Nature.com نى زىيارەت قىلغىنىڭىزغا رەھمەت.سىز ئىشلىتىۋاتقان توركۆرگۈچ نۇسخىسىنىڭ CSS قوللىشى چەكلىك.ئەڭ ياخشى تەجرىبە ئۈچۈن يېڭىلانغان تور كۆرگۈچنى ئىشلىتىشىڭىزنى تەۋسىيە قىلىمىز (ياكى Internet Explorer دىكى ماسلىشىشچان ھالەتنى چەكلەڭ).بۇ جەرياندا ، داۋاملىق قوللاشقا كاپالەتلىك قىلىش ئۈچۈن ، تور بېكەتنى ئۇسلۇب ۋە JavaScript ئىشلەتمەيمىز.
دورا تەكشۈرۈشتە يۈرەكنىڭ فىزىئولوگىيىلىك مۇھىتىنى توغرا كۆپەيتەلەيدىغان ئىشەنچلىك ۋىرۇس سىستېمىسىغا ئېھتىياجلىق.ئىنسانلارنىڭ يۈرەك توقۇلمىلىرى مەدەنىيەت سىستېمىسىنىڭ چەكلىك بولۇشى يۈرەك دورىسىنىڭ تەسىرىنى توغرا چۈشەندۈرۈشنى كەلتۈرۈپ چىقاردى.بۇ يەردە بىز يۈرەك توقۇلمىلىرى مەدەنىيەت مودېلىنى (CTCM) تەتقىق قىلىپ چىقتۇق ، ئۇ ئېلېكترو مېخانىكىلىق يۈرەك كېسىلىنى غىدىقلاپ ، يۈرەك دەۋرىيلىكىنىڭ سىستولىزىم ۋە دىئاستىولوگىيىلىك باسقۇچلىرىدا فىزىئولوگىيىلىك سوزۇلۇشنى باشتىن كەچۈردى.12 كۈنلۈك مەدەنىيەتتىن كېيىن ، بۇ ئۇسۇل يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ھاياتىي كۈچىنى قىسمەن يۇقىرى كۆتۈردى ، ئەمما ئۇلارنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى تولۇق ساقلاپ قالالمىدى.شۇڭلاشقا ، كىچىك مولېكۇلا تەكشۈرۈلگەندىن كېيىن ، بىزنىڭ ۋاسىتەمىزغا 100 nM ترىئودىئودىروئىن (T3) ۋە 1 μ mM دېكامېتاسون (Dex) قوشۇلغاندىن كېيىن ، بۆلەكلەرنىڭ مىكرو قۇرۇلمىسىنى 12 كۈن ساقلىغانلىقىنى بايقىدۇق.T3 / Dex نى داۋالاش بىلەن بىرلەشتۈرۈپ ، CTCM سىستېمىسى ترانسكرىپسىيە ئارخىپى ، ھاياتىي كۈچى ، مېتابولىزم پائالىيىتى ۋە قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى يېڭى يۈرەك توقۇلمىلىرى بىلەن ئوخشاش سەۋىيىدە 12 كۈن ساقلىدى.بۇنىڭدىن باشقا ، مەدەنىيەتتىكى يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ ھەددىدىن زىيادە سوزۇلۇشى يۇقىرى قان بېسىم يۈرەك سىگنالىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ ، بۇ CTCM نىڭ يۈرەك سوزۇلۇشى كەلتۈرۈپ چىقارغان يۇقىرى قان بېسىم كېسەللىكلىرىگە تەقلىد قىلىش ئىقتىدارىنى ئىسپاتلاپ بېرىدۇ.خۇلاسىلىگەندە ، CTCM ئۇزۇن مۇددەت مەدەنىيەتتىكى يۈرەكنىڭ فىزىئولوگىيىسى ۋە كېسەللىك قوزغاتقۇسىنى ئۈلگە قىلىپ ، ئىشەنچلىك دورا تەكشۈرتەلەيدۇ.
كلىنىكىلىق تەتقىقاتتىن ئىلگىرى ، ئىنسان قەلبىنىڭ فىزىئولوگىيىلىك مۇھىتىنى توغرا كۆپەيتەلەيدىغان ۋىرۇس سىستېمىسىدا ئىشەنچلىك بولۇشى كېرەك.بۇ خىل سىستېمىلار ئۆزگەرتىلگەن مېخانىكىلىق سوزۇلۇش ، يۈرەك سوقۇشى ۋە ئېلېكترو فىزىئولوگىيىلىك خۇسۇسىيەتكە تەقلىد قىلىشى كېرەك.ھايۋانات مودېللىرى ئادەتتە يۈرەك فىزىئولوگىيىسىنى تەكشۈرۈش سۇپىسى سۈپىتىدە ئىشلىتىلىدۇ ، زەھەرلىك چېكىملىكنىڭ ئىنسانلارنىڭ قەلبىدىكى تەسىرىنى ئەكس ئەتتۈرىدۇ.ئاخىرقى ھېسابتا ، كۆڭۈلدىكىدەك يۈرەك توقۇلمىلىرى مەدەنىيەت تەجرىبە مودېلى (CTCM) ئىنتايىن سەزگۈر ۋە ھەر خىل داۋالاش ۋە دورىگەرلىك ئارىلىشىشقا ماس كېلىدىغان مودېل بولۇپ ، ئىنسان قەلبىنىڭ فىزىئولوگىيىسى ۋە كېسەللىك قوزغاتقۇسىنى توغرا كۆپەيتىدۇ.بۇ خىل سىستېمىنىڭ بولماسلىقى يۈرەك زەئىپلىشىشنىڭ يېڭى داۋالاش ئۇسۇللىرىنىڭ بايقىلىشىنى چەكلەپ قويىدۇ ۋە بازارنىڭ چېكىنىشىدىكى ئاساسلىق سەۋەب سۈپىتىدە زەھەرلىك چېكىملىكنىڭ يۈرەك زەھىرىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى 6.
ئۆتكەن ئون يىلدا ، يۈرەك قان تومۇردىن باشقا سەككىز خىل دورا كلىنىكىلىق ئىشلىتىشتىن چېكىندۈرۈلدى ، چۈنكى ئۇلار QT ئارىلىقىنىڭ ئۇزىراپ كېتىشى يۈرەك دالانچىسى رېتىمى ۋە تۇيۇقسىز ئۆلۈپ كېتىشنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.شۇڭا ، يۈرەك قان تومۇرنىڭ ئۈنۈمى ۋە زەھىرىنى باھالاش ئۈچۈن ئىشەنچلىك دەسلەپكى تەكشۈرۈش ئىستراتېگىيىسىگە بولغان ئېھتىياج كۈنسېرى ئېشىۋاتىدۇ.يېقىندىن بۇيان ئىنسانلار كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان كۆپ ئىقتىدارلىق غول ھۈجەيرە ھاسىل قىلغان يۈرەك قان تومۇر (hiPS-CM) نى دورا تەكشۈرۈش ۋە زەھەرلىك تەكشۈرۈشتە ئىشلىتىش بۇ مەسىلىنى قىسمەن ھەل قىلىش چارىسى بىلەن تەمىنلەيدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، hiPS-CM لارنىڭ پىشىپ يېتىلمىگەنلىكى ۋە يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ كۆپ ھۈجەيرىلىك مۇرەككەپلىكىنىڭ بولماسلىقى بۇ ئۇسۇلنىڭ ئاساسلىق چەكلىمىسى.يېقىنقى تەتقىقاتلار شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، دەسلەپكى hiPS-CM ئارقىلىق ئۆزلۈكىدىن تارىيىش باشلانغاندىن كېيىن ئۇزۇن ئۆتمەي يۈرەك توقۇلمىلىرى ھىدروگېن ھاسىل قىلىپ ، ۋاقىتنىڭ ئۆتۈشىگە ئەگىشىپ ئېلېكتر غىدىقلاش تەدرىجىي كۈچىيىدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ hiPS-CM مىكرو تىپلىق قۇرامىغا يەتكەن يۈرەك مۇسكۇلىنىڭ پىشقان ئېلېكترو فىزىئولوگىيىلىك ۋە تارىيىش خۇسۇسىيىتى كەمچىل.ئۇنىڭدىن باشقا ، ئىنسانلارنىڭ يۈرەك توقۇلمىلىرى بىر قەدەر مۇرەككەپ قۇرۇلمىغا ئىگە بولۇپ ، ئوخشىمىغان ھۈجەيرە تىپىدىكى ئوخشىمىغان ھۈجەيرە ئارىلاشمىسىدىن تەركىب تاپقان ، يەنى ئىچكى ھۈجەيرە ھۈجەيرىسى ، نېرۋا ھۈجەيرىسى ۋە ئۆسمە تالا ئۆسمىسى قاتارلىقلارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.قۇرامىغا يەتمىگەن سۈت ئەمگۈچىلەرنىڭ يۈرىكىدىكى يۈرەك قان تومۇر ئۆسمىسىنىڭ بۇ خىل ئوخشىماسلىقى 11،12،13 بولۇپ ، يەككە ھۈجەيرە تىپلىرىنى ئىشلىتىپ يۈرەك توقۇلمىلىرىنى مودېللاشتىكى ئاساسلىق توساق.بۇ ئاساسلىق چەكلىمىلەر فىزىئولوگىيىلىك ۋە كېسەللىك شارائىتىدا مۇكەممەل يۈرەك مۇسكۇلى توقۇلمىلىرىنى يېتىشتۈرۈش ئۇسۇللىرىنى تەرەققىي قىلدۇرۇشنىڭ مۇھىملىقىنى تەكىتلەيدۇ.
ئىنسان قەلبىنىڭ يېتىشتۈرۈلگەن نېپىز (300 µm) بۆلەكلىرى مۇكەممەل ئىنسانلارنىڭ يۈرەك مۇسكۇلىنىڭ ئۈمىدۋار مودېلى ئىكەنلىكىنى ئىسپاتلىدى.بۇ ئۇسۇل ئىنسانلارنىڭ يۈرەك توقۇلمىلىرىغا ئوخشاش مۇكەممەل 3D كۆپ ھۈجەيرىلىك سىستېمىغا ئېرىشەلەيدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، 2019-يىلغىچە مەدەنىيەتلىك يۈرەك بۆلەكلىرىنى ئىشلىتىش قىسقا (24 سائەت) مەدەنىيەتنىڭ مەۋجۇتلۇقى بىلەن چەكلەنگەن.بۇ فىزىكىلىق-مېخانىكىلىق سوزۇلماسلىق ، ھاۋا-سۇيۇقلۇق كۆرۈنمە يۈزى ۋە يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ ئېھتىياجىنى قوللىمايدىغان ئاددىي مېدىيا ئىشلىتىش قاتارلىق بىر قاتار ئامىللارنىڭ سەۋەبىدىن.2019-يىلى ، بىر قانچە تەتقىقات گۇرۇپپىسى مېخانىكىلىق ئامىللارنى يۈرەك توقۇلمىلىرى مەدەنىيەت سىستېمىسىغا كىرگۈزۈشنىڭ مەدەنىيەت ئۆمرىنى ئۇزارتالايدىغانلىقىنى ، يۈرەكنىڭ ئىپادىسىنى ياخشىلايدىغانلىقىنى ۋە يۈرەك كېسەللىكلىرىنى دورىغىلى بولىدىغانلىقىنى كۆرسەتتى.17 ۋە 18-نومۇرلۇق ئىككى نەپىس تەتقىقاتتا كۆرسىتىلىشچە ، بىرلىككە كەلگەن مېخانىكىلىق يۈكنىڭ مەدەنىيەت جەريانىدا يۈرەك فېنوت تىپىغا ئاكتىپ تەسىرى بار.قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ تەتقىقاتلار يۈرەك دەۋرىيلىكىنىڭ ھەرىكەتچان ئۈچ ئۆلچەملىك فىزىكا-مېخانىكىلىق يۈكلىنىشىدىن پايدىلانمىدى ، چۈنكى يۈرەك بۆلەكلىرىگە ئىزومېتىرىلىق جىددىيلىك كۈچى 17 ياكى سىزىقلىق ياردەمچى 18 يۈك قاچىلانغان.توقۇلمىلارنى سوزۇشنىڭ بۇ ئۇسۇللىرى نۇرغۇن يۈرەك گېنىنىڭ بېسىلىشىنى ياكى بىنورمال سوزۇلۇش ئىنكاسى بىلەن مۇناسىۋەتلىك گېنلارنىڭ ھەددىدىن زىيادە بېسىم قىلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى.دىققەت قىلىشقا ئەرزىيدىغىنى ، پىتولىس قاتارلىقلار.19 ھەرىكەتلەندۈرگۈچ كۈچ قايتۇرۇش ۋە جىددىيلىك قوزغاتقۇچ ئارقىلىق يۈرەك دەۋرىيلىكىنى قايتا قۇرۇش ئۈچۈن ھەرىكەتچان يۈرەك پارچىلىرى مەدەنىيەت مۇنچىسى ياساپ چىقتى.گەرچە بۇ سىستېما ۋىرۇس يۈرەك دەۋرىيلىكىنى مودېللاشتا تېخىمۇ توغرا يول بىلەن تەمىنلىگەن بولسىمۇ ، ئەمما ئۇسۇلنىڭ مۇرەككەپلىكى ۋە تۆۋەن كىرگۈزۈلۈشى بۇ سىستېمىنىڭ قوللىنىلىشىنى چەكلەيدۇ.تەجرىبىخانىمىز يېقىندا ئېلېكتر غىدىقلاش ۋە ئەلالاشتۇرۇلغان ۋاسىتە ئارقىلىق ئاددىيلاشتۇرۇلغان مەدەنىيەت سىستېمىسىنى ياساپ چىقىپ ، پورشېن ۋە ئىنسانلارنىڭ يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ بۆلەكلىرىنىڭ ھاياتىي كۈچىنى 6 كۈن 20،21 كۈنگىچە ساقلىدى.
ھازىرقى قوليازمىدا ، يۈرەك توقۇلمىلىرى مەدەنىيەت مودېلى (CTCM) نى يۈرەكنىڭ دەۋرىيلىكىدىكى ئۈچ ئۆلچەملىك يۈرەك فىزىئولوگىيىسى ۋە كېسەللىك قوزغاتقۇچنى قايتا-قايتا تەكرارلاش ئۈچۈن يۇمۇرلۇق يىپ ئۇچىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان بۆلەكلەرنى ئىشلىتىپ تەسۋىرلەيمىز.بۇ CTCM كلىنىكىلىق داۋالاشتىن بۇرۇنقى دورا تەكشۈرۈشنىڭ سۈت بېزىنىڭ فىزىئولوگىيىسى / كېسەللىك قوزغاتقۇسىغا تەقلىد قىلىنغان تەننەرخنى تېجەيدىغان ، ئوتتۇراھال كىرگۈزۈشچان يۈرەك سىستېمىسى بىلەن تەمىنلەش ئارقىلىق كلىنىكىلىق داۋالاشتىن بۇرۇنقى دورىلارنىڭ ئالدىن پەرەز قىلىنىشنىڭ توغرىلىقىنى ئىلگىرى ئېرىشەلمىگەن سەۋىيىگە يەتكۈزەلەيدۇ.
گېمودىنامىكىلىق مېخانىكىلىق سىگنال 22،23،24 دىكى يۈرەك قان تومۇر ئىقتىدارىنى ساقلاشتا ھالقىلىق رول ئوينايدۇ.ھازىرقى قوليازمىدا بىز CTCM نى ياساپ چىقتۇق (1a رەسىم) ، فىزىئولوگىيىلىك چاستوتا ئېلېكتر ۋە مېخانىك غىدىقلاشنى قوزغىتىش ئارقىلىق قۇرامىغا يەتكەنلەرنىڭ يۈرەك مۇھىتىغا تەقلىد قىلالايدۇ (مىنۇتىغا 1.2 Hz ، مىنۇتىغا 72 قېتىم).دىئاستول مەزگىلىدە توقۇلمىلارنىڭ ھەددىدىن زىيادە كېڭىيىپ كېتىشىدىن ساقلىنىش ئۈچۈن ، 3D بېسىش ئۈسكۈنىسى توقۇلمىلارنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى% 25 ئاشۇردى (1b رەسىم).C-PACE سىستېمىسى كەلتۈرۈپ چىقارغان ئېلېكتر قەدىمى سانلىق مەلۇمات ئىگىلەش سىستېمىسى ئارقىلىق يۈرەك دەۋرىيلىكىنى تولۇق كۆپەيتىش ئۈچۈن سىستولدىن 100 ms بۇرۇن قوزغالغان.توقۇلما مەدەنىيەت سىستېمىسى پروگرامما خاراكتېرلىك ئۆپكە شەكىللىك ھەرىكەتلەندۈرگۈچ كۈچ (LB قۇرۇلۇش ، گېرمانىيە) دىن پايدىلىنىپ ئەۋرىشىم كرېمنىي پەردىسىنى دەۋرىيلىك كېڭەيتىپ ، ئۈستۈنكى كامېردىكى يۈرەك پارچىلىرىنىڭ كېڭىيىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.بۇ سىستېما بېسىم ئۆزگەرتكۈچ ئارقىلىق سىرتقى ھاۋا لىنىيىسىگە ئۇلانغان بولۇپ ، بېسىم (± 1 mmHg) ۋە ۋاقىت (ms 1 ms) نى توغرا تەڭشىگىلى بولىدۇ (1c رەسىم).
