“Đừng bao giờ nghi ngờ rằng một nhóm nhỏ những công dân chu đáo, tận tụy có thể thay đổi thế giới. Trên thực tế, đó là nhóm duy nhất ở đó.”
Sứ mệnh của Cureus là thay đổi mô hình xuất bản y khoa lâu đời, trong đó việc nộp nghiên cứu có thể tốn kém, phức tạp và mất thời gian.
Huyết tương giàu tiểu cầu/prp, tái tạo mô, hoạt hóa tiểu cầu, liệu pháp tăng sinh glucose, tiểu cầu, liệu pháp tăng sinh
Trích dẫn bài viết này là: Harrison TE, Bowler J, Reeves K, et al. (17 tháng 5 năm 2022) Tác động của glucose lên số lượng và thể tích tiểu cầu: ý nghĩa đối với y học tái tạo. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
Huyết tương giàu tiểu cầu (PRP) và dung dịch glucose ưu trương thường được dùng để tiêm trong y học tái tạo, đôi khi dùng chung với nhau. Tác dụng của glucose ưu trương lên quá trình ly giải và hoạt hóa tiểu cầu chưa từng được báo cáo trước đây. Chúng tôi đã thử nghiệm tác dụng của nồng độ glucose cao lên số lượng tiểu cầu và hồng cầu, cũng như thể tích tế bào trong PRP và máu toàn phần (WB). Giảm nhanh một phần số lượng tiểu cầu xảy ra với tất cả các hỗn hợp glucose trộn với PRP hoặc máu toàn phần, phù hợp với quá trình ly giải một phần. Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự thích ứng nhanh chóng của tiểu cầu còn lại với tình trạng tăng trương lực cực độ (>2000 mOsm). Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự thích ứng nhanh chóng của tiểu cầu còn lại với tình trạng tăng trương lực cực độ (>2000 mOsm). Bạn có thể sử dụng một số công cụ có thể giúp bạn có được một khoản vay phù hợp với nhu cầu của mình аккомодацию остаточных тромбоцитов до экстремального (>2000 мОсм) гипертонуса. Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự thích ứng nhanh chóng của các tiểu cầu còn lại đến mức tăng trương lực cực đại (>2000 mOsm).2000 mOsm) 高渗状态。2000 mOsm) Bạn có thể sử dụng một số công cụ có thể giúp bạn có được một khoản vay phù hợp với nhu cầu của bạn остаточных тромбоцитов к экстремальному (>2000 мОсм) гиперосмолярному состоянию. Sau phút đầu tiên, số lượng tiểu cầu vẫn ổn định, cho thấy sự thích nghi nhanh chóng của tiểu cầu còn lại với trạng thái tăng thẩm thấu cực độ (>2000 mOsm).Nồng độ glucose từ 25% trở lên dẫn đến sự gia tăng đáng kể về thể tích tiểu cầu trung bình (MPV), cho thấy giai đoạn đầu của quá trình hoạt hóa tiểu cầu. Cần có thêm các nghiên cứu để xác định xem tiểu cầu có bị ly giải hay hoạt hóa hay không và liệu tiêm glucose ưu trương đơn thuần hay kết hợp với PRP có thể mang lại lợi ích lâm sàng bổ sung hay không.
Vào những năm 1950, bác sĩ phẫu thuật người Mỹ George Hackett đã phát hiện ra rằng ông có thể làm giảm vĩnh viễn tình trạng đau khớp và đau lưng ở nhiều bệnh nhân bằng cách tiêm dung dịch tăng sinh vào gân và dây chằng. Các thí nghiệm của ông trên thỏ cho thấy phương pháp điều trị mà ông gọi là liệu pháp tăng sinh đã khiến gân to ra và khỏe hơn. Các nghiên cứu mô học đã xác nhận rằng collagen mới được sản xuất trong quá trình này [1].
Trong vài thập kỷ đầu, nhiều giải pháp phân phối khác nhau đã được thử nghiệm. Đến những năm 1990, hầu hết các bác sĩ đều coi nồng độ glucose cao là phương pháp an toàn và hiệu quả nhất. Tuy nhiên, cơ chế hoạt động vẫn chưa rõ ràng.
Một số nghiên cứu lâm sàng đã được tiến hành vào thế kỷ 20 sau công trình của Hackett. Tuy nhiên, vào những năm 2000, đã có sự quan tâm mới và một số thử nghiệm lâm sàng thành công về liệu pháp tăng sinh đã được hoàn thành để điều trị đau lưng dưới [2], thoái hóa khớp gối [3] và viêm lồi cầu ngoài [4].
