەتلىك. بۇ ئانالىزلارنى ساقلاپ قېلىش ۋە ساقلاپ قېلىش 16. كۆپ خىل شەكىلدىكى ئۆز-ئارا تەسىر كۆرسىتىدىغان ئارىلاشما ھالەتتىكى خروموگرافىيە پېپتىد ، ئاقسىل ۋە باشقا مۇرەككەپ ئارىلاشمىلارنى ئايرىشنىڭ RP-LC نىڭ ئورنىنى ئالالايدۇ. ھەرخىل ئارىلاشما ھالەتتىكى تۇراقلىق باسقۇچلار تەييارلاندى ، بۇ باسقۇچلار قاچىلانغان تۈۋرۈكلەر پېپتىد ۋە ئاقسىلنىڭ ئايرىلىشى ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ. ئىككى قۇتۇپ ۋە قۇتۇپسىز گۇرۇپپىلارنىڭ بولغانلىقى ئۈچۈن پېپتىد ۋە ئاقسىلنىڭ ئايرىلىشىغا ماس كېلىدۇ.كۆپ خىل ئۆز-ئارا تەسىر كۆرسىتىش 29 ، 30 ، 31 ، 32. يېقىنقى ۋاقىتلاردا ، جاڭ قاتارلىقلار.30 دودسىلىن بىلەن ئاخىرلاشقان پولىئامىن تۇراقلىق باسقۇچنى تەييارلاپ ، ھىدرو كاربون ، ئوكسىدلىنىشقا قارشى تۇرغۇچى ، فلاۋونوئىد ، يادرو ، ئېستروگېن ۋە باشقا بىر قانچە ئانالىزنى مۇۋەپپەقىيەتلىك ئايرىدى. قۇتۇپ ئارىلىقىدا قۇتۇپ ۋە قۇتۇپسىز گۇرۇپپىلار بار ، شۇڭا ئۇ گىدروفوبىك ۋە گىدروفىللىق نەملىك بار بولغان پېپتىد ۋە ئاقسىلنى ئايرىپ ئىشلىتىشكە بولىدۇ. RP-Amide تۈۋرۈكى ، ئەمما بۇ ئىستونلار پەقەت ئامىنە 33 نى تەھلىل قىلىشقا ئىشلىتىلىدۇ.
نۆۋەتتىكى تەتقىقاتتا ، HSA نىڭ پېپتىد ۋە تىرىپسىن ھەزىملىرىنى ئايرىش ئۈچۈن قۇتۇپقا ئورنىتىلغان تۇراقلىق باسقۇچ (N-fenylmaleimide قىستۇرۇلغان پولىستىرېن) تەييارلىنىپ باھالاندى. تۇراقلىق باسقۇچ تۆۋەندىكى ئىستراتېگىيەلەردىن پايدىلىنىپ تەييارلاندى. رۇدا چوڭلۇقى. ئىككىنچى ، يېڭى لەگلەك ، فېنىلمالىئىمىد-مېتىل ۋىنىل ئىزوكيانات بىرىكتۈرۈلۈپ ، سىلىتسىي زەررىچىلىرىنى ھاسىل قىلىپ ، قۇتۇپ سىڭدۈرۈلگەن تۇراقلىق باسقۇچنى تەييارلاشقا ئىشلىتىلىدۇ. نەتىجىدە تۇراقلىق باسقۇچ داتلاشماس پولات تۈۋرۈككە قاچىلانغان (100 × 1.8 مىللىمېتىرلىق id) بولۇپ ، بۇ خىل ئورالما ئورالما ئورالمىسىغا ماسلاشتۇرۇلغان. بەش پېپتىدتىن تەركىب تاپقان. PMP ئىستونىدا ياخشى ھەل قىلىش ۋە ئۈنۈملۈك بولۇش ، Ascentis Express RP-Amide ئىستونىغا قارىغاندا تېخىمۇ ئۈنۈملۈك.
