غذائی اجزاء کا حصول اور تقسیم کیڑوں کے چارے اور زندگی کی تاریخ کی خصوصیات کو یکجا کرتی ہے۔ زندگی کے مختلف مراحل میں مخصوص غذائی اجزاء کی کمی کو پورا کرنے کے لیے، کیڑے اضافی خوراک کے ذریعے یہ غذائی اجزاء حاصل کر سکتے ہیں، مثال کے طور پر، اس عمل میں فقاری رطوبتوں کو کھانا کھلانے سے جسے puddles کہا جاتا ہے۔ میٹابولزم اور پنروتپادن دونوں کے لیے غذائی اجزاء۔ اس مطالعے کا مقصد یہ اندازہ لگانا تھا کہ آیا ایک۔غذائیت کے حصول کے لیے گائے کے پیشاب پر arabiensis ایجی ٹیشن زندگی کی تاریخ کی خصوصیات کو بہتر بناتا ہے۔
اس بات کو یقینی بنائیں کہ یہ محفوظ ہے۔ arabiensis تازہ، 24 گھنٹے، 72 گھنٹے، اور 168 گھنٹے پرانے گائے کے پیشاب کی بدبو کی طرف راغب ہوئی تھی، اور میزبان کی تلاش کرنے والی اور خون پلائی جانے والی (48 گھنٹے بعد خون کھانے والی) خواتین کو Y-tube olfactometer میں ماپا گیا تھا، اور حاملہ خواتین کے لیے الیکٹرو کیمیکل ٹیسٹ کیے گئے تھے۔ اس کے بعد تجزیے کا استعمال گائے کے پیشاب میں بائیو ایکٹیو مرکبات کی شناخت کے لیے کیا گیا جس کی عمر چاروں کلاسوں میں کی گئی۔ Y-tube اور فیلڈ ٹرائلز میں بائیو ایکٹیو مرکبات کے مصنوعی مرکبات کا جائزہ لیا گیا۔ گائے کے پیشاب اور اس کے مرکزی نائٹروجن پر مشتمل مرکب یوریا کی تحقیقات کے لیے ممکنہ اضافی خوراک کے طور پر ملیریا ویکٹر کی خصوصیات کی پیمائش کرنے کے لیے خواتین کی حیاتیاتی خصوصیات کی پیمائش کی گئی۔ اور گائے کے پیشاب اور جذب شدہ یوریا کی مقدار کا اندازہ لگایا گیا۔ کھانا کھلانے کے بعد، خواتین کی بقا، ٹیچرڈ فلائٹ، اور تولید کا اندازہ لگایا گیا۔
میزبان کے خون اور غذائیت کی تلاش کریں۔ لیبارٹری اور فیلڈ اسٹڈیز میں، عربوں کو تازہ اور بوڑھے گائے کے پیشاب کی قدرتی اور مصنوعی خوشبو کی طرف راغب کیا گیا تھا۔ حاملہ خواتین انڈوں کی جگہوں پر گائے کے پیشاب کے ردعمل سے لاتعلق تھیں۔ میزبان کی تلاش کرنے والی اور خون چوسنے والی خواتین ان تمام وسائل کو فعال طور پر جذب کرتی ہیں اور ان تمام وسائل کو تجارت کے مطابق جذب کرتی ہیں۔ پرواز، بقا، یا پنروتپادن کے لیے جسمانی حالت کا ایک فنکشن۔
زندگی کی تاریخ کی بہتر خصوصیات کے لیے گائے کے پیشاب کا حصول اور تقسیم۔ گائے کے پیشاب کی اضافی خوراک روزانہ کی بقا اور ویکٹر کی کثافت میں اضافہ کرکے اور بالواسطہ طور پر پرواز کی سرگرمی کو تبدیل کرکے ویکٹر کی صلاحیت کو متاثر کرتی ہے اور اس لیے مستقبل کے ماڈلز میں اس پر غور کیا جانا چاہیے۔
غذائی اجزاء کا حصول اور تقسیم کیڑوں کے چارے اور زندگی کی تاریخ کی خصوصیات کو مربوط کرتی ہے [1,2,3]۔ کیڑے خوراک کی دستیابی اور غذائیت کی ضروریات کی بنیاد پر خوراک کا انتخاب اور حصول اور معاوضہ خوراک انجام دینے کے قابل ہوتے ہیں۔ مخصوص غذائی اجزاء کی کمی کو پورا کرنے کے لیے، کیڑے ان غذائی اجزاء کو اضافی خوراک کے ذریعے حاصل کر سکتے ہیں، جیسے کیچڑ، مختلف اخراج اور ریڑھ کی ہڈیوں کے رطوبتوں، اور مردار، ایک عمل جسے پڈلز کہتے ہیں اور اس قسم کے وسائل کو کھانا کھلانا صحت اور دیگر زندگی کی تاریخ کی خصوصیات پر اہم اثرات مرتب کر سکتا ہے [2, 4, 5, 6],7] ملیریا مچھر Anopheles gambiae sensu lato (sl) ایک 'غذائیت کا شکار' بالغ کے طور پر ابھرتا ہے [8]، اس لیے پانی پلانا اس کی زندگی میں ایک اہم کردار ادا کر سکتا ہے لیکن تاریخ کے اس رویے کے استعمال کا مطلب یہ ہے کہ اس کی خصوصیات میں اضافہ ہوا ہے۔ اس اہم گاڑی میں غذائی اجزاء کی مقدار توجہ کی ضمانت دیتی ہے کیونکہ اس کے وبائی امراض کے اہم نتائج ہو سکتے ہیں۔
بالغ مادہ انوفیلس مچھروں میں نائٹروجن کی مقدار لاروا مرحلے سے کم کیلوریز کے ذخائر اور خون کے کھانے کے غیر موثر استعمال کی وجہ سے محدود ہوتی ہے [9]۔ Female Ann.gambiae sl عام طور پر اضافی خون کے کھانے سے اس کی تلافی کرتی ہے [10، 11 سے زیادہ لوگوں کو بیماری کا خطرہ لاحق ہوتا ہے] شکار کا خطرہ۔ متبادل کے طور پر، مچھر نائٹروجن مرکبات حاصل کرنے کے لیے کشیرکا کے اخراج کی اضافی خوراک کا استعمال کر سکتے ہیں جو موافقت اور پرواز کی چال کو بڑھاتے ہیں، جیسا کہ دوسرے کیڑوں سے ظاہر ہوتا ہے [2]۔ اور عمر رسیدہ گائے کا پیشاب [12,13,14]، دلچسپ ہے۔ Anopheles arabinis اپنی میزبان ترجیحات میں موقع پرست ہے اور اسے مویشیوں کے ساتھ ملانے اور کھانا کھلانے کے لیے جانا جاتا ہے۔ گائے کا پیشاب نائٹروجن مرکبات سے بھرپور ایک ایسا وسیلہ ہے، جس میں یوریا کی مقدار 50-95% ہے جو کہ کل 50 سے 95 فیصد کو یورینین میں ہوتی ہے۔ عمروں میں، مائکروجنزم ان وسائل کو 24 گھنٹوں کے اندر نائٹروجن مرکبات کی پیچیدگی کو کم کرنے کے لیے استعمال کرتے ہیں [15]۔ امونیا میں تیزی سے اضافے کے ساتھ، نامیاتی نائٹروجن میں کمی کے ساتھ، الکالوفیلک مائکروجنزم (جن میں سے اکثر مچھروں کے لیے زہریلے مرکبات پیدا کرتے ہیں) جو کہ مادہ کو اپنی طرف متوجہ کر سکتے ہیں، 5۔ 24 گھنٹے یا اس سے کم عمر میں [13، 14]۔
اس تحقیق میں میزبان اور خون سے پلائے جانے والے Ans کی تلاش کی گئی۔ اس کے پہلے گوناڈوٹروپن سائیکل کے دوران، arabiensis کا اندازہ نائٹروجنی مرکبات کے حصول کے لیے کیا گیا، بشمول یوریا، پیشاب کی آمیزش کے ذریعے۔ اس کے بعد، تجربات کا ایک سلسلہ اس بات کا جائزہ لینے کے لیے کیا گیا کہ کس طرح مادہ مچھروں کے لیے یہ مادہ مچھروں کے دوبارہ پیدا ہونے کی صلاحیت کو بہتر بناتا ہے۔ بنیادی طور پر، تازہ اور بوڑھے گائے کے پیشاب کی بدبو کا اندازہ اس بات کا تعین کرنے کے لیے کیا گیا کہ آیا یہ میزبان اور خون سے پلائے جانے والے An کے لیے قابل اعتماد اشارے فراہم کرتے ہیں۔ اس ممکنہ غذائیت کے وسائل کی تلاش میں، arabiensis نے مشاہدہ شدہ امتیازی کشش کے پیچھے کیمیائی ارتباط دریافت کیا۔ فیلڈ حالات کے تحت استعمال کیا جاتا ہے، لیبارٹری کے حالات کے تحت حاصل کردہ نتائج کو بڑھانا اور مختلف جسمانی حالتوں پر بوائین پیشاب کی بدبو کے اثر کو ظاہر کرنا۔مچھروں کی کشش۔ حاصل کردہ نتائج اس بات کی تصدیق کرتے ہیں کہ این۔arabiensis زندگی کی تاریخ کی خصوصیات کو متاثر کرنے کے لیے کشیرکا پیشاب میں پائے جانے والے نائٹروجنی مرکبات کو حاصل اور تقسیم کرتا ہے۔ ان نتائج کو ممکنہ وبائی امراض کے نتائج کے تناظر میں زیر بحث لایا جاتا ہے اور انہیں ویکٹر کی نگرانی اور کنٹرول کے لیے کیسے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
