“Đừng bao giờ nghi ngờ rằng một nhóm nhỏ gồm những công dân chu đáo, tận tụy có thể thay đổi thế giới.Trên thực tế, nó là chiếc duy nhất ở đó.”
Nhiệm vụ của Cureus là thay đổi mô hình xuất bản y học lâu đời, trong đó việc đệ trình nghiên cứu có thể tốn kém, phức tạp và tốn thời gian.
Huyết tương/prp giàu tiểu cầu, tái tạo mô, kích hoạt tiểu cầu, liệu pháp tăng sinh glucose, tiểu cầu, liệu pháp tăng sinh
Trích dẫn bài viết này như: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al.(17 tháng 5 năm 2022) Tác dụng của glucose đối với số lượng và khối lượng tiểu cầu: ý nghĩa đối với y học tái tạo.Chữa bệnh 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
Huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) và dung dịch glucose ưu trương thường được sử dụng để tiêm trong y học tái tạo, đôi khi kết hợp với nhau.Tác dụng của glucose ưu trương đối với quá trình ly giải và kích hoạt tiểu cầu chưa được báo cáo trước đây.Chúng tôi đã thử nghiệm tác động của nồng độ glucose tăng cao đối với số lượng tiểu cầu và hồng cầu, cũng như khối lượng tế bào trong PRP và máu toàn phần (WB).Số lượng tiểu cầu giảm một phần nhanh chóng xảy ra với tất cả các hỗn hợp glucose được trộn với PRP hoặc máu toàn phần, phù hợp với quá trình ly giải một phần. Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự điều chỉnh nhanh chóng của các tiểu cầu còn lại đến mức tăng trương lực cực độ (>2000 mOsm). Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự điều chỉnh nhanh chóng của các tiểu cầu còn lại đến mức tăng trương lực cực độ (>2000 mOsm). После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быстр ую аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 năm) гипертонуса. Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự điều chỉnh nhanh chóng của các tiểu cầu còn lại đến mức tăng trương lực cực độ (>2000 mOsm).第一分钟后，血小板计数保持稳定，表明残余血小板迅速适应极端（> 2000 mOsm）高渗状态。2000 mOsm）高渗状态。 После первой минуты количество тромбоцитов оставалось стабильным, что указывает на быстр ую адаптацию остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию . Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự thích nghi nhanh chóng của các tiểu cầu còn lại sang trạng thái siêu thẩm thấu cực cao (>2000 mOsm).Nồng độ glucose từ 25% trở lên dẫn đến sự gia tăng đáng kể về thể tích tiểu cầu trung bình (MPV), cho thấy giai đoạn đầu của quá trình kích hoạt tiểu cầu.Các nghiên cứu sâu hơn là cần thiết để xác định liệu có xảy ra quá trình ly giải hoặc kích hoạt tiểu cầu hay không và liệu việc tiêm glucose ưu trương đơn thuần hay kết hợp với PRP có thể mang lại lợi ích lâm sàng bổ sung hay không.
Vào những năm 1950, bác sĩ phẫu thuật người Mỹ George Hackett phát hiện ra rằng ông có thể giảm đau lưng và khớp vĩnh viễn cho nhiều bệnh nhân bằng cách tiêm dung dịch tăng sinh vào gân và dây chằng.Các thí nghiệm của ông trên thỏ cho thấy phương pháp điều trị mà ông gọi là liệu pháp tăng sinh, khiến gân to ra và khỏe hơn.Các nghiên cứu mô học đã xác nhận rằng collagen mới được sản xuất trong quá trình này [1].
Trong vài thập kỷ đầu tiên, nhiều giải pháp phân phối khác nhau đã được thử.Đến những năm 1990, hầu hết các học viên đều coi nồng độ glucose cao là phương pháp an toàn và hiệu quả nhất.Tuy nhiên, cơ chế hoạt động vẫn chưa rõ ràng.
Rất ít nghiên cứu lâm sàng được thực hiện trong thế kỷ 20 sau công trình của Hackett.Tuy nhiên, vào những năm 2000, đã có sự quan tâm mới và một số thử nghiệm lâm sàng thành công về liệu pháp tăng sinh đã được hoàn thành để điều trị đau thắt lưng [2], viêm xương khớp đầu gối [3] và viêm lồi cầu ngoài [4].
Quá trình tái tạo mô cần có sự tham gia của tế bào gốc.Do đó, nồng độ glucose cao bằng cách nào đó phải tạo ra sự di cư, sao chép và biệt hóa tế bào gốc.Chúng tôi đưa ra giả thuyết rằng tiểu cầu có thể đóng vai trò là sứ giả và nồng độ glucose cao có thể khiến tiểu cầu giải phóng các cytokine và các yếu tố tăng trưởng, do đó thúc đẩy quá trình tái tạo, đặc biệt là sự di chuyển của tế bào gốc đến các khu vực có nồng độ glucose cao.