PEG. eroxide (BPO) ، HPLC Grade Acetonitrile (ACN) ، مېتانول ، 2-پروپانول ۋە ئاتسېتون سىگما-ئالدرىچتىن سېتىۋېلىندى (سانت لۇئىس ، MO ، ئامېرىكا).
ئۇرېيە (8 گرام) ، پولىئېتىلېن گلىكول (8 گرام) ۋە 8 مىللىلىتىر 0.01 N كىسلاتا كىسلاتاسىنىڭ ئارىلاشمىسى 10 مىنۇت ئارىلاشتۇرۇلدى ، ئاندىن مۇز سوغۇق شارائىتتا ئۇنىڭغا 24 مىللىلىتىر TMOS قوشۇلدى. ھەمدە 550 سېلسىيە گرادۇسلۇق ھاۋارايىدا 12 سائەت ھېسابلىنىدۇ. ئۈچ تۈركۈم تەييارلىنىپ ، زەررىچە چوڭلۇقى ، تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭلۇقى ۋە يەر يۈزىدىكى كۆپىيىشچانلىقىنى تەكشۈردى.
سىلىتسىي زەررىچىلىرىنى ئالدىن بىرىكتۈرۈلگەن لىگېن فېننىلمامىد-مېتىلۋىنىلىسوكيانات (PCMP) بىلەن يەر يۈزىگە ئۆزگەرتىش ئارقىلىق ، ستېرېن بىلەن رادىئاتسىيە پولىمېرلىشىش ئارقىلىق ، قۇتۇپ گۇرۇپپىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بىرىكمە تەييارلانغان.يىغىلىش ۋە پولىستىرېن زەنجىرىنىڭ تۇراقلىق باسقۇچى. تەييارلىق جەريانى تۆۋەندە بايان قىلىنغان.
N-fenylmaleimide (200 mg) ۋە مېتىل ۋىنىل ئىزوكيانات (100 مىللىگىرام) قۇرۇق تولۇئېندا ئېرىپ ، 2،2 ′ azoisobutyronitrile (AIBN) نىڭ 0.1 مىللىلىتىر رېئاكسىيە پلاستىنكىسىغا فېننىلمالىئىمىد-مېتىل ۋىنىل ئىزويانات كوپولمېرغا تەييارلانغان. 3 سائەت.
قۇرۇتۇلغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (2 گرام) قۇرۇق تولۇئېن (100 مىللىمېتىر) غا تارقاقلاشتۇرۇلۇپ ، 500 مىللىمېتىرلىق يۇمىلاق ئۈستەل تاختىسىدا 10 مىنۇت ئارىلاشتۇرۇلدى ۋە سونىكلاشتۇرۇلدى. ) تولۇئېن (200 مىللىلېتىر) ئېرىتىپ ، 4 µ گىدروكىسسى- TEMPO (2 mL) كاتالىزاتور سۈپىتىدە 100 µL لىك دىبۇتلىنتىن سۇيۇقلۇقىنىڭ تەركىبىدە قوشۇلدى.
ستېرېن (1 مىللىمېتىر) ، بېنزولىن ئوكسىد BPO (0.5 مىللىمېتىر) ۋە TEMPO-PMCP ئۇلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (1.5 گرام) تولۇئېنغا تارقىلىپ ئازوت بىلەن ساپلاشتۇرۇلدى. ستېرېننىڭ پولىمېرلىشىشى 100 سېلسىيە گرادۇستا 12 سائەت ئېلىپ بېرىلدى.