ئۈسكۈنىنىڭ مەدەنىيەت ئۆيىنىڭ ئىچىگە كۆك رەڭدە كۆرسىتىلگەن 7 مىللىمېتىرلىق ئۈزۈككە توقۇلما بۆلەكنى چاپلاڭ.مەدەنىيەت ئۆيى نېپىز ئەۋرىشىم كرېمنىي پەردىسى بىلەن ھاۋا ھۇجرىسىدىن ئايرىلىدۇ.ئېقىپ كېتىشنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن ھەر بىر كامېرنىڭ ئارىسىغا گاز قاچىلاڭ.ئۈسكۈنىنىڭ قاپقىقىدا ئېلېكتر غىدىقلاش بىلەن تەمىنلەيدىغان گرافت ئېلېكترود بار.b چوڭ توقۇلما ئۈسكۈنىنىڭ سىخېمالىق ئىپادىلىنىشى ، يېتەكچى ئۈزۈك ۋە تىرەك ھالقىسى.توقۇلما بۆلەكلىرى (قوڭۇر) چوڭلۇقتىكى ئۈسكۈنىگە قويۇلغان بولۇپ ، يېتەكچى ئۈزۈك ئۈسكۈنىنىڭ سىرتقى چېتىدىكى ئۆستەڭگە قويۇلغان.يېتەكچىدىن پايدىلىنىپ ، توقۇلما ئاكرىل چاپلاق بىلەن سىرلانغان تىرەك ھالقىسىنى يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ بۆلىكىگە قويۇڭ.c ئېلېكتر غىدىقلاش ۋاقتىنى پروگرامما خاراكتېرلىك ئۆپكە ھەرىكەتلەندۈرگۈچ كۈچى (PPD) كونترول قىلىدىغان ھاۋا ھۇجرىسى بېسىمىنىڭ رولى سۈپىتىدە كۆرسىتىدىغان گرافىك.سانلىق مەلۇمات سېتىۋېلىش ئۈسكۈنىسى بېسىم سېنزورى ئارقىلىق ئېلېكتر غىدىقلاشنى ماس قەدەمدە ئىشلىتىشكە ئىشلىتىلگەن.مەدەنىيەت ئۆيىدىكى بېسىم بەلگىلەنگەن چەككە يەتكەندە ، C-PACE-EM غا تومۇر سىگنالى ئەۋەتىلىپ ئېلېكتر غىدىقلاشنى قوزغىتىدۇ.d ئىنكۇباتور تەكچىسىگە قويۇلغان تۆت CTCM نىڭ رەسىمى.تۆت ئۈسكۈنە ئۆپكە توك يولى ئارقىلىق بىر PPD غا ئۇلىنىدۇ ، قان سېنزورىغا بېسىم سېنزورى قىستۇرۇلۇپ ، ئۆپكە توك يولىدىكى بېسىمنى نازارەت قىلىدۇ.ھەر بىر ئۈسكۈنىدە ئالتە توقۇلما بۆلەك بار.
يەككە ئۆپكە قوزغاتقۇچ ئىشلىتىپ ، بىز 4 CTCM ئۈسكۈنىسىنى كونترول قىلالىدۇق ، ئۇلارنىڭ ھەر بىرىدە 6 توقۇلما بۆلەك بار (رەسىم 1d).CTCM دە ، ھاۋا ھۇجرىسىدىكى ھاۋا بېسىمى سۇيۇقلۇق ئۆيدىكى ماس قەدەملىك بېسىمغا ئۆزگىرىپ ، يۈرەك كېسىلىنىڭ فىزىئولوگىيىلىك كېڭىيىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ (2a رەسىم ۋە قوشۇمچە فىلىم 1).توقۇلمىلارنىڭ باھاسى 80 مىللىمېتىر Hg.سەنئەت.توقۇلما بۆلەكلىرىنىڭ سۇنغانلىقىنى% 25 كۆرسەتتى (2b رەسىم).بۇ پىرسەنت سوزۇلۇش نورمال يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ تارىيىشى ئۈچۈن فىزىئولوگىيىلىك ساركومىنىڭ ئۇزۇنلۇقى 2.2-22.3 µm غا ماس كېلىدىغانلىقى كۆرسىتىلدى.توقۇلما ھەرىكىتى ئىختىيارى كامېرا تەڭشىكى ئارقىلىق باھالانغان (قوشۇمچە 1-رەسىم).توقۇلمىلار ھەرىكىتىنىڭ ئامپلتۇدىسى ۋە تېزلىكى (2c رەسىم ، d) يۈرەك دەۋرىيلىكى ۋە سىستول ۋە دىئاستول دەۋرىدىكى سوزۇلۇشقا ماس كېلىدۇ (2b رەسىم).تارىيىش ۋە بوشىشىش جەريانىدا يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ سوزۇلۇشى ۋە تېزلىكى مەدەنىيەتتە 12 كۈن تۇراقلىق ھالەتنى ساقلىدى (2-رەسىم).مەدەنىيەت جەريانىدا ئېلېكتر غىدىقلاشنىڭ تارىيىشچانلىقىغا كۆرسىتىدىغان تەسىرىنى باھالاش ئۈچۈن ، سايە ئالگورىزىم (قوشۇمچە رەسىم 2a ، b) ئارقىلىق ئاكتىپ شەكلى ئۆزگىرىشىنى ئېنىقلاش ئۇسۇلىنى تەتقىق قىلىپ چىقتۇق ۋە ئېلېكتر غىدىقلاش بىلەن شەكلى ئۆزگىرىشىنى پەرقلەندۈرەلەيدىغان بولدۇق.يۈرەكنىڭ ئوخشاش بۆلىكى (2-رەسىم).كېسىلگەن يۆتكىلىشچان رايوندا (R6-9) ئېلېكتر غىدىقلاش جەريانىدىكى ئېلېكتر بېسىمى ئېلېكتر غىدىقلاش بولمىغان ئەھۋالغا قارىغاندا% 20 يۇقىرى بولغان ، بۇ ئېلېكتر غىدىقلاشنىڭ ھۆددىگەرلىك ئىقتىدارىغا قوشقان تۆھپىسىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.
ھاۋا ھۇجرىسى بېسىمى ، سۇيۇقلۇق ئۆينىڭ بېسىمى ۋە توقۇلمىلارنىڭ ھەرىكىتىنى ئۆلچەش ئىزلىرى كامېر بېسىمىنىڭ سۇيۇقلۇق ئۆينىڭ بېسىمىنى ئۆزگەرتىپ ، توقۇلمىلارنىڭ مۇناسىپ ھەرىكىتىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقىنى ئىسپاتلايدۇ.b پىرسەنت سوزۇلغان (ئاپېلسىن) توقۇلما بۆلەكلىرىنىڭ پىرسەنت سوزۇلغان (كۆك) ۋەكىللىك ئىزلىرى.c يۈرەك كېسىلىنىڭ ئۆلچەنگەن ھەرىكىتى ئۆلچەملىك ھەرىكەت سۈرئىتى بىلەن بىردەك.(4) يۈرەكنىڭ بىر بۆلىكىدە دەۋرىيلىك ھەرىكەت (كۆك سىزىق) ۋە تېزلىك (ئاپېلسىن چېكىتلىك سىزىق) نىڭ ۋەكىللىك يۆنىلىشى.e دەۋرىيلىك ۋاقىت سانى (ھەر گۇرۇپپىدا n = 19 پارچە ، ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن) ، تارىيىش ۋاقتى (ھەر گۇرۇپپىدا n = 19 پارچە) ، ئارام ئېلىش ۋاقتى (ھەر گۇرۇپپىدا n = 19 پارچە ، ئوخشىمىغان چوشقادىن) ، توقۇلمىلار ھەرىكىتى (n = 25).پارچە)ئىككى قۇيرۇقلۇق ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدا ھېچقانداق پارامېتىردا كۆرۈنەرلىك پەرق يوق.f (قىزىل) ۋە (كۆك) ئېلېكتر غىدىقلاش بولمىغان توقۇلما بۆلەكلىرىنىڭ ۋەكىللىك سۈزۈش ئانالىز ئىزلىرى ، ئوخشاش بۆلەكتىكى توقۇلما بۆلەكلىرىنىڭ ئون رايون رايونى.ئاستىنقى تاختايدا ئوخشىمىغان بۆلەكتىكى ئون رايوندا ئېلېكتر غىدىقلاش ۋە توقۇلمىلار بۆلەكلىرىدىكى بېسىمنىڭ نىسبىتى پەرقى كۆرسىتىلدى. . . . (n = 8 بۆلەك / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقا ، ئىككى قۇيرۇقلۇق ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقى （N = 8 片 / 组 ， 来自 不同 的 ， ， ** ** 学生 t 检验 ； **** p <0.0001 ， ** p <0.01 ， * p <0.05）。 （N = 8 片 / 组 ， 来自 不同 的 ， ， ** ** 学生 t 检验 ； **** p <0.0001 ， ** p <0.01 ， * p <0.05）。 . .خاتالىق بالدىقى ئوتتۇرىچە ± ئۆلچەملىك ياتلىشىشنى كۆرسىتىدۇ.
ئىلگىرىكى تۇراقلىق بىئولوگىيىلىك يۈرەك كېسىش مەدەنىيەت سىستېمىسىدا [20 ، 21] ئېلېكتر غىدىقلاش ۋە ئوتتۇرا تەركىبنى ئەلالاشتۇرۇش ئارقىلىق يۈرەك كېسىلىنىڭ ھاياتىي كۈچى ، ئىقتىدارى ۋە قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى 6 كۈن ساقلىدۇق.قانداقلا بولمىسۇن ، 10 كۈندىن كېيىن ، بۇ سانلار شىددەت بىلەن تۆۋەنلىدى.بىز ئىلگىرىكى تۇراقلىق بىئولوگىيىلىك مەدەنىيەت سىستېمىسى 20 ، 21 كونترول شارائىتى (Ctrl) دا مەدەنىيەتلەشتۈرۈلگەن بۆلەكلەرنى كۆرسىتىدۇ ، بىز ئىلگىرى ئەلالاشتۇرۇلغان ۋاستىمىزنى بىرلا ۋاقىتتا مېخانىك ۋە ئېلېكتر قوزغىتىش (CTCM) ئاستىدا MC شارائىتى ۋە مەدەنىيىتىمىز سۈپىتىدە ئىشلىتىمىز.دەپ چاقىردى.بىرىنچىدىن ، ئېلېكتر غىدىقلىماي مېخانىكىلىق غىدىقلاشنىڭ توقۇلمىلارنىڭ ھاياتىي كۈچىنى 6 كۈن ساقلاپ قېلىشقا يەتمەيدىغانلىقىنى ئېنىقلىدۇق (قوشۇمچە 3a ، b).قىزىقارلىق يېرى ، STCM ئارقىلىق فىزىكا-مېخانىكىلىق ۋە ئېلېكتر غىدىقلاشنىڭ ئوتتۇرىغا چىقىشى بىلەن ، MTT تەھلىلىدە كۆرسىتىلگەندەك ، 12 كۈنلۈك يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ھاياتىي كۈچى MS شارائىتىدا يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرىدىكىگە ئوخشاش ساقلانغان ، ئەمما Ctrl شارائىتىدا ئەمەس (1-رەسىم).3a).بۇ يۈرەك دەۋرىيلىكىنى مېخانىكىلىق غىدىقلاش ۋە تەقلىد قىلىش توقۇلما بۆلەكلىرىنى ئىلگىرىكى تۇراقلىق مەدەنىيەت سىستېمىسىدا دوكلات قىلىنغاندىن ئىككى ھەسسە ئۇزۇن ساقلىيالايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.قانداقلا بولمىسۇن ، يۈرەك تروپونىن T ۋە 43-نومۇرلۇق ئوكۇلنى ئىممۇنىتېتلاش ئارقىلىق توقۇلما بۆلەكلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى باھالاش نەتىجىسىدە كۆرسىتىلىشىچە ، 12-كۈنىدىكى MC توقۇلمىلىرىدا 43 خىل ئىپادىلەش ئوخشاش بىر كۈندىكى كونترول قىلىشقا قارىغاندا كۆرۈنەرلىك يۇقىرى بولغان.قانداقلا بولمىسۇن ، بىر تۇتاش تۇتاشتۇرۇلغان 43 ئىپادىلەش ۋە Z- دىسكىنىڭ شەكىللىنىشى تولۇق ساقلانمىدى (3b رەسىم).بىز سۈنئىي ئىدراك (AI) رامكىسىنى ئىشلىتىپ توقۇلمىلارنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى مىقدارلاشتۇرىمىز 26 ، تروپونىن- T ۋە ئۇلانغان داغنى ئاساس قىلغان رەسىمنى ئاساس قىلغان چوڭقۇر ئۆگىنىش تۇرۇبىسى يەرلىكلەشتۈرۈشنىڭ كۈچلۈكلۈكى جەھەتتە يۈرەك پارچىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلىكى ۋە فلۇئورېسسېنسىيەسىنى ئاپتوماتىك مىقدارلاشتۇرىدۇ.بۇ ئۇسۇلدا پايدىلىنىش نېرۋا تورى (CNN) ۋە چوڭقۇر ئۆگىنىش رامكىسى قوللىنىلىپ ، پايدىلىنىشتا تەسۋىرلەنگەندەك ، يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى ئاپتوماتىك ۋە تەرەپسىز ھالدا ئىشەنچلىك مىقدارلاشتۇرغىلى بولىدۇ.26. MC توقۇلمىلىرى تۇراقلىق كونترول بۆلەكلىرىگە سېلىشتۇرغاندا 0-كۈندىكى قۇرۇلما ئوخشاشلىقىنى كۆرسەتتى.بۇنىڭدىن باشقا ، ماسسوننىڭ ترىخروم داغلىرى مەدەنىيەتنىڭ 12-كۈنىدىكى كونترول شارائىتىغا سېلىشتۇرغاندا ، MS شارائىتىدا تالا كېسىلىنىڭ كۆرۈنەرلىك تۆۋەن بولىدىغانلىقىنى ئاشكارىلىدى (3c رەسىم).CTCM 12-كۈنى يۈرەك توقۇلمىلىرى بۆلەكلىرىنىڭ ھاياتىي كۈچىنى يېڭى يۈرەك توقۇلمىلىرىغا ئوخشاش سەۋىيىگە يەتكۈزگەن بىلەن ، يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى كۆرۈنەرلىك ياخشىلىمىدى.