انوفیلس عربی (ڈونگولا تناؤ) کو 25 ± 2 °C، 65 ± 5% RH اور 12:12 h روشنی پر برقرار رکھا گیا تھا: تاریک سائیکل۔ لاروا کو پلاسٹک کی ٹرے (20 سینٹی میٹر × 18 سینٹی میٹر × 7 سینٹی میٹر) میں پالا گیا تھا جس میں 20 سینٹی میٹر × 18 سینٹی میٹر × 7 سینٹی میٹر) ڈسٹلڈ واٹر، ڈسٹلڈ واٹر، پی ® فوڈ اور ایف ڈی ای سے بھرا ہوا تھا۔ 30 ملی لیٹر کپ (نولاٹو ہرٹیلا، Åstorp، SE) میں جمع کیا گیا اور پھر بگڈورم کیجز (30 سینٹی میٹر × 30 سینٹی میٹر × 30 سینٹی میٹر؛ میگا ویو سائنس، تائیچنگ، تائیوان) میں منتقل کر دیا گیا تاکہ بالغوں کے ظہور کی اجازت دی جا سکے۔ بالغوں کو 10% سوکروز فراہم کیا گیا تھا، جو کہ 4 دن کے بعد تک، جو کہ خواتین کے اعضاء پر ہو جائیں گے۔ تجربے سے فوراً پہلے خوراک کی پیشکش کی، یا تجربے سے پہلے آست پانی کے ساتھ راتوں رات بھوک لگی، جیسا کہ ذیل میں بیان کیا گیا ہے۔ فلائٹ ٹیوب کے تجربات کے لیے استعمال ہونے والی خواتین کو صرف 4-6 گھنٹے کے لیے واٹر ایڈ لیبٹم کے ساتھ بھوکا رکھا گیا تھا۔ بعد کے بائیو سیز کے لیے خون چوسنے والے مچھروں کو تیار کرنے کے لیے، 4 dpe خواتین کو خون کی خوراک فراہم کی گئی تھی۔ Hemotek Discovery Workshops, Acrington, UK۔ مکمل طور پر بھیڑ والی خواتین کو پھر انفرادی پنجروں میں منتقل کیا گیا اور انہیں براہ راست خوراک فراہم کی گئی، جیسا کہ ذیل میں بیان کیا گیا ہے، یا ذیل میں بیان کردہ تجربات سے 3 دن پہلے 10% sucrose ad libitum۔ بعد کی خواتین کو فلائٹ ٹیوب بائیوسیز کے لیے استعمال کیا گیا اور لیبارٹری میں منتقل کیا گیا، اور پھر 46 گھنٹے پہلے پانی کے تجربے کے لیے استعمال کیا گیا۔
بالغ عرب خواتین میں پیشاب اور یوریا کے استعمال کی مقدار درست کرنے کے لیے فیڈنگ اسسز کا استعمال کیا گیا تھا۔ میزبان اور خون پلائی جانے والی خواتین کو 1% پتلا تازہ اور بوڑھے گائے کا پیشاب، یوریا کی مختلف مقداریں، اور دو کنٹرول (10% سوکروز اور پانی) کے لیے خوراک فراہم کی گئی تھی۔ 2650-17-1؛ Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) کو خوراک میں شامل کیا گیا اور 250 µl مائکرو سینٹری فیوج ٹیوبوں میں 4 × 4 میٹرکس میں فراہم کیا گیا (اکسیجن سائنٹیفک، یونین سٹی، CA، US؛ شکل 1A) کنارے پر بھریں تاکہ اثرات سے بچنے کے لیے µ0 اور ممکنہ رنگوں کے درمیان رنگ (~3)۔ 10 مچھروں کو ایک بڑی پیٹری ڈش (قطر میں 12 سینٹی میٹر اور اونچائی 6 سینٹی میٹر؛ Semadeni، Ostermundigen، CH؛ شکل 1A) میں 25 ± 2 سینٹی میٹر ° C اور 65 ± 5% رشتہ دار نمی پر مکمل اندھیرے میں رکھیں۔ مزید تجزیہ تک °C۔
بوائین پیشاب اور یوریا جو میزبان اور خون چوسنے والی مادہ Anopheles arabianus کے ذریعے جذب کیا گیا ہے تلاش کریں۔ فیڈنگ ٹرائل (A) میں، مادہ مچھروں کو تازہ اور بوڑھے گائے کا پیشاب، یوریا کی مختلف مقداریں، سوکروز (10%)، اور کشید شدہ پانی (H2ees-B) اور مادہ خون (H2ees-B) یا خون سے بھرا ہوا پانی فراہم کیا گیا تھا۔ جانچ کی گئی کسی بھی دوسری خوراک سے زیادہ سوکروز۔ نوٹ کریں کہ میزبان کی تلاش کرنے والی خواتین نے 168 گھنٹے کے گائے کے پیشاب (B) سے کم 72 گھنٹے گائے کا پیشاب جذب کیا۔ مختلف حروف کے ناموں کے ساتھ سانس لینے والی جلدیں (D, E) ایک دوسرے سے نمایاں طور پر مختلف تھیں (ٹوکی کے پوسٹ ہاک تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے یک طرفہ ANOVA؛ p <0.05)۔ ایرر بارز اوسط (BE) کی معیاری غلطی کی نمائندگی کرتے ہیں۔ سیدھی ڈیشڈ لائن لاگ لائنر ریگریشن لائن (F, G) کی نمائندگی کرتی ہے۔
جذب شدہ خوراک کو چھوڑنے کے لیے، مچھروں کو انفرادی طور پر 1.5 ملی لیٹر مائیکرو سینٹرفیوج ٹیوبوں میں رکھا گیا تھا جس میں 230 µl ڈسٹل واٹر تھا اور ٹشو کو ڈسپوز ایبل پیسٹل اور کورڈ لیس موٹر (VWR انٹرنیشنل، لنڈ، SE) کا استعمال کرتے ہوئے خلل ڈالا گیا تھا، اس کے بعد سینٹرفیوگریشن کے ذریعے 1010 پی ایم پر 230 µl 1000 منٹ پر سپرے کیا گیا تھا۔ ایک 96 کنویں مائکروپلیٹ (سگما-الڈرچ) میں منتقل کیا گیا اور جذب (λ620) کا تعین سپیکٹرو فوٹومیٹر پر مبنی مائکروپلیٹ ریڈر (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔ متبادل کے طور پر، مچھروں کو پیس دیا گیا تھا جس میں ایک µ0 ملی لیٹر پانی کی مقدار میں 1،00 ملی لیٹر کی مقدار میں منتقل کیا گیا تھا۔ سپیکٹرو فوٹومیٹرک تجزیہ (λ 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE)۔ غذائی مقدار کی مقدار معلوم کرنے کے لیے، ایک معیاری وکر سیریل ڈائلیشن کے ذریعے تیار کیا گیا تھا تاکہ 0.2 µl سے 2.4 µl تک 1 mg ml-1 xylnde کا استعمال کیا گیا۔ ہر مچھر کے کھانے کی مقدار کا تعین کرنے کے لیے۔
حجم کے اعداد و شمار کا یکطرفہ تجزیہ (ANOVA) کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا گیا جس کے بعد Tukey کی پوسٹ ہاک جوڑی کے لحاظ سے موازنہ (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007)۔ لکیری رجعت کا تجزیہ بیان کیا گیا ہے اور خون کے ارتکاز اور انحصار کے درمیان ردعمل کا موازنہ کیا گیا ہے۔ squitoes (GraphPad Prism v8.0.0 for Mac, GraphPad Software, San Diego, CA, US)۔
ہر عمر کے گروپ سے تقریباً 20 µl پیشاب کے نمونے Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh، Sigma Aldrich) پر بندھے ہوئے تھے اور ٹن کیپسول (8 mm × 5 mm) میں لپیٹے گئے تھے۔ Fisher Scientific, Waltham, MA, US) کارخانہ دار کے پروٹوکول کے مطابق تازہ اور بوڑھے پیشاب میں نائٹروجن کی مقدار کا تعین کرنے کے لیے۔ کل نائٹروجن (g N l-1) کو معیار کے طور پر استعمال ہونے والے معلوم یوریا کی تعداد کی بنیاد پر مقدار میں طے کیا گیا تھا۔
