O ṣeun fun lilo si Nature.com.Ẹya ẹrọ aṣawakiri ti o nlo ni atilẹyin CSS lopin.Fun iriri ti o dara julọ, a ṣeduro pe ki o lo ẹrọ aṣawakiri imudojuiwọn kan (tabi mu Ipo Ibamu ṣiṣẹ ni Internet Explorer).Lakoko, lati rii daju pe atilẹyin tẹsiwaju, a yoo ṣe aaye naa laisi awọn aza ati JavaScript.
Ẹjẹ ti ko ni iṣakoso jẹ ọkan ninu awọn okunfa akọkọ ti iku.Iṣeyọri hemostasis iyara ṣe idaniloju iwalaaye koko-ọrọ bi iranlọwọ akọkọ lakoko ija, awọn ijamba ijabọ, ati awọn iṣẹ idinku iku.Nanoporous fiber-reinforced composite scaffold (NFRCS) yo lati kan ti o rọrun hemostatic film-forming tiwqn (HFFC) bi a lemọlemọfún alakoso le ma nfa ati ki o mu hemostasis.Idagbasoke ti NFRCS da lori apẹrẹ ti apakan dragonfly.Ẹya apakan dragonfly ni awọn iyẹ ifa ati gigun, ati awọn membran apakan ti sopọ mọ ara wọn lati ṣetọju iduroṣinṣin ti microstructure.HFFC ni iṣọkan n ṣe oju oju okun pẹlu fiimu ti sisanra nanometer ati so sisanra owu ti a pin laileto (Ct) (ipin ti a tuka) lati ṣe agbekalẹ nanoporous kan.Ijọpọ ti awọn ipele ti nlọ lọwọ ati pipinka dinku idiyele ọja nipasẹ igba mẹwa ni akawe si awọn ọja ti o wa ni iṣowo.NFRCS ti a ṣe atunṣe (awọn tampon tabi awọn ọrun-ọwọ) le ṣee lo ni ọpọlọpọ awọn ohun elo biomedical.Ni awọn ẹkọ vivo ti pari pe Cp NFRCS ti o ni idagbasoke nfa ati mu ilana ilana coagulation pọ si ni aaye ohun elo.NFRCS le ṣe atunṣe microenvironment ki o ṣiṣẹ ni ipele cellular nitori igbekalẹ nanoporous rẹ ti o mu ki iwosan ọgbẹ dara dara julọ ni awoṣe ọgbẹ imukuro.
Ẹjẹ ti ko ni iṣakoso lakoko ija, intraoperative ati awọn ipo pajawiri le jẹ ewu nla si igbesi aye awọn ti o gbọgbẹ1.Awọn ipo wọnyi tun yorisi ilosoke gbogbogbo ni resistance ti iṣan agbeegbe, ti o yori si mọnamọna iṣọn-ẹjẹ.Awọn ọna ti o yẹ lati ṣakoso ẹjẹ lakoko ati lẹhin iṣẹ abẹ ni a gba pe o le hawu-aye2,3.Bibajẹ si awọn ohun elo nla nyorisi pipadanu ẹjẹ nla, ti o mu abajade iku ti ≤ 50% ni ija ati 31% lakoko iṣẹ abẹ1.Pipadanu ẹjẹ nla nyorisi idinku ninu iwọn ara, eyiti o dinku iṣelọpọ ọkan.Ilọsoke lapapọ resistance ti iṣan agbeegbe ati ailagbara ilọsiwaju ti microcirculation yori si hypoxia ninu awọn ara atilẹyin igbesi aye.Ibanujẹ iṣọn-ẹjẹ le waye ti ipo naa ba tẹsiwaju laisi ilowosi to munadoko1,4,5.Awọn iloluran miiran pẹlu ilọsiwaju ti hypothermia ati acidosis ti iṣelọpọ, bakanna bi iṣọn-ẹjẹ coagulation ti o ṣe idiwọ ilana iṣọn-ẹjẹ.Ibanujẹ iṣọn-ẹjẹ nla ni nkan ṣe pẹlu eewu ti o ga julọ ti iku6,7,8.Ni ipele III (itẹsiwaju) mọnamọna, gbigbe ẹjẹ jẹ pataki fun iwalaaye alaisan lakoko intraoperative ati lẹhin iṣẹ-aisan ati iku.Lati bori gbogbo awọn ipo idẹruba igbesi aye ti o wa loke, a ti ṣe agbekalẹ kan naporous fiber-reinforced composite scaffold (NFRCS) ti o nlo ifọkansi polima ti o kere ju (0.5%) nipa lilo apapọ awọn polima hemostatic hemostatic ti omi-soluble.
Pẹlu lilo imuduro okun, awọn ọja ti o munadoko le ni idagbasoke.Awọn okun ti a ṣeto laileto jọ eto ti apakan dragonfly, iwọntunwọnsi nipasẹ awọn ila petele ati inaro lori awọn iyẹ.Awọn iṣọn iṣipopada ati gigun ti apakan ni ibaraẹnisọrọ pẹlu awọ awo apakan (Fig. 1).NFRCS ni Ct ti a fikun bi eto scaffold pẹlu agbara ti ara ati ẹrọ ti o dara julọ (olusin 1).Nitori agbara ati iṣẹ-ọnà, awọn oniṣẹ abẹ fẹ lati lo awọn wiwọn okun owu (Ct) lakoko awọn iṣẹ ati awọn aṣọ. Nitorinaa, ni akiyesi awọn anfani lọpọlọpọ rẹ, pẹlu> 90% cellulose crystalline (awọn ipin ninu imudara iṣẹ ṣiṣe hemostatic), a lo Ct bi eto egungun ti NFRCS9,10. Nitorinaa, ni akiyesi awọn anfani lọpọlọpọ rẹ, pẹlu> 90% cellulose crystalline (awọn ipin ninu imudara iṣẹ ṣiṣe hemostatic), a lo Ct bi eto egungun ti NFRCS9,10. Следовательно, учитывая его многочисленные преимущества, в том числе > 90% кристалической гемостатической активности), Ct использовали в качестве скелетной системы NFRCS9,10. Nitorinaa, fun ọpọlọpọ awọn anfani rẹ, pẹlu> 90% cellulose crystalline (ti o ṣe alabapin si iṣẹ ṣiṣe hemostatic ti o pọ si), a lo Ct bi eto egungun NFRCS9,10.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%架系统.因此，考虑到它的多重益处，包括> 90%Nitorinaa, fun ọpọlọpọ awọn anfani rẹ, pẹlu diẹ sii ju 90% cellulose crystalline (ṣe iranlọwọ imudara iṣẹ ṣiṣe hemostatic), a lo Ct bi scaffold fun NFRCS9,10.A ti bo Ct ni aipe (a ṣe akiyesi idasile fiimu ti o nipọn) ati ni asopọ pẹlu akopọ ti o ṣẹda fiimu hemostatic (HFFC).HFFC ṣe bi matrigel, ti o dani Ct laileto ti a gbe papọ.Apẹrẹ ti o ni idagbasoke ntan aapọn laarin ipele ti a tuka (awọn okun ti n mu agbara).O nira lati gba awọn ẹya nanoporous pẹlu agbara ẹrọ ti o dara nipa lilo awọn ifọkansi polima to kere.Ni afikun, ko rọrun lati ṣe akanṣe awọn apẹrẹ oriṣiriṣi fun oriṣiriṣi awọn ohun elo biomedical.