Sự tái tạo mô đòi hỏi sự tham gia của tế bào gốc. Do đó, nồng độ glucose cao bằng cách nào đó phải thúc đẩy sự di chuyển, sao chép và biệt hóa của tế bào gốc. Chúng tôi đưa ra giả thuyết rằng tiểu cầu có thể hoạt động như chất truyền tin và nồng độ glucose cao có thể khiến tiểu cầu giải phóng cytokine và các yếu tố tăng trưởng, do đó thúc đẩy các quá trình tái tạo, đặc biệt là sự di chuyển của tế bào gốc đến các vùng có nồng độ glucose cao.
Hoạt hóa tiểu cầu luôn diễn ra trước khi tăng canxi nội bào [5]. Liu và cộng sự năm 2008 đã chỉ ra rằng nồng độ glucose cao làm tăng hoạt động của các kênh thụ thể tiềm năng thoáng qua loại 6 điển hình (TRPC6) trong màng huyết tương, dẫn đến dòng ion canxi chảy vào tiểu cầu [6]. Một nghiên cứu khác cho thấy việc tiếp xúc vùng biên của vi ống với các ion canxi gây ra sự giãn nở, giãn nở và biến dạng của vùng biên, từ đó gây ra sự thay đổi hình dạng từ hình đĩa sang hình cầu, dẫn đến thể tích tiểu cầu trung bình (MPV) [7].
Giả thuyết của chúng tôi trong nghiên cứu này là việc tiểu cầu tiếp xúc với nồng độ glucose cao sẽ ảnh hưởng đến vùng biên của vi ống và môi trường nội bào, dẫn đến tăng MPV.
Tất cả những người tham gia đều ký vào mẫu đơn đồng ý tham gia sau khi các chi tiết của nghiên cứu được giải thích và trước khi nhận mẫu. Trong nghiên cứu này, chỉ sử dụng các mẫu PRP có hematocrit lớn hơn 2% để có thể đưa số lượng hồng cầu (erythrocyte) và thể tích hồng cầu trung bình (MCV) vào để so sánh.
Nghiên cứu được tiến hành trong bốn giai đoạn, giai đoạn đầu tiên là PRP và các giai đoạn còn lại là máu toàn phần (Bảng 1). Như đã mô tả trước đây [8], tất cả các lực ly tâm tương đối (RCF, lực g) được tính từ điểm giữa (Rmid, tính bằng cm) của cột máu trong ống tiêm ly tâm. Chúng tôi đã chọn sử dụng MPV làm dấu hiệu nhạy cảm tiểu cầu và số lượng tiểu cầu làm chỉ báo khả năng ly giải tiểu cầu, cả hai đều có thể dễ dàng đo được trên máy phân tích huyết học tiêu chuẩn.
Trong giai đoạn đầu, 47 tình nguyện viên đã hiến mẫu máu—một ống axit ethylenediaminetetraacetic (EDTA) và một mẫu máu toàn phần PRP (chống đông bằng natri citrat (NaCl, 3%)) (Bảng 1). Đặt que lắc vào ống ngay lập tức. Công thức máu toàn phần (CBC) được thực hiện trên các mẫu EDTA theo bộ ba, và các mẫu NaCl được phân tích theo bộ ba để phân tích CBC, sau đó PRP được chuẩn bị bằng nhiều phương pháp khác nhau được mô tả ở trên [8]. Tất cả các mẫu PRP được chuẩn bị bằng cách ly tâm ở tốc độ 900–1000 g. Trộn từng mẫu PRP trên máy trộn xoáy trong 5–10 giây, sau đó chia năm phần 0,5 ml vào các ống.
Để đánh giá tác động của việc tiếp xúc tiểu cầu đối với nồng độ glucose tăng cao, các lượng bằng nhau (0,5 ml) glucose 0%, 5%, 12,5%, 25% và 50% trong nước được trộn với các mẫu tiểu cầu để thu được nồng độ hỗn hợp glucose là 0%, 2,5%, 6,25%, 12,5% và 25% và trộn các ống trên máy lắc ống nghiệm trong 15 phút. TAC của mỗi hỗn hợp được phân tích ba lần sau 15 phút. Số lượng tiểu cầu (PLT), số lượng hồng cầu, MCV và MPV được tính trung bình cho mỗi ống và số lượng tiểu cầu trung bình, số lượng hồng cầu, MCV và MPV được tính cho tất cả các mẫu PRP.
Sau khi giai đoạn thu thập dữ liệu đầu tiên hoàn tất, chúng tôi nhận thấy sự gia tăng đáng kể về thể tích tiểu cầu trong tiểu cầu PRP sau khi bổ sung D50W. Tiểu cầu PRP không nhất thiết đại diện cho tất cả các tiểu cầu trong máu và môi trường PRP khác với môi trường WB. Do đó, chúng tôi quyết định tiến hành thử nghiệm giai đoạn thứ hai về tác dụng của việc bổ sung D50W vào toàn bộ máu.