میزبان کی تلاش کرنے والی اور خون چوسنے والی خواتین کی بقا پر خوراک کے اثر کا اندازہ لگانے کے لیے، مچھروں کو انفرادی طور پر بڑے پیٹری ڈشز (قطر میں 12 سینٹی میٹر اور اونچائی 6 سینٹی میٹر؛ سیماڈینی) میں رکھا گیا تھا جس کے ڈھکن میں جالی سے ڈھکا ہوا سوراخ (قطر میں 3 سینٹی میٹر) تھا جس کے ساتھ وینٹی لیٹس اور 4 فیصد خوراک فراہم کرنے کے بعد براہ راست تازہ خوراک فراہم کی گئی تھی۔ گائے کا پیشاب، یوریا کی چار مقداریں، اور دو کنٹرول، 10% سوکروز اور پانی۔ ہر خوراک کو ڈینٹل ٹیمپون (DAB Dental AB، Upplands Väsby, SE) پر 5 ملی لیٹر کی سرنج (تھرمو فشر سائنٹیفک، گوتھنبرگ، ڈس پلس 1) میں ڈالا گیا۔ A) ہر روز اپنی خوراک تبدیل کریں۔ اوپر بیان کردہ لیبارٹری کو برقرار رکھیں۔ زندہ بچ جانے والے مچھروں کو دن میں دو بار شمار کیا جاتا تھا، جبکہ آخری مچھر کے مرنے تک مردہ مچھروں کو ضائع کر دیا جاتا تھا (n = 40 فی علاج)۔ مختلف خوراکوں پر کھلائے جانے والے مچھروں کی بقا کا اعدادوشمار کے مطابق تجزیہ کیا گیا تھا۔ خوراک کے درمیان s (IBM SPSS شماریات 24.0.0.0)۔
Attisano et al. s 9 سینٹی میٹر کے فاصلے پر نیوڈیمیم میگنےٹ کے ایک جوڑے کے درمیان معلق ایک کیڑے کی سوئی سے چپکا ہوا ہے۔ اسی مواد (6.5 سینٹی میٹر L) سے بنی ایک افقی ٹیوب نے عمودی ٹیوب کو دو حصوں میں تقسیم کر کے ایک ٹیتھرڈ بازو اور ایک بازو بنایا جس میں ایلومینیم فوائل کا ایک چھوٹا سا ٹکڑا روشنی کے نشان کے طور پر ہوتا ہے۔
24 گھنٹے کی بھوکی خواتین کو 30 منٹ تک پابندی سے پہلے مندرجہ بالا خوراک دی گئی۔ مکمل طور پر کھلائے جانے والی مادہ مچھروں کو پھر انفرادی طور پر 2-3 منٹ کے لیے برف پر اینستھیٹائز کیا گیا اور انہیں موم کے ساتھ کیڑے کے پنوں سے جوڑ دیا گیا Mill. Revolutions فی پرواز کو ایک حسب ضرورت ڈیٹا لاگر کے ذریعے ریکارڈ کیا گیا، پھر PC-Lab 2000™ سافٹ ویئر (v4.01; Velleman, Gavere, BE) کا استعمال کرتے ہوئے ذخیرہ کیا گیا اور ڈسپلے کیا گیا۔ فلائٹ مل کو ایک آب و ہوا سے متعلق کمرے میں رکھا گیا تھا (12 h: 12 h، روشنی: تاریک، 25 ± 6 ° C ± 2 R 5)۔
پرواز کی سرگرمی کے پیٹرن کو دیکھنے کے لیے، 24 گھنٹے کی مدت میں پرواز کی کل مسافت (m) اور مسلسل پرواز کی سرگرمیوں کی کل تعداد کا فی گھنٹہ حساب کیا گیا۔ اس کے علاوہ، انفرادی خواتین کی طرف سے پرواز کی گئی اوسط دوری کا علاج کے دوران موازنہ کیا گیا اور یکطرفہ ANOVA اور Tukey کے پوسٹ ہاک تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے تجزیہ کیا گیا، جہاں پر انحصار کیا گیا فاصلہ (JMP Invariable، inc.4 Pro, v. جبکہ علاج ایک آزاد عنصر ہے۔ اس کے علاوہ، راؤنڈز کی اوسط تعداد کا حساب 10 منٹ کے اضافے میں کیا جاتا ہے۔
An.arabiensis کی تولیدی کارکردگی پر خوراک کے اثر کا اندازہ لگانے کے لیے، چھ خواتین (4 dpe) کو خون جمع کرنے کے بعد براہ راست بگڈورم کیجز (30 سینٹی میٹر × 30 سینٹی میٹر × 30 سینٹی میٹر) میں منتقل کیا گیا اور پھر 48 گھنٹے کے لیے تجرباتی خوراک فراہم کی گئی جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے۔ اس کے بعد خوراک کو ہٹا دیا گیا اور اسپوننگ کپ (30 ملی لیٹر پانی کے ساتھ 30 ملی لیٹر پانی نہیں بھرا گیا)۔ دن 48 گھنٹے کے لیے، ہر 24 گھنٹے میں تبدیل ہوتا ہے۔ ہر غذائی طرز عمل کو 20-50 بار دہرائیں۔ ہر تجرباتی پنجرے کے لیے انڈوں کو شمار اور ریکارڈ کیا گیا تھا۔ انڈوں کے ذیلی نمونے انفرادی انڈوں کے اوسط سائز اور لمبائی میں فرق کا اندازہ کرنے کے لیے استعمال کیے گئے تھے (n ≥ 200 فی خوراک) ایک Dialux-20، Wetzlar، Wetzlar 20-20 مائکروسکوپ کے ساتھ۔ ایک لائیکا کیمرہ (DFC) 320 R2؛Leica Microsystems Ltd., DE)۔بقیہ انڈوں کو 24 گھنٹے کے لیے معیاری پرورش کے حالات کے تحت موسمیاتی کنٹرول والے کمرے میں رکھا گیا تھا، اور حال ہی میں سامنے آنے والے پہلے انسٹار لاروا (n ≥ 200 فی خوراک) کے ذیلی نمونے کی پیمائش کی گئی تھی، جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے۔ sis (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.)۔
تازہ (1 گھنٹہ بعد کے نمونے لینے)، 24 گھنٹے، 72 گھنٹے اور 168 گھنٹے کی عمر کے پیشاب سے ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ زیبو مویشیوں، ارسی ریسوں سے جمع کیے گئے نمونوں سے جمع کیے گئے تھے۔ سہولت کے لیے، صبح سویرے پیشاب کے نمونے جمع کیے گئے تھے جب کہ گائیں ابھی بھی گودام میں تھیں۔ سرخ سے انفرادی پولیامائیڈ بیکنگ بیگز (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) 3 l پولیامائیڈ میں ڑککن کے ساتھ vinyl کلورائیڈ پلاسٹک کے ڈرموں میں۔ ہر بوائین پیشاب کے نمونے سے ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ براہ راست (تازہ) جمع کیے گئے تھے یا ہر کمرے کے درجہ حرارت h2 کے بعد h2، 2 کے بعد ine نمونہ ہر عمر کے گروپ کا نمائندہ تھا۔
ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ کے جمع کرنے کے لیے، ایک بند لوپ سسٹم کا استعمال ایک فعال کاربن فلٹرڈ گیس اسٹریم (100 ملی لیٹر منٹ-1) کو پولیامائیڈ بیگ کے ذریعے ادسورپشن کالم میں 2.5 گھنٹے کے لیے ڈایافرام ویکیوم پمپ (KNF Neuberger, Freiburg, DE) سے کیا گیا تھا۔ اورپشن کالم Teflon نلیاں (5.5 cm x 3 mm id) سے بنا تھا جس میں 35 mg Porapak Q (50/80 mesh؛ Waters Associates, Milford, MA, US) شیشے کے اون کے پلگوں کے درمیان تھا۔ استعمال سے پہلے، کالم کو 1 ملی لیٹر کے ساتھ فلش کیا گیا تھا۔ entane (99.0% خالص سالوینٹ GC گریڈ، سگما Aldrich)۔ جذب شدہ اتار چڑھاؤ کو 400 μl پینٹین کے ساتھ نکالا گیا تھا۔ ہیڈ اسپیس کے مجموعوں کو جمع کیا گیا تھا اور پھر مزید تجزیہ کے لیے استعمال ہونے تک -20 ° C پر محفوظ کیا گیا تھا۔