Kích hoạt tiểu cầu luôn đi trước sự gia tăng canxi nội bào [5].Lưu và cộng sự.vào năm 2008 đã chỉ ra rằng nồng độ glucose cao làm tăng hoạt động của các kênh chính tắc tiềm ẩn thụ thể thoáng qua loại 6 (TRPC6) trong màng sinh chất, dẫn đến dòng ion canxi vào tiểu cầu [6].Một nghiên cứu khác cho thấy rằng sự tiếp xúc của vùng biên vi ống với các ion canxi gây ra sự thư giãn, mở rộng và biến dạng của vùng biên, từ đó gây ra sự thay đổi hình dạng từ dạng đĩa sang hình cầu, dẫn đến thể tích tiểu cầu trung bình (MPV) [7].
Giả thuyết của chúng tôi trong nghiên cứu này là việc tiểu cầu tiếp xúc với nồng độ glucose cao sẽ ảnh hưởng đến vùng biên vi ống và môi trường nội bào, dẫn đến sự gia tăng MPV.
Tất cả những người tham gia đã ký vào một mẫu đơn đồng ý sau khi các chi tiết của nghiên cứu đã được giải thích và trước khi nhận được các mẫu.Trong nghiên cứu này, chỉ các mẫu PRP có hematocrit lớn hơn 2% mới được sử dụng để có thể đưa vào số lượng hồng cầu (hồng cầu) và thể tích hồng cầu trung bình (MCV) để so sánh.
Nghiên cứu được tiến hành theo 4 giai đoạn, giai đoạn đầu tiên là PRP và các giai đoạn còn lại là máu toàn phần (Bảng 1).Như đã mô tả trước đây [8], tất cả các lực ly tâm tương đối (RCF, g-force) được tính từ điểm giữa (Rmid, tính bằng cm) của cột máu trong ống tiêm ly tâm.Chúng tôi đã chọn sử dụng MPV làm chất đánh dấu mức độ nhạy cảm của tiểu cầu và số lượng tiểu cầu làm chỉ số cho khả năng ly giải tiểu cầu, cả hai chỉ số này đều có thể dễ dàng đo được trên máy phân tích huyết học tiêu chuẩn.
Trong giai đoạn đầu tiên, 47 tình nguyện viên đã hiến các mẫu máu—một ống axit ethylenediaminetetraacetic (EDTA) và một mẫu máu toàn phần PRP (được chống đông bằng natri citrate (NaCl, 3%)) (Bảng 1).Đặt rocker trong ống ngay lập tức.Công thức máu toàn bộ (CBC) được thực hiện ba lần trên các mẫu EDTA và các mẫu NaCl được phân tích ba lần để phân tích CBC, sau đó PRP được chuẩn bị bằng nhiều phương pháp được mô tả ở trên [8].Tất cả các mẫu PRP được chuẩn bị bằng cách ly tâm ở 900–1000 g.Trộn từng mẫu PRP trên máy trộn xoáy trong 5–10 giây, sau đó chia năm phần 0,5 ml vào các ống.
Để đánh giá tác động của việc tiếp xúc với tiểu cầu đối với nồng độ glucose tăng cao, một lượng bằng nhau (0,5 ml) glucose 0%, 5%, 12,5%, 25% và 50% trong nước được trộn với các mẫu tiểu cầu để thu được hỗn hợp glucose có nồng độ 0%, 2,5 %, 6,25%, 12,5% và 25% và trộn các ống trên máy lắc ống nghiệm trong 15 phút.TAC của từng hỗn hợp được phân tích ba lần sau 15 phút.Số lượng tiểu cầu (PLT), số lượng hồng cầu, MCV và MPV được tính trung bình cho mỗi ống và số lượng tiểu cầu trung bình, số lượng hồng cầu, MCV và MPV được tính cho tất cả các mẫu PRP.
Sau khi hoàn thành giai đoạn thu thập dữ liệu đầu tiên, chúng tôi nhận thấy khối lượng tiểu cầu trong tiểu cầu PRP tăng đáng kể sau khi bổ sung D50W.Tiểu cầu PRP không nhất thiết đại diện cho tất cả các tiểu cầu trong máu và môi trường PRP khác với môi trường WB.Do đó, chúng tôi quyết định tiến hành thử nghiệm giai đoạn hai về hiệu quả của việc bổ sung D50W vào máu toàn phần.