Nọmba naa fihan aworan atọka ti apẹrẹ NFRCS ti o da lori eto apakan dragonfly (A).Aworan yii ṣe afihan afiwera ti igbekalẹ iyẹ ti dragonfly kan (isopọmọra ati awọn iṣọn gigun ti apakan jẹ asopọ laarin) ati fọtomikirogi apakan agbelebu ti Cp NFRCS (B).Aṣoju sikematiki ti NFRCS.
Awọn NFRC ti ni idagbasoke ni lilo HFFC gẹgẹbi ipele ilọsiwaju lati koju awọn idiwọn loke.HFFC jẹ oriṣiriṣi awọn polima hemostatic ti o ṣẹda fiimu pẹlu chitosan (gẹgẹbi polima hemostatic akọkọ) pẹlu methylcellulose (MC), hydroxypropyl methylcellulose (HPMC 50 cp) ati ọti polyvinyl (PVA)) (125 kDa) gẹgẹbi polymer atilẹyin ti o ṣe agbega dida thrombus.idasile.Afikun ti polyvinylpyrrolidine K30 (PVP K30) ṣe ilọsiwaju agbara gbigba ọrinrin ti NFRCS.Polyethylene glycol 400 (PEG 400) ni a ṣafikun lati mu ilọsiwaju si ọna asopọ polima ni awọn idapọmọra polima ti a so pọ.Awọn akojọpọ hemostatic HFFC mẹta oriṣiriṣi (Cm HFFC, Ch HFFC ati Cp HFFC), eyun chitosan pẹlu MC (Cm), chitosan pẹlu HPMC (Ch), ati chitosan pẹlu PVA (Cp), ni a lo si Ct.Orisirisi in vitro ati in vivo awọn ijinlẹ ifaramọ ti jẹrisi iṣẹ-ṣiṣe hemostatic ati ọgbẹ iwosan ti NFRCS.Awọn ohun elo idapọmọra ti NFRCS funni ni a le lo lati ṣe akanṣe ọpọlọpọ awọn fọọmu ti scaffolding lati pade awọn iwulo kan pato.
Ni afikun, NFRCS le ṣe atunṣe bi bandage tabi yipo lati bo gbogbo agbegbe ipalara ti awọn opin isalẹ ati awọn ẹya miiran ti ara.Ni pato fun awọn ipalara ikọlu ija, apẹrẹ NFRCS ti a ṣe apẹrẹ le yipada si apa idaji tabi ẹsẹ kikun (Afikun Aworan S11).NFRCS le ṣe di okun-ọwọ pẹlu lẹ pọ tissu, eyiti o le ṣee lo lati da ẹjẹ duro lati awọn ipalara ọwọ igbẹmi ara ẹni nla.Ibi-afẹde akọkọ wa ni lati ṣe agbekalẹ NFRCS kan pẹlu polima kekere bi o ti ṣee ṣe ti o le ṣe jiṣẹ si olugbe nla (ni isalẹ laini osi) ati pe o le gbe sinu ohun elo iranlọwọ akọkọ.Rọrun, daradara, ati ọrọ-aje ni apẹrẹ, NFRCS ṣe anfani awọn agbegbe agbegbe ati pe o le ni ipa agbaye.
Chitosan (iwuwo molikula 80 kDa) ati amaranth ni a ra lati Merck, India.Hydroxypropyl methylcellulose 50 Cp, polyethylene glycol 400 ati methylcellulose ni a ra lati Loba Chemie Pvt.LLC, Mumbai.Polyvinyl (iwuwo molikula 125 kDa) (87-90% hydrolysed) ni a ra lati awọn Kemikali ti Orilẹ-ede, Gujarati.Polyvinylpyrrolidine K30 ni a ra lati Molychem, Mumbai, a ra awọn swabs ti o ni ifo lati Ramaraju Surgery Cotton Mills Ltd., Tamil Nadu, pẹlu Milli Q omi (Tara-Q3 omi ìwẹnumọ eto, Merck, India) bi awọn ti ngbe.
NFRCS ti ni idagbasoke nipa lilo ọna lyophilization11,12.Gbogbo awọn akojọpọ HFFC (Table 1) ni a pese sile nipa lilo aruwo ẹrọ.Ṣetan ojutu 0.5% ti chitosan nipa lilo 1% acetic acid ninu omi nipasẹ gbigbe siwaju ni 800 rpm lori aruwo ẹrọ.Iwọn gangan ti polima ti o kojọpọ ti itọkasi ni Tabili 1 ni a ṣafikun si ojutu chitosan ati ki o ru titi ti o fi gba ojutu polima ti o yege.PVP K30 ati PEG 400 ni a ṣafikun si adalu Abajade ni awọn oye ti a tọka si ni Tabili 1, ati aruwo tẹsiwaju titi ti a fi gba ojutu viscous viscous ko o.Abajade iwẹ ti polima ojutu ti a sonicated fun 60 iṣẹju lati yọ idẹkùn air nyoju lati polima adalu.Gẹgẹbi a ṣe han ni S1 (b) Afikun, Ct ti pin ni deede ni kanga kọọkan ti awo kanga 6 (m) ti o ni afikun pẹlu 5 milimita ti HFFC.
Awo kanga mẹfa naa jẹ sonicated fun awọn iṣẹju 60 lati ṣaṣeyọri ririn aṣọ ati pinpin HFFC ni nẹtiwọọki Ct.Lẹhinna di awo kanga mẹfa ni -20 ° C fun awọn wakati 8-12.Awọn awo didi jẹ lyophilized fun awọn wakati 48 lati gba ọpọlọpọ awọn agbekalẹ ti NFRCS.Ilana kanna ni a lo lati ṣe awọn oriṣiriṣi awọn apẹrẹ ati awọn ẹya, gẹgẹbi awọn tampons tabi tampons cylindrical, tabi eyikeyi apẹrẹ miiran fun awọn ohun elo ọtọtọ.
Chitosan ti o ni iwuwo deede (80 kDa) (3%) ti wa ni tituka ni 1% acetic acid nipa lilo aruwo oofa.Si ojutu abajade ti chitosan ni a fi kun 1% PEG 400 ati ki o ru fun ọgbọn išẹju 30.Tú ojutu ti o jade sinu onigun mẹrin tabi eiyan onigun ati ki o di ni -80 ° C fun wakati 12.Awọn ayẹwo ti o tutuni jẹ lyophilized fun awọn wakati 48 lati gba Cs13 la kọja.
NFRCS ti o ni idagbasoke ti wa labẹ awọn adanwo nipa lilo Fourier transform infurarẹẹdi spectroscopy (FTIR) (Shimadzu 8400 s FTIR, Tokyo, Japan) lati jẹrisi ibaramu kemikali ti chitosan pẹlu awọn polymers14,15 miiran.Awọn iwoye FTIR (iwọn ti iwọn ilawọn lati 400 si 4000 cm-1) ti gbogbo awọn ayẹwo idanwo ni a gba nipasẹ ṣiṣe awọn ọlọjẹ 32.