میزبان کی تلاش اور خون کھانے والے An.Headspace کے اتار چڑھاؤ والے عرق کے جو تازہ، 24-h، 72-h، اور 168-h-عمر والے پیشاب سے جمع کیے گئے ان کے طرز عمل کے ردعمل کا تجزیہ عربیڈوپسس مچھروں کے غیر مستحکم عرقوں کے لیے کیا گیا۔ این کی گھر تلاش کرنے کی سرگرمی کا دورانیہ۔ عربی ir کو سٹینلیس سٹیل میش اسکرینوں کی ایک سیریز سے گزر کر ایک لیمینر فلو اور ایک یکساں پلوم ڈھانچہ بنایا جاتا ہے۔ ڈینٹل ٹیمپون ڈسپنسر (4 سینٹی میٹر × 1 سینٹی میٹر؛ L:D؛ DAB ڈینٹل AB)، olfactometer کے ونڈ ورڈ اینڈ پر 5 سینٹی میٹر کوائل سے معطل کیا جاتا ہے، ہر ایک μl50 سٹریکٹ کے ساتھ ہر ایک سٹریکٹ یا سٹرک منٹ کی تبدیلیاں ہوتی ہیں۔ 1:10 کو گھٹا دیا گیا، محرک کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ پینٹین کی مساوی مقدار کو کنٹرول کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ انفرادی میزبان یا خون چوسنے والے مچھروں کو تجربہ شروع ہونے سے 2-3 گھنٹے پہلے انفرادی رہائی کے پنجروں میں رکھا گیا تھا۔ رہائی کے پنجرے کو نیچے کی طرف رکھا گیا تھا لیکن اس کے بعد olfactometer اور moccolimeter کے لیے اجازت دی گئی۔ پنجرے کے والو کو جاری کرنے کے لیے کھول دیا گیا تھا۔ علاج یا کنٹرول کی طرف کشش کا تجزیہ مچھروں کے تناسب کے طور پر کیا گیا جو کہ رہائی کے 5 منٹ کے اندر اندر ذریعہ کے ساتھ رابطے میں آئے۔ ہر ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ اور کنٹرول کو کم از کم 30 بار نقل کیا گیا، اور کسی ایک دن کے اثرات سے بچنے کے لیے، خون کے ٹیسٹوں کی ایک ہی تعداد اور تجرباتی ٹیسٹوں کے ٹیسٹوں اور ٹیسٹوں پر ایک ہی دن ٹیسٹ کیے گئے۔ ic بمقابلہ ہیڈ اسپیس سیٹ کا تجزیہ برائے نام لاجسٹک ریگریشن کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا جس کے بعد طاق تناسب (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) کے لیے جوڑے کے لحاظ سے موازنہ کیا گیا۔
این کے اسپوننگ ردعمل۔ تازہ اور بوڑھے گائے کے پیشاب سے ہیڈ اسپیس کے عرق کا بگڈورم کیجز میں تجزیہ کیا گیا (30 سینٹی میٹر × 30 سینٹی میٹر × 30 سینٹی میٹر؛ میگا ویو سائنس)۔ پلاسٹک کے کپ (30 ملی لیٹر؛ نولاٹو ہرٹیلا) 20 ملی لیٹر آست پانی سے بھرے ہوئے تھے، جس میں 4 سینٹی میٹر کے کونے کے اوپری حصے اور 4 سینٹی میٹر کے اوپری حصے کو اسپوننگ کی جگہ فراہم کی گئی تھی۔ .ٹریٹمنٹ کپ ہر ہیڈ اسپیس کے نچوڑ کے 10 μl کے ساتھ 1:10 ڈائلیشن پر ایڈجسٹ کیے گئے تھے۔ کنٹرول کپ کو ایڈجسٹ کرنے کے لیے مساوی مقدار میں پینٹین استعمال کیا گیا تھا۔ پوزیشن کے اثرات کو کنٹرول کرنے کے لیے ہر تجربے کے درمیان ٹریٹمنٹ اور کنٹرول کپ کا تبادلہ کیا گیا تھا۔ ZT 9-11 پر دس خون سے پلائی جانے والی خواتین کو تجرباتی پنجروں میں چھوڑا گیا تھا اور بعد میں انڈوں کی گنتی 2 گھنٹے میں کی گئی تھی۔ : (علاج کے کپ میں رکھے گئے انڈوں کی تعداد – کنٹرول کپ میں رکھے گئے انڈوں کی تعداد)/(دیے گئے انڈوں کی کل تعداد)۔ہر علاج کو 8 بار دہرایا گیا۔
خواتین An.arabiensis کا گیس کرومیٹوگرافک اور الیکٹران اینٹینا پیٹرن کا پتہ لگانے (GC-EAD) تجزیہ کیا گیا جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا تھا [20]۔ مختصر طور پر، تازہ ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ کو ایک Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA) کے ساتھ الگ کیا گیا تھا۔ id، 0.25 μm فلم کی موٹائی، Agilent ٹیکنالوجیز)۔اور بڑھاپا پیشاب۔ ہائیڈروجن کو موبائل فیز کے طور پر استعمال کیا گیا جس کی اوسط لکیری بہاؤ کی شرح 45 سینٹی میٹر s-1 تھی۔ ہر نمونہ (2 μl) کو 225 °C کے داخلی درجہ حرارت کے ساتھ 30 سیکنڈ کے لیے اسپلٹ لیس موڈ میں انجکشن لگایا گیا تھا۔ GC اوون کا درجہ حرارت 35 °C (3 °C 01 منٹ ہولڈ) سے پروگرام کیا گیا تھا۔ -1۔جی سی ایفلوئنٹ سپلٹر میں، 4 psi نائٹروجن کو شامل کیا گیا اور 1:1 کو ایک Gerstel 3D/2 کم ڈیڈ والیوم کراس (Gerstel, Mülheim, DE) میں شعلہ آئنائزیشن ڈیٹیکٹر اور EAD کے درمیان تقسیم کیا گیا۔ EAD کے لیے GC ایفلوئنٹ کیپلیری کو Gerstel °C میں منتقل کیا گیا، جو Gerstel °C میں درجہ حرارت کو منتقل کرتا ہے۔ ٹیوب (10 سینٹی میٹر × 8 ملی میٹر)، جہاں اسے کاربن فلٹر شدہ، مرطوب ہوا (1.5 l min−1) کے ساتھ ملایا گیا تھا۔ اینٹینا ٹیوب کے آؤٹ لیٹ سے 0.5 سینٹی میٹر کے فاصلے پر رکھا گیا تھا۔ ہر انفرادی مچھر کا حساب ایک نقل کے لیے تھا، اور میزبان کی تلاش کرنے والے مچھروں کے لیے، ہر ایک کے نمونے پر کم از کم تین نمونے لیے گئے تھے۔
مشترکہ GC اور ماس اسپیکٹومیٹر (GC-MS؛ 6890 GC اور 5975 MS؛ Agilent Technologies) کا استعمال کرتے ہوئے تازہ اور بوڑھے بوائین پیشاب کے ہیڈ اسپیس کے مجموعوں میں بائیو ایکٹیو مرکبات کی شناخت GC-EAD تجزیہ میں اینٹینل ردعمل کو ظاہر کرنے کے لیے، GC-EAD کے تجزیے میں E-VP E-VP کے ساتھ E-VP موڈ میں کام کر رہا تھا۔ 5MS UI-coated فیوزڈ سلیکا کیپلیری کالم (60 m × 0.25 mm اندرونی قطر، 0.25 μm فلم کی موٹائی) 35 cm s-1.A 2 μl نمونے کو اسی انجیکٹر کا استعمال کرتے ہوئے انجیکشن لگایا گیا تھا جس میں 35 سینٹی میٹر s-1 کی اوسط لکیری بہاؤ کی شرح کے ساتھ موبائل فیز کے طور پر استعمال کیا گیا تھا۔ کسٹم لائبریری اور این آئی ایس ٹی 14 لائبریری (ایجیلنٹ) کے مقابلے ٹائم (کوویٹ انڈیکس) اور ماس سپیکٹرا۔ شناخت شدہ مرکبات کی تصدیق مستند معیارات (اضافی فائل 1: ٹیبل ایس 2) کے ذریعے کی گئی تھی۔
میزبان کی تلاش اور خون چوسنے والے Ans.arabiensis کو اپنی طرف متوجہ کرنے کے لیے تازہ اور بوڑھے پیشاب میں بایو ایکٹیو مرکبات پر مشتمل مصنوعی بدبو کے مرکب کی افادیت کا اندازہ لگانا، اوپر کے جیسا ہی اولفیکٹو میٹر اور پروٹوکول استعمال کرتے ہوئے۔ مصنوعی آمیزے نے مرکب کی نقل کی اور تازہ سروں کے تناسب کی ترکیب اور تناسب4۔ گھنٹہ، 48-گھنٹہ، 72-گھنٹہ، اور 168-گھنٹے پرانا پیشاب (شکل 5D-G؛ اضافی فائل 1: ٹیبل S2)۔تجزیہ کے لیے، مکمل طور پر مصنوعی مرکب کے 1:100 کم کرنے کے 10 μl کا استعمال کریں، جس کی مجموعی طور پر رہائی کی شرح 40-40-400 سے لے کر 40-400 کے درمیان ہے۔ میزبان اور خون چوسنے والے مچھروں کے لیے۔ اس کے بعد، ٹیسٹ مکمل مرکب پر کیا جاتا ہے، جس میں مکمل مرکب کے واحد مرکبات کے تخفیف آمیز مرکبات کو ہٹا دیا جاتا ہے۔ میزبان اور خون سے پلائے جانے والے جوابات سے جوابات حاصل کریں۔ عرب بمقابلہ مصنوعی اور تخفیف آمیز مرکبات کا تجزیہ کیا گیا تھا۔ v14.0.0، SAS Institute Inc.)