Đối với vòng thứ hai, chúng tôi đã chọn cỡ mẫu là 30 dựa trên kết quả từ loạt đầu tiên, như được mô tả trong phần Phân tích.Trong loạt bài này, 20 tình nguyện viên đã hiến mẫu máu (Bảng 1).Máu toàn phần (1,8 ml) được hút vào ống tiêm 3 ml và được chống đông bằng 0,2 ml 40% NaCl.Toàn bộ ống tiêm máu được trộn trong năm giây bằng máy trộn xoáy và CBC được phân tích ba lần.Sau khi phân tích, máu chống đông được thêm vào 2 ml glucose 50% trong ống tiêm 5 ml (nồng độ glucose cuối cùng là khoảng 25% (D25) và đặt trong ống lắc trong 30 phút. MPV đã được tính toán cho từng mẫu trước và sau khi thêm glucose.
Vì tiểu cầu trong máu toàn phần thường tiếp xúc với glucose ưu trương trong quá trình điều trị bằng glucose tăng sinh do tiêm xâm lấn tối thiểu và việc kết hợp PRP với glucose ưu trương ngay trước khi tiêm là điều không phổ biến, nên chúng tôi quyết định nghiên cứu glucose ưu trương kết hợp với WB trong Phần 1. Bước 3 và 4.Ở mỗi giai đoạn, 20 tình nguyện viên đã hiến tặng 7-8 ml ACD-A (axit chứa trisodium citrate (22,0 g/l), axit xitric (8,0 g/l) và glucose (24,5 g/l), dung dịch dextrose citrate) cho chất chống đông máu (Bảng 1).Chỉ hỗn hợp glucose lớn hơn 12,5% được sử dụng để xác định tỷ lệ phần trăm ngưỡng liên quan đến sự gia tăng MPV.Ở giai đoạn thứ ba, 1 ml máu được đặt trong ống nghiệm.Sau đó trộn máu trên máy trộn xoáy trong 10 giây bằng cách thêm 1 ml glucose 30%, glucose 40% hoặc glucose 50% vào ống để thu được nồng độ glucose cuối cùng lần lượt là 15%, 20% và 25%.Các mẫu máu glucose được phân tích CBC ngay sau khi trộn và lặp lại hai phút một lần trong 30 phút.
Trong quá trình trộn ban đầu, việc bổ sung glucose ưu trương 1:1 và WB hoặc PRP làm cho tiểu cầu đạt nồng độ trên 25% trong vài giây.Trong bước thứ tư, để đánh giá tác dụng của glucose ưu trương với nồng độ đỉnh tối thiểu ban đầu và kiểm tra giới hạn trên của tác dụng của glucose, chúng tôi chỉ thêm một lượng nhỏ máu vào D25W hoặc D50W.Cho 1 ml D25W hoặc D50W vào ống và thêm 0,2 ml WB trong khi xoáy mẫu trong 10 giây.Trong những trường hợp này, máu được tiếp xúc với glucose ở nồng độ cao hơn nồng độ cuối cùng khoảng 20%, thay vì cao hơn 50% so với nồng độ cuối cùng như trong Giai đoạn 3, dẫn đến nồng độ glucose cuối cùng là 20,8% và 41,6%.Các mẫu hỗn hợp được phân tích trong cùng khoảng thời gian như ở bước 3.
Trong bước đầu tiên của mỗi loạt pha loãng glucose, 30 mẫu được lấy vì đây là cỡ mẫu thích hợp cho nghiên cứu thí điểm [9].Vào cuối mỗi giai đoạn (bao gồm cả giai đoạn đầu tiên), hãy đánh giá mức độ phù hợp của cỡ mẫu bằng cách sử dụng công thức được sử dụng để xác định cỡ mẫu cần thiết để ước tính giá trị trung bình của biến kết quả liên tục trong một quần thể.Công thức n = Z2 x SD2 /E2.Trong phương trình này, Z là điểm số Z, SD là độ lệch chuẩn và E là sai số mong muốn [10].Alpha của chúng tôi là 0,05, tương ứng với giá trị Z là 1,96 và chúng tôi mong đợi lỗi là 5 (tính bằng phần trăm).Do đó, chúng tôi giải quyết cho n = (1,962 x SD2)/52.Kết quả cho thấy cỡ mẫu cần thiết cho từng giai đoạn nhỏ hơn so với số lượng thực tế thu thập được.
