“O‘ychan, fidoyi fuqarolarning kichik guruhi dunyoni o‘zgartirishi mumkinligiga hech qachon shubha qilmang.Darhaqiqat, u yerda yagona”.
Cureusning missiyasi tibbiyot nashrining uzoq yillik modelini o'zgartirishdan iborat bo'lib, unda tadqiqot topshirish qimmat, murakkab va ko'p vaqt talab qilishi mumkin.
Trombotsitlarga boy plazma/prp, to‘qimalarni qayta tiklash, trombotsitlarni faollashtirish, glyukoza proliferativ terapiyasi, trombotsitlar, proliferativ terapiya
Ushbu maqoladan iqtibos keltiring: Harrison TE, Bowler J, Reeves K va boshqalar.(2022 yil 17-may) Glyukozaning trombotsitlar soni va hajmiga ta'siri: regenerativ tibbiyotga ta'siri.Davolash 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
Trombotsitlarga boy plazma (PRP) va gipertonik glyukoza eritmalari odatda regenerativ tibbiyotda, ba'zan birgalikda in'ektsiya uchun ishlatiladi.Gipertonik glyukozaning trombotsitlar lizisi va faollashuviga ta'siri ilgari xabar qilinmagan.Biz ko'tarilgan glyukoza kontsentratsiyasining trombotsitlar va eritrotsitlar soniga, shuningdek PRP va butun qondagi (WB) hujayra hajmlariga ta'sirini sinab ko'rdik.PRP yoki butun qon bilan aralashtirilgan barcha glyukoza aralashmalari bilan trombotsitlar sonining tez qisman qisqarishi sodir bo'ldi, bu qisman lizisga mos keladi. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu esa qoldiq trombotsitlarning o'ta (>2000 mOsm) gipertoniklikka tez joylashishini ko'rsatadi. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu esa qoldiq trombotsitlarning o'ta (>2000 mOsm) gipertoniklikka tez joylashishini ko'rsatadi. Posle pervoy minuty kolichestvo trombositov ostavalos stabilnym, chto ukazyvaet bystruyu akkomodatsyyu ostatochnyh trombotsitov ham ekstremal (>2000 mOsm) gipertonus. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu esa qoldiq trombotsitlarning o'ta (>2000 mOsm) gipertoniklikka tez joylashishini ko'rsatadi.língíngíngíngínííííííííííííííííííííííííníínííníííníngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngmīngmīngmīmīmīmīmīmīmīmīmīmīmīmīmīmīng2000 mOsm. Posle pervoy minuty kolichestvo trombotsitov ostavalos stabilnym, chto ukazyvaet bystruyu adaptatyu ostatochnyh trombotsitov k ekstremalnom (>2000 mOsm) giperosmolyarnomu sostoyaniyu. Birinchi daqiqadan so'ng trombotsitlar soni barqaror bo'lib qoldi, bu esa qoldiq trombotsitlarning ekstremal (>2000 mOsm) giperosmolyar holatga tez moslashishini ko'rsatadi.25% va undan yuqori glyukoza konsentratsiyasi trombotsitlarning o'rtacha hajmining (MPV) sezilarli darajada oshishiga olib keldi, bu trombotsitlar faollashishining dastlabki bosqichini ko'rsatadi.Trombotsitlar lizis yoki faollashuv sodir bo'ladimi yoki yo'qmi, va gipertonik glyukoza in'ektsiyasining o'zi yoki PRP bilan birgalikda qo'shimcha klinik foyda keltirishi mumkinligini aniqlash uchun qo'shimcha tadqiqotlar talab qilinadi.
1950-yillarda amerikalik jarroh Jorj Xakett tendon va ligamentlarga proliferativ eritma yuborish orqali ko'plab bemorlarda bo'g'im va bel og'rig'ini doimiy ravishda engillashtirishi mumkinligini aniqladi.Uning quyonlarda o‘tkazgan tajribalari shuni ko‘rsatdiki, u proliferativ terapiya deb atagan davolash tendonlarning kattalashishi va mustahkamlanishiga sabab bo‘lgan.Gistologik tadqiqotlar bu jarayonda yangi kollagen ishlab chiqarilishini tasdiqladi [1].
Dastlabki bir necha o'n yilliklarda ko'plab turli xil tarqatish echimlari sinab ko'rildi.1990-yillarga kelib, ko'pchilik amaliyotchilar glyukozaning yuqori konsentratsiyasini eng xavfsiz va eng samarali usul deb bilishgan.Biroq, harakat mexanizmi noaniqligicha qolmoqda.
20-asrda Hackett ishidan keyin bir nechta klinik tadqiqotlar o'tkazildi.Biroq, 2000-yillarda qiziqish yangilandi va bel og'rig'i [2], tizzaning osteoartriti [3] va lateral epikondilit [4] davolash uchun proliferativ terapiyaning bir nechta muvaffaqiyatli klinik sinovlari yakunlandi.
