Nature.com پر جانے کا شکریہ۔آپ جس براؤزر کا ورژن استعمال کر رہے ہیں اسے محدود CSS سپورٹ حاصل ہے۔بہترین تجربے کے لیے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ آپ ایک اپ ڈیٹ شدہ براؤزر استعمال کریں (یا انٹرنیٹ ایکسپلورر میں مطابقت موڈ کو غیر فعال کریں)۔اس دوران، مسلسل تعاون کو یقینی بنانے کے لیے، ہم سائٹ کو بغیر اسٹائل اور جاوا اسکرپٹ کے رینڈر کریں گے۔
بے قابو خون بہنا موت کی سب سے بڑی وجوہات میں سے ایک ہے۔تیزی سے ہیموسٹاسس حاصل کرنا لڑائی، ٹریفک حادثات، اور موت کو کم کرنے کے آپریشن کے دوران ابتدائی طبی امداد کے طور پر موضوع کی بقا کو یقینی بناتا ہے۔نینو پورس فائبر ریئنفورسڈ کمپوزٹ اسکافولڈ (NFRCS) ایک سادہ ہیموسٹیٹک فلم بنانے والی کمپوزیشن (HFFC) سے اخذ کیا گیا ہے جو ایک مسلسل مرحلے کے طور پر ہیموسٹاسس کو متحرک اور بڑھا سکتا ہے۔NFRCS کی ترقی ڈریگن فلائی کے بازو کے ڈیزائن پر مبنی ہے۔ڈریگن فلائی ونگ کا ڈھانچہ قاطع اور طول بلد پروں پر مشتمل ہوتا ہے، اور مائیکرو اسٹرکچر کی سالمیت کو برقرار رکھنے کے لیے پروں کی جھلی ایک دوسرے سے جڑی ہوتی ہے۔HFFC نینو میٹر موٹائی کی فلم کے ساتھ فائبر کی سطح کو یکساں طور پر کوٹ کرتا ہے اور تصادفی طور پر تقسیم شدہ کپاس کی موٹائی (Ct) (منتشر مرحلے) کو نینو پورس ڈھانچہ بنانے کے لیے جوڑتا ہے۔مسلسل اور منتشر مراحل کا امتزاج تجارتی طور پر دستیاب مصنوعات کے مقابلے مصنوعات کی قیمت کو دس گنا کم کر دیتا ہے۔ترمیم شدہ این ایف آر سی ایس (ٹیمپون یا کلائی بینڈ) کو مختلف بائیو میڈیکل ایپلی کیشنز میں استعمال کیا جا سکتا ہے۔Vivo مطالعات میں یہ نتیجہ اخذ کیا گیا ہے کہ ترقی یافتہ Cp NFRCS درخواست کی جگہ پر جمنے کے عمل کو متحرک اور بڑھاتا ہے۔این ایف آر سی ایس مائیکرو ماحولیات کو ماڈیول کر سکتا ہے اور سیلولر سطح پر اپنے نینو پورس ڈھانچے کی وجہ سے کام کر سکتا ہے جس کے نتیجے میں زخم کے زخم کے ماڈل میں زخم کی بہتر شفا یابی ہوتی ہے۔
لڑائی، دوران آپریشن اور ہنگامی حالات کے دوران بے قابو خون بہنا زخمیوں کی زندگی کے لیے سنگین خطرہ بن سکتا ہے۔یہ حالات مزید پردیی عروقی مزاحمت میں مجموعی طور پر اضافے کا باعث بنتے ہیں، جس سے ہیمرج جھٹکا لگتا ہے۔سرجری کے دوران اور بعد میں خون بہنے پر قابو پانے کے لیے مناسب اقدامات کو ممکنہ طور پر جان لیوا سمجھا جاتا ہے 2,3۔بڑی نالیوں کو پہنچنے والے نقصان سے خون کا بہت زیادہ نقصان ہوتا ہے، جس کے نتیجے میں موت کی شرح 50% لڑائی میں اور 31% سرجری کے دوران ہوتی ہے۔بڑے پیمانے پر خون کی کمی جسم کے حجم میں کمی کا باعث بنتی ہے، جس سے کارڈیک آؤٹ پٹ کم ہوتا ہے۔کل پردیی عروقی مزاحمت میں اضافہ اور مائکرو سرکولیشن کی ترقی پسند خرابی زندگی کی مدد کرنے والے اعضاء میں ہائپوکسیا کا باعث بنتی ہے۔اگر حالت مؤثر مداخلت کے بغیر جاری رہتی ہے تو ہیمرج جھٹکا ہوسکتا ہے 1,4,5۔دیگر پیچیدگیوں میں ہائپوتھرمیا اور میٹابولک ایسڈوسس کے بڑھنے کے ساتھ ساتھ جمنے کی خرابی بھی شامل ہے جو جمنے کے عمل میں رکاوٹ ہے۔شدید ہیمرج جھٹکا موت کے زیادہ خطرے سے وابستہ ہے 6,7,8۔گریڈ III (ترقی پسند) جھٹکے میں، انٹراپریٹو اور پوسٹ آپریٹو بیماری اور اموات کے دوران مریض کی بقا کے لیے خون کی منتقلی ضروری ہے۔مندرجہ بالا تمام جان لیوا حالات پر قابو پانے کے لیے، ہم نے ایک نینو پورس فائبر ریئنفورسڈ کمپوزٹ اسکافولڈ (NFRCS) تیار کیا ہے جو پانی میں حل پذیر ہیموسٹیٹک پولیمر کے امتزاج کا استعمال کرتے ہوئے کم سے کم پولیمر ارتکاز (0.5%) کا استعمال کرتا ہے۔
فائبر ری انفورسمنٹ کے استعمال سے سستی مصنوعات تیار کی جا سکتی ہیں۔تصادفی طور پر ترتیب دیئے گئے ریشے ڈریگن فلائی کے پروں کی ساخت سے مشابہت رکھتے ہیں، جو پروں پر افقی اور عمودی دھاریوں سے متوازن ہوتے ہیں۔بازو کی قاطع اور طول بلد رگیں بازو کی جھلی کے ساتھ رابطہ کرتی ہیں (تصویر 1)۔NFRCS بہتر جسمانی اور مکینیکل طاقت کے ساتھ سکیفولڈ سسٹم کے طور پر تقویت یافتہ Ct پر مشتمل ہے (شکل 1)۔سستی اور کاریگری کی وجہ سے، سرجن آپریشنز اور ڈریسنگ کے دوران سوتی دھاگے کے گیجز (Ct) کو استعمال کرنے کو ترجیح دیتے ہیں۔ لہذا، اس کے متعدد فوائد پر غور کرتے ہوئے، بشمول> 90% کرسٹل لائن سیلولوز (ہیموسٹیٹک سرگرمی کو بڑھانے میں مدد کرتا ہے)، Ct کو NFRCS9,10 کے سکیلیٹل سسٹم کے طور پر استعمال کیا گیا۔ لہذا، اس کے متعدد فوائد پر غور کرتے ہوئے، بشمول> 90% کرسٹل لائن سیلولوز (ہیموسٹیٹک سرگرمی کو بڑھانے میں مدد کرتا ہے)، Ct کو NFRCS9,10 کے سکیلیٹل سسٹم کے طور پر استعمال کیا گیا۔ Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристаллической целюлозы (участвествует в ивности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10۔ لہذا، اس کے بہت سے فوائد کو دیکھتے ہوئے، بشمول>90% کرسٹل لائن سیلولوز (بڑھتی ہوئی ہیموسٹیٹک سرگرمی میں شامل)، Ct کو NFRCS سکیلیٹل سسٹم 9,10 کے طور پر استعمال کیا گیا۔因此，考虑到它的多重益处，包括> %90系统.因此，考虑到它的多重益处，包括>90%لہذا، اس کے بہت سے فوائد کو دیکھتے ہوئے، بشمول 90% سے زیادہ کرسٹل لائن سیلولوز (ہیموسٹیٹک سرگرمی کو بڑھانے میں مدد کرتا ہے)، Ct کو NFRCS9,10 کے لیے ایک سہار کے طور پر استعمال کیا گیا۔سی ٹی کو سطحی طور پر لیپت کیا گیا تھا (نینو موٹی فلم کی تشکیل کا مشاہدہ کیا گیا تھا) اور ہیموسٹیٹک فلم بنانے والی ساخت (HFFC) کے ساتھ آپس میں جڑا ہوا تھا۔HFFC ایک میٹریجل کی طرح کام کرتا ہے، تصادفی طور پر Ct کو ایک ساتھ رکھتا ہے۔تیار شدہ ڈیزائن منتشر مرحلے کے اندر تناؤ کو منتقل کرتا ہے (تقویت دینے والے ریشوں)۔کم سے کم پولیمر ارتکاز کا استعمال کرتے ہوئے اچھی مکینیکل طاقت کے ساتھ نینو پورس ڈھانچے حاصل کرنا مشکل ہے۔اس کے علاوہ، مختلف بائیو میڈیکل ایپلی کیشنز کے لیے مختلف سانچوں کو اپنی مرضی کے مطابق بنانا آسان نہیں ہے۔
