נוטריאַנט אַקוואַזישאַן און פאַרשפּרייטונג ינטאַגרייץ ינסעקט פאָרידזשינג און לעבן געשיכטע טרייץ. צו פאַרגיטיקן פֿאַר דיפישאַנסיז אין ספּעציפיש נוטריאַנץ אין פאַרשידענע לעבן סטאַגעס, ינסעקץ קענען קריגן די נוטריאַנץ דורך סאַפּלאַמענאַל פידינג, למשל, דורך פידינג אויף ווערבעראַט סאַקרישאַנז אין אַ פּראָצעס באקאנט ווי פּאַדאַלז. דער ציל פון דעם לערנען איז געווען צו אַססעסס צי אַ.אַראַביענסיס אַדזשאַטיישאַן אויף קו פּישעכץ פֿאַר נוטריאַנט אַקוואַזישאַן ימפּרוווז לעבן געשיכטע קעראַקטעריסטיקס.
מאַכן זיכער אַז עס איז זיכער. אַראַביענסיס איז געווען געצויגן צו די רייעך פון פריש, 24-שעה, 72-שעה און 168-שעה אַלט קו פּישעכץ, און באַלעבאָס-זוכן און בלוט-פאסטעכער (48-שעה נאָך בלוט מאָלצייַט) פימיילז זענען געמאסטן אין אַ י-רער אָלפאַקטאָמעטער, און שוואַנגער ווייבערז זענען גענוצט צו ידענטיפיצירן כעמישער קאַמפּאַונדז פֿאַר כעמיש אַנאַליזעס און אַססעססעד אין ילעקטראָואַקטיווע פימיילז. קו פּישעכץ אין אַלע פיר עלטער קלאסן. סינטעטיש מיקסטשערז פון ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז זענען עוואַלואַטעד אין י-רער און פעלד טריאַלס. צו ויספאָרשן קו פּישעכץ און זייַן הויפּט ניטראָגען-מיט קאַמפּאַונד ורעאַ ווי פּאָטענציעל סאַפּלאַמענאַל דיייץ פֿאַר מאַלאַריאַ וועקטאָרס, פידינג פּאַראַמעטערס און לעבן געשיכטע קעראַקטעריסטיקס זענען געמאסטן. ניצל, טייד פלי, און רעפּראָדוקציע.
זוכן פֿאַר די באַלעבאָס ס בלוט און דערנערונג. אין לאַבאָראַטאָריע און פעלד שטודיום, אַראַבס זענען געצויגן צו די נאַטירלעך און סינטעטיש רייעך פון פריש און אַלט קו פּישעכץ. שוואַנגער ווייבער זענען גלייַכגילטיק צו קו פּישעכץ רעספּאָנסעס ביי רוטינג זייטלעך. וואַל, אָדער רעפּראָדוקציע.
Anopheles arabinis אַקוואַזישאַן און פאַרשפּרייטונג פון קו פּישעכץ פֿאַר ימפּרוווד לעבן געשיכטע קעראַקטעריסטיקס. סופּפּלעמענטאַל פידינג פון קו פּישעכץ אַפעקץ וועקטאָר קאַפּאַציטעט גלייַך דורך ינקריסינג טעגלעך ניצל און וועקטאָר געדיכטקייַט, און מינאַצאַד דורך אָלטערינג פלי טעטיקייט און זאָל דעריבער זיין קאַנסידערד אין צוקונפֿט מאָדעלס.
נוטריאַנט אַקוואַזישאַן און פאַרשפּרייטונג ינטאַגרייץ ינסעקט פאָרידזשינג און לעבן געשיכטע קעראַקטעריסטיקס [1,2,3]. ינסעקץ זענען ביכולת צו אויסקלייַבן און קריגן עסנוואַרג און דורכפירן קאָמפּענסאַטאָרי פידינג באזירט אויף עסנוואַרג אַוויילאַבילאַטי און נוטריאַנט באדערפענישן [1, 3]. אין ספּעציפיש נוטריאַנץ, ינסעקץ קענען קריגן די נוטריאַנץ דורך סופּפּלעמענטאַל פידינג, אַזאַ ווי אויף בלאָטע, פאַרשידן עקסקרעמענט און סאַקרישאַנז פון ווערברייץ, און קאַרריאָן, אַ פּראָצעס באקאנט ווי פּאַדאַלז [2]. 2, 4, 5, 6] ,7]. די מאַלאַריאַ קאָמאַר Anopheles gambiae sensu lato (sl) ימערדזשד ווי אַ 'מאַלנערישט' דערוואַקסן [8], אַזוי וואָטערינג קען שפּילן אַ וויכטיק ראָלע אין זייַן לעבן געשיכטע קעראַקטעריסטיקס, אָבער דעם נאַטור איז ביז איצט אָפּגעלאָזן.
ניטראָגען ינטייק אין דערוואַקסן ווייַבלעך אַנאָפעלעס מאַסקיטאָוז איז לימיטעד רעכט צו נידעריק קאַלאָריק ריזערווז פון די לאַרוואַל בינע און באַטלאָניש יוטאַלאַזיישאַן פון בלוט מאָלצייַט [9]. Female Ann.gambiae סל טיפּיקלי קאַמפּאַנסייץ פֿאַר דעם דורך סאַפּלאַמענטאַד מיט סאַפּלאַמענאַל בלוט מילז [10, 11], דערמיט שטעלן מער מענטשן אין ריזיקירן פון קאַנטראַקטינג די קרענק און סופּפּלעמענטאַטיאָן פון אָלטערנאַטיוו קאָרמען. אין דעם אַכטונג, די שטאַרק און אָפּשיידנדיק אַטראַקשאַן פון איינער פון די סיבלינג מינים אין אַן. די גאַמביאַן סל מינים קאָמפּלעקס, Anopheles arabinis, פריש און אַלט קו פּישעכץ [12,13, איז טשיקאַווע און אָפענגיק אויף זיין פּרעפֿערענצן, איז באַוווסט אין זיין פּרעפֿערענצן. קו פּישעכץ איז אַ מיטל רייַך אין ניטראָגענאָוס קאַמפּאַונדז, מיט ורעאַ אַקאַונטינג פֿאַר 50-95% פון די גאַנץ ניטראָגען אין פריש פּישעכץ [15, 16]. קאַלאָפיליק מייקראָואָרגאַניזאַמז (פילע פון ​​וואָס פּראָדוצירן קאַמפּאַונדז טאַקסיק צו מאַסקיטאָוז) טרייוו [15], וואָס קען זיין ווייַבלעך אַנ.אַראַביענסיס איז פּרעפערענטשאַלי געצויגן צו פּישעכץ אַלט 24 שעה אָדער ווייניקער [13, 14].
אין דעם לערנען, באַלעבאָס און בלוט-פאסטעכער אַנס זענען געקוקט פֿאַר. בעשאַס זיין ערשטער גאָנאַדאָטראָפּין ציקל, אַראַביענסיס איז אַססעססעד פֿאַר די אַקוואַזישאַן פון ניטראָגענאָוס קאַמפּאַונדז, אַרייַנגערעכנט ורעאַ, דורך פּישעכץ מיקסינג. אין זייער זוכן פֿאַר דעם פּאָטענציעל נוטרישאַנאַל מיטל, arabiensis דיסקאַווערד כעמישער קאָראַליישאַנז הינטער די באמערקט דיפערענטשאַל אַטראַקטיוונאַס. סינטעטיש רייעך מיקסטשערז פון וואַלאַטאַל אָרגאַניק קאַמפּאַונדז (VOCs) יידענאַפייד אין 24-שעה אַלט פּישעכץ, די 24-שעה אַלט פּישעכץ זענען נאָך עוואַלואַטעד אונטער די לאַבאָראַטאָריע ווירקונג פון פּישעכץ טנאָים פאַרשידענע פיזיאַלאַדזשיקאַל שטאַטן.קאָמאַר אַטראַקשאַן. די באקומען רעזולטאַטן באַשטעטיקן אַז אַן.arabiensis אַקווייערז און דיסטריביוץ ניטראָגענאָוס קאַמפּאַונדז געפונען אין ווערבראַט פּישעכץ צו השפּעה לעבן געשיכטע קעראַקטעריסטיקס.די רעזולטאטן זענען דיסקאַסט אין דעם קאָנטעקסט פון פּאָטענציעל עפּידעמיאָלאָגיקאַל קאַנסאַקווענסאַז און ווי זיי קענען ווערן געניצט פֿאַר וועקטאָר סערוויילאַנס און קאָנטראָל.