To'qimalarning yangilanishi ildiz hujayralarining ishtirokini talab qiladi.Shuning uchun glyukozaning yuqori konsentratsiyasi qandaydir tarzda ildiz hujayralarining migratsiyasini, replikatsiyasini va differentsiatsiyasini keltirib chiqarishi kerak.Biz trombotsitlar xabarchi sifatida harakat qilishi va glyukozaning yuqori kontsentratsiyasi trombotsitlardan sitokinlar va o'sish omillarini chiqarishga olib kelishi mumkin, bu esa regenerativ jarayonlarni, ayniqsa glyukoza yuqori konsentratsiyali hududlarga ildiz hujayralarining migratsiyasini rag'batlantirishi mumkin deb taxmin qilamiz.
Trombotsitlarning faollashishi har doim hujayra ichidagi kaltsiyning ko'payishidan oldin sodir bo'ladi [5].Liu va boshqalar.2008 yilda yuqori glyukoza darajalari plazma membranasidagi vaqtinchalik retseptorlar potentsiali kanonik tip 6 (TRPC6) kanallarining faolligini oshirishini ko'rsatdi, bu esa trombotsitlarga kaltsiy ionlarining kirib kelishiga olib keladi [6].Boshqa bir tadqiqot shuni ko'rsatdiki, mikrotubulaning marginal zonasiga kaltsiy ionlari ta'siri marginal zonaning bo'shashishi, kengayishi va deformatsiyasiga olib keladi, bu esa o'z navbatida shaklning diskdan sferikgacha o'zgarishiga olib keladi, natijada trombotsitlarning o'rtacha hajmi (MPV) ga olib keladi [7].
Ushbu tadqiqotdagi gipotezamiz trombotsitlarning glyukozaning yuqori konsentratsiyasiga ta'siri mikrotubulaning marginal zonasiga va hujayra ichidagi muhitga ta'sir qiladi, bu esa MPV ning oshishiga olib keladi.
Barcha ishtirokchilar tadqiqot tafsilotlari tushuntirilgandan so'ng va namunalarni olishdan oldin xabardor qilingan rozilik shaklini imzoladilar.Ushbu tadqiqotda faqat gematokrit 2% dan yuqori bo'lgan PRP namunalari ishlatilgan, shuning uchun eritrotsitlar (eritrotsitlar) soni va qizil qon hujayralarining o'rtacha korpuskulyar hajmi taqqoslash uchun kiritilishi mumkin.
Tadqiqot to'rt bosqichda o'tkazildi, birinchi bosqich PRP va qolgan bosqichlar to'liq qon edi (1-jadval).Yuqorida ta'riflanganidek [8], barcha nisbiy markazdan qochma kuchlar (RCF, g-kuch) markazdan qochma shpritsdagi qon ustunining o'rta nuqtasidan (Rmid, sm) hisoblab chiqilgan.Biz MPV dan trombotsitlar sezuvchanligi belgisi sifatida va trombotsitlar soni potentsial trombotsitlar lizisining ko'rsatkichi sifatida foydalanishni tanladik, ularning ikkalasini ham standart gematologiya analizatorlarida osongina o'lchash mumkin.
Birinchi bosqichda 47 nafar ko'ngilli qon namunalarini topshirdi - bitta etilendiamintetraasetik kislota (EDTA) va bitta PRP to'liq qon namunasi (natriy sitrat (NaCl, 3%) bilan antikoagulyatsion) (1-jadval).Rokerni zudlik bilan trubaga joylashtiring.To'liq qon ro'yxati (CBC) EDTA namunalarida uch nusxada o'tkazildi va NaCl namunalari CBC tahlili uchun uch nusxada tahlil qilindi va keyin PRP yuqorida tavsiflangan turli usullar bilan tayyorlandi [8].Barcha PRP namunalari 900-1000 g da santrifüjlash orqali tayyorlangan.Har bir PRP namunasini vorteksli mikserda 5-10 soniya davomida aralashtiring, so'ngra beshta 0,5 ml alikvotni naychalarga bo'ling.
Trombotsitlar ta'sirining ko'tarilgan glyukoza kontsentratsiyasiga ta'sirini baholash uchun suvdagi teng miqdorda (0,5 ml) 0%, 5%, 12,5%, 25% va 50% glyukoza trombotsitlar namunalari bilan aralashtiriladi, bunda 0%, 2,5% 6,25% va probirkada 12,5% glyukoza aralashmasi olinadi. ker 15 daqiqa.Har bir aralashmaning TAC 15 daqiqadan so'ng uch nusxada tahlil qilindi.Trombotsitlar soni (PLT), qizil qon tanachalari soni, MCV va MPV har bir naycha uchun o'rtacha hisoblangan va barcha PRP namunalari uchun o'rtacha trombotsitlar soni, qizil qon tanachalari soni, MCV va MPV hisoblab chiqilgan.
Ma'lumot to'plashning birinchi bosqichi tugagandan so'ng, biz D50W qo'shilgandan so'ng PRP trombotsitlarida trombotsitlar hajmining sezilarli o'sishini payqadik.PRP trombotsitlari qondagi barcha trombotsitlarni ifodalashi shart emas va PRP muhiti WB muhitidan farq qiladi.Shuning uchun biz to'liq qonga D50W qo'shilishi ta'sirining ikkinchi bosqichini sinovdan o'tkazishga qaror qildik.