اعداد و شمار ڈریگن فلائی ونگ کی ساخت (A) پر مبنی NFRCS ڈیزائن کا خاکہ دکھاتا ہے۔یہ تصویر ڈریگن فلائی کے پروں کے ڈھانچے کی تقابلی مشابہت دکھاتی ہے (ونگ کی ایک دوسرے سے جڑی ہوئی اور طول بلد رگیں آپس میں جڑی ہوئی ہیں) اور Cp NFRCS (B) کا کراس سیکشنل فوٹو مائکروگراف۔NFRCS کی منصوبہ بندی کی نمائندگی۔
مندرجہ بالا حدود کو دور کرنے کے لیے HFFC کو مسلسل مرحلے کے طور پر استعمال کرتے ہوئے NFRCs تیار کیے گئے تھے۔HFFC مختلف فلم بنانے والے ہیموسٹیٹک پولیمر پر مشتمل ہے جس میں chitosan (بطور مرکزی ہیموسٹیٹک پولیمر) میتھائل سیلولوز (MC) کے ساتھ، ہائیڈروکسی پروپیل میتھیل سیلولوز (HPMC 50 cp) اور پولی وینیل الکحل (PVA) (125 kDa) ایک سپورٹ پولیمر کے طور پر ہے جو تھرو کو فروغ دیتا ہے۔تشکیلPolyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) کے اضافے نے NFRCS کی نمی جذب کرنے کی صلاحیت کو بہتر کیا۔Polyethylene glycol 400 (PEG 400) بانڈڈ پولیمر مرکب میں پولیمر کراس لنکنگ کو بہتر بنانے کے لیے شامل کیا گیا تھا۔تین مختلف HFFC ہیموسٹیٹک کمپوزیشنز (Cm HFFC، Ch HFFC اور Cp HFFC)، یعنی MC (Cm) کے ساتھ chitosan، HPMC (Ch) کے ساتھ chitosan اور PVA (Cp) کے ساتھ چائٹوسن، Ct پر لاگو کیے گئے تھے۔مختلف ان وٹرو اور ان ویوو کریکٹرائزیشن اسٹڈیز نے NFRCS کی ہیموسٹیٹک اور زخم بھرنے کی سرگرمی کی تصدیق کی ہے۔NFRCS کی طرف سے پیش کردہ جامع مواد کو مخصوص ضروریات کو پورا کرنے کے لیے سہاروں کی مختلف شکلوں کو اپنی مرضی کے مطابق بنانے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
اس کے علاوہ، این ایف آر سی ایس کو ایک پٹی یا رول کے طور پر تبدیل کیا جا سکتا ہے تاکہ نچلے حصے اور جسم کے دیگر حصوں کی چوٹ کے پورے حصے کو کور کیا جا سکے۔خاص طور پر جنگی اعضاء کی چوٹوں کے لیے، ڈیزائن کردہ NFRCS ڈیزائن کو آدھے بازو یا پوری ٹانگ میں تبدیل کیا جا سکتا ہے (ضمنی اعداد و شمار S11)۔این ایف آر سی ایس کو ٹشو گلو کے ساتھ کلائی کا پٹہ بنایا جا سکتا ہے، جسے کلائی کی شدید خودکشی کی چوٹوں سے خون بہنے سے روکنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔ہمارا بنیادی مقصد ایک این ایف آر سی ایس تیار کرنا ہے جس میں ممکن حد تک کم پولیمر ہو جسے ایک بڑی آبادی (غربت کی لکیر سے نیچے) تک پہنچایا جا سکے اور اسے فرسٹ ایڈ کٹ میں رکھا جا سکے۔ڈیزائن میں سادہ، موثر اور اقتصادی، NFRCS مقامی کمیونٹیز کو فائدہ پہنچاتا ہے اور عالمی سطح پر اثر ڈال سکتا ہے۔
Chitosan (سالماتی وزن 80 kDa) اور مرک، بھارت سے خریدے گئے تھے۔Hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp، polyethylene glycol 400 اور methylcellulose Loba Chemie Pvt سے خریدے گئے تھے۔ایل ایل سی، ممبئی۔پولی وینیل الکحل (سالماتی وزن 125 kDa) (87-90% ہائیڈرولائزڈ) نیشنل کیمیکل، گجرات سے خریدا گیا تھا۔Polyvinylpyrrolidine K30 Molychem، ممبئی سے خریدا گیا تھا، جراثیم سے پاک جھاڑیوں کو Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd. سے خریدا گیا تھا، جس میں Milli Q پانی (Direct-Q3 واٹر پیوریفیکیشن سسٹم، مرک، انڈیا) بطور کیریئر تھا۔
NFRCS کو لائو فلائزیشن طریقہ 11,12 کا استعمال کرتے ہوئے تیار کیا گیا تھا۔تمام HFFC کمپوزیشنز (ٹیبل 1) مکینیکل اسٹرر کا استعمال کرتے ہوئے تیار کی گئیں۔مکینیکل اسٹرر پر 800 rpm پر مسلسل ہلاتے ہوئے پانی میں 1% ایسٹک ایسڈ کا استعمال کرتے ہوئے چائٹوسن کا 0.5% محلول تیار کریں۔جدول 1 میں اشارہ کردہ بھاری بھرکم پولیمر کا صحیح وزن چائٹوسن محلول میں شامل کیا گیا اور اس وقت تک ہلایا گیا جب تک کہ واضح پولیمر حل حاصل نہ ہوجائے۔پی وی پی کے 30 اور پی ای جی 400 کو ٹیبل 1 میں بتائی گئی مقدار میں نتیجے میں مرکب میں شامل کیا گیا تھا، اور اس وقت تک ہلچل جاری رکھی گئی جب تک کہ واضح چپچپا پولیمر حل حاصل نہ ہوجائے۔پولیمر محلول کے نتیجے میں غسل کو پولیمر مکسچر سے پھنسے ہوئے ہوا کے بلبلوں کو دور کرنے کے لیے 60 منٹ تک سونیکیٹ کیا گیا تھا۔جیسا کہ ضمنی شکل S1(b) میں دکھایا گیا ہے، Ct کو 5 ملی لیٹر HFFC کے ساتھ 6 کنویں پلیٹ (مولڈ) کے ہر کنویں میں یکساں طور پر تقسیم کیا گیا تھا۔
سی ٹی نیٹ ورک میں HFFC کی یکساں گیلا اور تقسیم کو حاصل کرنے کے لیے چھ کنویں والی پلیٹ کو 60 منٹ کے لیے سونیکیٹ کیا گیا تھا۔پھر چھ کنویں والی پلیٹ کو -20 ° C پر 8-12 گھنٹے کے لیے منجمد کریں۔این ایف آر سی ایس کے مختلف فارمولیشنز کو حاصل کرنے کے لیے منجمد پلیٹوں کو 48 گھنٹوں کے لیے لائفائلائز کیا گیا۔ایک ہی طریقہ کار مختلف اشکال اور ڈھانچے، جیسے ٹیمپون یا بیلناکار ٹیمپون، یا مختلف ایپلی کیشنز کے لیے کوئی دوسری شکل تیار کرنے کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔
درست طریقے سے وزنی چائٹوسن (80 kDa) (3%) کو مقناطیسی محرک کا استعمال کرتے ہوئے 1% acetic ایسڈ میں تحلیل کیا جاتا ہے۔چائٹوسن کے نتیجے میں حل میں 1٪ پی ای جی 400 شامل کیا گیا اور 30 ​​منٹ تک ہلایا گیا۔نتیجے میں حل کو ایک مربع یا مستطیل کنٹینر میں ڈالیں اور -80 ° C پر 12 گھنٹے تک منجمد کریں۔غیر محفوظ Cs13 حاصل کرنے کے لیے منجمد نمونوں کو 48 گھنٹوں کے لیے لائفائلائز کیا گیا۔
ترقی یافتہ NFRCS کو فوئیر ٹرانسفارم انفراریڈ سپیکٹروسکوپی (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR، Tokyo, Japan) کا استعمال کرتے ہوئے تجربات کا نشانہ بنایا گیا تاکہ دوسرے پولیمر کے ساتھ chitosan کی کیمیائی مطابقت کی تصدیق کی جا سکے۔14,15۔تمام جانچے گئے نمونوں میں سے FTIR سپیکٹرا (400 سے 4000 cm-1 کے طیف کی حد کی چوڑائی) 32 سکین کر کے حاصل کیے گئے۔