ئەۋرىشكە 393 K دە 1 سائەت تۆۋەنلەپ ، 10-3 Torr دىن تۆۋەن قالدۇق بېسىمغا ئېرىشتى. P / P0 = 0.99 نىڭ نىسپىي بېسىمىدا ئېلان قىلىنغان N2 نىڭ مىقدارى تۆشۈكچىلەرنىڭ ئومۇمىي مىقدارىنى ئېنىقلاشقا ئىشلىتىلدى. كاربون لېنتا. ئالتۇنغا Q150T پۈركۈگۈچ چاپلاق چاپلانغان ، ئەۋرىشكە ئۈستىگە 5 nm Au قەۋىتى قويۇلغان. بۇ تۆۋەن بېسىملىق بېسىم ئىشلىتىپ جەريان ئۈنۈمىنى يۇقىرى كۆتۈرىدۇ ۋە ئىنچىكە دان ، سوغۇق پۈركۈش بىلەن تەمىنلەيدۇ. تېرمو ئېلېكترون (ۋالتام ، MA ، ئامېرىكا) Flash EA1112 ئېلېمېنتلىق ئانالىزچىغا ئىشلىتىلگەن. ھەمدە لەگلەك باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (ھەر بىرى 5 مىللىگىرام) 5 مىللىلىتىر ئىزوپروپانولدا تارقاقلاشتۇرۇلدى ، 10 مىنۇتتا سوقۇلدى ، 5 مىنۇت قاينام-تاشقىنلىققا چۆمدى ۋە Mastersizer نىڭ ئوپتىكىلىق ئورۇندۇقىغا قويۇلدى. تېرموگراۋىمېترىك ئانالىز مىنۇتىغا 30 سېلسىيە گرادۇستىن 800 سېلسىيە گرادۇسقىچە.
ئەينەك تىزىلغان داتلاشماس پولات تار دائىرىلىك چوڭلۇقتىكى تۈۋرۈكلەر (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) پاتقاق ئوراش ئۇسۇلى ئارقىلىق ئورالغان بولۇپ ، رېفتا قوللىنىلغان ئوخشاش تەرتىپنى قوللانغان.31. داتلاشماس پولات تۈۋرۈك (ئەينەك تىزىلغان ، 100 × 1.8 مىللىمېتىرلىق id) ئېغىزىغا 1 µm لىق قورۇما ئورنىتىلغان بولۇپ ، پاتقاق قاچىلىغۇچقا ئۇلىنىدۇ (ئامېرىكا IL ، ئامېرىكا ILtech Deerfield). 10 مىنۇت ، 80 MP 15 مىنۇت ، 60 MP 30 مىنۇت. ئوراپ قاچىلاش جەريانىدا ، مېخانىكىلىق تەۋرىنىش ئىككى GC تۈۋرۈك سىلكىنىش (Alltech, Deerfield, IL, USA) بىلەن ستوننىڭ بىردەك ئورالغانلىقىغا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن.
LC پومپىسى (ياپونىيە 10AD Shimadzu) ، ئوكۇل ئۇرغۇچى (ۋالكو (ئامېرىكا) C14 W.05) 50nL ئوكۇل ھالقىسى ، پەردىنىڭ بۇزۇلۇشى (Shimadzu DGU-14A) ، UV-VIS قىل قان تومۇر كۆزنىكى ئالاھىدە µLC ئۈسكۈنىسىنى تەكشۈرۈش ئۈسكۈنىسى (UV-2075) ۋە ئەينەك تىزىلغان مىكرو ئېلېمېنتلارنى كىچىكلىتىدۇ. illaries (50 mm) كېمەيتىش بىرلەشمىسىنىڭ 1/16 ″ چىقىش ئېغىزىغا ئورنىتىلدى. سانلىق مەلۇمات توپلاش ۋە خروموگرافىك بىر تەرەپ قىلىش Multichro 2000 يۇمشاق دېتالى ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلدى. 254 nm ئانالىز قىلىش ئۇلترا بىنەپشە نۇرنىڭ سۈمۈرۈلۈشى ئۈچۈن سىناق قىلىندى.