Oṣuwọn gbigba ẹjẹ (BAR) fun gbogbo awọn agbekalẹ ni a ṣe ayẹwo ni lilo ọna ti a ṣalaye nipasẹ Chen et al.16 pẹlu awọn iyipada diẹ.Awọn NFRK ti o ni idagbasoke ti gbogbo awọn akojọpọ ni a gbẹ ni adiro igbale ni 105°C ni alẹ lati yọ iyọkuro to ku.30 miligiramu NFRCS (iwuwo ayẹwo akọkọ - W0) ati 30 mg Ct (iṣakoso rere) ni a gbe sinu awọn ounjẹ lọtọ ti o ni ipilẹṣẹ ti 3.8% iṣuu soda citrate.Ni awọn aarin akoko ti a ti pinnu tẹlẹ, ie 5, 10, 20, 30, 40 ati 60 iṣẹju-aaya, NFRCS yọkuro ati pe awọn aaye wọn di mimọ ti ẹjẹ ti ko gba nipasẹ gbigbe awọn ayẹwo si Ct fun ọgbọn aaya 30.Iwọn ikẹhin ti ẹjẹ ti o gba nipasẹ NFRCS 16 ni a gbero (W1) ni aaye kọọkan.Ṣe iṣiro ipin ogorun BAR nipa lilo agbekalẹ atẹle:
Akoko didi ẹjẹ (BCT) jẹ ipinnu bi a ti royin nipasẹ Wang et al.17 .Akoko ti a beere fun gbogbo ẹjẹ (ẹjẹ eku ti a dapọ pẹlu 3.8% iṣuu soda citrate) lati didi ni iwaju NFRCS ni iṣiro bi BCT ti ayẹwo idanwo.Awọn oriṣiriṣi awọn paati NFRCS (30 miligiramu) ni a gbe sinu milimita 10 skru fila awọn lẹgbẹrun ati ti a fi sii ni 37°C.Ẹjẹ (0.5 milimita) ni a ṣafikun si vial ati 0.3 milimita ti 0.2 M CaCl2 ni a ṣafikun lati mu iṣọn-ẹjẹ ẹjẹ ṣiṣẹ.Nikẹhin, yi vial pada ni gbogbo iṣẹju-aaya 15 (to 180°) titi di didi didi kan.BCT ti ayẹwo jẹ ifoju nipasẹ awọn nọmba ti flips vails17,18.Da lori BCT, awọn akopọ ti o dara julọ meji lati NFRCS Cm, Ch ati Cp ni a yan fun awọn ijinlẹ isọdisi siwaju sii.
BCT ti Ch NFRCS ati awọn akojọpọ Cp NFRCS jẹ ipinnu nipasẹ imuse ọna ti a ṣalaye nipasẹ Li et al.19 .Gbe 15 x 15 mm2 Ch NFRCS, Cp NFRCS, ati Cs (Iṣakoso rere) sinu awọn ounjẹ Petri lọtọ (37 °C).Ẹjẹ ti o ni 3.8% iṣuu soda citrate ni a dapọ pẹlu 0.2 M CaCl2 ni iwọn didun 10: 1 lati bẹrẹ ilana didi ẹjẹ.20 µl ti 0.2 M CaCl2 eku ẹjẹ ni a lo si oju ayẹwo ati gbe sinu satelaiti Petri ofo.Iṣakoso jẹ ẹjẹ ti a ta sinu awọn ounjẹ Petri ti o ṣofo laisi Ct.Ni awọn aaye arin ti o wa titi ti 0, 3, ati 5 iṣẹju, da didi silẹ nipa fifi 10 milimita ti omi deionized (DI) kun si apẹẹrẹ ti o ni satelaiti naa laisi wahala didi.Awọn erythrocytes ti ko ni idapọ (erythrocytes) gba iṣọn-ẹjẹ ni iwaju omi ti a ti sọ diionized ati tu haemoglobin silẹ.Hemoglobin ni awọn aaye akoko oriṣiriṣi (HA (t)) ni iwọn 540 nm (λmax hemoglobin) nipa lilo spectrophotometer UV-Vis.Gbigba haemoglobin pipe (AH(0)) ni iṣẹju 0 ti 20 µl ti ẹjẹ ni milimita 10 ti omi deionized ni a mu gẹgẹbi idiwọn itọkasi.Gbigbe haemoglobin ibatan (RHA) ti ẹjẹ iṣọpọ ni a ṣe iṣiro lati ipin HA (t)/HA (0) ni lilo ipele ẹjẹ kanna.
Lilo olutọpa ifarakanra (Texture Pro CT V1.3 Build 15, Brookfield, USA), awọn ohun-ini alemora ti NFRK si awọn ohun elo ti o bajẹ ni a pinnu.Tẹ satelaiti iyipo ti o ṣii-isalẹ lodi si inu ti awọ ẹran ẹlẹdẹ (laisi ipele ti ọra).Awọn ayẹwo (Ch NFRCS ati Cp NFRCS) ni a lo nipasẹ cannula sinu awọn molds cylindrical lati ṣẹda ifaramọ si awọ ara ẹlẹdẹ.Lẹhin abeabo iṣẹju 3 ni iwọn otutu yara (RT) (25° C.), agbara alemora NFRCS ni a gbasilẹ ni iwọn igbagbogbo ti 0.5 mm/aaya.
Ẹya akọkọ ti awọn edidi iṣẹ abẹ ni lati mu didi ẹjẹ pọ si lakoko ti o dinku isonu ẹjẹ.Coagulation ti ko ni ipadanu ni NFRCS ni a ṣe ayẹwo nipa lilo ọna ti a tẹjade tẹlẹ pẹlu awọn iyipada diẹ 19.Ṣe tube microcentrifuge (2 milimita) (iwọn ila opin ti inu 10 mm) pẹlu iho 8 × 5 mm2 ni ẹgbẹ kan ti tube centrifuge (ti o nsoju ọgbẹ ṣiṣi).NFRCS ni a lo lati tii šiši ati teepu ti a lo lati di awọn egbegbe ita.Fi 20 µl ti 0.2 M CaCl2 kun tube microcentrifuge ti o ni 3.8% iṣuu soda citrate premix.Lẹhin awọn iṣẹju 10, awọn tubes microcentrifuge ti yọ kuro ninu awọn awopọ ati ilosoke ninu ibi-iwọn ti awọn n ṣe awopọ ti pinnu nitori sisan ẹjẹ lati NFRK (n = 3).Pipadanu ẹjẹ Ch NFRCS ati Cp NFRCS ni a ṣe afiwe pẹlu Cs.
Iduroṣinṣin tutu ti NFRCS ni ipinnu da lori ọna ti a ṣapejuwe nipasẹ Mishra ati Chaudhary21 pẹlu awọn iyipada kekere.Gbe NFRCS sinu ọpọn 100 milimita Erlenmeyer pẹlu omi 50 milimita ati yiyi fun awọn iṣẹju 60 laisi ṣiṣe oke kan.Ayẹwo wiwo ati iṣaju awọn ayẹwo fun iduroṣinṣin ti ara ti o da lori gbigba.
Agbara abuda ti HFFC si Ct ni a ṣe iwadi nipa lilo awọn ọna ti a tẹjade tẹlẹ pẹlu awọn iyipada kekere.Iduroṣinṣin ti a bo oju oju ni a ṣe ayẹwo nipasẹ ṣiṣafihan NFRK si awọn igbi omi acoustic (iwuri ita) ni iwaju omi milliQ (Ct).NFRCS Ch NFRCS ti o dagbasoke ati Cp NFRCS ni a gbe sinu beaker ti o kun fun omi ati sonicated fun 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, ati 30 min, lẹsẹsẹ.Lẹhin gbigbe, iyatọ ipin laarin iwuwo ibẹrẹ ati ipari ti NFRCS ni a lo lati ṣe iṣiro ipadanu ogorun ohun elo (HFFC).In vitro BCT tun ṣe atilẹyin agbara abuda tabi isonu ti awọn ohun elo dada.Iṣiṣẹ ti HFFC abuda si Ct n pese iṣọpọ ẹjẹ ati bora rirọ lori dada ti Ct22.
