דזשאַוואַסקריפּט איז דערווייַל פאַרקריפּלט אין דיין בלעטערער. עטלעכע פֿעיִקייטן פון דעם וועבזייטל וועט נישט אַרבעטן ווען דזשאַוואַסקריפּט איז פאַרקריפּלט.
פאַרשרייַבן מיט דיין ספּעציפיש דעטאַילס און ספּעציפיש מעדיצין פון אינטערעס, און מיר וועלן גלייַכן די אינפֿאָרמאַציע איר צושטעלן מיט אַרטיקלען אין אונדזער ברייט דאַטאַבייס און גלייך בליצפּאָסט איר אַ פּדף קאָפּיע.
סטעלאַ S, Vitale SR, Martorana F, Massimino M, Pavone G, Lanzafame K, Bianca S, Barone C, Gorgone C, Fichera M, Manzella L
Stefania Stella, 1,2 Silvia Rita Vitale, 1,2 Federica Martorana, 1,2 Michele Massimino, 1,2 Giuliana Pavone, 3 Katia Lanzafame, 3 Sebastiano Bianca, 4 Chiara Barone, 5 Cristina Gorgone, 6 Marco Fichera, 6, 7 Livia Manzella University, Catzella and Exhibition of C1lin. 95123, איטאליע; 2 צענטער פֿאַר עקספּערימענטאַל אָנקאָלאָגי און העמאַטאָלאָגי, AOU Poliklinico "G.Rodolico - San Marco", Catania, 95123, איטאליע;3 מעדיציניש אָנקאָלאָגי, אַאָו פּאָליקליניקאָו "G.ראָדאָליקאָ - סאַן מאַרקאָ", קאַטאַניאַ, 95123, איטאליע;4 מעדיציניש גענעטיקס, ARNAS Garibaldi, Catania, 95123, איטאליע;5 מעדיצין גענעטיקס, אַספּ, סיראַקוסע, 96100, איטאליע;6 דעפּאַרטמענט פון ביאָמעדיקאַל און ביאָטעטשנאָלאָגי ססיענסעס, אוניווערסיטעט פון קאַטאַניאַ, מעדיציניש גענעטיקס, קאַטאַניאַ, איטאליע, 95123;7Oasi Research Institute-IRCCS, טראָינאַ, 94018, איטאליע קאָמוניקאַציע: Stefania Stella, TEL +39 095 378 1946, E- בריוו [עמאַיל פּראָטעקטעד];[עמאַיל פּראָטעקטעד] ציל: גערמלינע מיוטיישאַנז אין BRCA1 און BRCA2 און געגרינדעט ברוסט ראַק (BC), אָוווערי (אָק) און אנדערע פֿאַרבונדן מיט אַ לעבן ריזיקירן פון ראַק. טעסטינג פֿאַר די BRCA דזשין איז שליסל צו אַססעסס יחיד ריזיקירן, ווי געזונט ווי צו געפֿינען פאַרהיטונג מעטהאָדס אין געזונט קאַריערז און טיילערינג טריטמאַנץ אין ראַק פּאַטיענץ. דער ציל פון אונדזער לערנען איז געווען צו ויספאָרשן די ינסידאַנס און פאַרשפּרייטונג פון BRCA פּאַטאַדזשעניק גערמלינע אָלטעריישאַנז אין אַ קאָהאָרט פון BC פּאַטיענץ פון מזרח סיסילי און צו אַססעסס זייער פאַרבאַנד מיט ספּעציפיש BC טרייץ ניצן ווייַטער-דור סיקוואַנסינג מיט אָלטערנאַטיוו גריידינג און די בייַזייַן פון אָלטערנאַטיוו אינדעקס. 35 פּאַטיענץ (9%) האָבן אַ ברקאַ פּאַטאַדזשעניק וואַריאַנט, 17 (49%) אין BRCA1 און 18 (51%) אין BRCA2.BRCA1 אָלטעריישאַנז זענען פאַרשפּרייט אין דרייַיק-נעגאַטיוו BC פּאַטיענץ, כאָטש BRCA2 מיוטיישאַנז זענען מער געוויינטלעך אין לומינאַל BC פּאַטיענץ. מיוטיישאַנאַל סטאַטוס אין BC פּאַטיענץ פון מזרח סיסילי און באַשטעטיקן די ראָלע פון ​​NGS אַנאַליסיס אין ידענטיפיינג פּאַטיענץ מיט יערושעדיק BC.Overall, די דאַטן זענען קאָנסיסטענט מיט פרייַערדיק זאָגן וואָס שטיצן BRCA זיפּונג פֿאַר געהעריק פאַרהיטונג און באַהאַנדלונג פון ראַק אין מיוטיישאַן קאַריערז.