אַנאָפעלעס אַראַביקאַנס (דאָנגאָלאַ שפּאַנונג) איז געווען מיינטיינד בייַ 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% רה און אַ 12:12 ה ליכט: פינצטער ציקל. לאַרווי זענען רירד אין פּלאַסטיק טאַץ (20 סענטימעטער × 18 סענטימעטער × 7 סענטימעטער) אָנגעפילט מיט דיסטילד וואַסער און געפֿיטערט טעטראַמין ® פיש מיט טעטראַמין, דעמעפּ ® פיש. 0 מל טעפּלעך (Nolato Hertila, Åstorp, SE) און דאַן טראַנספערד צו בוגדאָרם קאַגעס (30 סענטימעטער × 30 סענטימעטער × 30 סענטימעטער; MegaView Science, Taichung, טייוואַן) צו לאָזן דערוואַקסן ימערדזשאַנס. אַדאַלץ זענען צוגעשטעלט מיט אַ 10% סוקראָוס לייזונג אַד לביטום ביז 4 טעג נאָך-ימערדזשאַנס איז געווען געפֿינט גלייך איידער די נייטמער (דפּ, די ווענט און די נייטמער) טילד וואַסער פריערדיק צו דער עקספּערימענט, ווי דיסקרייבד אונטן. פעמאַלעס געניצט פֿאַר פלי רער יקספּעראַמאַנץ זענען סטאַרווד פֿאַר בלויז 4-6 שעה מיט וואַסער אַד לאַביטו. יחיד קאַגעס און צוגעשטעלט דיעטע גלייַך, ווי דיסקרייבד אונטן, אָדער 10% סוקראָוס אַד ליביטום פֿאַר 3 טעג פריערדיק צו די יקספּעראַמאַנץ דיסקרייבד אונטן. די יענער פימיילז זענען געניצט פֿאַר פלי רער ביאָאַססיז און טראַנספערד צו דער לאַבאָראַטאָריע, און דעמאָלט האט דיסטילד וואַסער אַד לאַביטואַם פֿאַר 4-6 שעה איידער דער עקספּערימענט.
פידינג אַססעס זענען געניצט צו קוואַנטיפיצירן פּישעכץ און ורעאַ קאַנסאַמשאַן אין דערוואַקסן אַנ.אַראַב ווייַבלעך. האָסט-זוכט און בלוט-פאסטעכער פימיילז זענען צוגעשטעלט אַ דיעטע מיט 1% דיילוטאַד פריש און אַלט קו פּישעכץ, פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז פון ורעאַ, און צוויי קאָנטראָלס (10% סוקראָוס און וואַסער) פֿאַר 48 שעה. -1; Sigma-Aldrich, Stockholm, SE) איז צוגעגעבן צו די דיעטע און סאַפּלייד אין אַ 4 × 4 מאַטריץ אין 250 μל מיקראָסענטריפוגע טובז (Axygen Scientific, Union City, CA, USA; פיגורע 1A) פּלאָמבירן צו די ברעג (~ 300 μl). 6 סענטימעטער אין הייך; Semadeni, Ostermundigen, CH; Figure 1A) אין גאַנץ פינצטערניש בייַ 25 ± 2 סענטימעטער °C און 65 ± 5% קאָרעוו הומידיטי.די יקספּעראַמאַנץ זענען ריפּיטיד 5-10 מאל.נאָך ויסשטעלן צו דיעטע, מאַסקיטאָוז זענען געשטעלט בייַ -20 °C ביז ווייַטער אַנאַליסיס.
קוק פֿאַר רינדערנס פּישעכץ און ורעאַ אַבזאָרבד דורך דער באַלעבאָס און בלוט-סאַקינג ווייַבלעך Anopheles arabianus. אין פידינג פּראָצעס (א), ווייַבלעך מאַסקיטאָוז זענען צוגעשטעלט מיט אַ דיעטע וואָס באשטייט פון פריש און אַלט קו פּישעכץ, פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז פון ורעאַ, סוקראָוס (10%), און דיסטילד וואַסער (H2O). צו אַז באַלעבאָס-זוכן פימיילז אַבזאָרבד 72-שעה קו פּישעכץ ווייניקער ווי 168-שעה קו פּישעכץ (ב). די דורכשניטלעך גאַנץ ניטראָגען אינהאַלט (± נאָרמאַל דיווייישאַן) פון פּישעכץ איז רעפּריזענטיד אין די ינסעט. וועג ANOVA ניצן Tukey ס פּאָסטן האָק אַנאַליסיס; פּ <0.05). טעות באַרס רעפּראַזענץ נאָרמאַל טעות פון די מיינען (BE). די גלייַך דאַשט שורה רעפּראַזענץ די קלאָץ-לינעאַר ראַגרעשאַן שורה (F, G)
צו באַפרייַען אַבזאָרבד עסנוואַרג, מאַסקיטאָוז זענען ינדיווידזשואַלי געשטעלט אין 1.5 מל מיקראָסענטריפיודזש טובז מיט 230 μל דיסטילד וואַסער און די געוועב איז דיסראַפּטיד מיט אַ דיספּאָוזאַבאַל פּעסטלע און קאָרדלעסס מאָטאָר (VWR International, Lund, SE), נאכגעגאנגען דורך סענטריפוגיישאַן ביי 10 קרפּם פֿאַר 10 מינוט. רייך) און אַבזאָרבאַנס (λ620) איז געווען באשלאסן ניצן אַ ספּעקטראָפאָטאָמעטער-באזירט מיקראָפּלאַטע לייענער (SPECTROStar® Nano, BMG Labtech, Ortenberg, DE) נם). , Kista, SE). צו קוואַנטיפיצירן דייאַטערי ינטייק, אַ נאָרמאַל ויסבייג איז געווען צוגעגרייט דורך סיריאַל דיילושאַן צו טראָגן 0.2 μל צו 2.4 μל פון 1 מג מל-1 קסילענע סייאַנייד. דערנאָך, די אָפּטיש געדיכטקייַט פון באקאנט פאַרב קאַנסאַנטריישאַנז איז געניצט צו באַשטימען די סומע פון ​​עסנוואַרג יעדער קאָמאַר ינדזשעסטאַד.
באַנד דאַטן זענען אַנאַלייזד ניצן איין-וועג אַנאַליסיס פון וועריאַנס (ANOVA) נאכגעגאנגען דורך Tukey ס פּאָסט האָק פּאָרווייז קאַמפּעראַסאַנז (JMP Pro, v14.0.0, SAS Institute Inc., Cary, NC, US, 1989-2007). 0 פֿאַר מעק, GraphPad ווייכווארג, סאַן דיעגאָ, CA, יו.
בעערעך 20 μל פּישעכץ סאַמפּאַלז פון יעדער עלטער גרופּע זענען געבונדן אויף Chromosorb® W/AW (10 מג 80/100 מעש, Sigma Aldrich) און ענקאַפּסאַלייטיד אין צין קאַפּסאַלז (8 מם × 5 מם). עס.) צו באַשטימען ניטראָגען אינהאַלט אין פריש און אַלט פּישעכץ לויט דער פּראָטאָקאָל פון דער פאַבריקאַנט. גאַנץ ניטראָגען (ג ן ל-1) איז קוואַנטאַפייד באזירט אויף באקאנט ורעאַ קאַנסאַנטריישאַנז געניצט ווי אַ נאָרמאַל.
צו אַססעסס די ווירקונג פון דיעטע אויף באַלעבאָס-זוכן און בלוט-סאַקינג ווייַבלעך ניצל, מאַסקיטאָוז זענען ינדיווידזשואַלי געשטעלט אין גרויס פּעטרי קיילים (12 סענטימעטער אין דיאַמעטער און 6 סענטימעטער אין הייך; Semadeni) מיט אַ מעש-באדעקט לאָך אין די דעקל (3 סענטימעטער אין דיאַמעטער) מיט פֿאַר ווענטאַליישאַן און עסנוואַרג צושטעלן. דיייץ זענען צוגעשטעלט גלייך נאָך 4 דפּע און אַרייַנגערעכנט 1% קאַנסאַנטריישאַן פון פּישעכץ און 1 דיילוטאַד פּישעכץ. 0% סוקראָוס און וואַסער. יעדער דיעטע איז געווען פּיפּעטטיד אויף אַ דענטאַל טאַמפּאָן (DAB Dental AB, Upplands Väsby, SE) ינסערטאַד אין אַ 5 מל שפּריץ (Thermo Fisher Scientific, Gothenburg, SE), די פּלאַנדזשער איז אַוועקגענומען און געשטעלט אויף שפּיץ פון אַ פּעטרי שיסל (פיגור 1). צוויי מאָל אַ טאָג, בשעת טויט מאַסקיטאָוז זענען אַוועקגענומען ביז די לעצטע קאָמאַר געשטארבן (n = 40 פּער באַהאַנדלונג). ניצל פון מאַסקיטאָוז פאסטעכער אויף פאַרשידן דיייץ איז סטאַטיסטיש אַנאַלייזד ניצן קאַפּלאַן-מייער ניצל קורוועס און קלאָץ-ראַנג טעסץ צו פאַרגלייַכן ניצל פאַרשפּרייטונג קאַמפּעראַסאַנז צווישן דיייץ (יבם ספּסס 0.04).
