Oziq moddalarni olish va tarqatish hasharotlarning ozuqa qidirish va hayot tarixining xususiyatlarini birlashtiradi. Hayotning turli bosqichlarida ma'lum ozuqa moddalaridagi etishmovchilikni qoplash uchun hasharotlar bu ozuqalarni qo'shimcha oziqlantirish orqali olishlari mumkin, masalan, ko'lmak deb nomlanuvchi jarayonda umurtqali hayvonlarning sekretsiyasi bilan oziqlanish. ham metabolizm, ham ko'payish uchun. Ushbu tadqiqotning maqsadi An. Oziq moddalarni olish uchun sigir siydigida arabiensis ajitatsiyasi hayot tarixi xususiyatlarini yaxshilaydi.
Bu xavfsiz ekanligiga ishonch hosil qiling.arabiensis yangi, 24 soatlik, 72 soatlik va 168 soatlik eski sigir siydigining hidiga jalb qilingan va mezbon izlovchi va qon bilan oziqlangan (48 soatlik qondan keyingi ovqat) urg'ochilar Y-naychali olfaktometrda o'lchangan va homilador ayollar uchun kimyoviy tahlil qilingan va elektrofiziologik tahlil qilingan. Sigir siydigidagi bioaktiv birikmalarni barcha toʻrtta yosh toifasida aniqlash uchun foydalanilgan. Biofaol birikmalarning sintetik aralashmalari Y-naycha va dala sinovlarida baholandi. Sigir siydigi va uning asosiy azot oʻz ichiga olgan karbamidini bezgak tashuvchilari uchun potentsial qoʻshimcha parhez sifatida oʻrganish, oziqlanish parametrlari va ayol sigirning siydigi miqdori va hayot tarixining xususiyatlari oʻlchandi. so'rilgan karbamid baholandi. Oziqlantirishdan so'ng urg'ochilarning omon qolishi, bog'langan parvozi va ko'payishi baholandi.
Uy egasining qoni va ozuqasini qidiring. Laboratoriya va dala tadqiqotlarida arablar yangi va qarigan sigir siydigining tabiiy va sintetik hidiga qiziqdilar. Homilador urg'ochilar urug'lanish joylarida sigir siydigining reaktsiyasiga befarq edilar. Xost izlovchi va qon so'ruvchi urg'ochilar sigir siydigi va karbamidni faol ravishda o'zlashtiradilar. parvoz, omon qolish yoki ko'payish uchun fiziologik holat.
Anopheles arabinis yaxshilangan hayot tarixi xususiyatlari uchun sigir siydigini olish va taqsimlash.Sigir siydigini qo'shimcha oziqlantirish vektor sig'imiga to'g'ridan-to'g'ri kunlik omon qolish va vektor zichligini oshirish orqali va bilvosita parvoz faolligini o'zgartirish orqali ta'sir qiladi va shuning uchun kelajakdagi modellarda hisobga olinishi kerak.
Oziq moddalarni olish va tarqatish hasharotlarning oziqlanishi va hayot tarixining xususiyatlarini birlashtiradi [1,2,3]. Hasharotlar oziq-ovqat mavjudligi va ozuqa moddalariga bo'lgan ehtiyojga asoslanib, oziq-ovqat tanlash va sotib olish va kompensatsion oziqlantirishni amalga oshirishga qodir [1, 3]. Ozuqa moddalarining taqsimlanishi hayot tarixiga bog'liq bo'lib, dietaning sifati va miqdori uchun turli xil talablarga olib kelishi mumkin [1,2]. Muayyan ozuqa moddalarining etishmasligi uchun hasharotlar bu oziq moddalarni qo'shimcha oziqlantirish orqali olishlari mumkin, masalan, loy, umurtqali hayvonlarning turli xil axlatlari va sekretlari va murdalar, bu jarayon ko'lmak deb nomlanadi [2]. Garchi turli xil kapalak va kuya turlari birinchi navbatda tasvirlangan bo'lsa-da, sug'orish teshiklari ham paydo bo'lishi va oziqlanish tartibining boshqa turlariga ta'sir qilishi mumkin. salomatlik va hayot tarixining boshqa xususiyatlari [2, 4, 5, 6], 7]. Bezgak chivinlari Anopheles gambiae sensu lato (sl) "to'g'ri ovqatlanmagan" kattalar sifatida paydo bo'ladi [8], shuning uchun sug'orish uning hayot tarixida muhim rol o'ynashi mumkin, ammo bu xatti-harakat shu paytgacha ushbu vositadan foydalanish muhim oziqlanish vositasi sifatida e'tibordan chetda qolmoqda. Bu muhim epidemiologik oqibatlarga olib kelishi mumkinligi sababli e'tiborni talab qiladi.
Voyaga yetgan urg‘ochi Anopheles chivinlarining azot iste’moli lichinka davridan boshlab past kaloriya zahirasi va qon ovqatidan samarasiz foydalanish tufayli cheklangan. yirtqichlik.Shu bilan bir qatorda, chivinlar moslashuv va parvoz manevrligini kuchaytiruvchi azotli birikmalarni olish uchun umurtqali hayvonlarning ekskretsiyasini qo'shimcha oziqlantirishdan foydalanishi mumkin, bu boshqa hasharotlar tomonidan ko'rsatilgan [2]. Shu munosabat bilan, An.The arabinis kompleksi, siydigining yangi turlaridan birining kuchli va aniq jalb etilishi. [12,13,14], qiziq. Anopheles arabinis oʻzining uy egasi boʻlishida opportunistik boʻlib, qoramol bilan bogʻlanishi va oziqlanishi maʼlum. Sigir siydigi azotli birikmalarga boy resurs boʻlib, karbamid yangi siydikdagi umumiy azotning 50-95% ni tashkil qiladi [15.Arabinis]. bu resurslar 24 soat ichida azotli birikmalarning murakkabligini kamaytirish uchun [15]. Ammiakning tez o'sishi bilan organik azotning pasayishi bilan bog'liq holda, ishqoriy mikroorganizmlar (ularning ko'pchiligi chivinlar uchun zaharli birikmalar ishlab chiqaradi) rivojlanadi [15], bu ayollar bo'lishi mumkin Ann.arabiensis [13] yoki kamroq tortiladi. 14].
Ushbu tadqiqotda uy egasi va qon bilan oziqlangan Ans qidirildi. Birinchi gonadotropin siklida arabiensis siydikni aralashtirish orqali azotli birikmalarni, shu jumladan karbamidni olish uchun baholandi. Keyinchalik, urg'ochi chivinlar bu potentsial ozuqaviy resursni qanday ajratishini baholash uchun bir qator eksperimentlar o'tkazildi. va keksa sigir siydigi tekshirildi, bular uy egasi va qon bilan oziqlangan An uchun ishonchli maslahatlar beradimi yoki yo'qmi, arabiensis ushbu potentsial ozuqaviy manbani qidirishda kuzatilgan farqli jozibadorlikning orqasida kimyoviy korrelyatsiyalarni aniqladi. sigir siydik hidining turli fiziologik holatlarga ta'siri. Chivinlarni jalb qilish.Olingan natijalar shuni tasdiqlaydiki, An. arabiensis hayot tarixi xususiyatlariga ta'sir qilish uchun umurtqali hayvonlar siydigida topilgan azotli birikmalarni oladi va tarqatadi.Ushbu natijalar potentsial epidemiologik oqibatlar va ulardan vektor kuzatuvi va nazorati uchun qanday foydalanish mumkinligi kontekstida muhokama qilinadi.