Đối với vòng thứ hai, chúng tôi đã chọn quy mô mẫu là 30 dựa trên kết quả từ loạt đầu tiên, như đã mô tả trong phần Phân tích. Trong loạt này, 20 tình nguyện viên đã hiến mẫu máu (Bảng 1). Máu toàn phần (1,8 ml) được rút vào ống tiêm 3 ml và chống đông bằng 0,2 ml NaCl 40%. Ống tiêm máu toàn phần được trộn trong năm giây bằng máy trộn xoáy và CBC được phân tích ba lần. Sau khi phân tích, máu chống đông được thêm vào 2 ml glucose 50% trong ống tiêm 5 ml (nồng độ glucose cuối cùng là khoảng 25% (D25) và đặt trong ống lắc trong 30 phút. Sau 30 phút, D25/CBC trong ống tiêm WB được phân tích ba lần. Số lượng tiểu cầu, số lượng hồng cầu, MCV và MPV trên mỗi ống tiêm được tính trung bình và PLT, số lượng hồng cầu, MCV và MPV trung bình được tính cho từng mẫu trước và sau khi thêm glucose.
Do tiểu cầu trong toàn bộ máu thường tiếp xúc với glucose ưu trương trong quá trình điều trị glucose tăng sinh do tiêm ít xâm lấn và không phổ biến khi kết hợp PRP với glucose ưu trương ngay trước khi tiêm, chúng tôi quyết định nghiên cứu glucose ưu trương kết hợp với WB trong Phần 1. Bước ba và bốn. Ở mỗi giai đoạn, 20 tình nguyện viên đã hiến 7-8 ml ACD-A (axit chứa trisodium citrate (22,0 g/l), axit citric (8,0 g/l) và glucose (24,5 g/l), dung dịch dextrose citrate) để làm thuốc chống đông máu (Bảng 1). Chỉ sử dụng hỗn hợp glucose lớn hơn 12,5% để xác định phần trăm ngưỡng liên quan đến sự gia tăng MPV. Ở giai đoạn thứ ba, 1 ml máu được cho vào ống nghiệm. Sau đó trộn máu trên máy trộn xoáy trong 10 giây bằng cách thêm 1 ml glucose 30%, glucose 40% hoặc glucose 50% vào ống để thu được nồng độ glucose cuối cùng lần lượt là 15%, 20% và 25%. Các mẫu máu glucose được phân tích CBC ngay sau khi trộn và lặp lại sau mỗi hai phút trong 30 phút.
Trong quá trình trộn ban đầu, việc bổ sung glucose ưu trương 1:1 và WB hoặc PRP làm tiểu cầu tiếp xúc với nồng độ trên 25% trong vài giây. Ở bước thứ tư, để đánh giá tác dụng của glucose ưu trương với nồng độ đỉnh ban đầu tối thiểu và kiểm tra giới hạn trên của tác dụng của glucose, chúng tôi chỉ thêm một lượng nhỏ máu vào D25W hoặc D50W. Cho 1 ml D25W hoặc D50W vào ống và thêm 0,2 ml WB trong khi lắc mẫu trong 10 giây. Trong những trường hợp này, máu tiếp xúc với glucose ở nồng độ cao hơn khoảng 20% ​​so với nồng độ cuối cùng, thay vì cao hơn 50% so với nồng độ cuối cùng như trong Giai đoạn 3, dẫn đến nồng độ glucose cuối cùng là 20,8% và 41,6%. Các mẫu hỗn hợp được phân tích trong cùng khoảng thời gian như trong bước 3.
Trong bước đầu tiên của mỗi loạt pha loãng glucose, 30 mẫu được lấy vì đây là quy mô mẫu phù hợp cho nghiên cứu thí điểm [9]. Vào cuối mỗi giai đoạn (bao gồm cả giai đoạn đầu tiên), hãy đánh giá tính đầy đủ của quy mô mẫu bằng cách sử dụng công thức được sử dụng để xác định quy mô mẫu cần thiết để ước tính giá trị trung bình của biến kết quả liên tục trong một quần thể. Công thức n = Z2 x SD2 /E2. Trong phương trình này, Z là điểm Z, SD là độ lệch chuẩn và E là lỗi mong muốn [10]. Alpha của chúng tôi là 0,05, tương ứng với giá trị Z là 1,96 và chúng tôi mong đợi sai số là 5 (tính theo phần trăm). Do đó, chúng tôi giải cho n = (1,962 x SD2) / 52. Kết quả cho thấy quy mô mẫu cần thiết cho mỗi giai đoạn nhỏ hơn số lượng thực tế thu thập được.