تمام فارمولیشنوں کے لیے خون کے جذب کی شرح (BAR) کا اندازہ چن ایٹ ال کے بیان کردہ طریقہ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا۔معمولی ترمیم کے ساتھ 16۔تمام مرکبات کے تیار کردہ NFRKs کو ایک ویکیوم اوون میں 105°C پر راتوں رات خشک کیا جاتا تھا تاکہ بقایا سالوینٹ کو نکالا جا سکے۔30 ملی گرام NFRCS (ابتدائی نمونہ وزن - W0) اور 30 ​​mg Ct (مثبت کنٹرول) کو الگ الگ برتنوں میں رکھا گیا تھا جس میں 3.8% سوڈیم سائٹریٹ کا پریمکس تھا۔پہلے سے متعین وقت کے وقفوں پر، یعنی 5، 10، 20، 30، 40 اور 60 سیکنڈ، NFRCS کو ہٹا دیا گیا اور نمونوں کو 30 سیکنڈ کے لیے Ct پر رکھ کر ان کی سطحوں کو غیر جذب شدہ خون سے صاف کیا گیا۔NFRCS 16 کے ذریعے جذب ہونے والے خون کے حتمی وزن کو ہر وقت کے نقطہ پر (W1) سمجھا جاتا تھا۔درج ذیل فارمولے کا استعمال کرتے ہوئے بار فیصد کا حساب لگائیں:
خون کے جمنے کا وقت (بی سی ٹی) کا تعین کیا گیا تھا جیسا کہ وانگ ایٹ ال نے اطلاع دی ہے۔17NFRCS کی موجودگی میں پورے خون (3.8% سوڈیم سائٹریٹ کے ساتھ پہلے سے مکس شدہ چوہے کا خون) کے جمنے کے لیے درکار وقت کو ٹیسٹ کے نمونے کے BCT کے طور پر شمار کیا گیا۔این ایف آر سی ایس کے مختلف اجزاء (30 ملی گرام) 10 ملی لیٹر اسکرو کیپ شیشیوں میں رکھے گئے تھے اور 37 ڈگری سینٹی گریڈ پر انکیوبیٹ کیے گئے تھے۔خون (0.5 ملی لیٹر) شیشی میں شامل کیا گیا تھا اور خون کے جمنے کو چالو کرنے کے لئے 0.2 M CaCl2 کا 0.3 ملی لیٹر شامل کیا گیا تھا۔آخر میں، شیشی کو ہر 15 سیکنڈ میں الٹ دیں (180° تک) جب تک کہ ایک مضبوط جمنا نہ بن جائے۔نمونے کے BCT کا اندازہ فلپس ویلز کی تعداد 17,18 سے لگایا گیا ہے۔BCT کی بنیاد پر، مزید خصوصیات کے مطالعہ کے لیے NFRCS Cm، Ch اور Cp سے دو بہترین کمپوزیشنز کا انتخاب کیا گیا۔
Ch NFRCS اور Cp NFRCS مرکبات کے BCT کا تعین لی ایٹ ال کے بیان کردہ طریقہ کار کو نافذ کرکے کیا گیا تھا۔1915 x 15 mm2 Ch NFRCS، Cp NFRCS، اور Cs (مثبت کنٹرول) کو علیحدہ پیٹری ڈشز (37 °C) میں رکھیں۔3.8% سوڈیم سائٹریٹ پر مشتمل خون کو 0.2 M CaCl2 کے ساتھ 10:1 حجم کے تناسب میں ملایا گیا تاکہ خون جمنے کا عمل شروع ہو سکے۔20 µl 0.2 M CaCl2 چوہے کے خون کے مکسچر کو نمونے کی سطح پر لگایا گیا اور ایک خالی پیٹری ڈش میں رکھا گیا۔کنٹرول Ct کے بغیر خالی پیٹری برتنوں میں خون ڈالا گیا تھا۔0، 3، اور 5 منٹ کے مقررہ وقفوں پر، جمنے کو پریشان کیے بغیر ڈش پر مشتمل نمونے میں 10 ملی لیٹر ڈیونائزڈ (DI) پانی شامل کرکے جمنا بند کریں۔غیر جمع شدہ erythrocytes (erythrocytes) deionized پانی کی موجودگی میں hemolysis سے گزرتے ہیں اور ہیموگلوبن جاری کرتے ہیں۔مختلف ٹائم پوائنٹس (HA(t)) پر ہیموگلوبن کو UV-Vis spectrophotometer کا استعمال کرتے ہوئے 540 nm (λmax ہیموگلوبن) پر ناپا گیا۔10 ملی لیٹر ڈیونائزڈ پانی میں 20 μl خون کے 0 منٹ میں ہیموگلوبن (AH(0)) کے مطلق جذب کو ایک حوالہ معیار کے طور پر لیا گیا تھا۔جمے ہوئے خون کے رشتہ دار ہیموگلوبن اپٹیک (RHA) کا حساب خون کے اسی بیچ کا استعمال کرتے ہوئے HA(t)/HA(0) کے تناسب سے کیا گیا۔
ٹیکسچر اینالائزر (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA) کا استعمال کرتے ہوئے NFRK کی خراب ٹشو سے چپکنے والی خصوصیات کا تعین کیا گیا۔ایک کھلی نیچے والی بیلناکار ڈش کو سور کے گوشت کی جلد کے اندر سے دبائیں (چربی کی تہہ کے بغیر)۔نمونے (Ch NFRCS اور Cp NFRCS) کو کینولا کے ذریعے بیلناکار سانچوں میں لاگو کیا گیا تاکہ سور کی جلد میں چپکنے والی پیدا ہو۔کمرے کے درجہ حرارت (RT) (25 ° C.) پر 3 منٹ کے انکیوبیشن کے بعد، NFRCS چپکنے والی طاقت 0.5 ملی میٹر/سیکنڈ کی مستقل شرح سے ریکارڈ کی گئی۔
سرجیکل سیلانٹس کی اہم خصوصیت خون کی کمی کو کم کرتے ہوئے خون کے جمنے کو بڑھانا ہے۔NFRCS میں نقصان کے بغیر جمنے کا اندازہ پہلے شائع شدہ طریقہ کو استعمال کرتے ہوئے معمولی ترمیم کے ساتھ کیا گیا تھا 19۔ایک مائکرو سینٹری فیوج ٹیوب (2 ملی لیٹر) (اندرونی قطر 10 ملی میٹر) سینٹرفیوج ٹیوب کے ایک طرف 8 × 5 ملی میٹر 2 سوراخ کے ساتھ بنائیں (کھلے زخم کی نمائندگی کرتے ہوئے)۔NFRCS کا استعمال کھلنے کو بند کرنے کے لیے کیا جاتا ہے اور بیرونی کناروں کو سیل کرنے کے لیے ٹیپ کا استعمال کیا جاتا ہے۔مائکرو سینٹرفیوج ٹیوب میں 0.2 M CaCl2 کا 20 µl شامل کریں جس میں 3.8% سوڈیم سائٹریٹ پریمکس ہو۔10 منٹ کے بعد، مائیکرو سینٹری فیوج ٹیوبیں برتنوں سے ہٹا دی گئیں اور برتنوں کے بڑے پیمانے پر اضافے کا تعین NFRK (n = 3) سے خون کے بہاؤ کی وجہ سے کیا گیا۔خون کی کمی Ch NFRCS اور Cp NFRCS کا موازنہ Cs سے کیا گیا۔
NFRCS کی گیلی سالمیت کا تعین مشرا اور چودھری 21 کے ذریعہ بیان کردہ طریقہ کی بنیاد پر کیا گیا تھا جس میں معمولی ترمیم کی گئی تھی۔NFRCS کو 100 ملی لیٹر ایرلن میئر فلاسک میں 50 ملی لیٹر پانی کے ساتھ رکھیں اور اوپر بنے بغیر 60 سیکنڈ تک گھومیں۔جمع کی بنیاد پر جسمانی سالمیت کے لیے نمونوں کا بصری معائنہ اور ترجیح۔
HFFC سے Ct کی پابند طاقت کا مطالعہ پہلے شائع شدہ طریقوں کو معمولی ترمیم کے ساتھ کیا گیا تھا۔سطح کی کوٹنگ کی سالمیت کا اندازہ ملی کیو واٹر (Ct) کی موجودگی میں NFRK کو صوتی لہروں (بیرونی محرک) سے بے نقاب کرکے کیا گیا۔ترقی یافتہ NFRCS Ch NFRCS اور Cp NFRCS کو پانی سے بھرے ہوئے بیکر میں رکھا گیا تھا اور بالترتیب 1، 2، 3، 4، 5، 6، 7، 8، 9، 10، اور 30 ​​منٹ کے لیے سونیکیٹ کیا گیا تھا۔خشک ہونے کے بعد، این ایف آر سی ایس کے ابتدائی اور آخری وزن کے درمیان فیصد کے فرق کو مواد کے فیصد نقصان (HFFC) کا حساب لگانے کے لیے استعمال کیا گیا۔ان وٹرو BCT نے بائنڈنگ طاقت یا سطحی مواد کے نقصان کی مزید حمایت کی۔Ct کے ساتھ HFFC بائنڈنگ کی کارکردگی Ct22 کی سطح پر خون جمنے اور ایک لچکدار کوٹنگ فراہم کرتی ہے۔