ברוסט ראַק (BC) איז די מערסט פּראָסט מאַליגנאַנס ווערלדווייד און די דעדליאַסט ראַק אין וואָמען.1 די בייאַלאַדזשיקאַל פֿעיִקייטן וואָס באַשטימען BC פּראָגנאָסיס און קליניש נאַטור האָבן שוין יקסטענסיוולי געלערנט און טייל ילוסידאַד איבער צייַט. אין פאַקט, עטלעכע סעראַגאַט מאַרקערס זענען דערווייַל געניצט צו קלאַסיפיצירן BC אין פאַרשידענע מאָלעקולאַר סובטיפּעס. 2) אַמפּלאַפאַקיישאַן, פּראָוליפעריישאַן אינדעקס קי-67 און אָנוווקס מיינונג (ג).2 די קאָמבינאַציע פון ​​די וועריאַבאַלז יידענאַפייד די פאלגענדע בק קאַטעגאָריעס: 1) לומינאַל טומאָרס, ווייזן ER און/אָדער פּגר אויסדרוק, אַקאַונאַד פֿאַר 75% פון BCs. בייַזייַן פון HER2 אַמפּלאַפאַקיישאַן, ראַגאַרדלאַס פון פּראָוליפעריישאַן אינדעקס;2) HER2+ טומאָרס וואָס זענען ER און PgR נעגאַטיוו אָבער ווייַזן HER2 אַמפּלאַפאַקיישאַן. די גרופּע אַקאַונץ פֿאַר 10% פון אַלע ברוסט טומאָרס;3) דרייַיק-נעגאַטיוו ברוסט ראַק (TNBC), וואָס טוט נישט ווייַזן ER און PgR אויסדרוק און HER2 אַמפּלאַפאַקיישאַן, אַקאַונץ פֿאַר וועגן 15% פון ברוסט קאַנסערס.2-4
צווישן די BC סובטיפּעס, אָנוווקס מיינונג און פּראָוליפעריישאַן אינדעקס רעפּראַזענץ קרייַז-סעקשאַנאַל ביאָמאַרקערס וואָס זענען גלייַך און ינדיפּענדאַנטלי פֿאַרבונדן מיט אָנוווקס אַגרעסיוונאַס און פּראָגנאָסיס.
אין אַדישאַן צו די אַפאָרמענשאַנד בייאַלאַדזשיקאַל פֿעיִקייטן, די ראָלע פון ​​ינכעראַטיד גענעטיק אָלטעריישאַנז וואָס פירן צו דער אַנטוויקלונג פון BC איז ינקריסינגלי וויכטיק אין די לעצטע יאָרן. 2, CHK2, PALB2, RAD51C און RAD51D) בפֿרט פאַראַנטוואָרטלעך פֿאַר יערושעדיק בק. צווישן די גענעס, BRCA1 און BRCA2 (דערנאָך ריפערד צו ווי BRCA1/2) געוויזן די סטראָנגעסט קאָראַליישאַן מיט דער אַנטוויקלונג פון ברוסט טומאָרס. , פּאַנקרעאַטיק, קאָלאָרעקטאַל און מעלאַנאָומאַ. פֿון עלטער 13 צו 80 יאָר, די קיומיאַלאַטיוו ינסידאַנס פון BC איז 72% אין וואָמען מיט אַ BRCA1 פּאַטאַדזשעניק וואַריאַנט (PV) און 69% אין וואָמען מיט אַ BRCA2 PV.14
נאָוטאַבלי, אַ פריש ויסגאַבע סאַגדזשעסץ אַז BC ריזיקירן דעפּענדס אויף די טיפּ פון פּוו. אין פאַקט, קאַמפּערד מיט פּאַטאַדזשעניק טראַנגקייטינג וועריאַנץ, גלערינג מיסענסע וועריאַנץ, ספּעציעל אין די BRCA1 דזשין, זענען פארבונדן מיט אַ רידוסט ריזיקירן פון BC, ספּעציעל אין עלטערע פרויען.15
די בייַזייַן פון BRCA1 אָדער BRCA2 PV איז געווען פֿאַרבונדן מיט פאַרשידענע בייאַלאַדזשיקאַל און קליניקאָפּאַטהאָלאָגיקאַל פֿעיִקייטן.16,17 BRCA1-associated BCs טענד צו זיין קליניש אַגרעסיוו, שוואַך דיפערענשיייטאַד און העכסט פּראָליפעראַטיווע. די טומאָרס זענען יוזשאַוואַלי דרייַיק נעגאַטיוו און האָבן אַ פרי עלטער פון אָנסעט. s זענען מער געוויינטלעך אין לומען ב און יוזשאַוואַלי פאַלן אין עלטערע אַדאַלץ. 16-18 נאָוטאַבלי, מיוטיישאַנז אין BRCA1 און BRCA2 פאַרגרעסערן סענסיטיוויטי צו ספּעציפיש טריטמאַנץ, אַרייַנגערעכנט פּלאַטינום סאָלץ און טאַרגעטעד דרוגס אַזאַ ווי פּאָלי(אַדפּ-ריבאָסע) פּאָלימעראַסע ינכיבאַטערז (PARPi).19,20
אין די לעצטע יאָרן, די ימפּלאַמענטיישאַן פון ווייַטער-דור סיקוואַנסינג (NGS) אין קליניש פיר האט ענייבאַלד אַ ינקריסינג נומער פון BC פּאַטיענץ צו דורכפירן מאָלעקולאַר טעסטינג פֿאַר ראַק סאַסעפּטאַבילאַטי סינדראָומז, אַרייַנגערעכנט BRCA1/2.21. מיולאַטינג אויף BRCA1/2 זיפּונג אין ספּעציפיש פּאַפּיאַליישאַנז, כיילייטינג דיפעראַנסיז צווישן דזשיאַגראַפיק מקומות.
מיר באַשרייַבן דאָ די רעזולטאַטן פון גערמלינע BRCA1/2 זיפּונג אין BC פּאַטיענץ פון מזרח סיסילי, ווייַטער קאָראַלייטינג די בייַזייַן פון BRCA1 אָדער BRCA2 מיוטיישאַנז מיט די הויפּט קליניקאָפּאַטהאָלאָגיקאַל פֿעיִקייטן פון די טומאָרס.