Anopheles arabicans (Dongola shtammi) 25 ± 2 °C, 65 ± 5% RH va 12:12 soat yorug'lik: qorong'u tsiklda saqlangan. Lichinkalar distillangan suv bilan to'ldirilgan plastik tovoqlarda (20 sm × 18 sm × 7 sm) o'stirildi va Tetramin® baliqlari bilan oziqlangan (MelTetramin® DEP to'plami). 30 ml stakanlarda (Nolato Hertila, Åstorp, SE) va keyin kattalar paydo bo'lishiga imkon berish uchun Bugdorm kataklariga (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science, Taichung, Tayvan) o'tkaziladi. eksperimentdan oldin darhol yoki quyida ta'riflanganidek, eksperimentdan oldin distillangan suv bilan bir kechada och qolgan. Parvoz trubkasi tajribalarida foydalanilgan urg'ochilar ad libitum suv bilan atigi 4-6 soat och qolganlar.Keyingi bioassaylar uchun qon so'ruvchi chivinlarni tayyorlash uchun 4 dpe urg'ochilarga defibrotik qo'y qoni (BroHet, feeding system) yordamida ta'minlangan. Discovery Workshops, Accrington, Buyuk Britaniya). So'ngra to'liq tiqilib qolgan urg'ochilar alohida kataklarga o'tkazildi va quyida ta'riflanganidek, to'g'ridan-to'g'ri dieta bilan ta'minlandi yoki quyida tasvirlangan tajribalar oldidan 3 kun davomida 10% ad libitum bilan ta'minlandi. Oxirgi urg'ochilar parvoz trubkasi bioassaylari uchun ishlatilgan va laboratoriyaga o'tkazilgan, so'ngra distillangan suv eksperimentidan bir soat oldin ad-46i.
Oziqlantirish tahlillari katta yoshli An.Arab ayolida siydik va karbamid iste'molini aniqlash uchun ishlatilgan. Xost izlovchi va qon bilan oziqlangan urg'ochilarga 1% suyultirilgan yangi va qari sigir siydigi, har xil konsentratsiyali karbamid va ikkita nazorat (10% saxaroza va suv) 48 soat davomida o'z ichiga olgan parhez taqdim etildi. Bundan tashqari, oziq-ovqat bo'yoqlari (1 mg FF) 2650-17-1; Sigma-Aldrich, Stokgolm, SE) dietaga qo'shildi va 250 µl mikrosentrifuga naychalarida 4 × 4 matritsada ta'minlandi (Axygen Scientific, Union City, CA, AQSH; Shakl 1A) Chegaragacha to'ldiring va rangning potentsial ta'sirini oldini olish uchun (~ 300 µl). Katta Petri idishida 10 ta chivin (diametri 12 sm va balandligi 6 sm; Semadeni, Ostermundigen, CH; 1A-rasm) 25 ± 2 sm °C va 65 ± 5% nisbiy namlikda to'liq qorong'ilikda. Bu tajribalar 5 dan 10 martagacha takrorlandi.
Uy egasi va qon so'ruvchi ayol Anopheles arabianus tomonidan so'rilgan qoramol siydigi va karbamidni qidiring. Oziqlantirish sinovida (A) urg'ochi chivinlarga yangi va qari sigir siydigi, turli konsentratsiyalarda karbamid, saxaroza (10%) va distillangan suv (H2O) dan iborat parhez berilgan. E'tibor bering. Xost izlovchi urg'ochilar 72 soatlik sigir siydigini 168 soatlik sigir siydigidan (B) kamroq so'radilar. Siydikdagi o'rtacha umumiy azot miqdori (± standart og'ish) insetda ifodalanadi. Xost izlovchi (D, F) va qon so'ruvchi (E, G) urg'ochi ayollar karbamid (E) bilan erkaklarga bog'liq. turli harf nomlari bir-biridan sezilarli darajada farq qilar edi (Tukeyning post hoc tahlilidan foydalangan holda bir tomonlama ANOVA; p <0,05). Xato satrlari o'rtacha (BE) standart xatosini ifodalaydi. To'g'ri chiziqli chiziq log-chiziqli regressiya chizig'ini (F, G) ifodalaydi.
So‘rilgan oziq-ovqatni chiqarish uchun chivinlar alohida-alohida 230 mkl distillangan suv bo‘lgan 1,5 ml mikrotsentrifuga naychalariga joylashtirildi va to‘qima bir martalik pestle va simsiz dvigatel (VWR International, Lund, SE) yordamida parchalandi, so‘ngra 10 krpm tezlikda 10 daqiqa davomida santrifüj qilindi (supernatant a20 mkl ga qizdirildi). 96-quduqli mikroplastinka (Sigma-Aldrich) va absorbans (l620) spektrofotometrga asoslangan mikroplastinka o'quvchi (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) nm yordamida aniqlandi. Shu bilan bir qatorda, chivinlar 1 ml distillangan suvda maydalangan, 900 mkm spektrofotometrga o'tkazilgan. tahlil (l 620 nm; UV 1800, Shimadzu, Kista, SE). Ratsionda iste'mol qilinadigan miqdorni aniqlash uchun 0,2 µl dan 2,4 µl gacha 1 mg ml-1 ksilen siyanid hosil qilish uchun ketma-ket suyultirish yo‘li bilan standart egri chiziq tayyorlandi. So‘ngra har bir oziq-ovqat bo‘yog‘ining optik zichligi ma'lum bo‘lgan moskiy kontsentratsiyasini aniqlash uchun ishlatilgan.
Hajm ma'lumotlari bir tomonlama dispersiya tahlili (ANOVA) yordamida tahlil qilindi, keyin Tukeyning post hoc juftlik taqqoslashlari (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, AQSH, 1989–2007). (Mac uchun GraphPad Prism v8.0.0, GraphPad Software, San-Diego, CA, AQSH).
Har bir yosh guruhidan taxminan 20 mkl siydik namunalari Chromosorb® W/AW (10 mg 80/100 mesh, Sigma Aldrich) ga bog'langan va qalay kapsulalarga (8 mm × 5 mm) o'ralgan. Kapsulalar yonish kamerasiga (CHFlash/O2000 analizatori) kiritilgan. Scientific, Waltham, MA, US) ishlab chiqaruvchining protokoliga muvofiq yangi va keksa siydikdagi azot miqdorini aniqlash. Umumiy azot (g N l-1) standart sifatida ishlatiladigan karbamid konsentrasiyalari asosida aniqlangan.
Parhezning uy egasini qidiruvchi va qon so'ruvchi ayollarning omon qolishiga ta'sirini baholash uchun chivinlar alohida-alohida katta Petri idishlariga (diametri 12 sm va balandligi 6 sm; Semadeni) joylashtirildi, qopqog'ida to'r bilan qoplangan teshik (diametri 3 sm) shamollatish va oziq-ovqat bilan ta'minlash uchun. siydik, to'rtta karbamid konsentratsiyasi va ikkita nazorat, 10% saxaroza va suv. Har bir parhez 5 ml lik shpritsga (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE) kiritilgan dental tamponga (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) pipetlandi, piston olib tashlangan, petrining tepasiga qo'yilgan. 1).1A).Ratsioningizni har kuni oʻzgartiring.Yuqorida taʼriflanganidek laboratoriyani saqlang.Omon qolgan chivinlar kuniga ikki marta sanab oʻtilgan, oʻlik chivinlar esa oxirgi chivin oʻlgunga qadar (har bir davolanish uchun n=40ta) tashlanadi.Turli parhezlar bilan oziqlangan chivinlarning omon qolishi statistik jihatdan Kaplan-Meyer dietasi va survival testi oʻrtasidagi taqsimotni solishtirish uchun statistik tahlil qilingan. (IBM SPSS Statistics 24.0.0.0).