تاياقچە گرافىكىدا تۇراقلىق مەدەنىيەت (D12 Ctrl) ياكى CTCM (D12 MC) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 Ctrl) ، 12 (D12 MC) كېسىش / گۇرۇپپىنىڭ ئوخشىمىغان چوشقىلارغا سېلىشتۇرغاندا ، 12 كۈن (D12 MC) سېلىشتۇرۇلغان يېڭى يۈرەك پارچىلىرى (D0) ياكى يۈرەك كېسىش مەدەنىيىتىنىڭ MTT ھاياتىي كۈچىنىڭ 12 كۈن ئىكەنلىكى كۆرسىتىلدى. l). تاياقچە گرافىكىدا تۇراقلىق مەدەنىيەت (D12 Ctrl) ياكى CTCM (D12 MC) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 Ctrl) ، 12 (D12 MC) كېسىش / گۇرۇپپىنىڭ ئوخشىمىغان چوشقىلارغا سېلىشتۇرغاندا ، 12 كۈن (D12 MC) سېلىشتۇرۇلغان يېڭى يۈرەك پارچىلىرى (D0) ياكى يۈرەك كېسىش مەدەنىيىتىنىڭ MTT ھاياتىي كۈچىنىڭ 12 كۈن ئىكەنلىكى كۆرسىتىلدى. l).گىستوگراممىدا تۇراقلىق مەدەنىيەت (D12 كونترول) ياكى CTCM (D12 MC) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 كونترول).)) ، 12 (D12 MC) بۆلەك / گۇرۇپپىنىڭ ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن MTT يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرى (D0) ياكى يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ مەدەنىيىتىنىڭ 12 كۈن ھاياتىي كۈچىنىڭ مىقدارلاشقانلىقى كۆرسىتىلدى.#### p <0,0001 по сравнению с D0 и ** p <0,01 по сравнению с D12 Ctrl). #### p <0.0001 بىلەن D0 ۋە ** p <0.01 D12 Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا). a 条形图 显示 在 静态 D (D12 Ctrl) 或 CTCM (D12 MC) (n = 18 (D0), 15 (D12 Ctrl) 中 新鲜 心脏 切片 (D0) 或 心脏 切片 培养 12 天 的 MTT 活力 的 量化 OV OV ( ， #### p <0.0001 ， 与 D12 Ctrl 相比 ， ** p <0.01)。 a 条形图 显示 在 静态 培养 (D12 Ctrl) 或 CTCM (D12 MC) (n = 18 (D0), 15 (D12 Ctrl) 中 新鲜 心脏 切片 (D0) ， 来自 不同 猪 的 12 (D12 MC) 切片 / 组 ， 进行 单向 OV OV ， ** p。)يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرى (D0) ياكى يۈرەك بۆلەكلىرىدىكى MTT نىڭ ھاياتىي كۈچىنىڭ مىقدارىنى كۆرسىتىدىغان گىستوگرامما تۇراقلىق مەدەنىيەت (D12 كونترول) ياكى CTCM (D12 MC) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 كونترول)) ، 12 (D12 MC) بۆلەك / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى.#### p <0,0001 по сравнению с D0, ** p <0,01 по сравнению с D12 Ctrl). #### p <0.0001 D0 غا سېلىشتۇرغاندا ، ** p <0.01 D12 Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا).b تروپونىن- T (يېشىل) ، كوننېكسىن 43 (قىزىل) ۋە DAPI (كۆك) يېڭى ئايرىۋېتىلگەن يۈرەك بۆلەكلىرىدە (D0) ياكى تۇراقلىق شارائىتتا (Ctrl) ياكى CTCM شارائىتىدا (MC) 12 كۈن ئىچىدە ۋەكىللىك قىلىنغان ئىممۇنىتېت كۈچى ئاجىز رەسىملەر (قۇرۇق كۆلەم = 100 µm). يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنىڭ سۈنئىي ئىدراك مىقدارى (n = 7 (D0) ، 7 (D12 Ctrl) ، 5 (D12 MC) پارچە / گۇرۇپپا ھەر بىرى ئوخشىمىغان چوشقا ، بىر يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ ؛ #### p <0.0001 D0 ۋە **** p <0.0001 بىلەن سېلىشتۇرغاندا يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنىڭ سۈنئىي ئىدراك مىقدارى (n = 7 (D0) ، 7 (D12 Ctrl) ، 5 (D12 MC) پارچە / گۇرۇپپا ھەر بىرى ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ ؛ #### p <0.0001 D0 ۋە **** p <0.0001 D12 Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا). Количестуууууеностуктуктврын тентусукиту, 7 (n = 7 mc) ср уп от рат 中ннынх свиней, поводить pакту; 04.## ئەسلىك P <0000,0001 по п 0 dююю d12 Ctrl). سۈنئىي ئىدراك (n = 7 (D0) ، 7 (D12 Ctrl) ، 5 (D12 MC) بۆلەك / گۇرۇپپىلارنىڭ ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن تەشكىل تاپقان يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى مىقدارلاشتۇرۇش ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلدى ؛ #### p <0.0001 بىلەن D0 ۋە **** p <0.0001)人工智能 量化 心脏 组织 结构 完整性 （n = 7 (D0) ، 7 (D12 Ctrl) ، 5 (D12 MC) ھەر خىل توڭگۇزلارنىڭ ھەر بىرى ، يەككە يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ؛ #### p <0.0001 与 D0 相比 ， **** p <0.0001 与 D12 Ctrl 相比）。人工智能 量化 心脏 组织 结构 完整性 （n = 7 (D0) ، 7 (D12 Ctrl) ، 5 (D12 MC) ھەر خىل توڭگۇزلارنىڭ ھەر بىرى / گۇرۇپپا ، ئانوۋا سىنىقى ؛ #### p <0.0001 与 D0 相比 ， **** p <0.0001 与 D12 Ctrl 相比）。 Искусственный интеллект для количественной оенки консной целостности сердечной ткани (n = 7 (D0) ، 7 (D12 Ctrl) ، 5 <0,0001 по сравнению с D12 Ctrl). يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى مىقدارلاشتۇرىدىغان سۈنئىي ئەقلىي ئىقتىدار (n = 7 (D0) ، 7 (D12 Ctrl) ، 5 (D12 MC) بۆلەك / گۇرۇپپا ھەر خىل توڭگۇزلارنىڭ ھەر بىرى ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ؛ #### p <0.0001 vs .D0 سېلىشتۇرۇش ئۈچۈن **** p <0.0001). c ماسوننىڭ ترىخروم داغلىرى (داغ يالىڭاچ = 500 µm) (n = 10 پارچە / گۇرۇپپا ھەر خىل ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن) يۈرەك كېسىلىنىڭ ۋەكىللىك رەسىملىرى (سولدا) ۋە مىقدارلاشتۇرۇش (ئوڭدا) D0 ۋە *** p <0.001 بىلەن سېلىشتۇرغاندا D c ماسوننىڭ ترىخروم داغ (تارازا يالىڭاچ = 500 µm) (n = 10 پارچە / گۇرۇپپا) ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن يۈرەك كېسىلىنىڭ ۋەكىللىك رەسىملىرى (سولدا) ۋە مىقدارلاشتۇرۇش (ئوڭدا) D0 ۋە *** p <0.001 گە سېلىشتۇرغاندا D c Репрезент كاننىي изображения (слева) ۋە количественная оенка (справа) срезов сердца, окрашенных трихромным красителем Мас муа ### p <0,0001 по сравнению с D0 и *** p <0,001 по сравнению с D12 Ctrl). c ماسسانىڭ ترىخروم داغلىرى (بويالغان كۆلەم = 500 µm) (ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن n = 10 بۆلەك / گۇرۇپپا ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلدى ؛ #### p <0 .0001) D0 ۋە *** p <0.001 بىلەن سېلىشتۇرغاندا ، يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ۋەكىللىك رەسىملىرى (سولدا) ۋە مىقدار (ئوڭدا). c 用 ماسسون ）。 C 用 masson 三 色 染料 的 心脏 切片 的 代表性 500 500 500 尺度 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 500 trl 相比）。 c Репрезент كاننىيې изображения (слева) ۋە количественный мат (справа) срезов сердца, окрашенных трихромным красителем Мас мена (بۇя шкала = 500 мкм) с كانننو о ماا; ### #p <0,0001 по сравнению с D0, *** p <0,001 по сравнению с D12 Ctrl). c ماسسوننىڭ ترىخروم داغلىرى (قۇرۇق = 500 µm) (n = 10 بۆلەك / گۇرۇپپا ، ھەر بىرسى ئوخشىمىغان چوشقادىن كەلگەن) بۆلەك بۆلەكلىرىنىڭ ۋەكىللىك رەسىملىرى (سولدا) ۋە مىقدار (ئوڭدا) D0 Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا ، ### # p <0.0001).خاتالىق بالدىقى ئوتتۇرىچە ± ئۆلچەملىك ياتلىشىشنى كۆرسىتىدۇ.
بىز مەدەنىيەتنىڭ ئوتتۇرا قىسمىغا كىچىك مولېكۇلا قوشۇش ئارقىلىق يۈرەك قان تومۇرنىڭ مۇكەممەللىكىنى ياخشىلاپ ، CTCM مەدەنىيىتى جەريانىدا تالا كېسىلىنىڭ تەرەققىي قىلىشىنى ئازايتقىلى بولىدىغانلىقىنى پەرەز قىلدۇق.شۇڭلاشقا قالايمىقان ئامىللارنىڭ سانى ئاز بولغاچقا ، تۇراقلىق كونترول مەدەنىيىتىمىز ئارقىلىق كىچىك مولېكۇلالارنى تەكشۈردۇق.بۇ ئېكران ئۈچۈن Dexamethasone (Dex) ، triiodothyronine (T3) ۋە SB431542 (SB) تاللانغان.بۇ كىچىك مولېكۇلالار ئىلگىرى hiPSC-CM مەدەنىيىتىدە ساركومېرنىڭ ئۇزۇنلۇقى ، T نەيچىسى ۋە ئۆتكۈزۈش سۈرئىتىنى ئاشۇرۇش ئارقىلىق يۈرەك قان تومۇرنىڭ يېتىلىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ.بۇنىڭدىن باشقا ، دېكىس (گلۇكوكورتىكوئىد) ۋە SB نىڭ ھەر ئىككىسى ياللۇغنى باسىدىغانلىقى مەلۇم.شۇڭلاشقا ، بىز بۇ كىچىك مولېكۇلالارنىڭ بىرى ياكى بىرىكىشىنىڭ يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى ياخشىلايدىغان ياكى ئاشۇرالمايدىغانلىقىنى سىنىدۇق.دەسلەپكى تەكشۈرۈش ئۈچۈن ، ھەر بىر بىرىكمىنىڭ مىقدارى ھۈجەيرە مەدەنىيەت مودېللىرىدا كۆپ ئىشلىتىلىدىغان قويۇقلۇق دەرىجىسىگە ئاساسەن تاللانغان (1 μM Dex27 ، 100 nM T327 ۋە 2.5 μM SB31).12 كۈنلۈك مەدەنىيەتتىن كېيىن ، T3 بىلەن Dex نىڭ بىرىكىشى ئەڭ ياخشى يۈرەك قان تومۇر قۇرۇلمىسىنىڭ مۇكەممەللىكى ۋە تالالىق ئەڭ تۆۋەن ئۆزگەرتىشنى كەلتۈرۈپ چىقاردى (قوشۇمچە 4-ۋە 5-رەسىملەر).ئۇنىڭدىن باشقا ، T3 ۋە Dex نىڭ بۇ قويۇقلۇقىنى قوش ياكى بىر ھەسسە ئىشلىتىش نورمال قويۇقلۇقىغا سېلىشتۇرغاندا نازۇك ئۈنۈم ھاسىل قىلدى (قوشۇمچە 6a ، b).
دەسلەپكى تەكشۈرۈشتىن كېيىن ، بىز 4 خىل مەدەنىيەت شارائىتىنى بىرمۇبىر سېلىشتۇرۇش ئېلىپ باردۇق (4a رەسىم): Ctrl: ئەلالاشتۇرۇلغان ۋاستىمىز ئارقىلىق ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەن تۇراقلىق مەدەنىيىتىمىزدە يېتىشتۈرۈلگەن يۈرەك بۆلەكلىرى20.21 TD: T3 ۋە Ctrl s چارشەنبە كۈنى Dex قوشۇلدى.MC: ئىلگىرى ئەلالاشتۇرۇلغان ۋاستىمىزنى ئىشلىتىپ CTCM دا يېتىشتۈرۈلگەن يۈرەك بۆلەكلىرىۋە MT: T3 ۋە Dex بىلەن CTCM ئوتتۇراھالغا قوشۇلدى.12 كۈنلۈك تېرىقچىلىقتىن كېيىن ، MS ۋە MT توقۇلمىلىرىنىڭ ھاياتىي كۈچى MTT تەكشۈرۈشى تەرىپىدىن باھالانغان يېڭى توقۇلمىلاردىكىگە ئوخشاش (4b رەسىم).قىزىقارلىق يېرى ، T3 ۋە Dex نىڭ يۆتكىلىشچان مەدەنىيەت (TD) گە قوشۇلۇشى Ctrl شارائىتىغا سېلىشتۇرغاندا ھاياتىي كۈچىنىڭ كۆرۈنەرلىك ياخشىلىنىشىنى كەلتۈرۈپ چىقارمىغان ، بۇ مېخانىك غىدىقلاشنىڭ يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ھاياتىي كۈچىنى ساقلاپ قېلىشتىكى موھىم رولىنى كۆرسىتىپ بەرگەن.
مېخانىكىلىق غىدىقلاش ۋە T3 / Dex تولۇقلاشنىڭ 12 كۈن ئىچىدىكى تەسىرىنى باھالاشتا ئىشلىتىلىدىغان تۆت خىل مەدەنىيەت شارائىتىنى تەسۋىرلەيدىغان تەجرىبە لايىھىلەش دىئاگراممىسى. b تاياقچە گرافىكىدا يېڭى يۈرەك پارچىلىرى (D0) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MT) ، 12 (D12 MC) پارچە / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلارغا سېلىشتۇرغاندا ، 12 (D12 MC) كېسىشمە / گۇرۇپپا ، ھەر بىر خىل ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ. to D12 Ctrl). b تاياقچە گرافىكىدا يېڭى يۈرەك پارچىلىرى (D0) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MT) ، 12 (D12 MC) پارچە / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلارغا سېلىشتۇرغاندا ، 12 (D12 MC) كېسىشمە / گۇرۇپپا ، ھەر بىر خىل ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ. to D12 ctrl). ب MT) ، 12. b تاياقچە گرافىكىدا يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرى (D0) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MT) ، 12 (D12 MC) بۆلەك / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلارغا سېلىشتۇرغاندا ، 12 كۈنلۈك يازما مەدەنىيەتنىڭ ھاياتىي كۈچىنىڭ مىقدارى كۆرسىتىلدى (كونترول ، TD ، MC ۋە MT). rl). b 条形图 显示 所有 4 种 培养 条件 （Ctrl 、 TD 、 MC 和 MT） 与 新鲜 心脏 切片 (D0) (n = 18 (D0) 、 15 (D12 Ctrl 、 D12 TD 和 D12 MT) ， 来自 不同 猪 的 ( 0.001 与 D0 相比 ， ** p <0.01 与 D12 控制）。b 4 12 (D12 MC) b Гистограмma, показывающая все 4 условия مانىتۋىرانيا (كۈن ، TD ، MC ۋە MT) по сравнению со свежим срезами сердца (D0) (n = 18 (D0), 15 (D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MT) OVA; #### p <0,0001, ### p <0,001 по сравнению с D0, ** p b يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرى (D0) (n = 18 (D0) ، 15 (D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MT) غا سېلىشتۇرغاندا ، 4 خىل مەدەنىيەت شارائىتىنى (كونترول ، TD ، MC ۋە MT) كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، ئوخشىمىغان چوشقا 12 (D12 MC) بۆلەك / گۇرۇپپا ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ؛ #### p <0.0001 ، ### p c تاياقچە گرافىكىدا 4 خىل مەدەنىيەت شارائىتىدا (Ctrl, TD, MC ۋە MT) گلۇكوزا ئېقىمىنىڭ 12 كۈنلۈك پوستلاق مەدەنىيىتىنىڭ مىقدارى كۆرسىتىلگەن بولۇپ ، يېڭى يۈرەك پارچىلىرى (D0) غا سېلىشتۇرغاندا (n = 6 پارچە / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ ؛ ### p <0.001 ، D0 ۋە *** p <0.001 گە سېلىشتۇرغاندا). c تاياقچە گرافىكىدا 4 خىل مەدەنىيەت شارائىتىدا (Ctrl, TD, MC ۋە MT) گلۇكوزا ئېقىمىنىڭ 12 كۈنلۈك پوستلاق مەدەنىيىتىنىڭ مىقدارى كۆرسىتىلگەن بولۇپ ، يېڭى يۈرەك پارچىلىرى (D0) غا سېلىشتۇرغاندا (n = 6 پارچە / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ ؛ ### p <0.001 ، D0 ۋە *** p <0.001 گە سېلىشتۇرغاندا). c оронний Выполняется ту ANOVA; ### p <0,001 по сравнению с D0 и *** p <0,001 по сравнению с D12 Ctrl). c گىستوگرامدا يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرى (D0) (ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن n = 6 بۆلەك / گۇرۇپپا ، بىر يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلدى ؛ # D# Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا ### p <0.001) بىلەن سېلىشتۇرغاندا ، 4 خىل مەدەنىيەت شارائىتىدا (كونترول ، TD ، MC ۋە MT) بارلىق 12 مەدەنىيەت شارائىتىدا (كونترول ، TD ، MC ۋە MT) گلۇكوزا ئېقىمىنىڭ مىقدارى كۆرسىتىلدى. c 条形图 显示 所有 4 种 培养 条件 （Ctrl 、 TD 、 MC 和 MT） 与 新鲜 心脏 切片 (D0) 相比 ， 培养 后 12 天 的 葡萄糖 通量 （n = 6 片 / 组 ， 来自 不同 猪 单向 单向 执行 执行 执行 OV l 相比）。 C 条形图 显示 所有 4 种 条件 （（ctrl 、 td 、 mc 和 mt） 新鲜 心脏 切片 切片 相比 ， 培养 后 后 = n = 6 片 / 组 ， 来自 猪 0.00 A A 0 相比 ， *** p <0.001 与 D12 Ctrl 相比）。 س ، односторонний Были проведены тесты ANOVA; c گىستوگرامما يېڭى مەدەنىيەت بۆلەكلىرى (D0) (n = 6 بۆلەك / گۇرۇپپا) غا سېلىشتۇرغاندا ، ئوخشىمىغان 4 خىل مەدەنىيەت شارائىتىنىڭ (كونترول ، TD ، MC ۋە MT) مەدەنىيەتتىن كېيىنكى 12 كۈن ئىچىدە گلۇكوزا ئېقىمىنىڭ مىقدارىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ، D12 (كونترول) بىلەن سېلىشتۇرغاندا ،d ئون رايون توقۇلما بۆلەك نۇقتىسىدىكى يېڭى (كۆك) ، 12-كۈنى MC (يېشىل) ۋە 12-كۈنى MT (قىزىل) توقۇلمىلارنىڭ سۈزۈش ئانالىز نۇقتىلىرى (n = 4 پارچە / گۇرۇپپا ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ؛ گۇرۇپپىلار ئارىسىدا كۆرۈنەرلىك پەرق يوق).e يانار تاغ سىيۇژىتى تۇراقلىق شارائىتتا (Ctrl) ياكى MT شارائىتىدا (MT) 10-12 كۈن يېتىلدۈرۈلگەن يۈرەك بۆلەكلىرىگە سېلىشتۇرغاندا ، يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرىدە (D0) ئوخشىمىغان ئىپادىلەنگەن گېنلارنى كۆرسىتىدۇ.f ھەر بىر مەدەنىيەت شارائىتىدا يېتىلدۈرۈلگەن يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ساركومىن گېنىنىڭ ئىسسىقلىق خەرىتىسى.خاتالىق بالدىقى ئوتتۇرىچە ± ئۆلچەملىك ياتلىشىشنى كۆرسىتىدۇ.