א רעטראַספּעקטיוו לערנען איז געווען דורכגעקאָכט אין די "צענטער פֿאַר עקספּערימענטאַל אָנקאָלאָגי און העמאַטאָלאָגי" אין די פּאָליקליניקאָ האָספּיטאַל. ראָדאָליקאָ - סאַן מאַרקאָ אין קאַטאַניאַ. פֿון יאנואר 2017 צו מערץ 2021, אַ גאַנץ פון 455 פּאַטיענץ מיט ברוסט און אָווועריאַן, מעלאַנאָומאַ, פּאַנקרעאַטיק אָדער פּראָסטאַט ראַק זענען ריפערד צו אונדזער גענעטיק טעסט פֿאַר דיאַגנאָסטיק לערנען אין לויט מיט אונדזער גענעטיק דיאַגנאָסטיק לערנען. העלסינקי, און אַלע פּאַרטיסאַפּאַנץ צוגעשטעלט געשריבן ינפאָרמד צושטימען איידער מאָלעקולאַר אַנאַליסיס.
היסטאָלאָגיקאַל און בייאַלאַדזשיקאַל קעראַקטעריסטיקס (ER, PgR, HER2 סטאַטוס, Ki-67, און גראַד) פון BC זענען אַססעססעד אויף האַרץ ביאָפּסי אָדער כירורגיש סאַמפּאַלז, קאַנסידערינג בלויז אַגרעסיוו אָנוווקס קאַמפּאָונאַנץ. באַזירט אויף די קעראַקטעריסטיקס, BCs זענען קלאַסאַפייד ווי גייט: לומינאַל A (ER+ און/אָדער PgR+, HER2-, 20 קי-+ער, 7% און 2-0, קי-6, 7% און 2-, 2-0, קי-6, 7%) -67≥20%), לומינאַל ב-הער2+ (ער און/אָדער פּגר+, הער2+), הער2+ (ער און פּגר-, הער2+) אָדער דרייַיק נעגאַטיוו (ער און פּגר-, הער2-).
איידער אַססעססינג די BRCA1 און BRCA2 מיוטיישאַן סטאַטוס, אַ מולטידיססיפּלינאַרי מאַנשאַפֿט אַרייַנגערעכנט אַן אָנקאָלאָגיסט, אַ גענעטיקיסט און אַ סייקאַלאַדזשאַסט געפירט אַ אָנוווקס דזשאַנעטיקס באַראַטונג פֿאַר יעדער פּאַציענט צו באַשליסן די בייַזייַן פון BRCA1 און / אָדער BRCA1.אָדער מענטשן מיט אַ הויך ריזיקירן פון פּוו אין די BRCA2 גענע.פּאַציענט סעלעקציע איז דורכגעקאָכט לויט די איטאַליעניש געזעלשאפט פון מעדיקאַל אָנקאָלאָגי (AIOM) גיידליינז און היגע סיסיליאַן רעקאַמאַנדיישאַנז.30,31 די קרייטיריאַ אַרייַננעמען: (איך) משפּחה געשיכטע פון ​​באקאנט פּאַטאַדזשעניק וועריאַנץ אין סאַסעפּטאַבילאַטי גענעס (למשל, BRCA1, BRCA2, TP53, PTEN);(ii) מאַלעס מיט בק;(iii) יענע מיט BC און OC;(יוו) וואָמען מיט BC <36 יאר, TNBC <60 יאר, אָדער ביילאַטעראַל BC <50 יאר;(v) פערזענלעכע מעדיציניש געשיכטע פון ​​BC <50 יאר און בייַ מינדסטער איין ערשטער-גראַד קאָרעוו: (אַ) BC < 50 יאר;(ב) ניט-מיסינאַס און ניט-באָרדערליין אָק פון קיין עלטער;(C) ביילאַטעראַל בק;(ד) זכר בק;(e) פּאַנקרעאַטיק ראַק;(ו) פּראָסטאַט ראַק;(ווי) צוויי אָדער מער פערזענלעכע געשיכטע פון ​​BC> 50 יאָר און משפּחה געשיכטע פון ​​BC, OC אָדער פּאַנקרעאַטיק ראַק פֿאַר קרובים וואָס זענען ערשטער-גראַד קרובים צו יעדער אנדערער (אַרייַנגערעכנט קרובים מיט וועמען זי איז ערשטער-גראַד קרובים);(ווי) פערזענלעכע געשיכטע פון ​​אָק און בייַ מינדסטער איין ערשטער-גראַד קאָרעוו: (אַ) בק <50 יאר;(ב) NOC;(C) ביילאַטעראַל בק;(ד) זכר בק;(ווי) ווייַבלעך מיט הויך-מיינונג סעראָוס אָק.
א 20 מל פּעריפעראַל בלוט מוסטער איז באקומען פון יעדער פּאַציענט און געזאמלט אין EDTA טובז (BD Biosciences). גענאָמיק דנאַ איז אפגעזונדערט פון 0.7 מל גאַנץ בלוט סאַמפּאַלז ניצן די QIAsymphony DSP DNA Midi Kit Isolation Kit (QIAGEN, Hilden, איטאליע) לויט די פאַבריקאַנט ס ינסטראַקשאַנז און דורכגעגאנגען דורך אַ פלויטאָר ® 3. קוואַנטיפיקאַטיאָן.ציל ענריטשמענט און ביבליאָטעק צוגרייטונג זענען דורכגעקאָכט דורך די Oncomine ™ BRCA פאָרשונג אַססייַ שעף, גרייט צו זיין לאָודיד אין די Ion AmpliSeq ™ Chef Reagents DL8 קיט פֿאַר אָטאַמייטיד ביבליאָטעק צוגרייטונג לויט די פאַבריקאַנט ס ינסטראַקשאַנז. 15 μL פון יעדער דיילוטאַד מוסטער דנאַ (10 נג) איז צוגעגעבן צו באַרקאָדעט פּלאַטעס פֿאַר ביבליאָטעק צוגרייטונג, און אַלע רעאַגענץ און קאָנסומאַבלעס זענען לאָודיד אויף די Ion Chef™ ינסטרומענט. מאַ, USA) לויט דער פאַבריקאַנט ס אינסטרוקציעס. צום סוף, לייברעריז זענען קאַמביינד אין עקווימאָלאַר ריישיאָוז אין יאָן שעף ™ ביבליאָטעק מוסטער טובז (באַרקאָדעד טובז) און לאָודיד אַנטו די יאָן שעף ™ ינסטרומענט. סיקוואַנסינג איז דורכגעקאָכט ניצן אַן יאָן טאָררענט ס 5 (טהערמאָ פישער ססיענטיפיק) ינסטרומענט (טערמאָ פישער ססיענטיפיק 510 אַנאַליסיס פון פישער וויסנשאפטלעכע 510 אַנאַליז. plicon Suite (SmartSeq srl) און יאָן רעפּאָרטער ווייכווארג.