Isọpọ ti NFRCS ti o ni idagbasoke jẹ ipinnu nipasẹ BCT ti awọn ayẹwo (30 miligiramu) ti a mu lati awọn ipo gbogbogbo ti a yan laileto ti NFRCS.Tẹle ilana BCT ti a mẹnuba tẹlẹ lati pinnu ibamu NFRCS.Isunmọ laarin gbogbo awọn ayẹwo marun n ṣe idaniloju agbegbe agbegbe aṣọ ati ifisilẹ HFFC ni apapo Ct.
Agbegbe ifarakan ẹjẹ (NBCA) ti pinnu bi a ti royin tẹlẹ pẹlu diẹ ninu awọn iyipada.Ṣọ ẹjẹ pọ nipasẹ didi 20 µl ti ẹjẹ laarin awọn oju meji ti Ct, Ch NFRCS, Cp NFRCS ati Cs.Lẹhin wakati 1, awọn ẹya meji ti stent ti yapa ati pẹlu ọwọ wọn agbegbe ti didi.Iwọn aropin ti awọn atunwi mẹta ni a ka NBCA NFRCS19.
Onínọmbà Dynamic Vapor Sorption (DVS) ni a lo lati ṣe iṣiro imunadoko ti NFRCS lati fa omi lati agbegbe ita tabi lati aaye ipalara ti o ni iduro fun pilẹṣẹ coagulation.DVS n ṣe iṣiro tabi ṣe igbasilẹ gbigba oru ati ipadanu ni ayẹwo gravimetrically nipa lilo iwọntunwọnsi ifarabalẹ kan pẹlu ipinnu pipọ ti ± 0.1 µg.Apakan oru titẹ (ọriniinitutu ojulumo) jẹ ipilẹṣẹ nipasẹ olutọsọna ṣiṣan iwọn eletiriki ni ayika apẹẹrẹ nipasẹ didapọ awọn gaasi ti ngbe ati ti o gbẹ. Gẹgẹbi awọn itọnisọna European Pharmacopeia, ti o da lori ipin ogorun ti gbigbe ọrinrin nipasẹ awọn ayẹwo, awọn ayẹwo ti pin si awọn ẹka 4 (0-0.012% w / w- kii-hygroscopic, 0.2-2% w / w hygroscopic die-die, 2-15% hygroscopic niwọntunwọnsi, ati> 15% scopic) hygro. Gẹgẹbi awọn itọnisọna European Pharmacopeia, ti o da lori ipin ogorun ti gbigbe ọrinrin nipasẹ awọn ayẹwo, awọn ayẹwo ti pin si awọn ẹka 4 (0-0.012% w / w- kii-hygroscopic, 0.2-2% w / w hygroscopic die-die, 2-15% hygroscopic niwọntunwọsi, ati> scopic) 2 pupọ.Ni ibamu pẹlu awọn iṣeduro ti European Pharmacopoeia, ti o da lori ogorun ti gbigba ọrinrin nipasẹ awọn ayẹwo, awọn ayẹwo ti pin si awọn ẹka 4 (0-0.012% w / w - ti kii-hygroscopic, 0.2-2% w / w die-die hygroscopic, 2-55%).% умеренно гигроскопичен и > 15% очень гигроскопичен)23. % niwọntunwọsi hygroscopic ati> 15% hygroscopic pupọ)23.根据欧洲药典指南，根据样品吸收水分的百分比，样品分为4 类（0-0.012% w/w-㸻%微吸湿性、2-15% 适度吸湿，> 15% 非常吸湿）23.根据 欧洲 药典 指南 ， 根据 吸收 水分 的 百分比、 、 、 、 0.2-2% W/w 、 2-15% 。度 吸湿 、 15 %Ni ibamu pẹlu awọn iṣeduro ti European Pharmacopoeia, awọn ayẹwo ti pin si awọn kilasi 4 da lori ipin ogorun ọrinrin ti o gba nipasẹ ayẹwo (0-0.012% nipasẹ iwuwo - ti kii-hygroscopic, 0.2-2% nipasẹ iwuwo kekere hygroscopic, 2-15% nipasẹ iwuwo).% умеренно гигроскопичен, > 15 % очень гигроскопичен) 23. % hygroscopic niwọntunwọsi,> 15% hygroscopic pupọ) 23.Iṣiṣẹ hygroscopic ti NFCS X NFCS ati TsN NFCS ti pinnu lori olutupalẹ DVS TA TGA Q5000 SA.Lakoko ilana yii, akoko ṣiṣe, ọriniinitutu ibatan (RH), ati iwuwo ayẹwo akoko gidi ni 25°C24 ni a gba.Akoonu ọrinrin jẹ iṣiro nipasẹ ṣiṣe itupalẹ pipọ NFRCS deede nipa lilo idogba atẹle:
MC jẹ ọriniinitutu NFRCS.m1 - iwuwo gbigbẹ ti awọn NSAIDs.m2 jẹ titobi NFRCS akoko gidi ni RH ti a fun.
Apapọ agbegbe ti a ṣe iṣiro ni lilo idanwo adsorption nitrogen pẹlu nitrogen olomi lẹhin sisọ awọn ayẹwo ni 25 °C fun awọn wakati 10 (<7 × 10–3 Torr). Apapọ agbegbe ti a ṣe iṣiro ni lilo idanwo adsorption nitrogen pẹlu nitrogen olomi lẹhin sisọ awọn ayẹwo ni 25 °C fun awọn wakati 10 (<7 × 10–3 Torr). Общая площадь поверhnosty оцениvalasь при 25 °С в течение 10 ч (< 7 × 10–3 Торр). Apapọ agbegbe ti a ṣe iṣiro ni lilo idanwo adsorption nitrogen pẹlu nitrogen olomi lẹhin ti a ti sọ awọn ayẹwo ni 25°C fun wakati 10 (<7 × 10–3 Torr).在25°C 清空样品10 小时（< 7 × 10-3 Torr）后，使用液氮的氮吸附实验估计总表面积。iwọn otutu ti 25 ° C Общая площадь поверхности оценивалась. зцов в течение 10 часов при 25°C (< 7 × 10-3 торр). Lapapọ agbegbe dada ni ifoju ni lilo awọn adanwo adsorption nitrogen pẹlu nitrogen olomi lẹhin ti awọn ayẹwo ti di ofo fun wakati 10 ni 25°C (<7 x 10-3 torr).Lapapọ agbegbe agbegbe, iwọn pore ati iwọn pore NFRCS ni a pinnu pẹlu Quantachrome lati NOVA 1000e, Austria ni lilo sọfitiwia RS 232.
Mura 5% RBCs (iyọ bi diluent) lati gbogbo ẹjẹ.Lẹhinna gbe aliquot ti HFFC (0.25 milimita) si awo-daradara 96 ​​kan ati 5% RBC ibi (0.1 milimita).Ṣafikun adalu ni 37 ° C fun awọn iṣẹju 40.Adalu awọn sẹẹli ẹjẹ pupa ati omi ara ni a gba bi iṣakoso rere, ati adalu iyọ ati awọn sẹẹli ẹjẹ pupa bi iṣakoso odi.Hemagglutination ti pinnu ni ibamu si iwọn Stajitzky.Awọn irẹjẹ ti a dabaa jẹ bi atẹle: + + + + awọn akojọpọ granular ipon;+ + + awọn paadi isalẹ didan pẹlu awọn egbegbe ti a tẹ;+ + awọn paadi isalẹ didan pẹlu awọn egbegbe ti o ya;+ awọn oruka pupa dín ni ayika awọn egbegbe ti awọn paadi didan;– (odi) ọtọ pupa bọtini 12 ni aarin ti isalẹ kanga.