اس بات کا اندازہ لگانے کے لیے کہ آیا گائے کا پیشاب ملیریا مچھروں کے لیے میزبان رہائش گاہ کے اشارے کے طور پر کام کر سکتا ہے، تازہ اور بوڑھے گائے کا پیشاب، جیسا کہ اوپر بیان کیا گیا ہے جمع کیا گیا، اور پانی کو میشڈ 3 لیٹر بالٹی (100 ملی لیٹر) میں رکھا گیا اور میزبان بیت کے جالوں میں رکھا گیا۔(BG-HDT ورژن؛ BioGents, Regensburg, DE) چراگاہ میں 50 میٹر کے فاصلے پر دس پھندے، دیہاتی برادری سے 400 میٹر کے فاصلے پر (سائلے، ایتھوپیا، 5°53´24´N، 37°29´24´E) اور کوئی مویشی نہیں، مستقل افزائش کے میدانوں پر اور دیہاتوں میں پانچ ہیٹ ٹریپس موجود تھے۔ علاج کے ہر مقام کو کل پانچ راتوں کے لیے رات میں گھمایا جاتا ہے۔ مختلف عمروں کے پیشاب کے ساتھ پھنسے ہوئے جالوں میں پکڑے گئے مچھروں کی تعداد کا موازنہ لاجسٹک ریگریشن کا استعمال کرتے ہوئے بیٹا بائنومیئل ڈسٹری بیوشن (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.) سے کیا گیا۔
ایتھوپیا کے علاقے ماکی کے قصبے کے قریب ملیریا سے متاثرہ گاؤں میں (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E؛ Figure 6A)۔ یہ مطالعہ اگست کے وسط اور ستمبر کے وسط کے درمیان کیا گیا تھا، اس سے پہلے سالانہ انڈور کے موسم کے ساتھ ساتھ ایک طویل عرصے تک بارش کے موسم کے ساتھ ساتھ 200 میٹر تک کے باقیات۔ حصہ) گاؤں کے مضافات میں واقع کو مطالعہ کے لیے منتخب کیا گیا تھا (تصویر 6A)۔ گھروں کو منتخب کرنے کے لیے استعمال ہونے والے معیار یہ تھے: گھر میں جانوروں کی اجازت نہیں تھی، گھر کے اندر کھانا پکانے کی اجازت نہیں تھی (کم از کم آزمائشی مدت کے دوران)، اور زیادہ سے زیادہ دو باشندوں والے گھر، غیر کیڑے مار ادویات میں سو رہے تھے۔علاج شدہ مچھروں کے جال کے تحت۔ اخلاقی منظوری فکلٹی آف نیچرل سائنسز (CNS-IRB) کے ادارہ جاتی تحقیقی اخلاقیات کا جائزہ بورڈ (IRB/022/2016) نے عطا کی ہے، عدیس ابابا یونیورسٹی، ورلڈ میڈیکل ایسوسی ایشن کی طرف سے قائم کردہ رہنما خطوط کے مطابق ہیلسنکی کے سربراہ کے ساتھ ہیلسنکی کے سابقہ عملہ کی معاونت کی گئی ہے۔ ضلع اور وارڈ ('کیبیلے') کی سطح پر مقامی انتظامیہ کی طرف سے پورے عمل کی توثیق کی گئی ہے۔ تجرباتی ڈیزائن نے 2 × 2 لاطینی مربع ڈیزائن کی پیروی کی، جس میں مصنوعی مرکب اور کنٹرول پہلی رات جوڑے بنائے گئے گھروں کو تفویض کیے گئے تھے اور اگلی تجرباتی رات گھروں کے درمیان تبدیل کیے گئے تھے۔ اس عمل کو دس بار دہرایا گیا۔ دن کے ایک ہی وقت میں فیلڈ ٹرائل کے آغاز، درمیانی اور اختتام پر راتیں۔
چھ بائیو ایکٹیو مرکبات پر مشتمل ایک مصنوعی مرکب ہیپٹین (97.0% سالوینٹ جی سی گریڈ، سگما ایلڈرچ) میں تحلیل کیا گیا اور ایک کاٹن وِک ڈسپنسر کا استعمال کرتے ہوئے 140 این جی ایچ-1 پر جاری کیا گیا [20]۔ وِک ڈسپنسر نے تمام مرکبات کو مستقل تناسب میں جاری کرنے کی اجازت دی۔ اگلے 12 گھنٹے کے دوران استعمال کیا گیا۔ سینٹرز فار ڈیزیز کنٹرول اینڈ پریوینشن (CDC) کا لائٹ ٹریپ (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US؛ Figure 6A)۔ پھندوں کو زمین سے 0.8 - 1 میٹر اوپر، بستر کے پاؤں کے قریب لٹکایا گیا تھا، اور ایک رضاکار ایک غیر علاج شدہ مچھروں کے نیچے سوتا تھا اور اس کے درمیان: جنس اور جسمانی حیثیت کے لحاظ سے ed (غیر کھلایا، کھلایا، نیم حاملہ، اور حاملہ [21] بعد میں پولیمریز چین ری ایکشن (PCR) تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے جانچ کی گئی تاکہ مورفولوجیکل طور پر A. gambiae sl. کمپلیکس کے ممبران کی شناخت کی جا سکے۔ منحصر متغیر اور علاج (مصنوعی مرکب بمقابلہ کنٹرول) مقررہ اثر تھا (JMP® 14.0.0. SAS Institute Inc.)۔یہاں، ہم امکانی تناسب کے ٹیسٹ سے χ2 اور p-values کی اطلاع دیتے ہیں۔
اندازہ کریں کہ آیا یہ محفوظ ہے۔ arabiensis پیشاب حاصل کرنے کے قابل تھا، اس کا بنیادی نائٹروجن ذریعہ، یوریا، براہ راست کھانا کھلانے کے ذریعے، انتظامیہ کے 48 گھنٹے کے اندر، 4 دن کے بعد (dpe) میزبان کی تلاش اور خون سے کھلانے والی خواتین کو کھانا کھلانے کے ٹرائلز (تصویر 1A)۔ دونوں میزبان تلاش کرنے والی اور خون چوسنے والی خواتین (خواتین یا خون چوسنے والی خواتین کے مقابلے میں زیادہ مقدار میں) ) = 20.15, p <0.0001 اور F(5,299) = 56.00, p <0.0001، بالترتیب؛ تصویر 1B,C) مزید برآں، میزبان کی تلاش کرنے والی خواتین نے 168 گھنٹے میں پیشاب کے مقابلے میں 72 گھنٹے میں کم پیشاب کھایا، F.W-Hosting کی پیشکش والی خواتین کی خوراک میں 168 گھنٹے (F.W) پر مشتمل ہے دیگر تمام ارتکاز اور پانی کے مقابلے میں 2.69 ایم ایم پر یوریا کی نمایاں طور پر زیادہ مقدار کو چھانٹ لیا، جبکہ 10% سوکروز (F(10,813) = 15.72، p <0.0001؛ شکل 1D سے الگ نہیں کیا جا سکتا۔ پانی، اگرچہ 10% سے نمایاں طور پر کم سوکروز (F(10,557) = 78.35, p <0.0001؛ شکل 1.1E) مزید برآں، جب دو جسمانی حالتوں کے درمیان موازنہ کیا جائے تو فلیبوٹومائزڈ خواتین نے میزبان خواتین کے مقابلے میں زیادہ یوریا جذب کیا، اور سب سے کم اسی طرح کی خواتین کو تلاش کرنے والی خواتین سے زیادہ یوریا جذب کیا گیا۔ زیادہ ارتکاز پر (F(1,953)= 78.82, p <0.0001;تصویر 1F, G)۔جبکہ یوریا پر مشتمل خوراک کے استعمال میں زیادہ سے زیادہ قدریں دکھائی دیتی ہیں (تصویر 1D,E)، دونوں جسمانی حالتوں میں خواتین یوریا کی مقدار کو یوریا کے ارتکاز کی پوری رینج پر لاگ ان لکیری انداز میں ماڈیول کرنے کے قابل تھیں (Fig1)۔اسی طرح، مچھر پیشاب کے جذب ہونے کی مقدار کو ریگولیٹ کرکے اپنے نائٹروجن کے اخراج کو کنٹرول کرتے دکھائی دیتے ہیں، کیونکہ پیشاب میں نائٹروجن کی مقدار جذب ہونے والی مقدار میں ظاہر ہوتی ہے (شکل 1B، C اور B انسیٹس)۔