Attisano va boshqalar [17] asosidagi maxsus chivinli uchuvchi tegirmon, 5 mm qalinlikdagi shaffof akril panellardan (10 sm keng x 10 sm uzunlik x 10 sm balandlikda) old va orqa panellarsiz (3-rasm: tepa). bir juft neodim magnitlari orasiga 9 sm masofada osilgan igna. Xuddi shu materialdan (6,5 sm L) yasalgan gorizontal trubka vertikal trubani ikkiga bo'lib, bog'langan qo'lni va yorug'likni to'xtatuvchi signal sifatida alyuminiy folga kichik qismini olib yuradigan qo'lni hosil qildi.
24 soat davomida och qolgan urg'ochilarga cheklanishdan oldin 30 daqiqa davomida yuqoridagi parhez berilgan. To'liq oziqlangan urg'ochi chivinlar alohida-alohida muz ustida 2-3 daqiqa davomida behushlik qilinib, asal mumi bilan hasharotlar pinlariga biriktirilgan (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SEi qo'llariga) tubes.Flying Mill.Har bir parvozdagi inqiloblar maxsus tayyorlangan maʼlumotlar jurnali tomonidan qayd etilgan, soʻngra PC-Lab 2000™ dasturiy taʼminoti (v4.01; Velleman, Gavere, BE) yordamida saqlangan va koʻrsatilgan. Parvoz tegirmoni iqlimi tartibga solinadigan xonaga joylashtirilgan (12 soat:12 soat, yorugʻlik: qorongʻi, ±5 °C, ±5%).
Parvoz faolligi namunasini tasavvur qilish uchun 24 soatlik vaqt davomida har soatda umumiy parvoz masofasi (m) va ketma-ket parvoz harakatlarining umumiy soni hisoblab chiqildi. Bundan tashqari, alohida urg‘ochilarning uchgan o‘rtacha masofalari muolajalar bo‘yicha taqqoslandi va bir tomonlama ANOVA va Tukeyning post hoc tahlili (JMP Pro, v14.0.0) yordamida tahlil qilindi. mustaqil omil.Qo'shimcha ravishda, turlarning o'rtacha soni 10 daqiqalik bosqichlarda hisoblanadi.
An.arabiensisning reproduktiv qobiliyatiga dietaning ta'sirini baholash uchun oltita urg'ochi (4 dpe) qon to'plangandan so'ng to'g'ridan-to'g'ri Bugdorm kataklariga (30 sm × 30 sm × 30 sm) o'tkazildi va keyin yuqorida aytib o'tilganidek, 48 soat davomida eksperimental parhez bilan ta'minlandi. Shundan so'ng dietalar olib tashlandi va tuxum qo'yadigan idishlar (30 ml; Nolato Hertila 2 ning uchinchi kuni uchun distillangan suv bilan to'ldiriladi) 48 soat, har 24 soatda o'zgartiriladi. Har bir parhez rejimini 20-50 marta takrorlang. Tuxumlar har bir eksperimental qafas uchun hisoblandi va qayd etildi. Tuxumlarning kichik namunalari Dialux-20 mikroskopi (DM10DEz0) yordamida individual tuxumlarning o'rtacha hajmi va uzunligi o'zgarishini baholash uchun ishlatilgan (har bir parhez uchun n ≥ 200), Wenst 0; Leica Camera (DFC) 320 R2 bilan; Leica Microsystems Ltd., DE). Qolgan tuxumlar iqlim nazorati ostidagi xonada standart parvarish sharoitida 24 soat davomida saqlangan va yuqorida aytib o'tilganidek, yaqinda paydo bo'lgan 1-bosqich lichinkalarining kichik namunasi o'lchangan (har bir parhez uchun n ≥ 200). hoc tahlili (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Yangi (namuna olingandan 1 soat keyin), 24 soat, 72 soat va 168 soatlik yoshdagi siydikdan bosh bo‘shlig‘idagi uchuvchi moddalar Zebu qoramollari, Arsi irqlaridan olingan namunalardan to‘plangan. Qulaylik uchun siydik namunalari ertalab erta tongda sigirlar hali omborda bo‘lganida olingan. Siydik namunalari har biri 10 ml dan olingan va Qopqoqli 3 l poliamidda (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH and Co., Minden, DE) alohida poliamid pishirish qoplariga o'tkaziladi. Vinilxloridli plastik barabanlarda. Har bir sigir siydigi namunasidan bosh bo'shlig'idagi uchuvchi moddalar to'g'ridan-to'g'ri (yangi) yoki xona haroratida 7,2,2 va 28 soat pishganidan keyin yig'ilgan. har bir siydik namunasi har bir yosh guruhining vakili edi.
Bosh bo'shlig'ida uchuvchi moddalarni to'plash uchun diafragma vakuum pompasi (KNF Neuberger, Freiburg, DE) yordamida 2,5 soat davomida poliamid qop orqali faollashtirilgan uglerod bilan filtrlangan gaz oqimini (100 ml min-1) adsorbsiya ustuniga aylantirish uchun yopiq konturli tizim ishlatilgan. ustun shisha jun vilkalar orasiga 35 mg Porapak Q (50/80 mesh; Waters Associates, Milford, MA, AQSh) ni o'z ichiga olgan teflon trubadan (5,5 sm x 3 mm id) yasalgan. Ishlatishdan oldin ustun 1 ml qayta distillangan n-geksan (Merck, Darmstadt) va pudra9 ml 9 ml bilan yuvilgan. GC darajasi, Sigma Aldrich). Adsorbsiyalangan uchuvchi moddalar 400 mkl pentan bilan elutildi. Bosh bo'shliq to'plamlari birlashtirildi va keyingi tahlil uchun foydalanilgunga qadar -20 ° C da saqlanadi.