A ṣe iwadi hemocompatibility ti NFRCS ni ibamu si ọna ti International Organisation for Standardization (ISO10993-4, 1999) 26,27.Ọna gravimetric ti a ṣalaye nipasẹ Singh et al.Awọn iyipada kekere ni a ṣe lati ṣe ayẹwo idasile thrombus ni iwaju tabi lori dada ti NFRCS.500 miligiramu ti Cs, Ch NFRCS ati Cp NFRCS ni a fi sinu saline buffered fosifeti (PBS) fun wakati 24 ni 37°C.Lẹhin awọn wakati 24, a yọ PBS kuro ati pe a ṣe itọju NFRCS pẹlu 2 milimita ti ẹjẹ ti o ni 3.8% iṣuu soda citrate.Lori dada ti NFRCS, ṣafikun 0.04 milimita ti 0.1 M CaCl2 si awọn ayẹwo ti a fi sinu.Lẹhin awọn iṣẹju 45, 5 milimita ti omi distilled ti wa ni afikun lati da coagulation duro.Ẹjẹ coagulated lori dada ti NFRK ti wa ni itọju pẹlu 36-38% formaldehyde ojutu.Awọn didi ti o wa titi pẹlu formaldehyde ti gbẹ ati iwọn.Iwọn ogorun ti thrombosis jẹ iṣiro nipasẹ iṣiro iwuwo gilasi laisi ẹjẹ ati ayẹwo (iṣakoso odi) ati gilasi pẹlu ẹjẹ (iṣakoso rere).
Gẹgẹbi ìmúdájú akọkọ, awọn ayẹwo ni wiwo labẹ maikirosikopu opiti lati loye agbara ti ibora oju-aye HFFC, Ct interconnected, ati Ct nẹtiwọki lati dagba awọn pores.Awọn apakan tinrin ti Ch ati Cp lati NFRCS ni a ge pẹlu abẹfẹlẹ scalpel kan.Abala abajade ti a gbe sori ifaworanhan gilasi kan, ti a fi bo pẹlu ibori, ati awọn egbegbe ti wa ni titọ pẹlu lẹ pọ.Awọn ifaworanhan ti a pese silẹ ni a wo labẹ maikirosikopu opiti ati pe a ya awọn fọto ni awọn titobi oriṣiriṣi.
Iṣalaye polima ni awọn nẹtiwọọki Ct ni a fi oju han nipa lilo microscopy fluorescence ti o da lori ọna ti a ṣalaye nipasẹ Rice et al.29. Akopọ HFFC ti a lo fun agbekalẹ naa ni a dapọ pẹlu awọ fluorescent (amaranth), ati NFRCS (Ch & Cp) ti pese sile gẹgẹbi ọna ti a mẹnuba tẹlẹ. Akopọ HFFC ti a lo fun agbekalẹ naa ni a dapọ pẹlu awọ fluorescent (amaranth), ati NFRCS (Ch & Cp) ti pese sile gẹgẹbi ọna ti a mẹnuba tẹlẹ.Akopọ HFFC ti a lo fun iṣelọpọ ni a dapọ pẹlu awọ fluorescent (amaranth) ati NFRCS (Ch ati Cp) ni a gba ni ibamu si ọna ti a mẹnuba tẹlẹ.将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并照前面提到的方法到的方法NFRCS）将用于配方的HFFC 组合物与荧光染料（苋菜）混合，并照前面提到的方法到的方法NFRCS）Akopọ HFFC ti a lo ninu agbekalẹ jẹ idapọ pẹlu awọ fluorescent (Amaranth) ati gba NFRCS (Ch ati Cp), bi a ti mẹnuba tẹlẹ.Awọn apakan tinrin ti NFRK ni a ge lati awọn apẹẹrẹ ti a gba, ti a gbe sori awọn ifaworanhan gilasi, ati ti a bo pẹlu awọn isokuso ideri.Ṣe akiyesi awọn ifaworanhan ti a pese silẹ labẹ maikirosikopu Fuluorisenti nipa lilo àlẹmọ alawọ kan (310-380 nm).Awọn aworan ni a mu ni titobi 4x lati loye awọn ibatan Ct ati ifisilẹ polima pupọ ninu nẹtiwọọki Ct.
Oju-aye oju-aye ti NFRCS Ch ati Cp ti pinnu nipa lilo maikirosikopu agbara atomiki (AFM) pẹlu cantilever TESP ultra-didasilẹ ni ipo titẹ ni kia kia: 42 N/m, 320 kHz, ROC 2-5 nm, Bruker, Taiwan.Iṣeduro oju oju jẹ ipinnu nipasẹ root tumosi square (RMS) nipa lilo sọfitiwia (Iṣayẹwo Ṣiṣe Aworan Aworan).Orisirisi awọn ipo NFRCS ni a ṣe lori awọn aworan 3D lati ṣayẹwo fun isokan dada.Iyapa boṣewa ti Dimegilio fun agbegbe ti a fun ni asọye bi aibikita dada.Idogba RMS ni a lo lati ṣe iwọn aijinle dada ti NFRCS31.
Awọn ẹkọ ti o da lori FESEM ni a ṣe pẹlu lilo FESEM, SU8000, HI-0876-0003, Hitachi, Tokyo, lati ni oye morphology dada ti Ch NFRCS ati Cp NFRCS, eyiti o fihan BCT ti o dara ju Cm NFRCS.Iwadi FESEM ni a ṣe ni ibamu si ọna ti Zhao et al ti ṣalaye.32 pẹlu awọn iyipada kekere.NFRCS 20 si 30 miligiramu Ch NFRCS ati Cp NFRCS jẹ iṣaju pẹlu 20 µl ti 3.8% iṣuu soda citrate iṣaju pẹlu ẹjẹ eku.20 μl ti 0.2 M CaCl2 ni a fi kun si awọn ayẹwo ti a ṣe itọju ẹjẹ lati bẹrẹ iṣọn-ẹjẹ ati awọn ayẹwo ti a fi sii ni iwọn otutu yara fun awọn iṣẹju 10.Ni afikun, awọn erythrocytes ti o pọ julọ ni a yọ kuro lati oju NFRCS nipasẹ fifẹ pẹlu iyọ.
Awọn ayẹwo ti o tẹle ni a tọju pẹlu 0.1% glutaraldehyde ati lẹhinna gbẹ ni adiro afẹfẹ ti o gbona ni 37 ° C lati yọ ọrinrin kuro.Awọn ayẹwo ti o gbẹ ni a bo ati ṣe atupale 32.Awọn aworan miiran ti a gba lakoko itupalẹ jẹ iṣelọpọ didi lori oju ti awọn okun owu kọọkan, ifisilẹ polima laarin Ct, morphology erythrocyte (apẹrẹ), iduroṣinṣin didi, ati morphology erythrocyte ni iwaju NFRCS.Awọn agbegbe NFRCS ti ko ni itọju ati Ch ati Cp ti a tọju awọn agbegbe NFRCS ti o wa pẹlu ẹjẹ ni a ṣayẹwo fun awọn ions ipilẹ (sodium, potassium, nitrogen, calcium, magnesium, zinc, copper ati selenium)33.Ṣe afiwe awọn ipin ion ipilẹ laarin itọju ati awọn ayẹwo ti a ko tọju lati loye ikojọpọ ion ipilẹ lakoko iṣelọpọ didi ati isokan didi.