א מנהג קאָמאַר פליענדיק מיל באזירט אויף Attisano et al.[17], געמאכט פון 5 מם דיק קלאָר אַקריליק פּאַנאַלז (10 סענטימעטער ברייט רענטגענ 10 סענטימעטער לאַנג רענטגענ 10 סענטימעטער הויך) אָן פראָנט און דערציען פּאַנאַלז (פיגורע 3: שפּיץ). פּאָר פון נעאָדימיום מאַגנאַץ 9 סענטימעטער באַזונדער. א האָריזאָנטאַל רער געמאכט פון דער זעלביקער מאַטעריאַל (6.5 סענטימעטער ל) בייסעקטאַד די ווערטיקאַל רער צו פאָרעם אַ טעטהערד אָרעם און אַן אָרעם וואָס געפירט אַ קליין שטיק פון אַלומינום שטער ווי אַ ליכט-ינטעראַפּטיד סיגנאַל.
24-שעה-סטאַרווד פימיילז זענען געגעבן די אויבן דיעטע פֿאַר 30 מינוט פריערדיק צו צאַמונג. פול-פאסטעכער ווייַבלעך מאַסקיטאָוז זענען דעמאָלט ינדיווידזשואַלי אַנעסטעטיזעד אויף אייז פֿאַר 2-3 מינוט און אַטאַטשט צו ינסעקט פּינס מיט בעעסוואַקס (Joel Svenssons Vaxfabrik AB, Munka Ljungby, SE) און דעמאָלט טייד צו די אָרעם רעוואָלוציע רעקאָרדעד צו די אָרעם רעוואָלוציע. ר, דעמאָלט סטאָרד און געוויזן ניצן פּיסי-לאַב 2000 ™ ווייכווארג (וו4.01; וועללעמאַן, גאַווערע, BE). די פלי מיל איז געשטעלט אין אַ קלימאַט-רעגיאַלייטאַד צימער (12 ה: 12 ה, ליכט: טונקל, 25 ± 2 ° C, 65 ± 5% רה).
צו וויזשוואַלייז די מוסטער פון פלי טעטיקייט, די גאַנץ דיסטאַנסע פלאָון (מ) און די גאַנץ נומער פון קאָנסעקוטיווע פלי אַקטיוויטעטן זענען קאַלקיאַלייטיד פּער שעה איבער אַ 24-שעה צייַט. אין דערצו, די דורכשניטלעך דיסטאַנסאַז פלאָון דורך יחיד פימיילז זענען קאַמפּערד צווישן טריטמאַנץ און אַנאַלייזד מיט איין-וועג ANOVA און Tukey ס פּאָסט האָק אַנאַליסיס (JMP Pro, v14.0.0), ווען סאַס איז אָפענגיק דיסטאַנסע אין אַ דורכשניטלעך באַהאַנדלונג פאַקטאָר. , די דורכשניטלעך נומער פון ראָונדס איז קאַלקיאַלייטיד אין 10-מינוט ינגקראַמאַנץ.
צו אַססעסס די ווירקונג פון דיעטע אויף די רעפּראָדוקטיווע פאָרשטעלונג פון An.arabiensis, זעקס פימיילז (4 דפּע) זענען טראַנספערד גלייך צו בוגדאָרם קאַגעס (30 סענטימעטער × 30 סענטימעטער × 30 סענטימעטער) נאָך בלוט זאַמלונג און דערנאָך צוגעשטעלט די יקספּערמענאַל דיעטע פֿאַר 48 שעה ווי דיסקרייבד אויבן. דיייץ זענען אַוועקגענומען און ספּאַנינג טעפּלעך (30 מל; נאָלאַטאָול דיסטיל 8 שעה פֿאַר 8 שעה) , טשאַנגינג יעדער 24 שעה. איבערחזרן יעדער דייאַטערי רעזשים 20-50 מאל. עגגס זענען גערעכנט און רעקאָרדעד פֿאַר יעדער יקספּערמענאַל שטייַג. סאַבסאַמפּאַלז פון עגגס זענען געניצט צו אַססעסס די דורכשניטלעך גרייס און לענג ווערייישאַן פון יחיד עגגס (n ≥ 200 פּער דיעטע) ניצן אַ דיאַלוקס-20 מיקראָסקאָפּ (דמ1000) יקוויפּט מיט דיאַלוקס-20 קאַמעראַס (דמ1000) 20 ר 2;Leica Microsystems Ltd., DE). די רוען עגגס זענען געהאלטן אין אַ קלימאַט-קאַנטראָולד צימער אונטער נאָרמאַל רייזינג טנאָים פֿאַר 24 שעה, און אַ סובסאַמפּלע פון ​​לעצטנס ימערדזשד 1סט ינסטאַר לאַרווי (n ≥ 200 פּער דיעטע) זענען געמאסטן, ווי דיסקרייבד אויבן. 0.0, סאַס אינסטיטוט ינק.).
העאַדספּאַסע וואַלאַטאַלז פון פריש (1 שעה נאָך מוסטערונג), 24 הר, 72 הר און 168 הר אַלט פּישעכץ זענען געזאמלט פון סאַמפּאַלז געזאמלט פון זעבו פיך, אַרסי ראַסעס. פֿאַר קאַנוויניאַנס, פּישעכץ סאַמפּאַלז זענען געזאמלט פרי אין דער מאָרגן בשעת די קאַוז זענען נאָך אין די שפּייַכלער. ינג באַגס (Toppits Cofresco, Frischhalteprodukte GmbH און Co., Minden, DE) אין 3 ל פּאַליאַמידע מיט דעקל אין וויינאַל קלאָרייד פּלאַסטיק דראַמז. העאַדספּאַסע וואַלאַטאַלז פון יעדער באָווין פּישעכץ מוסטער זענען געזאמלט אָדער גלייַך (פריש) אָדער נאָך מאַטשוריישאַן אין צימער טעמפּעראַטור פֿאַר 24 ה, 72 ה און 168 שעה פון יעדער פּישעכץ מוסטער.
פֿאַר כעדספּאַסע וואַלאַטאַלז זאַמלונג, אַ פארמאכט-שלייף סיסטעם איז געניצט צו סערקיאַלייט אַן אַקטיווייטיד טשאַד-פילטערד גאַז טייַך (100 מל מין-1) דורך אַ פּאָליאַמידע זעקל צו די אַדסאָרפּטיאָן זייַל פֿאַר 2.5 שעה דורך ניצן אַ דייאַפראַם וואַקוום פּאָמפּע (KNF Neuberger, Freiburg, DE). יד) מיט 35 מג פון פּאָראַפּאַק ק (50/80 מעש; וואַטערס אַססאָסיאַטעס, מילפאָרד, מאַ, יו. μl פון פּענטאַנע. העאַדספּאַסע זאַמלונגען זענען פּאָאָלד און דעמאָלט סטאָרד בייַ -20 ° C ביז געניצט פֿאַר ווייַטער אַנאַליסיס.