مېتابولىزىمنىڭ ياغ كىسلاتاسىنىڭ ئوكسىدلىنىشىدىن گلىكولىزغا ئايلىنىشى يۈرەك قان تومۇرنى ئايرىشنىڭ ئالاھىدىلىكى.پىشىپ يېتىلمىگەن يۈرەك قان تومۇرلىرى ئاساسلىقى ATP ئىشلەپچىقىرىشتا گلۇكوزا ئىشلىتىدۇ ھەمدە كىرىستو 5،32 بولغان قاندا ماي كۆپىيىشچان خوندىرىئوسوم بار.گلۇكوزىدىن پايدىلىنىش ئانالىزىدا كۆرسىتىلىشىچە ، MC ۋە MT شارائىتىدا ، گلۇكوزىنىڭ ئىشلىتىلىشى 0 كۈنلۈك توقۇلمىلارغا ئوخشايدىكەن (4c رەسىم).قانداقلا بولمىسۇن ، Ctrl ئەۋرىشكىسى يېڭى توقۇلمىلارغا سېلىشتۇرغاندا گلۇكوزىنىڭ ئىشلىتىلىشىدە كۆرۈنەرلىك ئاشقانلىقىنى كۆرسەتتى.بۇ CTCM بىلەن T3 / Dex نىڭ بىرىكىشى توقۇلمىلارنىڭ ھاياتىي كۈچىنى ئاشۇرىدىغانلىقىنى ۋە 12 كۈنلۈك مەدەنىيەتلىك يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ مېتابولىزىم فېنوتىنى ساقلاپ قالىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، جىددىي ئانالىز نەتىجىسىدە كۆرسىتىلىشىچە ، جىددىيلىشىش دەرىجىسى MT ۋە MS شارائىتىدا 12 كۈن يېڭى يۈرەك توقۇلمىلىرى بىلەن ئوخشاش بولغان (4d رەسىم).
CTCM ۋە T3 / Dex نىڭ يۈرەك كېسىلىنىڭ توقۇلمىلىرىنىڭ يەرشارىدىكى ترانسكرىپسىيە مەنزىرىسىگە بولغان تەسىرىنى تەھلىل قىلىش ئۈچۈن ، بىز ئوخشىمىغان تۆت خىل مەدەنىيەت شارائىتىدىكى يۈرەك كېسىلىنى RNAseq نى ئورۇنلىدۇق (قوشۇمچە سانلىق مەلۇمات 1).قىزىقارلىق يېرى ، MT بۆلەكلىرى يېڭى يۈرەك توقۇلمىلىرىغا ترانسكرىپسىيەنىڭ يۇقىرىلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى ، 13 مىڭ 642 گېن ئىچىدە پەقەت 16 پەرقلىق ئىپادىلەندى.قانداقلا بولمىسۇن ، بىز ئىلگىرى كۆرسىتىپ ئۆتكىنىمىزدەك ، Ctrl پارچەلىرى مەدەنىيەتتە 10-12 كۈندىن كېيىن 1229 ئوخشىمىغان ئىپادىلەنگەن گېننى كۆرسەتتى (4e رەسىم).بۇ سانلىق مەلۇماتلار يۈرەك ۋە تالالىق گېننىڭ qRT-PCR تەرىپىدىن دەلىللەندى (قوشۇمچە 7a-c).قىزىقارلىق يېرى ، Ctrl بۆلەكلىرىدە يۈرەك ۋە ھۈجەيرە دەۋرىيلىكى گېنىنىڭ تەڭشىلىشى ۋە ياللۇغلىنىش گېنى پروگراممىسىنىڭ ئاكتىپلانغانلىقى كۆرسىتىلدى.بۇ سانلىق مەلۇماتلار ئۇزۇن مۇددەتلىك مەدەنىيەتتىن كېيىن كۆرۈلىدىغان پەرقلەندۈرۈشنىڭ MT شارائىتىدا پۈتۈنلەي قويۇقلاشقانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ (قوشۇمچە رەسىم 8a ، b).ساركوزى گېنىنى ئەستايىدىللىق بىلەن تەتقىق قىلىش شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، پەقەت MT شارائىتىدا ساركومېر (4f رەسىم) ۋە ئىئون قانىلى (قوشۇمچە 9-رەسىم) كودلانغان گېنلار ساقلانغان بولۇپ ، ئۇلارنى Ctrl ، TD ۋە MC شارائىتىدا باستۇرۇشتىن ساقلايدۇ.بۇ سانلىق مەلۇماتلار مېخانىكىلىق ۋە يۇمۇرىستىك غىدىقلاش (T3 / Dex) نىڭ بىرىكىشى بىلەن ، يۈرەك كېسىلىنىڭ خاتىرىسىنى مەدەنىيەتتە 12 كۈندىن كېيىن يېڭى يۈرەك پارچىلىرىغا ئوخشاش ساقلاپ قالىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.
بۇ ترانسكرىپسىيەلىك بايقاش يۈرەك بۆلەكلىرىدىكى يۈرەك قان تومۇرلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنىڭ MT شارائىتىدا 12 كۈن ئەڭ ياخشى ساقلانغانلىقى بىلەن قوللانغان بولۇپ ، مۇكەممەل ۋە يەرلىكلەشتۈرۈلگەن 43-نومۇرلۇق ئۇلىنىش (5a رەسىم).ئۇنىڭدىن باشقا ، MT شارائىتىدىكى يۈرەك بۆلەكلىرىدىكى تالا ئۆسمىسى Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا كۆرۈنەرلىك تۆۋەنلەپ ، يېڭى يۈرەك بۆلەكلىرىگە ئوخشايدۇ (5b رەسىم).بۇ سانلىق مەلۇماتلار مېخانىكىلىق غىدىقلاش بىلەن T3 / Dex داۋالاشنىڭ بىرلەشتۈرۈلۈشى مەدەنىيەتنىڭ يۈرەك بۆلەكلىرىدىكى يۈرەك قۇرۇلمىسىنى ئۈنۈملۈك ساقلايدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.
تروپونىن- T (يېشىل) ، كوننېكسىن 43 (قىزىل) ۋە DAPI (كۆك) نىڭ يېڭى ئىممۇنىتېتلانغان يۈرەك بۆلەكلىرىدىكى (D0) ۋەكىللىك ئىممۇنىتېت كۈچىگە ئىگە رەسىملەر ياكى تۆت يۈرەك بۆلۈمى مەدەنىيەت شارائىتىدا 12 كۈن مەدەنىيەتلەشتۈرۈلگەن (كۆلەم بالداق = 100 µm).). يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنىڭ سۈنئىي ئىدراك مىقدارى (n = 7 (D0 ۋە D12 Ctrl) ، 5 (D12 TD ، D12 MC ۋە D12 MT) ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن پارچە / گۇرۇپپا ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ ؛ #### p <0.0001 D0 ۋە * p <0.05 ، ياكى **** p <0.0001). يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنىڭ سۈنئىي ئىدراك مىقدارى (n = 7 (D0 ۋە D12 Ctrl) ، 5 (D12 TD ، D12 MC ۋە D12 MT) ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن پارچە / گۇرۇپپا ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ ؛ #### p <0.0001 D0 ۋە * p <0.05 ، ياكى **** p <0.0001). Количестууенн уеностукитукитукитукитуууусста (n = 7 игено тен1 ие (слиу, 5 (n = 7 TD, D12 MC AN D12 MT) срееов / гр руууунзхамей, проведнененененененененененененеRIVENT * 0,0,000 Нению с D12 Ctrl). سۈنئىي ئىدراك (n = 7 (D0 ۋە D12 Ctrl) ، 5 (D12 TD ، D12 MC ۋە D12 MT) بۆلەكلىرى / گۇرۇپپىلىرى ئوخشاش بولمىغان چوشقا توپىدىن تەشكىل تاپقان يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى مىقدارلاشتۇرۇش ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA سىنىقى ئېلىپ بېرىلدى ؛ # D# ۋە * p <0.05 ياكى **** p <0.0001).对 不同 猪 的 心脏 组织 结构 完整性 （n = 7 （D0 和 D12 Ctrl） 、 5 （D12 TD 、 D12 MC 和 D12 MT） 切片 / 组） 进行 人工智能 量化 ， 单向 ANOVA 测试 ； #### p相比）。对 不同 猪 的 心脏 结构 （n = 7 （d0 和 d12 ctrl） （5 （d12 td 、 d12 mc 和 d12 mt） 组） 智能 量 化 # # # # # # # # # # Ctrl 相比）。ئوخشاش بولمىغان چوشقا (n = 7 (D0 ۋە D12 Ctrl) ، 5 (D12 TD ، D12 MC ۋە D12 MT) بۆلەك / گۇرۇپپا) سۈنئىي ئىدراك ئارقىلىق يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ قۇرۇلما پۈتۈنلۈكىنى مىقدارلاشتۇرۇش.#### p <0,0001 по сравнению с D0 и * p <0,05 или **** p <0,0001 по сравнению с D12 Ctrl). #### p <0.0001 D0 ۋە * p <0.05 ياكى **** p <0.0001 D12 Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا). B مەردەر بولغان بىرىنچى پارچە پىلاستىنلىق تىت-تىتلەق سەھنىدە, ئوخشىمىغان چولپانلار = 500, D12 Ctrl / D11 PR <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001. . B مەردەر بولغان بىرىنچى پارچە پىلاستىنلىق تىت-تىتلەق سەھنىدە, ئوخشىمىغان چولپانلار = 500, D12 Ctrl / D11 PR <0.0001 <0.0001 <0.0001 <0.0001. . b Репрезент كاننىيې изображения и количественная оценка срезов сердца, окрашенных трихромным красителем Мас ина (чнаяяейейка = 500 мкм) (n = 10 (D0, D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MC) يا односторонний ту ANOVA; #### p <0,0001 по сравнению с D0 и *** p <0,001 или **** p <0,0001 по сравнению с D12 Ctrl). b ماسوننىڭ ترىخروم داغلىرى (ئۆلچەملىك بالداق = 500 µm) (n = 10 (D0, D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MC) ، 9 (D12 MT) بۆلەك / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن تەركىب تاپقان يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ۋەكىللىك رەسىمى ۋە مىقدارى ، تاق يۆنىلىشلىك ANOVA نى ئورۇندىدى. #### p <0.0001 vs D0 ۋە *** p b 用 ماسسون ， *** p <0.001 ， 或 **** p <0.0001 与 D12 Ctrl 相比）。 b 用 masson 三 色 染料 的 心脏 切片 的 代表性 量化 尺 = 500 µm） （n = 10 （d0 、 d12 ctrl 、 d12 td 和 d12 mc组 ， 进行 单 因素 方差 分析 ； #### p <0.0001 与 D0 相比 ， *** p <0.001 ， 或 **** p <0.0001 与 D12 Ctrl 相比）。 b Репрезент كاننىيې изображения и количественная оенка срезов сердца, окрашенных трихромом Мас шона (шнанаяейей = 500 мкм) (n = 10 (D0, D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MC) ## p <0,0001 по сравнению с D0, *** p <0,001 или **** p <0,0001 по сравнению с D12 Ctrl). b ماسسون ترىخرومى (تارازا تاياقچىسى = 500 µm) (n = 10 (D0, D12 Ctrl, D12 TD ۋە D12 MC) ، ئوخشىمىغان چوشقا / گۇرۇپپىدىن كەلگەن 9 (D12 MT) بۆلەكلەر ، بىر ANOVA ئۇسۇلى ؛ #### p <0.0001) D0 ، *** p <0.001 ياكى ****خاتالىق بالدىقى ئوتتۇرىچە ± ئۆلچەملىك ياتلىشىشنى كۆرسىتىدۇ.
ئاخىرىدا ، CTCM نىڭ يۈرەك قان تومۇرنى تەقلىد قىلىش ئىقتىدارى يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ كېڭىيىشىنى ئاشۇرۇش ئارقىلىق باھالاندى.CTCM دە ، چوققا ھاۋا ھۇجرىسى بېسىمى 80 mmHg دىن 80 mmHg غا ئۆرلىدى.سەنئەت.(نورمال سوزۇلۇش) 140 mmHg سەنئەت.(6a رەسىم).بۇ سوزۇلۇشنىڭ% 32 ئېشىشىغا ماس كېلىدۇ (6b رەسىم) ، بۇ ئىلگىرى يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ يۇقىرى قان بېسىمىدا كۆرۈلگەنگە ئوخشاش ساركوزىنىڭ ئۇزۇنلۇقىغا ئېرىشىشى ئۈچۈن تەلەپ قىلىنغان ماس نىسبەتتە سوزۇلغانلىقى كۆرسىتىلدى.ئالتە كۈنلۈك مەدەنىيەت جەريانىدا تارىيىش ۋە بوشىشىش جەريانىدا يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ سوزۇلۇشى ۋە تېزلىكى ئىزچىل ساقلانغان (6c رەسىم).MT شارائىتىدىكى يۈرەك توقۇلمىلىرى ئالتە كۈن نورمال سوزۇلۇش (MT (نورمال)) ياكى چەكتىن ئېشىپ كېتىش (MT (OS)) نىڭ تەسىرىگە ئۇچرىغان.مەدەنىيەتتە تۆت كۈن تۇرغاندىن كېيىن ، يۇقىرى قان بېسىملىق بىئولوگىيىلىك ماركا NT-ProBNP MT (OS) شارائىتىدا MT (نورمال) شارائىتقا سېلىشتۇرغاندا كۆرۈنەرلىك يۇقىرى كۆتۈرۈلگەن (7a رەسىم).بۇنىڭدىن باشقا ، ئالتە كۈنلۈك مەدەنىيەتتىن كېيىن ، MT يۈرەك (نورمال) بۆلەكلىرىگە سېلىشتۇرغاندا ، MT (OS) دىكى ھۈجەيرە چوڭلۇقى (7b رەسىم) كۆرۈنەرلىك ئاشتى.بۇنىڭدىن باشقا ، چەكتىن ئاشقان توقۇلمىلاردا NFATC4 يادرونىڭ يۆتكىلىشى كۆرۈنەرلىك ئاشتى (7c رەسىم).بۇ نەتىجىلەر يۇقىرى قان بېسىمدىن كېيىن پاتولوگىيىلىك ئۆزگەرتىشنىڭ تەدرىجىي تەرەققىي قىلغانلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ ھەمدە CTCM ئۈسكۈنىسىنى سوزۇلما يۈرەك يۈرەك قان تومۇر سىگنالىنى تەتقىق قىلىدىغان سۇپا قىلىپ ئىشلىتىشكە بولىدۇ دېگەن ئۇقۇمنى قوللايدۇ.
ھاۋا ھۇجرىسى بېسىمى ، سۇيۇقلۇق ئۆينىڭ بېسىمى ۋە توقۇلمىلارنىڭ ھەرىكىتىنى ئۆلچەش ئىزلىرى كامېر بېسىمىنىڭ سۇيۇقلۇق ئۆينىڭ بېسىمىنى ئۆزگەرتىپ ، توقۇلمىلارنىڭ مۇناسىپ ھەرىكىتىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغانلىقىنى ئىسپاتلايدۇ.b ئادەتتە سوزۇلغان (قىزغۇچ سېرىق) ۋە سوزۇلغان (كۆك) توقۇلما بۆلەكلىرىنىڭ ۋەكىللىك سوزۇلۇش نىسبىتى ۋە سوزۇلۇش نىسبىتى ئەگرى سىزىقى.c تاياقچە گرافىك دەۋرىيلىك ۋاقىتنى كۆرسىتىدۇ (ھەر گۇرۇپپىدا n = 19 پارچە ، ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن) ، تارىيىش ۋاقتى (ھەر گۇرۇپپىدا n = 18-19 پارچە ، ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن) ، ئارام ئېلىش ۋاقتى (ھەر بىر گۇرۇپپىغا n = 19 پارچە ، ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن) ، توقۇلمىلار ھەرىكىتىنىڭ ئامپلىتسىيەسى (n = 14 پارچە / گۇرۇپپا ، ئوخشىمىغان چوشقا) (چوققا چوققا D) ) بۆلەكلەر / گۇرۇپپىلار) ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن) ، ئىككى قۇيرۇقلۇق ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقىدا ھېچقانداق پارامېتىردا كۆرۈنەرلىك پەرق يوق ، بۇ پارامېتىرلارنىڭ 6 كۈنلۈك مەدەنىيەتتە ھەددىدىن زىيادە بېسىم بىلەن تۇراقلىقلىقىنى كۆرسىتىپ بېرىدۇ.خاتالىق بالدىقى ئوتتۇرىچە ± ئۆلچەملىك ياتلىشىشنى كۆرسىتىدۇ.