Trong các giai đoạn 1, 3 và 4 sử dụng nhiều hơn một nồng độ glucose, tác động của các nồng độ glucose khác nhau được phân tích bằng cách so sánh sự thay đổi một phần giữa thời gian 0 và mỗi lần tiếp theo (giai đoạn 1 sau 15 phút, giai đoạn 3 sau 15 phút).và bốn lần sau 15 giây, sau đó cứ sau hai phút.) Tỷ lệ thay đổi cho từng khoảng thời gian được so sánh bằng phép thử Mann-Whitney U vì dữ liệu không tuân theo phân phối chuẩn như được xác định bởi phép thử tính quy tắc Shapiro-Wilk.Do phân tích 1 đối 1 của một số nhóm (năm) được thực hiện ở bước đầu tiên, thứ ba và thứ tư (tổng cộng là năm), nên hiệu chỉnh Bonferroni đã được thực hiện để điều chỉnh giá trị alpha mong muốn thành ≤0,01 chứ không phải ≤0,05.
Giảm số lượng tiểu cầu với tất cả các nồng độ dextrose ưu trương và tăng MPV trong tiểu cầu PRP ở nồng độ dextrose >12,5%: Số lượng tiểu cầu PRP tăng từ một đến năm lần nồng độ so với máu toàn phần ban đầu, thay đổi theo phương pháp (không mô tả). Giảm số lượng tiểu cầu với tất cả các nồng độ dextrose ưu trương và tăng MPV trong tiểu cầu PRP ở nồng độ >12,5% dextrose: Số lượng tiểu cầu PRP tăng từ 1 đến 5 lần nồng độ so với máu toàn phần ban đầu, thay đổi theo phương pháp (không mô tả). Уменьшение количества тромбоцитов при всех концентрациях гипертонической декстрозы и увел ичение MPV в тромбоцитах PRP при концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов увеличилос ь в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровью, в зависимости от метода (не показано). Giảm số lượng tiểu cầu ở tất cả các nồng độ dextrose ưu trương và tăng MPV trong tiểu cầu PRP ở nồng độ dextrose >12,5%: Số lượng tiểu cầu PRP tăng 1-5 lần so với máu toàn phần ban đầu, tùy thuộc vào phương pháp (không hiển thị). ).在> 12,5% 的葡萄糖浓度下，所有浓度的高渗葡萄糖降低血小板计数，PRP 血小板中MPV 增加：与基线全血相比，PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 Nồng độ glucose >12.5%, nồng độ glucose cao làm giảm công thức máu, MPV máu PRP tăng: so với 与基线全血, công thức máu PRP tăng gấp 1 đến 5 lần so với nồng độ (không mô tả). При концентрациях глюкозы >12,5% все концентрации гипертонической глюкозы снижали количест во тромбоцитов, а MPV повышали в тромбоцитах PRP: количество тромбоцитов PRP увеличивалось от 1-д о 5-кратных концентраций по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в зависимости от метода (не описано ). Ở nồng độ glucose >12,5%, tất cả nồng độ glucose tăng huyết áp đều làm giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV trong tiểu cầu PRP: Số lượng tiểu cầu PRP tăng từ 1 đến 5 lần so với nồng độ cơ bản trong máu, tùy thuộc vào phương pháp (như mô tả ).Hình 1 cho thấy số lượng tiểu cầu giảm gần 75% sau khi pha loãng trong nước và 20-30% sau 15 phút pha loãng với các nồng độ glucose khác nhau so với PRP ban đầu và độ pha loãng 1:1 được điều chỉnh theo thể tích (1-k1 với hiệu chỉnh thể tích).k -1 chăn nuôi).1 chăn nuôi).
Số lượng tế bào trong mỗi độ pha loãng được biểu thị dưới dạng một phần nhỏ của số lượng ban đầu trước khi pha loãng.
MPV giảm tối thiểu trong quá trình sản xuất PRP, mà không thay đổi thêm nồng độ pha loãng thành 12,5% trong nước hoặc glucose (bao gồm hỗn hợp 25% PRP glucose) và tăng hơn 20% sau khi pha loãng trong dung dịch glucose 50% (Hình.2).).Ngược lại, hồng cầu không có sự thay đổi đáng kể về thể tích ở bất kỳ độ pha loãng nào khác ngoài H2O.
Thể tích tế bào trung bình trong mỗi độ pha loãng được biểu thị bằng phần trăm so với thể tích ban đầu trước khi pha loãng.
Sự giảm tương tự nhưng ít rõ rệt hơn về số lượng tiểu cầu và tăng CVR đã được quan sát thấy ở BC tiếp xúc với 50% glucose (để tạo công thức với 25% glucose).Bảng 2 so sánh số lượng tế bào và thể tích tế bào trong máu toàn phần được pha loãng trong 50% dextrose với dữ liệu PRP giai đoạn 1 được pha loãng trong 50% dextrose.Những thay đổi về số lượng hồng cầu và RBC MCV không rõ ràng và không phải là trọng tâm chú ý của chúng tôi.