בעהאַוויאָראַל רעספּאָנסעס פון באַלעבאָס-זוכן און בלוט-עסן אַנ. העאַדספּאַסע וואַלאַטאַל עקסטראַקץ געזאמלט פון פריש, 24-ה, 72-ה, און 168-ה-אַלט פּישעכץ זענען אַנאַלייזד פֿאַר וואַלאַטאַל עקסטראַקץ פון אַראַבידאָפּסיס מאַסקיטאָוז ניצן אַ גלייַך גלאז רער אָלפאַקטאָמעטער [18]. [19] א גלאז רער אָלפאַקטאָמעטער (80 סענטימעטער × 9.5 סענטימעטער שייַן) איז ילומאַנייטאַד מיט 3 ± 1 לקס פון רויט ליכט פון אויבן. האָלצקוילן פילטערד און כיומידיד לופט לויפן (25 ± 2 °C, 65 ± 2% קאָרעוו הומידיטי) דורכגעגאנגען די ביאָאַסיי ביי 30 סענטימעטער פון שטאָל און אַ 30 סענטימעטער ס-לאמינער סקרין איז דורכגעגאנגען דורך אַ סעריע פון ​​​​שטאָל און 1 אַ שטייַלן. דענטאַל טאַמפּאָן דיספּענסער (4 סענטימעטער × 1 סענטימעטער; ל: ד; דאַב דענטאַל אַב), סוספּענדעד פון אַ 5 סענטימעטער שפּול אויף די ווינדווערד סוף פון די אָלפאַקטאָמעטער, מיט סטימולאַטאָר ענדערונגען יעדער 5 מינוט. אַקקינג מאַסקיטאָוז זענען געשטעלט אין יחיד מעלדונג קאַגעס 2-3 שעה איידער די אָנהייב פון דער עקספּערימענט. זענען רעפּליקייטיד בייַ מינדסטער 30 מאל, און צו ויסמיידן די יפעקץ פון איין טאָג, די זעלבע נומער פון טריטמאַנץ און קאָנטראָלס זענען טעסטעד אויף יעדער יקספּערמענאַל טאָג.
העאַדספּייס עקסטראַקץ פון פריש און אַלט קו פּישעכץ זענען אַנאַלייזד אין בוגדאָרם קאַגעס (30 סענטימעטער × 30 סענטימעטער × 30 סענטימעטער; MegaView Science). פּלאַסטיק טעפּלעך (30 מל; נאָלאַטאָ הערטילאַ) אָנגעפילט מיט 20 מל פון דיסטילד וואַסער צוגעשטעלט די ספּאַנינג סאַבסטרייט און זענען געשטעלט אין די אָפּטייל פון די קאַפע און זענען אַדזשאַסטיד אין די אָפּזעצערייַ סאַבסטרייט. מיט 10 μל פון יעדער העאַדספּאַסע עקסטראַקט אין אַ 1:10 דיילושאַן. אַן גלייַך סומע פון ​​​​פּענטיין איז געניצט צו סטרויערן די קאָנטראָל גלעזל. באַהאַנדלונג און קאָנטראָל טעפּלעך זענען פארביטן צווישן יעדער עקספּערימענט צו קאָנטראָלירן פֿאַר שטעלע ווירקונג. געלייגט אין די באַהאַנדלונג גלעזל - די נומער פון עגגס געלייגט אין די קאָנטראָל גלעזל) / (די גאַנץ נומער פון עגגס געלייגט). יעדער באַהאַנדלונג איז ריפּיטיד 8 מאל.
גאַז טשראָמאַטאָגראַפיק און עלעקטראָן אַנטענע מוסטער דיטעקשאַן (GC-EAD) אַנאַליסיס פון ווייַבלעך אַנ.אַראַביענסיס איז געווען דורכגעקאָכט ווי פריער דיסקרייבד [20]. בעקיצער, פריש העאַדספּאַסע וואַלאַטאַל עקסטראַקץ זענען אפגעשיידט ניצן אַ Agilent Technologies 6890 GC (Santa Clara, CA, US) יקוויפּט מיט אַ הפּ-5 זייַל (30 עם. ).און יידזשינג פּישעכץ. הידראָגען איז געניצט ווי די רירעוודיק פאַסע מיט אַ דורכשניטלעך לינעאַר לויפן קורס פון 45 סענטימעטער ס-1. יעדער מוסטער (2 μל) איז ינדזשעקטיד פֿאַר 30 סעקונדעס אין ספּליטלעסס מאָדע מיט אַ ינלעט טעמפּעראַטור פון 225 ° C. 4 פּסי פון ניטראָגען איז צוגעגעבן און שפּאַלטן 1:1 אין אַ Gerstel 3D/2 נידעריק טויט באַנד קרייַז (Gerstel, Mülheim, DE) צווישן די פלאַם ייאַנאַזיישאַן דעטעקטאָר און די EAD. כיומידיפיעד לופט (1.5 ל מין-1). די אַנטענע איז געווען געשטעלט 0.5 סענטימעטער פון די ווענטיל פון די רער.יעדער יחיד קאָמאַר אַקאַונאַד פֿאַר איין רעפּלאַקייט, און פֿאַר באַלעבאָס-זוכן מאַסקיטאָוז, בייַ מינדסטער דרייַ רעפּלאַקייטן זענען געטאן אויף פּישעכץ סאַמפּאַלז פון יעדער עלטער.
לעגיטימאַציע פון ​​ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז אין העאַדספּאַסע זאַמלונגען פון פריש און אַלט רינדערנס פּישעכץ מיט אַ קאַמביינד GC און מאַסע ספּעקטראָמעטער (GC-MS; 6890 GC און 5975 MS; Agilent Technologies) צו אַרויסלאָזן אַנטענעאַל רעספּאָנסעס אין GC-EAD אַנאַליסיס, אַפּערייטינג אין עלעקטראָן פּראַל ייאַנאַזיישאַן מאָדע ביי 70 HP 5975 eV. (60 עם × 0.25 מם ינער דיאַמעטער, 0.25 μם פילם גרעב) ניצן העליום ווי די רירעוודיק פאַסע מיט אַ דורכשניטלעך לינעאַר לויפן קורס פון 35 סענטימעטער s-1. א 2 μl מוסטער איז ינדזשעקטיד מיט די זעלבע ינדזשעקטער סעטטינגס און ויוון טעמפּעראַטור ווי פֿאַר די GC-EAD אַנאַליסיס. יידענאַפייד קאַמפּאַונדז זענען באשטעטיקט דורך ינדזשעקטינג עכט סטאַנדאַרדס (אַדדיטיאָנאַל טעקע 1: טאַבלע ס 2). פֿאַר קוואַנטאַפאַקיישאַן, העפּטיל אַסאַטייט (10 נג, 99.8% כעמיש ריינקייַט, Aldrich) איז ינדזשעקטיד ווי אַ פונדרויסנדיק נאָרמאַל.
אָפּשאַצן די עפיקאַסי פון אַ סינטעטיש רייעך געמיש וואָס באשטייט פון ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז יידענאַפייד אין פריש און אַלט פּישעכץ צו צוציען באַלעבאָס-זוכן און בלוט-זויגן אַנס.אַראַביענסיס, ניצן די זעלבע אָלפאַקטאָמעטער און פּראָטאָקאָל ווי אויבן. פֿאַר אַנאַליסיס, נוצן 10 μל פון אַ 1:100 דיילושאַן פון די גאָר סינטעטיש געמיש, מיט אַ קוילעלדיק מעלדונג קורס ריינדזשינג פון בעערעך 140-2400 ng ה-1, פֿאַר אַססעסס די אַטראַקטיוונאַס צו באַלעבאָס און בלוט-סאַקינג געמיש, וואָס איז דורכגעקאָכט אין די מאַסיוו און בלוט-סאַקינג געמיש. איין קאַמפּאַונדז פון די גאַנץ געמיש זענען אַוועקגענומען. זוכן רעספּאָנסעס פון באַלעבאָס און בלוט-פאסטעכער אַנס.אַראַב ווס סינטעטיש און סאַבטראַקטיוו מיקסטשערז זענען אַנאַלייזד ניצן נאָמינאַל לאָגיסטיק ראַגרעשאַן נאכגעגאנגען דורך פּאָרוויסע קאַמפּעראַסאַנז פֿאַר מאָדנע ריישיאָוז (דזשמפּ פּראָ, וו14.0.0, סאַס אינסטיטוט ינק.).
צו אַססעסס צי קו פּישעכץ קען דינען ווי אַ באַלעבאָס וווין קיו פֿאַר מאַלאַריאַ מאַסקיטאָוז, פריש און אַלט קו פּישעכץ, געזאמלט ווי דיסקרייבד אויבן, און וואַסער זענען געשטעלט אין מעשט 3 ל באַקאַץ (100 מל) און שטעלן אין באַלעבאָס לעקעכל טראַפּס.(BG-HDT ווערסיע; BioGents, Regensburg, DE). צען טראַפּס געשטעלט 50 עם באַזונדער אין פּאַסטשער, 400 עם פון דאָרף קהל (סילייַ, עטיאפיע, 5°53'24''N, 37°29'24''E) און קיין פיך, אויף שטענדיק ברידינג גראָונדס און דערפער. איז ראָוטייטיד נייטלי פֿאַר אַ גאַנץ פון פינף נעכט. קאָמאַר נומערן קאַפּטשערד אין טראַפּס בייטעד מיט פּישעכץ פון פאַרשידענע צייטן זענען קאַמפּערד מיט לאָגיסטיק ראַגרעשאַן מיט אַ ביתא בינאָמיאַל פאַרשפּרייטונג (דזשמפּ פּראָ, וו14.0.0, סאַס אינסטיטוט ינק.).