ئالبۇمىن ئىنسانلارنىڭ قان زەردابىدىن ، لىيوفىللانغان پاراشوك ، ≥ 96% (ئاگاروزا گېلى ئېلېكتروفورىسى) 3 مىللىگىرام تىرىپسىن (1.5 مىللىگىرام) ، 4.0 M ئۇرېيە (1 مىللىمېتىر) ۋە 0.2 M ئاممونىي ئىككى كاربونات (1 مىللىلېتىر) ئارىلاشتۇرۇلغان.
پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە HSA تىرىپسىننىڭ ھەزىم قىلىنىشى PMP تۈۋرۈكىدە ئايرىم باھالاندى. HSA نىڭ پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە ترىپسىن ھەزىمنىڭ PMP ئىستونى بىلەن ئايرىلىشىنى تەكشۈرۈپ ، نەتىجىنى Ascentis Express RP-Amide ئىستونى بىلەن سېلىشتۇرۇڭ. نەزەرىيەۋى نومۇر تاختىسى تۆۋەندىكىدەك ھېسابلىنىدۇ:
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى ۋە لەگلەك باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ SEM رەسىملىرى FIG دا كۆرسىتىلدى.2. يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى (A, B) نىڭ SEM تەسۋىرىدە كۆرسىتىلىشىچە ، بىزنىڭ ئىلگىرىكى تەتقىقاتىمىزغا سېلىشتۇرغاندا ، بۇ زەررىچىلەر شارسىمان بولۇپ ، بۇ زەررىچىلەر ئۇزۇنغا سوزۇلغان ياكى تەرتىپسىز سىممېترىك بولىدۇ.
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى (A, B) ۋە لەگلەك باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرى (C ، D) نىڭ ئېلېكترونلۇق مىكروسكوپ تەسۋىرىنى سىكاننېرلاش.
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى ۋە لەگلەك بىلەن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ زەررىچە چوڭ-كىچىكلىكى تەقسىملىنىشى 3-رەسىمدە كۆرسىتىلدى. ) قىممىتى 3.05 mm (پولىستىرېن بىلەن تۇتىشىدىغان سىلىتسىي زەررىچىسى) 34. بۇ تۈركۈمدە رېئاكسىيە ئارىلاشمىسىدىكى PEG ، ئۇرېيە ، TMOS ۋە كىسلاتا كىسلاتاسىنىڭ ئوخشىمىغان نىسبىتى سەۋەبىدىن ئالدىنقى تەتقىقاتىمىزغا سېلىشتۇرغاندا تار زەررىچە چوڭلۇقتىكى تەقسىمات بار. سىلىتسىي يۈزىدە 7 µm) ، PMP باسقۇچىدا قەۋەت قېلىنلىقى 1.38 µm.
يالىڭاچ سىلىتسىي زەررىچىلىرى ۋە لەگلەك بىلەن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى تەقسىملەش (A) ۋە تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى تەقسىملەش (B).
نۆۋەتتىكى تەتقىقاتتىكى سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ تۆشۈكچىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى ، تۆشۈكچىلەرنىڭ ھەجىمى ۋە يەر يۈزى 1-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى. ئەگرى سىزىق 3-رەسىمدە كۆرسىتىلدى. (مۇشۇنىڭغا ئوخشاش) ، خىمىيىلىك ئۆزگەرتىلگەندىن كېيىن سىلىتسىي زەررىچىلىرىنىڭ تۆشۈكچىلەرنىڭ مىقدارى 0.67 دىن 0.58 cm3 / g غا تۆۋەنلىدى.