SD = độ lệch chuẩn, MD = chênh lệch trung bình giữa các nhóm, SE = độ lệch chuẩn của chênh lệch trung bình, RBC = hồng cầu, PLT = tiểu cầu, PRP = huyết tương giàu tiểu cầu, WB = máu toàn phần
Sau khi thêm D50W vào WB, tỷ lệ phần trăm mất tiểu cầu được điều chỉnh theo độ pha loãng là 7,7% (310±73 so với 286±96) so với 17,8% khi pha loãng PRP trong D50W (664±348 so với 544±277).MPV WB tăng 16,8% (từ 10,1 ± 0,5 lên 11,8 ± 0,6), trong khi MPV PRP tăng 26% (9,2 ± 0,8 so với 11,6 ± 0,7). Mặc dù sự khác biệt trung bình trong cả giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV nhiều hơn đáng kể với PRP, nhưng những thay đổi về giảm số lượng tiểu cầu trong WB là gần như đáng kể (310 ± 73 đến 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) và sự gia tăng MPV là đáng kể (10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Mặc dù sự khác biệt trung bình trong cả giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV nhiều hơn đáng kể với PRP, nhưng những thay đổi về giảm số lượng tiểu cầu trong WB là gần như đáng kể (310 ± 73 đến 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) và sự gia tăng MPV là đáng kể (10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Mặc dù sự khác biệt trung bình trong cả giảm số lượng tiểu cầu và tăng CVR đều lớn hơn đáng kể với PRP, những thay đổi về giảm số lượng tiểu cầu trong WB gần như đáng kể (310 ± 73 đến 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV được đánh giá cao (от 10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). sự gia tăng MPV là đáng kể (từ 10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).尽管PRP 在血小板计数减少和MPV 增加方面的平均差异显着更大，但WB 内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = 0,06）和MPV 的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001 ）。尽管PRP在血小板计数和和增加方面的平均差异显着大，但但内血小板计数减少的 几乎 是 显着 的（（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%)； p = 0,06）和MPV 的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0. 6 (+16,8) p < 0,001）。Sự thay đổi về mức giảm số lượng tiểu cầu trong WB gần như đáng kể (từ 310 ± 73 đến 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), mặc dù PRP có sự khác biệt lớn hơn đáng kể về mức giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV.và sự gia tăng của MPV là đáng kể.(от 10,1 ± 0,5 до 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (từ 10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Cần có nồng độ cuối cùng là 20% glucose để thấy sự thay đổi đáng kể về MPV, nhưng sự thay đổi về MPV rõ rệt hơn ở nồng độ cuối cùng là 25%.Mất tiểu cầu ổn định sau sự suy giảm ban đầu.Chúng tôi ghi nhận CVR ban đầu giảm mạnh, tuy nhiên, CVR đã nhanh chóng được phục hồi ở nồng độ glucose cuối cùng 25%, cao hơn đáng kể so với mức CVR quan sát được ở nồng độ glucose cuối cùng là 20% và 15% (Hình 3 và bên trái của Bảng 3; hộp bóng mờ).biểu thị giá trị p ≤ alpha với hiệu chỉnh Bonferroni là 0,01).Số lượng PLT ban đầu cũng giảm mạnh, được quan sát thấy trong giai đoạn đầu từ 0-15 giây, sau đó duy trì ổn định (từ 15 giây đến 30 phút; bên trái của bảng 4).
Việc bổ sung các nồng độ glucose khác nhau vào máu toàn phần dẫn đến giảm MPV ban đầu nhanh chóng, sau đó là sự phục hồi phụ thuộc vào nồng độ hơn 20%.Truyền thuyết cho thấy nồng độ glucose sau khi pha loãng.D15, D20 và D25 được thực hiện ở độ pha loãng 1:1.D21 và D41 được thực hiện ở độ pha loãng 1:5.
Bảng 4 cho thấy sự thay đổi số lượng tiểu cầu khi pha loãng trong glucose ưu trương.Chúng tôi đã quan sát thấy mối quan hệ phụ thuộc vào liều lượng giữa việc giảm số lượng PLT ngay lập tức ở độ pha loãng 1:1 và ở độ pha loãng 1:5.So sánh độ pha loãng 1:1 như một nhóm riêng lẻ với độ pha loãng 1:5, nhóm 1:1 có số lượng tiểu cầu giảm ngay lập tức ít hơn so với nhóm 1:5 66±48.000 (23%) so với 99±69.000 (37%)., p = 0,014) ở nhóm 1:5.Sau khi giảm ban đầu tại điểm đo đầu tiên, số lượng tiểu cầu tính theo phần trăm glucose ổn định (Hình 4).