אַלע וואַריאַנט נאָמענקלאַטורע נאכגעגאנגען די קראַנט גיידליינז פון די מענטשנרעכט גענאָמע ווערייישאַן קאָנסאָרטיום, בנימצא אָנליין (HGVS, http://www.hgvs.org/mutnomen). UP, BRCAEXCHANGE, ClinVar, IARC_LOVD און UMD. 32
צו באַשטימען פּאָטענציעל קליניש באַטייַט צו יעדער VUS, די פאלגענדע קאַמפּיוטיישאַנאַל פּראָטעינס פּראָגנאָז אַלגערידאַמז זענען געניצט: MUTATION TASTER, 33 PROVEAN-SIFT (http://provean.jcvi.org/index.php), POLYPHEN-2 (http:///genetics.bwh.harvard.edu/pph2/pph2/) און Align_agvgvgd. input.php). וועריאַנץ קלאַסאַפייד ווי קלאַס 1 און 2 זענען געהאלטן ווילד טיפּ.
סאַנגער סיקוואַנסינג באשטעטיקט דעם בייַזייַן פון יעדער פּאַטאַדזשעניק וואַריאַנט. בעקיצער, אַ פּאָר פון ספּעציפיש אָנפאַנגערס איז דיזיינד פֿאַר יעדער דיטעקטאַד וואַריאַנט דורך ניצן די BRCA1 און BRCA2 דזשין רעפֿערענץ סיקוואַנסיז (NG_005905.2, NM_007294.3 און NG_012772.3, NM_000059, SCR, 000059, SMR, 000059). סינג.
פּאַטיענץ וואָס האָבן טעסטעד נעגאַטיוו פֿאַר די BRCA1/2 דזשין זענען טעסטעד דורך מולטיפּלעקס ליגאַטיאָן-אָפענגיק זאָנד אַמפּלאַפאַקיישאַן (MLPA) לויט די פאַבריקאַנט ס אינסטרוקציעס צו אַססעסס די בייַזייַן פון גרויס גענאָמיק ריעריינדזשמאַנץ (LGR). פון פּקר אַמפּליקאָנס, זענען דעמאָלט אַנאַלייזד דורך קאַפּאַלערי עלעקטראָפאָרעסיס און דורך Cofalyser.Net ווייכווארג אין קאַנדזשאַנגקשאַן מיט די צונעמען פּעקל-ספּעציפיש קאָפאַליזער טישן (www.mrcholland.com).
סעלעקטעד קליניקאָפּאַטהאָלאָגיקאַל וועריאַבאַלז (היסטאָלאָגיקאַל מיינונג און קי-67% פּראָוליפעריישאַן אינדעקס) זענען פֿאַרבונדן מיט די בייַזייַן פון BRCA1/2 PV, קאַלקיאַלייטיד מיט די פּריזמע ווייכווארג וו.
צווישן יאנואר 2017 און מערץ 2021, 455 פּאַטיענץ זענען סקרינד פֿאַר גערמלינע BRCA1/2 מיוטיישאַנז. מיוטיישאַן טעסטינג איז געווען דורכגעקאָכט אין די פּאָליקליניקאָ האָספּיטאַל ס צענטער פֿאַר עקספּערימענטאַל אָנקאָלאָגי און העמאַטאָלאָגי. 020), די ראָדאָליקאָ פון קאַטאַניאַ - סאַן מאַרקאָ" קוילעלדיק, 389 פּאַטיענץ עס זענען געווען ברוסט ראַק, 37 אָווועריאַן ראַק, 16 פּאַנקרעאַטיק ראַק, 8 פּראָסטאַט ראַק און 5 מעלאַנאָומאַ.די פאַרשפּרייטונג פון פּאַטיענץ לויט ראַק טיפּ און אַנאַליסיס רעזולטאַטן איז געוויזן אין פיגורע 1.
פיגורע 1 ווייזט אַ לויפן טשאַרט וואָס ווייזן אַן איבערבליק פון די לערנען. פּאַטיענץ מיט ברוסט, מעלאַנאָומאַ, פּאַנקרעאַטיק, פּראָסטאַט, אָדער אָווועריאַן טומאָרס זענען טעסטעד פֿאַר מיוטיישאַנז אין די BRCA1 און BRCA2 גענעס.
אַבריווייישאַנז: פּווס, פּאַטאַדזשעניק וואַריאַנט;VUS, וואַריאַנט פון ומזיכער באַטייַט;WT, ווילד-טיפּ BRCA1/2 סיקוואַנס.
מיר סאַלעקטיוולי פאָוקיסט אונדזער שטודיום אויף ברוסט ראַק קאָהאָרטן. די פּאַטיענץ האָבן אַ מידיאַן עלטער פון 49 יאר (קייט 23-89) און זענען פּרידאַמאַנאַנטלי ווייַבלעך (n=376, אָדער 97%).