אין אַ מאַלאַריאַ-ענדעמיק דאָרף נעבן די שטאָט פון מאַקי, אָראָמיאַ געגנט, עטיאפיע (8° 11′ 08″ N, 38° 81′ 70″ E; פיגורע 6A). די לערנען איז געווען געפירט צווישן מיטן אויגוסט און מיטן סעפטעמבער איידער די יערלעך דרינענדיק ריזידזשואַל ספּרייינג, צוזאמען מיט אַ 0 מ' באַזונדער הויז אויף די 50 מיז באַזונדער הויז. אַוצקערץ פון דעם דאָרף זענען אויסגעקליבן פֿאַר די לערנען (פיג. 6 א). די קרייטיריאַ געניצט צו אויסקלייַבן די הייזער זענען געווען: קיין אַנימאַלס ערלויבט אין די הויז, קיין דרינענדיק קוקינג (צייכענען ברענהאָלץ אָדער האָלצקוילן) איז ערלויבט (לפּחות בעשאַס די פּראָצעס צייַט), און הייזער מיט אַ מאַקסימום פון צוויי באוווינער, סליפּינג אין ונינסעקטאַסיידז.אונטער די באהאנדלט קאָמאַר נעץ.עטישע האַסקאָמע איז געגעבן געווארן דורך די ינסטיטוטיאָנאַל פאָרשונג עטיקס איבערבליק באָרד (IRB/022/2016) פון די פאַקולטי פון נאַטוראַל ססיענסעס (CNS-IRB), אַדיס אַבאַבאַ אוניווערסיטעט, לויט די גיידליינז געגרינדעט דורך די וועלט מעדיקאַל אַססאָסיאַטיאָן דעקלאַראַציע פון ​​העלסינקי. די צושטימען פון יעדער קאָפּ פון געזונט אַדמיניסטראַציע איז באקומען דורך די היגע אַדמיניסטראַטיאָן פּראַסעסאַז מיט די היגע פאַרלענגערונג פּראַסעסאַז. די יקספּערמענאַל פּלאַן איז נאכגעגאנגען אַ 2 × 2 לאַטייַן קוואַדראַט פּלאַן, אין וואָס סינטעטיש מיקסטשערז און קאָנטראָלס זענען אַסיינד צו פּערד הייזער אין דער ערשטער נאַכט און סוואַפּט צווישן הייזער אין דער ווייַטער יקספּערמענאַל נאַכט.
א סינטעטיש געמיש מיט זעקס ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז איז צעלאָזן אין העפּטאַן (97.0% סאַלוואַנט גק מיינונג, Sigma Aldrich) און באפרייט אין 140 ng ה-1 מיט אַ וואַטע וויק דיספּענסער [20]. קאָנטראָל און פּרעווענטיאָן (CDC) ליכט טראַפּ (John W. Hock Company, Gainesville, FL, USA; Figure 6A). די טראַפּס זענען געהאנגען 0.8 - 1 עם אויבן דער ערד, לעבן די פֿיס פון די בעט, און אַ פרייַוויליקער סלעפּט אונטער אַן אַנטריטיד קאָמאַר נעץ און אַפּערייטאַד צווישן 18:00 און 06:30. , און שוואַנגער [21] זענען דערנאָך סקרינד ניצן פּאָלימעראַסע קייט רעאַקציע (PCR) אַנאַליסיס צו ידענטיפיצירן די מינים מאָרפאָלאָגיקאַללי יידענאַפייד ווי A. gambiae סל מיטגלידער פון דעם קאָמפּלעקס [23]. אין די פעלד לערנען, טראַפּ טראַפּינג פון פּערד הייזער איז אַנאַלייזד ניצן אַ נאָמינאַל לאָגיסטיק פּאַסיק מאָדעל, ווו אַטראַקשאַן איז געווען די אָפענגיק וועריאַבאַל און באַהאַנדלונג (סינטעטיק יפעקטיוו 4).0. סאַס אינסטיטוט ינק.).דאָ, מיר באַריכט די χ2 און p-וואַלועס פון די ליקעליהאָאָד פאַרהעלטעניש פּראָבע.
אָפּשאַצן צי עס איז סאַפע. אַראַביענסיס איז ביכולת צו קריגן פּישעכץ, זייַן הויפּט ניטראָגען מקור, ורעאַ, דורך דירעקט פידינג, ין 48 שעה פון אַדמיניסטראַציע פֿאַר 4 טעג נאָך (דפּע) באַלעבאָס-זוכן און בלוט-פאסטעכער ווייַבלעך פידינג טריאַלס (פיגורע 1אַ). 0.0001 און F(5,299) = 56.00, פּ <0.0001, ריספּעקטיוולי; Fig. 1B,C). דערצו, באַלעבאָס-זוכט פימיילז געגעסן ווייניקער אין פּישעכץ אין 72 שעה קאַמפּערד צו פּישעכץ אין 168 שעה (Fig. 1B). קאַמפּערד מיט אַלע אנדערע קאַנסאַנטריישאַנז און וואַסער, כאָטש ניט אַנדערש פון 10% סוקראָוס (F(10,813) = 15.72, פּ <0.0001; פיגורע 1D). דאָס איז געווען אין קאַנטראַסט צו דער ענטפער פון בלוט-פאסטעכער פימיילז, וואָס טיפּיקלי אַבזאָרבד באטייטיק מער ורעאַ-מיט דיייץ ווי 5,71% ווייניקער ווי וואַסער (71% סוקראָסע). 5, p < 0.0001; פיגור 1).1E). דערצו, ווען קאַמפּערינג צווישן די צוויי פיזיאַלאַדזשיקאַל שטאַטן, פלעבאָטאָמיזעד פימיילז אַבזאָרבד מער ורעאַ ווי באַלעבאָס-זוכט פימיילז אין די לאָואַסט קאַנסאַנטריישאַנז, און די פימיילז אַבזאָרבד ענלעך אַמאַונץ פון ורעאַ אין העכער קאַנסאַנטריישאַנז (F(1,953)= 0,08;Fig. 1F, G). בשעת ינטייק פון אַ ורעאַ-מיט דיעטע איז געווען אָפּטימאַל וואַלועס (Fig. 1D,E), פימיילז אין ביידע פיזיאַלאַדזשיקאַל שטאַטן זענען ביכולת צו מאָדולירן די סומע פון ​​ורעאַ אַבזאָרבד איבער די גאנצע קייט פון ורעאַ קאַנסאַנטריישאַנז אין אַ לאָג-לינעאַר מאָדע (Fig. 1F,G).). סימילאַרלי, מאַסקיטאָוז דערשייַנען צו קאָנטראָלירן זייער ניטראָגען אַפּטייק דורך רעגיאַלייטינג די סומע פון ​​פּישעכץ אַבזאָרבד, ווי די סומע פון ​​ניטראָגען אין פּישעכץ איז שפיגלט אין די סומע אַבזאָרבד (פיגורע 1 ב, C און ב ינסעץ).