Khi máu toàn phần được thêm vào glucose theo tỷ lệ 1:1, số lượng tiểu cầu giảm khoảng 25%.Tuy nhiên, khi máu toàn phần được thêm vào theo tỷ lệ 1:5, mức giảm còn lớn hơn nhiều – khoảng 50%.
Đường 41% tăng MPV nhanh hơn và mạnh hơn 25% hoặc 21%.Kết quả MPV được thể hiện trong Hình 3. Ở tất cả các độ pha loãng khác, MPV ban đầu không giảm ngay lập tức sau khi bổ sung 50% glucose.Khi sử dụng 25% glucose (nồng độ glucose 20,8% ở độ pha loãng cuối cùng), sự thay đổi của MPV tương đương với sự thay đổi của 20% glucose ở độ pha loãng 1:1 (Hình 3).Mặc dù những thay đổi về MPV ban đầu lớn hơn ở nồng độ hỗn hợp 41% so với 25%, nhưng sự khác biệt về MPV giữa 41% và 25% sau 16 phút không còn đáng kể (Bảng 3, bên phải).Điều thú vị là 25% glucose tăng MPV hiệu quả hơn 20,8%.
Nghiên cứu trong ống nghiệm này đã xác nhận một phần giả thuyết của chúng tôi. Nó cho thấy khả năng ly giải một phần tiểu cầu bằng phụ gia dextrose, sự điều chỉnh nhanh chóng của tiểu cầu đến trạng thái ưu trương cực độ và sự gia tăng đáng kể MPV để đáp ứng với nồng độ > 25% của dextrose ưu trương. Nó cho thấy khả năng ly giải một phần tiểu cầu bằng phụ gia dextrose, sự điều chỉnh nhanh chóng của tiểu cầu đến trạng thái ưu trương cực độ và sự gia tăng đáng kể MPV để đáp ứng với nồng độ > 25% của dextrose ưu trương. Он показал потенциальный частичный лизис тромбоцитов примесью декстрозы, быструю акко модацию тромбоцитов до экстремального гипертонуса và значительное повышение MPV в ответ на гиперт оническую концентрацию декстрозы > 25%. Nó cho thấy khả năng ly giải một phần tiểu cầu với dextrose, điều chỉnh tiểu cầu nhanh chóng đến tình trạng tăng trương lực cực độ và tăng đáng kể MPV để đáp ứng với mức dextrose ưu trương> 25%.25 % 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。它显示出通过葡萄糖潜在的部分血小板溶解血小板快速适应极端高渗，以及响应>25%浓度高渗葡萄糖时时mpv显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, бысрую т а даптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу и значительное увеличение MPV в отве на кон центрацию гипертонической глюкозы > 25%. Nó cho thấy tiềm năng ly giải một phần tiểu cầu bằng hỗn hợp glucose, tiểu cầu nhanh chóng thích ứng với tình trạng quá trương lực và tăng đáng kể MPV để đáp ứng với glucose ưu trương >25%.Mức tăng ban đầu đạt tối đa khi tiếp xúc với 41,6% glucose, nhưng mức tăng MPV đạt tới mức tiếp xúc với 25% glucose khoảng 20 phút sau khi tiếp xúc.
Nồng độ của tiểu cầu bị ảnh hưởng bởi glucose.Chúng tôi nhận thấy rằng lượng PLT giảm ở tất cả các độ pha loãng của glucose.Sự giảm mạnh số lượng tiểu cầu trong dung dịch pha loãng H2O (0%) của chuỗi PRP có thể liên quan đến hiện tượng ly giải thẩm thấu.Ngoài ra, đây có thể là một hiện tượng gây ra bởi sự kết khối của tiểu cầu, nhưng điều này trái ngược với việc thiếu sự thay đổi MPV ở độ pha loãng này.Phát hiện này có nghĩa là một số tiểu cầu rất nhạy cảm với tình trạng giảm thẩm thấu.
Trong tất cả các độ pha loãng 1:1 của glucose, lượng PLT giảm 20-30%, thậm chí bởi D5W (hypotonic ở 252 mOsm), điều này có thể cho thấy tác dụng không thẩm thấu cụ thể của glucose, vì cả PLT và MPV đều không thay đổi khi nồng độ tăng gấp ba lần.glucôzơ.từ D5W đến D25W.Trên thực tế, nồng độ PLT có xu hướng tăng nhẹ khi tăng độ thẩm thấu.