Awọn sisanra ti oju iboju Cp HFFC lori oju Ct ni a pinnu nipa lilo FESEM.Awọn apakan agbelebu ti Cp NFRCS ni a ge lati inu ilana ati ti a bo sputter.Abajade awọn ayẹwo ti a bo sputter ni a ṣe akiyesi nipasẹ FESEM ati sisanra ti ibora ti o ni iwọn 34, 35, 36.
X-ray micro-CT n pese 3D ti o ga-giga aworan ti kii ṣe iparun ati pe o fun ọ laaye lati ṣe iwadi eto iṣeto inu ti NFRK.Micro-CT nlo itanna X-ray ti n kọja nipasẹ ayẹwo lati ṣe igbasilẹ alasọdipupo attenuation laini ti agbegbe ti awọn egungun X ninu apẹẹrẹ, eyiti o ṣe iranlọwọ lati gba alaye ti iṣan.Ipo inu ti Ct ni Cp NFRCS ati Cp NFRCS ti a ṣe itọju ẹjẹ ni a ṣe ayẹwo nipasẹ micro-CT lati ni oye ṣiṣe mimu ati didi ẹjẹ ni iwaju NFRCS37,38,39.Awọn ẹya 3D ti ẹjẹ ti a tọju ati awọn ayẹwo Cp NFRCS ti ko ni itọju ni a tun ṣe pẹlu lilo micro-CT (V|tome | x S240, Phoenix, Germany).Lilo VG STUDIO-MAX sọfitiwia ẹya 2.2, ọpọlọpọ awọn aworan X-ray ni a ya lati awọn igun oriṣiriṣi (apẹrẹ 360° agbegbe) lati ṣe agbekalẹ awọn aworan 3D fun NFRCS.Awọn data asọtẹlẹ ti a gba ni a tun ṣe sinu awọn aworan iwọn didun iwọn 3D ni lilo sọfitiwia Ẹkọ ScanIP 3D rọrun ti o baamu.
Ni afikun, lati ni oye pinpin didi, 20 µl ti ẹjẹ citrated ti iṣaju ati 20 µl ti 0.2 M CaCl2 ni a ṣafikun si NFRCS lati bẹrẹ didi ẹjẹ.Awọn ayẹwo ti a pese silẹ ni a fi silẹ lati le.A ṣe itọju NFRK pẹlu 0.5% glutaraldehyde ati ki o gbẹ ni adiro afẹfẹ ti o gbona ni 30-40 ° C fun 30 min.Dindindin ẹjẹ ti o ṣẹda lori NFRCS ni a ṣayẹwo, tun ṣe, ati aworan 3D ti didi ẹjẹ jẹ ojuran.
Awọn igbelewọn antibacterial ni a ṣe lori Cp NFRCS (ti o dara julọ ni akawe si Ch NFRCS) ni lilo ọna ti a ṣalaye tẹlẹ pẹlu awọn iyipada kekere.Iṣẹ ṣiṣe antibacterial ti Cp NFRCS ati Cp HFFC ni a pinnu nipa lilo awọn microorganisms idanwo oriṣiriṣi mẹta [S.aureus (bacteria gram-positive), E.coli (bacteria gram-negative) ati Candida funfun (C.albicans)] dagba lori agar ni awọn ounjẹ Petri ni incubator.Ni iṣọkan ṣe inoculate 50 milimita ti idadoro aṣa kokoro-arun ti fomi ni ifọkansi ti 105-106 CFU milimita-1 lori alabọde agar.Tú alabọde sinu satelaiti Petri kan ki o jẹ ki o ṣoro.Awọn kanga ti a ṣe lori oju ti agar awo lati kun pẹlu HFFC (awọn kanga 3 fun HFFC ati 1 fun iṣakoso odi).Fi 200 µl HFFC kun kanga 3 ati 200 µl pH 7.4 PBS si kanga 4th.Ni apa keji satelaiti petri, gbe disiki 12 mm Cp NFRCS sori agar ti o lagbara ati ki o tutu pẹlu PBS (pH 7.4).Ciprofloxacin, ampicillin ati awọn tabulẹti fluconazole ni a gba si awọn iṣedede itọkasi fun Staphylococcus aureus, Escherichia coli ati Candida albicans.Ṣe iwọn agbegbe ti idinamọ pẹlu ọwọ ki o ya aworan oni-nọmba kan ti agbegbe idinamọ.
Lẹhin ifọwọsi iṣe ti igbekalẹ, iwadi naa ni a ṣe ni Ile-ẹkọ Iṣoogun ti Kasturba ti Ẹkọ ati Iwadi ni Manipal, Karnataka, ni gusu India.Ilana idanwo in vitro TEG ti jẹ atunyẹwo ati fọwọsi nipasẹ Igbimọ Iwa ti igbekalẹ ti Ile-ẹkọ Iṣoogun ti Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020).Awọn koko-ọrọ ni a gba lati ọdọ awọn oluranlọwọ ẹjẹ oluyọọda (ọjọ ori 18 si 55) lati banki ẹjẹ ile-iwosan.Ni afikun, fọọmu ifitonileti alaye ni a gba lati ọdọ awọn oluyọọda fun gbigba awọn ayẹwo ẹjẹ.TEG abinibi (N-TEG) ​​ni a lo lati ṣe iwadi ipa ti igbekalẹ Cp HFFC lori gbogbo ẹjẹ ti a dapọ pẹlu citrate soda.N-TEG jẹ olokiki pupọ fun ipa rẹ ni isọdọtun-itọju-itọju, eyiti o ṣẹda awọn iṣoro fun awọn oṣiṣẹ ile-iwosan nitori agbara fun idaduro pataki ti ile-iwosan ni awọn abajade (awọn idanwo coagulation deede).Ayẹwo N-TEG ni a ṣe ni lilo gbogbo ẹjẹ.Ififunni alaye ati itan-akọọlẹ iṣoogun alaye ni a gba lati ọdọ gbogbo awọn olukopa.Iwadi naa ko pẹlu awọn olukopa pẹlu hemostatic tabi awọn ilolu thrombotic gẹgẹbi oyun / postpartum tabi arun ẹdọ.Awọn koko-ọrọ ti o mu awọn oogun ti o ni ipa lori kasikedi coagulation ni a tun yọkuro ninu iwadi naa.Awọn idanwo yàrá ipilẹ (hemoglobin, akoko prothrombin, thromboplastin ti a mu ṣiṣẹ ati kika platelet) ni a ṣe lori gbogbo awọn olukopa ni ibamu si awọn ilana boṣewa.N-TEG ṣe ipinnu viscoelasticity didi ẹjẹ, ipilẹ didi akọkọ, ibaraenisepo patiku, okun didi, ati lysis didi.Itupalẹ N-TEG n pese data ayaworan ati nọmba lori awọn ipa apapọ ti ọpọlọpọ awọn eroja cellular ati pilasima.Ayẹwo N-TEG ni a ṣe lori awọn iwọn oriṣiriṣi meji ti Cp HFFC (10 µl ati 50 µl).Bi abajade, 1 milimita ti gbogbo ẹjẹ pẹlu citric acid ni a ṣafikun si 10 μl ti Cp HFFC.Fi milimita 1 kun (Cp HFFC + ẹjẹ citrated), 340 µl ẹjẹ adalu si 20 µl 0.2 M CaCl2 ti o ni awopọ TEG ninu.Lẹhinna, awọn ounjẹ TEG ni a kojọpọ sinu TEG® 5000, US lati wọn R, K, igun alpha, MA, G, CI, TPI, EPL, LY 30% ti awọn ayẹwo ẹjẹ ni iwaju Cp HFFC41.