Trong các giai đoạn 1, 3 và 4 sử dụng nhiều hơn một nồng độ glucose, tác động của các nồng độ glucose khác nhau đã được phân tích bằng cách so sánh sự thay đổi phân số giữa thời điểm 0 và mỗi thời điểm tiếp theo (giai đoạn 1 ở phút thứ 15, giai đoạn 3 ở phút thứ 15). và bốn ở giây thứ 15, sau đó cứ sau hai phút.) Tỷ lệ thay đổi cho mỗi giai đoạn thời gian đã được so sánh bằng cách sử dụng kiểm định Mann-Whitney U vì dữ liệu không tuân theo phân phối chuẩn như được xác định bởi kiểm định chuẩn Shapiro-Wilk. Vì phân tích 1-1 của một số nhóm (năm) đã được thực hiện trong các bước đầu tiên, thứ ba và thứ tư (tổng cộng năm), nên đã thực hiện hiệu chỉnh Bonferroni để điều chỉnh giá trị alpha mong muốn thành ≤0,01 nhưng không phải ≤0,05.
Giảm số lượng tiểu cầu với mọi nồng độ dextrose ưu trương và tăng MPV trong tiểu cầu PRP ở nồng độ dextrose >12,5%: Số lượng tiểu cầu PRP tăng từ một đến năm lần so với nồng độ máu toàn phần ban đầu, thay đổi tùy theo phương pháp (không mô tả). Giảm số lượng tiểu cầu với mọi nồng độ dextrose ưu trương và tăng MPV trong tiểu cầu PRP ở nồng độ dextrose >12,5%: Số lượng tiểu cầu PRP tăng từ một đến năm lần so với nồng độ máu toàn phần ban đầu, thay đổi tùy theo phương pháp (không mô tả). Bạn có thể sử dụng tài khoản của mình để có được tài khoản dành cho xe MPV và xe MPV của mình sử dụng PRP концентрации декстрозы > 12,5%: количество тромбоцитов PRP увеличилось в 1-5 раз по сравнению с исходной цельной кровью, в зависимости от tôi (không có gì cả). Giảm số lượng tiểu cầu ở mọi nồng độ dextrose ưu trương và tăng MPV ở tiểu cầu PRP ở nồng độ dextrose >12,5%: Số lượng tiểu cầu PRP tăng 1-5 lần so với máu toàn phần ban đầu, tùy thuộc vào phương pháp (không hiển thị). ).在> 12,5% Các nhà đầu tư: PRP 血小板计数从浓度的1 倍上升到5 倍，因方法而异（未描述）。 Ở nồng độ glucose >12,5%, nồng độ glucose cao làm giảm số lượng tế bào máu, MPV máu PRP tăng: so với 与基线全血, số lượng tế bào máu PRP tăng từ 1 đến 5 lần so với nồng độ (không mô tả). Tỷ lệ tín dụng >12,5% tỷ lệ tín dụng Xin chào, một chiếc MPV sẽ được cung cấp cho bạn PRP: Bảo đảm quyền lợi PRP увеличивалось от 1- до 5-кратных концентраций по сравнению с исходными концентрациями цельной крови, в bạn không cần phải làm gì cả (không phải описано ). Ở nồng độ glucose >12,5%, tất cả nồng độ glucose tăng huyết áp đều làm giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV trong tiểu cầu PRP: Số lượng tiểu cầu PRP tăng gấp 1 đến 5 lần so với nồng độ máu toàn phần ban đầu, tùy thuộc vào phương pháp (như đã mô tả).Hình 1 cho thấy số lượng tiểu cầu giảm gần 75% sau khi pha loãng trong nước và giảm 20-30% sau 15 phút pha loãng với các nồng độ glucose khác nhau so với PRP ban đầu và pha loãng 1:1 được điều chỉnh theo thể tích (1- k1 với hiệu chỉnh thể tích). k -1 nuôi cấy).1 nuôi cấy).
Số lượng tế bào ở mỗi độ pha loãng được biểu thị dưới dạng một phần của số lượng ban đầu trước khi pha loãng.
MPV giảm tối thiểu trong quá trình sản xuất PRP, không có thay đổi thêm về nồng độ pha loãng thành 12,5% trong nước hoặc glucose (bao gồm hỗn hợp glucose PRP 25%) và tăng hơn 20% sau khi pha loãng trong dung dịch glucose 50% (Hình .2). Ngược lại, hồng cầu không cho thấy thay đổi đáng kể về thể tích ở bất kỳ độ pha loãng nào khác ngoài H2O.
Thể tích trung bình của tế bào ở mỗi độ pha loãng được biểu thị dưới dạng phần trăm của thể tích ban đầu trước khi pha loãng.
Giảm số lượng tiểu cầu và tăng CVR tương tự nhưng ít rõ rệt hơn đã được quan sát thấy ở BC tiếp xúc với 50% glucose (để pha chế với 25% glucose). Bảng 2 so sánh số lượng tế bào và thể tích tế bào trong toàn bộ máu pha loãng trong 50% dextrose với dữ liệu PRP pha loãng trong 50% dextrose. Những thay đổi trong số lượng RBC và MCV RBC không rõ ràng và không phải là trọng tâm chú ý của chúng tôi.