تیار شدہ NFRCS کی یکسانیت کا تعین NFRCS کے تصادفی طور پر منتخب عمومی مقامات سے لیے گئے نمونوں (30 mg) کے BCT سے کیا گیا تھا۔NFRCS کی تعمیل کا تعین کرنے کے لیے پہلے بیان کردہ BCT طریقہ کار پر عمل کریں۔پانچوں نمونوں کے درمیان قربت یکساں سطح کی کوریج اور Ct میش میں HFFC جمع کو یقینی بناتی ہے۔
برائے نام خون کے رابطے کے علاقے (NBCA) کا تعین کیا گیا تھا جیسا کہ پہلے کچھ ترمیم کے ساتھ اطلاع دی گئی تھی۔Ct، Ch NFRCS، Cp NFRCS اور Cs کی دو سطحوں کے درمیان 20 µl خون کو کلیمپ کرکے خون کو جمائیں۔1 گھنٹے کے بعد، سٹینٹ کے دونوں حصوں کو الگ کر دیا گیا اور دستی طور پر جمنے کے علاقے کی پیمائش کی۔تین تکرار کی اوسط قدر کو NBCA NFRCS19 سمجھا جاتا تھا۔
ڈائنامک ویپر سورپشن (DVS) تجزیہ کا استعمال این ایف آر سی ایس کی تاثیر کو جانچنے کے لیے کیا گیا تھا تاکہ بیرونی ماحول سے یا چوٹ کی جگہ سے پانی جذب کیا جا سکے جو جمنا شروع کرنے کے لیے ذمہ دار ہے۔DVS ±0.1 µg کے بڑے پیمانے پر ریزولوشن کے ساتھ انتہائی حساس توازن کا استعمال کرتے ہوئے کشش ثقل کے لحاظ سے نمونے میں بخارات کے اخراج اور نقصان کا جائزہ یا ریکارڈ کرتا ہے۔ایک جزوی بخارات کا دباؤ (متعلقہ نمی) نمونے کے ارد گرد الیکٹرانک ماس فلو کنٹرولر کے ذریعے سیر شدہ اور خشک کیریئر گیسوں کو ملا کر پیدا کیا جاتا ہے۔ یورپی فارماکوپیا کے رہنما خطوط کے مطابق، نمونوں کے ذریعے نمی کے اخراج کے فیصد کی بنیاد پر، نمونوں کو 4 زمروں میں درجہ بندی کیا گیا تھا (0–0.012% w/w− non-hygroscopic، 0.2–2% w/w تھوڑا سا ہائیگروسکوپک، 2–15% اعتدال پسند، اور %2-15% hygrospic> very hygroscopic. یورپی فارماکوپیا کے رہنما خطوط کے مطابق، نمونوں کے ذریعے نمی کے اخراج کے فیصد کی بنیاد پر، نمونوں کو 4 زمروں میں درجہ بندی کیا گیا تھا (0–0.012% w/w− non-hygroscopic، 0.2–2% w/w تھوڑا سا ہائیگروسکوپک، 2–15 % اعتدال پسند اور %hygroscopic> very hydroscopic.یورپی فارماکوپیا کی سفارشات کے مطابق، نمونوں کی طرف سے نمی جذب کرنے کے فیصد پر منحصر ہے، نمونوں کو 4 زمروں میں تقسیم کیا گیا تھا (0-0.012% w/w – غیر ہائیگروسکوپک، 0.2–2% w/w تھوڑا سا ہائیگروسکوپک، %-fteen)۔% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23۔ % معتدل ہائیگروسکوپک اور> 15% انتہائی ہائیگروسکوپک)23۔根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w-w-2 湀典指南微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23۔根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比 样品 分为 分为 分为 分为 分为 分为 类 %0-2性 、 、 、 0.2-2٪ W/w 轻微 、 2-15٪ 适度 吸湿 ，> 15 %非常吸湿） 23۔یورپی فارماکوپیا کی سفارشات کے مطابق، نمونوں کو نمونے کے ذریعے جذب ہونے والی نمی کے فیصد کے لحاظ سے 4 کلاسوں میں تقسیم کیا گیا ہے (0-0.012% وزن کے لحاظ سے - غیر ہائیگروسکوپک، 0.2-2% وزن کے لحاظ سے تھوڑا سا ہائیگروسکوپک، 2-15% وزن کے لحاظ سے)۔% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % معتدل ہائیگروسکوپک،> 15% بہت ہائیگروسکوپک) 23۔NFCS X NFCS اور TsN NFCS کی ہائگروسکوپک کارکردگی کا تعین ایک تجزیہ کار DVS TA TGA Q5000 SA پر کیا گیا تھا۔اس عمل کے دوران، رن ٹائم، رشتہ دار نمی (RH)، اور ریئل ٹائم نمونے کا وزن 25°C24 پر حاصل کیا گیا۔نمی کی مقدار کا حساب درج ذیل مساوات کا استعمال کرتے ہوئے درست NFRCS بڑے پیمانے پر تجزیہ کے ذریعے کیا جاتا ہے۔
MC NFRCS نمی ہے۔m1 - NSAIDs کا خشک وزن۔m2 دیئے گئے RH پر حقیقی وقت کا NFRCS ماس ہے۔
کل سطح کے رقبے کا تخمینہ مائع نائٹروجن کے ساتھ 25 ° C پر نمونوں کو 10 h (<7 × 10–3 Torr) کے لیے خالی کرنے کے بعد نائٹروجن جذب کرنے والے تجربے کا استعمال کرتے ہوئے لگایا گیا۔ کل سطح کے رقبے کا تخمینہ مائع نائٹروجن کے ساتھ 25 ° C پر نمونوں کو 10 h (<7 × 10–3 Torr) کے لیے خالی کرنے کے بعد نائٹروجن جذب کرنے والے تجربے کا استعمال کرتے ہوئے لگایا گیا۔ Общая площадь поверхности оценивалась с помощью эксперимента по адсорбции азота жидким азотом ° ние 10 ч (< 7 × 10–3 torр)۔ 10 گھنٹے (<7 × 10–3 ٹور) کے لیے نمونے 25 ° C پر خالی کیے جانے کے بعد سطح کے کل رقبے کا اندازہ مائع نائٹروجن کے ساتھ نائٹروجن جذب کرنے والے تجربے سے لگایا گیا تھا۔25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Tor25 ڈگری سینٹی گریڈ پر Общая площадь поверхности оценивалась с использованием экспериментов по адсорбции азота жидким азотом посенивалованием 0 часов при 25°C (<7 × 10-3 торр)۔ 25 ° C (<7 x 10-3 torr) پر 10 گھنٹے کے لیے نمونے خالی کیے جانے کے بعد سطح کے کل رقبے کا اندازہ مائع نائٹروجن کے ساتھ نائٹروجن جذب کرنے کے تجربات سے لگایا گیا۔RS 232 سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے NOVA 1000e، آسٹریا کے Quantachrome کے ساتھ کل سطح کا رقبہ، pore حجم اور NFRCS pore سائز کا تعین کیا گیا۔