Ikkinchi tur uchun biz “Tahlil” bo‘limida tavsiflanganidek, birinchi seriyadagi natijalar asosida 30 ta namunani tanladik.Ushbu seriyada 20 nafar ko'ngilli qon namunalarini topshirdi (1-jadval).To'liq qon (1,8 ml) 3 ml shpritsga tushirildi va 0,2 ml 40% NaCl bilan antikoagulyasiya qilindi.Butun qon shprits besh soniya davomida vorteks mikser bilan aralashtirildi va CBC uch nusxada tahlil qilindi.Tahlildan so'ng antikoagulyatsion qon 5 ml lik shpritsdagi 2 ml 50% glyukozaga qo'shildi (yakuniy glyukoza konsentratsiyasi taxminan 25% (D25)) va chayqaladigan trubkaga 30 daqiqaga joylashtirildi. 30 daqiqadan so'ng WB shpritslaridagi D25/CBC uch nusxada tahlil qilindi. Trombotsitlar soni, MPV va o'rtacha RBCV soni. PLT, qizil qon tanachalari soni, MCV va MPV glyukoza qo'shilishidan oldin va keyin har bir namuna uchun hisoblab chiqilgan.
To'liq qondagi trombotsitlar odatda minimal invaziv in'ektsiya tufayli proliferativ glyukoza terapiyasi paytida gipertonik glyukoza ta'siriga uchraganligi sababli va PRPni gipertonik glyukoza bilan in'ektsiyadan oldin birlashtirish odatiy hol emasligi sababli, biz 1-bo'limda gipertonik glyukozani WB bilan birgalikda o'rganishga qaror qildik. Uchinchi va to'rtinchi qadam.Har bir bosqichda 20 nafar ko‘ngilli qon antikoagulyantlari uchun 7-8 ml ACD-A (tarkibida trinatriy sitrat (22,0 g/l), limon kislotasi (8,0 g/l) va glyukoza (24,5 g/l), dekstroz sitrat eritmasi) 7-8 ml (1-jadval) topshirdi.MPV ning oshishi bilan bog'liq bo'lgan chegara foizini aniqlash uchun faqat 12,5% dan ortiq glyukoza aralashmalari ishlatilgan.Uchinchi bosqichda 1 ml qon probirkaga solinadi.Keyin 1 ml 30% glyukoza, 40% glyukoza yoki 50% glyukoza qo'shib, mos ravishda 15%, 20% va 25% glyukoza konsentratsiyasini olish uchun qonni vorteksli mikserda 10 soniya davomida aralashtiramiz.Glyukoza qon namunalari aralashtirilgandan so'ng darhol CBC uchun tahlil qilindi va har ikki daqiqada 30 daqiqa davomida takrorlandi.
Dastlabki aralashtirish vaqtida 1:1 gipertonik glyukoza va WB yoki PRP qo'shilishi trombotsitlarni bir necha soniya davomida 25% dan yuqori konsentratsiyaga olib keladi.To'rtinchi bosqichda, minimal boshlang'ich cho'qqi kontsentratsiyasi bilan gipertonik glyukoza ta'sirini baholash va glyukoza ta'sirining yuqori chegarasini tekshirish uchun biz D25W yoki D50W ga faqat oz miqdordagi qon qo'shdik.1 ml D25W yoki D50W ni probirkaga soling va namunani 10 soniya davomida aylantirib, 0,2 ml WB qo'shing.Bunday hollarda qon 3-bosqichdagi kabi yakuniy konsentratsiyadan 50% emas, balki oxirgi konsentratsiyadan taxminan 20% yuqori konsentratsiyada glyukoza ta'siriga uchradi, natijada glyukozaning yakuniy kontsentratsiyasi 20,8% va 41,6% ni tashkil etdi.Aralash namunalar 3-bosqichdagi kabi bir xil vaqt oralig'ida tahlil qilindi.
Har bir glyukoza suyultirish seriyasining birinchi bosqichida 30 ta namuna olindi, chunki bu tajriba tadqiqoti uchun mos namuna hajmi edi [9].Har bir bosqichning oxirida (birinchi bosqichni o'z ichiga olgan holda) bitta populyatsiyadagi uzluksiz natija o'zgaruvchisining o'rtacha qiymatini baholash uchun zarur bo'lgan tanlama hajmini aniqlash uchun ishlatiladigan formuladan foydalanib, namuna hajmining etarliligini baholang.Formula n = Z2 x SD2 /E2.Bu tenglamada Z - Z ball, SD - standart og'ish, E - kerakli xato [10].Bizning alfamiz 0,05, bu Z qiymati 1,96 ga to'g'ri keladi va biz xatolikni 5 (foizda) kutamiz.Demak, n = (1,962 x SD2)/52 ni hal qilamiz.Natijalar shuni ko'rsatdiki, har bir bosqich uchun talab qilinadigan namuna hajmi to'plangan haqiqiy sondan kichikroq.