SD = độ lệch chuẩn, MD = sự khác biệt trung bình giữa các nhóm, SE = độ lệch chuẩn của sự khác biệt trung bình, RBC = hồng cầu, PLT = tiểu cầu, PRP = huyết tương giàu tiểu cầu, WB = máu toàn phần
Sau khi thêm D50W vào WB, tỷ lệ mất tiểu cầu điều chỉnh theo pha loãng là 7,7% (310±73 so với 286±96) so với 17,8% đối với pha loãng PRP trong D50W (664±348 so với 544±277). MPV WB tăng 16,8% (từ 10,1 ± 0,5 lên 11,8 ± 0,6), trong khi MPV PRP tăng 26% (9,2 ± 0,8 so với 11,6 ± 0,7). Mặc dù sự khác biệt trung bình về cả giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV đều lớn hơn đáng kể với PRP, nhưng những thay đổi về giảm số lượng tiểu cầu trong WB gần như đáng kể (310 ± 73 đến 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) và sự gia tăng MPV là đáng kể (10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). Mặc dù sự khác biệt trung bình về cả giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV đều lớn hơn đáng kể với PRP, nhưng những thay đổi về giảm số lượng tiểu cầu trong WB gần như đáng kể (310 ± 73 đến 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06) và sự gia tăng MPV là đáng kể (10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Mặc dù sự khác biệt trung bình về cả giảm số lượng tiểu cầu và tăng CVR đều lớn hơn đáng kể với PRP, nhưng những thay đổi về giảm số lượng tiểu cầu trong WB gần như có ý nghĩa (310 ± 73 đến 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06).увеличение MPV было значительным (từ 10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001). sự gia tăng MPV là đáng kể (từ 10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).Công ty cung cấp PRP cho MPV内血小板计数减少的变化几乎是显着的（310 ± 73 至286 ± 96 (-7,7%)；p = 0,06)和MPV的增加是显着的（10.1 ± 0.5 到11.8 ± 0.6 (+16.8) p < .001）。尽管 PRP 在 血小板 计数 和 和 增加 方面 的 平均 差异 显着 大 , 但 但 内血小板 计数减少 的 几乎 是 显着 的 （（（310 ± 73 至 286 ± 96 (-7,7%) ； p = 0,06)和MPV 的增加是显着的（10,1 ± 0,5 到11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001)。Sự thay đổi trong việc giảm số lượng tiểu cầu trong WB gần như đáng kể (từ 310 ± 73 xuống 286 ± 96 (-7,7%); p = 0,06), mặc dù PRP có sự khác biệt trung bình lớn hơn đáng kể về sự giảm số lượng tiểu cầu và tăng MPV, và sự gia tăng MPV là đáng kể.(từ 10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) р < 0,001). (từ 10,1 ± 0,5 đến 11,8 ± 0,6 (+16,8) p < 0,001).
Nồng độ cuối cùng là 20% glucose là cần thiết để thấy sự thay đổi đáng kể trong MPV, nhưng sự thay đổi trong MPV rõ rệt hơn ở nồng độ cuối cùng là 25%. Tình trạng mất tiểu cầu ổn định sau sự suy giảm ban đầu. Chúng tôi ghi nhận sự giảm mạnh ban đầu trong CVR, tuy nhiên, CVR đã nhanh chóng được phục hồi ở nồng độ glucose cuối cùng là 25%, cao hơn đáng kể so với mức CVR được quan sát thấy ở nồng độ glucose cuối cùng là 20% và 15% (Hình 3 và bên trái của Bảng 3; các hộp được tô bóng). biểu thị giá trị p ≤ alpha với hiệu chỉnh Bonferroni là 0,01). Cũng có một sự sụt giảm mạnh ban đầu về số lượng PLT, được quan sát thấy trong giai đoạn đầu từ 0-15 giây, sau đó duy trì ổn định (từ 15 giây đến 30 phút; bên trái của bảng 4).
Việc bổ sung các nồng độ glucose khác nhau vào máu toàn phần dẫn đến sự giảm nhanh ban đầu của MPV sau đó là sự phục hồi phụ thuộc vào nồng độ hơn 20%. Chú thích cho thấy nồng độ glucose sau khi pha loãng. D15, D20 và D25 được thực hiện ở độ pha loãng 1:1. D21 và D41 được thực hiện ở độ pha loãng 1:5.