پورے خون سے 5% RBCs (خارج کے طور پر پتلا) تیار کریں۔پھر ایچ ایف ایف سی (0.25 ملی لیٹر) کا ایک ایلی کوٹ 96 کنویں کی پلیٹ میں اور 5٪ آر بی سی ماس (0.1 ملی لیٹر) میں منتقل کریں۔مکسچر کو 37 ° C پر 40 منٹ تک سینکیں۔خون کے سرخ خلیات اور سیرم کے مرکب کو مثبت کنٹرول سمجھا جاتا تھا، اور نمکین اور سرخ خون کے خلیات کے مرکب کو منفی کنٹرول سمجھا جاتا تھا۔Hemagglutination کا تعین Stajitzky پیمانے کے مطابق کیا گیا تھا۔مجوزہ ترازو مندرجہ ذیل ہیں: + + + + گھنے دانے دار مجموعے؛+ + + مڑے ہوئے کناروں کے ساتھ ہموار نیچے پیڈ؛+ + پھٹے ہوئے کناروں کے ساتھ ہموار نیچے پیڈ؛+ ہموار پیڈ کے کناروں کے گرد تنگ سرخ حلقے؛نچلے کنویں کے بیچ میں (منفی) مجرد سرخ بٹن 12۔
انٹرنیشنل آرگنائزیشن فار اسٹینڈرڈائزیشن (ISO) (ISO10993-4, 1999)26,27 کے طریقہ کار کے مطابق NFRCS کی hemocompatibility کا مطالعہ کیا گیا۔سنگھ ایٹ ال کے ذریعہ بیان کردہ کشش ثقل کا طریقہ۔NFRCS کی موجودگی میں یا اس کی سطح پر تھرومبس کی تشکیل کا اندازہ لگانے کے لیے معمولی تبدیلیاں کی گئیں۔500 ملی گرام Cs، Ch NFRCS اور Cp NFRCS کو فاسفیٹ بفرڈ نمکین (PBS) میں 24 گھنٹے 37 ° C پر رکھا گیا تھا۔24 گھنٹے کے بعد، پی بی ایس کو ہٹا دیا گیا اور این ایف آر سی ایس کو 2 ملی لیٹر خون کے ساتھ علاج کیا گیا جس میں 3.8 فیصد سوڈیم سائٹریٹ تھا۔NFRCS کی سطح پر، انکیوبیٹڈ نمونوں میں 0.1 M CaCl2 کا 0.04 ملی لیٹر شامل کریں۔45 منٹ کے بعد، جمنے کو روکنے کے لیے 5 ملی لیٹر آست پانی ڈالا گیا۔NFRK کی سطح پر جمے ہوئے خون کا علاج 36-38% formaldehyde محلول سے کیا گیا۔formaldehyde کے ساتھ طے شدہ کلاٹس کو خشک کیا گیا اور وزن کیا گیا۔تھرومبوسس کی فیصد کا اندازہ بغیر خون اور نمونے (منفی کنٹرول) اور خون کے ساتھ گلاس (مثبت کنٹرول) کے بغیر شیشے کے وزن کا حساب لگا کر لگایا گیا۔
ابتدائی تصدیق کے طور پر، نمونوں کو آپٹیکل مائکروسکوپ کے تحت دیکھا گیا تاکہ HFFC سطح کی کوٹنگ، Ct آپس میں جڑے ہوئے، اور Ct نیٹ ورک کے سوراخوں کی تشکیل کی صلاحیت کو سمجھ سکیں۔NFRCS سے Ch اور Cp کے پتلے حصوں کو اسکیلپل بلیڈ سے تراشا گیا تھا۔نتیجے کے حصے کو شیشے کی سلائڈ پر رکھا گیا تھا، ایک کور سلپ سے ڈھکا ہوا تھا، اور کناروں کو گلو کے ساتھ طے کیا گیا تھا۔تیار شدہ سلائیڈوں کو آپٹیکل مائکروسکوپ کے نیچے دیکھا گیا اور مختلف میگنیفیکیشنز پر تصاویر لی گئیں۔
Ct نیٹ ورکس میں پولیمر کے جمع ہونے کو رائس ایٹ ال کے بیان کردہ طریقہ کی بنیاد پر فلوروسینس مائکروسکوپی کا استعمال کرتے ہوئے تصور کیا گیا تھا۔ فارمولیشن کے لیے استعمال ہونے والی HFFC کمپوزیشن کو فلوروسینٹ ڈائی (امرانتھ) کے ساتھ ملایا گیا تھا، اور NFRCS (Ch & Cp) کو پہلے بیان کردہ طریقہ کے مطابق تیار کیا گیا تھا۔ فارمولیشن کے لیے استعمال ہونے والی HFFC کمپوزیشن کو فلوروسینٹ ڈائی (امرانتھ) کے ساتھ ملایا گیا تھا، اور NFRCS (Ch & Cp) کو پہلے بیان کردہ طریقہ کے مطابق تیار کیا گیا تھا۔فارمولیشن کے لیے استعمال ہونے والی HFFC کمپوزیشن کو فلوروسینٹ ڈائی (امرانتھ) کے ساتھ ملایا گیا تھا اور NFRCS (Ch اور Cp) کو پہلے بیان کردہ طریقہ کے مطابق حاصل کیا گیا تھا۔将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制。将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并按照前面提到的方法制。فارمولیشن میں استعمال ہونے والی HFFC کمپوزیشن کو فلوروسینٹ ڈائی (Amaranth) کے ساتھ ملایا گیا تھا اور NFRCS (Ch اور Cp) حاصل کیا گیا تھا، جیسا کہ پہلے ذکر کیا گیا ہے۔NFRK کے پتلے حصے حاصل کردہ نمونوں سے کاٹے گئے، شیشے کی سلائیڈوں پر رکھے گئے، اور کور سلپس سے ڈھانپ دیے گئے۔سبز فلٹر (310-380 nm) کا استعمال کرتے ہوئے فلوروسینٹ مائکروسکوپ کے نیچے تیار سلائیڈوں کا مشاہدہ کریں۔Ct تعلقات اور Ct نیٹ ورک میں اضافی پولیمر جمع کو سمجھنے کے لیے تصاویر 4x میگنیفیکیشن پر لی گئیں۔
NFRCS Ch اور Cp کی سطحی ٹپوگرافی کا تعین ایک اٹامک فورس مائیکروسکوپ (AFM) کے ساتھ انتہائی تیز ٹی ای ایس پی کینٹیلیور کے ساتھ ٹیپنگ موڈ میں کیا گیا تھا: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan۔سطح کی کھردری کا تعین سافٹ ویئر (اسکیننگ پروب امیج پروسیسر) کا استعمال کرتے ہوئے روٹ میڈین اسکوائر (RMS) سے کیا گیا تھا۔سطح کی یکسانیت کی جانچ کرنے کے لیے مختلف NFRCS مقامات کو 3D امیجز پر پیش کیا گیا تھا۔کسی مخصوص علاقے کے لیے اسکور کے معیاری انحراف کو سطح کی کھردری کے طور پر بیان کیا جاتا ہے۔RMS مساوات کا استعمال NFRCS31 کی سطح کی کھردری کو درست کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔
FESEM پر مبنی مطالعات FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo کا استعمال کرتے ہوئے Ch NFRCS اور Cp NFRCS کی سطحی شکل کو سمجھنے کے لیے کی گئیں، جس نے Cm NFRCS سے بہتر BCT ظاہر کیا۔FESEM مطالعہ Zhao et al کے بیان کردہ طریقہ کے مطابق کیا گیا تھا۔32 معمولی ترامیم کے ساتھ۔NFRCS 20 سے 30 mg Ch NFRCS اور Cp NFRCS کو چوہے کے خون کے ساتھ 20 μl 3.8% سوڈیم سائٹریٹ کے ساتھ پہلے سے مکس کیا گیا تھا۔0.2 M CaCl2 کا 20 μl خون کے علاج شدہ نمونوں میں جمنے کو شروع کرنے کے لئے شامل کیا گیا تھا اور نمونوں کو کمرے کے درجہ حرارت پر 10 منٹ تک انکیوبیٹ کیا گیا تھا۔اس کے علاوہ، نمکین کے ساتھ کلی کر کے NFRCS کی سطح سے اضافی erythrocytes کو ہٹا دیا گیا تھا۔
اس کے بعد کے نمونوں کو 0.1% گلوٹرالڈہائیڈ کے ساتھ علاج کیا گیا اور پھر نمی کو دور کرنے کے لیے گرم ہوا کے تندور میں 37 ° C پر خشک کیا گیا۔خشک نمونوں کو لیپت کیا گیا اور 32 کا تجزیہ کیا گیا۔تجزیہ کے دوران حاصل کی گئی دیگر تصاویر میں انفرادی کپاس کے ریشوں کی سطح پر جمنے کی تشکیل، Ct کے درمیان پولیمر جمع، erythrocyte morphology (شکل)، کلٹ کی سالمیت، اور NFRCS کی موجودگی میں erythrocyte morphology تھیں۔علاج نہ کیے جانے والے NFRCS علاقوں اور Ch اور Cp سے علاج شدہ NFRCS علاقوں کو خون سے بھرا ہوا عنصری آئنوں (سوڈیم، پوٹاشیم، نائٹروجن، کیلشیم، میگنیشیم، زنک، کاپر اور سیلینیم) کے لیے اسکین کیا گیا۔علاج شدہ اور غیر علاج شدہ نمونوں کے درمیان عنصری آئن کے فیصد کا موازنہ کریں تاکہ کلٹ کی تشکیل اور کلٹ کی یکسانیت کے دوران عنصری آئن کے جمع ہونے کو سمجھ سکیں۔