Yangi, 24-soat, 72-soat va 168-soatlik siydikdan yig'ilgan An.Headspace uchuvchi ekstraktlarining xost izlayotgan va qon iste'mol qiladigan xatti-harakatlari to'g'ridan-to'g'ri shisha naychali olfaktometr yordamida Arabidopsis chivinlaridan uchuvchi ekstraktlar uchun tahlil qilindi [18]. ZT 13 davrida tajribalar o'tkazildi. uy izlash faoliyati.Arab [19].Shisha naychali olfaktometr (80 sm × 9,5 sm id) yuqoridan 3 ± 1 lx qizil nur bilan yoritilgan. Ko'mir filtrlangan va namlangan havo oqimi (25 ± 2 ° C, 65 ± 2% nisbiy namlik) 3 sm-A seriyali bioanalizdan o'tdi. zanglamaydigan po'latdan yasalgan to'rli ekranlar, laminar oqim va bir xil shleyf tuzilishini yaratadi. Tish tamponli dispenser (4 sm × 1 sm; L:D; DAB Dental AB), olfaktometrning shamol tomonidagi 5 sm lasanga osilgan, stimulyator har 5 daqiqada o'zgartiriladi. Tahlil qilish uchun har bir boshdan 10 mkl, suyultirilgan ekstrakt ishlatilgan: 10 mkl. Tekshirish vositasi sifatida teng miqdorda pentan ishlatilgan. Alohida xost izlovchi yoki qon so'ruvchi chivinlar eksperiment boshlanishidan 2-3 soat oldin alohida bo'shatish kataklariga joylashtirildi. Bo'shatish qafasi olfaktometrning shamol ostidagi tomoniga joylashtirildi va chivinlarning 1 daqiqaga moslashishiga ruxsat berildi yoki so'ngra bo'shatish klapanlari ochildi. nazorat chiqarilgandan keyin 5 daqiqa ichida manba bilan aloqa qilgan chivinlar nisbati sifatida tahlil qilindi. Har bir bosh bo‘shlig‘i uchuvchi ekstrakti va nazorati kamida 30 marta takrorlandi va har qanday bir kunning ta’sirini oldini olish uchun har bir tajriba kunida bir xil miqdordagi muolajalar va nazoratlar sinovdan o‘tkazildi. Xost va qon bilan oziqlangan javoblarni izlang. toq nisbatlar uchun juftlik taqqoslashlari (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Anning yumurtlamaga munosabati. Yangi va qari sigir siydigidan olingan bosh boʻshliq ekstraktlari Bugdorm qafaslarida (30 sm × 30 sm × 30 sm; MegaView Science) tahlil qilindi. 20 ml distillangan suv bilan to'ldirilgan plastik stakanlar (30 ml; Nolato Hertila) yumurtlamani ta'minladi. Bir-biridan ajratilgan. Davolash stakanlari 1:10 nisbatda suyultirilganda har bir bosh bo‘shlig‘i ekstraktidan 10 mkl bilan sozlangan. Nazorat kosasini sozlash uchun teng miqdorda pentan ishlatilgan. Har bir tajriba o‘rtasida holat ta’sirini nazorat qilish uchun davolash va nazorat stakanlari almashtirildi. O‘nta qon bilan oziqlangan urg‘ochi ZT 9-11 da eksperimental qafaslarga qo‘yib yuborildi va tuxumlar soni 2 soatdan keyin formulada 4 soat ichida ekildi. urug'lanish ko'rsatkichi: (davolovchi idishga qo'yilgan tuxumlar soni - nazorat kosasiga qo'yilgan tuxumlar soni)/(qo'yilgan tuxumlarning umumiy soni).Har bir davolash 8 marta takrorlandi.
Ayol An.arabiensisning gaz xromatografik va elektron antenna naqshini aniqlash (GC-EAD) tahlili avval ta'riflanganidek amalga oshirildi [20].Qisqacha aytganda, yangi bosh bo'shliqlari uchuvchi ekstraktlar Agilent Technologies 6890 GC (Santa Klara, CA, AQSh) yordamida ajratilgan edi (Santa Klara, CA, AQSH) HP-5 mm5 ustuni (3.0 mm5.0) bilan jihozlangan. mkm plyonka qalinligi, Agilent Technologies). va qarish siydik. Vodorod o'rtacha chiziqli oqim tezligi 45 sm s-1 bo'lgan mobil faza sifatida ishlatilgan. Har bir namuna (2 mkl) 225 °C kirish harorati bilan bo'linmasdan rejimda 30 soniya davomida AOK qilingan. GC pechning harorati 35 °C (3 daqiqa ushlab turish) dan 300 °C da (min. 301 daqiqa ushlab turish) dasturlashtirilgan. GC chiqindi suv ajratgich, 4 psi azot qo'shildi va Gerstel 3D/2 past o'lik hajmli xochda (Gerstel, Myulheim, DE) olov ionizatsiyasi detektori va EAD o'rtasida 1:1 bo'lindi. EAD uchun GC oqava suv kapillyarı Gerstel ODP-2 °C haroratli trubkadan o'tkazilib, harorat o'tkazuvchanligi 2 °C bo'lgan shishadan o'tkazildi. (10 sm × 8 mm), u erda uglerod bilan filtrlangan, namlangan havo (1,5 l min−1) bilan aralashtiriladi. Antenna trubaning chiqish joyidan 0,5 sm masofada joylashtirildi. Har bir alohida chivin bir replikatsiyani tashkil etdi va xost izlovchi chivinlar uchun har bir yoshdagi siydik namunalarida kamida uchta takrorlash amalga oshirildi.
GC-EAD tahlilida antenna javoblarini aniqlash uchun birlashtirilgan GC va massa spektrometri (GC-MS; 6890 GC va 5975 MS; Agilent Technologies) yordamida yangi va qari qoramol siydigining bosh bo'shlig'i kollektsiyalarida bioaktiv birikmalarni aniqlash, GC-EAD tahlilida elektron ta'sir ionizatsiyasi rejimida ishlaydigan HP7-05 rejimida ishlaydi. UI bilan qoplangan eritilgan kremniy kapillyar ustuni (ichki diametri 60 m × 0,25 mm, plyonka qalinligi 0,25 mkm) o'rtacha chiziqli oqim tezligi 35 sm s-1 bo'lgan mobil faza sifatida geliydan foydalanadi. 2 mkl namunasi bir xil injektor sozlamalari va pechning harorati GCp-E ga qarab aniqlangan vaqtga asoslangan holda AOK qilingan. (Kovát indeksi) va maxsus kutubxona va NIST14 kutubxonasi (Agilent) bilan solishtirganda massa spektrlari. Aniqlangan birikmalar haqiqiy standartlarni kiritish orqali tasdiqlangan (1-qo'shimcha fayl: S2-jadval). Miqdorini aniqlash uchun geptil asetat (10 ng, 99,8% kimyoviy tozalik, standart sifatida Aldrich inject edi.)
Xost izlovchi va qon so'ruvchi Ans.arabiensisni jalb qilish uchun yangi va keksa siydikda aniqlangan bioaktiv birikmalardan tashkil topgan sintetik hid aralashmasining samaradorligini baholash, yuqoridagi kabi bir xil olfaktometr va protokol yordamida.Sintetik aralashmalar aralashmalarning tarkibi va nisbatlarini taqlid qildi. 48-soatlik, 72-soatlik va 168-soatlik siydik (5D-G-rasm; 1-qoʻshimcha fayl: S2-jadval). Tahlil qilish uchun 10 mkl 1:100 nisbatda toʻliq sintetik aralashmaning suyultirilishidan foydalaning, umumiy chiqarish tezligi taxminan 140-2400 dan qonning jozibadorligini baholash uchun soat. chivinlar. Shundan so'ng, test to'liq aralashmalar bo'yicha amalga oshiriladi, unda to'liq aralashmaning yagona birikmalarining subtractiv aralashmalari chiqariladi. Xost va qon bilan oziqlangan Ans.Arab va sintetik va subtractiv aralashmalarning javoblari nominal logistik regressiya yordamida tahlil qilindi, so'ngra g'alati nisbatlar uchun juftlik taqqoslash (JMP Institut Pro., v14).
Sigir siydigi bezgak chivinlari uchun yashash joyi bo'lib xizmat qila oladimi yoki yo'qligini baholash uchun yuqorida aytib o'tilganidek, yangi va qari sigir siydigi yig'iladi va suv to'rli 3 litrli chelaklarga (100 ml) joylashtiriladi va uy o'ljalari uchun tuzoqlarga o'rnatiladi. (BG-HDT versiyasi; BioGents, Regensburg, DE). O'nta tuzoq yaylovda bir-biridan 50 m masofada, qishloq jamoasidan 400 m masofada (Silay, Efiopiya, 5°53´24´´N, 37°29´24´´D) o'rnatilgan va doimiy isitiladigan qishloqlarda chorva mollari yo'q edi. beshta tuzoq isitilmagan holda qoldiriladi. Har bir davolash joyi kechasi jami besh kecha davomida aylantiriladi. Turli yoshdagi siydik bilan o'ljalangan tuzoqlarda tutilgan chivinlar soni beta binomial taqsimot bilan logistik regressiya yordamida solishtirildi (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc.).