Bảng 4 cho thấy sự thay đổi số lượng tiểu cầu khi pha loãng trong glucose ưu trương. Chúng tôi quan sát thấy mối quan hệ phụ thuộc liều lượng giữa sự giảm ngay lập tức số lượng PLT ở độ pha loãng 1:1 và ở độ pha loãng 1:5. So sánh độ pha loãng 1:1 như một nhóm duy nhất với độ pha loãng 1:5, nhóm 1:1 có sự giảm ngay lập tức số lượng tiểu cầu ít hơn nhóm 1:5 là 66±48.000 (23%) so với 99±69.000 (37%). , p = 0,014) trong nhóm 1:5. Sau khi giảm ban đầu tại điểm đo đầu tiên, số lượng tiểu cầu dưới dạng phần trăm glucose đã ổn định (Hình 4).
Khi máu toàn phần được thêm vào glucose theo tỷ lệ 1:1, số lượng tiểu cầu giảm khoảng 25%. Tuy nhiên, khi máu toàn phần được thêm vào theo tỷ lệ 1:5, mức giảm lớn hơn nhiều – khoảng 50%.
Glucose 41% làm tăng MPV nhanh hơn và đáng kể hơn so với 25% hoặc 21%. Kết quả MPV được thể hiện trong Hình 3. Ở tất cả các pha loãng khác, không quan sát thấy sự giảm ban đầu ngay lập tức nào trong MPV sau khi thêm glucose 50%. Khi sử dụng glucose 25% (nồng độ glucose 20,8% ở độ pha loãng cuối cùng), sự thay đổi trong MPV tương đương với sự thay đổi trong glucose 20% ở độ pha loãng 1: 1 (Hình 3). Mặc dù sự thay đổi trong MPV ban đầu lớn hơn ở nồng độ hỗn hợp 41% so với 25%, nhưng sự khác biệt trong MPV giữa 41% và 25% sau 16 phút không còn đáng kể nữa (Bảng 3, bên phải). Điều thú vị nữa là glucose 25% làm tăng MPV hiệu quả hơn 20,8%.
Nghiên cứu trong ống nghiệm này đã xác nhận một phần giả thuyết của chúng tôi. Nó cho thấy khả năng ly giải tiểu cầu một phần do sự pha trộn của dextrose, khả năng thích ứng nhanh của tiểu cầu với tình trạng tăng trương lực cực độ và làm tăng đáng kể MPV để đáp ứng với nồng độ dextrose tăng trương lực > 25%. Nó cho thấy khả năng ly giải tiểu cầu một phần do sự pha trộn của dextrose, khả năng thích ứng nhanh của tiểu cầu với tình trạng tăng trương lực cực độ và làm tăng đáng kể MPV để đáp ứng với nồng độ dextrose tăng trương lực > 25%. Bạn có thể sử dụng các công cụ hỗ trợ để có được một khoản vay phù hợp với bạn тромбоцитов до экстремального гипертонуса và значительное повышение MPV đã đạt được mức tăng trưởng > 25%. Nó cho thấy khả năng ly giải tiểu cầu một phần với dextrose, khả năng thích ứng tiểu cầu nhanh với tình trạng tăng trương lực cực độ và làm tăng đáng kể MPV để đáp ứng với mức dextrose tăng trương lực >25%.Bạn có thể làm điều đó bằng cách sử dụng công cụ này. 25% 浓度的高渗葡萄糖时MPV 显着上升。Bạn có thể làm được điều đó không?响应> 25% 浓度 高渗 葡萄糖 时 时 mpv 显着。。。。。 Он показывает потенциальный частичный лизис тромбоцитов смесями с глюкозой, быструю адаптацию тромбоцитов к экстремальному гипертонусу và значительное увеличение MPV ở mức cao hơn 25%. Nó cho thấy khả năng tiểu cầu bị ly giải một phần bởi hỗn hợp glucose, tiểu cầu thích nghi nhanh với tình trạng tăng trương lực cực độ và MPV tăng đáng kể khi đáp ứng với glucose tăng trương lực >25%.Sự gia tăng ban đầu đạt mức tối đa ở mức tiếp xúc với glucose là 41,6%, nhưng mức tăng MPV đạt tới mức tiếp xúc với glucose là 25% sau khoảng 20 phút tiếp xúc.
Nồng độ tiểu cầu bị ảnh hưởng bởi glucose. Chúng tôi nhận thấy rằng lượng PLT giảm ở mọi pha loãng glucose. Sự giảm mạnh về số lượng tiểu cầu trong pha loãng H2O (0%) của chuỗi PRP có thể liên quan đến sự phân hủy thẩm thấu. Mặt khác, đây có thể là hiện tượng giả tạo do tiểu cầu vón cục, nhưng điều này trái ngược với việc thiếu thay đổi MPV ở pha loãng này. Phát hiện này có nghĩa là một số tiểu cầu rất nhạy cảm với tình trạng hạ thẩm thấu.