פון די סאַבדזשעקץ, 64 (17%) האט ברקאַ1/2 מיוטיישאַנז און זענען אַלע ווייַבלעך.פינף און דרייסיק (9%) האט פּוו און 29 (7.5%) האט VUS.Seventeen (48.6%) פון די 35 פּאַטאַדזשעניק וועריאַנץ פארגעקומען אין BRCA1 און 18 (51.4%) אין BRCA2 און ברקאַ 2.21. (Figures 1 און 2). LGR איז נישט פאָרשטעלן אין די MLPA אַנאַליסיס.
פיגורע 2. אַנאַליסיס פון ברקאַ1 און ברקאַ2 מיוטיישאַנז אין 389 ברוסט ראַק פּאַטיענץ. (א) פאַרשפּרייטונג פון פּאַטאַדזשעניק וועריאַנץ (פּוו) (רויט), וועריאַנץ פון ומזיכער באַטייַט (וווס) (מאַראַנץ), און ווט (בלוי) אין 389 ברוסט ראַק פּאַטיענץ;(ב) 389 ברוסט ראַק פּאַטיענץ 35 (9%) האט ברקאַ1/2 פּאַטאַדזשעניק וועריאַנץ (פּווס). צווישן זיי, 17 (48.6%) זענען ברקאַ1 פּוו קאַריערז (טונקל רויט) און 18 (51.4%) זענען ברקאַ2 קאַריערז (ליכט רויט);(C) 29 (7.5%) פון 389 סאַבדזשעקץ געפירט VUS, 5 (17.2%) BRCA1 גענעס (טונקל מאַראַנץ) און 24 (82.8%) BRCA2 גענעס (ליכט מאַראַנץ).
אַבריווייישאַנז: פּווס, פּאַטאַדזשעניק וואַריאַנט;VUS, וואַריאַנט פון ומזיכער באַטייַט;WT, ווילד-טיפּ BRCA1/2 סיקוואַנס.
מיר ווייַטער ינוועסטאַגייטאַד די פּרעוואַלאַנס פון BC מאָלעקולאַר סובטיפּעס אין פּאַטיענץ מיט BRCA1/2 PV. B BC, 2 (11.8%) האט HER2 + קרענק, און 10 (58.8%) האט TNBC. טומאָרס אָן BRCA1 מיוטיישאַנז זענען אָדער לומינאַל א אָדער לומינאַל ב-HER2+ (פיגורע 3). אין די BRCA2-positive סובגראָופּ, 10 (55.6%) טומאָרס זענען לומינאַל ב, 73% (טנהל 6%). בק און 2 (11.1%) זענען לומינאַל א (פיגורע 3). קיין HER2+ טומאָרס זענען פאָרשטעלן אין דעם גרופּע. אזוי, ברקאַ1 מיוטיישאַנז זענען פאַרשפּרייט אין טנבק פּאַטיענץ, כוועראַז ברקאַ2 אָלטעריישאַנז זענען פּרידאַמאַנאַנט אין לומען ב מענטשן.
פיגורע 3 פּרעוואַלאַנס פון ברוסט ראַק סובטיפּעס אין פּאַטיענץ מיט פּאַטאַדזשעניק וועריאַנץ אין BRCA1 און BRCA2. היסטאָגראַמס וואָס ווייַזן די פאַרשפּרייטונג פון BRCA1- (טונקל רויט) און BRCA2- (ליכט רויט) פּווס צווישן מאָלעקולאַר סובטיפּעס פון ברוסט ראַק פּאַטיענץ.
אַבריווייישאַנז: פּווס, פּאַטאַדזשעניק וואַריאַנט;HER2+, מענטש עפּידעמאַל גראָוט פאַקטאָר רעסעפּטאָר 2 positive;TNBC, דרייַיק נעגאַטיוו ברוסט ראַק.
דערנאָך, מיר אַססעססעד די טיפּ און דזשין לאָוקאַלאַזיישאַן פון BRCA1 און BRCA2 PVs. אין BRCA1 PV, מיר באמערקט 7 איין נוקלעאָטידע וועריאַנץ (SNVs), 6 דילישאַנז, 3 דופּליקיישאַנז און 1 ינסערשאַן. בלויז איין מיוטיישאַן (c.5522delG) רעפּראַזענץ אַ נייַע ופדעקונג. אָלטערניישאַן ינוואַלווז אַ דילישאַן פון פינף נוקלעאָטידעס (CTAAT) אין BRCA1 עקסאָן 15, ריזאַלטינג אין די סאַבסטיטושאַן פון די אַמינאָ זויער לעוסינע דורך טיראָסינע ביי קאָדאָן 1679, און רעכט צו אַ איבערזעצונג פראַמעשיפט מיט אַ פּרעדיקטעד אַלטערנאַטיווע סטאָפּ קאָדאָן פירן צו צו פרי פּראָטעינס טראַנגקיישאַן. c.4357+1G>T) (טאַבלע 1).