Efiopiya, Oromiya viloyati, Maki shahri yaqinidagi bezgak bilan kasallangan qishloqda (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; Shakl 6A). Tadqiqot avgust oyi oʻrtalari va sentyabr oyining oʻrtalari oraligʻida yillik yopiq xonadonda yomgʻir yogʻishi bilan birga uzoq muddatli yomgʻir yogʻishidan oldin oʻtkazildi. Qishloqning chekkasida joylashgan (20-50 m masofada) tadqiqot uchun tanlangan (6A-rasm).Uylarni tanlash uchun mezonlar quyidagilar edi: uyda hayvonlarga ruxsat berilmagan, yopiq ovqat tayyorlashga ruxsat berilmagan (o'tin yoki ko'mir chizish) (hech bo'lmaganda sinov davrida) va ko'pi bilan ikki aholi yashaydigan uylar, uxlab yotgan uylar. Butunjahon tibbiyot assotsiatsiyasining Xelsinki deklaratsiyasida belgilangan ko'rsatmalarga muvofiq Addis-Abeba universiteti Tabiat fanlari fakulteti (CNS-IRB)ning Institutsional tadqiqot etikasini ko'rib chiqish kengashi (IRB/022/2016) tomonidan axloqiy ma'qullangan. Sog'liqni saqlashning har bir boshlig'ining roziligi butun uy xo'jaligi rahbari tomonidan amalga oshirilgan. tuman va tuman ('kebele') darajasidagi ma'muriyatlar. Eksperimental dizayn 2 × 2 lotin kvadrat dizayniga amal qildi, unda sintetik aralashmalar va boshqaruvlar birinchi kechada juftlashgan uylarga tayinlangan va keyingi eksperimental kechada uylar o'rtasida almashtirilgan. Bu jarayon o'n marta takrorlangan. dala sinovining o'rtasi va oxiri kunning bir vaqtida.
Oltita bioaktiv birikmani o'z ichiga olgan sintetik aralashma geptanda eritildi (97,0% erituvchi GC darajasi, Sigma Aldrich) va paxta pichog'i tarqatuvchisi [20] yordamida 140 ng soat 1 da chiqariladi. Chiziqli dispenser 12 soat davomida barcha birikmalarning doimiy nisbatda chiqarilishiga imkon berdi. Keyingi tajribada geptan suspenziyasi ishlatilgan. Kasalliklarni nazorat qilish va oldini olish markazlari (CDC) yorug'lik tuzog'i (John W. Hock Company, Gainesville, FL, US; Shakl 6A). Qopqonlar erdan 0,8 - 1 m balandlikda, to'shakning oyog'i yaqinida osilgan va ko'ngilli davolanmagan chivinli to'r ostida uxlab yotgan va 106:00 dan 18:00 gacha bo'lgan vaqt oralig'ida ishlagan. fiziologik holat (oziqlanmagan, oziqlangan, yarim homilador va homilador [21] keyinchalik A. gambiae sl sifatida morfologik aniqlangan turlarni aniqlash uchun polimeraza zanjiri reaktsiyasi (PZR) tahlili yordamida skrining qilindi. Kompleks a'zolari [23]. Dala tadqiqotida, juftlashgan uylarning tuzoqqa tushishi va nominal logistika mosligi tahlil qilindi, bu erda bog'langan uylarning tuzoqqa tutilishi va nominal logistika mosligi tahlil qilindi. (sintetik aralashma va nazorat) qat'iy ta'sir edi (JMP® 14.0. 0. SAS Institute Inc. Bu erda biz ehtimollik nisbati testidan ch2 va p-qiymatlari haqida xabar beramiz.
Xavfsiz yoki yo'qligini baholang.arabiensis to'g'ridan-to'g'ri oziqlantirish orqali siydikni, uning asosiy azot manbai bo'lgan karbamidni, 4 kunlik (dpe) mezbonni qidirish va qon bilan oziqlangan ayollarni oziqlantirish sinovlari davomida 48 soat ichida olish imkoniga ega bo'ldi (1A-rasm). Xost izlovchi va qon so'ruvchi urg'ochi ayollar boshqa dietaga qaraganda sezilarli darajada ko'proq suv (F = F4, 5) so'riladi. 20,15, p <0,0001 va F(5,299) = 56,00, p <0,0001, 1B,C-rasm.Bundan tashqari, mezbon-izlovchi urg'ochilar 168 soatda siydik bilan solishtirganda 72 soatda siydikda kamroq ovqatlangan (W 1B-rasmda 1B-rasmda so'rilgan dieta mavjud). 2,69 mM karbamid miqdori boshqa barcha konsentratsiyalar va suv bilan solishtirganda, 10% sukrozdan farqlanmaydi (F(10,813) = 15,72, p <0,0001; 1D-rasm). Bu qon bilan oziqlangan urg'ochilarning javobidan farqli o'laroq, odatda suvni sezilarli darajada so'rib olishadi. 10% dan kam saxaroza (F(10,557) = 78,35, p <0,0001; 1E-rasm). Bundan tashqari, ikki fiziologik holatni solishtirganda, flebotomizatsiyalangan urg'ochilar eng past konsentratsiyalarda mezbon qidirayotgan urg'ochi ayollarga qaraganda ko'proq karbamidni so'radilar va bu urg'ochilar shunga o'xshash konsentratsiyalarda yuqori miqdorda so'riladi. (F(1,953)= 78,82, p < 0,0001; 1F, G-rasm). Karbamid o'z ichiga olgan dietadan qabul qilish optimal qiymatlarga ega bo'lib ko'rinsa-da (1D, E-rasm), ikkala fiziologik holatdagi urg'ochi ayollar so'rilgan karbamid miqdorini butun konsentratsiya oralig'ida modulyatsiya qila oldilar (F1, log karbamid kontsentratsiyasi). ).Shunga o'xshab, chivinlar so'rilgan siydik miqdorini tartibga solish orqali o'zlarining azot iste'molini nazorat qiladilar, chunki siydikdagi azot miqdori so'rilgan miqdorda aks etadi (1B, C va B qo'shimchalari).