MT نورمال سوزۇلۇش (Norm) ياكى ھەددىدىن زىيادە سوزۇلۇش (OS) شارائىتىدا (n = 4 (D2 MTNorm) ، 3 (D2 MTOS ، D4 MTNorm ۋە D4 MTOS) بۆلەكلىرى / گۇرۇپپىلىرىنىڭ مەدەنىيەت تاراتقۇلىرىدىكى NT-ProBNP قويۇقلۇقىنىڭ تاياقچە گرافىك مىقدارى ، ئوخشىمىغان چوشقىلارغا سېلىشتۇرغاندا ، قوش يۆنىلىشلىك ANOVA ئېلىپ بېرىلىدۇ. MT نورمال سوزۇلۇش (Norm) ياكى ھەددىدىن زىيادە سوزۇلۇش (OS) شارائىتىدا (n = 4 (D2 MTNorm) ، 3 (D2 MTOS ، D4 MTNorm ۋە D4 MTOS) بۆلەكلىرى / گۇرۇپپىلىرىنىڭ مەدەنىيەت تاراتقۇلىرىدىكى NT-ProBNP قويۇقلۇقىنىڭ تاياقچە گرافىك مىقدارى ، ئوخشىمىغان چوشقىلارغا سېلىشتۇرغاندا ، قوش يۆنىلىشلىك ANOVA ئېلىپ بېرىلىدۇ.NT-ProBNP نىڭ قويۇقلۇق دەرىجىسىدىكى مەدەنىيەتنىڭ قويۇقلۇقى نورمال MT سوزۇلۇش (نورمال) ياكى چەكتىن ئېشىپ كېتىش (OS) (n = 4 (D2 MTNorm) ، 3 (D2 MTOS ، D4 MTNorm ۋە D4).** پ ** p <0.01 نورمال سوزۇلۇشقا سېلىشتۇرغاندا). a 在 MT 正常 拉伸 (Norm) 或 过度 拉伸 (OS) 条件 下 培养 的 心脏 切片 培养基 中 NT-ProBNP 浓度 的 条形图 量化 （n = 4 (D2 MTNorm) 、 3 （D2 MTOS 、 D4 MTNorm 和 4 4 ； ； ； 切片 切片p <0.01）。 MT نورمال سوزۇلۇش (Norm) ياكى چەكتىن ئېشىپ كېتىش (OS) شارائىتىدا (n = 4 (D2 MTNorm) ، 3 (D2 MTOS ، D4 MTNorm 和 D4 MTOS) دىن ئوخشىمىغان يۈرەك lic NT 组 组 双向 双向 方 发 发 ** ** ** ** **.گىستوگرامما نورمال MT سوزۇلۇش (نورمال) ياكى ھەددىدىن زىيادە كېڭىيىش (OS) (n = 4 (D2 MTNorm) ، 3 (D2 MTOS ، D4 MTNorm) ۋە D4 MTOS) بۆلەكلىرى / گۇرۇپپىلىرىنىڭ ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن يۈرەك پارچىلىرىدىكى NT-ProBNP قويۇقلۇقىنىڭ مىقدارى.** پ ** p <0.01 نورمال سوزۇلۇشقا سېلىشتۇرغاندا). b تروپونىن- T ۋە WGA (سولدا) ۋە ھۈجەيرىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى مىقدارلاشتۇرۇش (ئوڭدا) (n = 330 (D6 MTOS) ، 369 (D6 MTNorm) ھۈجەيرىسى / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن 10 پارچە ، ئىككى قۇيرۇقلۇق ئوقۇغۇچىلار T سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ. b تروپونىن- T ۋە WGA (سولدا) ۋە ھۈجەيرىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى مىقدارلاشتۇرۇش (ئوڭدا) (n = 330 (D6 MTOS) ، 369 (D6 MTNorm) ھۈجەيرىسى / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن 10 خىل بۆلەكتىن ياسالغان يۈرەك پارچىلىرىغا ۋەكىللىك قىلىدىغان رەسىملەر ، نورمال سوزۇلۇشقا سېلىشتۇرغاندا **** p <0.0001). b Репрезент كاننىيې изображения срезов сердца, окрашенных тропонином-Т и АЗП (слева) ۋە количественного определения размера клеток (справа) (n = 330 (D6 MTOS)) водится хвостовой t-критерий Стьюдента; **** p b تروپونىن- T ۋە AZP (سولدا) ۋە ھۈجەيرىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى مىقدارلاشتۇرۇش (ئوڭدا) (n = 330 (D6 MTOS) ، 369 (D6 MTNorm) ھۈجەيرىسى / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن 10 بۆلەكتىن تەركىب تاپقان يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ۋەكىللىك سۈرىتى ، نورمال قۇيرۇققا سېلىشتۇرغاندا **** p <0.0001). b 用 肌钙蛋白 -T 和 WGA （左） 和 细胞 大小 量化 右 = = = = n = 330 （D6 MTOS） ， 来自 不同 猪 的 个 9 ** p <0.0001）。 b يۈرەك كېسىلىنىڭ ۋەكىللىك رەسىملىرى نورمال سوزۇلغان ， **** p <0.0001 بىلەن سېلىشتۇرغاندا ، كالتارىن- T ۋە WGA (سولدا) ۋە ھۈجەيرە چوڭلۇقى (ئوڭدا) (n = 330 (D6 MTOS)) ، 369 ئوخشىمىغان 10 پارچە (D6 MTNorm)) ھۈجەيرىلىرى. b Репрезент كاننىيې изображения срезов сердца, окрашенных тропонином-Т и АЗП (слева) ۋە количественная оценка размера клеток (справа) (n = 330 (D6 MTOS), 369 نىي критерий Стьюдента; **** p <0,0001 по сравнению с كاننىم رات انىنىم). b يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ تروپونىن- T ۋە AZP (سولدا) ۋە ھۈجەيرىلەرنىڭ چوڭ-كىچىكلىكى (ئوڭدا) (n = 330 (D6 MTOS) ، 369 (D6 MTNorm) ئوخشىمىغان چوشقىلارنىڭ ئوخشىمىغان 10 بۆلىكىدىن كەلگەن رەسىملەر) ھۈجەيرە / گۇرۇپپا ، ئىككى قۇيرۇق ئۆلچىمى ئوقۇغۇچىلارنىڭ t;**** p <0.0001 نورمال بېسىمغا سېلىشتۇرغاندا). c 0 ۋە 6-كۈندىكى ۋەكىللىك رەسىملەر MTOS يۈرەك پارچىلىرى تروپونىن- T ۋە NFATC4 ئۈچۈن ئىممۇنىتېتلانغان بولۇپ ، NFATC4 نىڭ CM نىڭ يادروسىغا (n = 4 (D0) ، 3 (D6 MTOS) پارچە / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن ، ئىككى قۇيرۇق ئوقۇغۇچىلار T سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ). c 0 ۋە 6-كۈندىكى ۋەكىللىك رەسىملەر MTOS يۈرەك پارچىلىرى تروپونىن- T ۋە NFATC4 ئۈچۈن ئىممۇنىتېتلانغان بولۇپ ، NFATC4 نىڭ CM نىڭ يادروسىغا (n = 4 (D0) ، 3 (D6 MTOS) پارچە / گۇرۇپپا ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن كەلگەن ، ئىككى قۇيرۇق ئوقۇغۇچىلار T سىنىقى ئېلىپ بېرىلىدۇ). س выполняется дву зононний t-критерий Стьюдента; * p <0,05). c 0 ۋە 6 كۈندىكى يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ۋەكىللىك رەسىملىرى MTOS ، تروپونىن- T ۋە NFATC4 ئۈچۈن ئىممۇنىتېتلانغان ، ھەمدە ئۆڭكۈر ھۈجەيرىسىنىڭ يادروسىدىكى NFATC4 تەرجىمە مىقدارى (n = 4 (D0) ، 3 (D6 MTOS) ئوخشىمىغان چوشقا توپىدىن كەلگەن گۇرۇپپا)* p <0.05). c 用于 肌钙蛋白 -T 和 NFATC4 免疫 标记 的 第 0 天和 第 6 天 MTOS 心脏 切片 的 代表性 图像 ， 以及 的 猪 的 NFATC4 易位 至 CM 细胞核 的 量化 （n = 4 (D0) 、 3 D c كالكاننىن- T ۋە NFATC4 ئىممۇنىتېتلاشنىڭ ۋەكىللىك رەسىمى 第 0 天和 第 6 天 MTOS يۈرەك پارچىلىرى ۋە NFATC4 ئوخشىمىغان NFATC4 易位 至 CM ھۈجەيرە يادروسى 的 مىقدارى 化 (n = 4 (D0) ، 3 (D6 MTOS) 切 礼 / 组, 时间 双 p p 学生 س ерий Стьюдента; * p <0,05). c MTOS يۈرەك كېسىلىنىڭ ۋەكىللىك رەسىملىرى 0 ۋە 6-كۈنلەردە تروپونىن- T ۋە NFATC4 ئىممۇنىتېتلاش ۋە NFATC4 نىڭ CM نىڭ يادروسىدىكى ئوخشىمىغان چوشقىلاردىن (n = 4 (D0) ، 3 (D6 MTOS) پارچە / گۇرۇپپا ، ئىككى قۇيرۇقلۇق T- ئۆلچەم ئوقۇغۇچىسى * * p <0.05)خاتالىق بالدىقى ± ئۆلچەملىك ياتلىشىشنى كۆرسىتىدۇ.
تەرجىمە يۈرەك قان تومۇر تەتقىقاتى يۈرەك مۇھىتىنى توغرا كۆپەيتىدىغان ھۈجەيرە مودېللىرىنى تەلەپ قىلىدۇ.بۇ تەتقىقاتتا ، يۈرەكنىڭ ئۇلتراتىن بۆلەكلىرىنى غىدىقلىيالايدىغان CTCM ئۈسكۈنىسى ياسالغان ۋە خاراكتېرلەنگەن.CTCM سىستېمىسى فىزىئولوگىيىلىك ماس قەدەملىك ئېلېكترو مېخانىكىلىق غىدىقلاش ۋە T3 ۋە Dex سۇيۇقلۇقىنى موللاشتۇرۇشنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ.پورشېن يۈرەك بۆلەكلىرى بۇ ئامىللار بىلەن ئۇچراشقاندا ، ئۇلارنىڭ ھاياتىي كۈچى ، قۇرۇلما پۈتۈنلۈكى ، مېتابولىزم پائالىيىتى ۋە ترانسكرىپسىيە ئىپادىلىنىشى 12 كۈنلۈك مەدەنىيەتتىن كېيىن يېڭى يۈرەك توقۇلمىلىرى بىلەن ئوخشاش بولۇپ كەلدى.ئۇنىڭدىن باشقا ، يۈرەك توقۇلمىلىرىنىڭ ھەددىدىن زىيادە سوزۇلۇشى يۈرەكنىڭ يۇقىرى قان بېسىمىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.ئومۇمىي جەھەتتىن ئالغاندا ، بۇ نەتىجىلەر فىزىئولوگىيىلىك مەدەنىيەت شارائىتىنىڭ نورمال يۈرەك فېنوتىپنى ساقلاپ قېلىشتىكى ھالقىلىق رولىنى قوللايدۇ ۋە دورا تەكشۈرۈش سەھنىسى بىلەن تەمىنلەيدۇ.
نۇرغۇن ئامىللار يۈرەك قان تومۇرلىرىنىڭ ئىقتىدارى ۋە مەۋجۇتلۇقى ئۈچۈن ئەڭ ياخشى مۇھىت يارىتىشقا تۆھپە قوشىدۇ.بۇ ئامىللارنىڭ ئىچىدە ئەڭ روشەن بولغىنى (1) ھۈجەيرىلەر ئارا ئۆز-ئارا تەسىر قىلىش ، (2) ئېلېكترو مېخانىكىلىق غىدىقلاش ، (3) يۇمۇرىستىك ئامىللار ۋە (4) مېتابولىزم ئاستى بېزى.فىزىئولوگىيىلىك ھۈجەيرە بىلەن ھۈجەيرىلەرنىڭ ئۆز-ئارا تەسىر قىلىشى تاشقى ھۈجەيرە ماترىسسا قوللايدىغان كۆپ خىل ھۈجەيرە تىپىدىكى مۇرەككەپ ئۈچ ئۆلچەملىك تورنى تەلەپ قىلىدۇ.بۇ خىل مۇرەككەپ ھۈجەيرە ئۆز-ئارا تەسىرنى يەككە ھۈجەيرە تىپلىرىنىڭ ئورتاق مەدەنىيىتى ئارقىلىق ۋىرۇستا قايتا قۇرۇش تەس ، ئەمما يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ ئورگانىك خاراكتېرىدىن پايدىلىنىپ ئاسانلا ئېرىشكىلى بولىدۇ.
يۈرەك مۇسكۇلىنىڭ مېخانىكىلىق سوزۇلۇشى ۋە ئېلېكترنىڭ غىدىقلىنىشى يۈرەك فېنوتىپنى ساقلاپ قېلىشتا ئىنتايىن مۇھىم.مېخانىكىلىق غىدىقلاش hiPSC-CM تەڭشىگۈچ ۋە پىشىپ يېتىلىشتە كەڭ قوللىنىلغان بولسىمۇ ، بىر نەچچە نەپىس تەتقىقاتلار يېقىندا بىر تۇتاش يۈك ئارقىلىق مەدەنىيەتتىكى يۈرەك پارچىلىرىنى مېخانىكىلىق غىدىقلاشقا ئۇرۇندى.بۇ تەتقىقاتلار 2D بىرلەشمە مېخانىكىلىق يۈكنىڭ مەدەنىيەت جەريانىدا يۈرەكنىڭ فېنوت تىپىغا ئاكتىپ تەسىر كۆرسىتىدىغانلىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.بۇ تەتقىقاتلاردا ، يۈرەك بۆلەكلىرىگە يا ئىزومېتىرىلىق جىددىيلىك كۈچى 17 ، سىزىقلىق ياردەمچى يۈك 18 قاچىلانغان ياكى يۈرەك دەۋرىيلىكى كۈچ ئۆزگەرتكۈچ ئىنكاس ۋە جىددىيلىك قوزغاتقۇچ ئارقىلىق قايتا ياسالغان.قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ ئۇسۇللار مۇھىتنى ئەلالاشتۇرماي تۇرۇپ توقۇلما توقۇلمىلارنى ئىشلىتىدۇ ، نەتىجىدە نۇرغۇن يۈرەك گېنىنىڭ بېسىلىشى ياكى بىنورمال سوزۇلۇش ئىنكاسى بىلەن مۇناسىۋەتلىك گېنلارنىڭ ھەددىدىن زىيادە بېسىلىشى كېلىپ چىقىدۇ.بۇ يەردە تەسۋىرلەنگەن CTCM 3D ئېلېكترو مېخانىكىلىق غىدىقلاش بىلەن تەمىنلەيدۇ ، ئۇ دەۋرىيلىك ۋاقىت ۋە فىزىئولوگىيىلىك سوزۇلۇش جەھەتتە تەبىئىي يۈرەك دەۋرىنى تەقلىد قىلىدۇ (% 25 سوزۇلۇش ،% 40 سىستولى ،% 60 دىئاستول ۋە مىنۇتىغا 72 قېتىم).گەرچە بۇ ئۈچ ئۆلچەملىك مېخانىكىلىق غىدىقلاش پەقەت توقۇلمىلارنىڭ پۈتۈنلۈكىنى ساقلاشقا يەتمىسىمۇ ، ئەمما T3 / Dex ئارقىلىق يۇمۇرىستىك ۋە مېخانىكىلىق غىدىقلاشنى بىرلەشتۈرۈپ ، توقۇلمىلارنىڭ ھاياتىي كۈچى ، ئىقتىدارى ۋە پۈتۈنلۈكىنى يېتەرلىك ساقلاش تەلەپ قىلىنىدۇ.
قۇرامىغا يەتكەن يۈرەك ھادىسىسىنى تەڭشەشتە يۇمۇرىستىك ئامىللار مۇھىم رول ئوينايدۇ.بۇ HiPS-CM تەتقىقاتىدا گەۋدىلەندۈرۈلۈپ ، T3 ۋە Dex مەدەنىيەت تاراتقۇلىرىغا قوشۇلۇپ ھۈجەيرىلەرنىڭ يېتىلىشىنى تېزلەتتى.T3 بەلكىم ئامىنو كىسلاتاسى ، قەنت ۋە كالتسىينىڭ ھۈجەيرە پەردىسىگە يۆتكىلىشىگە تەسىر كۆرسىتىشى مۇمكىن.بۇنىڭدىن باشقا ، T3 MHC-α ئىپادىلەش ۋە MHC-β نى تەڭشەشنى ئىلگىرى سۈرۈپ ، ھامىلىنىڭ CM دىكى ئاستا-ئاستا تارتىشىپ قېلىش مۇسكۇلىغا سېلىشتۇرغاندا ، پىشىپ يېتىلگەن يۈرەك قان تومۇردا تېز تارتىشىش خاراكتېرلىك مۇسكۇل ئۆسمىسىنىڭ شەكىللىنىشىنى ئىلگىرى سۈرىدۇ.قاندىكى قالقانسىمان بەز بىمارلىرىدىكى T3 كەملىك مېڭە قان تومۇرلىرىنىڭ يوقىلىشىنى ۋە ئاۋازنىڭ تەرەققىي قىلىش نىسبىتىنىڭ تۆۋەنلىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.Dex گلۇكوكورتىكوئىد قوبۇللىغۇچىسىدا ھەرىكەت قىلىدۇ ۋە يەككە خۇشپۇراق يۈرەكلەردە يۈرەك مۇسكۇلىنىڭ تارىيىشىنى ئاشۇرىدۇ.38 بۇ ياخشىلىنىش كالتسىي زاپىسى ئارقىلىق قوزغىتىش (SOCE) نىڭ تەسىرى بىلەن مۇناسىۋەتلىك دەپ قارىلىدۇ.ئۇنىڭدىن باشقا ، دېكىس قوبۇللىغۇچ بىلەن باغلىنىپ ، ئىممۇنىتېت ئىقتىدارى ۋە ياللۇغنى باسىدىغان كەڭ ھۈجەيرە ئىنكاسىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىدۇ.