تۇراقلىق باسقۇچنى ئېلېمېنتلىق ئانالىز قىلىش نەتىجىسى 2-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى. نۆۋەتتىكى تۇراقلىق باسقۇچنىڭ كاربون قاچىلاش نىسبىتى% 6.35 بولۇپ ، بۇ بىزنىڭ ئىلگىرىكى تەتقىقاتىمىزنىڭ كاربون قاچىلاش مىقدارىدىن تۆۋەن (ئايرىم-ئايرىم ھالدا پولىستىرېن باغلانغان سىلىتسىي زەررىچىسى ، ئايرىم-ئايرىم ھالدا% 7.93 ۋە% 10.21). . % 35 ، 2-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك ، ئورۇقلاش PMP تۇراقلىق باسقۇچى بىلەن تەكشۈرۈلگەن ، TGA ئەگرى سىزىقى 4-رەسىمدە كۆرسىتىلگەن. TGA ئەگرى سىزىقىدا ئورۇقلاش نىسبىتى% 8.6 بولۇپ ، كاربون قاچىلاش (% 6.35) بىلەن ياخشى ماس كېلىدۇ ، چۈنكى لەگلەكلەردە C بولۇپلا قالماي ، N ، O ۋە H. قاتارلىقلار بار.
فېنىلمالىئىمىد-مېتىلۋىنىلىسكويانات لەگلەك سىلىتسىي زەررىچىلىرىنى يەر يۈزىگە ئۆزگەرتىش ئۈچۈن تاللانغان ، چۈنكى ئۇنىڭدا قۇتۇپ فېنىلمالىئېمىد گۇرۇپپىسى ۋە ۋىنىلوسوكيانات گۇرۇپپىسى بار. iety نىڭ نورمال pH دا مەۋھۇم توك يوق. تۇراقلىق باسقۇچنىڭ قۇتۇپلىقىنى ئەڭ ياخشى مىقداردا ستېرېن ۋە ئەركىن رادىكال پولىمېرلىشىشنىڭ ئىنكاس ۋاقتى ئارقىلىق كونترول قىلغىلى بولىدۇ. رېئاكسىيەنىڭ ئاخىرقى باسقۇچى (ئەركىن رادىكال پولىمېرلىشىش) ئىنتايىن مۇھىم بولۇپ ، تۇراقلىق باسقۇچنىڭ قۇتۇپلىقىنى ئۆزگەرتەلەيدۇ. ستېرېننىڭ كاربون يۈكى ئوخشىمايدۇ. يەنە كېلىپ ، بۇ تۇراقلىق باسقۇچلارنى داتلاشماس پولات تۈۋرۈككە قاچىلاپ ، ئۇلارنىڭ خروموگرافىك ئىقتىدارىنى تەكشۈرۈڭ (تاللاشچانلىقى ، ئېنىقلىق دەرىجىسى ، N قىممىتى قاتارلىقلار). بۇ سىناقلارغا ئاساسەن ، ئەلالاشتۇرۇلغان فورمۇلا تاللىنىپ ، PMP تۇراقلىق باسقۇچىنى كونترول قىلىپ ، كونترول قىلىنغان قۇتۇپ ۋە ياخشى ئانالىزنىڭ ساقلىنىشىغا كاپالەتلىك قىلدى.
بەش پېپتىد ئارىلاشمىسى (Gly-Tyr ، Gly-Leu-Tyr ، Gly-Gly-Tyr-Arg ، Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg ، لېۋىن ئېنكېفالىن) مۇ كۆچمە باسقۇچ ئارقىلىق PMP ئىستونى ئارقىلىق باھالانغان.60/40 (v / v) ئاتسېتىنىترىل / سۇ (% 0.1 TFA) ئېقىش سۈرئىتى 80 μL / min. بىر مىنۇتتا ، N قىممىتى ئىنتايىن ياخشى ، ھەر بىر ئىستوندا 13،500 ± 330 (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ، 135،000 تەخسە / m (5B رەسىم) گە ماس كېلىدۇ. ئۈچ خىل ئوخشاش چوڭلۇقتىكى تۈۋرۈك (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ئوخشىمىغان ئۈچ خىل PMP تۇراقلىق باسقۇچقا قاچىلانغان بولۇپ ، كۆپىيىشچانلىقىنى تەكشۈردى. 4-جەدۋەلدە PMP ستوننىڭ كۆپىيىشچانلىقى 3-جەدۋەلدە كۆرسىتىلگەندەك ئىنتايىن تۆۋەن% RSD قىممىتى بىلەن ياخشى مۇناسىۋەتلىك.