Siydik va karbamidning uy egasini qidiradigan va qon so'ruvchi chivinlarning omon qolishiga ta'sirini baholash uchun urg'ochilar barcha to'rt yoshdagi siydik (yangi, 24 soat, 72 soat va cho'kishdan keyin 168 soat) va bir qator karbamid kontsentratsiyasi, shuningdek distillangan suv va 10% sukroz bilan oziqlangan (uning dietasi nazorat ostida bo'lganligini ko'rsatdi). mezbon qidirayotgan ayollarda umumiy omon qolishga sezilarli ta'sir ko'rsatadi (siydik: ch2 = 108,5, df = 5, p < 0,0001; karbamid: ch2 = 122,8, df = 5, p < 0,0001; 2B, C-rasm) va qon bilan oziqlangan urg'ochilarda (p3, p5 = p9) < 0,0001; karbamid: ch2 = 137,9, df = 5, p < 0,0001; Barcha tajribalarda siydik, karbamid va suv bilan oziqlangan ayollarda saxaroza dietasi bilan oziqlangan ayollarga qaraganda ancha past bo'lgan (2-rasm). 72 soatlik eski siydik bilan oziqlanganlar (p = 0,016) eng past omon qolish ehtimoliga ega (2B-rasm). Bundan tashqari, 135 mM karbamid bilan oziqlangan mezbon izlovchi urg'ochilar suv nazoratiga qaraganda ko'proq omon qolishdi (p <0,04) (p <0,02C) va chuchuk suv bilan sug'orilgan ayollar. 24 soatlik siydik uzoqroq yashadi (p = 0,001 va p = 0,012; 2D-rasm), 72 soatlik siydik bilan oziqlangan ayollar esa ayollarning qisqa yangi siydik va 24 soatlik siydik bilan oziqlanganlarga qaraganda ko'proq omon qolishdi (p <0,0001 va p = 0,01-rasm, f3; D2 mos ravishda). mM karbamid, qon bilan oziqlangan urg'ochilar karbamid va suvning boshqa barcha konsentrasiyalariga qaraganda uzoqroq yashadilar (p <0,013; 2E-rasm).
Sigir siydigi va karbamid bilan oziqlanadigan xo'jayin va qon so'ruvchi urg'ochi Anopheles arabinisning omon qolishi. Bioassayda (A) urg'ochi chivinlarga yangi va keksa sigir siydigi, turli konsentratsiyalarda karbamid, saxaroza (10%) va distillangan suv (H2O) dan iborat parhez taqdim etilgan. siydik (B, D) va karbamid (C, E) va nazorat, saxaroza va suv bilan oziqlangan barcha urg'ochilar o'lgunga qadar har 12 soatda qayd etiladi.
24 soat davomida parvoz tegirmoni sinovida aniqlangan turlarning umumiy masofasi va soni mezbonni qidiruvchi va qon so'ruvchi chivinlar o'rtasida farq qildi, ular umuman kamroq parvoz faolligini ko'rsatdi (3-rasm). Yangi va qari siydik yoki saxaroza va suv bilan ta'minlangan mezbon izlovchi chivinlar aniq parvoz shakllarini ko'rsatdi, urg'ochi da faol bo'lgan siydigi3), yangi siydigida ko'proq faol bo'lgan. Siydik bilan oziqlangan 24 va 168 soatlik chivinlar esa turli xil parvoz shakllarini namoyon etgan va asosan sutkalik bo'lgan. Saxaroza yoki 72 soatlik siydik bilan ta'minlovchi urg'ochi chivinlar 24 soat davomida faollik ko'rsatgan, suv bilan ta'minlagan urg'ochi chivinlar esa, eng yuqori davrning o'rtalarida sukroz faolligini namoyon etgan. kechasi va erta tongda, 72 soatlik siydikni iste'mol qilganlar esa 24 soat davomida faollikning barqaror pasayishini boshdan kechirgan (3-rasm).
Sigir siydigi va karbamid bilan oziqlanadigan ovchi qon so'ruvchi ayol Anopheles arabinisning parvozi. Parvoz tegirmoni sinovida yangi va qari sigir siydigi, har xil konsentratsiyadagi karbamid, saxaroza (10%) va distillangan suv (H2O) bilan oziqlangan urg'ochi chivinlar gorizontal, qo'ltiqcha bilan bog'langan. va qon so'ruvchi (o'ngda) urg'ochi, 24 soatlik vaqt davomida har bir parhez uchun soatiga umumiy masofa va parvozlar soni qayd etilgan (quyuq: kulrang; yorug'lik: oq). O'rtacha masofa va o'rtacha janglar soni sirkadiyalik faollik grafigining o'ng tomonida ko'rsatilgan. Xato chiziqlari o'rtacha qiymatning standart xatosini ifodalaydi.Statistik tahlil matniga qarang.
Umuman olganda, mezbon qidirayotgan urg'ochilarning umumiy parvoz faoliyati 24 soatlik vaqt davomida parvoz masofasiga o'xshash naqshga amal qildi. O'rtacha parvoz masofasiga ovqatni iste'mol qilish sezilarli ta'sir ko'rsatdi (F(5, 138) = 28,27, p <0,0001) va mezbon qidirayotgan urg'ochilar boshqa barcha dietalar bilan solishtirganda 72 soatdan ko'proq uzoqroq siydik qabul qilishgan. 0,0001) va saxaroza bilan oziqlangan chivinlar yangi (p = 0,022) va 24 soatlik siydik (p = 0,022) bilan oziqlangan chivinlarga qaraganda uzoqroq uchdi. Siydik dietasida tasvirlangan parvoz faolligi namunasidan farqli o'laroq, karbamid bilan oziqlangan mezbon-qidiruvchi urg'ochi ayollar ikkinchi marta parvoz qilishning yarmida faollik ko'rsatdilar. qorong'u fazaning (3-rasm) .Faoliyat naqshlari o'xshash bo'lsa-da, karbamid bilan oziqlangan mezbon qidirayotgan urg'ochilar so'rilgan kontsentratsiyaga qarab o'rtacha parvoz masofasini sezilarli darajada oshirdi (F (5, 138) = 1310,91, p <0,0001). Xost izlovchi urg'ochilar karbamidning har qanday konsentratsiyasini oziqlantirishdi (fp <0, suv yoki ayollarga qaraganda uzoqroq uchib ketishdi).
Qon so'ruvchi chivinlarning umumiy parvoz faolligi barcha dietalar bo'yicha 24 soat davomida barqaror va barqaror bo'lib, qorong'u davrning ikkinchi yarmida suv bilan oziqlangan urg'ochi ayollarda, shuningdek, yangi va 24 soatlik yoshdagi ayollarda siydik faolligi ortdi (3-rasm). 0,0004), karbamid xun yo'q edi (F (5, 138) = 1,36, p = 0,24) .boshqa siydik va nazorat dietasi bilan (yangi, p = 0,0091; 72 soat, p = 0,0022; 168 soat, p = 0,001; saxaroza, p = 0,001; d07, p = H 0, p = H 0, p = 0,00. 0,036).
Siydik va karbamid bilan oziqlantirishning reproduktiv ko'rsatkichlarga ta'siri tuxum qo'yadigan bioassaylarda baholandi (4A-rasm) va har bir urg'ochi tomonidan qo'yilgan tuxum soni, tuxum hajmi va yangi chiqqan birinchi lichinkalar bo'yicha tekshirildi. Tuxum qo'yish soni. Siydik bilan oziqlangan, arab urg'ochi dietasi (F2 2) (F2, p = F84) = 0,0008; 4B-rasm).Ayollar 24 soatlik siydik bilan oziqlangan, qon ovqati boshqa siydik dietalari bilan oziqlangan ayollarga qaraganda ancha ko'p tuxum qo'ygan va sukroz bilan oziqlanganlarga o'xshash edi (4B-rasm). 0.0001), 24 soatlik siydik va sukroz bilan oziqlangan urg'ochilar suv bilan oziqlangan urg'ochilarga qaraganda sezilarli darajada kattaroq tuxum qo'yadilar, 168 soat siydik bilan oziqlangan urg'ochilarning tuxumlari esa sezilarli darajada kichikroq edi (4C-rasm). Bundan tashqari, siydik dietasi lichinka hajmiga sezilarli ta'sir ko'rsatdi (F (5, p = 710, 70, p). 24 va 72 soatlik siydik bilan oziqlangan urg'ochilar qo'ygan tuxumdan sezilarli darajada kattaroq lichinkalar tuxum lichinkalaridan qo'yilgan tuxumlardan ko'ra. Suv bilan oziqlangan va 168 soat siydik bilan oziqlangan urg'ochi (4D-rasm).