نەتىجىمىز شۇنى ئىسپاتلىدىكى ، فىزىكىلىق مېخانىكىلىق غىدىقلاش (MS) Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا ئومۇمىي مەدەنىيەت ئۈنۈمىنى ئۆستۈردى ، ئەمما مەدەنىيەتتە 12 كۈن ئىچىدە ھاياتىي كۈچ ، قۇرۇلما پۈتۈنلىكى ۋە يۈرەك ئىپادىسىنى ساقلاپ قالالمىدى.Ctrl غا سېلىشتۇرغاندا ، T3 ۋە Dex نىڭ CTCM (MT) مەدەنىيىتىگە قوشۇلۇشى ھاياتىي كۈچىنى ئاشۇرۇپ ، يېڭى يۈرەك توقۇلمىلىرى بىلەن ئوخشىشىپ كېتىدىغان ئارخىپ ، قۇرۇلما پۈتۈنلۈكى ۋە مېتابولىزىم پائالىيىتىنى 12 كۈن ساقلىدى.ئۇنىڭدىن باشقا ، توقۇلمىلارنىڭ كېڭىيىش دەرىجىسىنى كونترول قىلىش ئارقىلىق ، STCM ئارقىلىق يۇقىرى قان بېسىم كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان يۈرەك قان بېسىمى مودېلى بارلىققا كېلىپ ، STCM سىستېمىسىنىڭ كۆپ خىللىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.كۆرسىتىپ ئۆتۈشكە تېگىشلىكى شۇكى ، گەرچە يۈرەكنى ئۆزگەرتىش ۋە تالا ئۆسمىسى ئادەتتە مۇكەممەل ئەزالارنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ ، ئۇلارنىڭ ئايلىنىش ھۈجەيرىسى مۇناسىپ سىتوكېن شۇنداقلا فاكوسېتوز ۋە باشقا ئۆزگەرتىش ئامىللىرى بىلەن تەمىنلىيەلەيدۇ ، ئەمما يۈرەك بۆلەكلىرى بېسىم ۋە جاراھەتكە تاقابىل تۇرۇش ئۈچۈن تالا جەريانىنى تەقلىد قىلالايدۇ.myofibroblast.بۇ ئىلگىرى بۇ يۈرەك كېسىش ئەندىزىسىدە باھالانغان.كۆرسىتىپ ئۆتۈشكە تېگىشلىكى شۇكى ، CTCM پارامېتىرلىرىنى بېسىم / ئېلېكتر ئامپلىتۇدىيىسى ۋە چاستوتىسىنى ئۆزگەرتىش ئارقىلىق تەقلىد قىلىپ ، يۈرەك مۇسكۇلى ، يۈرەك قان تومۇر ئۆسمىسى ۋە مېخانىكىلىق ئايلىنىشنى قوللاش (مېخانىكىلىق چۈشۈرۈلگەن يۈرەك) قاتارلىق نۇرغۇن ئەھۋاللارنى تەقلىد قىلغىلى بولىدۇ.بۇ سىستېمىنى دورا تەكشۈرۈشتىكى ئوتتۇرا ھالغا ئايلاندۇرىدۇ.CTCM نىڭ ھەددىدىن زىيادە بېسىم كەلتۈرۈپ چىقىرىدىغان يۈرەك قان بېسىمىنى مودېل قىلىش ئىقتىدارى بۇ سىستېمىنى خاسلاشتۇرۇلغان داۋالاش ئۈچۈن سىناق قىلىشقا يول ئاچىدۇ.خۇلاسىلىگەندە ، بۇ تەتقىقات يۈرەك توقۇلمىلىرى بۆلەكلىرىنىڭ مەدەنىيىتىنى ساقلاپ قېلىشتا مېخانىكىلىق سوزۇلۇش ۋە يۇمۇرىستىك غىدىقلاشنىڭ ئىنتايىن مۇھىملىقىنى كۆرسىتىپ بەردى.
گەرچە بۇ يەردە كۆرسىتىلگەن سانلىق مەلۇماتلار CTCM نىڭ مۇكەممەل يۈرەك مۇسكۇلى مودېللاشتىكى ئىنتايىن ئۈمىدۋار سۇپا ئىكەنلىكىنى كۆرسىتىپ بەرسىمۇ ، ئەمما بۇ مەدەنىيەت ئۇسۇلىنىڭ بەزى چەكلىمىلىرى بار.CTCM مەدەنىيىتىنىڭ ئاساسلىق چەكلىمىسى شۇكى ، ئۇ پارچە-پۇراتلارغا ئۇدا ھەرىكەتچان مېخانىكىلىق بېسىم پەيدا قىلىدۇ ، بۇ ھەر بىر ئايلىنىش جەريانىدا يۈرەك كېسىلىنىڭ تارىيىشىنى ئاكتىپ نازارەت قىلىش ئىقتىدارىنى چەكلەيدۇ.بۇنىڭدىن باشقا ، يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ كىچىكلىكى (7 مىللىمېتىر) سەۋەبىدىن ، ئەنئەنىۋى كۈچ سېنزورى ئارقىلىق مەدەنىيەت سىستېمىسىنىڭ سىرتىدىكى سىستولىزىم ئىقتىدارىنى باھالاش ئىقتىدارى چەكلىك.نۆۋەتتىكى قوليازمىدا ئوپتىكىلىق توك بېسىمىنى ھۆددىگەرلىك ئىقتىدارىنىڭ كۆرسەتكۈچى دەپ باھالاپ ، بۇ چەكلىمىلەرنى قىسمەن يەڭدۇق.قانداقلا بولمىسۇن ، بۇ چەكلىمىلەر تېخىمۇ كۆپ خىزمەتلەرنى تەلەپ قىلىدۇ ۋە كەلگۈسىدە كالتسىي ۋە توك بېسىمىغا سەزگۈر بوياق ئىشلىتىپ ئوپتىكىلىق خەرىتە قاتارلىق يۈرەك كېسىلىنىڭ مەدەنىيەتتىكى ئىقتىدارىنى ئوپتىكىلىق نازارەت قىلىش ئۇسۇللىرىنى تونۇشتۇرۇش ئارقىلىق ھەل قىلىنىشى مۇمكىن.CTCM نىڭ يەنە بىر چەكلىمىسى شۇكى ، خىزمەت ئەندىزىسى فىزىئولوگىيىلىك بېسىمنى كونترول قىلمايدۇ (ئالدىن قاچىلاش ۋە يۈك بېسىش).CTCM دە ، قارشى يۆنىلىشتە بېسىم پەيدا بولۇپ ، ئىنتايىن چوڭ توقۇلمىلاردىكى دىئاستول (تولۇق سوزۇلۇش) ۋە سىستول (ئېلېكتر غىدىقلاش جەريانىدا تارىيىش ئۇزۇنلۇقى) دىكى% 25 فىزىئولوگىيىلىك سوزۇلۇشنى كۆپەيتىدۇ.بۇ چەكلىمىنى كەلگۈسىدىكى CTCM لايىھىلىگەندە ئىككى تەرەپتىن يۈرەك توقۇلمىلىرىغا يېتەرلىك بېسىم قىلىش ۋە يۈرەك ھۇجرىسىدا يۈز بەرگەن ئېنىق بېسىم ھەجىم مۇناسىۋىتىنى قوللىنىش ئارقىلىق چىقىرىۋېتىش كېرەك.
بۇ قوليازمىدا دوكلات قىلىنغان چەكتىن ئاشۇرۇۋېتىلگەن قايتا ئۆزگەرتىش پەقەت يۇقىرى قان بېسىم سىگنالىغا تەقلىد قىلىش بىلەنلا چەكلىنىدۇ.شۇڭا ، بۇ مودېل يۇمۇرلۇق ياكى نېرۋا ئامىلىنىڭ ھاجىتى يوق (بۇ سىستېمىدا مەۋجۇت ئەمەس) سوزۇلما خاراكتېرلىك يۇقىرى قان بېسىم سىگنالىنى تەتقىق قىلىشقا ياردەم بېرەلەيدۇ.CTCM نىڭ كۆپ خىللىقىنى ئاشۇرۇش ئۈچۈن يەنىمۇ ئىلگىرىلىگەن ھالدا تەتقىقات ئېلىپ بېرىشقا توغرا كېلىدۇ ، مەسىلەن ، ئىممۇنىتېت ھۈجەيرىسى بىلەن ھەمكارلىشىش ، قان پلازمىسى يۇمۇرلۇق ئامىللار ۋە نېرۋا ھۈجەيرىلىرى بىلەن ھەمكارلاشقاندا ئىچكى كېسەللىكلەر CTCM ئارقىلىق كېسەللىك مودېللىرىنىڭ مۇمكىنچىلىكىنى ياخشىلايدۇ.
بۇ تەتقىقاتتا 13 چوشقا ئىشلىتىلگەن.بارلىق ھايۋانات تەرتىپلىرى تۈزۈم كۆرسەتمىسى بويىچە ئېلىپ بېرىلىپ ، لۇيىسۋىل ئۇنۋېرسىتىتى ئورگان ھايۋاناتلارنى بېقىش ۋە ئىشلىتىش كومىتېتى تەرىپىدىن تەستىقلاندى.ئارتېرىيە قوۋزىقى قىسىلىپ ، يۈرەككە 1 لېتىرلىق يۈرەك قان تومۇرلىرى تولۇقلاندى (110 mM NaCl ، 1.2 mM CaCl2 ، 16 mM KCl ، 16 mM MgCl2 ، 10 mM NaHCO3 ، 5 U / mL گېپارىن ، pH 7.4 گىچە). يۈرەكلەر مۇزدەك يۈرەك يۈرەك ئېرىتمىسىدە ساقلانغان بولۇپ ، مۇز ئۈستىدىكى تەجرىبىخانىغا توشۇلغۇچە ئادەتتە <10 مىنۇت. يۈرەكلەر مۇزدەك يۈرەك يۈرەك ئېرىتمىسىدە ساقلانغان بولۇپ ، مۇز ئۈستىدىكى تەجرىبىخانىغا توشۇلغۇچە ئادەتتە <10 مىنۇت. сердца хранили в ледяном кардиоп огическом растворе до зировировки в лабораторию на льду, что обикно занимает <10 min. يۈرەك مۇز مۇز تەجرىبىخانىسىغا توشۇلغۇچە مۇز سوغۇق يۈرەك يۈرەك ئېرىتمىسىدە ساقلانغان ، ئادەتتە <10 مىنۇت ۋاقىت كېتىدۇ.将 心脏 保存 在 冰冷 的 心脏停搏 10 10 10 10 10 <10 分钟。将 心脏 保存 在 冰冷 的 心脏停搏 10 10 10 10 10 <10 分钟。 Держите сердца в ледяной кардиоп угии до зировировки в лабораторию на льду, обикно <10 مىن. مۇز ئۈستىدىكى تەجرىبىخانىغا توشقۇچە يۈرەكنى مۇز يۈرەك كېسەللىكىدە ساقلاڭ ، ئادەتتە <10 مىنۇت.
CTCM ئۈسكۈنىسى SolidWorks كومپيۇتېر ئارقىلىق لايىھەلەنگەن (CAD) يۇمشاق دېتالىدا ياسالغان.مەدەنىيەت ئۆيى ، بۆلگۈچ ۋە ھاۋا ھۇجرىسى CNC سۈزۈك ئاكرىل سۇلياۋدىن ياسالغان.دىئامېتىرى 7 مىللىمېتىرلىق زاپاس ئۈزۈك مەركىزىدىكى يۇقىرى زىچلىقتىكى پولىئېتىلېن (HDPE) دىن ياسالغان بولۇپ ، ئاستىدىكى تاراتقۇلارنى پېچەتلەش ئۈچۈن ئىشلىتىلىدىغان كرېمنىيلىق ئۈزۈكنى سىغدۇرالايدىغان O ھالقىسى بار.نېپىز سىلىتسىي پەردىسى مەدەنىيەت ئۆيىنى ئايرىش تاختىسىدىن ئايرىيدۇ.كرېمنىي پەردىسى 0.02 ″ قېلىن كرېمنىيلىق قەغەزدىن لازېر كېسىلگەن بولۇپ ، قاتتىقلىقى 35A.ئاستى ۋە ئۈستى كرېمنىيلىق گاز قاچىسى 1/16 ″ قېلىن كرېمنىيلىق قەغەزدىن لازېر كېسىلگەن بولۇپ ، قاتتىقلىقى 50A.316L داتلاشماس پولات چىۋىق ۋە قانات مېغىزى توسۇقنى چىڭىتىش ۋە ھاۋا ئۆتۈشۈش تامغىسى ياساشقا ئىشلىتىلىدۇ.
مەخسۇس بېسىلغان توك يولى تاختىسى (PCB) C-PACE-EM سىستېمىسى بىلەن بىرلەشتۈرۈش ئۈچۈن لايىھەلەنگەن.PCB دىكى سۇ ئۈزۈش ماشىنىسىنىڭ ئۇلاش ئېغىزى كۈمۈش يالىتىلغان مىس سىم ۋە ئېلېكتر قۇتۇبىغا سىلىنغان مىس 0-60 نۇمۇر ئارقىلىق گرافت ئېلېكترودقا ئۇلىنىدۇ.بېسىپ چىقىرىلغان توك يولى تاختىسى 3D پرىنتېرنىڭ مۇقاۋىسىغا قويۇلغان.
CTCM ئۈسكۈنىسى يۈرەك دەۋرىگە ئوخشاش كونترول قىلىنىدىغان ئايلىنىش بېسىمىنى پەيدا قىلىدىغان پروگرامما خاراكتېرلىك ئۆپكە ھەرىكەتلەندۈرگۈچ كۈچى (PPD) تەرىپىدىن كونترول قىلىنىدۇ.ھاۋا ھۇجرىسى ئىچىدىكى بېسىمنىڭ ئېشىشىغا ئەگىشىپ ، ئەۋرىشىم كرېمنىي پەردىسى يۇقىرىغا كېڭىيىپ ، توقۇلما ئورۇننىڭ ئاستىدىكى ۋاسىتىنى مەجبۇرلايدۇ.ئاندىن توقۇلمىلارنىڭ دائىرىسى بۇ سۇيۇقلۇقنىڭ سىرتقا چىقىرىلىشى بىلەن كېڭىيىدۇ ، دىئاستول مەزگىلىدە يۈرەكنىڭ فىزىئولوگىيىلىك كېڭىيىشىنى تەقلىد قىلىدۇ.ئارام ئېلىشنىڭ يۇقىرى پەللىسىدە ، گرافت ئېلېكترود ئارقىلىق ئېلېكتر غىدىقلاش قوللىنىلىپ ، ھاۋا ھۇجرىسىدىكى بېسىمنى تۆۋەنلىتىپ ، توقۇلما بۆلەكلىرىنىڭ تارىيىشىنى كەلتۈرۈپ چىقاردى.تۇرۇبا ئىچىدە ھاۋا سېنزورىدىكى بېسىمنى بايقاش ئۈچۈن بېسىم سېنزورى بار قان تومۇر كلاپانى بار.بېسىم سېنزورى ھېس قىلغان بېسىم خاتىرە كومپيۇتېرغا ئۇلانغان سانلىق مەلۇمات يىغىش ماشىنىسىغا قوللىنىلىدۇ.بۇ گاز ئۆيى ئىچىدىكى بېسىمنى ئۇدا نازارەت قىلالايدۇ.ئەڭ چوڭ كامېرا بېسىمىغا يەتكەندە (ئۆلچەملىك 80 mmHg ، 140 mmHg OS) ، سانلىق مەلۇمات سېتىۋېلىش ئۈسكۈنىسى C-PACE-EM سىستېمىسىغا سىگنال ئەۋەتىپ ، 2 ms لىك قوش بىسلىق بېسىملىق سىگنال ھاسىل قىلىشقا بۇيرۇلدى ، 4 V قىلىپ بېكىتىلدى.
يۈرەك بۆلەكلىرى قولغا كەلتۈرۈلۈپ ، 6 قۇدۇقتىكى مەدەنىيەت شارائىتى تۆۋەندىكىدەك ئېلىپ بېرىلدى: يىغىۋېلىنغان يۈرەكلەرنى يۆتكەش پاراخوتىدىن سوغۇق (4 سېلسىيە گرادۇس) يۈرەك قان تومۇرلىرى بار تەخسىگە يۆتكەڭ.سول يۈرەك دالانچىسى ستېرېز تىغ بىلەن ئايرىۋېتىلىپ ، 1-2 cm3 پارچىغا بۆلۈندى.بۇ توقۇلمىلار توقۇلمىلارغا توقۇلمىلارغا چاپلانغان بولۇپ ، تىرودنىڭ ئېرىتمىسى بولغان تەۋرىنىشچان مىكرو توقۇلما مۇنچىسىغا قويۇلدى ۋە ئۇدا ئوكسىگېنلانغان (3 g / L 2,3-بۇتانېدىئون مونوكسىمى (BDM) ، 140 mM NaCl (8.18 g).) ، 6 mM KCl (0.447 g) ، 10MM mM CaCl2 (1.8 مىللىمېتىر 1 M ئېرىتمىسى) ، 1 L ddH2O غىچە).تەۋرىنىشچان مىكرو ئېلېكتر 80 Hz چاستوتا 300 مىللىمېتىر قېلىنلىقتا كېسىلىدۇ ، گورىزونتال تەۋرىنىش ئامپلىتۇدىيىسى 2 مىللىمېتىر ، ئىلگىرىلەش نىسبىتى 0.03 mm / s.توقۇلما مۇنچا مۇز بىلەن قورشالغان بولۇپ ، ئېرىتمىنى سوغۇق ساقلاش ۋە تېمپېراتۇرا ° C4 قا چىققان.مىكرو بۆلەك مۇنچىسىدىن توقۇلما بۆلەكلىرىنى مۇز ئۈستىدە ئۇدا ئوكسىگېنلانغان Tyrode ئېرىتمىسى بار يوشۇرۇن مۇنچىغا يۆتكەڭ ، بىر مەدەنىيەت تەخسىسىگە يېتەرلىك بۆلەكلەر ئېرىشكۈچە.تىرانسفورموتور مەدەنىيىتى ئۈچۈن توقۇلما بۆلەكلەر 6 مىللىمېتىر كەڭلىكتىكى پولىئۇرېتان تاياقچىسىغا ئۇلىنىپ ، 6 مىللىلېتىر ئەلالاشتۇرۇلغان ئوتتۇراھال (199 ئوتتۇرا ، 1x ITS تولۇقلاش ،% 10 FBS ، 5 ​​ng / ml VEGF ، 10 ng / ml FGF- ئىشقارلىق ۋە 2X ئانتىبىئوتىكقا قارشى تۇرغۇچى).C-Pace ئارقىلىق توقۇلما بۆلەكلىرىگە ئېلېكتر غىدىقلاش (10 V ، چاستوتىسى 1.2 Hz) قوللىنىلدى.TD شارائىتىغا نىسبەتەن ، ھەر بىر ئوتتۇرا ئۆزگىرىشتە يېڭى T3 ۋە Dex 100 nM ۋە 1 mMM قوشۇلدى.ۋاسىتە كۈنىگە 3 قېتىم ئالماشتۇرۇشتىن بۇرۇن ئوكسىگېن بىلەن تويۇنغان.توقۇلما بۆلەكلىرى 37 سېلسىيە گرادۇس ۋە% 5 CO2 لىك ئىنكۇباتوردا يېتىشتۈرۈلگەن.