Bir nechta glyukoza konsentratsiyasidan foydalangan holda 1, 3 va 4-davrlarda turli glyukoza kontsentratsiyasining ta'siri 0 vaqt va har bir keyingi vaqt (1-bosqich 15 daqiqada, 3-davr 15 daqiqada) o'rtasidagi fraksiyonel o'zgarishlarni solishtirish orqali tahlil qilindi.va 15 soniyada to'rtta, so'ngra har ikki daqiqada.) Har bir vaqt davri uchun o'zgarish stavkalari Mann-Whitney U-testi yordamida taqqoslandi, chunki ma'lumotlar Shapiro-Uilk me'yoriylik testi tomonidan aniqlangan normal taqsimotga amal qilmadi.Birinchi, uchinchi va to'rtinchi bosqichlarda (jami beshta) bir nechta guruhlarning (beshta) 1-dan 1-ga tahlili o'tkazilganligi sababli, kerakli alfa qiymatini ≤0,01 ga sozlash uchun Bonferroni tuzatishi amalga oshirildi, lekin ≤0,05 emas.
Gipertonik dekstrozning barcha kontsentratsiyasi bilan trombotsitlar sonining kamayishi va PRP trombotsitlarida MPV ning >12,5% dekstroz konsentratsiyasida ortishi: PRP trombotsitlari soni boshlang'ich to'liq qonga nisbatan konsentratsiyadan birdan besh baravargacha ko'tarildi, bu usul bo'yicha farqlanadi (tasvirlanmagan). Gipertonik dekstrozning barcha kontsentratsiyasi bilan trombotsitlar sonining kamayishi va PRP trombotsitlarida MPV ning >12,5% dekstroz kontsentratsiyasida ortishi: PRP trombotsitlari soni boshlang'ich to'liq qonga nisbatan bir dan besh baravar kontsentratsiyaga ko'tarildi, bu usul bo'yicha o'zgarib turadi (tasvirlanmagan). Umenshie kolichestva trombotsitov va barcha nazorat qilish usullarining gipertonik dekstrozi va uvelichenie MPV va trombotsitax PRP uchun trombotsitlar > 12,5%: PRP kolichestvo trombositlar va 1-5 razryadlar bo'yicha sravneniyu sravneniyu sravneniyu sxodnoy tsellyuloza o'tkazuvchanligi. Barcha gipertonik dekstroz konsentrasiyalarida trombotsitlar sonining kamayishi va PRP trombotsitlarida MPV ning >12,5% dekstroz kontsentratsiyasida ortishi: PRP trombotsitlari soni usulga qarab (ko'rsatilmagan) boshlang'ich to'liq qonga nisbatan 1-5 baravar oshdi. ).①> 12,5% 的 葡萄糖, PRP ↓ ↑, PRP ↑ 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 的 ↑ Glyukoza kontsentratsiyasi >12,5% bo'lsa, glyukozaning yuqori konsentratsiyasi qon miqdorini pasaytiradi, PRP qon MPV ni oshiradi: chíngíngínga nisbatan, PRP qon miqdori konsentratsiyadan 1 dan 5 baravargacha oshadi (ta'riflanmagan). Prikoliyax glyukozi >12,5% barcha markazlashtirilgan gipertoniches glyukozy snijali kolichestvo trombositlar, a MPV povyshali trombotsitax PRP: kolichestvo trombositov PRP uvelichivalos ot 1-dan 5-kratli metodni qo'llab-quvvatlaydi. Glyukoza kontsentratsiyasi >12,5% bo'lganda, barcha gipertenziv glyukoza kontsentratsiyasi trombotsitlar sonini kamaytirdi va PRP trombotsitlarida MPV ni oshirdi: PRP trombotsitlari soni usulga qarab (ta'riflanganidek) to'liq qondagi boshlang'ich konsentratsiyaga nisbatan 1-5 baravar oshdi.1-rasmda ko'rsatilgandek, trombotsitlar soni suvda suyultirilgandan keyin deyarli 75% ga va 15 daqiqadan so'ng glyukozaning turli konsentrasiyalari bilan suyultirilgandan so'ng 20-30% ga, bazaviy PRP va hajmga moslashtirilgan 1: 1 suyultirish bilan solishtirganda (hajmni to'g'irlash bilan 1- k1) kamaydi.k -1 naslchilik).1 naslchilik).
Har bir suyultirishdagi hujayralar soni suyultirishdan oldingi asl sonning bir qismi sifatida ifodalanadi.
PRP ishlab chiqarish jarayonida MPV minimal darajada kamaydi, suyultirish kontsentratsiyasi suvda yoki glyukozada 12,5% gacha (shu jumladan 25% PRP glyukoza aralashmalari) o'zgarmadi va 50% glyukoza eritmasida suyultirilgandan keyin 20% dan ko'proq oshdi (2-rasm).).Aksincha, eritrotsitlar H2O dan boshqa har qanday suyultirishda hajmda sezilarli o'zgarishlarni ko'rsatmadi.
Har bir suyultirishdagi hujayralarning o'rtacha hajmi suyultirishdan oldingi dastlabki hajmning foizi sifatida ifodalanadi.