PMP ئىستونى (B) ۋە Ascentis Express RP-Amide تۈۋرۈكىدىكى پېپتىد ئارىلاشمىسىنى ئايرىش.كۆچمە باسقۇچ 60/40 ACN / H2O (TFA 0.1%) ، PMP ئىستون ئۆلچىمى (100 × 1.8 مىللىمېتىر id);ئانالىز بىرىكمىلەرنىڭ يوقىتىش تەرتىپى: 1 (Gly-Tyr) ، 2 (Gly-Leu-Tyr) ، 3 (Gly-Gly-Tyr-Arg) ، 4 (Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg) ۋە 5 (لېۋىن) كىسلاتا ئېنكېفالىن).
PMP تۈۋرۈكى (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) يۇقىرى ئۈنۈملۈك سۇيۇقلۇق خروموگرافىيەدە ئىنسانلارنىڭ قان زەردابى ئالبومىننىڭ تىرىپتىك ھەزىملىرىنى ئايرىش ئۈچۈن باھالاندى. 6-رەسىمدىكى خروموگرامما ئەۋرىشكىنىڭ ياخشى ئايرىلغانلىقى ۋە ئېنىقلىق دەرىجىسىنىڭ ناھايىتى ياخشى ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بەردى. HSA ھەزىم قىلىشتىكى ھەر بىر چوققىلارنىڭ ئايرىش ئۈنۈمى ھېسابلىنىپ ، قىممىتى 5-جەدۋەلدە كۆرسىتىلدى.
PMP ئىستونىدا HSA (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) نىڭ ئۈچ ئۆلچەملىك ھەزىم قىلىنىشى ئايرىلدى.ئېقىش نىسبىتى (100 µL / min) ، كۆچمە باسقۇچ 60/40 ئاتسېتىنىترىل / سۇ% 0.1 TFA.
بۇ يەردە L بولسا تۈۋرۈك ئۇزۇنلۇقى ، η كۆچمە باسقۇچنىڭ يېپىشقاقلىقى ، ΔP بولسا ئىستون ئارقا بېسىمى ، u بولسا كۆچمە باسقۇچنىڭ سىزىقلىق تېزلىكى. PMP تۈۋرۈكىنىڭ ئۆتكۈزۈشچانلىقى 2.5 × 10-14 m2 ، ئېقىش سۈرئىتى 25 μL / min ، 60/40 v / v ACN / سۇ ئىشلىتىلگەن. مۇزسىمان زەررىچىلەر: 1.3 مىللىمېتىرلىق زەررىچىلەر ئۈچۈن 1.7 × 10-15 ، 1.7 مىللىمېتىرلىق زەررىچىلەر ئۈچۈن 3.1 × 10-15 ، 5.6 × 10-15 ۋە 2.5 × 10-14 m2 غىچە 2.6 مىللىمېتىرلىق زەررىچىلەر 5 مىللىمېتىر زەررىچىلەر ئۈچۈن 43. شۇڭلاشقا ، PMP باسقۇچىنىڭ ئۆتكۈزۈشچانلىقى 5 مىللىمېتىرلىق يادرو زەررىچىسى بىلەن ئوخشاش.