CTCM مەدەنىيىتى ئۈچۈن توقۇلما بۆلەكلىرى ئۆزگەرتىلگەن Tyrode نىڭ ئېرىتمىسىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان Petri تامىقىغا مەخسۇس ياسالغان 3D پرىنتېرغا قويۇلدى.بۇ ئۈسكۈنە يۈرەك قىسمىنىڭ چوڭ-كىچىكلىكىنى تىرەك ھالقىسىنىڭ% 25 ئاشۇرۇش ئۈچۈن لايىھەلەنگەن.بۇ تىرودنىڭ ئېرىتمىسىدىن ئوتتۇراھال ۋە دىئاستىول دەۋرىگە يۆتكەلگەندىن كېيىن يۈرەك بۆلەكلىرى سوزۇلماسلىق ئۈچۈن قىلىنىدۇ.گىستوئاكرىللىق يېلىم ئىشلىتىپ ، قېلىنلىقى 300 مىللىمېتىر كېلىدىغان بۆلەكلەر دىئامېتىرى 7 مىللىمېتىر كېلىدىغان تىرەك ھالقىسىغا مۇقىملاشتۇرۇلغان.توقۇلما بۆلەكلىرىنى تىرەك ھالقىسىغا ئۇلىغاندىن كېيىن ، ئارتۇق توقۇلمىلار بۆلەكلىرىنى كېسىپ ، باغلانغان توقۇلما بۆلەكلىرىنى قايتىدىن بىر ئۈسكۈنە ئۈچۈن يېتەرلىك بۆلەكلەر تەييارلانغانغا قەدەر مۇز (4 سېلسىيە گرادۇس) مۇز ئۈستىدىكى Tyrode ئېرىتمىسىنىڭ مۇنچىسىغا قويۇڭ.بارلىق ئۈسكۈنىلەرنىڭ بىر تەرەپ قىلىش ۋاقتى 2 سائەتتىن ئېشىپ كەتمەسلىكى كېرەك.ئۇلارنىڭ قوللاش ھالقىسىغا 6 توقۇلما بۆلەك باغلانغاندىن كېيىن ، CTCM ئۈسكۈنىسى قۇراشتۇرۇلدى.CTCM مەدەنىيەت ئۆيى 21 مىللىلېتىر ئالدىن ئوكسىگېنلانغان ۋاسىتە بىلەن تولدۇرۇلغان.توقۇلما بۆلەكلىرىنى مەدەنىيەت ئۆيىگە يۆتكەڭ ھەمدە تۇرۇبا بىلەن ھاۋادىكى كۆپۈكلەرنى ئەستايىدىللىق بىلەن ئېلىڭ.ئاندىن توقۇلما بۆلىكى تۆشۈككە يېتەكلىنىپ ئاستا-ئاستا جايىغا بېسىلىدۇ.ئاخىرىدا ، ئېلېكترود قالپىقىنى ئۈسكۈنىگە قويۇپ ، ئۈسكۈنىنى ئىنكۇباتورغا يۆتكەڭ.ئاندىن CTCM نى ھاۋا تۇرۇبىسى ۋە C-PACE-EM سىستېمىسىغا ئۇلاڭ.ئۆپكە ھەرىكەتلەندۈرگۈچ كۈچى ئېچىلىدۇ ، ھاۋا كلاپانى CTCM نى ئاچىدۇ.C-PACE-EM سىستېمىسى 2 ms لىك قوش يۆنىلىشلىك تېزلىنىش جەريانىدا 1.2 Hz دە 4 V يەتكۈزۈشكە تەڭشەلدى.ۋاسىتە كۈنىگە ئىككى قېتىم ، ئېلېكترود كۈندە بىر قېتىم ئالماشتۇرۇلۇپ ، ئېلېكترودتا گرافتنىڭ يىغىلىپ قېلىشىدىن ساقلىنىدۇ.زۆرۈر تېپىلغاندا ، توقۇلما بۆلەكلەرنى ئۇلارنىڭ مەدەنىيەت قۇدۇقلىرىدىن چىقىرىپ تاشلاپ ، ئۇلارنىڭ ئاستىغا چۈشۈپ قالغان ھاۋا كۆپۈكلىرىنى قوغلىۋەتكىلى بولىدۇ.MT داۋالاش شارائىتى ئۈچۈن ، T3 / Dex ھەر بىر ئوتتۇرا ئۆزگىرىش بىلەن 100 nM T3 ۋە 1 μM Dex قوشۇلغان.CTCM ئۈسكۈنىلىرى 37 سېلسىيە گرادۇس ۋە% 5 لىك CO2 ئىنكۇباتوردا يېتىشتۈرۈلگەن.
يۈرەك كېسىلىنىڭ سوزۇلغان مۇساپىسىگە ئېرىشىش ئۈچۈن ، ئالاھىدە كامېرا سىستېمىسى بارلىققا كەلدى.SLR كامېراسى (Canon Rebel T7i ، Canon ، توكيو ، ياپونىيە) Navitar Zoom 7000 18-108mm ماكرو لىنزا (Navitar, San Francisco, CA) ئىشلىتىلگەن.كۆرۈنۈشنى ئوتتۇراھال يېڭى ۋاسىتە بىلەن ئالماشتۇرغاندىن كېيىن ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا ئېلىپ بېرىلدى.كامېرا 51 ° بۇلۇڭلۇق ئورۇنغا قويۇلغان بولۇپ ، سىن سېكۇنتتا 30 رامكا ئىچىدە خاتىرىلەنگەن.ئالدى بىلەن ، ئوچۇق كود يۇمشاق دېتالى (MUSCLEMOTION43) Image-J ئارقىلىق يۈرەك كېسىلىنىڭ ھەرىكىتىنى مىقدارلاشتۇردى.بۇ ماسكا MATLAB (MathWorks, Natick, MA, ئامېرىكا) ئارقىلىق ياسالغان بولۇپ ، شاۋقۇندىن ساقلىنىش ئۈچۈن يۈرەك كېسىلىنى ئۇرغان قىزىقىدىغان رايونلارنى ئېنىقلىغان.قولدا بۆلۈنگەن ماسكا بارلىق رەسىملەرگە رامكا تەرتىپىدە قوللىنىلىدۇ ، ئاندىن MUSCLEMOTION قىستۇرمىسىغا يەتكۈزۈلىدۇ.مۇسكۇل ھەرىكىتى ھەر بىر رامكىدىكى پېكسىلنىڭ ئوتتۇرىچە كۈچلۈكلۈك دەرىجىسىنى ئىشلىتىپ ، ئۇنىڭ پايدىلىنىش رامكىسىغا سېلىشتۇرغاندا ئۇنىڭ ھەرىكىتىنى مىقدارلاشتۇرىدۇ.سانلىق مەلۇماتلار خاتىرىلەندى ، سۈزۈلدى ۋە يۈرەك دەۋرىيلىكىدىكى توقۇلمىلارنىڭ سوزۇلۇشىنى باھالاشقا ئىشلىتىلدى.خاتىرىلەنگەن سىن بىرىنچى دەرىجىلىك نۆل باسقۇچلۇق رەقەملىك سۈزگۈچ ئارقىلىق بىر تەرەپ قىلىنغان.توقۇلمىلارنىڭ كېڭىيىشىنى (چوققا چوققىدىن چوققا) مىقدارلاشتۇرۇش ئۈچۈن ، خاتىرىلەنگەن سىگنالدىكى چوققا بىلەن ئوقۇرنى پەرقلەندۈرۈش ئۈچۈن چوققا چوققىدىن يۇقىرى پەللىگە چىقىش ئانالىزى ئېلىپ بېرىلدى.ئۇنىڭدىن باشقا ، سىگنالنىڭ يۆتكىلىشىنى يوقىتىش ئۈچۈن 6-نومۇرلۇق كۆپ قۇتۇپلۇق ئىشلىتىش ئارقىلىق توسۇش ئېلىپ بېرىلىدۇ.پروگرامما كودى MATLAB دا ئىشلەنگەن بولۇپ ، يەر شارى توقۇلمىلىرىنىڭ ھەرىكىتى ، دەۋرىيلىك ۋاقتى ، ئارام ئېلىش ۋاقتى ۋە تارىيىش ۋاقتى (قوشۇمچە پروگرامما كودى 44).
جىددىي تەھلىل قىلىش ئۈچۈن ، مېخانىكىلىق سوزۇلۇشنى باھالاش ئۈچۈن ياسالغان ئوخشاش سىنلارنى ئىشلىتىپ ، ئالدى بىلەن MUSCLEMOTION يۇمشاق دېتالىغا ئاساسەن ھەرىكەت چوققىسى (ئەڭ يۇقىرى (ئۈستى) ۋە ئەڭ تۆۋەن (تۆۋەن) ھەرىكەت نۇقتىسى) غا ۋەكىللىك قىلىدىغان ئىككى رەسىمنى ئىزلىدۇق.ئاندىن بىز توقۇلما رايونلارنى ئايرىپ ، بۆلۈنگەن توقۇلمىلارغا سايە ھېسابلاش ئۇسۇلى قوللاندۇق (قوشۇمچە 2a رەسىم).بۆلۈنگەن توقۇلما ئاندىن ئون يەر ئاستىغا بۆلۈنگەن بولۇپ ، ھەر بىر يۈزىدىكى بېسىم تۆۋەندىكى تەڭلىمىنى ئىشلىتىپ ھېسابلانغان: Strain = (Sup-Sdown) / Sdown ، بۇ يەردە Sup ۋە Sdown شەكىلنىڭ رەختنىڭ ئۈستى ۋە ئاستى سايىسىدىن ئايرىم-ئايرىم ھالدا (قوشۇمچە رەسىم .2b).
يۈرەك بۆلەكلىرى% 4 لىك پارافورمالدېگىدتا 48 سائەت ئوڭشالدى.مۇقىم توقۇلمىلار% 10 ۋە% 20 لىك ساخاروزادا 1 سائەت سۇسىزلانغان ، ئاندىن بىر كېچە% 30 لىك ساخاروزا.بۇ بۆلەكلەر ئاندىن ئەڭ ياخشى كېسىش تېمپېراتۇرىسى بىرىكمىسى (OCT بىرىكمىسى) گە قىستۇرۇلۇپ ، ئىزوپېنتان / قۇرۇق مۇز مۇنچىسىدا ئاستا-ئاستا مۇزلاپ كەتتى.ئايرىلغۇچە OCT قىستۇرما بۆلەكلىرىنى -80 ° C قا ساقلاڭ.تام تەسۋىر قېلىنلىقى 8 مىللىمېتىر كېلىدىغان بۆلەكلەر سۈپىتىدە تەييارلاندى.
OCT نى يۈرەك بۆلەكلىرىدىن چىقىرىۋېتىش ئۈچۈن ، تام تەسۋىرنى 95 سېلسىيە گرادۇسلۇق ئىسسىقلىق بىلەن 5 مىنۇت قىزىتىڭ.ھەر بىر تام تەسۋىرگە 1 مىللىمېتىر PBS قوشۇڭ ۋە ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 30 مىنۇت سىڭدۈرۈڭ ، ئاندىن ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا PBS دا% 0.1 لىك Triton-X نى 15 مىنۇت تۇرغۇزۇپ بۆلەكلەرگە سىڭىپ كىرىڭ.ئالاھىدە ئانتىتېلانىڭ ئەۋرىشكە باغلىنىشىنىڭ ئالدىنى ئېلىش ئۈچۈن ، تام تەسۋىرگە% 3 لىك BSA ئېرىتمىسىدىن 1 مىللىلېتىر قوشۇپ ، ئۆي تېمپېراتۇرىسىدا 1 سائەت سىڭدۈرۈڭ.ئاندىن BSA ئېلىۋېتىلدى ۋە تام تەسۋىر PBS بىلەن يۇيۇلدى.ھەر بىر ئەۋرىشكىنى قەلەم بىلەن بەلگە قىلىڭ.دەسلەپكى ئانتىتېلا (% 1 BSA دا 1: 200 سۇيۇلدى) (كوننېكسىن 43 (Abcam; # AB11370) ، NFATC4 (Abcam; # AB99431) ۋە تروپونىن- T (تېرمو ئىلمىي ؛ 594 (تېرمو ئىلمىي;
WGA-Alexa Fluor 555 (تېرمو ئىلمىيئاندىن تام تەسۋىر PBS بىلەن يۇيۇلدى ، ھەر بىر تام تەسۋىرگە سۇدان قارا قوشۇلدى ۋە 30 مىنۇت سىڭدۈرۈلدى.ئاندىن تام تەسۋىر PBS بىلەن يۇيۇلدى ۋە ۋېتاكېلد قىستۇرما ۋاسىتە قوشۇلدى.تام تەسۋىر 40x چوڭايتىشتا Keyence مىكروسكوپتا تەسۋىرلەنگەن.
OCT يۇقىرىدا بايان قىلىنغاندەك ئەۋرىشكىلەردىن چىقىرىۋېتىلدى.OCT نى ئېلىۋەتكەندىن كېيىن ، تام تەسۋىرنى بىر كېچىدىلا Bouin نىڭ ئېرىتمىسىگە چىلاپ قويۇڭ.ئاندىن تام تەسۋىرنى ئارىلاشتۇرۇلغان سۇ بىلەن 1 سائەت چايقىدى ، ئاندىن بىبرىچ ئالوي كىسلاتا فۇچىن ئېرىتمىسىگە 10 مىنۇت قويدى.ئاندىن تام تەسۋىرنى دىرىللانغان سۇ بىلەن يۇيۇپ ،% 5 فوسفولىمبدېن /% 5 فوسفاتوڭتىك كىسلاتا ئېرىتمىسىگە 10 مىنۇت تۇرغۇزدى.چايقاشتىن باشقا ، تام تەسۋىرنى بىۋاسىتە ئانىلىن كۆك ئېرىتمىسىگە 15 مىنۇت يۆتكەڭ.ئاندىن تام تەسۋىرنى دىرىللانغان سۇ بىلەن يۇيۇپ ،% 1 لىك كىسلاتا كىسلاتا ئېرىتمىسىگە 2 مىنۇت تۇرغۇزدى.تام تەسۋىر 200 N ئېتانولدا قۇرۇتىلىپ ، خىلىنغا يۆتكەلدى.داغلانغان تام تەسۋىر 10x ئوبيېكتىپ بولغان Keyence مىكروسكوپ ئارقىلىق تەسۋىرلەنگەن.Fibrosis رايونىنىڭ نىسبىتى Keyence Analyzer يۇمشاق دېتالى ئارقىلىق مىقدارلاشقان.
CyQUANT ™ MTT Cell Viability Assay (Invitrogen, Carlsbad, CA) ، مۇندەرىجە نومۇرى V13154 ، ئىشلەپچىقارغۇچىلارنىڭ كېلىشىمنامىسىگە ئاساسەن بەزى ئۆزگەرتىشلەر.بولۇپمۇ MTT تەھلىلى جەريانىدا دىئامېتىرى 6 مىللىمېتىر كېلىدىغان ئوپېراتسىيە مۇشت ئىشلىتىلگەن.توقۇلمىلار ئىشلەپچىقارغۇچىلارنىڭ كېلىشىمنامىسىگە ئاساسەن MTT تارماق ئېلېمېنتى بار 12 قۇدۇق تاختىسىنىڭ قۇدۇقلىرىغا ئايرىم-ئايرىم ئورالغان.بۇ بۆلەكلەر 37 سېلسىيە گرادۇسلۇق ھاۋارايىدا 3 سائەت سىڭدۈرۈلگەن بولۇپ ، تىرىك توقۇلمىلار MTT تارماق مېتابولىزىمىدا بىنەپشە رەڭلىك فورمازان بىرىكمىسى ھاسىل قىلغان.MTT ئېرىتمىسىنى 1 مىللىمېتىر DMSO بىلەن ئالماشتۇرۇپ ، 37 سېلسىيە گرادۇستا 15 مىنۇت تۇرغۇزۇپ ، يۈرەك بۆلەكلىرىدىن بىنەپشە رەڭلىك فورمازان چىقىرىڭ.ئەۋرىشكەلەر DMSO دا 96 قۇدۇق سۈزۈك ئاستى تاختايدا سۇيۇقلاندۇرۇلدى ، Cytation تاختا ئوقۇغۇچ (BioTek) ئارقىلىق بىنەپشە رەڭنىڭ كۈچلۈكلىكى 570 nm.يۈرەكنىڭ ھەر بىر يېرىنىڭ ئېغىرلىقى بىلەن ئوقۇش نورماللاشتى.