50% glyukoza ta'sirida (25% glyukoza bilan shakllantirish uchun) BCda trombotsitlar sonining shunga o'xshash, ammo kamroq aniq kamayishi va CVRning oshishi kuzatildi.2-jadvalda 50% dekstrozda suyultirilgan to'liq qondagi hujayralar soni va hujayra hajmlari 50% dekstrozda suyultirilgan 1-bosqich PRP ma'lumotlari bilan taqqoslanadi.RBC soni va RBC MCVdagi o'zgarishlar aniq emas edi va bizning e'tiborimiz markazida emas edi.
SD = standart og'ish, MD = guruhlar orasidagi o'rtacha farq, SE = o'rtacha farqning standart og'ishi, RBC = eritrotsitlar, PLT = trombotsitlar, PRP = trombotsitlarga boy plazma, WB = butun qon
WB ga D50W qo'shgandan so'ng, suyultirishga moslashtirilgan trombotsitlar yo'qotilishi 7,7% (310 ± 73 ga qarshi 286 ± 96), D50W da PRP suyultirish uchun 17,8% (664 ± 348 va 544 ± 277) ni tashkil etdi.MPV WB 16,8% ga oshdi (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 gacha), MPV PRP esa 26% ga oshdi (9,2 ± 0,8 va 11,6 ± 0, 7). Ikkala trombotsitlarni kamaytirish va MPVda o'sishning o'rtacha farqlari juda muhim bo'lsa-da, p = 96 (-7 ± 0,5 dan 11,8 gacha (+16.8) p <.001). Ikkala trombotsitlarni kamaytirish va MPVda o'sishning o'rtacha farqlari juda muhim bo'lsa-da, p = 96 (-7 ± 0,5 dan 11,8 gacha (+16.8) p <.001).Trombotsitlar sonining kamayishi va CVR o'sishidagi o'rtacha farqlar PRP bilan sezilarli darajada katta bo'lsa-da, WB ichida trombotsitlar sonining pasayishidagi o'zgarishlar deyarli sezilarli edi (310 ± 73 dan 286 ± 96 gacha (-7,7%); p = 0,06).uvelichenie MPV bylo znachitelnym (ot 10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). MPV ning o'sishi sezilarli bo'ldi (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 (+16,8) p <0,001).mípíííííííííííííííí MPV íííííííííííííííííííàí WB wbíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngjíngíníngíníngíngwb chíngìíííííí（310 ± 73 lí286 ± 96 (-7.7%)；p = .06） míngčičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičičiči <10.5 ± 1.5 ± 10.1 ± 6. 001).PRP míngííííí ííííííí íííííí lēngčičičičii （（（（310 ± 73 lì 286 ± 96 (-7,7%)； p = .06） mēng MPV 01-01-01. ± 0,6 (+16,8) p < ,001）。WB ichida trombotsitlar sonining kamayishidagi o'zgarish deyarli sezilarli edi (310 ± 73 dan 286 ± 96 gacha (-7,7%); p = 0,06), garchi PRP trombotsitlar sonining pasayishi va MPV o'sishidagi o'rtacha farqlar sezilarli darajada kattaroq edi.va MPVning o'sishi sezilarli bo'ldi.(ot 10,1 ± 0,5 to 11,8 ± 0,6 (+16,8) r < 0,001). (10,1 ± 0,5 dan 11,8 ± 0,6 gacha (+16,8) p <0,001).
MPV ning sezilarli o'zgarishini ko'rish uchun 20% glyukozaning yakuniy kontsentratsiyasi talab qilindi, ammo MPV ning o'zgarishi yakuniy 25% kontsentratsiyasida aniqroq edi.Trombotsitlar yo'qolishi dastlabki pasayishdan keyin barqarorlashdi.Biz CVR ning dastlabki keskin pasayishini qayd etdik, ammo CVR 25% yakuniy glyukoza kontsentratsiyasida tezda tiklandi, bu 20% va 15% yakuniy glyukoza konsentrasiyalarida kuzatilgan CVR darajasidan sezilarli darajada yuqori edi (3-rasm va 3-jadvalning chap tomonida; soyali qutilar).p-qiymatlarini ko'rsating ≤ alfa Bonferroni tuzatishi bilan 0,01).Shuningdek, PLT sonining dastlabki keskin pasayishi kuzatildi, 0-15 s boshlang'ich bosqichida kuzatildi va keyin barqaror qoldi (15 s dan 30 minutgacha; 4-jadvalning chap tomonida).
To'liq qonga turli konsentratsiyali glyukoza qo'shilishi MPV ning dastlabki tez pasayishiga olib keldi, so'ngra konsentratsiyaga bog'liq holda 20% dan ortiq tiklanishga olib keldi.Afsonada suyultirilgandan keyin glyukoza konsentratsiyasi ko'rsatilgan.D15, D20 va D25 1:1 nisbatda suyultirilgan holda amalga oshirildi.D21 va D41 1:5 nisbatda suyultirilganda amalga oshirildi.