צו אַססעסס די ווירקונג פון פּישעכץ און ורעאַ אויף באַלעבאָס-זוכן און בלוט-סאַקינג קאָמאַר ניצל, פימיילז זענען געפֿיטערט פּישעכץ פון אַלע פיר צייטן (פריש, 24 שעה, 72 שעה, און 168 שעה נאָך דעפּאַזישאַן) און אַ קייט פון ורעאַ קאַנסאַנטריישאַנז, ווי געזונט ווי דיסטילד וואַסער און 10% סוקראָוס האט געדינט ווי אַ באַטייטיק ווירקונג אויף 2 אַ קאָנטראָל. וויוואַל אין האָסט-זוכט פימיילז (פּישעכץ: χ2 = 108.5, דף = 5, פּ <0.0001; ורעאַ: χ2 = 122.8, דף = 5, פּ <0.0001; פיגור. 2 ב, C) און בלוט-פאסטעכער פימיילז (פּישעכץ: χ.02, ד = 0.02, ד = 9.02, ד. χ2 = 137.9, df = 5, p <0.0001; פיגור 2D,E). אין אַלע יקספּעראַמאַנץ, פימיילז פאסטעכער אַ דיעטע פון ​​פּישעכץ, ורעאַ, און וואַסער האט באטייטיק נידעריקער ניצל ראַטעס קאַמפּערד מיט פימיילז פעד אַ סוקראָוס דיעטע (פיגורע 2B-E). ה אַלט - געבאַקן פּישעכץ (פּ = 0.016) מיט די לאָואַסט ניצל מאַשמאָעס (פיגורע 2 ב). דערצו, באַלעבאָס-זוכט פימיילז פאסטעכער 135 מם ורעאַ סערווייווד מער ווי וואַסער קאָנטראָלס (פּ <0.04) (Fig.2C). קאַמפּערד מיט וואַסער, פרויען פאסטעכער מיט פריש פּישעכץ און 24-שעה פּישעכץ סערווייווד מער (פּ = 0.001 און פּ = 0.012, ריספּעקטיוולי; פיגורע 2 ד), בשעת וואָמען פאסטעכער מיט 72-שעה פּישעכץ סערווייווד מער ווי יענע פאסטעכער ווייַבלעך קורץ פריש פּישעכץ און 24-שעה < 0,0 פיגורע פּישעכץ = 0,0 פּישעכץ. e 2D). ווען פאסטעכער 135 מם ורעאַ, בלוט-פאסטעכער פימיילז סערווייווד מער ווי אַלע אנדערע קאַנסאַנטריישאַנז פון ורעאַ און וואַסער (פּ <0.013; פיגורע 2E).
ניצל פון באַלעבאָס און בלוט-סאַקינג ווייַבלעך Anopheles arabinis פידינג אויף קו פּישעכץ און ורעאַ. אין די ביאָאַסיי (א), ווייַבלעך מאַסקיטאָוז זענען צוגעשטעלט אַ דיעטע וואָס באשטייט פון פריש און אַלט קו פּישעכץ, פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז פון ורעאַ, סוקראָוס (10%) און דיסטילד וואַסער (H2O). 2 שעה ביז אַלע פימיילז פעד מיט פּישעכץ (ב, ד) און ורעאַ (C, E), און קאָנטראָלס, סוקראָוס און וואַסער, זענען טויט
די גאַנץ דיסטאַנסע און נומער פון ראָונדס באשלאסן אין די פלי מיל פּרובירן איבער אַ 24-שעה פּעריאָד דיפערד צווישן באַלעבאָס-זוכן און בלוט-סאַקינג מאַסקיטאָוז, וואָס געוויזן ווייניקער פלי טעטיקייט קוילעלדיק (פיגורע 3). 4- און 168-שעה אַלט מאַסקיטאָוז וואָס געפֿיטערט מיט פּישעכץ יגזיבאַטאַד פאַרשידענע פלי פּאַטערנז און זענען בפֿרט טעגלעך. ווייַבלעך מאַסקיטאָוז וואָס צוגעשטעלט סוקראָוס אָדער 72-שעה פּישעכץ געוויזן טעטיקייט איבער די 24-שעה צייַט, בשעת פרויען וואָס האָבן צוגעשטעלט וואַסער זענען מער אַקטיוו אין די מיטן צייַט. 72-שעה-אַלט פּישעכץ יקספּיריאַנסט אַ פעסט אַראָפּגיין אין טעטיקייט איבער 24 שעה (פיגורע 3).
פלי פאָרשטעלונג פון יעגער-זוכט בלוט-סאַקינג ווייַבלעך Anopheles arabinis פידינג אויף קו פּישעכץ און ורעאַ. אין די פלי מיל פּרובירן, ווייַבלעך מאַסקיטאָוז געפֿיטערט אויף פריש און אַלט קו פּישעכץ, פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז פון ורעאַ, סוקראָוס (10%), און דיסטילד וואַסער (H2O) זענען אַטאַטשט צו האָריזאָנטאַל, פרילי ראָוטייטינג אָרעם (זען די האָריזאָנטאַל, פרילי ראָוטייטינג אָרעם). , די גאַנץ דיסטאַנסע און נומער פון פלייץ פּער שעה פֿאַר יעדער דיעטע איבער אַ 24-שעה צייַט זענען רעקאָרדעד (פינצטער: גרוי; ליכט: ווייַס). דורכשניטלעך ווייַטקייט און דורכשניטלעך נומער פון באַוץ זענען געוויזן צו די רעכט פון די סערקאַדיאַן טעטיקייט גראַפיק. טעות באַרס רעפּראַזענץ נאָרמאַל טעות פון די מיטל.
אין אַלגעמיין, די קוילעלדיק פלי טעטיקייט פון באַלעבאָס-זוכט פימיילז נאכגעגאנגען אַ מוסטער ענלעך צו די פלי דיסטאַנסע איבער אַ 24-שעה פּעריאָד. די דורכשניטלעך פלי דיסטאַנסע איז געווען באטייטיק אַפעקטאַד דורך דיעטע ינדזשעסטיד (F (5, 138) = 28.27, p <0.0001), און באַלעבאָס-זוכט פימיילז ינדזשעסטאַד 72 שעה פון פּישעכץ און פיל מער דיסטאַנסאַז פון פּישעכץ (0-0) קאַמפּערד צו אַלע אנדערע דיסטאַנסאַז פון פּישעכץ (0-0). געפֿיטערט מאַסקיטאָוז פלו מער ווי פריש (פּ = 0.022) און 24-ה-אַלט פּישעכץ (פּ = 0.022)-פאסטעכער מאַסקיטאָוז. אין קאַנטראַסט צו די פלי טעטיקייט מוסטער דיסקרייבד דורך די פּישעכץ דיעטע, ורעאַ-פאסטעכער באַלעבאָס-זוכן פימיילז יגזיבאַטאַד פּערסיסטענט פלי טעטיקייט איבער אַ 24-ה-געפיטערט פלי אַקטיוויטעט אין די רגע פאַסע פון ​​​​די רגע-העפטן 3-טה פּעריאָד. זוכן פימיילז פעד ורעאַ באטייטיק געוואקסן דורכשניטלעך פלי דיסטאַנסע דיפּענדינג אויף די אַבזאָרבד קאַנסאַנטריישאַן (F (5, 138) = 1310.91, פּ <0.0001). האָסט-זוכט פימיילז פאסטעכער קיין קאַנסאַנטריישאַן פון ורעאַ פלו מער ווי פימיילז פעד אָדער וואַסער אָדער סוקראָוס (פּ <0.03).
קוילעלדיק פלי טעטיקייט פון בלוט-סאַקינג מאַסקיטאָוז איז געווען סטאַביל און סוסטאַינעד איבער 24 שעה איבער אַלע דיייץ, מיט געוואקסן פּישעכץ טעטיקייט אין דער צווייטער העלפט פון דער פינצטער צייט פֿאַר פימיילז געפֿיטערט מיט וואַסער ווי געזונט ווי אין פימיילז פאסטעכער פריש און 24 שעה אַלט (בילד 3). ה האט נישט (F(5, 138) = 1.36, פּ = 0.24) .מיט אנדערע פּישעכץ און קאָנטראָל דיעטע (פריש, פּ = 0.0091; 72 שעה, פּ = 0.0022; 168 שעה, פּ = 0.001; סוקראָוס, פּ = 0.0017, .ד.ה = 0.0017, .ד.
די יפעקץ פון פּישעכץ און ורעאַ פידינג אויף רעפּראָדוקטיווע פּאַראַמעטערס זענען אַססעססעד אין יי-ארויפלייגן ביאָאַססיז (פיגורע 4 א) און זענען ינוועסטאַגייטאַד לויט די נומער פון עגגס געלייגט דורך יעדער ווייַבלעך, יי גרייס, און ניי כאַטשט ערשטער ינסטאַר לאַרווי. די נומער פון עגגס געלייגט. 4 ב). פעמאַלעס פאסטעכער אַ 24-שעה פּישעכץ, בלוט מאָלצייַט געלייגט באטייטיק מער עגגס ווי פימיילז פאסטעכער אנדערע פּישעכץ דיייץ און זענען ענלעך צו יענע פאסטעכער סוקראָוס (Fig. 4B). פעד פימיילז ארויפלייגן באטייטיק גרעסערע עגגס ווי וואַסער-פאסטעכער פימיילז, בשעת די עגגס פון פימיילז פאסטעכער מיט 168 ה פון פּישעכץ זענען באטייטיק קלענערער (פיגורע 4C). אין דערצו, פּישעכץ דיעטע באטייטיק אַפעקטאַד די לאַרוואַל גרייס (F(5, 187) = 7.86, פּ <0.0001, מיט 0.0001 יי - 4 לאַרוואַ און 2. אַלט פּישעכץ-פאסטעכער פימיילז ווי פון עגגס געלייגט פון עגגס לאַרווי. וואַסער-פאסטעכער און 168-ה פּישעכץ-פאסטעכער פימיילז (פיגורע 4 ד).