بۇ يەردە Wx بولسا خلوروفورم قاچىلانغان تۈۋرۈكنىڭ ئېغىرلىقى ، Wy بولسا مېتانول قاچىلانغان تۈۋرۈكنىڭ ئېغىرلىقى ، ρ بولسا ئېرىتكۈچىنىڭ زىچلىقى. مېتانول (ρ = 0.7866) ۋە خلوروفورم (ρ = 1.484). دېمەك ، ئۇرېيە لەگلەكلىرىنىڭ بولۇشى تۇراقلىق باسقۇچنىڭ ئۆتكۈزۈشچانلىقىنى تۆۋەنلىتىدۇ. يەنە بىر تەرەپتىن ، PMP تۈۋرۈكىنىڭ ئومۇمىي قويۇقلۇقى (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) 0.60. . تىپىك تەجرىبىدە ، ستوننىڭ جۇشقۇنلۇقى مۇنداق ھېسابلىنىدۇ:
7A ، B رەسىمدە PMP ستون (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ۋە Ascentis Express RP-Amide ستون (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) ئوخشاش يوقىتىش شارائىتىنى ئىشلىتىپ كۆرسىتىلدى (يەنى 60/40 ACN / H2O ۋە% 0.1 TFA).) van Deemter سۇيىقەستىنىڭ.تاللانغان پېپتىد ئارىلاشمىسى (Gly-Tyr, Gly-Leu-Tyr, Gly-Gly-Tyr-Arg, Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg, Leucine Enkephalin) 20 µL / ھەر ئىككى ئىستوننىڭ ئەڭ تۆۋەن ئېقىش نىسبىتى 800 µL / min. HETP قىممىتى ئايرىم-ئايرىم ھالدا PMP ستوننىڭ (100 × 1.8 مىللىمېتىرلىق id) ئايرىش ئۈنۈمىنىڭ سودا خاراكتېرلىك Ascentis Express RP-Amide ستون (100 × 1.8 مىللىمېتىر id) دىن كۆپ ياخشى ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ. le شەكلى ، چوڭ-كىچىكلىكى ۋە نۆۋەتتىكى خىزمەتتە ئىشلىتىلىدىغان مۇرەككەپ تۈۋرۈك ئوراش تەرتىپى 34.
.
قۇتۇپقا ئورالغان پولىستىرېنلىق تۇراقلىق باسقۇچ يۇقىرى ئۈنۈملۈك سۇيۇقلۇق خروموگرافىيەدە بىرىكمە پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە ئىنسانلارنىڭ قان زەردابى پىلاستىنكىسى (HAS) نىڭ تىرىپسىن ھەزىملىرىنى ئايرىش ئۈچۈن تەييارلىنىپ باھالاندى. يۇقىرى ئايرىش ئۈنۈمىدىن باشقا ، يۇقىرى ئېقىش سۈرئىتىدىكى تۆۋەن تۈۋرۈك ئارقا بېسىمى بۇ تۇراقلىق باسقۇچنىڭ يەنە بىر ئەۋزەللىكى. PP تۈۋرۈكى ياخشى كۆپىيىشچانلىقىنى نامايەن قىلىدۇ ھەمدە ھەر خىل ئاقسىللارنىڭ پېپتىد ئارىلاشمىسى ۋە ترىپسىننىڭ ھەزىم قىلىنىشىنى ئانالىز قىلىشقا ئىشلىتىلىدۇ.
Field, JK, Euerby, MR, Lau, J., Thøgersen, H. & Petersson, Pخىروموگرافىيە .1603 ، 113 - 129.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2019.05.038 (2019).
گومېز ، B. قاتارلىقلار يۇقۇملۇق كېسەللىكلەرنى داۋالاش ئۈچۈن لايىھەلەنگەن ئاكتىپ پېپتىدلار. بىئوتېخنىكا. كۈچەيتىلگەن .36 (2) ، 415-429.https: //doi.org/10.1016/j.biotechadv.2018.01.004 (2018).
Vlieghe, P., Lisowski, V., Martinez, J. & Khrestchatisky, M. سىنتېتىك داۋالاش پېپتىدلىرى: ئىلىم-پەن ۋە بازار. زەھەرلىك چېكىملىك ​​بايقاش .15 (1-2) بۈگۈن ، 40-56. Http:
Xie, F., Smith, RD & Shen, Y. Advanced Proteomic Liquid Chromatography.J.خىروموگرافىيە. A 1261 ، 78–90 (2012).
ليۇ ، ۋ.