يۈرەك كېسىش مېدىياسى ئىلگىرى تەسۋىرلەنگەندەك گلۇكوزىدىن پايدىلىنىش ئۈچۈن 1 μCi / ml [5-3H]-گلۇكوزا (موراۋېك بىئو-خىمىيىلىك دورا ، برا ، ئامېرىكا ، CA) بار مېدىيا بىلەن ئالماشتۇرۇلدى.4 سائەت ئىنكۇبلانغاندىن كېيىن ، 100 µl 0.2 N HCl بولغان 100 µl بولغان ئوچۇق مىكرو ئېلېمېنت نەيچىسىگە 100 µl ئوتتۇراھال قوشۇڭ.ئاندىن بۇ نەيچىدە 500 مىللىمېتىر dH2O بولغان سىلىندىر نەيچىسىگە قويۇلۇپ ، 37 سېلسىيە گرادۇستا 72 سائەت پارغا ئايلىنىدۇ.ئاندىن مىكرو ئېلېمېنت نەيچىسىنى مىكروبسىزلاندۇرۇش نەيچىسىدىن ئېلىڭ ھەمدە 10 مىللىلېتىر پۈركۈش سۇيۇقلۇقى قوشۇڭ.Scintillation ھېسابلاش Tri-Carb 2900TR سۇيۇق پۈركۈش ئانالىزچىسى (Packard Bioscience Company, Meriden, CT, ئامېرىكا) ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلدى.ئاندىن گلۇكوزىدىن پايدىلىنىش [5-3H] - گلۇكوزانىڭ كونكرېت پائالىيىتى ، تەڭپۇڭسىزلىق ۋە ئارقا كۆرۈنۈشنىڭ تولۇق بولماسلىقى ، [5-3H] نىڭ بەلگىسى يوق گلۇكوزىنىڭ سۇيۇلۇشى ۋە پۈركۈشتىن ساقلىنىش ئۈنۈمىنى ئويلاشقان.يۈرەك بۆلەكلىرىنىڭ سانلىق مەلۇماتلىرى نورماللىشىدۇ.
Trizol دىكى توقۇلمىلارنىڭ بىرىكىشىدىن كېيىن ، RNA ئىشلەپچىقارغۇچىنىڭ كېلىشىمنامىسىگە ئاساسەن Qiagen miRNeasy Micro Kit # 210874 ئارقىلىق يۈرەك بۆلەكلىرىدىن ئايرىۋېتىلدى.RNAsec كۈتۈپخانىسىنى تەييارلاش ، تەرتىپلەش ۋە سانلىق مەلۇمات ئانالىزى تۆۋەندىكىدەك ئېلىپ بېرىلدى:
ھەر بىر ئەۋرىشكە 1 mg RNA RNA كۈتۈپخانىسىنى تەييارلاش ئۈچۈن دەسلەپكى ماتېرىيال سۈپىتىدە ئىشلىتىلگەن.تەرتىپلىك كۈتۈپخانىلار ئىشلەپچىقارغۇچىنىڭ تەۋسىيەسى بىلەن Illumina (ئامېرىكا NEB ، ئامېرىكا) NEBNext UltraTM RNA كۈتۈپخانىسىنى تەييارلاش زاپچىسى ئارقىلىق بارلىققا كەلگەن بولۇپ ، ھەر بىر ئەۋرىشكىنىڭ خاسلىق تەرتىپىگە كۆرسەتكۈچ كودى قوشۇلغان.قىسقىچە قىلىپ ئېيتقاندا ، mRNA poly-T oligonucleotides بىلەن باغلانغان ماگنىتلىق مونچاق ئارقىلىق ئومۇمىي RNA دىن ساپلاشتۇرۇلدى.پارچىلىنىش NEBNext First Strand Synthesis Reaction Buffer (5X) دىكى يۇقىرى تېمپېراتۇرىدا تەڭداش كاتەكچە ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلىدۇ.بىرىنچى تال cDNA ئىختىيارى ئالتە تەرەپلىك پىرىس ۋە M-MuLV تەتۈر كۆچۈرۈلگەن (RNase H-) ئارقىلىق بىرىكتۈرۈلگەن.ئىككىنچى تال cDNA ئاندىن DNA پولىمېرازا I ۋە RNase H. ئارقىلىق بىرىكتۈرۈلۈپ ، ئېشىپ قالغان ئارتۇقچە ماددىلار exonuclease / polymerase پائالىيىتى ئارقىلىق تۇتۇق ئۇچىغا ئايلىنىدۇ.DNA پارچىسىنىڭ 3 ′ ئاخىرىغا ماسلاشتۇرۇلغاندىن كېيىن ، NEBNext Adapter ئۇنىڭغا چاچ پاسونى قۇرۇلمىسى ماسلاشتۇرۇلغان بولۇپ ، ئۇنى بىرىكتۈرۈشكە تەييارلىق قىلىدۇ.ياقتۇرىدىغان ئۇزۇنلۇقى 150-200 bp بولغان cDNA پارچىلىرىنى تاللاش ئۈچۈن.كۈتۈپخانىنىڭ پارچىلىرى AMPure XP سىستېمىسى ئارقىلىق تازىلاندى (Beckman Coulter, Beverly, ئامېرىكا).ئاندىن ، چوڭلۇقتا تاللانغان cDNA ماسلاشتۇرغۇچ بىلەن 3 مىللىمېتىرلىق USER ئېنزىم (ئامېرىكا NEB ، ئامېرىكا) 37 سېلسىيە گرادۇستا 15 مىنۇت ، ئاندىن PCR دىن ئىلگىرى 95 سېلسىيە گرادۇستا 5 مىنۇت ئىشلىتىلگەن.PCR كېيىن Phusion High-Fidelity DNA پولىمېراسى ، ئۇنىۋېرسال PCR كۆرسەتكۈچلىرى ۋە كۆرسەتكۈچ (X) كۆرسەتكۈچلىرى ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلدى.ئاخىرىدا PCR مەھسۇلاتلىرى ساپلاشتۇرۇلدى (AMPure XP سىستېمىسى) ۋە Agilent Bioanalyzer 2100 سىستېمىسىدا كۇتۇپخانا سۈپىتى باھالاندى.ئاندىن CDNA كۈتۈپخانىسى Novaseq تەرتىپلىگۈچ ئارقىلىق تەرتىپلەندى.Illumina دىكى خام رەسىم ھۆججەتلىرى CASAVA Base Calling ئارقىلىق خام ئوقۇشقا ئۆزگەرتىلدى.خام ماتېرىيال FASTQ (fq) فورمات ھۆججىتىدە ساقلىنىدۇ ، ئۇنىڭدا ئوقۇش تەرتىپى ۋە ماس ئاساسى سۈپەتلەر بار.Sscrofa11.1 پايدىلىنىش گېنلىرىغا سۈزۈلگەن تەرتىپ بويىچە ئوقۇش ئۈچۈن HISAT2 نى تاللاڭ.ئومۇمەن قىلىپ ئېيتقاندا ، HISAT2 ھەر قانداق چوڭلۇقتىكى گېنلارنى قوللايدۇ ، بۇنىڭ ئىچىدە 4 مىلياردتىن چوڭ گېنلار بار ، سۈكۈتتىكى قىممەت كۆپىنچە پارامېتىرلارغا تەڭشەلدى.RNA Seq سانلىق مەلۇماتىدىن ئوقۇلىدىغان قىستۇرمىلارنى HISAT2 ئارقىلىق ئۈنۈملۈك ماسلاشتۇرغىلى بولىدۇ ، ھازىرقى ئەڭ تېز سىستېما ، باشقا ئۇسۇللارغا ئوخشاش ياكى تېخىمۇ توغرا.
خاتىرىلەرنىڭ كۆپلۈكى گېننىڭ ئىپادىلىنىش دەرىجىسىنى بىۋاسىتە ئەكىس ئەتتۈرىدۇ.گېننىڭ ئىپادىلىنىش دەرىجىسى گېن ياكى تاشقى كېسەللىكلەر بىلەن مۇناسىۋەتلىك خاتىرىلەرنىڭ كۆپلۈكى (تەرتىپ سانى) تەرىپىدىن باھالىنىدۇ.ئوقۇش سانى گېننىڭ ئىپادىلىنىش دەرىجىسى ، گېن ئۇزۇنلۇقى ۋە تەرتىپ چوڭقۇرلۇقىغا ماس كېلىدۇ.FPKM (ھەر بىر جۈپ ئاساسى جۈپ جۈپلەشتۈرۈلگەن ھەر بىر جۈپ جۈپ خەتنىڭ پارچىلىرى) ھېسابلىنىدۇ ھەمدە پەرقلىق ئىپادىلەشنىڭ P قىممىتى DESeq2 بولىقى ئارقىلىق بېكىتىلدى.ئاندىن بىز ئىچىگە ئورۇنلاشتۇرۇلغان R فۇنكىسىيەسى «p.adjust» نى ئاساس قىلىپ Benjamini-Hochberg ئۇسۇلى 9 ئارقىلىق ھەر P قىممىتىدىكى يالغان بايقاش نىسبىتىنى (FDR) ھېسابلىدۇق.
يۈرەك بۆلەكلىرىدىن ئايرىۋېتىلگەن RNA تېرمودىن كەلگەن SuperScript IV Vilo Master ئارىلاشمىسى ئارقىلىق 200 ng / μl قويۇقلۇقىدا cDNA غا ئۆزگەرتىلدى (تېرمو ، مۈشۈك 11756050).مىقدارلاشتۇرۇلغان RT-PCR قوللىنىشچان بىئولوگىيىلىك سىستېما Endura تەخسىسى Microamp 384 قۇدۇق سۈزۈك رېئاكسىيە تاختىسى (تېرمو ، مۈشۈك.رېئاكسىيە ئارىلاشمىسى 5 µl Taqman تېز ئىلغار ئۇستاز ئارىلاشمىسى (تېرمو ، مۈشۈك # 4444557) ، 0.5 µl تاقمان پىرىمېر ۋە ھەر قۇدۇققا 3.5 µl H2O ئارىلاشتۇرۇلغان.ئۆلچەملىك qPCR دەۋرىيلىكى ئىجرا قىلىندى ۋە CT قىممىتى قوللىنىشچان بىئولوگىيىلىك سىستېما Quantstudio 5 ھەقىقىي PCR قورالى (384 قۇدۇق مودۇلى ؛ مەھسۇلات # A28135) ئارقىلىق ئۆلچەم قىلىندى.تاقمان پىرىمېرلىرى تېرمو (GAPDH (Ss03375629_u1) ، PARP12 (Ss06908795_m1) ، PKDCC (Ss06903874_m1) ، CYGB (Ss06900188_m1) ، RGL1 (Ss06868890_M1) 3383805_u1.
NT-ProBNP نىڭ تاراتقۇلارنىڭ تارقىتىلىشى ئىشلەپچىقارغۇچىلارنىڭ كېلىشىمنامىسىگە ئاساسەن NT-ProBNP يۈرۈشلۈك زاپچاسلىرى (چوشقا) (مۈشۈك. MBS2086979 ، MyBioSource) ئارقىلىق باھالاندى.قىسقىچە قىلىپ ئېيتقاندا ، ھەر بىر قۇدۇققا كۆپەيتىلگەن نۇسخىدا ھەر بىر ئەۋرىشكە ۋە ئۆلچەمدىن 250 µl قوشۇلدى.ئەۋرىشكە قوشقاندىن كېيىن ، ھەر بىر قۇدۇققا 50 µl Assay Reagent A نى قوشۇڭ.تەخسىنى ئاستا سىلكىپ پېچەتلەش بىلەن پېچەتلەش.ئاندىن بۇ تاختا كومپيۇتېر 37 سېلسىيە گرادۇستا 1 سائەت سىلىندى.ئاندىن ئېرىتمىنى ئارزۇ قىلىپ ، قۇدۇقنى 4 قېتىم 350 µl 1X يۇيۇش ئېرىتمىسى بىلەن يۇيۇڭ ، ھەر قېتىم يۇيۇش ئېرىتمىسىنى 1-2 مىنۇت سىڭدۈرۈڭ.ئاندىن ھەر قۇدۇققا 100 µl Assay Reagent B نى قوشۇڭ ھەمدە تەخسە پېچەتلەش بىلەن پېچەتلەڭ.بۇ تاختا كومپيۇتېر ئاستا-ئاستا سىلكىنىپ ، ° C 37 قا 30 مىنۇت سىلىندى.ئېرىتمىنى ئارزۇ قىلىپ ، قۇدۇقنى 5 قېتىم يۇيۇپ ، 350 µl 1X يۇيۇش ئېرىتمىسى بىلەن يۇيۇڭ.ھەر بىر قۇدۇققا 90 µl سۇ ئاستى ئېرىتمىسى قوشۇڭ ۋە تەخسىنى پېچەتلەڭ.تەخسىنى 37 سېلسىيە گرادۇسقىچە 10-20 مىنۇت تۇرغۇزۇڭ.ھەر بىر قۇدۇققا 50 µl Stop Solution نى قوشۇڭ.بۇ تەخسە 450 nm قىلىپ بېكىتىلگەن Cytation (BioTek) تەخسە ئوقۇغۇچ ئارقىلىق دەرھال ئۆلچەم قىلىنغان.
گۇرۇپپا ئانالىزى ئېلىپ بېرىلىپ ،% 80 توك بىلەن تەمىنلەپ ، پارامېتىردىكى% 10 مۇتلەق ئۆزگىرىشنى بايقىغىلى بولىدۇ. گۇرۇپپا ئانالىزى ئېلىپ بېرىلىپ ،% 80 توك بىلەن تەمىنلەپ ، پارامېتىردىكى% 10 مۇتلەق ئۆزگىرىشنى بايقىغىلى بولىدۇ. ئاناس موسنوستي بيل выполнен для выбора размеров группа, кот че обеспечат> 80% موشنости для обнаружения 10% абсолтного изменения Параметра с 5% частотой чибобок чипа I. گۇرۇپپا ئانالىزى% 5 لىك I خاتالىق نىسبىتى بىلەن% 10 مۇتلەق پارامېتىر ئۆزگىرىشىنى بايقاش ئۈچۈن% 80 توك بىلەن تەمىنلەيدىغان گۇرۇپپا رازمېرىنى تاللاش ئۈچۈن ئېلىپ بېرىلدى.进行 功效 分析 以 选择 提供> 80 ％ 功效 以 检测 中 中 10 ％ 绝对 变化 和 5 ％ I 型 错误 率 的 组 大小。进行 功效 分析 以 选择 提供> 80 ％ 功效 以 检测 中 中 10 ％ 绝对 变化 和 5 ％ I 型 错误 率 的 组 大小。 Был проведен ما мощности для выбора размера группы, котorый обеспечил бы> 80% موشنости для обнаружения 10% абсолтного изменения Параметров ۋە 5% частоты зибокока I. گۇرۇپپا ئانالىزى ئېلىپ بېرىلىپ ،% 80 مۇتلەق پارامېتىر ئۆزگىرىش ۋە% 5 I خاتالىق نىسبىتىنى بايقاش ئۈچۈن% 80 توك بىلەن تەمىنلەيدىغان گۇرۇپپا چوڭلۇقى تاللاندى.توقۇلما بۆلەكلىرى سىناقتىن ئىلگىرى ئىختىيارىي تاللانغان.بارلىق ئانالىزلار شارائىت قارىغۇ بولۇپ ، بارلىق سانلىق مەلۇماتلار ئانالىز قىلىنغاندىن كېيىن ئاندىن ئەۋرىشكە يېشىپ بېرىلدى.GraphPad Prism يۇمشاق دېتالى (San Diego, CA) بارلىق ستاتىستىكىلىق ئانالىزلارنى قىلىشقا ئىشلىتىلگەن. بارلىق ستاتىستىكىلارغا نىسبەتەن ، p- قىممىتى <0.05 قىممىتىدە مۇھىم دەپ قارالدى. بارلىق ستاتىستىكىلارغا نىسبەتەن ، p- قىممىتى <0.05 قىممىتىدە مۇھىم دەپ قارالدى. Для всей стати пи-значения считались значимыми при значениях <0,05. بارلىق ستاتىستىكىلارغا نىسبەتەن ، p- قىممىتى <0.05 قىممىتىدە مۇھىم دەپ قارالدى.对于 所有 统计 数据 ， p 值 在 0.05 <0.05 时 被 认为 是 显 着。。对于 所有 统计 数据 ， p 值 在 0.05 <0.05 时 被 认为 是 显 着。。 Для всей стати пи-значения считались значимыми при значениях <0,05. بارلىق ستاتىستىكىلارغا نىسبەتەن ، p- قىممىتى <0.05 قىممىتىدە مۇھىم دەپ قارالدى.ئىككى قۇيرۇقلۇق ئوقۇغۇچىلارنىڭ T سىنىقى سانلىق مەلۇماتتا ئاران 2 سېلىشتۇرۇش ئېلىپ بېرىلدى.بىر گۇرۇپپا ياكى قوش يۆنىلىشلىك ANOVA كۆپ گۇرۇپپىلارنىڭ ئەھمىيىتىنى ئېنىقلاشقا ئىشلىتىلگەن.پوچتىدىن مەخسۇس سىناق ئېلىپ بارغاندا ، تۇكېينىڭ تۈزىتىشى كۆپ خىل سېلىشتۇرۇش ئۈچۈن قوللىنىلدى.RNAsec سانلىق مەلۇماتلىرى ئۇسۇل بۆلىكىدە تەسۋىرلەنگەندەك FDR ۋە p.adjust نى ھېسابلىغاندا ئالاھىدە ستاتىستىكىلىق ئويلىنىشقا ئىگە.
تەتقىقات لايىھىسىگە مۇناسىۋەتلىك تېخىمۇ كۆپ ئۇچۇرلارنى بۇ ماقالىگە باغلانغان تەبىئەت تەتقىقات دوكلاتىنىڭ قىسقىچە مەزمۇنىدىن كۆرۈڭ.