רעפּראָדוקטיווע פאָרשטעלונג פון ווייַבלעך Anopheles arabinis פידינג אויף קו פּישעכץ און ורעאַ. בלוט-פאסטעכער ווייַבלעך מאַסקיטאָוז זענען פאסטעכער דיייץ קאַנסיסטינג פון פריש און אַלט קו פּישעכץ, פאַרשידן קאַנסאַנטריישאַנז פון ורעאַ, סוקראָוס (10%), און דיסטילד וואַסער (ה 2 אָ) פֿאַר 48 שעה איידער פּלייסינג אין ביאָ-אַסייסאַז (עגג סיזעס, עגג, 8 שעה, א, ב). , F) און לאַרווי גרייס (ד, ג) זענען באטייטיק אַפעקטאַד דורך די צוגעשטעלט דיעטע (קו פּישעכץ: בד; ורעאַ: ע.ג.). מיטל פֿאַר יעדער פּאַראַמעטער געמאסטן מיט פאַרשידענע אותיות נעמען זענען באטייטיק אַנדערש פון יעדער אנדערער (איין-וועג ANOVA ניצן Tukey ס פּאָסט האָק אַנאַליסיס; פּ <0.05). טעות באַרס פאָרשטעלן נאָרמאַל טעות פון די מיטל.
ווי דער הויפּט ניטראָגענאָוס קאָמפּאָנענט פון פּישעכץ, ורעאַ, ווען צוגעשטעלט ווי אַ דיעטע צו בלוט-פאסטעכער פימיילז, באטייטיק אַפעקטאַד רעפּראָדוקטיווע פּאַראַמעטערס אין אַלע שטודיום. די נומער פון עגגס געלייגט דורך פימיילז געפֿיטערט ורעאַ, נאָך אַ בלוט מאָלצייַט, דיפּענדינג אויף ורעאַ קאַנסאַנטריישאַן (F(11, 360) = 4.69; p <0.00 ווייבערשע קאַנסאַנטריישאַן צווישן 1 און 0.00 ווייַבלעך. 34 מם געלייגט מער עגגס (פיגורע 4E). פעמאַלעס פאסטעכער מיט ורעאַ קאַנסאַנטריישאַנז פון 134 μM אָדער העכער לייגן גרעסערע עגגס ווי פימיילז געפֿיטערט אויף וואַסער (F(10, 4245) = 36.7; p <0.0001; פיגורע 4F), און לאַרוואַל גרייס פון (30 ף קאַנסאַנטריישאַן, כאָטש אַפעקטאַד דורך 30 ף. ; פּ <0.0001) איז געווען מער בייַטעוודיק (פיגורע 4 ג).
קוילעלדיק אַטראַקטיוונאַס צו באַלעבאָס-זוכן באָווין פּישעכץ כעדספּייס וואַלאַטאַל עקסטראַקץ. די אַראַביענסיס אַססעססעד אין די גלאז רער אָלפאַקטאָמעטער (Fig. 5A) איז באטייטיק אַפעקטאַד דורך פּישעכץ עלטער (χ2 = 15.9, DF = 4, p = 0.0032; Fig. 5B. קאַמפּערד מיט אַלע אנדערע טריטמאַנץ (72 שעה: פּ = 0.0060, 168 שעה: פּ = 0.012, פּענטיין: פּ = 0.00070), אַחוץ פֿאַר דער שמעקן פון פריש פּישעכץ (פּ = 0.13; פיגורע 5 ב). 0.067; פיגורע 5 ק), די פימיילז זענען געווען באטייטיק מער אַטראַקטיוו צו כעדספּייס וואַלאַטאַל עקסטראַקץ קאַמפּערד מיט 72-שעה אַלט פּישעכץ קאַמפּערד צו קאָנטראָלס (פּ = 0.0066; פיגורע 5 ק).
בעהאַוויאָראַל רעספּאָנסעס צו נאַטירלעך און סינטעטיש קו פּישעכץ אָודערז אין דער זוכן פֿאַר באַלעבאָס און בלוט-פאסטעכער Anopheles arabianus. סכעמאַטיש פון די גלאז רער אָלפאַקטאָמעטער (א). אַטראַקשאַן פון העאַדספּאַסע וואַלאַטאַל עקסטראַקט פון פריש און אַלט קו פּישעכץ צו באַלעבאָס (ב) און בלוט-סאַקינג (C) מאַסקיטאָוז. -שעה (E), 72-שעה (F), און 168-שעה (ג) אַלט קו פּישעכץ זענען געוויזן. עלעקטראָן אַנטענע דיטעקשאַן (EAD) טראַסעס ווייַזן וואָולטידזש ענדערונגען אין ענטפער צו ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז אין די העאַדספּאַסע ילוטאַד פון די גאַז קראָומאַטאַגראַף און דיטעקטאַד דורך אַ פלאַם ייאַנאַזיישאַן דעטעקטאָר (FID) רעפּריזענטינג רעספּאָנסעס וואָג (FID). s (µg h-1) פון די בייאַלאַדזשיקלי אַקטיוו קאַמפּאַונדז זענען געוויזן. א איין אַסטעריסק (*) ינדיקייץ אַ קאָנסיסטענט נידעריק-אַמפּליטוד ענטפער.טאָפּל אַסטעריסק (**) אָנווייַזן אַנרעפּראָדוסיבלע רעספּאָנסעס. יעדער אנדערער (איין-וועג ANOVA ניצן Tukey ס פּאָסטן-האָק אַנאַליסיס;פּ <0.05). טעות באַרס פאָרשטעלן נאָרמאַל טעות פון די וואָג
ווייַבלעך Ann.arabiensis, 72 ה און 120 ה נאָך בלוט מאָלצייַט, בעשאַס ספּאַנינג, קיין ייבערהאַנט איז געוויזן פֿאַר העאַדספּאַסע וואַלאַטאַל אויסצוגן פון פריש און אַלט קו פּישעכץ קאַמפּערד מיט פּענטיין קאָנטראָלס (χ2 = 3.07, פּ> 0.05; נאָך טעקע 1: פיגור ס 1).
פֿאַר ווייַבלעך Ann.arabiensis, GC-EAD און GC-MS אַנאַליזעס יידענאַפייד אַכט, זעקס, דריי און דריי ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז (פיגורע 5D-G). די שוועל זענען אַרייַנגערעכנט אין ווייַטער אַנאַליזעס.
די גאַנץ וואַלאַטאַל מעלדונג קורס פון ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז אין די העאַדספּאַסע זאַמלונג געוואקסן פון 29 μג ה-1 אין פריש פּישעכץ צו 242 μג ה-1 אין 168-שעה אַלט פּישעכץ, דער הויפּט רעכט צו פ-קרעסאָל און מ-פאָרמאַלדאַכייד פענאָל ינקריסאַז און פענאָל. עלטער, וואָס קאָראַלייטאַד מיט די באמערקט פאַרקלענערן אין סיגנאַל ינטענסיטי (זעה) אין די טשראָמאַטאָגראַם (Fig. 5D)-G לינקס טאַפליע) און פיזיאַלאַדזשיקאַל רעספּאָנסעס צו די קאַמפּאַונדז (Fig. 5D-G רעכט טאַפליע).
קוילעלדיק, די סינטעטיש געמיש האט אַ ענלעך נאַטירלעך פאַרהעלטעניש פון ביאָאַקטיווע קאַמפּאַונדז יידענאַפייד אין וואַלאַטאַל עקסטראַקץ פון פריש און אַלט פּישעכץ העאַדספּייסאַז (פיגורע 5 ד-ג) און האט נישט דערשייַנען צו אַרויסלאָזן באַטייַטיק אַפּעלירן אין דער זוכן פֿאַר אַ באַלעבאָס (χ2 = 8.15, דף = 4, פּ = 0.083; Fig. = 0.30; Fig. 5I) אָבער, פּאָסט-האָק פּאָרוויסע קאַמפּעראַסאַנז צווישן טריטמאַנץ געוויזן אַז באַלעבאָס-זוכן מאַסקיטאָוז זענען באטייטיק אַטראַקטיוו צו די סינטעטיש געמיש פון 24-ה אַלט פּישעכץ קאַמפּערד מיט פּענטיין קאָנטראָלס (פּ = 0.0086; פיגורע 5 ה).