میزبان تلاش کرنے والے اور خون چوسنے والے مچھروں کی بقا پر پیشاب اور یوریا کے اثرات کا جائزہ لینے کے لیے، خواتین کو چاروں عمروں (تازہ، 24 گھنٹے، 72 گھنٹے، اور 168 گھنٹے بعد جمع ہونے کے بعد) پیشاب پلایا گیا اور یوریا کی مقدار کی ایک رینج، نیز ڈسٹل واٹر اور یہ سرویو اے ایف 10 فیصد کنٹرول (سرویو اے ایف)۔ lysis سے پتہ چلتا ہے کہ خوراک کا میزبان کی تلاش کرنے والی خواتین میں مجموعی طور پر بقا پر ایک اہم اثر پڑتا ہے (پیشاب: χ2 = 108.5، df = 5، p <0.0001؛ یوریا: χ2 = 122.8، df = 5، p <0.0001؛ Fig. df = 5, p <0.0001؛ یوریا: χ2 = 137.9, df = 5, p <0.0001؛ شکل 2D,E)۔ تمام تجربات میں، خواتین نے پیشاب، یوریا، اور پانی کی خوراک کھلائی ان کی بقا کی شرح نمایاں طور پر کم تھی۔ ale پیشاب نے بقا کی مختلف شرحیں ظاہر کیں، جن کو 72-h باسی پیشاب کھلایا گیا (p = 0.016) سب سے کم زندہ رہنے کا امکان (تصویر 2B)۔ مزید برآں، میزبان کی تلاش کرنے والی خواتین کو 135 ایم ایم یوریا کھلایا گیا وہ پانی کے کنٹرول (p
24 گھنٹے کی مدت میں فلائٹ مل ٹیسٹ میں طے شدہ کل فاصلہ اور راؤنڈز کی تعداد میزبان تلاش کرنے والے اور خون چوسنے والے مچھروں کے درمیان مختلف تھی، جس نے مجموعی طور پر کم پرواز کی سرگرمی دکھائی (تصویر 3)۔ میزبان تلاش کرنے والے مچھر جو تازہ اور بوڑھے پیشاب یا سوکروز اور پانی فراہم کرتے ہیں۔ 24- اور 168 گھنٹے کی عمر کے مچھروں کو جو پیشاب پر کھانا کھلاتے تھے مختلف پرواز کے نمونوں کی نمائش کرتے تھے اور بنیادی طور پر روزمرہ کے ہوتے تھے۔ سوکروز یا 72 گھنٹے پیشاب فراہم کرنے والی مادہ مچھروں نے 24 گھنٹے کی مدت میں سرگرمی دکھائی، جب کہ وہ خواتین جو پانی فراہم کرتی تھیں وہ زیادہ سے زیادہ متحرک تھیں۔ رات گئے اور صبح سویرے، جب کہ 72 گھنٹے پیشاب پینے والوں نے 24 گھنٹوں کے دوران سرگرمی میں مسلسل کمی کا تجربہ کیا (شکل 3)۔
شکاری خون چوسنے والی خاتون اینوفیلس عربینس کی پرواز کی کارکردگی جو گائے کا پیشاب اور یوریا کھا رہی تھی۔ فلائٹ مل ٹیسٹ میں، مادہ مچھروں کو تازہ اور بوڑھے گائے کا پیشاب کھلایا گیا، یوریا کی مختلف مقدار، سوکروز (10%)، اور ڈسٹلڈ واٹر (H2O) کو آزادانہ طور پر گھومنے یا گھومنے کے لیے استعمال کیا گیا۔ تلاش کرنے والی (بائیں) اور خون چوسنے والی (دائیں) خواتین، 24 گھنٹے کی مدت میں ہر خوراک کے لیے فی گھنٹہ پروازوں کی کل فاصلہ اور تعداد ریکارڈ کی گئی (سیاہ: سرمئی؛ ہلکا: سفید)۔ اوسط فاصلہ اور باؤٹس کی اوسط تعداد سرکیڈین سرگرمی گراف کے دائیں طرف دکھائی گئی ہے۔ خرابی کی سلاخیں مطلب کی معیاری غلطی کی نمائندگی کرتی ہیں۔ شماریاتی متن دیکھیں۔
عام طور پر، میزبان کی تلاش کرنے والی خواتین کی پرواز کی مجموعی سرگرمی 24 گھنٹے کی مدت کے دوران پرواز کے فاصلے کی طرح کے پیٹرن کی پیروی کرتی ہے۔ اوسط پرواز کا فاصلہ کھانے کی خوراک سے نمایاں طور پر متاثر ہوا (F(5, 138) = 28.27, p <0.0001)، اور میزبان کی تلاش کرنے والی خواتین نے 72 گھنٹے کی طویل فاصلہ کے مقابلے میں f1wp (72 گھنٹے طویل فاصلہ کھایا۔ )، اور سوکروز سے کھلائے جانے والے مچھر تازہ (p = 0.022) اور 24-گھنٹے کی عمر کے پیشاب (p = 0.022) سے زیادہ دیر تک اڑتے ہیں۔ پیشاب کی خوراک کے ذریعہ بیان کردہ پرواز کی سرگرمی کے پیٹرن کے برعکس، یوریا سے کھلایا میزبان تلاش کرنے والی خواتین میں پرواز کے دوسرے مرحلے کے دوران نصف سرگرمی (پی 2) کے دوران نصف سے زیادہ نصف سرگرمی کی نمائش ہوتی ہے۔ اگرچہ سرگرمی کے نمونے ایک جیسے تھے، میزبان کی تلاش کرنے والی خواتین نے جذب شدہ ارتکاز (F(5, 138) = 1310.91, p <0.0001) کے لحاظ سے یوریا کھلایا، اوسط پرواز کے فاصلے میں نمایاں اضافہ ہوا۔
خون چوسنے والے مچھروں کی مجموعی پرواز کی سرگرمی تمام غذاوں میں 24 گھنٹے سے زیادہ مستحکم اور برقرار رہی، اندھیرے دور کے دوسرے نصف حصے کے دوران پانی پینے والی خواتین کے ساتھ ساتھ تازہ کھلائی جانے والی اور 24 گھنٹے کی عمر کی خواتین میں پیشاب کی سرگرمی میں اضافہ ہوا (تصویر 3)۔جبکہ پیشاب کی خوراک نے خون چوسنے والی خواتین میں پرواز کا درمیانی فاصلہ نمایاں طور پر متاثر کیا۔ یوریا کی خوراک (F(5, 138) = 1.36, p = 0.24) .دوسری پیشاب اور کنٹرول والی خوراک کے ساتھ (تازہ، p = 0.0091؛ 72 گھنٹے، p = 0.0022؛ 168 گھنٹے، p = 0.001؛ sucrose، p = 0.001؛ sucrose، p = 0.001؛ p = 0.24)؛
تولیدی پیرامیٹرز پر پیشاب اور یوریا پلانے کے اثرات کا اندازہ انڈے دینے والے بائیوسیز (شکل 4A) میں کیا گیا تھا اور ان کی جانچ ہر خاتون کے انڈوں کی تعداد، انڈے کے سائز، اور نئے بچے ہوئے پہلے انسٹار لاروا کے مطابق کی گئی تھی۔ انڈوں کی تعداد جو پیشاب سے کھلائی گئی عرب خواتین (50 = 5 سے مختلف ہوتی ہیں)۔ 8؛ تصویر 4B۔ خواتین نے 24 گھنٹے پیشاب کھلایا، خون کے کھانے نے خواتین کو پیشاب کی دوسری خوراکوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ انڈے دیے اور ان کھلائے ہوئے سوکروز (تصویر 4B) سے ملتے جلتے تھے۔ اسی طرح، پیشاب کھلانے والی خواتین کی طرف سے دیے گئے انڈوں کا سائز خوراک کے لحاظ سے مختلف ہوتا ہے، (F. 5.20 = 5.20 کے ساتھ <0) -گھنٹہ پیشاب کرنے والی اور سوکروز کھلائی جانے والی خواتین پانی سے پلائی جانے والی خواتین کے مقابلے میں نمایاں طور پر بڑے انڈے دیتی ہیں، جبکہ 168 گھنٹے پیشاب کے ساتھ کھلائی جانے والی خواتین کے انڈے نمایاں طور پر چھوٹے تھے (تصویر 4C)۔ اس کے علاوہ، پیشاب کی خوراک نے لاروا کے سائز کو نمایاں طور پر متاثر کیا (F(5, 187) = 7.80 سے زیادہ بڑے انڈے کے ساتھ۔ 24- اور 72-گھنٹے پرانی پیشاب کرنے والی خواتین انڈوں کے لاروا سے دیے گئے انڈوں سے۔