4-jadvalda gipertonik glyukozada suyultirilganda trombotsitlar sonining o'zgarishi ko'rsatilgan.Biz 1:1 nisbatda suyultirilganda va 1:5 nisbatda suyultirilganda PLT sonining darhol pasayishi o'rtasida dozaga bog'liq munosabatni kuzatdik.Yagona guruhdagi 1:1 nisbatdagi suyultirishlarni 1:5 nisbatdagi suyultirishlar bilan solishtirganda, 1:1 guruhida trombotsitlar soni 1:5 guruhidagidan 66±48000 (23%)ga nisbatan 99±69000 (37%)ga nisbatan darhol kamaygan., p = 0,014) 1:5 guruhida.Birinchi o'lchov nuqtasida dastlabki pasayishdan so'ng trombotsitlar soni stabillashgan glyukoza ulushi sifatida (4-rasm).
To'liq qon glyukozaga 1: 1 nisbatda qo'shilsa, trombotsitlar soni taxminan 25% ga kamayadi.Biroq, to'liq qon 1: 5 nisbatda qo'shilganda, pasayish ancha katta edi - taxminan 50%.
41% glyukoza MPV ni 25% yoki 21% dan tezroq va sezilarli darajada oshirdi.MPV natijalari 3-rasmda ko'rsatilgan. Boshqa barcha suyultirishlarda 50% glyukoza qo'shilgandan so'ng MPVning darhol dastlabki pasayishi kuzatilmadi.25% glyukozadan foydalanganda (oxirgi suyultirishda glyukoza konsentratsiyasi 20,8%) MPV ning o'zgarishi 1:1 nisbatda suyultirilganda 20% glyukoza o'zgarishi bilan solishtirish mumkin edi (3-rasm).MPVdagi o'zgarishlar dastlab 41% aralash konsentratsiyada 25% dan ko'ra ko'proq bo'lsa-da, 16 daqiqadan so'ng MPVdagi 41% va 25% o'rtasidagi farq endi ahamiyatli emas (3-jadval, o'ng).Shunisi qiziqki, 25% glyukoza MPV ni 20,8% dan samaraliroq oshirdi.
Ushbu in vitro tadqiqot bizning farazimizni qisman tasdiqladi. Bu dekstroz aralashmasi bilan trombotsitlarning potentsial qisman parchalanishini, trombotsitlarning haddan tashqari gipertoniklikka tez joylashishini va gipertonik dekstrozaning > 25% kontsentratsiyasiga javoban MPVning sezilarli darajada oshishini ko'rsatdi. Bu dekstroz aralashmasi bilan trombotsitlarning potentsial qisman parchalanishini, trombotsitlarning haddan tashqari gipertoniklikka tez joylashishini va gipertonik dekstrozaning > 25% kontsentratsiyasiga javoban MPVning sezilarli darajada oshishini ko'rsatdi. On pokazal potensialnyy chastichnyy lizis trombositov primesyu dekstrozy, bystruyu akkomodatsyyu trombotsitov to ekstremalnogo gipertonusa va znachitelnoe povyshenie MPV v otvet na hypertonicheskuyu ko'taruvchi destrozy > 25%. Bu dekstroz bilan trombotsitlarning potentsial qisman lizisini, ekstremal gipertoniklikka tez trombotsitlar joylashishini va gipertonik dekstroz darajasi >25% ga javoban MPVning sezilarli darajada oshishini ko'rsatdi.língíngííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííííníngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngíngínglíngínglínglínglínglíngi % língíngíngíngíníngíníníníníníníníníníní MPV língíngíngínílíngíngín língíngíííííííííííííííííííííí qí> 25% língíííííííííííííííííní mpv língínínín U pokazyvaet potentsial chastichnyy lizis trombotsitov smesyami s glyukozoy, bystruyu adaptatsiyu trombotsitov k ekstremalnomu gipertonusi va snachitelnoe uvelchenie MPV v otvet natoksyyu hypertonycheskoy golyukozy > 25%. Bu glyukoza aralashmalari bilan trombotsitlarning potentsial qisman parchalanishini, trombotsitlarning haddan tashqari gipertoniklikka tez moslashishini va gipertonik glyukoza >25% ga javoban MPVning sezilarli darajada oshishini ko'rsatadi.Dastlabki o'sish 41,6% glyukoza ta'sirida maksimal bo'ldi, ammo MPV ning o'sishi ta'sir qilishdan taxminan 20 minut o'tgach, 25% glyukoza ta'siriga yaqinlashdi.
Trombotsitlar kontsentratsiyasi glyukozadan ta'sirlanadi.Glyukozaning barcha suyultirilishida PLT miqdori kamayganini payqadik.PRP seriyasining H2O (0%) seyreltmelerinde trombotsitlar sonining keskin pasayishi osmotik liziz bilan bog'liq bo'lishi mumkin.Shu bilan bir qatorda, bu trombotsitlar to'planishi natijasida yuzaga kelgan artefakt bo'lishi mumkin, ammo bu suyultirishda MPV o'zgarishining yo'qligidan farqli o'laroq.Bu topilma shuni anglatadiki, ba'zi trombotsitlar gipoosmolyarlikka juda sezgir.