Sự giảm PLT giữa độ pha loãng 1:1 và 1:5 có nghĩa là hiệu ứng hòa tan phụ thuộc vào nồng độ glucose ban đầu và cuối cùng.Nếu nó chỉ phụ thuộc vào nồng độ ban đầu, thì người ta sẽ thấy sự khác biệt về mức giảm PLT giữa các nồng độ 1:1.Nhưng chúng tôi thì không.Nếu hiệu ứng ly giải chỉ phụ thuộc vào nồng độ glucose cuối cùng, thì chúng ta không mong đợi có nhiều sự khác biệt giữa độ pha loãng 20% ​​1:1 và độ pha loãng 20,8% 1:5.Và chúng tôi đã làm được.
Nếu mất tiểu cầu xảy ra do ly giải tiểu cầu, một phần ly giải được hình thành, sau đó các cytokine và các yếu tố tăng trưởng được giải phóng vào môi trường ngoại bào.Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng lysate tiểu cầu có hiệu quả gần như PRP như một giải pháp tăng sinh [11].Bản thân PRP đã được chứng minh là một giải pháp hiệu quả trong điều trị tăng sinh [12-14].
Các tiểu cầu không hoạt động lưu thông dưới dạng một đĩa được gia cố bằng một số cấu trúc bên trong.Trong quá trình kích hoạt, chúng có hình dạng hình cầu hoặc amip hơn, dẫn đến sự gia tăng về khối lượng.Sự gia tăng thể tích đòi hỏi sự gia tăng diện tích bề mặt, đó là kết quả của sự đùn hệ thống ống mở (OCS) và việc bổ sung các hạt ngoại bào vào màng.Vẫn còn phải xác định xem sự gia tăng MPV do glucose ưu trương gây ra có liên quan đến một hoặc cả hai cơ chế này hay không, nhưng nếu cơ chế sau, thì sự gia tăng MPV sẽ cho thấy sự thoái hóa.
Nghiên cứu này cho thấy rằng việc tiếp xúc với nồng độ glucose cao trên PRP hoặc toàn bộ tiểu cầu máu dẫn đến sự gia tăng MPV trong vòng 15 phút với nồng độ glucose lần lượt là 25% và 41,6%.
Sự gia tăng MPV tiểu cầu có thể là do sự giãn nở của các đám rối vi ống xung quanh để đáp ứng với dòng canxi.Lưu và cộng sự.Glucose đã được chứng minh là trung gian cho dòng canxi đi qua kênh TRPC6 của tiểu cầu [6].Giả thuyết của chúng tôi là glucose gây ra sự thư giãn của các rối loạn vi ống, dẫn đến sự gia tăng MPV và sự nhạy cảm và / hoặc kích hoạt tiểu cầu.Tuy nhiên, đánh giá theo kết quả của chúng tôi, đây chỉ là một phần của câu chuyện.Trong các thử nghiệm của chúng tôi, không có nồng độ nào dưới D25W dẫn đến tăng MPV.Do chúng tôi chưa kiểm tra mức độ tiếp xúc với nồng độ glucose trong khoảng từ 12,5% đến 25%, kết quả giai đoạn 1 của chúng tôi cho thấy rằng có thể có một ngưỡng trong phạm vi nồng độ glucose này dẫn đến sự gia tăng MPV.Thử nghiệm thêm ở giai đoạn 3 và 4 cho thấy 20-25% glucose dường như là ngưỡng cho điều này, nhưng vẫn chưa rõ tại sao.
Chúng tôi cũng quan sát thấy MPV giảm ~9% sau khi ly tâm.Không rõ liệu sự giảm MPV này có phải là do các tiểu cầu lớn hơn và đặc hơn bị mắc kẹt trong lớp hồng cầu của máy ly tâm hay không.Quan sát này có thể quan trọng đối với các bác sĩ lâm sàng vì nó có thể ngụ ý rằng tiểu cầu PRP là một tập hợp con nhỏ hơn và ít đậm đặc hơn của tiểu cầu WB.
Trong một nghiên cứu trước đây, chúng tôi đã chỉ ra rằng việc chuẩn bị PRP bằng phương pháp thủ công là không tốn kém [8].Nếu glucose làm nhạy cảm với tiểu cầu mô hoặc PRP, khiến chúng dễ bị kích hoạt hơn hoặc nếu PRP được sản xuất với đặc tính ly giải một phần, điều này có thể tăng cường tái tạo và giảm nhu cầu điều trị.Do đó, sự kết hợp giữa PRP và glucose đậm đặc có thể tiết kiệm chi phí hơn so với PRP hoặc glucose đơn thuần.