וועגן BRCA2 PV, מיר באמערקט 6 דילישאַנז, 6 SNVs און 2 דופּליקאַטיאָנס. קיינער פון די ענדערונגען געפונען זענען ראָמאַן. 5 פון BRCA2, פּרעדיקטעד צו ענקאָוד אַ טראַנגקייטיד, ניט-פאַנגקשאַנאַל פּראָטעין. די c.8487 + 1G> א מיוטיישאַן אַקערז אין די ינטראָניק געגנט פון BRCA2 ינטראָן 19 (± 1,2) און אַפעקץ די ספּליסינג קאָנסענסוס סיקוואַנס, ריזאַלטינג אין אָלטערד ספּלייצינג ריזאַלטינג אין אַבנאָרמאַל אָדער ניטאָ אַ 585אַג-דעל-5אַג-פּראָטעין. אָטידע דילישאַן פון נוקלעאָטידע שטעלעס 5851 צו 5854 אין די קאָדירונג עקסאָן 10 פון די BRCA2 דזשין און רעזולטאטן אין אַ טראַנסלאַטיאָן פראַמעשיפט מיט אַ פּרעדיקטעד אָלטערנאַטיוו סטאָפּ קאָדאָן (פּ.S1951WfsTer). נאָוטאַבלי, ווי פריער געמאלדן, ביידע אָלטעריישאַנז C.631G>A און C.2A>T די זעלבע דיטעקשאַן פון די פּאַציענט מיט די זעלבע דיטעקשאַן פון C.631G>A און C.700. ענאָסינע (א) אין ברקאַ2 עקסאָן 7 מיט אַ גואַנין (ג) מיט נוקלעאָטידע ריזאַלטינג אין אַ ענדערונג פון וואַלינע צו יסאָלעוסינע ביי קאָדאָן 211, יסאָלעוסינע אַמינאָ זויער איז אַן אַמינאָ זויער מיט זייער ענלעך פּראָפּערטיעס. די ענדערונג אַפעקץ נאָרמאַל מרנאַ ספּלייינג. 7008-2A>T טוישן קען דזשענערייט קייפל טראַנסקריפּץ פון פאַרשידענע לענגקטס. דערצו, אין דער גרופּע פון ​​BRCA2 פּווס, 4 פון 18 ענדערונגען (22.2%) זענען ינטראָניק.
מיר דעמאָלט מאַפּט BRCA1/2 דעטעריאָוס מיוטיישאַנז אין פאַנגקשאַנאַל דאָומיינז און פּראָטעין-ביינדינג מקומות (Fig. 4). אין די BRCA1 דזשין, 50% פון פּוו זענען ליגן אין די ברוסט ראַק קנויל געגנט (BCCR), בשעת 22% פון די מיוטיישאַנז זענען ליגן אין די אָווועריאַן ראַק קנויל געגנט (OCCR) (Fig. 42.8% פון די מיוטיישאַנז זענען ליגן אין די OCCR (Fig. 4B). ווייַטער, מיר אַססעססעד די אָרט פון פּוו ין די BRCA1 און BRCA2 פּראָטעין דאָומיינז. טראָניק און 3 עקסאָניק ענדערונגען זענען דיטעקטאַד אין די אָליגאָ / אָליגאָסאַקשאַרידע-ביינדינג (אָב) און טורעם (ה) דאָומיינז (פיגורע 4 ב).
פיגורע 4 סכעמאַטיש פאַרטרעטונג פון BRCA1 און BRCA2 פּראָטעינס און לאָוקאַלאַזיישאַן פון פּאַטאַדזשעניק וועריאַנץ. די פיגור ווייזט די פאַרשפּרייטונג פון BRCA1 (A) און BRCA2 (B) פּאַטאַדזשעניק וועריאַנץ אין ברוסט ראַק פּאַטיענץ. עקסאָניק מיוטיישאַנז זענען געוויזן אין בלוי, בשעת ינטראָניק וועריאַנץ זענען געוויזן אין מאַראַנץ. די באַר הייך רעפּראַזענץ די נומער פון קאַסעס. אין (רינג) און אַ יאָדער לאָוקאַלאַזיישאַן סיקוואַנס (NLS), אַ קוילד-שפּול פעלד, אַ SQ/TQ קנויל פעלד (SCD), און אַ BRCA1 C-וואָקזאַל פעלד (BRCT). (T), און אַן NLS אויף די C זייַט. געביטן גערופֿן די ברוסט קאַנסער קלאַסטער קאנט (BCCR) און אָווועריאַן קאַנסער קלאַסטער קאנט (OCCR) זענען געוויזן אין די דנאָ. * רעפּראַזענץ מיוטיישאַנז וואָס באַשטימען סטאָפּ קאָדאָנס.
מיר דעמאָלט ינוועסטאַגייטאַד BC קליניקאָפּאַטהאָלאָגיקאַל פֿעיִקייטן וואָס קען קאָראַלייט מיט די בייַזייַן פון BRCA1/2 PV. גאַנץ קליניש רעקאָרדס זענען בנימצא פֿאַר 181 BRCA1/2-נעגאַטיוו פּאַטיענץ (ניט-קאַריערז) ​​און אַלע קאַריערז (n = 35). עס איז געווען אַ קאָראַליישאַן צווישן אָנוווקס פּראָוליפעריישאַן קורס און מיינונג.
מיר קאַלקיאַלייטיד די פאַרשפּרייטונג פון קי-67 באזירט אויף די מידיאַן פון אונדזער קאָהאָרט (25%, קייט <10-90%). סאַבדזשעקץ מיט קי-67 <25% זענען דיפיינד ווי "נידעריק קי-67", בשעת מענטשן מיט וואַלועס ≥ 25% זענען גערעכנט ווי "הויך קי-67". קאַריערז (פיג. 5 אַ).
פיגורע 5 קאָראַליישאַן פון Ki-67 מיט גראַד פאַרשפּרייטונג אין ברוסט ראַק וואָמען מיט און אָן BRCA1 און BRCA2 PVs. גראַד גרופּעס (G2 און G3) לויט BRCA1 און BRCA2 מיוטיישאַן סטאַטוס (WT סאַבדזשעקץ, BRCA1 און BRCA2 פּוו קאַריערז).
פּונקט אַזוי, מיר יגזאַמאַנד צי אָנוווקס מיינונג קאָראַלייטאַד מיט די בייַזייַן פון BRCA1 / 2 PV. זינט G1 BC איז געווען ניטאָ אין אונדזער באַפעלקערונג, מיר צעטיילט די פּאַטיענץ אין צוויי גרופּעס (G2 אָדער G3). E 5 ב).