Glyukozaning barcha 1: 1 suyultirilishida PLT miqdori 20-30% ga, hatto D5W (252 mOsm da gipotonik) ga kamaydi, bu glyukozaning o'ziga xos osmotik bo'lmagan ta'sirini ko'rsatishi mumkin, chunki PLT va MPV konsentratsiyasining uch barobar ortishi bilan o'zgarishsiz qoldi.glyukoza.D5W dan D25W gacha.Darhaqiqat, PLT kontsentratsiyasi osmolyarlikning oshishi bilan bir oz ko'tarildi.
PLT ning 1: 1 va 1: 5 nisbatda suyultirilganda kamayishi erish effekti glyukozaning dastlabki va yakuniy kontsentratsiyasiga bog'liqligini anglatadi.Agar u faqat boshlang'ich kontsentratsiyaga bog'liq bo'lsa, unda 1: 1 kontsentratsiyasi o'rtasida PLT kamayishidagi farqni ko'rish mumkin.Lekin biz buni qilmaymiz.Agar lizis effekti faqat oxirgi glyukoza kontsentratsiyasiga bog'liq bo'lsa, unda biz 20% 1: 1 seyreltme va 20,8% 1: 5 seyreltme o'rtasida katta farq kutmaymiz.Va shunga qaramay, biz buni qildik.
Agar trombotsitlar parchalanishi tufayli trombotsitlar yo'qolsa, qisman lizat hosil bo'ladi, shundan so'ng sitokinlar va o'sish omillari hujayradan tashqari muhitga chiqariladi.Bir qator tadqiqotlar shuni ko'rsatdiki, trombotsitlar lizati proliferatsiya eritmasi sifatida PRP kabi deyarli samaralidir [11].PRPning o'zi proliferatsiyani davolash uchun samarali yechim ekanligi ko'rsatilgan [12-14].
Faol bo'lmagan trombotsitlar bir nechta ichki tuzilmalar bilan mustahkamlangan disk shaklida aylanadi.Faollashtirish vaqtida ular ko'proq sharsimon yoki amyoba shaklini oladi, natijada hajm oshadi.Hajmining oshishi sirt maydonini ko'paytirishni talab qiladi, bu ochiq tubulalar tizimining (OCS) ekstruziyasi va membranaga ekzositik granulalarning qo'shilishi natijasidir.Gipertonik glyukoza sabab bo'lgan MPV ning ko'payishi ushbu mexanizmlardan birini yoki ikkalasini ham o'z ichiga oladimi yoki yo'qligini aniqlash kerak, ammo agar ikkinchisi bo'lsa, MPV ning oshishi degranulyatsiyani ko'rsatadi.
Ushbu tadqiqot shuni ko'rsatdiki, PRP yoki butun qon trombotsitlarida glyukozaning yuqori konsentratsiyasiga ta'sir qilish MPV ning 15 daqiqa ichida mos ravishda 25% va 41,6% glyukoza konsentratsiyasi bilan oshishiga olib keldi.
Trombotsitlar MPV ning oshishi kaltsiy oqimiga javoban atrofdagi mikronaychalar chigallarining kengayishi bilan bog'liq bo'lishi mumkin.Liu va boshqalar.Glyukoza trombotsitlar TRPC6 kanali orqali kaltsiy oqimiga vositachilik qilishi ko'rsatilgan [6].Bizning farazimiz shundan iboratki, glyukoza mikrotubulalar chigallarining bo'shashishiga olib keladi, bu MPV va trombotsitlar sezgirligi va / yoki faollashuvining oshishiga olib keladi.Biroq, bizning natijalarimizga ko'ra, bu hikoyaning faqat bir qismi.Sinovlarimizda D25W dan past konsentratsiya MPV ning oshishiga olib kelmadi.Biz 12,5% dan 25% gacha bo'lgan glyukoza kontsentratsiyasiga ta'sir qilishni sinovdan o'tkazmaganimizni hisobga olsak, 1-bosqich natijalarimiz glyukoza konsentratsiyasining ushbu diapazonida MPV ning oshishiga olib keladigan chegara bo'lishi mumkinligini ko'rsatadi.3 va 4 bosqichlarda keyingi sinovlar shuni ko'rsatdiki, 20-25% glyukoza buning uchun chegara bo'lib ko'rinadi, ammo nima uchun bu noma'lumligicha qolmoqda.
Santrifüjdan keyin MPV ning ~ 9% pasayishini ham kuzatdik.MPVdagi bu pasayish sentrifuganing qizil qon hujayralari qatlamida tutilgan kattaroq va zichroq trombotsitlar bilan bog'liqmi yoki yo'qmi, aniq emas.Ushbu kuzatish klinisyenlar uchun muhim bo'lishi mumkin, chunki bu PRP trombotsitlari WB trombotsitlarining kichikroq va kamroq zichroq qismi ekanligini anglatishi mumkin.