Sigir siydigi va karbamid bilan oziqlanadigan ayol Anopheles arabinisning reproduktiv ko'rsatkichlari. Qon bilan oziqlangan ayol chivinlari yangi va keksa sigir siydigi, turli konsentratsiyali karbamid, saxaroza (10%) va distillangan suv (H2O) dan 48 soat davomida bioassaylarga joylashtirishdan oldin (E soni 8), tuxum qo'yish va tuxumni olishdan iborat. hajmi (C, F) va lichinkalar hajmi (D, G) taqdim etilgan dietadan sezilarli darajada ta'sirlangan (sigir siydigi: BD; karbamid: EG). Turli harf nomlari yordamida o'lchangan har bir parametr uchun o'rtacha bir-biridan sezilarli darajada farq qilgan (Tukeyning post hoc tahlilidan foydalangan holda bir tomonlama ANOVA; p <0,05). Xato chiziqlari o'rtacha standart xatoni ko'rsatadi.
Siydikning asosiy azotli komponenti sifatida, karbamid qon bilan oziqlangan urg'ochilarga parhez sifatida berilganda, barcha tadqiqotlarda reproduktiv parametrlarga sezilarli ta'sir ko'rsatdi. Karbamid kontsentratsiyasiga qarab, karbamid bilan oziqlangan urg'ochilar tomonidan qo'yilgan tuxumlar soni qonda ovqatdan keyin (F(11, 360) = 4,69; p <1140), ayollarda karbamid kontsentratsiyasi. µM va 1,34 mM ko‘proq tuxum qo‘ydi (4E-rasm). 134 mkM yoki undan yuqori karbamid konsentratsiyasi bilan oziqlangan urg‘ochilar suv bilan oziqlangan urg‘ochilarga qaraganda kattaroq tuxum qo‘yadi (F(10, 4245) = 36,7; p < 0,0001; 4F-rasm), garchi lichinkaning kontsentratsiyasi o‘xshash bo‘lsa-da, F1 ta’sir qiladi. 3305) = 37,9; p <0,0001) ko'proq o'zgaruvchan edi (4G-rasm).
Xost-izlovchi sigir siydik bosh bo'shlig'i uchuvchi ekstraktlari uchun umumiy jozibadorlik. Shisha naychali olfaktometrda (5A-rasm) baholangan arabiensis siydik yoshiga sezilarli ta'sir ko'rsatdi (ch2 = 15,9, df = 4, p = 0,0032; Fig. 5B; 5B-rasmda siydik miqdori sezilarli darajada yuqori ekanligini ko'rsatdi). boshqa barcha muolajalar bilan solishtirganda jozibadorlik darajalari (72 soat: p = 0,0060, 168 soat: p = 0,012, pentan: p = 0,00070), yangi siydik hidi bundan mustasno (p = 0,13; 5B-rasm). Garchi umumiy jalb qilish qon so'ruvchi chivinlardan farqli o'laroq bo'lmagan bo'lsa-da ps = sezilarli darajada farq qilmagan chivin 8.78, df = 4, p = 0.067; 5C-rasm), bu urg'ochilar nazorat bilan solishtirganda 72 soatlik siydik bilan solishtirganda bosh bo'shlig'idagi uchuvchi ekstraktlar uchun sezilarli darajada jozibador ekanligi aniqlandi (p = 0,0066; 5C-rasm).
Xost va qon bilan oziqlangan Anopheles arabianusni qidirishda tabiiy va sintetik sigir siydigi hidlariga xatti-harakatlari. Shisha naychali olfaktometrning sxemasi (A). Yangi va keksa sigir siydigidan bosh bo'shlig'idagi uchuvchi ekstraktlarni xostga (B) va qon so'ruvchi (C) chivin ekstraktining tortilishi. yangi (D), 24 soatlik (E), 72 soatlik (F) va 168 soatlik (G) yoshdagi sigir siydigidan ajratilgan. Elektron antennani aniqlash (EAD) izlari gaz kromatografidan elutsiya qilingan bosh bo'shlig'idagi bioaktiv birikmalarga javoban kuchlanish o'zgarishlarini ko'rsatadi va detektor shkalasi shtrixlari bilan aniqlanadi. (mV) saqlanish vaqtiga (s) nisbatan. Biologik faol birikmalarning xossalari va ajralib chiqish tezligi (µg h-1) ko‘rsatilgan. Bitta yulduzcha (*) doimiy past amplitudali javobni bildiradi. Ikkita yulduzcha (**) takrorlanib bo‘lmaydigan javoblarni bildiradi. Xostni (H) va qon so‘ruvchi (I) yangi sintezlangan aralashmalar va turli xil aralashmalarni toping. siydik hidlari. Turli harf nomlariga jalb qilingan chivinlarning o'rtacha nisbati bir-biridan sezilarli darajada farq qilgan (Tukey's post hoc tahlilidan foydalangan holda bir tomonlama ANOVA; p <0,05). Xato chiziqlari o'lchovning standart xatosini ifodalaydi.
Ayol Ann.arabiensis, qon ovqatidan 72 soat va 120 soat o'tgach, yumurtlama paytida, pentan nazorati bilan solishtirganda yangi va qari sigir siydigidan bosh bo'shlig'idagi uchuvchi ekstraktlar uchun afzallik ko'rsatilmagan (ch2 = 3,07, p> 0,05; Qo'shimcha fayl 1: S1-rasm).
Ayollar uchun Ann.arabiensis, GC-EAD va GC-MS tahlillari sakkiz, olti, uchta va uchta biofaol birikmalarni aniqladi (5D-G-rasm). Elektrofiziologik reaktsiyalarni keltirib chiqaradigan birikmalar sonidagi farqlar kuzatilgan bo'lsa-da, bu birikmalarning aksariyati har bir bosh bo'shlig'ida mavjud bo'lib, yangi va qarilikdan yig'ilgan uchuvchi ekstrakt, har bir javob uchun siydikdan olingan ekstrakt. chegaradan yuqori bo'lgan ayol antennalari keyingi tahlillarga kiritilgan.
Bosh bo'shlig'i kollektsiyasida bioaktiv birikmalarning umumiy uchuvchan ajralib chiqish tezligi yangi siydikda 29 mkg / soat dan 168 soatlik siydikda 242 mkg / soatgacha ko'tarildi, bu asosan p-krezol va m-formaldegid tufayli fenol va fenolning ko'payishiga olib keldi. dekanal, siydik yoshi ortishi bilan kamaydi, bu xromatogrammada (5D-rasm) -G chap panelda signal intensivligining (ko'pligi) kuzatilgan pasayishi bilan bog'liq) va bu birikmalarga fiziologik javoblar (5D-G o'ng paneli).
Umuman olganda, sintetik aralashmada yangi va qarigan siydik bo'shliqlarining uchuvchi ekstraktlarida aniqlangan bioaktiv birikmalarning o'xshash tabiiy nisbati bor edi (5D-G-rasm) va xostni qidirishda sezilarli e'tirozga olib kelmadi (ch2 = 8,15, df = 4, p = 0,083; 5H-rasm) yoki qon so'ruvchi (5H = ch2) 4.91, df = 4, p = 0.30; 5I-rasm).Ammo, muolajalar o'rtasidagi post hoc juftlik taqqoslashlari mezbon-izlovchi chivinlar pentan nazorati bilan solishtirganda 24 soatlik siydikning sintetik aralashmasiga sezilarli darajada jozibador ekanligini ko'rsatdi (p = 0.0086; rasm).