צו אַססעסס די ראָלע פון ​​יחיד קאַמפּאָונאַנץ אין סינטעטיש מיקסטשערז פון 24-ה-אַלט פּישעכץ, זעקס סאַבטראַקטיוו מיקסטשערז זענען עוואַלואַטעד קעגן גאַנץ מיקסטשערז אין די י-רער אַסאַסי, אין וואָס יחיד קאַמפּאַונדז זענען אַוועקגענומען. אין קאַנטראַסט, באַזייַטיקונג פון יחיד קאַמפּאַונדז פון די גאָר סינטעטיש געמיש האט נישט ווירקן די ביכייוויעראַל רעספּאָנסעס פון בלוט-סאַקינג מאַסקיטאָוז (χ2 = 11.38, df = 6, p = 0.077), מיט די ויסנעם פון דעקאַנאַל לעוועלס, וואָס ריזאַלטיד צו די 2 אַטטראַקטיאָן שטאַפּל פון 2 אַטטראַקטיאָן מיט די 2 0 פיגור. ב).
אין אַ מאַלאַריאַ-ענדעמיק דאָרף אין עטיאפיע, די עפיקאַסי פון אַ סינטעטיש געמיש פון 24-שעה קו פּישעכץ אין אַטראַקטינג מאַסקיטאָוז אונטער פעלד טנאָים איז עוואַלואַטעד פֿאַר צען נעכט (פיג. 6 א). א גאַנץ פון 4,861 מאַסקיטאָוז זענען קאַפּטשערד און יידענאַפייד, פון וואָס 45.7% זענען אַנגאַמביע. .4% זענען Culex spp.(Additional file 1: Table S1). Anopheles arabinis איז דער בלויז מיטגליד פון An.Gambian מינים קאָמפּלעקס יידענאַפייד דורך פּקר אַנאַליסיס. אין דורכשניטלעך, 320 מאַסקיטאָוז זענען קאַפּטשערד פּער נאַכט, בעשאַס וואָס מאָל טראַפּס מיט סינטעטיש געמיש בייץ געכאפט מער מאַסקיטאָוז ווי פּערד טראַפּס אָן געמיש (0,012,0,0,0,09) = 0,012. ניט-בייטיד טראַפּס זענען שטעלן אויף יעדער פון די פינף קאָנטראָל נעכט אין די אָנהייב, מיטן, און סוף פון די פּראָצעס. געכאפט אין די טראַפּס מיט די סינטעטיש געמיש איז באטייטיק געוואקסן: באַלעבאָס זוכן (χ2 (0, 2107) = 138.7, פּ <0.0001), לעצטע בלוט פידינג (χ2 (0, 650) = 32.2, פּ <0.0001) און שוואַנגערשאַפט (χ2 (0.0001) און שוואַנגערשאַפט (χ2 (0, 2.0, 0, 2. 0, 0, 2. 0; 0, 2. 0;נאָך טעקע 1: טאַבלע ס 1). דאָס איז אויך שפיגלט אין די גאַנץ נומער פון מאַסקיטאָוז קאַפּטשערד: באַלעבאָס זוכן > בלאָאָדסוקקינג > שוואַנגער > האַלב-שוואַנגער > זכר.
פעלד אפשאצונג פון די עפיקאַסי פון אַ 24-שעה סינטעטיש קו פּישעכץ רייעך געמיש. פעלד טריאַלס זענען דורכגעקאָכט אין דרום-צענטראל עטיאפיע (מאַפּע), לעבן די שטאָט פון מאַקי (אַרייַנלייגן), ניצן אַ סענטערס פֿאַר דיסעאַסע קאָנטראָל (CDC) ליכט טראַפּ (רעכט) אין פּערד הייזער, מיט אַ לאַטייַן קוואַדראַט פּלאַן (לופט בילד אַטראַקשאַן) און פאָטאָ-ראַפּאַטורע אַטראַקשאַן. בעסקוועס (ב), אָבער ניט Anopheles farroes (C), אין אַ אַנדערש שטייגער, אַ פיזיאַלאַדזשיקאַל שטאַט-אָפענגיק ווירקונג. אין דערצו, די טראַפּס קאַפּטשערד באטייטיק געוואקסן נומערן פון די באַלעבאָס קולעקס מאַסקיטאָוז. (ד) קאַמפּערד מיט קאָנטראָל. אינדעקס אין פּערז פון קאָנטראָל טראַפּס (עפענען; N = 5).).אַסטעריסק אָנווייַזן סטאַטיסטיש באַטייַט לעוועלס (*p = 0.01 און ***p <0.0001)
די דריי מינים זענען קאַפּטשערד דיפערענטלי אין טראַפּס מיט סינטעטיש מיקסטשערז. איר זוכט פֿאַר באַלעבאָס (χ2(1, 1345) = 71.7, פּ <0.0001), בלוט פידינג (χ2(1, 517) = 16.7, פּ <0.0001) און שוואַנגערשאַפט (χ12,01, 0.01) = χ12,0. .arabiensis איז געווען טראַפּט אין די טראַפּ ריליסינג די סינטעטיש געמיש (Fig. 6B), בשעת די סומע פון ​​An האט נישט דיפערד. Pharoensis אין פאַרשידענע פיזיאַלאַדזשיקאַל שטאַטן זענען געפונען (Fig. 6C). פֿאַר קולעקס, בלויז אַ באַטייַטיק פאַרגרעסערן אין די נומער פון מאַסקיטאָוז זוכן מחנות איז געפונען אין טראַפּס בייטעד מיט די סינטעטיש געמיש, χ. 6 ד), קאַמפּערד מיט קאָנטראָל טראַפּס.
האָסט לעקעכל טראַפּס ליגן אַרויס פון פּאָטענציעל מחנות צווישן ברידינג זייטלעך און דאָרפיש קהילות אין עטיאפיע זענען געניצט צו אַססעסס צי מאַלאַריאַ מאַסקיטאָוז נוצן קו פּישעכץ רייעך ווי אַ באַלעבאָס וווין קיו. אַריאַ מאַסקיטאָוז זענען געצויגן און קאַפּטשערד, כאָטש אין קליין נומערן, אומאָפּהענגיק פון פּישעכץ עלטער (χ2 (5, 25) = 2.29, p = 0.13; נאָך טעקע 1: פיגורע S3).
מאַלאַריאַ מאַסקיטאָוז קריגן און פאַרשפּרייטן ניטראָגען-מיט קאַמפּאַונדז דורך קאַמפּענסאַטאָרי פידינג אויף קו פּישעכץ (ד"ה פּאַדאַלז) צו פאַרבעסערן לעבן-געשיכטע טרייץ, ענלעך צו אנדערע ינסעקץ [2, 4, 24, 25, 26]. קו פּישעכץ איז אַ גרינג בנימצא רינואַבאַל מיטל וואָס איז ענג פֿאַרבונדן מיט מאַלאַריאַ און הויכע ערטער ווי מאַלאַריאַ און הויכע ערטער ווי מאַלאַריאַ און ספּאַ. ווייַבלעך מאַסקיטאָוז געפינען דעם מיטל דורך שמעקן און זענען ביכולת צו רעגולירן די אַפּטייק פון ניטראָגענאָוס קאַמפּאַונדז אין פּישעכץ, אַרייַנגערעכנט ורעאַ, די הויפּט ניטראָגענאָוס קאָמפּאָנענט אין פּישעכץ [15, 16]. טשאַראַקטעריסטיקס פון בלוט-פאסטעכער מענטשן בעשאַס דער ערשטער גאָנאַדאָטראָפּיק ציקל. דעריבער, פּישעכץ מיקסינג פיעסעס אַ וויכטיק נוטרישאַנאַל ראָלע פֿאַר מאַלאַריאַ וועקטאָרס וואָס זענען פארמאכט ווי מאַלנערישט אַדאַלץ [8], ווייַל עס גיט ווייַבלעך מאַסקיטאָוז די פיייקייט צו קריגן וויכטיק ניטראָגענאָוס קאַמפּאַונדז דורך אָנטייל נעמען אין נידעריק-ריזיקירן פידינג. דערצו, דעם נאַטור קען זיין דער ציל פון צוקונפֿט וועקטאָר פאַרוואַלטונג מגילה.