Trong tất cả các pha loãng glucose theo tỷ lệ 1:1, lượng PLT giảm 20-30%, thậm chí theo D5W (nhược trương ở 252 mOsm), điều này có thể chỉ ra tác dụng không thẩm thấu cụ thể của glucose, vì cả PLT và MPV đều không đổi khi nồng độ glucose tăng gấp ba lần từ D5W đến D25W. Trên thực tế, nồng độ PLT có xu hướng tăng nhẹ khi độ thẩm thấu tăng.
Sự giảm PLT giữa pha loãng 1:1 và 1:5 có nghĩa là hiệu ứng hòa tan phụ thuộc vào nồng độ glucose ban đầu và cuối cùng. Nếu nó chỉ phụ thuộc vào nồng độ ban đầu, thì người ta sẽ mong đợi thấy sự khác biệt trong việc giảm PLT giữa nồng độ 1:1. Nhưng chúng ta không thấy. Nếu hiệu ứng phân hủy chỉ phụ thuộc vào nồng độ glucose cuối cùng, thì chúng ta không mong đợi nhiều sự khác biệt giữa pha loãng 20% ​​1:1 và pha loãng 20,8% 1:5. Nhưng chúng ta đã làm được.
Nếu mất tiểu cầu xảy ra do ly giải tiểu cầu, một phần chất ly giải được hình thành, sau đó các cytokine và yếu tố tăng trưởng được giải phóng vào môi trường ngoại bào. Một số nghiên cứu đã chỉ ra rằng chất ly giải tiểu cầu gần như có hiệu quả như PRP như một dung dịch tăng sinh [11]. Bản thân PRP đã được chứng minh là một giải pháp hiệu quả để điều trị tăng sinh [12-14].
Tiểu cầu không hoạt động lưu thông dưới dạng đĩa được gia cố bằng một số cấu trúc bên trong. Trong quá trình hoạt hóa, chúng có hình cầu hoặc hình amip hơn, dẫn đến tăng thể tích. Sự gia tăng thể tích đòi hỏi phải tăng diện tích bề mặt, là kết quả của quá trình đùn hệ thống ống mở (OCS) và thêm các hạt ngoại bào vào màng. Vẫn chưa xác định được liệu sự gia tăng MPV do glucose ưu trương gây ra có liên quan đến một hoặc cả hai cơ chế này hay không, nhưng nếu là cơ chế sau, thì sự gia tăng MPV sẽ chỉ ra sự mất hạt.
Nghiên cứu này cho thấy việc tiếp xúc với nồng độ glucose cao trên PRP hoặc tiểu cầu toàn phần trong máu dẫn đến tăng MPV trong vòng 15 phút với nồng độ glucose lần lượt là 25% và 41,6%.
Sự gia tăng MPV của tiểu cầu có thể là do sự giãn nở của các đám rối vi ống xung quanh để đáp ứng với dòng canxi. Liu et al. Glucose đã được chứng minh là trung gian cho dòng canxi đi vào qua kênh TRPC6 của tiểu cầu [6]. Giả thuyết của chúng tôi là glucose gây ra sự giãn nở của các đám rối vi ống, dẫn đến sự gia tăng MPV và sự nhạy cảm và/hoặc hoạt hóa của tiểu cầu. Tuy nhiên, xét theo kết quả của chúng tôi, đây chỉ là một phần của câu chuyện. Trong các thử nghiệm của chúng tôi, không có nồng độ nào dưới D25W dẫn đến sự gia tăng MPV. Vì chúng tôi chưa thử nghiệm tiếp xúc với nồng độ glucose từ 12,5% đến 25%, nên kết quả giai đoạn 1 của chúng tôi cho thấy có thể có một ngưỡng trong phạm vi nồng độ glucose này dẫn đến sự gia tăng MPV. Các thử nghiệm tiếp theo ở giai đoạn 3 và 4 cho thấy glucose 20-25% dường như là ngưỡng cho điều này, nhưng vẫn chưa rõ lý do tại sao.
Chúng tôi cũng quan sát thấy MPV giảm ~9% sau khi ly tâm. Không rõ liệu sự giảm MPV này có phải do các tiểu cầu lớn hơn và đặc hơn bị mắc kẹt trong lớp RBC của máy ly tâm hay không. Quan sát này có thể quan trọng đối với các bác sĩ lâm sàng vì nó có thể ngụ ý rằng tiểu cầu PRP là một tập hợp con nhỏ hơn và ít đặc hơn của tiểu cầu WB.
Trong một nghiên cứu trước đây, chúng tôi đã chỉ ra rằng việc chuẩn bị PRP bằng phương pháp thủ công không tốn kém [8]. Nếu glucose làm nhạy cảm tiểu cầu mô hoặc PRP, khiến chúng dễ bị kích hoạt hơn hoặc nếu PRP được sản xuất với đặc tính lysate một phần, điều này có thể tăng cường tái tạo và giảm nhu cầu điều trị. Do đó, sự kết hợp của PRP và glucose có nồng độ cao có thể tiết kiệm chi phí hơn so với PRP hoặc glucose đơn lẻ.