Ct سطح پر Cp HFFC سطح کی کوٹنگ کی موٹائی کا تعین FESEM کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔سی پی این ایف آر سی ایس کے کراس سیکشنز کو فریم ورک سے کاٹ کر اسپٹر لیپت کیا گیا تھا۔FESEM کے ذریعہ اسپٹر کوٹنگ کے نمونے دیکھے گئے اور سطح کی کوٹنگ کی موٹائی 34 , 35 , 36 ناپی گئی۔
ایکس رے مائیکرو سی ٹی ہائی ریزولوشن 3D غیر تباہ کن امیجنگ فراہم کرتا ہے اور آپ کو NFRK کے اندرونی ساختی انتظامات کا مطالعہ کرنے کی اجازت دیتا ہے۔مائیکرو-سی ٹی نمونے میں موجود ایکس رے کے مقامی لکیری کشندگی کے گتانک کو ریکارڈ کرنے کے لیے نمونے سے گزرنے والی ایکس رے بیم کا استعمال کرتا ہے، جس سے مورفولوجیکل معلومات حاصل کرنے میں مدد ملتی ہے۔NFRCS37,38,39 کی موجودگی میں جذب کی کارکردگی اور خون کے جمنے کو سمجھنے کے لیے Cp NFRCS اور خون سے علاج شدہ Cp NFRCS میں Ct کے اندرونی مقام کا مائیکرو-CT کے ذریعے معائنہ کیا گیا۔خون کے علاج شدہ اور غیر علاج شدہ Cp NFRCS نمونوں کے 3D ڈھانچے کو مائیکرو-CT (V|tome|x S240, Phoenix, Germany) کا استعمال کرتے ہوئے دوبارہ تشکیل دیا گیا۔VG STUDIO-MAX سافٹ ویئر ورژن 2.2 کا استعمال کرتے ہوئے، NFRCS کے لیے 3D تصاویر تیار کرنے کے لیے مختلف زاویوں (مثالی طور پر 360° کوریج) سے کئی ایکسرے تصاویر لی گئیں۔جمع کردہ پروجیکشن ڈیٹا کو متعلقہ سادہ 3D اسکین آئی پی اکیڈمک سافٹ ویئر کا استعمال کرتے ہوئے 3D والیومیٹرک امیجز میں دوبارہ تشکیل دیا گیا تھا۔
اس کے علاوہ، جمنے کی تقسیم کو سمجھنے کے لیے، خون کا جمنا شروع کرنے کے لیے 20 µl پری مکسڈ سائٹریٹڈ خون اور 20 µl 0.2 M CaCl2 کو NFRCS میں شامل کیا گیا۔تیار شدہ نمونے سخت ہونے کے لیے چھوڑ دیے جاتے ہیں۔NFRK کی سطح کو 0.5% glutaraldehyde کے ساتھ علاج کیا گیا اور اسے 30-40 ° C پر 30 منٹ تک گرم ہوا کے تندور میں خشک کیا گیا۔NFRCS پر بننے والے خون کے جمنے کو اسکین کیا گیا، دوبارہ تعمیر کیا گیا، اور خون کے جمنے کی ایک 3D تصویر دیکھی گئی۔
معمولی ترمیم کے ساتھ پہلے بیان کردہ طریقہ کا استعمال کرتے ہوئے Cp NFRCS (Ch NFRCS کے مقابلے میں بہترین) پر اینٹی بیکٹیریل اسسیس کیے گئے تھے۔Cp NFRCS اور Cp HFFC کی اینٹی بیکٹیریل سرگرمی کا تعین تین مختلف ٹیسٹ مائکروجنزموں [S.aureus (gram-positive bacteria)، E.coli (gram-negative bacteria) اور سفید Candida (C.albicans)] ایک انکیوبیٹر میں پیٹری ڈشوں میں اگر پر اگنے سے کیا گیا تھا۔آگر میڈیم پر 105-106 CFU ml-1 کے ارتکاز میں 50 ملی لیٹر پتلا بیکٹیریل کلچر سسپنشن کو یکساں طور پر ٹیکہ لگائیں۔میڈیم کو پیٹری ڈش میں ڈالیں اور اسے مضبوط ہونے دیں۔آگر پلیٹ کی سطح پر HFFC سے بھرنے کے لیے کنویں بنائے گئے تھے (HFFC کے لیے 3 کنویں اور منفی کنٹرول کے لیے 1)۔200 µl HFFC 3 کنویں میں اور 200 µl pH 7.4 PBS چوتھے کنویں میں شامل کریں۔پیٹری ڈش کے دوسری طرف، ٹھوس آگر پر 12 ملی میٹر Cp NFRCS ڈسک رکھیں اور PBS (pH 7.4) سے نم کریں۔Ciprofloxacin، ampicillin اور fluconazole گولیاں Staphylococcus aureus، Escherichia coli اور Candida albicans کے حوالے سے معیارات سمجھی جاتی ہیں۔دستی طور پر روک کے زون کی پیمائش کریں اور روک کے زون کی ڈیجیٹل تصویر لیں۔
ادارہ جاتی اخلاقی منظوری کے بعد، یہ مطالعہ جنوبی ہندوستان میں منی پال، کرناٹک کے کستوربا میڈیکل کالج آف ایجوکیشن اینڈ ریسرچ میں کیا گیا۔ان وٹرو TEG تجرباتی پروٹوکول کا جائزہ لیا گیا ہے اور کستوربا میڈیکل کالج، منی پال، کرناٹک کی ادارہ جاتی اخلاقیات کمیٹی (IEC: 674/2020) نے اس کی منظوری دی ہے۔مضامین کو ہسپتال کے بلڈ بینک سے رضاکارانہ خون کے عطیہ دہندگان (عمر 18 سے 55 سال) سے بھرتی کیا گیا تھا۔اس کے علاوہ، خون کے نمونے جمع کرنے کے لیے رضاکاروں سے باخبر رضامندی کا فارم حاصل کیا گیا۔مقامی TEG (N-TEG) ​​کا استعمال سوڈیم سائٹریٹ کے ساتھ مل کر پورے خون پر Cp HFFC فارمولیشن کے اثر کا مطالعہ کرنے کے لیے کیا گیا تھا۔N-TEG کو پوائنٹ آف کیئر ریسیسیٹیشن میں اس کے کردار کے لیے بڑے پیمانے پر پہچانا جاتا ہے، جو نتائج میں طبی لحاظ سے اہم تاخیر کے امکانات کی وجہ سے معالجین کے لیے مسائل پیدا کرتا ہے (معمول کے کوگولیشن ٹیسٹ)۔N-TEG تجزیہ پورے خون کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا۔تمام شرکاء سے باخبر رضامندی اور تفصیلی طبی تاریخ حاصل کی گئی۔اس مطالعہ میں ہیموسٹیٹک یا تھرومبوٹک پیچیدگیوں جیسے حمل / بعد از پیدائش یا جگر کی بیماری والے شرکاء کو شامل نہیں کیا گیا تھا۔منشیات لینے والے مضامین جو جمنے کے جھرن کو متاثر کرتے ہیں انہیں بھی مطالعہ سے خارج کردیا گیا تھا۔تمام شرکاء پر معیاری طریقہ کار کے مطابق بنیادی لیبارٹری ٹیسٹ (ہیموگلوبن، پروتھرومبن ٹائم، ایکٹیویٹڈ تھروموبلاسٹن اور پلیٹلیٹ کا شمار) کئے گئے۔N-TEG خون کے جمنے کی viscoelasticity، ابتدائی جمنے کی ساخت، ذرات کا تعامل، جمنے کی مضبوطی، اور کلٹ lysis کا تعین کرتا ہے۔N-TEG تجزیہ کئی سیلولر عناصر اور پلازما کے اجتماعی اثرات پر گرافیکل اور عددی ڈیٹا فراہم کرتا ہے۔N-TEG تجزیہ Cp HFFC کی دو مختلف جلدوں (10 µl اور 50 µl) پر کیا گیا تھا۔نتیجے کے طور پر، سائٹرک ایسڈ کے ساتھ پورے خون کا 1 ملی لیٹر Cp HFFC کے 10 μl میں شامل کیا گیا۔TEG ڈش پر مشتمل 20 µl 0.2 M CaCl2 میں 1 ملی لیٹر (Cp HFFC + citrated خون)، 340 µl ملا ہوا خون شامل کریں۔اس کے بعد، Cp HFFC41 کی موجودگی میں خون کے نمونوں کا 30% R, K, الفا اینگل, MA, G, CI, TPI, EPL, LY کی پیمائش کرنے کے لیے TEG ڈشز کو TEG® 5000, US میں لوڈ کیا گیا۔