Ilana ikẹkọ in vivo ni a ṣe atunyẹwo ati fọwọsi nipasẹ Igbimọ Ẹkọ Eranko ti igbekalẹ (IAEC), Ile-iwe Oogun Kasturba, Ile-ẹkọ Manipal ti Ẹkọ giga, Manipal (IAEC/KMC/69/2020).Gbogbo awọn adanwo ẹranko ni a ṣe ni ibamu pẹlu awọn iṣeduro ti Igbimọ fun Iṣakoso ati Abojuto ti Idanwo Eranko (CPCSEA).Gbogbo awọn ẹkọ NFRCS vivo (2 × 2 cm2) ni a ṣe lori awọn eku Wistar obinrin (iwọn 200 si 250 g).Gbogbo awọn ẹranko ni a ṣe itẹwọgba ni iwọn otutu ti 24-26 ° C, awọn ẹranko ni iraye si ọfẹ si ounjẹ boṣewa ati ipolowo libitum omi.Gbogbo eranko ni won pin laileto si orisirisi awọn ẹgbẹ, kọọkan ẹgbẹ je ti mẹta eranko.Gbogbo awọn iwadi ni a ṣe ni ibamu pẹlu Awọn Ẹkọ Eranko: Iroyin ti In Vivo Experiments 43.Ṣaaju ki o to iwadi naa, awọn ẹranko ti ni akuniloorun nipasẹ iṣakoso intraperitoneal (ip) ti adalu 20-50 mg ti ketamine (fun 1 kg ti iwuwo ara) ati 2-10 mg ti xylazine (fun 1 kg ti iwuwo ara).Lẹhin iwadi naa, a ṣe iṣiro iwọn ẹjẹ nipasẹ iṣiro iyatọ laarin iwọn ibẹrẹ ati ipari ti awọn ayẹwo, iye apapọ ti a gba lati awọn idanwo mẹta ni a mu bi iwọn ẹjẹ ti ayẹwo.
Awoṣe gige iru eku ni imuse lati loye agbara NFRCS lati ṣe iyipada ẹjẹ ni ibalokanjẹ, ija, tabi ijamba ijabọ (awoṣe ipalara).Ge 50% iru naa pẹlu abẹfẹlẹ peli kan ati gbe sinu afẹfẹ fun iṣẹju 15 lati rii daju pe ẹjẹ deede.Ni afikun, awọn ayẹwo idanwo ni a gbe sori iru eku nipasẹ titẹ titẹ (Ct, Cs, Ch NFRCS ati Cp NFRCS).Ẹjẹ ati PCT ni a royin fun awọn apẹẹrẹ idanwo (n = 3) 17,45.
Imudara ti iṣakoso titẹ NFRCS ni ija ni a ṣe iwadii lori awoṣe ti iṣọn-ẹjẹ abo abo.Alọ iṣọn abo ti wa ni gbangba, ti a lu pẹlu trocar 24G, ati ẹjẹ laarin iṣẹju-aaya 15.Lẹhin ti ẹjẹ ti ko ni iṣakoso ti ṣe akiyesi, apẹrẹ idanwo ni a gbe si aaye puncture pẹlu titẹ ti a lo.Lẹsẹkẹsẹ lẹhin ohun elo ti ayẹwo idanwo, akoko didi ti gbasilẹ ati ṣiṣe hemostatic ni a ṣe akiyesi fun awọn iṣẹju 5 to nbọ.Ilana kanna ni a tun ṣe pẹlu Cs ati Ct46.
Dowling et al.47 dabaa awoṣe ipalara ẹdọ lati ṣe ayẹwo agbara hemostatic ti awọn ohun elo hemostatic ni ipo ti ẹjẹ inu inu.BCT ti gba silẹ fun awọn ayẹwo Ct (iṣakoso odi), ilana Cs (iṣakoso rere), awọn ayẹwo Ch NFRCS, ati awọn ayẹwo Cp NFRCS.Atẹgun iṣọn-ẹjẹ suprahepatic ti eku ti farahan nipa ṣiṣe laparotomi agbedemeji.Lẹhin iyẹn, a ti ge apa jijin ti lobe osi jade pẹlu awọn scissors.Ṣe lila ninu ẹdọ pẹlu abẹfẹlẹ scalpel ki o jẹ ki o jẹ ẹjẹ fun iṣẹju diẹ.Iwọn deede Ch NFRCS ati awọn ayẹwo idanwo Cp NFRCS ni a gbe sori dada ti o bajẹ laisi eyikeyi titẹ rere ati BCT ti gba silẹ.Ẹgbẹ iṣakoso (Ct) lẹhinna lo titẹ ti o tẹle nipasẹ Cs 30 s47 laisi fifọ ipalara naa.
Awọn idanwo iwosan ọgbẹ ni vivo ni a ṣe ni lilo awoṣe ọgbẹ ifasilẹ lati ṣe iṣiro awọn ohun-ini iwosan ọgbẹ ti awọn NFRCS ti o da lori polymer.Awọn awoṣe ti awọn ọgbẹ ikọsẹ ni a yan ati ṣe ni ibamu si awọn ọna ti a tẹjade tẹlẹ pẹlu awọn iyipada kekere19,32,48.Gbogbo eranko ti wa ni anesthetized bi tẹlẹ ṣàpèjúwe.Lo punch biopsy (12 mm) lati ṣe lila jinle ipin ninu awọ ẹhin.Awọn aaye ọgbẹ ti a ti pese silẹ ni a wọ pẹlu Cs (iṣakoso rere), Ct (ti o mọ pe awọn paadi owu dabaru pẹlu iwosan), Ch NFRCS ati Cp NFRCS (ẹgbẹ idanwo) ati iṣakoso odi laisi eyikeyi itọju.Ni ọjọ kọọkan ti iwadi naa, agbegbe ti ọgbẹ ni a wọn ni gbogbo awọn eku.Lo kamẹra oni-nọmba kan lati ya aworan agbegbe ọgbẹ ki o fi aṣọ tuntun wọ.Iwọn ti pipade ọgbẹ jẹ iwọn nipasẹ agbekalẹ atẹle:
Da lori ipin ogorun ti pipade ọgbẹ ni ọjọ 12th ti iwadii naa, awọ eku ti ẹgbẹ ti o dara julọ ti yọkuro ((Cp NFRCS) ati ẹgbẹ iṣakoso) ati ikẹkọ nipasẹ H& E abawọn ati abawọn trichrome Masson. Da lori ipin ogorun ti pipade ọgbẹ ni ọjọ 12th ti iwadii naa, awọ eku ti ẹgbẹ ti o dara julọ ti yọkuro ((Cp NFRCS) ati ẹgbẹ iṣakoso) ati ikẹkọ nipasẹ H& E abawọn ati abawọn trichrome Masson.Da lori ipin ogorun ti pipade ọgbẹ ni ọjọ 12th ti iwadi naa, awọ ara ti awọn eku ti ẹgbẹ ti o dara julọ ((Cp NFRCS) ati ẹgbẹ iṣakoso) ti yọkuro ati ṣe ayẹwo nipasẹ abawọn pẹlu hematoxylin-eosin ati Masson's trichrome.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组(( Cp NFRCS)染色研究.根据研究第12天的伤口闭合百分比，切除最佳组((Cp NFRCS)和对照组)的大闌皮肤Awọn eku ninu ẹgbẹ ti o dara julọ ((Cp NFRCS) ati awọn ẹgbẹ iṣakoso) ni a yọkuro fun abawọn hematoxylin-eosin ati abawọn trichrome Masson ti o da lori idapọ ọgbẹ ogorun ni ọjọ 12 ti iwadi naa.Ilana idoti ti a ṣe imuse ni a ṣe ni ibamu si awọn ọna ti a ṣalaye tẹlẹ49,50.Ni ṣoki, lẹhin imuduro ni 10% formalin, awọn apẹẹrẹ ti gbẹ ni lilo lẹsẹsẹ ti awọn ọti-lile.Lo microtome kan lati gba awọn apakan tinrin (nipọn 5µm) ti àsopọ ti a yọ kuro.Awọn apakan ni tẹlentẹle tinrin ti awọn idari ati Cp NFRCS ni a ṣe itọju pẹlu hematoxylin ati eosin lati ṣe iwadi awọn iyipada itan-akọọlẹ.Abawọn trichrome Masson ni a lo lati ṣe awari dida awọn fibril collagen.Awọn abajade ti o gba ni a ṣe iwadi ni afọju nipasẹ awọn onimọ-jinlẹ.