Nghiên cứu của chúng tôi có một số thiếu sót. Đầu tiên, chúng tôi sử dụng PRP thu được từ nhiều phương pháp khác nhau. Điều này có thể dẫn đến các kết quả trái ngược nhau. Thứ hai, chúng tôi không thể thực hiện phân tích sinh hóa đối với bất kỳ mẫu nào của mình để xác định chính xác hơn xem hoạt hóa tiểu cầu có xảy ra hay không. Chúng tôi muốn đo P-selectin, yếu tố tiểu cầu 4, các tập hợp tiểu cầu đơn nhân hoặc các dấu hiệu hoạt hóa tiểu cầu khác để hiểu rõ hơn về mức độ hoặc sự hiện diện của quá trình giải phóng hạt alpha, nhưng điều này nằm ngoài phạm vi của nghiên cứu này. Thứ ba, chúng tôi không thể xác nhận bằng kính hiển vi điện tử hoặc các phương pháp khác rằng sự gia tăng MPV ở các tiểu cầu tiếp xúc với glucose là do tác động lên các đám rối vi ống.
Hỗn hợp WB hoặc PRP với 25% glucose làm tăng MPV, báo hiệu sự khởi đầu của quá trình hoạt hóa tiểu cầu, mặc dù nghiên cứu này không chứng minh được sự tiến triển của quá trình kết tập hoặc giải phóng hạt. Hỗn hợp glucose ưu trương dẫn đến mất tiểu cầu, có thể biểu thị tác dụng ly giải. Hoạt hóa một phần hoặc ly giải tiểu cầu có thể gây tái tạo mô sau khi tiêm tiểu cầu. Không rõ những thay đổi này có thể dẫn đến hậu quả lâm sàng nào. Các nghiên cứu sâu hơn đã chứng minh các phép đo chính xác hơn về hoạt hóa hoặc ly giải và đã đánh giá các tác dụng lâm sàng khác nhau của hỗn hợp glucose ưu trương với WB hoặc PRP.
Liệu pháp tăng sinh glucose là một liệu pháp tái tạo đơn giản và không tốn kém đang phát triển nhanh chóng và hỗ trợ nghiên cứu lâm sàng. Nghiên cứu này gợi ý một cơ chế sinh lý, nếu được xác nhận, có thể giúp chúng ta hiểu một phần cơ chế tái tạo của liệu pháp tăng sinh.
Tin sinh học và tin học sức khỏe tại Đại học Missouri, Trường Y khoa Kansas City, Kansas City, Hoa Kỳ
Đối tượng là con người: Tất cả những người tham gia nghiên cứu này đã đồng ý hoặc không đồng ý. Hiệp hội Y học Tế bào Quốc tế đã ban hành phê duyệt ICMS-2017-003. Giao thức sau đây đã được Hội đồng Đánh giá Thể chế của Hiệp hội Y học Tế bào Quốc tế chấp thuận để sử dụng thêm: Tiêu đề: Tính toán sản lượng thuốc huyết tương giàu tiểu cầu dựa trên số lượng tiểu cầu CBC ban đầu. Đối tượng là động vật: Tất cả các tác giả xác nhận rằng không có động vật hoặc mô nào tham gia vào nghiên cứu này. Xung đột lợi ích: Theo Biểu mẫu Tiết lộ Thống nhất của ICMJE, tất cả các tác giả tuyên bố những điều sau: Thông tin thanh toán/dịch vụ: Tất cả các tác giả tuyên bố rằng họ không nhận được hỗ trợ tài chính từ bất kỳ tổ chức nào cho công trình đã nộp. Mối quan hệ tài chính: Tất cả các tác giả tuyên bố rằng họ hiện không có hoặc trong vòng ba năm qua không có mối quan hệ tài chính với bất kỳ tổ chức nào có thể quan tâm đến công trình đã nộp. Mối quan hệ khác: Tất cả các tác giả tuyên bố rằng không có mối quan hệ hoặc hoạt động nào khác có thể ảnh hưởng đến công trình đã nộp.
Harrison TE, Bowler J, Reeves K et al. (17 tháng 5 năm 2022) Tác động của glucose lên số lượng và thể tích tiểu cầu: ý nghĩa đối với y học tái tạo. Cure 14(5): e25081. doi:10.7759/cureus.25081
© Bản quyền 2022 Harrison et al. Đây là bài viết truy cập mở được phân phối theo các điều khoản của Giấy phép Creative Commons Ghi công CC-BY 4.0. Được phép sử dụng, phân phối và sao chép không giới hạn ở bất kỳ phương tiện nào, miễn là ghi rõ tác giả và nguồn gốc.