Chesnut, SM & Salisbury, JJ UHPLC نىڭ دورا تەرەققىياتىدىكى رولى .J.Sci.30 (8) ، 1183-1190 (2007).
ۋۇ ، ن.Sci.30 (8) ، 1167-1182.https: //doi.org/10.1002/jssc.200700026 (2007).
Wren, SA & Tchelitcheff, P. دەرىجىدىن تاشقىرى يۇقىرى ئىقتىدارلىق سۇيۇقلۇق خروموگرافىيەنىڭ دورا تەرەققىياتىدا قوللىنىلىشى.Chromatography.1119 (1-2), 140-146.https: //doi.org/10.1016/j.chroma.2006.02.052 (2006).
گۇ ، H. قاتارلىقلار مونولىت ماكرو شەكىللىك ھىدروگېل ئېنتېرو ۋىرۇسىنى ئۈنۈملۈك ساپلاشتۇرۇش ئۈچۈن مايدىكى سۇنىڭ يۇقىرى ئىچكى فازىلىق ئېمۇلسىيسىيىسىدىن تەييارلانغان. خىمىيىلىك. ئەنگىلىيە.ج.401 ، 126051 (2020).
Shi, Y., Xiang, R., Horváth, C. & Wilkins, JA سۇيۇق خروموگرافىيەنىڭ ئاقسىلدىكى رولى. J.خىروموگرافىيە. A 1053 (1-2) ، 27-36 (2004).
Fekete, S., Veuthey, J.L.دورىگەرلىك. بىئولوگىيەلىك ئىلىم. Anus.69 ، 9-27 (2012).
Gilar, M., Olivova, P., Daly, AE & Gebler, JC بىرىنچى ۋە ئىككىنچى ئايرىش ئۆلچىمىدە ئوخشىمىغان pH قىممىتى ئارقىلىق RP-RP-HPLC سىستېمىسى ئارقىلىق پېپتىدلارنى ئىككى ئۆلچەملىك ئايرىش .J.Sci.28 (14) ، 1694-1703 (2005).
Feletti, S. قاتارلىقلار. C18 تارماق 2 μ mm لىق تولۇق ۋە يۈزەكى شارسىمان زەررىچىلەر قاچىلانغان يۇقىرى ئۈنۈملۈك خروموگرافىك تۈۋرۈكلەرنىڭ تۈركۈملەپ يۆتكەش ئالاھىدىلىكى ۋە ھەرىكەت ئىقتىدارى تەكشۈرۈلدى.Sci.43 (9-10) ، 1737-1745 (2020).
Piovesana, S. et al. يېقىنقى يۈزلىنىش ۋە ئانالىز خىرىسلىرى ئۆسۈملۈك بىيوئاكتىپلىق پېپتىدلارنى ئايرىش ، پەرقلەندۈرۈش ۋە دەلىللەشتىكى خىرىس. 410 (15) ، 3425–3444.
مۇئېللېر ، JB قاتارلىقلار. ھاياتلىق پادىشاھلىقىنىڭ ئاقسىل مەنزىرىسى. تەبىئىي 582 (7813) ، 592-596.https: //doi.org/10.1038/s41586-020-2402-x (2020).
DeLuca, C. قاتارلىقلار. تەييار سۇيۇقلۇق خروموگرافىيە ئارقىلىق داۋالاش پېپتىدلىرىنى پىششىقلاپ ئىشلەش. مولېكۇلا (باسېل ، شىۋىتسارىيە) 26 (15) ، 4688 (2021).
ياڭ ، Y. & Geng ، X. ئارىلاشما ھالەتتىكى خروموگرافىيە ۋە ئۇنىڭ بىئوپولىمېرغا قوللىنىلىشى .J.خىروموگرافىيە. A 1218 (49) ، 8813–8825 (2011).
جاۋ ، گ. ، دوڭ ، X.-Y. & Sun ، Y.Biotechnology.144 (1), 3-11 (2009).