אַדוואַנסאַז אין דנאַ סיקוואַנסינג טעכנאָלאָגיע האָבן ענייבאַלד אַנפּרעסידענטיד אַדוואַנסיז אין BRCA1/2 גענעטיק טעסטינג, מיט קריטיש ימפּלאַקיישאַנז פֿאַר פּאַטיענץ מיט אַ משפּחה געשיכטע פון ​​​​ראַק. s.37 אין איטאליע, די קורס פון BRCA1/2 PVs ריינדזשד פון 8% צו 37%, ווייַזונג ברייט ינטער-לאַנד וועריאַביליטי.38,39 מיט אַ באַפעלקערונג פון כּמעט 5 מיליאָן, סיסילי איז די פינפט גרעסטער געגנט אין איטאליע אין טערמינען פון די נומער פון באוווינער.
אונדזער לערנען איז איינער פון די ערשטע ריפּאָרץ וועגן די ינסידאַנס פון BRCA1/2 PV אין BC פּאַטיענץ אין מזרח סיסילי.28 מיר פאָוקיסט אונדזער אַנאַליסיס אויף BC, ווייַל דאָס איז ביי ווייַט די מערסט פּראָסט קרענק אין אונדזער קאָהאָרט.
ווען טעסטינג 389 BC פּאַטיענץ, 9% געפירט BRCA1/2 PVs, יוואַנלי פונאנדערגעטיילט צווישן BRCA1 און BRCA2. די רעזולטאַטן זענען קאָנסיסטענט מיט די פריער רעפּאָרטעד אין דער איטאַליעניש באַפעלקערונג.28 ינטערעסטינגלי, 3% (13/389) פון אונדזער קאָהאָרט זענען זכר. די קורס איז העכער ווי דערוואַרט פֿאַר זכר ברוסט ראַק (1% פון אַלע 02-בק-קאַנסעראַס סעלעקציע, 4% פון אַלע ברוסט ראַק ראַק) , קיינער פון די מענטשן דעוועלאָפּעד אַ BRCA1/2 PV, אַזוי זיי זענען קאַנדאַדייץ פֿאַר ווייַטער מאָלעקולאַר אַנאַליסיס צו ויסשליסן די בייַזייַן פון ווייניקער פּראָסט מיוטיישאַנז אַזאַ ווי PALB2, RAD51C און D, צווישן אנדערע. וועריאַנץ פון ומזיכער באַטייַט זענען ריטריווד אין 7% פון סאַבדזשעקץ אין וואָס BRCA2 VUS איז קענטיק.
ווען מיר אַנאַלייזד די פאַרשפּרייטונג פון BC מאָלעקולאַר סובטיפּעס אין BRCA1/2 מוטאַנט וואָמען, מיר באשטעטיקט באַוווסט אַסאָוסייישאַנז צווישן TNBC און BRCA1 PV (58.8%) און צווישן לומינאַל B BC און BRCA2 PV (55.6%).
מיר דעמאָלט פאָקוס אויף די טיפּ און אָרט פון די BRCA1/2 PV.אין אונדזער קאָהאָרט, די מערסט פּראָסט BRCA1 PV איז געווען c.5035_5039delCTAAT.Although Incorvaia et al.זיי האָבן נישט דיסקרייבד דעם וואַריאַנט אין זייער סיסיליאַן קאָהאָרט, אנדערע מחברים האָבן רעפּאָרטעד עס ווי אַ גערמלינע BRCA1 PV.34 עטלעכע BRCA1 PVs זענען געפֿונען אין אונדזער קאָהאָרט - למשל c.181T>G, c.514del, c.3253dupA און c.5266dupC - וואָס זענען באמערקט אין די C.2CA 1 פונדערז און צוויי. .5266dupC) זענען אָפט געפונען אין אשכנזישע אידן פון מזרח און צענטראל אייראָפּע (פוילן, טשעכיש), סלאוועניש, עסטרייך, אונגאַריש, בעלארוסיש און דייטש), 44,45 און, אין די פארייניקטע שטאטן און ארגענטינע, איז לעצטנס דעפינירט געוואָרן אלס א "ריקעראַנט גערמלינע וואַריאַנט" אין איטאַליענישע פאציענטן מיט BC און OC543 ראַק, וואָס זענען פריער אידענטיפיצירט געוואָרן פון BC543 ראַק. אין פּאַלערמאָ און מעססינאַ. ינטערעסטינגלי, אפילו ינקאָרוואַיאַ עט על.געפונען די c.3253dupA וואַריאַנט אין עטלעכע פאַמיליעס אין קאַטאַניאַ.28 די מערסט רעפּריזענאַטיוו BRCA2 PVs זענען c.428dup, c.5851_5854delAGTT און די ינטראָניק וואַריאַנט c.8487+1G>A, וואָס האָבן שוין רעפּאָרטעד אין מער דעטאַל 28 אין אַ פּאַציענט אין פּאַלערמאָ מיט c.428dup אין ק. צפון-מערב סיסילי, דער הויפּט אין די טראַפּאַני און פּאַלערמאָ מקומות, כוועראַז C.5851_5854delAGTT PV איז באמערקט אין כאַוסכאָולדז אין צפון-מערב סיסילי.פריער דיסקרייבד די c.5851_5854delAGTT ענדערונג אין קאָלאָמביאַ.37 אן אנדער BRCA2 PV, c.631+1G>A, איז געפונען אין BC און OC פּאַטיענץ פון סיסילי (Agrigento, Siracusa און Ragusa).28 נאָוטאַבאַל, מיר באמערקט די קאָויגזיסטאַנס פון צוויי BRCA2 וועריאַנץ אין די זעלבע וועריאַנץ (BRCA. וואָס מיר האָבן אנגענומען צו זיין סעגרעגאַטעד אין סיס מאָדע, ווי פריער געמאלדן אַזוי. 34,46 די ברקאַ2 ובלע מיוטיישאַנז זענען טאַקע אָפט באמערקט אין די איטאַליעניש געגנט און האָבן שוין געפֿונען צו באַקענען צו פרי סטאָפּ קאָדאָנס, אַפעקטינג מעסינדזשער רנאַ ספּלייינג און קאָזינג די BRCA2 פּראָטעין צו פאַרלאָזן.47,48