گائے کے پیشاب اور یوریا پر کھانا کھلانے والی مادہ اینوفیلس عربینس کی تولیدی کارکردگی۔ خون سے پلنے والی مادہ مچھروں کو تازہ اور بوڑھے گائے کا پیشاب، یوریا کی مختلف مقدار، سوکروز (10%)، اور ڈسٹل واٹر (H2O) پر مشتمل خوراک کھلائی گئی اور 48 گھنٹے پہلے انڈوں کی تعداد (بائیو ایسٹرے بی) میں ڈالنے سے پہلے (بائیو ایسٹرے نمبر 8)۔ , E)، انڈے کا سائز (C, F) اور لاروا کا سائز (D, G) فراہم کردہ خوراک سے نمایاں طور پر متاثر ہوئے (گائے کا پیشاب: BD؛ یوریا: EG)۔ مختلف حروف کے ناموں کا استعمال کرتے ہوئے ماپا جانے والے ہر پیرامیٹر کا مطلب ایک دوسرے سے نمایاں طور پر مختلف تھا (ٹوکی کے پوسٹ ہاک تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے یکطرفہ ANOVA؛ p <0.05 کے معیار کا پی <0.05 یا غلطی کا مطلب ہے)۔
پیشاب کے اہم نائٹروجنی جزو کے طور پر، یوریا، جب خون سے پلائی جانے والی خواتین کو غذا کے طور پر فراہم کیا جاتا ہے، تمام مطالعات میں تولیدی پیرامیٹرز کو نمایاں طور پر متاثر کیا جاتا ہے۔ خون میں کھانے کے بعد یوریا کھلانے والی خواتین کی طرف سے دیے جانے والے انڈوں کی تعداد، یوریا کی ارتکاز پر منحصر ہے (F(11, 360) = 4.600 p<4.600؛ 4.600 p. µM اور 1.34 mM نے زیادہ انڈے دیے (تصویر 4E)۔ 134 µM یا اس سے اوپر کی یوریا کی مقدار پر کھلائی جانے والی خواتین پانی پر کھلائی جانے والی خواتین کے مقابلے میں زیادہ بڑے انڈے دیتی ہیں (F(10, 4245) = 36.7؛ p <0.0001)، اور اسی طرح کی ماں کے سائز میں 4 سینٹی میٹر متاثر ہوتی ہے۔ (F(10, 3305) = 37.9؛ p <0.0001) زیادہ متغیر تھا (تصویر 4G)۔
میزبان کی تلاش میں بوائین پیشاب کے ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ کے لیے مجموعی طور پر کشش۔ گلاس ٹیوب اولفیکٹومیٹر (تصویر 5A) میں تشخیص شدہ arabiensis پیشاب کی عمر سے نمایاں طور پر متاثر ہوا (χ2 = 15.9, df = 4, p = 0.0032; flyiganasis ظاہر کیا گیا ہے)۔ 24 گھنٹے دیگر تمام علاجوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ کشش کا باعث بنتے ہیں (72 گھنٹے: p = 0.0060، 168 گھنٹے: p = 0.012، پینٹین: p = 0.00070)، سوائے تازہ پیشاب کی بو کے (p = 0.13؛ شکل 5B)۔ نمایاں طور پر مختلف (χ2 = 8.78, df = 4, p = 0.067؛ تصویر 5C)، یہ خواتین کنٹرولز کے مقابلے 72 گھنٹے پرانے پیشاب کے مقابلے میں ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ کے لیے نمایاں طور پر زیادہ پرکشش پائی گئیں (p = 0.0066؛ شکل 5C)۔
میزبان کی تلاش میں قدرتی اور مصنوعی گائے کے پیشاب کی بدبو کے بارے میں طرز عمل کے ردعمل اور خون سے کھلائے جانے والے اینوفیلس عربینس۔ شیشے کی ٹیوب اولفیکٹو میٹر (A) کی منصوبہ بندی۔ تازہ اور بوڑھے گائے کے پیشاب سے میزبان (B) کی طرف ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ اور خون چوسنے والے ایکسٹریکٹ (C) کا خون چوسنا تازہ سے الگ تھلگ (D)، 24-hour (E)، 72-hour (F)، اور 168-hour (G) عمر کے گائے کے پیشاب کو دکھایا گیا ہے۔ الیکٹران اینٹینا کا پتہ لگانے (EAD) کے نشانات ہیڈ اسپیس میں بائیو ایکٹیو مرکبات کے جواب میں وولٹیج کی تبدیلیوں کو ظاہر کرتے ہیں جو کہ گیس کرومیٹو گراف کی نشاندہی کرتے ہیں ڈی (mV) بمقابلہ برقرار رکھنے کا وقت اور بوڑھے گائے کے پیشاب کی بدبو۔ مختلف حروف کے ناموں کی طرف متوجہ مچھروں کا اوسط تناسب ایک دوسرے سے نمایاں طور پر مختلف تھا (ٹوکی کے پوسٹ ہاک تجزیہ کا استعمال کرتے ہوئے یک طرفہ انووا؛پی <0.05)۔ ایرر بارز پیمانے کی معیاری غلطی کی نمائندگی کرتے ہیں۔
خواتین Ann.arabiensis، خون کے کھانے کے 72 گھنٹے اور 120 گھنٹے بعد، سپوننگ کے دوران، پینٹین کنٹرولز (χ2 = 3.07، p > 0.05؛ اضافی فائل 1: تصویر S1) کے مقابلے میں تازہ اور بوڑھے گائے کے پیشاب سے ہیڈ اسپیس کے اتار چڑھاؤ کے لیے کوئی ترجیح نہیں دکھائی گئی۔
خواتین Ann.arabiensis کے لیے، GC-EAD اور GC-MS کے تجزیوں نے آٹھ، چھ، تین اور تین بائیو ایکٹیو مرکبات کی نشاندہی کی (تصویر 5D-G)۔ اگرچہ الیکٹرو فزیولوجیکل ردعمل پیدا کرنے والے مرکبات کی تعداد میں فرق دیکھا گیا، لیکن ان میں سے زیادہ تر مرکبات ہر ہیڈ اسپیس میں موجود تھے، جو کہ ہر ایک کے لیے اکٹھا کیے گئے تازہ مرکبات کے لیے اتار چڑھاؤ کے لیے تیار کیے گئے تھے۔ d دہلیز کے اوپر خواتین اینٹینا کی طرف سے جسمانی ردعمل کو مزید تجزیوں میں شامل کیا گیا تھا۔
ہیڈ اسپیس کلیکشن میں بائیو ایکٹیو مرکبات کی کل اتار چڑھاؤ کی شرح تازہ پیشاب میں 29 µg h-1 سے بڑھ کر 168 گھنٹے پرانے پیشاب میں 242 µg h-1 ہوگئی، جس کی بنیادی وجہ p-cresol اور m-formaldehyde فینول کے ساتھ ساتھ فینول میں اضافہ ہوتا ہے۔ نہر، پیشاب کی بڑھتی ہوئی عمر کے ساتھ کم ہوئی، جو کرومیٹوگرام (تصویر 5D) -G بائیں پینل) میں سگنل کی شدت (کثرت) میں مشاہدہ شدہ کمی اور ان مرکبات پر جسمانی ردعمل (تصویر 5D-G دائیں پینل) سے منسلک ہے۔
مجموعی طور پر، مصنوعی مرکب میں حیاتیاتی مرکبات کا ایک جیسا قدرتی تناسب تھا جس کی شناخت تازہ اور عمر رسیدہ پیشاب کی جگہوں (تصویر 5D–G) کے اتار چڑھاؤ سے ہوتی ہے اور میزبان کی تلاش میں کوئی خاص اپیل نہیں کرتی تھی 4.91, df = 4, p = 0.30؛ تصویر 5I) تاہم، علاج کے درمیان جوڑے کے بعد کے موازنہ سے پتہ چلتا ہے کہ میزبان کی تلاش کرنے والے مچھر پینٹین کنٹرولز کے مقابلے میں 24-h کی عمر کے پیشاب کے مصنوعی مرکب کے لئے نمایاں طور پر پرکشش تھے۔