24 soatlik siydikning sintetik aralashmalaridagi individual komponentlarning rolini baholash uchun, Y-truba tahlilidagi to'liq aralashmalarga nisbatan oltita ajratuvchi aralashmalar baholandi, unda alohida birikmalar olib tashlangan. Xost izlovchi chivinlar uchun, to'liq aralashmadan individual birikmalarni olib tashlash xatti-harakatlarning reaktsiyalariga sezilarli ta'sir ko'rsatdi (ch2, d = 19, p = 06; p = 06. 1-fayl: S2A-rasm), barcha subtractiv aralashmalar to'liq aralashgandan ko'ra kichikroq bo'lganidan ko'ra jozibadorroq edi. Aksincha, to'liq sintetik aralashmadan alohida birikmalarni olib tashlash qon so'ruvchi chivinlarning xatti-harakatlariga ta'sir qilmadi (ch2 = 11,38, df = 6, p = 0,077) 0,022; 1-qo'shimcha fayl: S2B-rasm).
Efiopiyadagi bezgak-endemik qishloqda 24 soatlik sigir siydigining sintetik aralashmasining dala sharoitida chivinlarni jalb qilish samaradorligi o'n kecha davomida baholandi (6A-rasm). Jami 4861 chivin qo'lga olindi va aniqlandi, ulardan 45,7% ni tashkil etdi. Anopheles pharoensis va 35,4% Culex spp. (1-qo'shimcha fayl: S1-jadval). Anopheles arabinis PCR tahlili bilan aniqlangan An.Gambiya turlar majmuasining yagona a'zosidir. Bir kechada o'rtacha 320 ta chivin tutilgan, bu vaqt davomida sintetik aralashma bilan tuzoqqa chivinlar aralashtirmasdan ushlangan. 3196) = 170.0, p < 0.0001) .Sinovning boshida, oʻrtasida va oxirida beshta nazorat kechasining har biriga oʻljasiz tuzoqlar oʻrnatildi. Har bir juft tuzoqda bir xil miqdordagi chivinlar ushlandi, bu esa uylar oʻrtasida bir-biriga bogʻliqlik yoʻqligini koʻrsatmoqda (ch2(0, p <0.019, p6) 0,05) va o'rganish davrida populyatsiyaning kamayishi kuzatilmadi.Nazorat tuzoqlari bilan solishtirganda, sintetik aralashmani o'z ichiga olgan tuzoqlarda ushlangan chivinlar soni sezilarli darajada oshdi: mezbonni qidirish (ch2(0, 2107) = 138,7, p < 0,0001), yaqinda qon bilan oziqlantirish (ch2 (0, 0, 03, p) homiladorlik (ch2(0, 228) = 6.27, p = 0.0123; 1-qoʻshimcha fayl: S1-jadval). Bu qoʻlga olingan chivinlarning umumiy sonida ham namoyon boʻladi: mezbon izlovchi > qon soʻruvchi > homilador > yarim homilador > erkak.
24 soatlik sintetik sigir siydigi hid aralashmasining samaradorligini dalada baholash. Dala sinovlari Efiopiyaning janubiy-markaziy qismida (xarita), Maki shahri yaqinida (qoʻshish), Kasalliklarni nazorat qilish markazlari (CDC) yorugʻlik tuzogʻi (oʻngda) yordamida juftlashtirilgan uylarda (oʻngda) oʻtkazildi. CDC fototuzoqlari urgʻochi Anopheles arabesques (B), Anopheles farroes (C) emas, boshqacha tarzda, fiziologik holatga bogʻliq taʼsir koʻrsatadi. nazorat (ochiq) tuzoqlari (N = 10), o'ngdagi barlar nazorat tuzoqlari juftliklarida o'rtacha tanlash indeksini ifodalaydi (ochiq; N = 5). ).Yulduzchalar statistik ahamiyatga egalik darajasini bildiradi (*p = 0,01 va ***p <0,0001)
Sintetik aralashmalarni o'z ichiga olgan tuzoqlarda uchta tur turlicha tutilgan. Xost (ch2(1, 1345) = 71,7, p < 0,0001), qon bilan oziqlantirish (ch2(1, 517) = 16,7, p < 0,0001) va homiladorlik (ch80, 1, p1 = 1. 0,0134) a .arabiensis sintetik aralashmani chiqaradigan tuzoqqa tushdi (6B-rasm), An miqdori esa farq qilmadi. Faroensis turli xil fiziologik holatlarda topildi (6C-rasm). Culex uchun faqat sintetik aralashma bilan cho'ktiriladigan tuzoqlarni qidiradigan chivinlar sonining sezilarli o'sishi aniqlandi. (ch2 (1,1319) = 12,6, p = 0,0004; 6D-rasm), nazorat tuzoqlari bilan solishtirganda.
Efiopiyadagi naslchilik joylari va qishloq jamoalari oʻrtasida potentsial xostlardan tashqarida joylashgan oʻlja tuzoqlari bezgak chivinlari sigir siydigi hidini uy egasi yashash joyi sifatida ishlatishini baholash uchun ishlatilgan. Uy egasi signallari boʻlmaganida, issiqda va sigir siydigi hidi bor yoki boʻlmasa, hech qanday chivin tutilmagan (Qoʻshimcha harorat va S3-rasmda). sigir siydigi hidi, ayol bezgak chivinlari siydik yoshidan qat'i nazar, oz sonli bo'lsa-da, tortildi va qo'lga olindi (ch2(5, 25) = 2,29, p = 0,13; Qo'shimcha fayl 1: Shakl S3 ).Bundan farqli o'laroq, suv nazorati bezgak chivinlarini yuqori haroratlarda ushlamadi (A: dd3-rasm).
Bezgak chivinlari sigir siydigi (ya'ni, ko'lmaklar) bilan kompensatsion oziqlantirish orqali azot o'z ichiga olgan birikmalarni oladi va tarqatadi, boshqa hasharotlar kabi hayot tarixini yaxshilash uchun [2, 4, 24, 25, 26]. Sigir siydigi bezgak va ko'chatlar bilan chambarchas bog'liq bo'lgan qayta tiklanadigan resursdir. Urgʻochi chivinlar bu manbani hid orqali aniqlaydilar va siydikdagi azotli birikmalarning, shu jumladan siydikning asosiy azotli komponenti karbamidning soʻrilishini tartibga solishga qodir. Xost-qidiruvchi urg‘ochi chivinlar, shuningdek, qon bilan oziqlangan shaxslarning birinchi gonadotropik sikl davomida omon qolish va reproduktiv xususiyatlari.Shuning uchun siydik aralashuvi to‘yib ovqatlanmaydigan kattalar kabi yopiq bezgak tashuvchilari uchun muhim ozuqaviy rol o‘ynaydi [8], chunki u urg‘ochi chivinlarni past oziqlanish xavfi bilan oziqlantirish qobiliyatini ta’minlaydi. topilma muhim epidemiologik oqibatlarga olib keladi, chunki ayollar o'zlarining umr ko'rish davomiyligini, faolligini va reproduktiv mahsuldorligini oshiradi, bularning barchasi vektor qobiliyatiga ta'sir qiladi. Bundan tashqari, bu xatti-harakat kelajakda vektorni boshqarish dasturlarining maqsadi bo'lishi mumkin.