מיר אויך מאַפּט BRCA1 און BRCA2 פּוווס אין פּאַטאַטיוו OCCR און BCCR מקומות פון פּראָטעין דאָומיינז און גענעס.די מקומות זענען דיסקרייבד דורך Rebbeck et al.ווי ריזיקירן געביטן פֿאַר דעוועלאָפּינג אָווועריאַן און ברוסט ראַק, ריספּעקטיוולי.49 אָבער, די זאָגן וועגן די פאַרבאַנד צווישן די אָרט פון גערמלינע וועריאַנץ און ברוסט אָדער אָווועריאַן ראַק ריזיקירן בלייבט קאָנטראָווערסיאַל. OCCR און BCCR מקומות און BC פֿעיִקייטן. דאָס קען זיין רעכט צו דער לימיטעד נומער פון פּאַטיענץ מיט BRCA1/2 מיוטיישאַנז. פֿון אַ פּראָטעין פעלד פּערספּעקטיוו, BRCA1 PVs זענען פונאנדערגעטיילט צוזאמען די גאנצע פּראָטעין, און BRCA2 אָלטעריישאַנז זענען פּרעפערענטשאַלי געפֿונען אין די BRC איבערחזרן פעלד.
צום סוף, מיר קאָראַלייטיד BC קליניקאָפּאַטהאָלאָגיקאַל פֿעיִקייטן מיט BRCA1/2 PV. רעכט צו דער לימיטעד נומער פון פּאַטיענץ אַרייַנגערעכנט, מיר בלויז געפֿונען אַ באַטייטיק קאָראַליישאַן צווישן Ki-67 און אָנוווקס מיינונג. נידעריק" Ki-67 איז 20%. אָבער, די שוועל איז נישט אַפּלייז צו אונדזער BRCA1/2 מיוטיישאַן פּאַציענט באַפעלקערונג, וואָס האט אַ מעדיאַן Ki-67 ווערט פון 25%. דער גאַנג אין הויך Ki-67 ראַטעס קענען זיין דערקלערט דורך די פּרעוואַלאַנס אין אונדזער לומינאַל B און TNBC קאָהאָרטן, פון וואָס ווייניק לומינאַל אַווער טומאָרס זענען פאָרשטעלן (און 3 צו 6% העכער טומאָרס זענען פאָרשטעלן). סטראַטיפיצירן פּאַטיענץ לויט זייער פּראָגנאָסיס.53,54 פון די רעזולטאַטן פון אונדזער אַנאַליסיס, אַ באַטייטיק קאָראַליישאַן איז נישט חידוש.אַקערז צווישן הויך קי-67 און גראַדעס און די בייַזייַן פון BRCA1 PV.אין פאַקט, BRCA1-פֿאַרבונדענע טומאָרס זענען טיפּיש פון TNBC און ויסשטעלונג מער אַגרעסיוו פֿעיִקייטן.16,17
אין מסקנא, די לערנען גיט אַ באַריכט אויף די מיוטיישאַנאַל סטאַטוס פון BRCA1/2 אין אַ BC קאָהאָרט פון מזרח סיסילי. קוילעלדיק, אונדזער פיינדינגז זענען קאָנסיסטענט מיט פּרייגזיסטינג זאָגן, ביידע אין טערמינען פון מיוטיישאַן פּרעוואַלאַנס און קליניקאָפּאַטהאָלאָגיקאַל פֿעיִקייטן אין BC. אָפט ווי BRCA1 / 2. דאס וועט לאָזן די לעגיטימאַציע און געהעריק פאַרוואַלטונג פון די ינקריסינג נומער פון סאַבדזשעקץ מיט אַ געוואקסן ריזיקירן פון ראַק רעכט צו גענעטיק מיוטיישאַנז.
מיר באשטעטיגט אז פאציענטן האבן אונטערגעשריבן אינפאָרמירטע צושטימען צו באפרייען זייערע אָנוווקס סאַמפּאַלז אַנאַנאַמאַסלי פֿאַר פאָרשונג צוועקן. אלע פאציענטן האָבן אונטערגעשריבן שריפטליכע אינפאָרמירטע צושטימען לויט דער דעקלאַראַציע פון ​​העלסינקי. לויט דער פּאָליטיק פון AOU Policlinico “G.Rodolico – S.Marco”, איז די שטודיע געווען באפרייט פון עטישע רעצענזיע, ווייל די BRCA1/2 אַנאַליז איז דורכגעפירט געוואָרן לויט זייערע שריפטליכע אינפאָרמירטע באנוצונגס דאטן און אלע פאציענטן צושטימען צושטימען פאר פאציענטן. .
מיר דאַנקען פּראָפעסאָר Paolo Vigneri פֿאַר זיין הילף אין די זאָרגן פון ברוסט ראַק פּאַטיענץ ווי געבעטן דורך די עטיקס קאַמיטי.
Federica Martorana ריפּאָרץ אַנעראַריאַ פון Istituto Gentili, Eli Lilly, Novartis, Pfizer. די אנדערע מחברים דערקלערן קיין קאָנפליקט פון אינטערעס אין דעם ווערק.
1. Sung H, Ferlay J, Siegel RL, עט על.