Iduroṣinṣin ti awọn ayẹwo Cp NFRCS ni a ṣe iwadi ni iwọn otutu yara (25°C ± 2°C/60% RH ± 5%) fun osu 1251.Cp NFRCS (awọ dada ati idagbasoke microbial) ni a ṣe ayẹwo ni oju ati idanwo fun resistance aṣọ agbo ati BCT ni ibamu si awọn ọna ti o wa loke ti a ṣe ilana ni apakan Awọn ohun elo ati Awọn ọna.
Iwọn ati isọdọtun ti Cp NFRCS ni a ṣe ayẹwo nipasẹ ngbaradi Cp NFRCS pẹlu iwọn 15 × 15 cm2.Ni afikun, awọn ayẹwo 30 mg (n = 5) ni a yọkuro lati oriṣiriṣi awọn ida Cp NFRCS ati BCT ti awọn ayẹwo ti a ṣe iwadi ni a ṣe ayẹwo gẹgẹbi a ti ṣalaye tẹlẹ ni apakan Awọn ọna.
A ti gbiyanju lati ṣe agbekalẹ ọpọlọpọ awọn apẹrẹ ati awọn ẹya nipa lilo awọn akopọ Cp NFRCS fun ọpọlọpọ awọn ohun elo biomedical.Iru awọn apẹrẹ tabi awọn atunto pẹlu awọn swabs conical fun ẹjẹ imu, awọn ilana ehín, ati awọn swabs iyipo fun ẹjẹ ti abẹ.
Gbogbo awọn eto data jẹ afihan bi itumọ ± iyatọ boṣewa ati pe ANOVA ṣe atupale nipasẹ lilo Prism 5.03 (GraphPad, San Diego, CA, USA) atẹle nipasẹ idanwo awọn afiwera ọpọ Bonferroni (* p <0.05).
Gbogbo awọn ilana ti a ṣe ni awọn iwadii eniyan ni ibamu pẹlu awọn iṣedede ti Ile-ẹkọ ati Igbimọ Iwadi ti Orilẹ-ede, bakanna bi Ikede Helsinki 1964 ati awọn atunṣe atẹle rẹ, tabi awọn iṣedede ihuwasi ti o jọra.Gbogbo awọn olukopa ni a sọ fun nipa awọn ẹya ara ẹrọ ti iwadi ati iseda atinuwa rẹ.Awọn data alabaṣe wa ni asiri ni kete ti o gba.Ilana idanwo in vitro TEG ti jẹ atunyẹwo ati fọwọsi nipasẹ Igbimọ Iwa ti igbekalẹ ti Ile-ẹkọ Iṣoogun ti Kasturba, Manipal, Karnataka (IEC: 674/2020).Awọn oluyọọda fowo si iwe adehun alaye lati gba awọn ayẹwo ẹjẹ.
Gbogbo awọn ilana ti a ṣe ni awọn ẹkọ ẹranko ni a ṣe ni ibamu pẹlu Kastuba Faculty of Medicine, Manipal Institute of Higher Education, Manipal (IAEC/KMC/69/2020).Gbogbo awọn adanwo eranko ti a ṣe ni a ṣe ni ibamu pẹlu awọn itọnisọna ti Igbimọ fun Iṣakoso ati Abojuto ti Idanwo Eranko (CPCSEA).Gbogbo awọn onkọwe tẹle awọn ilana ARRIVE.
Awọn iwoye FTIR ti gbogbo NFRCS ni a ṣe atupale ati fiwewe pẹlu iwoye chitosan ti o han ni Nọmba 2A.Awọn oke-nla ti o wa ni abuda ti chitosan (ti a gbasilẹ) ni 3437 cm-1 (OH ati NH ti ntan, ni lqkan), 2945 ati 2897 cm-1 (nàn CH), 1660 cm-1 ( igara NH2 ), 1589 cm-1 (N – O atunse), 1157 cm - 1157 cm - 1157 cm - 1157 cm - 1157 cm - 1157 cm - 1157 cm - 1. xyl), 993 cm-1 (na CO, Bo-OH) 52.53.54.Àfikún Tabili S1 ṣe afihan awọn iye spectrum gbigba FTIR NFRCS fun chitosan (onirohin), chitosan mimọ, Cm, Ch, ati Cp.Awọn iwoye FTIR ti gbogbo NFRCS (Cm, Ch ati Cp) ṣe afihan awọn ẹgbẹ gbigba abuda kanna bi chitosan funfun laisi awọn ayipada pataki (Fig. 2A).Awọn abajade FTIR ṣe idaniloju isansa ti kemikali tabi awọn ibaraenisepo ti ara laarin awọn polima ti a lo lati ṣe idagbasoke NFRCS, ti o nfihan pe awọn polima ti a lo ko jẹ inert.
Isọdi in vitro ti Cm NFRCS, Ch NFRCS, Cp NFRCS ati Cs.(A) duro fun idapo FTIR spectra ti awọn akopọ ti chitosan ati Cm NFRCS, Ch NFRCS ati Cp NFRCS labẹ funmorawon.(B) a) Iwọn gbigbe ẹjẹ gbogbo ti NFRCS Cm, Ch, Cp, ati Cg (n = 3);Awọn ayẹwo Ct ṣe afihan BAR ti o ga julọ nitori pe owu swab ni ṣiṣe imudani ti o ga julọ;b) Ẹjẹ lẹhin gbigba ẹjẹ Apejuwe ti ayẹwo ti o gba.Aṣoju ayaworan ti BCT ti ayẹwo idanwo C (Cp NFRCS ni BCT ti o dara julọ (15 s, n = 3)). Awọn data ni C, D, E, ati G ni a fihan bi itumọ ± SD, ati awọn ọpa aṣiṣe jẹ aṣoju SD, *** p <0.0001. Awọn data ni C, D, E, ati G ni a fihan bi itumọ ± SD, ati awọn ọpa aṣiṣe jẹ aṣoju SD, *** p <0.0001. Данные в C, D, E и G представлены как среднее ± стандартное отклонение, , ***p <0,0001. Awọn data ni C, D, E, ati G ni a gbekalẹ bi itumọ ± iyapa boṣewa, ati awọn ọpa aṣiṣe jẹ aṣoju iyapa boṣewa, *** p<0.0001. C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0.0001。 C、D、E 和G 中的数据显示为平均值± SD，误差线代表SD，***p <0.0001。 Данные в C, D, E и G показаны как среднее значение ± стандарть ani, *** p <0,0001. Awọn data ni C, D, E, ati G jẹ afihan bi itumọ ± iyatọ boṣewa, awọn ọpa aṣiṣe jẹ aṣoju iyapa boṣewa, *** p <0.0001.