ان ویوو اسٹڈی پروٹوکول کا جائزہ انسٹی ٹیوشنل اینیمل ایتھکس کمیٹی (IAEC)، کستوربا اسکول آف میڈیسن، منی پال انسٹی ٹیوٹ آف ہائر ایجوکیشن، منی پال (IAEC/KMC/69/2020) نے لیا تھا۔جانوروں کے تمام تجربات جانوروں کے تجربات کے کنٹرول اور نگرانی کے لیے کمیٹی (CPCSEA) کی سفارشات کے مطابق کیے گئے تھے۔تمام ویوو این ایف آر سی ایس اسٹڈیز (2 × 2 سینٹی میٹر 2) خواتین وسٹار چوہوں (وزن 200 سے 250 گرام) پر کی گئیں۔تمام جانوروں کو 24-26 ° C کے درجہ حرارت میں موافق بنایا گیا تھا، جانوروں کو معیاری خوراک اور پانی تک مفت رسائی حاصل تھی۔تمام جانوروں کو تصادفی طور پر مختلف گروہوں میں تقسیم کیا گیا تھا، ہر گروہ تین جانوروں پر مشتمل تھا۔تمام مطالعات اینیمل اسٹڈیز: In Vivo Experiments 43 کی رپورٹ کے مطابق کی گئیں۔مطالعہ سے پہلے، جانوروں کو 20-50 ملی گرام کیٹامین (جسمانی وزن کے فی 1 کلوگرام) اور 2-10 ملی گرام زائلازین (جسمانی وزن کے فی 1 کلو) کے مرکب کی انٹراپیریٹونیئل (آئی پی) انتظامیہ کے ذریعے بے ہوشی کی گئی۔مطالعہ کے بعد، نمونوں کے ابتدائی اور آخری وزن کے درمیان فرق کا جائزہ لے کر خون بہنے والے حجم کا حساب لگایا گیا، تینوں ٹیسٹوں سے حاصل ہونے والی اوسط قدر کو نمونے کے خون بہنے والے حجم کے طور پر لیا گیا۔
چوہے کی دم کٹوانے کے ماڈل کو NFRCS کے صدمے، لڑائی، یا ٹریفک حادثے (انجری ماڈل) میں خون بہنے کی صلاحیت کو سمجھنے کے لیے لاگو کیا گیا تھا۔50% دم کو اسکیلپل بلیڈ سے کاٹ دیں اور عام خون کو یقینی بنانے کے لیے 15 سیکنڈ تک ہوا میں رکھیں۔اس کے علاوہ، ٹیسٹ کے نمونے چوہے کی دم پر دباؤ (Ct، Cs، Ch NFRCS اور Cp NFRCS) لگا کر رکھے گئے تھے۔ٹیسٹ کے نمونوں (n = 3) 17,45 کے لئے خون بہہ رہا ہے اور PCT کی اطلاع ملی ہے۔
لڑائی میں NFRCS پریشر کنٹرول کی تاثیر کی جانچ سطحی فیمورل شریان کے ماڈل پر کی گئی۔فیمورل شریان بے نقاب ہو جاتی ہے، 24G ٹروکار سے پنکچر ہو جاتی ہے، اور 15 سیکنڈ کے اندر خون بہہ جاتا ہے۔بے قابو خون بہنے کے مشاہدے کے بعد، ٹیسٹ کا نمونہ پنکچر کی جگہ پر دباؤ کے ساتھ رکھا جاتا ہے۔ٹیسٹ کے نمونے کی درخواست کے فوراً بعد، جمنے کا وقت ریکارڈ کیا گیا اور اگلے 5 منٹ تک ہیموسٹیٹک کارکردگی کا مشاہدہ کیا گیا۔یہی طریقہ کار Cs اور Ct46 کے ساتھ دہرایا گیا۔
Dowling et al.47 نے انٹراپریٹو بلیڈنگ کے تناظر میں ہیموسٹیٹک مواد کی ہیموسٹیٹک صلاحیت کا اندازہ لگانے کے لیے جگر کی چوٹ کا ماڈل تجویز کیا۔BCT Ct نمونے (منفی کنٹرول)، Cs فریم ورک (مثبت کنٹرول)، Ch NFRCS نمونے، اور Cp NFRCS نمونوں کے لیے ریکارڈ کیا گیا تھا۔چوہے کی suprahepatic vena cava کو میڈین لیپروٹومی کرکے بے نقاب کیا گیا۔اس کے بعد بائیں بازو کا دور دراز حصہ قینچی سے کاٹ دیا گیا۔اسکیلپل بلیڈ سے جگر میں چیرا لگائیں اور چند سیکنڈ تک خون بہنے دیں۔درست طریقے سے وزنی Ch NFRCS اور Cp NFRCS ٹیسٹ کے نمونے بغیر کسی مثبت دباؤ کے تباہ شدہ سطح پر رکھے گئے اور BCT ریکارڈ کیا گیا۔کنٹرول گروپ (Ct) نے پھر دباؤ کا اطلاق کیا جس کے بعد Cs 30 s47 زخم کو توڑے بغیر۔
Vivo میں زخم کی شفا یابی کے اسسیس کو ایک ایکسائزل زخم ماڈل کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا گیا تاکہ ترقی یافتہ پولیمر پر مبنی NFRCSs کی زخم کی شفا یابی کی خصوصیات کا اندازہ کیا جاسکے۔19,32,48 معمولی ترمیم کے ساتھ پہلے شائع شدہ طریقوں کے مطابق excisional زخموں کے ماڈلز کا انتخاب کیا گیا اور انجام دیا گیا۔جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے تمام جانوروں کو بے ہوشی کی گئی تھی۔پیٹھ کی جلد میں گول گہرا چیرا بنانے کے لیے بایپسی پنچ (12 ملی میٹر) کا استعمال کریں۔تیار کردہ زخموں کی جگہوں کو Cs (مثبت کنٹرول)، Ct (یہ تسلیم کرتے ہوئے کہ روئی کے پیڈ شفا یابی میں مداخلت کرتے ہیں)، Ch NFRCS اور Cp NFRCS (تجرباتی گروپ) اور بغیر کسی علاج کے منفی کنٹرول سے ملبوس تھے۔مطالعہ کے ہر دن، زخم کے علاقے کو تمام چوہوں میں ماپا گیا تھا.زخم کے علاقے کی تصویر لینے اور نئی ڈریسنگ لگانے کے لیے ڈیجیٹل کیمرہ استعمال کریں۔زخم بند ہونے کا فیصد درج ذیل فارمولے سے ماپا گیا:
مطالعہ کے 12 ویں دن زخم بند ہونے کے فیصد کی بنیاد پر، بہترین گروپ کی چوہوں کی جلد کو ایکسائز کیا گیا (Cp NFRCS) اور کنٹرول گروپ) اور H&E سٹیننگ اور میسن کے ٹرائیکروم سٹیننگ کے ذریعے مطالعہ کیا گیا۔ مطالعہ کے 12 ویں دن زخم بند ہونے کے فیصد کی بنیاد پر، بہترین گروپ کی چوہوں کی جلد کو ایکسائز کیا گیا (Cp NFRCS) اور کنٹرول گروپ) اور H&E سٹیننگ اور میسن کے ٹرائیکروم سٹیننگ کے ذریعے مطالعہ کیا گیا۔مطالعہ کے 12 ویں دن زخم کے بند ہونے کی فیصد کی بنیاد پر، بہترین گروپ (سی پی این ایف آر سی ایس) اور کنٹرول گروپ کے چوہوں کی جلد کو ہیماتوکسیلین-ایوسین اور میسن کے ٹرائیکروم سے داغ لگا کر ایکسائز کیا گیا اور جانچ کی گئی۔根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大鼠皮肤闭合百分比染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大对照组的大对照组的大鼠皮肤蒌，这鼠皮肤闭合百分比بہترین گروپ ((سی پی این ایف آر سی ایس) اور کنٹرول گروپس) میں چوہوں کو مطالعہ کے 12 ویں دن زخم کے فیصد بند ہونے کی بنیاد پر ہیماتوکسیلین-ایوسین سٹیننگ اور میسن کے ٹرائیکروم سٹیننگ کے لیے ایکسائز کیا گیا۔لاگو داغ لگانے کا طریقہ کار پہلے بیان کردہ طریقوں 49,50 کے مطابق کیا گیا تھا۔مختصراً، 10% فارملین میں فکسشن کے بعد، نمونوں کو درجہ بند الکوحل کی ایک سیریز کا استعمال کرتے ہوئے پانی کی کمی کی گئی تھی۔ایکسائز شدہ ٹشو کے پتلے حصے (5 µm موٹی) حاصل کرنے کے لیے مائکروٹوم کا استعمال کریں۔ہسٹوپیتھولوجیکل تبدیلیوں کا مطالعہ کرنے کے لیے کنٹرول کے پتلے سیریل سیکشنز اور سی پی این ایف آر سی ایس کا علاج ہیماتوکسیلین اور ای اوسین سے کیا گیا۔میسن کے ٹرائیکروم داغ کو کولیجن فائبرلز کی تشکیل کا پتہ لگانے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔پیتھالوجسٹ کے ذریعہ حاصل کردہ نتائج کا آنکھیں بند کرکے مطالعہ کیا گیا۔