Oldingi tadqiqotda biz qo'lda PRP tayyorlash arzon ekanligini ko'rsatdik [8].Agar glyukoza to'qima trombotsitlarini yoki PRPni sezgirlashtirsa, ularni faollashtirishga ko'proq moyil qiladi yoki PRP qisman lizat xususiyatiga ega bo'lsa, bu regeneratsiyani kuchaytirishi va terapiyaga bo'lgan ehtiyojni kamaytirishi mumkin.Shuning uchun PRP va yuqori konsentrlangan glyukoza kombinatsiyasi faqat PRP yoki glyukozaga qaraganda ancha tejamkor bo'lishi mumkin.
Bizning tadqiqotimizda bir qator kamchiliklar mavjud.Birinchidan, biz bir nechta turli usullardan olingan PRP dan foydalanamiz.Bu qarama-qarshi natijalarga olib kelishi mumkin.Ikkinchidan, trombotsitlar faollashuvi sodir bo'lganligini aniqroq aniqlash uchun biz namunalarimizning biokimyoviy tahlilini o'tkaza olmadik.Alfa granulasining degranulyatsiya darajasini yoki mavjudligini yaxshiroq tushunish uchun biz P-selektin, trombotsitlar omili 4, monositik trombotsitlar agregatlari yoki trombotsitlar faollashuvining boshqa belgilarini o'lchashni xohlaymiz, ammo bu ushbu tadqiqot doirasidan tashqarida.Uchinchidan, biz elektron mikroskopiya yoki boshqa usullar bilan glyukozaga duchor bo'lgan trombotsitlarda MPV ning ko'payishi mikrotubulalar chalkashliklari ta'siriga bog'liqligini tasdiqlay olmadik.
25% glyukoza bilan WB yoki PRP aralashmalari trombotsitlar faollashuvining boshlanishini ko'rsatuvchi MPV ni oshirdi, garchi bu tadqiqot agregatsiya yoki degranulyatsiya rivojlanishini ko'rsatmasa ham.Gipertonik glyukoza aralashmasi trombotsitlarning yo'qolishiga olib keldi, ehtimol litik ta'sirni ifodalaydi.Trombotsitlarning qisman faollashishi yoki lizisi trombotsitlar in'ektsiyasidan keyin to'qimalarning yangilanishiga olib kelishi mumkin.Ushbu o'zgarishlar qanday klinik oqibatlarga olib kelishi aniq emas.Keyingi tadqiqotlar faollashuv yoki lizisning aniqroq o'lchovlarini ko'rsatdi va WB yoki PRP bilan gipertonik glyukoza aralashmalarining turli klinik ta'sirini baholadi.
Glyukoza proliferativ terapiyasi tez kengayadigan va klinik tadqiqotlarni qo'llab-quvvatlovchi oddiy va arzon regenerativ terapiyadir.Ushbu tadqiqot fiziologik mexanizmni taklif qiladi, agar tasdiqlansa, proliferativ terapiyaning regenerativ mexanizmining bir qismini tushunishga yordam beradi.
Missuri universitetida biotibbiyot va salomatlik informatikasi, Kanzas Siti tibbiyot maktabi, Kanzas-Siti, AQSh
Inson sub'ektlari: Ushbu tadqiqotning barcha ishtirokchilari rozilik bergan yoki bermagan.Xalqaro Uyali Tibbiyot Jamiyati ICMS-2017-003 ni tasdiqladi.Quyidagi protokol Xalqaro Uyali Tibbiyot Jamiyatining Institutsional Tadqiq Kengashi tomonidan keyingi foydalanish uchun tasdiqlangan: Sarlavha: CBC trombotsitlarining dastlabki soniga asoslangan trombotsitlarga boy plazma dori hosildorligini hisoblash.Hayvonlar mavzusi: Barcha mualliflar ushbu tadqiqotda hayvonlar yoki to'qimalar ishtirok etmaganligini tasdiqladilar.Manfaatlar to'qnashuvi: ICMJE yagona oshkor qilish shakliga muvofiq, barcha mualliflar quyidagilarni e'lon qiladilar: To'lov/xizmat haqida ma'lumot: Barcha mualliflar taqdim etilgan ish uchun hech qanday tashkilotdan moliyaviy yordam olmaganliklarini e'lon qiladilar.Moliyaviy aloqalar: Barcha mualliflar hozirda yoki so'nggi uch yil ichida taqdim etilgan ishlarga qiziqish bildirishi mumkin bo'lgan har qanday tashkilot bilan moliyaviy munosabatlarga ega emasligini e'lon qiladilar.Boshqa aloqalar: Barcha mualliflar taqdim etilgan ishlarga ta'sir qilishi mumkin bo'lgan boshqa aloqalar yoki faoliyatlar yo'qligini e'lon qiladilar.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K va boshqalar.(2022 yil 17-may) Glyukozaning trombotsitlar soni va hajmiga ta'siri: regenerativ tibbiyotga ta'siri.Davolash 14(5): e25081.doi: 10.7759/cureus.25081
© Mualliflik huquqi 2022 Harrison va boshqalar.Bu Creative Commons Attribution License CC-BY 4.0 shartlariga muvofiq tarqatilgan ochiq kirish maqolasi.Asl muallif va manba hisoblangan holda har qanday vositada cheksiz foydalanish, tarqatish va ko'paytirishga ruxsat beriladi.