24-گھنٹے پرانے پیشاب کے مصنوعی مرکب میں انفرادی اجزاء کے کردار کا اندازہ لگانے کے لیے، Y-ٹیوب پرکھ میں مکمل مرکب کے مقابلے میں چھ تخفیف آمیزوں کا جائزہ لیا گیا، جس میں انفرادی مرکبات کو ہٹا دیا گیا تھا۔ میزبان تلاش کرنے والے مچھروں کے لیے، مکمل مرکب سے انفرادی مرکبات کو گھٹا کر = 96 کے رویے پر ایک اہم اثر ہوا (=96.3. 6, p = 0.0032؛ اضافی فائل 1: Figure S2A)، تمام تخفیف آمیز مرکبات مکمل طور پر مخلوط ہونے سے چھوٹے سے زیادہ پرکشش تھے۔ اس کے برعکس، مکمل طور پر مصنوعی مرکب سے انفرادی مرکبات کو ہٹانے سے خون چوسنے والے مچھروں کے طرز عمل پر کوئی اثر نہیں پڑا (χ2 = 1.78 = 1.70 کے علاوہ) نہر، جس کے نتیجے میں مکمل مرکب کشش (p = 0.022؛ اضافی فائل 1: Figure S2B) کے مقابلے میں کم سطحیں آئیں۔
ایتھوپیا کے ایک ملیریا سے متاثرہ گاؤں میں، کھیت کے حالات میں مچھروں کو اپنی طرف متوجہ کرنے میں 24 گھنٹے گائے کے پیشاب کے مصنوعی مرکب کی افادیت کا دس راتوں تک جائزہ لیا گیا (تصویر 6A)۔ مجموعی طور پر 4,861 مچھر پکڑے گئے اور ان کی شناخت کی گئی، جن میں سے 45.19 فیصد مچھر تھے۔ pharoensis اور 35.4% Culex spp۔(اضافی فائل 1: Table S1)۔ Anopheles arabinis An.Gambian species Complex کا واحد رکن ہے جس کی شناخت PCR تجزیہ کے ذریعے کی گئی ہے۔ اوسطاً، فی رات 320 مچھر پکڑے گئے، اس دوران مصنوعی مکسچر کے بغیر مچھروں کے پھندے پکڑے گئے۔ (0, 3196) = 170.0, p <0.0001) .مقدمہ کے آغاز، وسط اور اختتام پر پانچ کنٹرول راتوں میں سے ہر ایک پر بغیر لالچ والے جال لگائے گئے تھے۔ ہر ایک جوڑے میں مچھروں کی ایک جیسی تعداد پکڑی گئی تھی، جس سے یہ ظاہر ہوتا ہے کہ گھروں کے درمیان کوئی تعصب نہیں ہے، χ1 × 3 = 0 (5) 0.05) اور مطالعہ کی مدت کے دوران آبادی میں کوئی کمی نہیں ہوئی۔ کنٹرول ٹریپس کے مقابلے میں، مصنوعی مرکب پر مشتمل پھندے میں پکڑے گئے مچھروں کی تعداد میں نمایاں اضافہ ہوا: میزبان تلاش کرنا (χ2(0, 2107) = 138.7، p <0.0001)، حالیہ خون (p <0.0001)، حالیہ خون (p02 = 0.50) <0.2 (0.5) ) اور حمل (χ2(0، 228) = 6.27، p = 0.0123؛اضافی فائل 1: ٹیبل S1)۔ یہ پکڑے گئے مچھروں کی کل تعداد سے بھی ظاہر ہوتا ہے: میزبان تلاش کرنا> خون چوسنا> حاملہ> نیم حاملہ> مرد۔
24 گھنٹے کے مصنوعی گائے کے پیشاب کی بدبو کے مرکب کی افادیت کا فیلڈ کا جائزہ۔ فیلڈ ٹرائلز جنوبی وسطی ایتھوپیا (نقشہ) میں، ماکی کے قصبے کے قریب (انسرٹ) کیے گئے، جوڑے والے گھروں میں بیماریوں کے کنٹرول کے مرکز (سی ڈی سی) لائٹ ٹریپ (دائیں) کا استعمال کرتے ہوئے، جوڑی والے اسکوائر ڈیزائن کے ساتھ۔ فوٹو ٹراپس مادہ انوفیلس عربیسکوس (B) کو اپنی طرف متوجہ کرتے ہیں اور پکڑتے ہیں، لیکن انوفلیس فاررو (C) کو نہیں، ایک مختلف انداز میں، ایک جسمانی حالت پر منحصر اثر۔ اس کے علاوہ، ان ٹریپس نے میزبان کیولیکس مچھروں کی نمایاں طور پر بڑھتی ہوئی تعداد کو پکڑا ہے۔ ) ٹریپس (N = 10)، جبکہ دائیں طرف کی سلاخیں کنٹرول ٹریپس کے جوڑوں میں اوسط سلیکشن انڈیکس کی نمائندگی کرتی ہیں (کھلے؛ N = 5)۔ستارے شماریاتی اہمیت کی سطحوں کی نشاندہی کرتے ہیں (*p = 0.01 اور ***p <0.0001)
تینوں پرجاتیوں کو مصنوعی مرکب پر مشتمل پھندوں میں مختلف طریقے سے پکڑا گیا تھا۔ میزبان کی تلاش (χ2(1, 1345) = 71.7, p <0.0001)، خون کی خوراک (χ2(1, 517) = 16.7, p <0.0001) اور حمل (p <0.0001) اور حمل (χ1 = 0.1) 4) a .arabiensis مصنوعی مرکب (تصویر 6B) کو جاری کرنے والے جال میں پھنس گیا تھا، جبکہ An کی مقدار میں فرق نہیں تھا۔ مختلف جسمانی حالتوں میں Pharoensis پایا گیا تھا (تصویر 6C)۔ Culex کے لیے، میزبانوں کی تلاش میں مچھروں کی تعداد میں صرف ایک قابل ذکر اضافہ ہوا ہے، جس میں b199 کے ساتھ پایا گیا تھا۔ 12.6، p = 0.0004؛ تصویر 6D)، کنٹرول ٹریپس کے مقابلے۔
ایتھوپیا میں افزائش کے مقامات اور دیہی برادریوں کے درمیان ممکنہ میزبانوں کے باہر واقع ہوسٹ بیت ٹریپس کا استعمال اس بات کا جائزہ لینے کے لیے کیا گیا تھا کہ آیا ملیریا کے مچھر گائے کے پیشاب کی بدبو کو میزبان رہائش گاہ کے اشارے کے طور پر استعمال کرتے ہیں۔ تاہم، اعلی درجہ حرارت اور گائے کے پیشاب کی بدبو کی موجودگی میں، مادہ ملیریا مچھروں کو اپنی طرف متوجہ کیا گیا اور پکڑ لیا گیا، اگرچہ کم تعداد میں، پیشاب کی عمر (χ2(5, 25) = 2.29، p = 0.13؛ اضافی فائل 1: Figure S3)۔ : پیکر S3)۔
ملیریا کے مچھر گائے کے پیشاب (یعنی پڈلز) پر معاوضہ خوراک کے ذریعے نائٹروجن پر مشتمل مرکبات حاصل کرتے ہیں اور تقسیم کرتے ہیں تاکہ زندگی کی تاریخ کی خصوصیات کو بہتر بنایا جا سکے، جیسا کہ دوسرے حشرات [2, 4, 24, 25, 26]۔ گائے کا پیشاب ایک آرام دہ اور پرسکون ذریعہ ہے جو آسانی سے دستیاب جگہوں کے ساتھ مل سکتا ہے۔ اور دیہی گھروں کے قریب لمبے لمبے پودے اور اسپوننگ سائٹس۔ مادہ مچھر اس وسیلے کو سونگھ کر تلاش کرتے ہیں اور پیشاب میں نائٹروجن مرکبات کے اخراج کو منظم کرنے کے قابل ہوتے ہیں، بشمول یوریا، پیشاب میں موجود اہم نائٹروجنی جزو [15، 16]۔ میزبان کی تلاش کرنے والی مادہ مچھروں کی پرواز کی سرگرمی اور بقا کو بڑھانے کے ساتھ ساتھ پہلے گوناڈوٹروپک سائیکل کے دوران خون سے پلائے جانے والے افراد کی بقا اور تولیدی خصوصیات کو بڑھانے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔ اس لیے، پیشاب کی آمیزش ملیریا کے ویکٹروں کے لیے ایک اہم غذائیت کا کردار ادا کرتی ہے جو کہ اس کی طرح بالغ خواتین کو غذائیت فراہم کرتی ہے۔ کم خطرے والی خوراک میں مشغول ہو کر trogenous مرکبات۔ یہ دریافت اہم وبائی امراض کے نتائج رکھتی ہے، کیونکہ خواتین اپنی متوقع عمر، سرگرمی اور تولیدی پیداوار میں اضافہ کرتی ہیں، یہ سب ویکٹر کی صلاحیت کو متاثر کرتے ہیں۔ مزید برآں، یہ رویہ مستقبل کے ویکٹر مینجمنٹ پروگراموں کا ہدف ہو سکتا ہے۔
پوسٹ ٹائم: جولائی 07-2022