Cp NFRCS نمونوں کی استحکام کا مطالعہ 12 ماہ کے لیے کمرے کے درجہ حرارت (25 ° C ± 2 ° C/60% RH ± 5%) پر کیا گیا۔Cp NFRCS (سطح کی رنگت اور مائکروبیل گروتھ) کو مواد اور طریقوں کے سیکشن میں بیان کردہ مندرجہ بالا طریقوں کے مطابق فولڈ وئیر ریزسٹنس اور BCT کے لیے بصری طور پر معائنہ اور ٹیسٹ کیا گیا۔
Cp NFRCS کی توسیع پذیری اور تولیدی صلاحیت کی جانچ Cp NFRCS کو 15×15 cm2 کے سائز کے ساتھ تیار کر کے کی گئی۔اس کے علاوہ، 30 ملی گرام کے نمونے (n = 5) مختلف Cp NFRCS فریکشنز سے نکالے گئے اور مطالعہ کیے گئے نمونوں کے BCT کا جائزہ لیا گیا جیسا کہ پہلے طریقوں کے سیکشن میں بیان کیا گیا ہے۔
ہم نے مختلف بائیو میڈیکل ایپلی کیشنز کے لیے Cp NFRCS کمپوزیشن کا استعمال کرتے ہوئے مختلف شکلیں اور ڈھانچے تیار کرنے کی کوشش کی ہے۔اس طرح کی شکلیں یا کنفیگریشنز میں ناک بہنے کے لیے مخروطی جھاڑو، دانتوں کے طریقہ کار، اور اندام نہانی سے خون بہنے کے لیے بیلناکار جھاڑو شامل ہیں۔
تمام ڈیٹا سیٹس کو اوسط ± معیاری انحراف کے طور پر ظاہر کیا گیا ہے اور ان کا تجزیہ ANOVA نے Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) کا استعمال کرتے ہوئے کیا ہے جس کے بعد Bonferroni کا متعدد موازنہ ٹیسٹ (*p <0.05) ہے۔
انسانی مطالعات میں کئے گئے تمام طریقہ کار انسٹی ٹیوٹ اور نیشنل ریسرچ کونسل کے معیارات کے ساتھ ساتھ ہیلسنکی 1964 کے اعلامیہ اور اس کے بعد کی گئی ترامیم یا اسی طرح کے اخلاقی معیارات کے مطابق تھے۔تمام شرکاء کو مطالعہ کی خصوصیات اور اس کی رضاکارانہ نوعیت کے بارے میں آگاہ کیا گیا۔ایک بار جمع ہونے کے بعد شرکاء کا ڈیٹا خفیہ رہتا ہے۔ان وٹرو TEG تجرباتی پروٹوکول کا جائزہ لیا گیا ہے اور کستوربا میڈیکل کالج، منی پال، کرناٹک کی ادارہ جاتی اخلاقیات کمیٹی (IEC: 674/2020) نے اس کی منظوری دی ہے۔رضاکاروں نے خون کے نمونے جمع کرنے کے لیے باخبر رضامندی پر دستخط کیے۔
جانوروں کے مطالعے میں انجام پانے والے تمام طریقہ کار کسٹوبا فیکلٹی آف میڈیسن، منی پال انسٹی ٹیوٹ آف ہائر ایجوکیشن، منی پال (IAEC/KMC/69/2020) کے مطابق کیے گئے تھے۔جانوروں کے تمام تجربات ڈیزائن کیے گئے جانوروں کے تجربات کے کنٹرول اور نگرانی کے لیے کمیٹی (CPCSEA) کے رہنما اصولوں کے مطابق کیے گئے تھے۔تمام مصنفین ARRIVE رہنما خطوط پر عمل کرتے ہیں۔
تمام NFRCS کے FTIR سپیکٹرا کا تجزیہ کیا گیا اور اس کا موازنہ شکل 2A میں دکھائے گئے چائٹوسن سپیکٹرم سے کیا گیا۔3437 cm-1 (OH اور NH اسٹریچنگ، اوورلیپ) پر چائٹوسان کی خصوصیت والی سپیکٹرل چوٹیاں، 2945 اور 2897 cm-1 (CH سٹریچنگ)، 1660 cm-1 (NH2 سٹریچنگ)، 1589 cm-1 (NH2 سٹریننگ)، 1589 cm-1 (N-1H1-برج)، Btch1-15 سینٹی میٹر 7 سینٹی میٹر-1 (اسٹریچ C–O، سیکنڈری ہائیڈروکسیل)، 993 سینٹی میٹر-1 (اسٹریچ CO، Bo-OH) 52.53.54۔ضمنی جدول S1 چائٹوسن (رپورٹر)، خالص چائٹوسن، Cm، Ch، اور Cp کے لیے FTIR NFRCS جذب سپیکٹرم اقدار کو ظاہر کرتا ہے۔تمام NFRCS (Cm, Ch اور Cp) کے FTIR سپیکٹرا نے بغیر کسی اہم تبدیلی کے خالص چائٹوسن کے طور پر ایک ہی خصوصیت والے جذب بینڈ کو دکھایا (تصویر 2A)۔ایف ٹی آئی آر کے نتائج نے این ایف آر سی ایس کو تیار کرنے کے لیے استعمال کیے جانے والے پولیمر کے درمیان کیمیائی یا جسمانی تعامل کی عدم موجودگی کی تصدیق کی، جس سے ظاہر ہوتا ہے کہ استعمال شدہ پولیمر غیر فعال ہیں۔
Cm NFRCS، Ch NFRCS، Cp NFRCS اور Cs کی وٹرو خصوصیات میں۔(A) کمپریشن کے تحت chitosan اور Cm NFRCS، Ch NFRCS اور Cp NFRCS کی کمپوزیشن کے مشترکہ FTIR سپیکٹرا کی نمائندگی کرتا ہے۔(B) a) NFRCS Cm، Ch، Cp، اور Cg (n = 3) کے پورے خون کے اخراج کی شرح؛سی ٹی کے نمونوں نے زیادہ بار دکھایا کیونکہ روئی کے جھاڑو میں جذب کرنے کی کارکردگی زیادہ ہوتی ہے۔b) خون کے بعد خون جذب شدہ نمونے کی مثال۔ٹیسٹ کے نمونے C کے BCT کی گرافیکل نمائندگی (Cp NFRCS میں بہترین BCT تھا (15 s, n = 3))۔ C، D، E، اور G میں ڈیٹا کو اوسط ± SD کے طور پر دکھایا گیا تھا، اور ایرر بارز SD، ***p <0.0001 کی نمائندگی کرتے ہیں۔ C، D، E، اور G میں ڈیٹا کو اوسط ± SD کے طور پر دکھایا گیا تھا، اور ایرر بارز SD، ***p <0.0001 کی نمائندگی کرتے ہیں۔ Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, а планки погрешностей представляют представляют стандартное, ***0p. C, D, E، اور G میں ڈیٹا کو اوسط ± معیاری انحراف کے طور پر پیش کیا جاتا ہے، اور ایرر بارز معیاری انحراف کی نمائندگی کرتے ہیں، ***p <0.0001۔ C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD،***p <0.0001۔ C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD,误差线代表SD،***p <0.0001۔ данные в C ، D ، E и G G ео! онение ، *** P <0،0001۔ C, D, E، اور G میں ڈیٹا کو اوسط ± معیاری انحراف کے طور پر دکھایا گیا ہے، ایرر بارز معیاری انحراف کی نمائندگی کرتے ہیں، ***p <0.0001۔