Nghiên cứu của chúng tôi có một số thiếu sót.Đầu tiên, chúng tôi sử dụng PRP thu được từ một số phương pháp khác nhau.Điều này có thể dẫn đến kết quả mâu thuẫn.Thứ hai, chúng tôi không thể thực hiện phân tích sinh hóa của bất kỳ mẫu nào của chúng tôi để xác định chính xác hơn liệu có xảy ra kích hoạt tiểu cầu hay không.Chúng tôi muốn đo P-selectin, yếu tố tiểu cầu 4, tập hợp tiểu cầu đơn nhân hoặc các dấu hiệu kích hoạt tiểu cầu khác để hiểu rõ hơn về mức độ hoặc sự hiện diện của thoái hóa hạt alpha, nhưng điều này nằm ngoài phạm vi của nghiên cứu này.Thứ ba, chúng tôi không thể xác nhận bằng kính hiển vi điện tử hoặc các phương pháp khác rằng sự gia tăng MPV trong tiểu cầu tiếp xúc với glucose là do tác động lên các rối loạn vi ống.
Hỗn hợp WB hoặc PRP với 25% glucose làm tăng MPV, báo hiệu sự bắt đầu kích hoạt tiểu cầu, mặc dù nghiên cứu này không chứng minh được sự tiến triển của kết tập hoặc thoái hóa.Hỗn hợp glucose ưu trương dẫn đến mất tiểu cầu, có thể gây ra hiệu ứng ly giải.Kích hoạt hoặc ly giải một phần tiểu cầu có thể gây tái tạo mô sau khi tiêm tiểu cầu.Không rõ những thay đổi này có thể dẫn đến những hậu quả lâm sàng nào.Các nghiên cứu sâu hơn đã chứng minh các phép đo kích hoạt hoặc ly giải chính xác hơn và đã đánh giá các tác dụng lâm sàng khác nhau của hỗn hợp glucose ưu trương với WB hoặc PRP.
Liệu pháp tăng sinh glucose là một liệu pháp tái tạo đơn giản và rẻ tiền đang nhanh chóng mở rộng và hỗ trợ nghiên cứu lâm sàng.Nghiên cứu này đề xuất một cơ chế sinh lý, nếu được xác nhận, có thể giúp chúng ta hiểu một phần cơ chế tái tạo của liệu pháp tăng sinh.
Tin học y sinh và sức khỏe tại Đại học Missouri, Trường Y khoa Thành phố Kansas, Thành phố Kansas, Hoa Kỳ
Đối tượng là con người: Tất cả những người tham gia nghiên cứu này đều đồng ý hoặc không đồng ý.Hiệp hội y học tế bào quốc tế đã phê duyệt ICMS-2017-003.Giao thức sau đây đã được phê duyệt để tiếp tục sử dụng bởi Hội đồng Đánh giá Thể chế của Hiệp hội Y học Tế bào Quốc tế: Tiêu đề: Tính toán sản lượng thuốc trong huyết tương giàu tiểu cầu dựa trên số lượng tiểu cầu CBC cơ bản.Đối tượng động vật: Tất cả các tác giả xác nhận rằng không có động vật hoặc mô nào tham gia vào nghiên cứu này.Xung đột lợi ích: Theo Mẫu tiết lộ thống nhất của ICMJE, tất cả các tác giả tuyên bố như sau: Thông tin thanh toán/dịch vụ: Tất cả các tác giả tuyên bố rằng họ không nhận được hỗ trợ tài chính từ bất kỳ tổ chức nào cho tác phẩm được gửi.Mối quan hệ tài chính: Tất cả các tác giả tuyên bố rằng họ hiện không hoặc trong vòng ba năm qua không có mối quan hệ tài chính với bất kỳ tổ chức nào có thể quan tâm đến tác phẩm được gửi.Các mối quan hệ khác: Tất cả các tác giả tuyên bố rằng không có mối quan hệ hoặc hoạt động nào khác có thể ảnh hưởng đến tác phẩm được gửi.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K và cộng sự.(17 tháng 5 năm 2022) Tác dụng của glucose đối với số lượng và khối lượng tiểu cầu: ý nghĩa đối với y học tái tạo.Chữa bệnh 14(5): e25081.doi:10.7759/cureus.25081
© Bản quyền 2022 Harrison và cộng sự.Đây là một bài báo truy cập mở được phân phối theo các điều khoản của Giấy phép Ghi nhận tác giả Creative Commons CC-BY 4.0.Cho phép sử dụng, phân phối và sao chép không giới hạn trong bất kỳ phương tiện nào, miễn là tác giả gốc và nguồn được ghi có.